一種從竹蓀子實(shí)體中提取水溶性β葡聚糖的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種從竹蓀子實(shí)體中提取水溶性β葡聚糖的方法及其產(chǎn)品。屬于中藥的活性成分提取領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]竹蓀是世界上最珍貴的食用菌之一，自古就被列為“草八珍”之一，它有深綠色的菌帽，雪白色的圓柱狀的菌柄，粉紅色的蛋形菌托，在菌柄頂端有一圍細(xì)致潔白的網(wǎng)狀裙從菌蓋向下鋪開，被人們稱為“雪裙仙子”、“山珍之花”、“真菌之花”、“菌中皇后”。我國食用竹蓀的歷史可追溯到1000多年前。唐人孟詵在《食療本草》中記載說:“慈竹林夏月逢雨，滴汁著地，生蓐似鹿角，白色，可食”，這便是關(guān)于竹蓀的最早記錄。竹蓀性涼，味甘，微苦，自古入藥，歷代醫(yī)藥典籍中多有記述?！吨袊幍洹酚涊d，竹蓀具有補(bǔ)腎壯陽、益胃清腸、抗老防衰、消炎止痛、減肥等多種功能?，F(xiàn)代科學(xué)對(duì)竹蓀的營養(yǎng)保健功效有著豐富的理論研究和實(shí)驗(yàn)證明，竹蓀是一種高蛋白、低脂肪的天然保健食品，其菌體含有豐富的營養(yǎng)成分，所含氨基酸多達(dá)21種，比任何一種食用菌都在高，同時(shí)還有多種維生素、微量元素和半乳糖、葡萄糖、甘露糖、木糖等異多糖成分。食用竹蓀可以降低人體內(nèi)膽固醇的含量，減少腹壁脂肪的囤積，長期食用還可以調(diào)整體內(nèi)血酸和脂肪酸的含量，是降血壓和降血脂的天然良品。
[0003]隨著竹蓀的應(yīng)用越來越廣泛，竹蓀的活性成分提取成為了一個(gè)比較熱門的課題。竹蓀多糖是竹蓀的主要活性成分之一，對(duì)于竹蓀多糖的提取液已經(jīng)有了一些報(bào)道。但是這些文獻(xiàn)都只是對(duì)竹蓀總多糖的提取，竹蓀多糖在竹蓀中以α和β兩種構(gòu)型共存，目前對(duì)于竹蓀總多糖的工藝研究的文獻(xiàn)都沒有提到這兩種構(gòu)型的分離，僅僅是從提取總多糖本身入手，對(duì)提取的總多糖進(jìn)行進(jìn)一步純化，分離得到某一種構(gòu)型的多糖均一體。
[0004]多糖分子量從幾千到幾百萬不等，分子量越大其水溶性越差，竹蓀多糖也不例外。竹蓀多糖大分子量部分水溶性較差，在分離提取中用水做溶劑很難提取完全，即使使用堿液提取，雖然提取率高，但是干燥后得到多糖產(chǎn)品應(yīng)用時(shí)仍然不溶解于水。人體對(duì)于這種大分子竹蓀多糖吸收不好。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題為:1、竹蓀子實(shí)體中提取β葡聚糖的工業(yè)化生產(chǎn)問題?，F(xiàn)有技術(shù)提取通常提取的是總多糖，而本發(fā)明的方法提取得到了 β葡聚糖，并可應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)。2，解決β葡聚糖的水溶性問題，更有利于竹蓀β葡聚糖的吸收利用和產(chǎn)品開發(fā)。分子量大的葡聚糖不溶于水本發(fā)明利用酸水解技術(shù)降低了大分子量竹蓀多糖的分子量。提高了竹蓀多糖的收率，增加了水溶性，更有利于人體吸收。
[0006]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的目的在于提供一種從竹蓀菇子實(shí)體中提取水溶性β葡聚糖的方法。
[0007]—種從竹蓀子實(shí)體中提取水溶性β葡聚糖的方法，其特征在于:包括以下步驟: 步驟1、制備竹蓀粗多糖: 取竹蓀子實(shí)體，粉碎得到粉末，粉末用堿液浸提，過濾除去殘?jiān)?，濾液中加入乙醇，靜置，過濾得到沉淀，得竹蓀粗多糖；
步驟2、制備竹蓀β葡聚糖:
取竹蓀粗多糖，干燥后加水?dāng)嚢瑁尤毽恋矸勖杆?，水解液過濾，棄去濾液，得到殘?jiān)?，得竹蓀β葡聚糖；
步驟3、制備水溶性β葡聚糖:
取竹蓀β葡聚糖，加堿液攪拌提取，提取液調(diào)酸堿度至ΡΗ2.0-6.8，加熱水解，水解液過濾，濾液中加入乙醇，靜置，分離沉淀并干燥，得到水溶性β葡聚糖。
[0008]所述步驟1中，將竹蓀子實(shí)體粉碎后過50目的篩，得到粉末。
[0009]所述步驟1中，向粉末中加入5-20倍重量的堿液浸提取1-10小時(shí)，所用堿液的濃度優(yōu)選是0.1-1.0摩爾/升。
[0010]所述步驟1中，過濾采用濾布進(jìn)行過濾，其中濾布孔徑為0.5-5微米。
[0011]所述步驟1或步驟3中，向?yàn)V液中加入1-4倍體積的無水乙醇靜置2小時(shí)。
[0012]所述步驟2中，竹蓀粗多糖干燥后加5-10倍重量的水?dāng)嚢?，充分溶解?br>[0013]所述步驟3中，堿液濃度是0.1-0.4摩爾/升；所述的加熱水解優(yōu)選為加熱至80_100°C，水解時(shí)間為1-4小時(shí)。
[0014]本發(fā)明的提取方法的具體描述:
竹蓀子實(shí)體粉碎得到粉末，粉末用堿液浸提，過濾除渣，濾液中加入乙醇，靜置，過濾得到沉淀；此沉淀即竹蓀粗多糖。竹蓀β葡聚糖是竹蓀粗多糖的一部分，其相當(dāng)一部分位于真菌的細(xì)胞壁上，為了最大限度的提取竹蓀β葡聚糖，本發(fā)明選擇堿液提取，堿液加量為原料重量的5-20倍，堿液的濃度選取0.1-1.0摩爾/升中任一濃度均可，提取時(shí)間1-10小時(shí)。堿液可以用氫氧化鈉，氫氧化鉀，氫氧化鋅，有機(jī)堿等配制，考慮到成本問題，堿液一般選取氫氧化鈉溶液。提取液過濾除去殘?jiān)瑸V液加1-4倍體積的無水乙醇，靜置2小時(shí)后過濾得沉淀即竹蓀粗糖。
[0015]沉淀干燥后加水?dāng)嚢瑁蠹应恋矸勖杆?，水解液過濾，棄去濾液得殘?jiān)?br>[0016]此步的殘?jiān)粗裆pβ葡聚糖但水溶性較差。此步驟采用上一步中的沉淀(竹蓀粗多糖)為原料，加α淀粉酶(因?yàn)椴煌瑥S家產(chǎn)品酶活力不一樣，加量相差巨大，本領(lǐng)域技術(shù)人員可根據(jù)實(shí)際情況和酶的活力確定加入α淀粉酶的用量；用量多一點(diǎn)或者少一點(diǎn)不影響本發(fā)明的效果)將水不溶解的α構(gòu)型多糖水解變?yōu)榭扇?，棄去水解液，同時(shí)水解液也溶解了粗多糖中的大部分殘留單糖和寡糖，起到純化的作用，雖然水解液中也可能存在少量β葡聚糖，但是考慮到回收成本，故舍去。僅對(duì)殘?jiān)械拇罅喀缕暇厶沁M(jìn)行下一步處理使其變?yōu)榭扇芙?。α淀粉酶選取市售的各種型號(hào)均可。水解條件，酶用量依據(jù)各廠家不同型號(hào)的α淀粉酶說明書。
[0017]殘?jiān)訅A液攪拌提取，提取液調(diào)酸度至ρΗ2.0-6.8，加熱水解，水解液過濾，濾液中加入乙醇，靜置，分離沉淀并干燥，即得。
[0018]采用步驟b)的殘?jiān)鼮樵希訅A液提取，堿液加量為原料重量的5-20倍，提取液調(diào)酸堿至PH2.0-6.8，80-100°C加熱水解1_4小時(shí)，水解液過濾，濾液加1_4倍體積的無水乙醇進(jìn)行沉淀，分離沉淀干燥后即本發(fā)明產(chǎn)物，也就是竹蓀菇水溶性β葡聚糖。
[0019]堿堿液可以用氫氧化鈉，氫氧化鉀，氫氧化鋅，有機(jī)堿等配制，優(yōu)選氫氧化鈉，液濃度選取0.1-1.0摩爾/升中任一濃度均可。pH可以用鹽酸、醋酸、硫酸、乙酸等。pH2.0-6.8中任何一個(gè)值均可，只是不同的pH，水解強(qiáng)度不同，水解后所得最終產(chǎn)物重均分子量不同。
[0020]現(xiàn)有技術(shù)中雖然有對(duì)竹蓀菇的某一種構(gòu)型進(jìn)行了分離并且進(jìn)一步純化得到了高純度多糖，但是其分離方法與本發(fā)明有本質(zhì)區(qū)別，在經(jīng)過常規(guī)的水提醇沉后現(xiàn)有方法多使用柱層析對(duì)粗多糖分離，截去粗多糖中某一特定部分得到高純度的竹蓀多糖以用于科學(xué)研究，這和本發(fā)明的工業(yè)化方法有顯著區(qū)別，并且本發(fā)明除了對(duì)竹蓀多糖的β構(gòu)型進(jìn)行分離提取外，還通過對(duì)竹蓀多糖的分子量控制提高了其水溶性。本發(fā)明通過酸水解，水復(fù)溶的方法控制竹蓀多糖的分子量在一定范圍內(nèi)增強(qiáng)了竹蓀多糖的水溶性，提高了竹蓀多糖大分子量段的收率，有利于工業(yè)化生產(chǎn)竹蓀β水溶性多糖。
[0021]本發(fā)明提取方法所得到竹蓀子實(shí)體多糖是除去了 α構(gòu)型多糖的β葡聚糖，并且種β葡聚糖具有良好的水溶性。紅外光譜顯示本發(fā)明產(chǎn)物為β葡聚糖，硫酸苯酚法檢測多糖含量大于50%，多糖平均分子量2000-200000道爾頓不等。
【具體實(shí)施方式】
[0022]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，應(yīng)該理解的是這些實(shí)施例僅用于例證的目的，決不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0023]實(shí)施例1
一種從竹蓀子實(shí)體中提取水溶性β葡聚糖的方法，其特征在于:包括以下步驟:
步驟1