一種從樺褐孔菌子實(shí)體中提取水溶性β葡聚糖的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中藥的活性成分提取領(lǐng)域，特別是一種從樺褐孔菌子實(shí)體中提取水溶性β葡聚糖的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]樺褐孔菌(Inonotus obliquus)是一種藥用價值很高的名貴真菌，其有效成分在食品、藥品、保健品中有著廣泛的應(yīng)用。隨著對樺褐孔菌研究的深入，大量的活性成分被分離出來，主要有:樺褐孔菌多糖、樺褐孔菌素、樺褐孔菌醇和多種氧化三萜類化合物。樺褐孔菌具有抑制腫瘤生長、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、抗氧化和抗病毒等功效。
[0003]隨著樺褐孔菌的應(yīng)用越來越廣泛，樺褐孔菌的活性成分提取成為了一個比較熱門的課題。樺褐孔菌多糖是樺褐孔菌的主要活性成分之一，對于樺褐孔菌多糖的提取液已經(jīng)有了一些報道。但是這些文獻(xiàn)都只是對樺褐孔菌總多糖的提取，樺褐孔菌多糖在樺褐孔菌中以α和β兩種構(gòu)型共存，目前對于樺褐孔菌總多糖的工藝研究的文獻(xiàn)都沒有提到這兩種構(gòu)型的分離，僅僅是從提取總多糖本身入手，對提取的總多糖進(jìn)行進(jìn)一步純化，分離得到某一種構(gòu)型的多糖均一體。
[0004]多糖分子量從幾千到幾百萬不等，分子量越大其水溶性越差，樺褐孔菌多糖也不例外。樺褐孔菌多糖大分子量部分水溶性較差，在分離提取中用水做溶劑很難提取完全，即使使用堿液提取，雖然提取率高，但是干燥后得到多糖產(chǎn)品應(yīng)用時仍然不溶解于水。人體對于這種大分子樺褐孔菌多糖吸收不好。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種從樺褐孔菌子實(shí)體中提取水溶性β葡聚糖的方法，解決β葡聚糖的水溶性問題，更有利于樺褐孔菌β葡聚糖的吸收利用和產(chǎn)品開發(fā)，提高了樺褐孔菌多糖的收率，增加了水溶性，更有利于人體吸收。
[0006]本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn):
一種從樺褐孔菌子實(shí)體中提取水溶性β葡聚糖的方法，包括以下步驟:
步驟1、制備枠揭孔菌粗多糖:
取樺褐孔菌子實(shí)體，粉碎得到粉末，粉末用堿液浸提，過濾除去殘?jiān)瑸V液中加入乙醇，靜置，過濾得到沉淀，得樺褐孔菌粗多糖；
步驟2、制備樺褐孔菌β葡聚糖:
取樺褐孔菌粗多糖，干燥后加水?dāng)嚢瑁尤毽恋矸勖杆猓庖哼^濾，棄去濾液，得到殘?jiān)脴搴挚拙缕暇厶牵?br> 步驟3、制備水溶性β葡聚糖:
取樺褐孔菌β葡聚糖，加堿液攪拌提取，提取液調(diào)酸堿度至ΡΗ2.0-6.8，加熱水解，水解液過濾，濾液中加入乙醇，靜置，分離沉淀并干燥，得到水溶性β葡聚糖。
[0007]所述步驟1中，將樺褐孔菌子實(shí)體粉碎后過50目的篩，得到粉末。
[0008]所述步驟1中，向粉末中加入5-20倍重量的堿液浸提取1-10小時，所用堿液的濃度優(yōu)選是0.1-1.0摩爾/升。
[0009]所述步驟1中，過濾采用濾布進(jìn)行過濾，其中濾布孔徑為0.5-5微米。
[0010]所述步驟1或步驟3中，向?yàn)V液中加入1-4倍體積的無水乙醇靜置2小時。
[0011]所述步驟2中，樺褐孔菌粗多糖干燥后加5-10倍重量的水?dāng)嚢瑁浞秩芙狻?br>[0012]所述步驟3中，堿液濃度是0.1-0.4摩爾/升；所述的加熱水解優(yōu)選為加熱至80_100°C，水解時間為1-4小時。
[0013]本發(fā)明的有益效果:
1、解決了樺褐孔菌子實(shí)體中提取β葡聚糖的工業(yè)化生產(chǎn)問題；現(xiàn)有技術(shù)提取通常提取的是總多糖，而本發(fā)明的方法提取得到了 β葡聚糖，并可應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)。
[0014]2、解決β葡聚糖的水溶性問題，更有利于樺褐孔菌β葡聚糖的吸收利用和產(chǎn)品開發(fā)。分子量大的葡聚糖不溶于水本發(fā)明利用酸水解技術(shù)降低了大分子量樺褐孔菌多糖的分子量。提高了樺褐孔菌多糖的收率，增加了水溶性，更有利于人體吸收。
【具體實(shí)施方式】
[0015]實(shí)施例1
稱取樺褐孔菌子實(shí)體1公斤粉碎，過50目的篩，粉末加0.1摩爾/升的氫氧化鈉溶液5升浸提1小時，0.5微米孔徑濾布的板筐過濾除去殘?jiān)?，得濾液4.6升。濾液加18.4升的無水乙醇，靜置2小時后用0.5微米孔徑布的板筐過濾得沉淀，沉淀干燥后稱重共150克。沉淀加750毫升水室溫?cái)嚢?0分鐘，加入1克真菌α淀粉酶液(山東杰諾生物酶有限公司)，用6摩爾/升的鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5.5，50攝氏度保溫24小時。而后用0.5微米孔徑布的板筐過濾，棄去濾液，殘?jiān)?.0摩爾/升氫氧化鈉0.8升攪拌提取2小時，提取液調(diào)酸堿度至pH2.0，于90攝氏度加熱密封水解1小時，水解液0.5微米孔徑布的板筐過濾，濾液加
3.2升無水乙醇，靜置2小時后分離沉淀并干燥稱重為110克紅外光譜表明此產(chǎn)物為β葡聚糖，硫酸苯酚法測多糖含量為65%，高效液相凝膠色譜法測得平均分子量為2060道爾頓；經(jīng)試驗(yàn)檢測，所得到β葡聚糖具有良好的水溶性。
[0016]實(shí)施例2
稱取樺褐孔菌子實(shí)體1公斤粉碎，過50目的篩，粉末加1摩爾/升的氫氧化鈉溶液10升浸提5小時，0.5微米孔徑濾布的板筐過濾除去殘?jiān)脼V液7.2升。濾液加28.8升的無水乙醇，靜置2小時后用0.5微米孔徑布的板筐過濾得沉淀，沉淀干燥后稱重共142克。沉淀加1.4升水室溫?cái)嚢?0分鐘，加入0.6克真菌α淀粉酶液(購自無錫澄星生物科技有限公司)，用2摩爾/升的鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5.8，50攝氏度保溫24小時。而后用0.5微米孔徑布的板筐過濾，棄去濾液，殘?jiān)?.0摩爾/升氫氧化鈉0.8升攪拌提取2小時，提取液調(diào)酸堿度至PH6.8，于100攝氏度加熱密封水解4小時，水解液0.5微米孔徑布的板筐過濾，濾液加3.2升無水乙醇，靜置2小時后分離沉淀并干燥稱重為102克，即為本發(fā)明物。紅外光譜表明此產(chǎn)物為β葡聚糖，硫酸苯酚法測多糖含量為58%，高效液相凝膠色譜法測得平均分子量為198056道爾頓；經(jīng)試驗(yàn)檢測，所得到β葡聚糖具有良好的水溶性。
[0017]實(shí)施例3
稱取樺褐孔菌子實(shí)體1公斤粉碎，過50目的篩，粉末加0.5摩爾/升的氫氧化鈉溶液20升浸提10小時，2微米孔徑濾布的板筐過濾除去殘?jiān)?，得濾液16.8升。濾液加67.2升的無水乙醇，靜置2小時后用2微米孔徑布的板筐過濾得沉淀，沉淀干燥后稱重共143克。沉淀加1升水室溫?cái)嚢?0分鐘，加入1克真菌α淀粉酶液(山東杰諾生物酶有限公司)，ρΗ值至5.5，50攝氏度保溫24小時。而后用4微米孔徑布的板筐過濾，棄去濾液，殘?jiān)?.6摩爾/升氫氧化鈉0.8升攪拌提取2小時，提取液調(diào)酸堿度至ρΗ5.8，于80攝氏度加熱密封水解2小時，水解液2微米孔徑布的板筐過濾，濾液加3.2升無水乙醇，靜置2小時后分離沉淀并干燥稱重為101克，即為本發(fā)明物。紅外光譜表