專利名稱：：抗生素組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于抗微生物組合物領(lǐng)域，尤其屬于包含抗生素及化合物的抗微生物組合物領(lǐng)域，其中所述的化合物充當(dāng)該抗生素抗微生物效果的增強(qiáng)劑。
背景技術(shù)：
：在過(guò)去數(shù)十年間，已經(jīng)報(bào)道耐受一種或多種抗生素的細(xì)菌菌株大幅度地增加。這種增加導(dǎo)致出現(xiàn)幾乎或根本不能用現(xiàn)有類型抗生素加以治療的細(xì)菌性感染，當(dāng)與例如醫(yī)院內(nèi)感染關(guān)聯(lián)時(shí)，這是極嚴(yán)重的問(wèn)題并且已經(jīng)造成具有致命后果的細(xì)菌性感染增加?？股啬退幮缘某霈F(xiàn)似乎是人類醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)中不當(dāng)使用抗生素及高效細(xì)菌突變方法的結(jié)果。細(xì)胞壁是其中特定抗生素耐藥性起源的細(xì)菌性特征，因?yàn)樗钃醣姸嗫股氐诌_(dá)它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)的靶并且可以含有抗生素流出泵系統(tǒng)。此外，細(xì)菌可以產(chǎn)生使抗生素失活的抗生素水解蛋白(例如P-內(nèi)酰胺酶)。通常認(rèn)為若可以僅使細(xì)菌細(xì)胞膜變得更通透，則抗生素的效果增強(qiáng)。已經(jīng)進(jìn)行眾多嘗試以找到透化細(xì)菌外膜的有效方式。已經(jīng)表明幾種聚陽(yáng)離子推測(cè)地通過(guò)與帶負(fù)電荷的脂多糖(LPS)結(jié)合而透化革蘭氏陰性菌外膜。在聚陽(yáng)離子透化劑(permeabilizer)中包括多黏菌素B及其衍生物(見(jiàn)例如US4,510,132)。其它的聚陽(yáng)離子透化劑包括殺菌性/增加通透性的蛋白質(zhì)、魚(yú)精蛋白和多種聚陽(yáng)離子肽和/或兩性肽，包括賴氨酸低聚物、防衛(wèi)素、天蟾殺菌肽、爪蟾抗菌肽和蜂毒肽。還已經(jīng)證實(shí)帶負(fù)電荷的螯合劑(如乙二胺四乙酸鹽(EDTA)、氨三乙酸鹽(nitrilotriacetate)和六偏磷酸鈉)推測(cè)地通過(guò)除去鈣離子和鎂離子從而導(dǎo)致膜去穩(wěn)定化而成為有效的外膜透化劑，其中所述的鈣離子和鎂離子將LPS單位簇集起來(lái)。US6,165,997披露了帶負(fù)電荷的磷脂，其中所述磷脂不但增強(qiáng)抗生素的活性，本身還具有抗微生物活性。這些化合物似乎(至少部分地)作為上文所述的陽(yáng)離子螯合劑發(fā)揮作用。JP57155954描述通過(guò)存在由4個(gè)或更多個(gè)碳原子組成的脂胺而增強(qiáng)飼5料中堿性肽抗菌物質(zhì)的活性。所述堿性肽抗生素以胺(例如黏菌素A或B或多黏菌素A、B、D或M)為基礎(chǔ)。所披露的脂胺是單胺，尤其是丁胺、戊胺、己胺、庚胺、辛胺、壬胺、癸胺、月桂胺和硬脂胺。該專利的核心是通過(guò)向含有所述抗菌多黏菌素的動(dòng)物飼料添加這些胺而抑制因存在于家畜中的磷脂、不飽和脂肪酸以及鈣與鎂引起的抗菌活性下降。JP57155954顯示為恢復(fù)或甚至改善詞料中的抗菌活性，需要大量脂胺，尤其相對(duì)于飼料中存在的抗菌肽的量而言。僅在硬脂胺與黏菌素的摩爾比為至少13:1時(shí)觀察到效果。這些相對(duì)高的脂胺濃度致使在動(dòng)物飼料領(lǐng)域之外使用脂胺缺乏吸引力。此外，JP57155954中的脂胺被精心選出以匹配表面類似的(look-a-like)多黏菌素，所述脂胺與對(duì)于多黏菌素的抗菌活性必需的疏水尾部相似。正是這種結(jié)構(gòu)相似性促使技術(shù)人員期望某種類型的協(xié)同作用。因此，技術(shù)人員至多也僅關(guān)注連接于那些特定抗生素肽的丁胺直至硬脂胺的效果。WO-A-00/74654披露含有在基質(zhì)中的對(duì)酸敏感的活性化合物的施用形式，其中所述的基質(zhì)由包含三酰甘油和固體石蠟的混合物制成。該混合物可以還含有合適賦形劑，如聚合物、硬脂醇和堿性化合物，包括硬脂胺。雖然，WO-A-00/74654提出將所述對(duì)酸敏感的活性化合物與抗生素組合，然而沒(méi)有公開(kāi)還含有抗生素的這種施用形式。類似地，US6,479,540也教導(dǎo)了使用硬脂胺作為載體。在這種情況下，組合物含有生育酚可溶性治療物質(zhì)(包括抗生素)作為活性成分。硬脂胺是與所述活性成分形成離子對(duì)以增強(qiáng)其生育酚溶解性的眾多候選物之一。未報(bào)道抗生素與硬脂胺的實(shí)際組合。WO-A-00/30611涉及用于治療原蟲(chóng)、尤其治療瘧疾致病因的組合物。該專利描述了包裹青霉素或四環(huán)素的含硬脂胺的脂質(zhì)囊泡。雖然沒(méi)有給出配方，不過(guò)該專利提出使用大量硬脂胺來(lái)形成脂質(zhì)囊泡。沒(méi)有關(guān)于抗生素耐藥性的提示。WO-A-04/00360解決了皮膚病治療中發(fā)生抗生素耐藥性的問(wèn)題，并且教導(dǎo)使用局部療法。硬脂胺和十二烷基胺屬于能夠在局部用制劑中產(chǎn)生8.0或更大pH的眾多可能的堿性化合物，因此作為皮膚滲透增強(qiáng)物發(fā)揮作用。為此目的，必需相對(duì)大的量。DE10245506描述了其中在磷脂與棕櫚?；?D-葡糖苷酸的基質(zhì)內(nèi)嵌入活性物質(zhì)(如抗生素)的制劑。該制劑以胃腸道外方式或通過(guò)吸入施用。實(shí)例顯示磷脂的量大大超過(guò)活性成分的量。發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明的目的是提供抗微生物組合物。本發(fā)明的又一目的是提供對(duì)耐受一種或多種抗生素的細(xì)菌有活性的抗微生物組合物，本發(fā)明的目的尤其是提供對(duì)耐受一種或多種抗生素的細(xì)菌有活性的抗微生物組合物，其包含該細(xì)菌耐受的一種或多種抗生素。本發(fā)明的又一目的是提供與單獨(dú)的抗生素相比，對(duì)細(xì)菌具有一種或多種抗生素的增強(qiáng)活性的抗微生物組合物。發(fā)現(xiàn)與抗生素組合的某些長(zhǎng)鏈烴基胺能夠使細(xì)菌易感于該抗生素，而不與這些長(zhǎng)鏈烴基胺組合的抗生素則對(duì)該細(xì)菌的活性較低或根本無(wú)活性。此外，發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)鏈烴基胺在比現(xiàn)有技術(shù)中所報(bào)道的那些濃度顯著更低的濃度已經(jīng)促進(jìn)抗生素活性。因此，本發(fā)明涉及抗微生物組合物，其包含式I的長(zhǎng)鏈胺或其生理學(xué)上可接受的鹽,N\尺2尺3I其中&表示在直鏈中含有至少7個(gè)原子的直鏈或支鏈烴基，所述的烴基可以包含雙鍵或叁鍵，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)取代、一個(gè)或多個(gè)環(huán)垸基和/或芳基環(huán)，并且可以包含一個(gè)或多個(gè)O、N和/或S原子，并且R2和R3之一如對(duì)R,那樣定義，并且可以與Ri相同，或R2和R3不同于I^，并且R2和R3可以是相同或不同的，并表示氫或低級(jí)烴基，所述的低級(jí)烴基可以包含雙鍵或叁鍵，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)取代或環(huán)垸基和/或芳基環(huán)，并且可以包含一個(gè)或多個(gè)O、N和/或S原子，并且該組合物還含有至少一種抗生素。發(fā)明詳述本發(fā)明的組合物包含抗生素和如上文定義的式I化合物，其中所述的7式I化合物起到敏化劑的作用，這意指該化合物使微生物(尤其細(xì)菌)對(duì)所述抗生素的作用敏感，或它使所述微生物對(duì)在該抗生素的較低濃度或劑量上易受此抗生素的作用。尤其，發(fā)現(xiàn)在這種抗生素在式I的敏化劑存在下施用時(shí)，現(xiàn)在可以有效地在該抗生素的可接受濃度上阻止細(xì)菌增殖或?qū)嶋H上殺死該細(xì)菌，其中所述的細(xì)菌耐受某些類型的抗生素或至少不受處于可接受劑量上的抗生素影響。雖然從本文的其余部分和術(shù)語(yǔ)"敏化劑"中是顯而易見(jiàn)的，然而要強(qiáng)調(diào)的是式I化合物是所述組合物中的活性成分。因此，這與其中敏化劑充當(dāng)載體材料的那些情況完全不同，其中通常定義所述的載體物質(zhì)不與所述組合物的其它組分相互作用。然而，在本案中，精確地包含式I化合物以增強(qiáng)該抗生素的活性。這由所述敏化劑的優(yōu)選(相對(duì))量反映。式I中的R,表示在直鏈中含有至少7個(gè)原子的直鏈或支鏈烴基。在本上下文中，烴基意指它是含有碳原子的基團(tuán)。例如對(duì)于如JP57155954中公開(kāi)的脂胺，即丁胺、戊胺和己胺，在我們的研究中未觀察到效果。可理解的是若無(wú)另外指明，則所述烴基中的C、O、N和S原子也包含氫原子以恰當(dāng)?shù)貪M足相應(yīng)原子的價(jià)態(tài)。在直鏈中至少7個(gè)原子是相對(duì)于通過(guò)共價(jià)鍵而相互直接連接的原子(不包括氫)的最長(zhǎng)基團(tuán)而言，其中所述的共價(jià)鍵始于式I的氮(N)。因此，這樣的在直鏈中的至少7個(gè)原子的基團(tuán)可以是R,中包括芳環(huán)在內(nèi)的環(huán)狀要素的一部分，或換句話說(shuō)，一個(gè)或多個(gè)(飽和和/或不飽和)環(huán)可以形成在直鏈中包含至少7個(gè)原子的烴基(的一部分)。該烴基可以包含一個(gè)或多個(gè)O、N禾Q/或S原子，這意指碳原子鏈可以由一個(gè)或多個(gè)O、N和/或S原子斷開(kāi)。優(yōu)選該烴基包含co-CH3基團(tuán)，或換句話說(shuō)，從式I的氮(N)開(kāi)始，最長(zhǎng)的烴基優(yōu)選地以CH3結(jié)尾。R,烴基，尤其是含有至少7個(gè)原子的直鏈，可以包含一個(gè)或多個(gè)雙鍵或一個(gè)或多個(gè)叁鍵或雙鍵與叁鍵的組合和/或環(huán)垸基和/或芳基環(huán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，含有至少7個(gè)原子的直鏈包含一個(gè)雙鍵。另外，含有至少7個(gè)原子的直鏈可以由一個(gè)或多個(gè)0、N和/或S原子斷開(kāi)，產(chǎn)生例如烴氧基烴基、烴硫基烴基、羥基烴基、硫烴基、氨基烴基部分等。另外，含有至少7個(gè)原子的直鏈可以是取代的，例如由一個(gè)或多個(gè)鹵原子和/或經(jīng)一個(gè)或多個(gè)O、N和/或S原子的基團(tuán)(例如羥基、胺和/或硫羥基或O-、N-和/或S-低級(jí)(羧基)烴基)或雙鍵O、N(-H或-烴基)和域S取代。低級(jí)烴基優(yōu)選地意指包含1-6個(gè)碳原子的基團(tuán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，含有至少7個(gè)原子的直鏈烴基僅含有碳原子。在一個(gè)實(shí)施方案中，該直鏈烴基含有7-30個(gè)碳原子、優(yōu)選10-24個(gè)碳原子、更優(yōu)選12-22個(gè)碳原子、最優(yōu)選至少13個(gè)碳原子。在一個(gè)實(shí)施方案中，R,烴基僅含有碳原子。在一個(gè)實(shí)施方案中，僅一個(gè)相對(duì)大體積的烴基(即含有至少7個(gè)原子的直鏈烴基)存在于式I的敏化劑中。在一個(gè)實(shí)施方案中，R2和R3不同于R,。因此優(yōu)選R2和R3選自由氫和低級(jí)烴基組成的組，其中所述的低級(jí)烴基優(yōu)選地是含有1-6個(gè)碳原子的基團(tuán)。所述低級(jí)烴基可以包含一個(gè)或多個(gè)雙鍵或一個(gè)或多個(gè)叁鍵或雙鍵與叁鍵的組合和域環(huán)垸基和域芳基環(huán)。另外，該低級(jí)烴基可以由一個(gè)或多個(gè)O、N和/或S原子斷開(kāi)或以其結(jié)尾，例如烴氧基烴基、烴硫基烴基、羥基烴基、硫烴基、氨基烴基等。此外，該低級(jí)烴基可以是取代的，例如由一個(gè)或多個(gè)鹵原子和域經(jīng)一個(gè)或多個(gè)O、N和/或S原子的基團(tuán)(例如羥基、胺和/或硫羥基或0-、N-和/或S-低級(jí)(羧基)烴基)或雙鍵O、N(-H或-烴基)和/或S取代。在一個(gè)實(shí)施方案中低級(jí)烴基意指Q-CV烴基。在一個(gè)實(shí)施方案中，R2和R3是不同的并且R2和R3至少之一是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R2和R3是相同的并且優(yōu)選地選自由CVC4烴基、優(yōu)選甲基、乙基、丙基、異丙基和丁基組成的組。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R2和R3是相同的并且均是氫。在一個(gè)實(shí)施方案中，式I的敏化劑以鹽的形式、尤其以酸加成鹽的形式存在，例如是其HC1、HBr、HF、H3P04、H2S04、檸檬酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、羥乙磺酸、甲磺酸或乙二胺四乙酸加成鹽。在本發(fā)明的組合物中，式I的敏化劑優(yōu)選地以足以增強(qiáng)所述抗生素有效性的量存在?？股氐挠行岳斫鉃橄蚺囵B(yǎng)基添加該抗生素抑制接種物的生長(zhǎng)，從而使用該抗生素的菌落形成單位(CFU)數(shù)小于不添加該抗生素時(shí)CFU的30%，如20%、15%、10%或5%。優(yōu)選地，添加所述抗生素殺死接種物，從而CFU小于接種物CFU的70%、如60°/。、50%、40%、30%、20%、10%、95%、2%、1%、0.1%或0.01%。抗生素的效果增強(qiáng)理解為無(wú)本發(fā)明的式I敏化劑存在時(shí)的該抗生素的最小抑制濃度(MIC)因添加所述敏化劑而下降至少2倍。優(yōu)選地，所述下降是至少4倍、如8倍、10倍或甚至更多倍數(shù)，如20倍、50倍或甚至100倍?；诶袑?shí)驗(yàn)，考慮具體敏化劑、具體抗生素和該抗生素有效性增強(qiáng)所達(dá)到的程度，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠確定該敏化劑的適宜濃度是多少。如上所報(bào)告，作為本發(fā)明部分的是，為了增強(qiáng)抗生素的有效性，敏化劑的量不需要高。優(yōu)選式I的敏化劑與抗生素的摩爾比引人注意地低于5:1，更優(yōu)選低于2:1，最優(yōu)選低于1.5:1，特別最多1:1。更優(yōu)選地，該摩爾比是至少1x10-5:1，更優(yōu)選至少5x10—5:1，最優(yōu)選至少lxl0'4:l。因此，本發(fā)明組合物也優(yōu)選地包含抗微生物或抗生素方面有效量的抗生素。從上文中隨之而來(lái)的是基于例行實(shí)驗(yàn)，考慮具體敏化劑、具體抗生素和增強(qiáng)的該抗生素有效性所達(dá)到的程度，技術(shù)人員能夠確定該抗生素的適宜濃度是多少。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物含有效抗革蘭氏陰性菌的抗生素。革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌通過(guò)革蘭氏染色法區(qū)分。革蘭氏陽(yáng)性種在用脫色劑(醇或丙酮)處理時(shí)保持初染(結(jié)晶紫)，而革蘭氏陰性菌丟失這種初染。染色差異反映了革蘭氏陰性菌及革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)差異。革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁由相對(duì)厚實(shí)的肽聚糖層和胞壁酸組成，而革蘭氏陰性細(xì)胞壁由相對(duì)薄的肽聚糖層和外膜組成，其中所述的外膜由含有磷脂、脂多糖、脂蛋白和蛋白質(zhì)的脂質(zhì)雙層組成。在又一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物含有效抗革蘭氏陽(yáng)性菌的抗生素。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物包含選自由以下物質(zhì)組成的組中的抗生素P-內(nèi)酰胺類(例如氨芐青霉素、頭孢他啶、美羅培南)、喹諾酮類(例如諾氟沙星、環(huán)丙沙星)、糖肽類(例如萬(wàn)古霉素)、大環(huán)內(nèi)酯類(例如紅霉素)、噁唑垸酮類(例如利奈唑胺)、肽抗生素類(例如爪蟾抗菌肽II)、脂肽類(例如多黏菌素、桿菌肽)、硝基咪唑類(例如甲硝唑)、安莎霉素類(例如利福平)、唑類(例如氟康唑)、D-環(huán)絲氨酸、林可酰胺類(例如克林霉素)、莫匹羅新、鏈陽(yáng)性菌素(例如達(dá)福普汀、奎奴普汀)、磷霉素、氨基糖苷類(例如慶大霉素)、磺胺類(例如磺胺甲噁唑)、甲氧芐啶、四環(huán)素類(例如叔丁基甘氨酰米諾環(huán)素)、新生霉素、氯霉素、單環(huán)內(nèi)酰胺類及這些抗生素的合成衍生物。更具體地，待與式I的敏化劑組合使用的適宜抗生素(組合)選自由以下物質(zhì)組成的組糖肽類(優(yōu)選地萬(wàn)古霉素或替考拉寧)、(3-內(nèi)酰胺類，優(yōu)選是青霉素，如阿姆地諾西林、氨芐青霉素、阿莫西林、阿洛西林、巴氨西林、芐星青霉素G、羧芐西林、氯唑西林、環(huán)青霉素、雙氯西林、甲氧西林、美洛西林、奈夫西林、苯唑西林、青霉素G、青霉素V、哌拉西林和替卡西林；頭孢菌素類，如第一代藥物頭孢羥氨芐、頭孢唑啉、頭孢氨芐、頭孢噻吩、頭孢匹林和頭孢拉定，第二代藥物頭孢克洛、頭孢孟多、頭孢尼西、頭孢雷特、頭孢西丁和頭孢夫辛，或第三代頭孢菌素類頭孢派酮、頭孢噻肟、頭孢替坦、頭孢他啶、頭孢唑肟、頭孢曲松和拉氧頭孢；卡巴培南類(如亞安培南)或單環(huán)內(nèi)酰胺類(如氨曲南)；其它四環(huán)素類，如地美環(huán)素、叔丁基甘氨酰米諾環(huán)素、多西環(huán)素、美他環(huán)素、米諾環(huán)素和土霉素；氨基糖苷類，如阿米卡星、慶大霉素、卡那霉素、新霉素、奈替米星、巴龍霉素、壯觀霉素、鏈霉素和妥布霉素；多黏菌素，如黏菌素、甲磺酸多黏菌素E與多黏菌素B以及紅霉素與林可霉素，并且也預(yù)期磺胺類如磺胺西汀、磺胺嘧啶、磺胺異噁唑、磺胺甲噁唑、磺胺甲二唑和磺胺吡啶；甲氧節(jié)啶、喹諾酮類、新生霉素、乙胺嘧啶和利福平在本發(fā)明組合物中的式I敏化劑存在下具有增強(qiáng)的活性。要強(qiáng)調(diào)的是本發(fā)明的敏化劑不因其與抗生素的結(jié)構(gòu)相似性而被選擇。發(fā)現(xiàn)盡管結(jié)構(gòu)上具有很少共同點(diǎn)，然而式I的化合物也增強(qiáng)非肽抗生素類及脂肽類的前述抗生素的抗微生物效果。本發(fā)明也涉及如上文所定義的式I敏化劑和抗生素連同可藥用載體的組合物。這種藥物組合物可以是用于內(nèi)部或外部施加的固體、半固體、液體等形式，如片劑、膠囊劑、液劑、蒸汽劑(vapour)、軟膏劑、糊齊IJ、噴霧劑等。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知如何配制成適宜的制劑，見(jiàn)例如，"Remington'sPharmaceuticalSciences"禾口"EncyclopediaofPharmaceuticalTechnology"。為了與所述抗生素的最佳相互作用，優(yōu)選式I的敏化劑不包含在保護(hù)層或嵌入層中。式I的敏化劑和所述抗生素優(yōu)選地在同一基質(zhì)中存在。本發(fā)明的特別優(yōu)選實(shí)施方案是這些實(shí)施方案，其中式I的敏化劑選自由3-月桂氧基丙胺、月桂胺、肉豆蔻胺、十六烷基胺、硬脂胺、二十烷胺、油胺、亞油胺、亞麻胺(linolenylamine)、鞘氨醇組成的組。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物包含3-月桂氧基丙胺、月桂胺、肉豆蔻胺、十六烷基胺、硬脂胺、二十垸胺、油胺、亞油胺、亞麻胺、鞘氨醇、脫氫樅胺的HC1鹽或他莫昔芬的檸檬酸鹽。更具體地，本發(fā)明包含3-月桂氧基丙胺、肉豆蔻胺、十六垸基胺、二十垸胺、油胺、亞油胺、亞麻胺、鞘氨醇、脫氫縱胺、他莫昔芬或其HC1鹽或他莫昔芬的檸檬酸鹽。通常，本發(fā)明組合物可以用來(lái)將革蘭氏陰性和/或革蘭氏陽(yáng)性從不想要它們存在的地方根除。因此，本發(fā)明也涉及本發(fā)明的抗微生物組合物用于清潔或消毒物體和區(qū)域的用途。優(yōu)選地為此目的，將如上文所定義的式I敏化劑和抗生素以及任選地還有清潔劑和/或消毒劑與適宜載體或稀釋劑(例如水和/或醇)組合。動(dòng)物飼料配方不是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。更優(yōu)選本發(fā)明的組合物是藥物組合物。為對(duì)酸敏感的活性化合物提供新的施用形式不是本發(fā)明的部分。本發(fā)明的組合物優(yōu)選地不含此類對(duì)酸敏感的活性化合物，如對(duì)酸敏感的質(zhì)子泵抑制物(H+ZK+ATP酶抑制物)，尤其是取代的吡啶-2-基-甲基亞磺?；?111-苯并咪唑或拉唑?？蛇x地或額外地，優(yōu)選在所述組合物中不使用固體石蠟如硬石蠟(pamffinumsolidum)(石蠟)或地蠟。本發(fā)明也涉及如上文所定義的式I敏化劑和抗生素用于制備用以治療細(xì)菌性感染、優(yōu)選治療在人類中細(xì)菌性感染的藥物的用途，特別旨在增強(qiáng)所述抗生素的抗微生物活性。另外，本發(fā)明也提供用于治療有需要的患者(優(yōu)選人類)中細(xì)菌性感染的方法，該方法包括給該患者施用本發(fā)明的組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物用于治療由耐受或多重耐受某些特定抗生素的細(xì)菌所致的感染。在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物用于治療由革蘭氏陰性菌所致的感染。在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物用于治療由埃希氏菌(^^/2en'c/z/"^p)(尤其大腸桿菌(五.co/0)、嗜血桿菌(/7aemop/K7^spp)(尤其流感嗜血桿菌/","e"z"e))、假單胞菌(i^ez^owowosJ/p)(尤其銅綠假單胞菌(Paerwg77msa))、克雷伯菌屬(A7e65/e〃a)(尤其月巿炎克雷伯菌(^p"ew附o"/ae))、腸桿菌(E"tera6ac/er螺桿菌(77e//co6acfer^;)(尤其幽門(mén)螺桿菌(i/e/z'co6acfer_p_y/on'))、志賀氏菌(57n'ge〃as/p)、沙門(mén)氏菌(Sa/mowe〃as/p)、耳卩爾森菌(lfera/"/a5p/)、彎曲桿菌(G3wpjK/o6ac^"5pp)、奈瑟菌(7Ve^en'(312■5/7/7)、博德特菌(5orafefe〃a^;)、氣單胞菌(Jeramowosspp)、伯克霍德菌(Bw^;/zoWeWa卿)、沙雷菌OSerra"a卿)、弧菌(附ho卿)、變形菌(尸rato^sp/)、奇異變形桿菌(Pratews附/^36//^)禾口不動(dòng)桿菌04"'"^060^^"5^;)(尤其鮑曼不動(dòng)桿菌G4.6flwwa"m7))所致的感染。在一個(gè)實(shí)施方案中該藥物用于治療由革蘭氏陽(yáng)性菌所致的感染。在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物用于治療由葡萄球菌OStop/^/oco"^^p)(尤其耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌(S鄉(xiāng)/2少/ococcwsawe—)、鏈球菌(5y邵tococcwss/p)、腸球菌(jE"teracoccwss/;)、李斯特菌(Zi他n'a卿)、葡萄球菌(iSqp/^/ococct^鏈球菌(iSfr取ococci^spp)、梭菌(C7o5^WwMsp/)、芽孢桿菌(5ac/腸sp/)、腸球菌(五"teracoccwss/p)、棒狀桿菌(Co，ekifc/en'wAfc/7/)、軍團(tuán)菌(丄eg/o"e〃a"W)、分枝桿菌(AfycoZj"c/m'wM卿)所致的感染。另外，本發(fā)明也涉及試劑盒(Kitofparts),其包含a)由式I表示的至少一種敏化劑；和b)至少一種抗生素，旨在治療細(xì)菌性感染，尤其旨在增強(qiáng)所述抗生素的抗微生物效果。該敏化劑和所述抗生素可以包含一個(gè)或多個(gè)如上文所定義的額外特征。該試劑盒旨在依次或同時(shí)施用，其中該敏化劑和所述抗生素的施用途徑可以是相同或不同的。其中，優(yōu)選的是調(diào)整所施用的敏化劑的量以增強(qiáng)所述抗生素的有效性。上文描述了用于實(shí)現(xiàn)此目的的方法。實(shí)施例用于測(cè)定式I的敏化劑的實(shí)驗(yàn)方法溶液制備在乙醇中的式I長(zhǎng)鏈烴基胺的8mM貯存液，用于以乙醇進(jìn)行連續(xù)2倍稀釋。將1當(dāng)量鹽酸(來(lái)自1M水性貯存液)在稀釋前添加至所述第一溶液，以防所述胺不是HC1形式。在乙醇中溶解他莫昔芬檸檬酸鹽以提供第一8mM貯存液。細(xì)菌通過(guò)與校正曲線比較而確定銅綠假單胞菌(尸化wcfomo"waerag/"osa)PA01在100%LB中的過(guò)夜培養(yǎng)物(16小時(shí)，37。C)的濃度并且將其用100。/。LB稀釋至lxl05CFU/mL。類似地，制備以下臨床分離株(在萊頓大學(xué)醫(yī)學(xué)中心(LeidenUniversityMedicalCenter)獲得)的培養(yǎng)物多藥耐藥性鮑曼不動(dòng)桿菌04c/"eto^"w^wmanm7)LUH5771、產(chǎn)超廣譜P-內(nèi)酰胺酶(ESBL)肺炎克雷伯菌(尺/e&zW/a戶ewwo"z'ae)LUH5344以及銅綠假單胞菌PA7243、PA7247、PA7249、PA7252、PA7253和PA24-7-3(耐受頭孢他啶)。試驗(yàn)使用96孔平板，將各濃度的敏化劑(1^L每份乙醇溶液)添加至含有20pL銅綠假單胞菌(終濃度lxl04CFU/mL，0055()=0.1)和氨芐青霉素或利奈唑胺(在PA24-7-3和ESBL肺炎克雷伯菌LUH5344的情況下，使用頭孢他啶)的各孔內(nèi)。對(duì)于lxlO"CFU/mL鮑曼不動(dòng)桿菌LUH5771，在慶大霉素存在下研究敏化劑對(duì)生長(zhǎng)的影響。孔內(nèi)體積用20%LB調(diào)整至200pL。作為對(duì)照，包括20%LB、細(xì)菌+20%LB、細(xì)菌+20。/。LB+抗生素。在一些情況下，將培養(yǎng)基換成100n/。LB(見(jiàn)下文)。在1=0處添加敏化劑后，將96孔平板蓋住(不隔絕空氣)并在37'C于BioTek平板讀數(shù)儀中孵育20小時(shí)，伴以振搖；對(duì)于PA01研究，至少每隔10分鐘測(cè)定OD55?；?qū)τ诟髋R床分離株，在20小時(shí)后測(cè)定一次ODs50。測(cè)定特定化合物的MIC值，其為20小時(shí)孵育后所述0Ds5。值與所用空白的OD55。值相當(dāng)?shù)淖畹蜐舛?。結(jié)果表l.敏化劑在氨芐青霉素或利奈唑胺存在下對(duì)銅綠假單胞菌PA01在20%LB中生長(zhǎng)的影響?；衔镄Ч逼S青霉素MIC>200pg/mL利奈唑胺MIC〉200ug/mL油胺MIC在^20pM處50pg/mL氨芐青霉素+油胺MIC在^0.31pM油胺處200嗎/mL氨芐青霉素+油胺MIC在^0.08nM油胺處100ug/mL利奈唑胺+油胺MIC在^5pM油胺處硬脂胺MIC在^20pM處20(^g/mL氨芐青霉素+硬脂胺MIC在^0.62nM硬脂胺處14100ug/mL利奈唑胺+硬脂胺MIC在^10nM硬脂胺處脫氫樅胺MIC在^20pM處20(Hig/mL氨節(jié)青霉素+脫氫樅胺MIC在^10nM脫氫縱胺處他莫昔芬MIC在^20pM處200嗎/mL氨芐青霉素+他莫昔芬MIC在^2.5nM他莫昔芬處式I敏化劑的表示性實(shí)例是油胺和硬脂胺。如表1中所示，這些化合物使銅綠假單胞菌PA01易受氨芐青霉素破壞。在0.62pM硬脂胺或0.08nM油胺存在時(shí)，PA01被200pg/mL氨芐青霉素殺死。在敏化劑存在下，PA01的生長(zhǎng)也明顯受利奈唑胺抑制；利奈唑胺是指定僅用于治療革蘭氏陽(yáng)性種的抗生素。PA01不僅受氨芐青霉素與脂肪胺組合的抑制，還受氨芐青霉素與三環(huán)狀脫氫縱胺或抗癌藥他莫昔芬組合的抑制。類似地，針對(duì)銅綠假單胞菌的臨床分離株進(jìn)行測(cè)定油胺作為敏化劑的效果(表2)。這些分離株可以被氨芐青霉素+油胺組合根除而不受這二者的高濃度影響。表2.油胺在氨芐青霉素存在下對(duì)臨床銅綠假單胞菌分離株生長(zhǎng)的影響。在20%LB中接種104個(gè)細(xì)菌，20小時(shí)孵育。分離株MIC氨芐青霉素油胺氨芐青霉素與濃度如下的油胺的生長(zhǎng)抑制(MIC)組合物PA7243>200pg/mLMIC在〉4(VM處200|ig/mL在^5pM處50ng/mL在27.5nM處PA7247>20(^g/mLMIC在240pM處200嗎/mL在^7.5nM處5(Hig/mL在^10pM處PA7249>2(%g/mLMIC在〉40(xM處200pg/mL在22.5^M處50ng/mL在27.5nM處PA7252>2(%g/mLMIC在^40nM處200嗎/mL在^1.25jxM處50ng/mL在^5ixM處PA7253>200ng/mLMIC在〉40pM處200pg/mL在25pM處50ng/mL在^10iiM處15表3顯示低濃度的敏化劑油胺和硬脂胺對(duì)氨芐青霉素MIC值的影響，其中PA01通常耐受所述的氨芐青霉素；此外，表3顯示喹諾酮抗生素萘啶酮酸針對(duì)PAOl的MIC值在添加低濃度敏化劑時(shí)降低。應(yīng)當(dāng)注意抗生素的MIC值25pg/mL被劃定為臨床耐受。表3.(20小時(shí)后)敏化劑對(duì)于抗銅綠假單胞菌PAOl的抗生素的MIC值的影響。在20%13中接種104個(gè)細(xì)菌。<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>此外，發(fā)現(xiàn)多耐藥性鮑曼不動(dòng)桿菌臨床分離株在油胺存在下易受慶大霉素作用破壞，而該種本身耐受慶大霉素、氨芐青霉素、頻繁使用的慶大霉素/氨芐青霉素組合或單獨(dú)油胺的處理(見(jiàn)表4)。表4.敏化劑對(duì)于多藥耐藥性鮑曼不動(dòng)桿菌針對(duì)慶大霉素的易感性的影響。<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>最終，在產(chǎn)超廣譜p-內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯菌和銅綠假單胞菌臨床分離株的情況下，使用油胺作為敏化劑可以顯著降低頭孢他啶的MIC值。表5.組合物對(duì)產(chǎn)超廣譜卩-內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯菌臨床分離株LUH5344和頭孢他啶耐受性銅綠假單胞菌臨床分離株P(guān)A24-7-3的影響。(100%LB(LUH5344)或20%LB(PA24-7-3》_<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>如上表中所述的相似結(jié)果可以使用具有較短R,基團(tuán)的(如式I中所述)敏化劑(如月桂胺)獲得。按照如上文所述的相同方式，還測(cè)試了耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌(MRSA)，并且發(fā)現(xiàn)當(dāng)甲氧西林與上文所述的長(zhǎng)鏈烴基胺(如油胺和硬脂胺)一起施用時(shí)，該細(xì)菌對(duì)甲氧西林敏感。類似地，可以在式I的敏化劑存在下用萬(wàn)古霉素和其它糖肽類殺死耐萬(wàn)古霉素的糞腸球菌(vancomycin-resistantEwferacocct^^eca/^,VRE)。另夕卜，發(fā)現(xiàn)在式I的敏化劑存在下，需要較低的抗生素劑量用于抑制葡萄球菌、鏈球菌、梭菌、芽孢桿菌、腸球菌、棒狀桿菌、軍團(tuán)菌、分枝桿菌、李斯特菌的生長(zhǎng)。權(quán)利要求1.一種抗微生物組合物，其包含a)式I的長(zhǎng)鏈烴基胺或其生理學(xué)上可接受的鹽其中R1表示在直鏈中含有至少7個(gè)原子的直鏈或支鏈烴基，所述的烴基可以包含雙鍵或叁鍵，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)取代、環(huán)烷基或芳基環(huán)，并且可以包含一個(gè)或多個(gè)O、N和/或S原子，并且R2和R3可以是相同或不同的，并且表示氫或含有1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烴基，所述的低級(jí)烴基可以包含雙鍵或叁鍵、環(huán)烷基或芳基環(huán)，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)取代，并且可以包含一個(gè)或多個(gè)O、N和/或S原子，和b)至少一種抗生素。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗微生物組合物，其中a)與b)的摩爾比低于5:1。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗微生物組合物，其中所述a)與b)的摩爾比最大是l:l。4.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的抗微生物組合物，其為藥物組合物。5.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的抗微生物組合物，其中所述的含有至少7個(gè)原子的直鏈烴基僅含有碳原子。6.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的抗微生物組合物，其中所述的直鏈烴基含有12-22個(gè)碳原子。7.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的抗微生物組合物，其中所述的R,烴基僅含有碳原子。8.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的抗微生物組合物，其中&和R3表示氫。9.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的抗微生物組合物，其中式I的長(zhǎng)鏈烴基胺處于其HC1鹽的形式。10.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的抗微生物組合物，其中所述長(zhǎng)鏈胺選自由月桂胺、肉豆蔻胺、十六烷基胺、二十烷胺、油胺、鞘氨醇、3-月桂氧基丙胺、亞油胺、亞麻胺、脫氫揪胺、他莫昔芬組成的組。11.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的抗微生物組合物，其中所述抗生素選自(3-內(nèi)酰胺類、喹諾酮類、糖肽類、大環(huán)內(nèi)酯類、噁唑烷酮類、肽抗生素類、脂肽類、硝基咪唑類、安莎霉素類、唑類、D-環(huán)絲氨酸、林可酰胺類、莫匹羅新、鏈陽(yáng)性菌素、磷霉素、氨基糖苷類、磺胺類、甲氧芐啶、四環(huán)素類、新生霉素、氯霉素、單環(huán)內(nèi)酰胺類及其合成衍生物。12.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的組合物用于制備治療細(xì)菌性感染的藥物的用途。13.根據(jù)權(quán)利要求12的用途，旨在增強(qiáng)所述抗生素的抗微生物活性。14.根據(jù)權(quán)利要求12或13的用途，用于治療由革蘭氏陰性菌所致的感染。15.根據(jù)權(quán)利要求12-14的用途，用于治療由埃希氏菌、嗜血桿菌、假單胞菌、克雷伯菌、腸桿菌、螺桿菌、志賀氏菌、沙門(mén)氏菌、耶爾森菌、彎曲桿菌、奈瑟菌、博德特菌、氣單胞菌、伯克霍德菌、沙雷菌、變形菌、弧菌和不動(dòng)桿菌所致的感染。16.根據(jù)權(quán)利要求12的用途，用于治療由革蘭氏陽(yáng)性菌所致的感染。17.根據(jù)權(quán)利要求12或16的用途，用于治療由葡萄球菌、鏈球菌、梭菌、芽孢桿菌、腸球菌、棒狀桿菌、軍團(tuán)菌、分枝桿菌和李斯特菌所致的感染。18.根據(jù)權(quán)利要求1-11任一項(xiàng)的抗微生物組合物用于清潔或消毒物體和區(qū)域的用途，所述抗微生物組合物任選地還包含清潔劑和/或消毒劑，并任選地包含適宜的載體或稀釋劑。19.試劑盒，其包含a)式I的長(zhǎng)鏈烴基胺或其生理學(xué)上可接受的鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其巾R,表示在直鏈中含有至少7個(gè)原子的直鏈或支鏈烴基，所述的烴基可以包含雙鍵或叁鍵，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)取代、環(huán)烷基或芳基環(huán)，并且可以包含一個(gè)或多個(gè)O、N和/或S原子，并且R2和R3可以是相同或不同的，并且表示氫或含有l(wèi)-6個(gè)碳原子的低級(jí)烴基，所述的低級(jí)烴基可以包含雙鍵或叁鍵、環(huán)垸基或芳基環(huán)，并且可以含有一個(gè)或多個(gè)取代，并且可以包含一個(gè)或多個(gè)O、N和/或S原子，禾口b)至少一種抗生素。20.根據(jù)權(quán)利要求19的試劑盒的用途，用于制備治療細(xì)菌性感染的藥物。全文摘要本發(fā)明提供包含抗生素和增強(qiáng)所述抗生素的有效性或活性的敏化劑的抗微生物組合物，其中所述的敏化劑優(yōu)選地是含有長(zhǎng)烴基鏈的伯胺。此類組合物尤其用于治療由耐藥細(xì)菌所致的感染。文檔編號(hào)A61P31/00GK101511430SQ200780032682公開(kāi)日2009年8月19日申請(qǐng)日期2007年8月2日優(yōu)先權(quán)日2006年8月3日發(fā)明者G·J·普拉騰伯格,J·T·范迪塞爾,P·C·德菲瑟申請(qǐng)人:普羅森薩技術(shù)有限公司