專利名稱：含多個(gè)不飽和雙鍵的齊墩果烷三萜類化合物及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及有機(jī)化學(xué)和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其制備方法和用途。本發(fā)明將該系列化合物對六種腫瘤細(xì)胞株如人前列腺癌細(xì)胞(PC-3)，鼻咽癌細(xì)胞(CNE)，口腔上皮癌細(xì)胞株(KB)，人肺癌細(xì)胞(A549)，人肝癌細(xì)胞(BEL-7404)，人子宮頸癌細(xì)胞(Hela)進(jìn)行了腫瘤細(xì)胞生長抑制活性篩選。該類化合物被發(fā)現(xiàn)具有一定的抑制腫瘤細(xì)胞生長活性，可預(yù)期作為抗腫瘤藥物用途。此外，此類化合物還對二甲苯致小鼠耳腫脹有顯著的抑制作用，提示該類化合物可以預(yù)期成為抗炎類藥物。
背景技術(shù)：
目前，由于工業(yè)發(fā)展中帶來的環(huán)境污染等問題，人類的生存環(huán)境質(zhì)量不斷下降，腫瘤疾病的發(fā)病率和致死率也不斷上升。然而治療腫瘤疾病的特效藥并不能令人滿意，并且目前抗腫瘤臨床所用細(xì)胞毒性藥物的選擇性不高所導(dǎo)致的對正常細(xì)胞的惡性殺傷，限制了該類藥物的普遍適用性。因此，尋找和發(fā)現(xiàn)新的選擇性高的細(xì)胞毒性抗腫瘤藥物是世界范圍內(nèi)的研究熱點(diǎn)。我們也致力于抗腫瘤藥物的研究。長期以來，三萜酸類及三萜類化合物因其特殊的細(xì)胞毒性引起廣泛的興趣(Chi-I Chang等，Journal of Natural Products，(天然產(chǎn)物雜志)，2004年67卷，91-93頁)，有希望從中發(fā)現(xiàn)能夠成為新的抗腫瘤藥物的先導(dǎo)化合物。因此本發(fā)明的目的在于對這類化合物進(jìn)行合成和結(jié)構(gòu)改造，以期尋找對腫瘤細(xì)胞株生長產(chǎn)生更強(qiáng)抑制作用的多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物。根據(jù)全世界尤其是中國的常發(fā)腫瘤疾病譜及腫瘤細(xì)胞的敏感性，我們選擇了人前列腺癌細(xì)胞(PC-3)，鼻咽癌細(xì)胞(CNE)，口腔上皮癌細(xì)胞(KB)，人肺癌細(xì)胞(A549)，人肝癌細(xì)胞(BEL-7404)，人子宮頸癌細(xì)胞(Hela)六株腫瘤細(xì)胞作為體外細(xì)胞毒活性藥理評價(jià)的指標(biāo)。
炎癥反應(yīng)是肌體對理化因素、致病因素等刺激的一種防御性反應(yīng)。近期發(fā)現(xiàn)腫瘤及老年性癡呆癥，以及衰老等都與炎癥有著直接或間接的關(guān)系。
理想的抗炎藥物不僅要求抗炎作用強(qiáng)，療效滿意，而且長期服用應(yīng)無不良反應(yīng)。糖皮質(zhì)激素等甾體抗炎藥(SAID)的抗炎作用雖然比非甾體抗炎藥(NSAID)作用強(qiáng)烈，對不少炎癥的療效較快，但是因?yàn)殚L期服用可能引起嚴(yán)重的周身性不良反應(yīng)，一般不作首選藥物。在采用非甾體抗炎藥療效不佳時(shí)才考慮選用。但是非甾體抗炎藥不良反應(yīng)發(fā)生率也很高，一般表現(xiàn)在誘發(fā)或者加重消化道潰瘍，限制了其廣泛應(yīng)用。近期研究還發(fā)現(xiàn)，諸如阿司匹林、保泰松、羥保泰松、消炎痛等藥物長期和大劑量服用會(huì)導(dǎo)致肝損傷，嚴(yán)重者甚至導(dǎo)致肝功能衰竭而死亡。
從中草藥資源中尋找既能有強(qiáng)效的抗炎效果、又能避免誘發(fā)消化道潰瘍的藥物或化合物以及其組合物是世界范圍都在關(guān)注的焦點(diǎn)之一。許多報(bào)道都涉及三萜酸和三萜類化合物對抗炎有確定的作用(如Ana-Isabel Huguet等，European Journal of Pharmacology(歐洲藥理學(xué)雜志)，2000年410卷69-81頁)；在中國，諸如齊墩果酸還是上市藥物用于治療肝炎疾病(孫定人等，國家臨床新藥集，中國醫(yī)藥科技出版社，335頁)。此外，戴岳等人還報(bào)道了齊墩果酸對不同致炎劑引起的大鼠足墊腫脹及二甲苯致小鼠耳腫脹等炎癥模型都有明顯的抑制作用(戴岳等，齊墩果酸的抗炎作用，中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，1989年第二卷，97頁)。因此本發(fā)明的目的在于對這類化合物進(jìn)行合成和結(jié)構(gòu)改造，以期尋找對炎癥具有更強(qiáng)抑制作用的多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物。本發(fā)明中選用對二甲苯致小鼠耳腫脹抑制作用模型作為抗炎作用初步評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。
發(fā)明目的 本發(fā)明的目的是提供一種具有細(xì)胞毒活性的、具有式(1)所示的多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其可藥用鹽或溶劑化物
其中 R1～R6可以相同或不同，分別選自氫，含1～8個(gè)碳原子的烷氧基，含1～8個(gè)碳原子的酰氧基，含1～8個(gè)碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基；2，3位之間，9，11位之間，11，12位之間，12，13位之間，和/或13，18位之間可以各自獨(dú)立地是碳碳單鍵或雙鍵；2，3位之間還可以是環(huán)氧基； R7和R8可以相同或者不同，選自-CH3，-COOH，-CH2OH，-COOR9，-CONH2，-CONHR9，-CON(R9)2，其中R9是含1～8個(gè)碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基；其中“取代或未取代”是指基團(tuán)可以未被取代或者被取代，用作取代的取代基選自鹵素，氨基，硝基，巰基，氰基，羥基，含1～8個(gè)碳的烷基，含1～8個(gè)碳的烷氧基，含1～8個(gè)碳的酰基，苯基，芳基； 本發(fā)明的又一目的是提供了式(1)化合物的用于制備防治腫瘤疾病藥物的用途； 本發(fā)明的又一目的是提供了式(1)化合物的用于制備抗炎藥物的用途； 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了一種含有式(1)化合物的用于抗腫瘤疾病的藥物組合物。
本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供了一種含有式(1)化合物的用于抗炎藥物的組合物。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種具有式(1)所示的多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其可藥用鹽或溶劑化物
其中R1～R6可以相同或不同，分別選自氫，含1～8個(gè)碳原子的烷氧基，含1～8個(gè)碳原子的酰氧基，含1～8個(gè)碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基；2，3位之間，9，11位之間，11，12位之間，12，13位之間，和/或13，18位之間可以各自獨(dú)立地是碳碳單鍵或雙鍵；2，3位之間還可以是環(huán)氧基；R7和R8可以相同或者不同，選自-CH3，-COOH，-CH2OH，-COOR9，-CONH2，-CONHR9，-CON(R9)2，其中R9是含1～8個(gè)碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基；其中“取代或未取代”是指基團(tuán)可以未被取代或者被取代，用作取代的取代基選自鹵素，氨基，硝基，巰基，氰基，羥基，含1～8個(gè)碳的烷基，含1～8個(gè)碳的烷氧基，含1～8個(gè)碳的酰基，苯基，芳基；除非另有說明，本發(fā)明中的烷基是指1-8個(gè)碳原子的烷基。
本發(fā)明的式(1)化合物中，當(dāng)2，3位之間為雙鍵，11，12位之間，12，13位之間，和/或13，18位之間為碳碳單鍵或者雙鍵，R1，R2和R5是氫原子，R8為甲基時(shí)，是一類優(yōu)選的式(I)化合物
其中R3，R4和R7與式(1)化合物中的定義相同；其條件是，當(dāng)2，3位之間是雙鍵，12，13位之間是雙鍵，9，11位之間是單鍵時(shí)，R3和R4之間不能同時(shí)是氫。優(yōu)選R3，R4分別選自氫，含1～8個(gè)碳原子的酰氧基，含1～8個(gè)碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基；R7選自-CH3，-COOH，-CH2OH，-COOR9，-CONH2，-CONHR9，-CON(R9)2，其中R9是含1～8個(gè)碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基； 該類化合物的制備過程具體如下 化合物Ia、Ic分別由化合物3-甲基磺酰氧基-齊墩果烷-28-酸-11，13(18)-二烯、3-甲基磺酰氧基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-11，13(18)-二烯在碳酸鋰作用下脫去甲基磺酸得到。Ie由化合物Ic通過氫化鋁鋰還原得到。化合物3-甲基磺酰氧基-齊墩果烷-28-酸-12-烯(3-甲基磺酰氧基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯)與N-溴代琥珀酰亞胺反應(yīng)后得到化合物IIa(IIe)再脫去甲基磺酸得到Ih(Im)，再水解得到Ig(II)?；衔颕i、In由化合物齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯、齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯與三氧化鉻反應(yīng)后再經(jīng)還原得到。Ik、Ip分別由化合物齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯、齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯與二氧化硒反應(yīng)得到，再堿性水解得到化合物Ij、Io?；衔颕I～I(xiàn)p用氫化鋁鋰還原得到相應(yīng)的產(chǎn)物Iq～I(xiàn)u。Ib由化合物齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯被三氧化鉻氧化后再經(jīng)氫化鋁鋰還原得到，與重氮甲烷反應(yīng)可以得到化合物Id。
合成路線如下 合成路線1
Δ11，13(18)，R＝H Δ11，13(18)，R＝H Ia Δ11，13(18)，R＝CH3 Δ11，13(18)，R＝H Ic 合成路線2
R＝H R＝HIIa R＝CH3 R＝CH3 IIe
R＝HIh R＝HIg R＝CH3 Im R＝CH3 II 合成路線3
R＝H R＝H IVbR＝H Ii R＝CH3R＝CH3IVgR＝CH3 In 合成路線4
R＝HR＝HIk R＝H Ij R＝CH3 R＝CH3 Ip R＝CH3 Io 合成路線5
Δ11，13(18) IcΔ11，13(18) Ie Δ9(11)，12 IdΔ9(11)，12 If 制備例1化合物Ii的制備 將化合物3-甲基磺酰氧基-齊墩果烷-28-酸-12-烯(1.0mmol)加5毫升DMAC(N，N′-二甲基乙酰胺)溶解，再加入碳酸鋰(2.0mmol)。反應(yīng)混合物加熱回流半小時(shí)。冷卻后，濾去過量的碳酸鋰，濾液加入10毫升水中，以乙醚萃取，有機(jī)相水洗至中性。無水硫酸鈉干燥。硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯8/1)，得到白色固體齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯，產(chǎn)率82％。
在20毫升醋酸(含5％的醋酸酐)中，加入化合物齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(0.82mmol)和三氧化鉻(4.92mmol)，室溫下攪拌過夜。將反應(yīng)化合物倒入20毫升水中，用氯仿萃取。有機(jī)相用飽和碳酸鈉洗滌，再水洗至中性。無水硫酸鈉干燥。硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯/4/1)，得到白色固體IVb，產(chǎn)率47％。
將化合物IVb(0.38mmol)溶于10毫升甲醇中，0℃下加入硼氫化鈉(1.52mmol)，室溫下攪拌6～7小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，加入1M鹽酸酸化，脫去大部分甲醇，加入乙酸乙酯10毫升和水10毫升，分層后，水層再以乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)相，水洗至中性，無水硫酸鈉干燥。硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯/3/1)，得到白色固體Ii，產(chǎn)率78％。
根據(jù)制備例1的方法制備以下所示制備例2～制備例22化合物 制備例2齊墩果烷-28-酸-2，11，13(18)-三烯(Ia)的制備，C30H44O2，MSESI m/e 436(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.63，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.51(brd，1H，J＝14.2Hz，H-19)，5.31-5.43(m，3H，H-2，H-3，H-12)，6.35(d，1H，J＝10.4Hz，H-11)。
制備例3齊墩果烷-28-酸-2，9(11)，12-三烯(Ib)的制備，C30H44O2，MSESI m/e 436(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.63，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.31-5.40(m，3H，H-2，H-3，H-12)，5.46(d，1H，J＝10.0Hz，H-11)。
制備例4齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，11，13(18)-三烯(Ic)的制備，C31H46O2，MSESI m/e 450(M+)；Rf(石油醚/氯仿1/1)0.65，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.66(s，3H，OCH3)，5.40-5.48(m，2H，H-2，H-3)，5.63(d，1H，J＝10.4Hz，H-12)，6.44(d，1H，J＝10.4Hz，H-11)。
制備例5齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，9(11)，12-三烯(Id)的制備，C31H46O2，MSESI m/e 450(M+)；Rf(石油醚/氯仿1/1)0.65，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.65(s，3H，OCH3)，5.33-5.43(m，3H，H-2，H-3，H-12)，5.50(d，1H，J＝9.6Hz，H-11)。
制備例628-羥基-齊墩果烷-2，11，13(18)-三烯(Ie)的制備，C30H46O，MSESI m/e 422(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯3/1)0.57；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.62(m，2H，H-28，H-28)，5.42(m，2H，H-2，H-3)，5.63(m，1H，H-12)，6.45(brd，1H，J＝7.2Hz，H-11)。
制備例728-羥基-齊墩果烷-2，9(11)，12-三烯(If)的制備，C30H46O，MSESI m/e 422(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯3/1)0.57；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.62(m，2H，H-28，H-28’)，5.33(d，1H，J＝10.0Hz，H-12)，5.42(m，2H，H-2，H-3)，5.55(brd，1H，J＝10.0Hz，H-11)。
制備例811-羥基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(Ig)的制備，C30H46O3，MSESI m/e 454(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.55，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.01(brs，1H，H-11)，5.36-5.44(m，2H，H-2，H-3)，5.66(brs，1H，H-12)。
制備例911-溴-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(Ih)的制備，C30H45BrO2，MSESI m/e 516(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.60，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.56(brs，1H，H-11)，5.36-5.44(m，3H，H-2，H-3，H-12)。
制備例101，11-二羥基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(Ii)的制備，C30H46O4，MSESI m/e 470(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.50，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.98(brs，1H，H-11)，5.66(brs，1H，H-12)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)。
制備例111-羥基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(Ij)的制備，C30H46O3，MSESI m/e 454(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.55，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.88(brd，1H，J＝10.2Hz，H-18)，3.55(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，5.32(brs，1H，H-12)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)。
制備例121-乙酰氧基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(Ik)的制備，C32H48O4，MSESI m/e 496(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.65，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.86(dd，1H，J＝4.0，13.6Hz，H-18)，4.74(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，5.27(brs，1H，H-12)，5.60(d，1H，J＝9.6Hz，H-3)，5.66(m，1H，H-2)。
制備例1311-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(II)的制備，C31H48O3，MSESI m/e 468(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.35；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.69(s，3H，OCH3)，4.01(brs，1H，H-11)，5.36-5.44(m，2H，H-2，H-3)，5.66(brs，1H，H-12)。
制備例1411-溴-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(Im)的制備，C31H47BrO2，MSESI m/e 530(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.40；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.67(s，3H，OCH3)，3.98(brs，1H，H-11)，5.66(brs，1H，H-12)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)。
制備例151，11-二羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(In)的制備，C31H48O4，MSESIm/e 484(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.31；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.67(s，3H，OCH3)，3.98(brs，1H，H-11)，5.66(brs，1H，H-12)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)。
制備例161-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(Io)的制備，C31H48O3，MSESI m/e 468(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.35；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.88(brd，1H，J＝10.2Hz，H-18)，3.55(d,1H，J＝5.6Hz，H-1)，3.66(s，3H，OCH3)，5.32(brs，1H，H-12)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)。
制備例171-乙酰氧基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(Ip)的制備，C33H50O4，MSESI m/e510(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.55；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.86(dd，1H，J＝4.0，13.6Hz，H-18)，3.63(s，3H，OCH3)，4.74(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，5.27(brs，1H，H-12)，5.60(d，1H，J＝9.6Hz，H-3)，5.66(m，1H，H-2)。
制備例1811，28-二羥基-齊墩果烷-2，12-二烯(Iq)的制備，C30H48O2，MSESI m/e 440(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯5/1)0.35；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.23(d，1H，J＝10.8Hz，H-28)，3.57(d，1H，J＝10.8Hz，H-28’)，4.01(brs，1H，H-11)，5.36-5.44(m，2H，H-2，H-3)，5.66(brs，1H，H-12)。
制備例1911-溴-28-羥基-齊墩果烷-2，12-二烯(Ir)的制備，C30H47BrO，MSESI m/e 502(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯5/1)0.42；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.25(d，1H，J＝10.4Hz，H-28)，3.57(d，1H，J＝10.4Hz，H-28’)，3.98(brs，1H，H-11)，5.66(brs，1H，H-12)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)。
制備例201，11，28-三羥基-齊墩果烷-2，12-二烯(Is)的制備，Rf(石油醚/乙酸乙酯5/1)0.31；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.66(brs，2H，H-28，H-28′)，4.21(brs，1H，H-11)，5.66(brs，1H，H-12)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)。
制備例211，28-二羥基-齊墩果烷-2，12-二烯(It)的制備，C30H48O2，MSESI m/e 440(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯5/1)0.35；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.88(brd，1H，J＝10.2Hz，H-18)，3.55(m，2H，H-1，H-28)，3.60(d，1H，J＝10.4Hz，H-28’)，5.32(brs，1H，H-12)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)。
制備例221-乙酰氧基-28-羥基-齊墩果烷-2，12-二烯(Iu)的制備，C32H50O3，MSESI m/e 482(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯5/1)0.55；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.86(dd，1H，J＝4.0，13.6Hz，H-18)，3.30(d，1H，J＝10.4Hz，H-28)，3.56(d，1H，J＝10.4Hz，H-28’)，4.74(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，5.27(brs，1H，H-12)，5.60(d，1H，J＝9.6Hz，H-3)，5.66(m，1H，H-2)。
本發(fā)明的式(1)化合物中，當(dāng)12，13位之間為雙鍵，R4為溴原子，R3、R5和R6是氫原子，R8為甲基時(shí)，是一類優(yōu)選的式(II)化合物
其中R1，R2和R7與式(1)化合物的定義相同。
優(yōu)選R1，R2可以相同或不同，分別選自氫，含1～8個(gè)碳原子的酰氧基，含1～8個(gè)碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基，或者R1和R2之間可以形成環(huán)氧基；R7選自-CH3，-COOH，-CH2OH，-COOR9，-CONH2，-CONHR9，-CON(R9)2，其中R9是含1～8個(gè)碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基。
本發(fā)明更優(yōu)選的式(II)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是 3β-甲基磺酰氧基-11-溴-齊墩果烷-28-酸-12-烯(IIa)； 2β，3β-二羥基-11-溴-齊墩果烷-28-酸-12-烯(IIb)； 2，3-環(huán)氧-11-溴-齊墩果烷-28-酸-12-烯(IIc)； 3β-乙酰氧基-11-溴-齊墩果烷-28-酸-12-烯(IId)； 3β-甲基磺酰氧基-11-溴-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯(IIe)； 2β，3β-二羥基-11-溴-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯(IIf)； 2，3-環(huán)氧-11-溴-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯(IIg)； 3β-乙酰氧基-11-溴-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯(IIh)。
該類化合物的制備過程具體如下 化合物IIa(IIe)由化合物3-甲基磺酰氧基-齊墩果烷-28-酸-12-烯(3-甲基磺酰氧基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯)與NBS(N-溴代琥珀酰亞胺)在1，4-二氧六環(huán)和水做溶劑中反應(yīng)得到。脫去甲基磺酸后得到化合物Ih(Im)，由間氯過氧苯甲酸(mCPBA)環(huán)氧化得到化合物IIc(IIg)，再被濃鹽酸開環(huán)得到化合物IIb(IIf)?；衔颕Id、IIh分別由化合物3-乙酰氧基-齊墩果烷-28-酸-12-烯、3-乙酰氧基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯與N-溴代琥珀酰亞胺反應(yīng)得到。
合成路線如下 合成路線5
R＝H IhR＝H IIcR＝H IIb R＝CH3 ImR＝CH3 IIgR＝CH3 IIf 合成路線6
R＝HR＝HIId R＝CH3 R＝CH3 IIh 制備例23化合物IIa的制備 化合物3-甲基磺酰氧基-齊墩果烷-28-酸-12-烯(1.0mmol)加入10毫升1，4-二氧六環(huán)，攪拌下加入碳酸鉀(2.00mmol)，光照下加入N-溴代琥珀酰亞胺(2.50mmol)。反應(yīng)兩小時(shí)，過濾，濾液加10毫升的水和10毫升乙酸乙酯，分層后，水層用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用水洗至中性，無水硫酸鈉干燥，硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯/12/1)，得到白色固本IIa，產(chǎn)率30％。
根據(jù)制備例23的方法制備以下所示制備例24～制備例31化合物 制備例243β-甲基磺酰氧基-11-溴-齊墩果烷-28-酸-12-烯(IIa)的制備，C31H49BrO5S，MSESI m/e 612(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.52，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.04(s，3H，SCH3)，3.57(brs，1H，H-11)，3.04(s，3H，SCH3)，4.13(dd，1H，J＝7.2，14.0Hz，H-3)，5.30(brs，1H，H-12)。
制備例252β，3β-二羥基-11-溴-齊墩果烷-28-酸-12-烯(IIb)的制備，C30H47BrO4，MSESIm/e 550(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.41，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.56(brs，1H，H-11)，3.77(d，1H，J＝11.2Hz，H-3)，4.09(dd，1H，J＝11.2，20.4Hz，H-2)，5.23(s，1H，H-12)。
制備例262，3-環(huán)氧-11-溴-齊墩果烷-28-酸-12-烯(IIc)的制備，C30H45BrO3，MSESI m/e532(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.60，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.60(brs，1H，H-11)，3.03(m，2H，H-2，H-3)，3.56(brs，1H，H-11)，5.23(s，1H，H-12)。
制備例273β-乙酰氧基-11-溴-齊墩果烷-28-酸-12-烯(IId)的制備，C32H49BrO4，MSESI m/e576(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.55，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.52(m，1H，H-3)，3.57(brs，1H，H-11)，5.26(s，1H，H-12)。
制備例283β-甲基磺酰氧基-11-溴-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯(IIe)的制備，C32H51BrO5S，MSESI m/e 626(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯6/1)0.55，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.04(s，3H，SCH3)， 3.57(brs，1H，H-11)，3.04(s，3H，SCH3)，3.69(s，3H，OCH3)，4.13(dd，1H，J＝7.2，14.0Hz，H-3)，5.30(brs，1H，H-12)。
制備例292β，3β-二羥基-11-溴-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯(IIf)的制備，C31H49BrO4，MSESI m/e 564(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯6/1)0.35，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.56(brs，1H，H-11)，3.69(s，3H，OCH3)，3.77(d，1H，J＝11.2Hz，H-3)，4.09(dd，1H，J＝11.2，20.4Hz，H-2)，5.23(s，1H，H-12)。
制備例302，3-環(huán)氧-11-溴-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯(IIg)的制備，C31H47BrO3，MSESI m/e 546(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯6/1)0.65，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.60(brs，1H，H-11)，3.03(m，2H，H-2，H-3)，3.56(brs，1H，H-11)，3.67(s，3H，OCH3)，5.29(s，1H，H-12)。
制備例313β-乙酰氧基-11-溴-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯(IIh)的制備，C33H51BrO4，MSESI m/e 590(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯6/1)0.55，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.67(s，3H，OCH3)，4.52(m，1H，H-3)，3.57(brs，1H，H-11)，5.26(s，1H，H-12)。
本發(fā)明的式(1)化合物中，當(dāng)R3和R4是氫原子，R8為甲基，結(jié)構(gòu)中無任何雙鍵時(shí)，是一類優(yōu)選的式(III)化合物
其中R1，R2，R5，R6，R7與式(1)化合物的定義相同。
優(yōu)選R1，R2，R5，R6可以相同或不同，分別選自氫，含1～8個(gè)碳原子的酰氧基，含1～8個(gè)碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基，或者R1和R2之間可以形成環(huán)氧基；R7選自-CH3，-COOH，-CH2OH，-COOR9，-CONH2，-CONHR9，-CON(R9)2，其中R9是含1～8個(gè)碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基。
本發(fā)明更優(yōu)選的式(III)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是 3β，12，13-三羥基-齊墩果烷-28-酸(IIIa)； 2β，3β，12，13-四羥基-齊墩果烷-28-酸(IIIb)； 2α，3β，12，13-四羥基-齊墩果烷-28-酸(IIIc)； 3β，12，13-三羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(IIId)； 2β，3β，12，13-四羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(IIIe)； 2α，3β，12，13-四羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(IIIf)。
該類化合物制備過程具體如下 化合物IIIa～I(xiàn)IIc分別由化合物原料齊墩果酸和化合物齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯環(huán)氧化再在不同條件下開環(huán)得到?；衔颕IId～I(xiàn)IIf分別由化合物IIIa～I(xiàn)IIc與重氮甲烷反應(yīng)得到。
合成路線如下 合成路線7
合成路線8
齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯 合成路線9
齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯 制備例10化合物IIIb的制備 將化合物齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(0.42mmol)溶解在5毫升的二氯甲烷中，加入mCPBA(間氯過氧苯甲酸)(0.84mmol)，室溫下攪拌過夜。直接在反應(yīng)液中滴加2滴濃鹽酸。室溫反應(yīng)3小時(shí)。待反應(yīng)結(jié)束后，加入5毫升水，分層后，水層用二氯甲烷5毫升萃取，有機(jī)相水洗至中性。無水硫酸鈉干燥。硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯3/1)，得到白色固體IIIb，產(chǎn)率28％。
根據(jù)制備例32的方法制備以下所示制備例33～制備例38化合物 制備例333β，12，13-三羥基-齊墩果烷-28-酸(IIIa)的制備，C30H50O5，MSESI m/e 490(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.37，1H NMR(400Mz，CDCl3)δ3.23(dd，1H，J＝4，10.4Hz，H-3)，3.89(brs，1H，H-12)。
制備例342β，3β，12，13-四羥基-齊墩果烷-28-酸(IIIb)的制備，C30H50O6，MSESI m/e 506(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.20，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.80(d，1H，J＝11.6Hz，H-3)，3.89(brs，1H，H-12)，4.16(dd，1H，J＝9.6，11.6Hz，H-2)。
制備例352α，3β，12，13-四羥基-齊墩果烷-28-酸(IIIc)的制備，C30H50O6，MSESI m/e 506(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.23，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.68(m，2H，H-2，H-3)，3.91(brs，1H，H-12)。
制備例363β，12，13-三羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(IIId)的制備，C31H52O5，MSESI m/e 504(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯3/1)0.56，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.23(dd，1H，J＝4，10.4Hz，H-3)，3.69(s，3H，OCH3)，3.89(brs，1H，H-12)。
制備例372β，3β，12，13-四羥基-齊墩果烷-28-羥酸甲酯(IIIe)的制備，C31H52O6，MSESI m/e520(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯3/1)0.42，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.69(s，3H，OCH3)，3.80(d，1H，J＝11.6Hz，H-3)，3.89(brs，1H，H-12)，4.16(dd，1H，J＝9.6，11.6Hz，H-2)。
制備例382α，3β，12，13-四羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(IIIf)的制備，C31H52O6，MSESI m/e520(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯3/1)0.45，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.68(m，5H，H-2，H-3，OCH3)，3.91(brs，1H，H-12)。
本發(fā)明的式(1)化合物中，當(dāng)2，3位之間、12，13位之間同時(shí)為雙鍵，R4為酮羰基，R1，R2和R5是氫原子，R8為甲基時(shí)，是一類優(yōu)選的式(IV)化合物
其中R3和R7與式(1)化合物的定義相同。
優(yōu)選R3分別選自氫、含1～8個(gè)碳原子的酰氧基、含1～8個(gè)碳原子的磺酰氧基、鹵素、氨基、硝基、氰基、羥基或羰基；R7選自-CH3、-COOH、-CH2OH、-COOR9、-CONH2、-CONHR9或-CON(R9)2；其中R9是含1～8個(gè)碳原子的烷基、取代或未取代的苯基或者取代或未取代的苯基。
本發(fā)明更優(yōu)選的式(IV)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是 11-羰基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(IVa)； 1，11-二羰基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(IVb)； 1-溴-11-羰基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(IVc)； 1-乙酰氧基-11-羰基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(IVd)； 1-羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(IVe)； 11-羰基-齊礅果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(IVf)； 1，11-二羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(IVg)； 1-溴-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(IVh)； 1-乙酰氧基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(IVi)； 1-羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(IVj)。
該類化合物的制備過程具體如下 化合物IVa、IVf分別由化合物3β-甲基磺酰氧基-11-羰基-齊墩果烷-28-酸-12-烯、3β-甲基磺酰氧基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-12-烯脫去甲基磺酸得到，再經(jīng)過三氧化鉻的氧化得到化合物IVb、IVg，化合物IVc、IVh分別由化合物IVa、IVf與N-溴代琥珀酰亞胺在1，4-二氧六環(huán)和水做溶劑反應(yīng)得到?；衔颕Vd、IVi分別由化合物IVa、IVf通過二氧化硒氧化得到，再堿性水解分別得到化合物IVe、IVj。
合成路線如下
R＝HIVaR＝HIVb R＝CH3 IVfR＝CH3 IVg 合成路線11
R＝HIVaR＝HIVdR＝HIVe R＝CH3 IVfR＝CH3 IViR＝CH3 IVj 合成路線12
R＝HIVa R＝HIVc R＝CH3 IVf R＝CH3 IVh 制備例39化合物IVj的制備 將化合物IVf(1.00mmol)加入10毫升醋酸溶解，再加入二氧化硒(1.00mmol)，加熱回流至反應(yīng)完全后，冷卻。抽濾，濾液倒入10毫升水中，以氯仿萃取。有機(jī)相用飽和碳酸鈉溶液洗滌至水層堿性，再水洗至中性。無水硫酸鈉干燥，硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯/10/1)，得到白色固體IVi，產(chǎn)率20％。
0.80mmol氫氧化鉀溶解在0.5毫升水中，再加入10毫升乙醇。將化合物IVi加入到上述溶液中，加熱回流。冷卻后，脫去大部分甲醇，加10毫升水和10毫升乙酸乙酯，分層后，水層以乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)相，1M鹽酸溶液洗滌至酸性，水洗至中性。無水硫酸鈉干燥，硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯/10/1)，得到白色固體IVj，產(chǎn)率35％。
根據(jù)制備例39法制備以下所示制備例40至制備例49化合物 制備例4011-羰基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(IVa)的制備，C30H44O3，MSESI m/e 452(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.43，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.31-5.43(m，2H，H-2，H-3)，5.76(s，1H，H-12)。
制備例411，11-二羰基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(IVb)的制備，C30H42O4，MSESI m/e 466(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.38，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.74(s，1H，H-12)，5.82(d，1H，J＝10.4Hz，H-3)，6.24(dd，1H，J＝10.4Hz，H-2)。
制備例421-溴-11-羰基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(IVc)的制備，C30H43BrO3，MSESIm/e 530(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.46，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.88(brs，1H，H-1)，5.60(m，2H，H-2，H-3)，5.76(s，1H，H-12)。
制備例431-乙酰氧基-11-羰基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(IVd)的制備，C32H46O5，MSESI m/e 510(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.50，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.74(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，5.60(d，1H，J＝9.6Hz，H-3)，5.66(m，1H，H-2)，5.78(s，1H，H-12)。
制備例441-羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯(IVe)的制備，C30H44O4，MSESI m/e468(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.42，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.55(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)，5.79(s，1H，H-12)。
制備例4511-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(IVf)的制備，C31H46O3，MSESI m/e466(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯5/1)0.61，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.66(s，3H，OCH3)，5.31-5.43(m，2H，H-2，H-3)，5.76(s，1H，H-12)。
制備例461，11-二羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(IVg)的制備，C31H44O4，MSESIm/e 480(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯3/1)0.60，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.69(s，3H，OCH3)，5.71(s，1H，H-12)，5.85(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，6.23(dd，1H，J＝10.0Hz，H-2)。
制備例471-溴-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(IVh)的制備，C31H45BrO3，MSESI m/e 544(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯5/1)0.67，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.66(s，3H，OCH3)，3.89(brs，1H，H-1)，5.65(m，2H，H-1，H-2)，5.86(s，1H，H-12)。
制備例481-乙酰氧基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(IVi)的制備，C33H48O5，MSESI m/e 524(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯6/1)0.60，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.68(s，3H，OCH3)，4.74(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，5.60(d，1H，J＝9.6Hz，H-3)，5.69(m，1H，H-2)，5.76(s，1H，H-12)。
制備例491-羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯(IVj)的制備，C31H46O4，MSESI m/e 482(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯6/1)0.43，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.55(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，3.66(s，3H，OCH3)，5.32(brs，1H，H-12)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)。
本發(fā)明的式(1)化合物中，當(dāng)R5為酮羰基，13，18位之間是雙鍵，R2，R3和R4是氫原子，R8為甲基時(shí)，是一類優(yōu)選的式(V)化合物
其中R1和R7與式(1)化合物的定義相同。
優(yōu)選R1分別選自氫，含1～8個(gè)碳原子的酰氧基，含1～8個(gè)碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基；R7選自-CH3，-COOH，-CH2OH，-COOR9，-CONH2，-CONHR9，-CON(R9)2，其中R9是含1～8個(gè)碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基。
本發(fā)明更優(yōu)選的式(V)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是 3β-羥基-12-羰基-齊墩果烷-28-酸-13(18)-烯(Va)； 3β-乙酰氧基-12-羰基-齊墩果烷-28-酸-13(18)-烯(Vb)； 3β-甲基磺酰氧基-12-羰基-齊墩果烷-28-酸-13(18)-烯(Vc)； 3β-羥基-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-13(18)-烯(Vd)； 3β-乙酰氧基-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-13(18)-烯(Ve)； 3β-甲基磺酰氧基-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-13(18)-烯(Vf)。
該類化合物的制備過程具體如下 化合物Vd、Ve、Vf分別由化合物3-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-11，13(18)-二烯、3-乙酰氧基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-11，13(18)-二烯、3-甲基磺酰氧基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-11，13(18)-二烯與間氯過氧苯甲酸在酸性條件下被氧化得到?；衔颲a～Vb分別由化合物Vd～Vf水解得到。
合成路線如下 合成路線13
R1＝OH R1＝OH VdR1＝OH Va R1＝OAcR1＝OAc VeR1＝OAc Vb R1＝OMsR1＝OMs VfR1＝OMs Vc 制備例50化合物Va的制備 將化合物3-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-11，13(18)-二烯(2.00mmol)用10毫升二氯甲烷溶解，加入間氯過氧苯甲酸(2.00mmol)，攪拌三小時(shí)，滴加濃鹽酸10滴，室溫反應(yīng)兩小時(shí)。加入10毫升水，分層后，水層用氯仿10毫升萃取。合并有機(jī)相，飽和NaHCO3溶液洗滌至堿性，水性至中性。無水硫酸鈉干燥，硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯/10/1)，得到白色固體Vd，產(chǎn)率11％。
在5毫升二甲基甲酰胺中，加入化合物Vd(0.22mmol)和碘化鋰(1.10mmol)，反應(yīng)混合物加熱回流至反應(yīng)結(jié)束。抽濾，濾液倒入10毫升水中，乙酸乙酯10毫升萃取。有機(jī)相用水洗至中性。無水硫酸鈉干燥，硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯/5/1)，得到白色固體Va，產(chǎn)率55％。
根據(jù)制備例50法制備以下所示制備例51至制備例56化合物 制備例513β-羥基-12-羰基-齊墩果烷-28-酸-13(18)-烯(Va)的制備，C30H46O4，MSESI m/e470(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.33，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.91(brd，1H，H-11)，3.25(m，1H，H-3)。
制備例523β-乙酰氧基-12-羰基-齊墩果烷-28-酸-13(18)-烯(Vb)的制備，C32H48O5，MSESI m/e 512(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.45，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.90(brd，1H，H-11)，4.52(m，1H，H-3)。
制備例533β-甲基磺酰氧基-12-羰基-齊墩果烷-28-酸-13(18)-烯(Vc)的制備，C31H48O6S，MSESI m/e 548(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.36，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.93(brd，1H，H-11)，3.03(s，3H，CH3S)，4.38(dd，1H，J＝4.0，11.6Hz，H-3)。
制備例543β-羥基-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-13(18)-烯(Vd)的制備，C31H48O4，MSESI m/e 484(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯3/1)0.80，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.91(brd，1H，H-11)，3.25(m，1H，H-3)，3.65(s，3H，OCH3)。
制備例553β-乙酰氧基-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-13(18)-烯(Ve)的制備，C33H50O5，MSESI m/e 526(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯6/1)0.67，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.90(brd，1H，H-11)，3.66(s，3H，OCH3)，4.52(m，1H，H-3)。
制備例563β-甲基磺酰氧基-12-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-13(18)-烯(Vf)的制備，C32H50O6S，MSESI m/e 562(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯6/1)0.52，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.93(brd，1H，H-11)，3.03(s，3H，CH3S)，3.70(s，3H，OCH3)，4.38(m，1H，H-3)。
本發(fā)明的式(1)化合物中，當(dāng)R4為酮羰基，R3是氫原子，R8為甲基時(shí)，是一類優(yōu)選的式(VI)化合物
其中R1，R2，R5，R6和R7與式(1)化合物的定義相同。
優(yōu)選R1，R2，R5，R6可以相同或不同，分別選自氫，含1～8個(gè)碳原子的酰氧基，含1～8個(gè)碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基，或者R1和R2之間可以形成環(huán)氧基；R7選自-CH3，-COOH，-CH2OH，-COOR9，-CONH2，-CONHR9，-CON(R9)2，其中R9是含1～8個(gè)碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基。
本發(fā)明更優(yōu)選的式(VI)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是 3β，13-二羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-酸(VIa)； 3β-乙酰氧基-11-羰基-13-羥基-齊墩果烷-28-酸(VIb)； 3β-甲基磺酰氧基-11-羰基-13-羥基-齊墩果烷-28-酸(VIc)； 3β，13-二羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VId)； 3β-乙酰氧基-11-羰基-13-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIe)； 3β-甲基磺酰氧基-11-羰基-13-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIf)； 3β，12-二羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-酸(VIg)； 3β-乙酰氧基-11-羰基-12-羥基-齊墩果烷-28-酸(VIh)； 3β-甲基磺酰氧基-11-羰基-12-羥基-齊墩果烷-28-酸(VIi)； 3β，12-二羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIj)； 3β-乙酰氧基-12-羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIk)； 3β-甲基磺酰氧基-12-羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIl)； 11-羰基-12-羥基-齊墩果烷-28-酸-2-烯(VIm)； 2，3-環(huán)氧-11-羰基-12-羥基-齊墩果烷-28-酸(VIn)； 2β，3β，12-三羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-酸(VIo)； 11-羰基-12-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2-烯(VIp)； 2，3-環(huán)氧-11-羰基-12-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIq)； 2β，3β，12-三羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIr)。
該類化合物的制備過程具體如下 化合物VIa～VIc、VIg～VIi相應(yīng)由原料齊墩果酸、化合物3-乙酰氧基-齊墩果烷-28-酸-12-烯、3-甲基磺酰氧基-齊墩果烷-28-酸-12-烯與N-溴代琥珀酰亞胺在乙腈、二氯甲烷和水作溶劑時(shí)得到。將它們甲基化得到對應(yīng)的羧酸甲酯衍生物VId～VIf、VIj～VII?；衔颲Im(VIp)由化合物VIi(VII)脫去甲基磺酸得到。與間氯過氧苯甲酸發(fā)生環(huán)氧化得到化合物VIn(VIq)，酸性水解得到化合物VIo(VIr)。
合成路線如下 合成路線14
R1＝OH齊墩果酸 R1＝OH，R5＝H，R6＝OH VIa R1＝OH，R5＝H，R6＝OH VId R1＝OH，R5＝OH，R6＝H VIg R1＝OH，R5＝OH，R6＝H VIj R1＝OAc R1＝OAc，R5＝H，R6＝OH VIb R1＝OH，R5＝H，R6＝OH VIe R1＝OH，R5＝OH，R6＝H VIh R1＝OH，R5＝OH，R6＝H VIk R1＝OMs R1＝OH，R5＝H，R6＝OH VIc R1＝OH，R5＝H，R6＝OH VIf R1＝OH，R5＝OH，R6＝H VIi R1＝OH，R5＝OH，R6＝H VIl 合成路線15
R＝HVIiR＝H VIm R＝CH3 VIlR＝CH3 VIp
R＝HVInR＝H VIo R＝CH3 VIqR＝CH3 VIr 制備例57化合物VIa，VIg的制備 將原料齊墩果酸(1.00mmol)加入20毫升乙腈、二氯甲烷和水(15/1/0.1)的混合溶劑，光照下加入N-溴代琥珀酰亞胺(2.00mmol)。加入0.20毫升三乙胺，光照攪拌四小時(shí)左右，加入10毫升5％硫代硫酸鈉Na2S2O3溶液，乙酸乙酯10毫升萃取。合并有機(jī)相，依次以1M鹽酸、水、飽和氯化鈉溶液洗滌。無水硫酸鈉干燥，硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯8/1)，得到化合物VIa(白色固體，Rf＝0.3石油醚/乙酸乙酯8/1)，VIg(白色固體，Rf＝0.2石油醚/乙酸乙酯8/1)，產(chǎn)率分別是19％，34％。
根據(jù)制備例57法制備以下所示制備例58至制備例75化合物 制備例583β，13-二羥基-11-羰基-齊墩果酸-28-酸(VIa)的制備，C30H48O5，MSESI m/e 488(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.30，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.22(dd，1H，J＝6.4，10.8Hz，H-3)。
制備例593β-乙酰氧基-11-羰基-13-羥基-齊墩果烷-28-酸(VIb)的制備，C32H50O6，MSESIm/e 530(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.44，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.52(m，1H，H-3)。
制備例603β-甲基磺酰氧基-11-羰基-13-羥基-齊墩果烷-28-酸(VIc)的制備，C31H50O7S，MSESI m/e 566(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.35，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.03(s，3H，CH3S)，4.40(dd，1H，J＝11.8，5.6Hz，H-3)。
制備例613β，13-二羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VId)的制備，C31H50O5，MSESI m/e502(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.51，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.32(dd，1H，J＝6.0，10.8Hz，H-3)，3.65(s，3H，OCH3)。
制備例623β-乙酰氧基-11-羰基-13-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIe)的制備，C33H52O6，MSESI m/e 544(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.62，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.68(s，3H，OCH3)，4.52(m，1H，H-3)。
制備例633β-甲基磺酰氧基-11-羰基-13-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIf)的制備，C32H52O7S，MSESI m/e 580(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.55，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.03(s，3H，CH3S)，3.68(s，3H，OCH3)，4.33(dd，1H，J＝11.4，5.6Hz，H-3)。
制備例643β，12-二羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-酸(VIg)的制備，C31H48O5，MSESI m/e 488(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.20，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.23(dd，1H，J＝5.6，10.8Hz，H-3)，3.68(s，1H，H-12)。
制備例653β-乙酰氧基-11-羰基-12-羥基-齊墩果烷-28-酸(VIh)的制備，C32H50O6，MSESIm/e 530(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.35，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.66(s，1H，H-12)，4.52(m，1H，H-3)。
制備例663β-甲基磺酰氧基-11-羰基-12-羥基-齊墩果烷-28-酸(VIi)的制備，C31H50O7S，MSESI m/e 566(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.25，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.03(s，3H，CH3S)，3.68(s，1H，H-12)，4.33(dd，1H，J＝11.4，5.6Hz，H-3)。
制備例673β，12-二羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIj)的制備，C31H50O5，MSESI m/e502(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.20，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.23(dd，1H，J＝5.6，10.8Hz，H-3)，3.68(m，4H，H-12，OCH3)。
制備例683β-乙酰氧基-12-羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIk)的制備，C33H52O6，MSESI m/e 544(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.67，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.68(brs，4H，OCH3，H-12)，4.52(m，1H，H-3)。
制備例693β-甲基磺酰氧基-12-羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIl)的制備，C32H52O7S，MSESI m/e 580(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯8/1)0.25，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.03(s，3H，CH3S)，3.68(brs，4H，H-12，OCH3)，4.33(dd，1H，J＝11.0，5.2Hz，H-3)。
制備例7011-羰基-12-羥基-齊墩果烷-28-酸-2-烯(VIm)的制備，C30H46O4，MSESI m/e 470(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯3/1)0.65，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.69(s，1H，H-12)，5.41(m，2H，H-2，H-3)。
制備例712，3-環(huán)氧-11-羰基-12-羥基-齊墩果烷-28-酸(VIn)的制備，C30H46O5，MSESIm/e 486(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯3/1)0.60，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.21(m，2H，H-2，H-3)，3.68(s，1H，H-12)。
制備例722β，3β，12-三羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-酸(VIo)的制備，C30H48O6，MSESI m/e504(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯3/1)0.40，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.68(s，1H，H-12)，3.73(dd，1H，J＝11.2Hz，H-3)，4.10(dd，1H，J＝9.6，18.0Hz，H-2)。
制備例7311-羰基-12-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2-烯(VIp)的制備，C31H48O4，MSESIm/e 484(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯5/1)0.65，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.65(s，3H，OCH3)，3.69(s，1H，H-12)，5.41(m，2H，H-2，H-3)。
制備例742，3-環(huán)氧-11-羰基-12-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIq)的制備，C31H48O5，MSESI m/e 500(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯5/1)0.62，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.21(m，2H，H-2，H-3)，3.68(brs，4H，H-12，OCH3)。
制備例752β，3β，12-三羥基-11-羰基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯(VIr)的制備，C31H50O6，MSESIm/e 518(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯5/1)0.47，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.68(brs，4H，H-12，OCH3)，3.73(dd，1H，J＝11.2Hz，H-3)，4.10(dd，1H，J＝9.6，18.0Hz，H-2)。
本發(fā)明的式(1)化合物中，當(dāng)R7為甲基，R4和R5是氫原子，2，3位之間是雙鍵，9，11位之間和12，13位為雙鍵對，是一類優(yōu)選的式(VII)化合物
其中R1，R2，R3和R8與式(1)化合物的定義相同。
優(yōu)選R1，R2，R3分別選自氫，含1～8個(gè)碳原子的酰氧基，含1～8個(gè)碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基，或者R1和R2之間可以形成環(huán)氧基；R8選自-CH3，-COOH，-CH2OH，-COOR9，-CONH2，-CONHR9，-CON(R9)2，其中R9是含1～8個(gè)碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基。
本發(fā)明更優(yōu)選的式(VII)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是 1-羥基-齊墩果烷-30-酸-2，9(11)，12-三烯(VIIa)； 齊墩果烷-30-酸-2，9(11)，12-三烯(VIIIb)； 1，30-二羥基-齊墩果烷-2，9(11)，12-三烯(VIIc)； 30-羥基-齊墩果烷-2，9(11)，12-三烯(VIId)。
該類化合物的制備過程具體如下 化合物VIIa與VIIb分別由原料1，11-二羰基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯、11-羰基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯通過氫化鋁鋰還原得到?；衔颲IIc和VIId分別由化合物1-羥基-11-羰基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯和11-羰基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯通過氫化鋁鋰還原得到。
合成路線16
R3＝OH，R2＝R3＝H， R3＝OH，R2＝R3＝H， VIIa R1＝H，R2＝R3＝H， R1＝H，R2＝H，R3＝H，VIIb 合成路線17
R3＝OH，R2＝R3＝H， R3＝OH，R2＝Rx＝H，VIIc R1＝H，R2＝R3＝H， R1＝H，R2＝R3＝H， VIId 制備例761-羥基-齊墩果烷-30-酸-2，9(11)，12-三烯(VIIa)的制備，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，向氫化鋰鋁(0.9mmol)的無水四氫呋喃溶液(5毫升)懸浮液中小心滴加1，11-二羰基-齊墩果烷-30-酸-1，12-二烯(0.3mmol)的無水四氫呋喃溶液，并持續(xù)攪拌。滴加完畢后，反應(yīng)在室溫下進(jìn)行一小時(shí)。小心加入1M鹽酸，直至無氣體放出。產(chǎn)物用乙酸乙酯10毫升萃取四次。合并有機(jī)相，用水洗滌至中性。無水硫酸鈉干燥，脫溶后，硅膠柱層析(洗脫劑石油醚/乙酸乙酯1/1)，得到白色固體VIIa，產(chǎn)率39％。C30H44O3，MSESI m/e 452(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.52，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.59(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，5.50(d，1H，J＝14.0Hz，H-3)，5.59(d，1H，J＝6.0Hz，H-12)，5.65(d，1H，J＝6.0Hz，H-11)，5.68(dd，1H，J＝6.0，14.4Hz，H-2)。
根據(jù)制備例76法制備以下所示制備例77至制備例79化合物 制備例77齊墩果烷-30-酸-2，9(11)，12-三烯(VIIb)的制備，C30H44O2，MSESI m/e 436(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.66，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.31-5.43(m，2H，H-2，H-3)，5.60(d，1H，J＝5.6Hz，H-12)，5.63(d，1H，J＝5.6Hz，H-11)。
制備例781，30-二羥基-齊墩果烷-2，9(11)，12-三烯(VIIc)的制備，C30H46O2，MSESI m/e438(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯1/1)0.52，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.37(s，1H，OH)，3.49(d，1H，J＝10.8Hz，H-30)，3.62(d，1H，J＝10.8Hz，H-30′)，4.26(brs，1H，H-1)，5.28(d，1H，J＝10.0Hz，H-12)，5.46(d，1H，J＝10.0Hz，H-11)，5.55(d，1H，J＝5.6Hz，H-2)，6.65(d，1H，J＝5.6Hz，H-3)。
制備例7930-羥基-齊墩果烷-2，9(11)，12-三烯(VIId)的制備，C30H46O，MSESI m/e 422(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯1/1)0.68，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.49(d，1H，J＝10.8Hz，H-30)，3.62(d，1H，J＝10.8Hz，H-30’)，5.35-5.47(m，2H，H-2，H-3)，5.60(d，1H，J＝5.6Hz，H-12)，5.63(d，1H，J＝5.6Hz，H-11)。
本發(fā)明的式(1)化合物中，當(dāng)R7為甲基，R1，R2和R5是氫原子，2，3位之間和12，13位之間為雙鍵時(shí)，是一類優(yōu)選的式(VIII)化合物
其中R3，R4和R8與式(1)化合物的定義相同。
優(yōu)選R3，R4分別選自氫，含1～8個(gè)碳原子的酰氧基，含1～8個(gè)碳原子的磺酰氧基，鹵素，氨基，硝基，氰基，羥基，羰基；R8選自-CH3，-COOH，-CH2OH，-COOR9，-CONH2，-CONHR9，-CON(R9)2，其中R9是含1～8個(gè)碳原子的烷基，取代或未取代的苯基，取代或未取代的苯烷基。
本發(fā)明更優(yōu)選的式(VIII)化合物及其可藥用鹽或溶劑化物是 齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(VIIIa)； 11-羥基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(VIIIb)； 1-乙酰氧基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(VIIIc)； 1-羥基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(VIIId)； 1，11-二羥基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(VIIIe)； 齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯(VIIIf)； 11-羥基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯(VIIIg)； 1-乙酰氧基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯(VIIIh)； 1-羥基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯(VIIIi)； 1，11-二羥基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯(VIIIj)。
該類化合物的制備過程具體如下 化合物3β-羥基-11-羰基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-12-烯按文獻(xiàn)方法生成11-脫氧甘草次酸甲酯，再按前述的脫羥基方法得到化合物VIIIf，在水解得到化合物VIIIa?；衔颲IIIb、VIIIg、VIIIe、VIIIJ分別由化合物11-羰基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯、11-羰齊-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯、1，11-二羰基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯、1，11-二羰基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯通過硼氫化鈉還原得到?；衔颲IIIc、VIIIh分別由化合物VIIIa、VIIIf與二氧化硒反應(yīng)得到，再堿性水解得到化合物VIIId、VIIIi。
合成路線如下 合成路線18
合成路線19
R3＝H，R＝H R3＝H，R＝HVIIIb R3＝H，R＝CH3 R3＝H，R＝CH3 VIIIg R3＝Oxo，R＝H R3＝Oxo，R＝H VIIIe R3＝Oxo，R＝CH3 R3＝Oxo，R＝CH3VIIIj 合成路線20
R＝H VIIIa R＝H VIIIcR＝HVIIId R＝CH3 VIIIf R＝CH3 VIIIhR＝CH3 VIIIi 制備例80化合物VIIIb的制備 將化合物11-羰基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(1.0mmol)溶于10毫升甲醇中，0℃下加入硼氫化鈉(4.0mmol)，室溫下攪拌6～7小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，加入1M鹽酸酸化，脫去大部分甲醇，加入乙酸乙酯10毫升和水10毫升，分層后，水層再以乙酸乙酯10毫升萃取兩次。合并有機(jī)相，水洗至中性，無水硫酸鈉干燥。硅膠柱層析(洗脫液石油醚/乙酸乙酯/3/1)，得到白色固體VIIIb，產(chǎn)率69％。
根據(jù)制備例80法制備以下所示制備例81至制備例90化合物 制備例81齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(VIIIa)的制備，C30H46O2，MSESI m/e 438(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯1/1)0.60，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.31-5.43(m，3H，H-2，H-3，H-12)。
制備例8211-羥基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(VIIIb)的制備，C30H46O3，MSESI m/e 454(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.45，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.01(brs，1H，H-11)，5.36-5.44(m，2H，H-2，H-3)，5.66(brs，1H，H-12)。
制備例831-乙酰氧基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(VIIIc)的制備，C32H48O4，MSESI m/e 496(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.55，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.74(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，5.27(brs，1H，H-12)，5.60(d，1H，J＝9.6Hz，H-3)，5.66(m，1H，H-2)。
制備例841-羥基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(VIIId)的制備，C30H46O3，MSESI m/e 454(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.37，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.55(d，1H，J＝5.6Hz，H-1)，5.32(brs，1H，H-12)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)。
制備例851，11-二羥基-齊墩果烷-30-酸-2，12-二烯(VIIIe)的制備，C30H46O4，MSESI m/e 470(M+)；Rf(石油醚/氯仿/甲醇4/4/0.6)0.33，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.98(brs，1H，H-11)，5.66(brs，1H，H-12)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)。
制備例86齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯(VIIIf)的制備，C31H48O2，MSESI m/e 452(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯6/1)0.72，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.68(s，3H，OCH3)，5.31-5.43(m，3H，H-2，H-3，H-12)。
制備例8711-羥基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯(VIIIg)的制備，C31H48O3，MSESI m/e468(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯6/1)0.48，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.66(s，3H，OCH3)，4.01(brs，1H，H-11)，5.36-5.44(m，2H，H-2，H-3)，5.66(brs，1H，H-12)。
制備例881-乙酰氧基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯(VIIIh)的制備，C33H50O4，MSESIm/e 510(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯6/1)0.63，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.67(s，3H，OCH3)，4.01(brs，1H，H-11)，5.36-5.44(m，2H，H-2，H-3)，5.66(brs，1H，H-12)。
制備例891-羥基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯(VIIIi)的制備，C31H48O3，MSESI m/e468(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯6/1)0.45，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.55(d，1H，J＝6.0Hz，H-1)，3.68(s，3H，OCH3)，5.32(brs，1H，H-12)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)。
制備例901，11-二羥基-齊墩果烷-30-羧酸甲酯-2，12-二烯(VIIIj)的制備，C31H48O4，MSESIm/e 484(M+)；Rf(石油醚/乙酸乙酯6/1)0.39，1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.67(s，3H，OCH3)，3.98(brs，1H，H-11)，5.66(brs，1H，H-12)，5.53(d，1H，J＝10.0Hz，H-3)，5.73(m，1H，H-2)。
式(1)化合物具有重要的生物活性，體外對六株腫瘤細(xì)胞包括人前列腺癌細(xì)胞(PC-3)，鼻咽癌細(xì)胞(CNE)，(口腔上皮癌細(xì)胞株(KB)，人肺癌細(xì)胞(A549)，人肝癌細(xì)胞(BEL-7404)，人子宮頸癌細(xì)胞(Hela)的細(xì)胞毒活性試驗(yàn)表明此類多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物(具體見實(shí)施例)對腫瘤細(xì)胞生長具有抑制作用，有可能發(fā)展成為新的防治腫瘤藥物。此外，此類多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物(具體見實(shí)施例)顯示出明顯抑制二甲苯致小鼠耳腫脹的活性，有可能發(fā)展成為新的非甾體抗炎藥物。
本發(fā)明的式(1)化合物或其可藥用鹽及其溶劑化物可以與藥學(xué)上常用的輻料或載體結(jié)合，制備得到具有腫瘤細(xì)胞生長抑制活性從而可以用于防治腫瘤的藥物組合物。上述各類藥物組合物可以采用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物。
本發(fā)明的式(1)化合物或其可藥用鹽及其溶劑化物可以與藥學(xué)上常用的輻料或載體結(jié)合，制備得到具有抑制二甲苯致小鼠耳腫脹活性從而可以用于治療炎癥的藥物組合物。上述各類藥物組合物可以采用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物。
本發(fā)明的式(1)化合物或其可藥用鹽及其溶劑化物可以與現(xiàn)已上市的抗腫瘤藥物如鉑類藥物順鉑(DDP)、喜樹堿類藥物伊立替康(Irinatecan、CPT-11)、長春花堿類藥物失碳長春花堿(Vinorebine，NVB諾維本)、脫氧胞昔類藥物吉西他濱(Gemcitabine，Gemzar，健擇)、足葉乙甙(Etoposide)、紫杉醇(Paclitaxel)等聯(lián)合使用，制備得到具有腫瘤生長抑制活性的細(xì)胞毒性組合物，可用于治療腫瘤疾病。該類藥物組合物可以采用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物。
本發(fā)明的式(1)化合物或其可藥用鹽及其溶劑化物可以與現(xiàn)已上市的非甾體抗炎藥物或者甾體抗炎藥物如吲哚美辛(Indometacin)、布洛芬(Ibuprofen)、保泰松(Phenylbutazone)、羥基保泰松、安乃近(MetamizoleSodium)、萘普生(Naproxen)、氯芬那酸(Clofenamic acid)等聯(lián)合使用，制備得到具有抗炎消炎活性的組合物?？捎糜谥委熝装Y疾病。該類藥物組合物可以采用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物。
為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面分別用化合物對六種腫瘤細(xì)胞株生長的抑制作用的藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及抑制二甲苯致小鼠耳腫脹試驗(yàn)的結(jié)果，說明其在制藥領(lǐng)域中的新用途。實(shí)施例給出了代表性化合物的部分活性數(shù)據(jù)。必須說明，本發(fā)明的制備例和實(shí)施例是用于說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)對本發(fā)明進(jìn)行的簡單改進(jìn)都屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
藥理實(shí)施例1化合物IVa對KB細(xì)胞的細(xì)胞毒活性 KB(口腔上皮癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法。細(xì)胞經(jīng)過24小時(shí)的孵育后，分別將新配的化合物VIa的二甲亞砜溶液以濃度梯度加入到各孔中，使孔中化合物最終濃度分別為100μg/ml，33.3μg/mL，11.1μg/mL和3.7μg/mL。72小時(shí)后，加10μL MTT(5mg/mL)的磷酸鹽緩沖液，再繼續(xù)在37℃培養(yǎng)4小時(shí)后，離心5分鐘除去未轉(zhuǎn)化的MTT，每孔中加入200μL二甲亞砜。以溶解還原的MTT晶體甲臜(formazan)，所形成的formazan用酶標(biāo)儀在570nm波長下比色，細(xì)胞存活率由樣品相對于對照品的比值計(jì)算。其中化合物IVa對KB細(xì)胞半抑制濃度(IC50)由劑量效應(yīng)曲線得到。
化合物IVa的IC50為3.2×10-5M 實(shí)驗(yàn)結(jié)論KB細(xì)胞是測試化合物對腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性的有效工具和評價(jià)指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)表明此類具有多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物，對KB細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
根據(jù)藥理實(shí)施例1的方法，我們測試了所制備化合物對KB細(xì)胞的藥理活性，具體數(shù)據(jù)見表一。
表一 藥理實(shí)施例2化合物Vf對PC-3細(xì)胞的細(xì)胞毒活性 PC-3(前列腺癌)細(xì)胞用F-12培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法如實(shí)施例1。
化合物Vf的IC50為7.6×10-6M 實(shí)驗(yàn)結(jié)論本實(shí)驗(yàn)表明此類具有多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物對PC-3細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
根據(jù)藥理實(shí)施例2的方法，我們測試了所制備化合物對PC-3細(xì)胞的藥理活性，具體數(shù)據(jù)見表二 表二 藥理實(shí)施例3化合物IVa對CNE細(xì)胞的細(xì)胞毒活性 CNE(鼻咽癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。以每孔5×103細(xì)胞的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法如實(shí)施例1。
化合物IVa的IC50為1.99×10-5M 實(shí)驗(yàn)結(jié)論本實(shí)驗(yàn)表明此類具有多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物對CNE細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
根據(jù)藥理實(shí)施例3的方法，我們測試了所制備化合物對CNE細(xì)胞的藥理活性，具體數(shù)據(jù)見表三。
表三 藥理實(shí)施例4化合物Ik對A549細(xì)胞的細(xì)胞毒活性 A549(人肺癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)中培養(yǎng)24小時(shí)。
細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法如實(shí)施例1。
化合物Ik的IC50為3.1×1-6M 實(shí)驗(yàn)結(jié)論本實(shí)驗(yàn)表明此類具有多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物對A549細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
根據(jù)藥理實(shí)施例4的方法，我們測試了所制備化合物對A549細(xì)胞的藥理活性，具體數(shù)據(jù)以幾個(gè)實(shí)施例為例(見表四)。
表四 藥理實(shí)施例5化合物IVa對BEL-7404細(xì)胞的細(xì)胞毒活性 BEL-7404(人肝癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法如實(shí)施例1。
化合物IVa的IC50為3.7×10-5M 實(shí)驗(yàn)結(jié)論本實(shí)驗(yàn)表明此類具有多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物對BEL-7404細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
根據(jù)藥理實(shí)施例5的方法，我們測試了所制備化合物對BEL-7404細(xì)胞的藥理活性，具體數(shù)據(jù)見表五。
表五 藥理實(shí)施例6化合物IVf對Hela細(xì)胞的細(xì)胞毒活性 Hela(人子宮頸癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法如實(shí)施例1。
化合物IVf的IC50為1.7×10-5M 實(shí)驗(yàn)結(jié)論本實(shí)驗(yàn)表明此類具有具有多氧化取代的五環(huán)三萜類衍生物及其中間體系列化合物對Hela細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
根據(jù)藥理實(shí)施例6的方法，我們測試了所制備化合物對Hela細(xì)胞的藥理活性，具體數(shù)據(jù)見表六。
表六 藥理實(shí)施例7化合物IVf對二甲苯致炎小鼠耳腫脹的抑制作用 材料與方法 一、目的 在相同劑量下平行比較化合物IVf的抗炎活性強(qiáng)弱。
二、模型二甲苯致小鼠耳廓腫脹模型 1、動(dòng)物ICR小鼠，21±2g，全雄。
2、致炎劑二甲苯 3、陽性藥物醋酸地塞米松(DEX)片劑生理鹽水溶液。仙琚藥業(yè)出品，批號2002032206。
三、分組(64只小鼠，8只/組。) 1、生理鹽水組NS 2、DMSO組DMSO， 3、陽性藥物組DEX，5mg/kg，(ig) 4、化合物IVf大劑量組Il-H，80mg/kg，，(ig) 5、化合物IVf中劑量組Il-M，40mg/kg，(ig) 6、化合物IVf小劑量組Il-L，20mg/kg，(ig) 四、方法與步驟 動(dòng)物分組、編號及稱量。
各組小鼠按相應(yīng)劑量灌胃給藥3天，1次/天。末次給藥后45分鐘，用30μl二甲苯在小鼠右耳廓復(fù)制局部炎癥，左耳作對照。致炎后30分鐘，小鼠頸椎脫臼處死，剪下左右耳廓，用直徑9mm的打孔器沖下左右耳片，稱重。用同一小鼠左右耳片的重量差表示“腫脹度”，統(tǒng)計(jì)比較陽性組和試藥組與生理鹽水組小鼠耳廓腫脹度的差異是否顯著。
表七 *表示差異顯著(p＜0.05)；**表示差異非常顯著(p＜0.01)；***表示差異極顯著(p＜0.001)。
試驗(yàn)結(jié)果表明ICR小鼠灌胃化合物IVf高劑量、中劑量和低劑量對二甲苯致耳廓腫脹抑制率分別為56％，42％和34％，與空白組比較有顯著性差異。說明化合物IVf對急性炎癥模型有顯著的抑制作用。
為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面分別用該類化合物的各種藥物劑型實(shí)例如片劑、膠囊劑、注射劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑和軟膏劑的制備方法，說明其在制藥領(lǐng)域中的新應(yīng)用。
制劑實(shí)施例1片劑 用含有權(quán)利要求1和權(quán)利要求2中化合物(以化合物If為例)2000mg，按照藥劑學(xué)一般壓片法混勻后加輻料8000mg，壓制成100片，每片重100mg。
制劑實(shí)施例2膠囊劑 用含有權(quán)利要求1和權(quán)利要求2中化合物(以化合物If為例)2000mg，按照藥劑學(xué)膠囊劑的要求將8000mg輻料混勻后，裝入空心膠囊，每個(gè)膠囊重100mg。
制劑實(shí)施例3注射劑 用含有權(quán)利要求1和權(quán)利要求2中化合物(以化合物If為例)2000mg，按照常規(guī)藥劑學(xué)方法，進(jìn)行活性炭吸附，經(jīng)0.65μ微孔濾膜過濾后，填入氮?dú)夤拗瞥伤樦苿Ｃ恐会槃┕扪b2ml，共罐裝1000瓶。
制劑實(shí)施例4氣霧劑 用含有權(quán)利要求1和權(quán)利要求2中化合物(以化合物If為例)2000mg，用適量丙二醇溶解后，加入蒸餾水及其他輻料后，制成200ml的澄清溶液即得。
制劑實(shí)施例5栓劑 用含有權(quán)利要求1和權(quán)利要求2中化合物(以化合物If為例)2000mg，將之研細(xì)加入甘油適量，研勻后加入已熔化的甘油明膠，研磨均勻，傾入已涂潤滑劑的模型中，制得化合物If栓20顆。
制劑實(shí)施例6膜劑 用含有權(quán)利要求1和權(quán)利要求2中化合物(以化合物If為例)2000mg，將聚乙烯醇、藥用甘油、水等攪拌膨脹后加熱溶解，80目篩網(wǎng)過濾，再將化合物If加入到濾液中攪拌溶解，涂膜機(jī)制膜200片。
制劑實(shí)施例7滴丸劑 用含有權(quán)利要求1和權(quán)利要求2中化合物(以化合物If為例)2000mg，與明膠等基質(zhì)700mg加熱溶化混勻后，滴入低溫液體石蠟中，共制得滴丸100丸。
制劑實(shí)施例8外用搽劑 用含有權(quán)利要求1和權(quán)利要求2中化合物(以化合物If為例)2g，按照常規(guī)藥劑學(xué)方法，與乳化劑等輻料0.5g混合研磨，再加蒸餾水至50ml制成。
制劑實(shí)施例9軟膏劑 用含有權(quán)利要求1和權(quán)利要求2中化合物(以化合物If為例)2000mg，研細(xì)后與凡士林等油性基質(zhì)198g研勻即得。
權(quán)利要求
1. 一種含多個(gè)不飽和雙鍵的齊墩果烷三萜類化合物，具有式(I)所示的結(jié)構(gòu)通式，其特征是所述化合物含其可藥用鹽或溶劑化物，
其中2，3位之間是雙鍵；11，12位之間、12，13位之間、和/或13，18位之間是碳碳單鍵或者雙鍵；R1、R2、R5和R6是氫原子；R8是甲基；
R7選自-CH3、-COOH、-CH2OH、-COOR9、-CONH2、-CONHR9或-CON(R9)2；
R9選自含1～8個(gè)碳原子的烷基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的苯烷基中的一種；
R3，R4分別選自氫、含1～8個(gè)碳原子的酰氧基、含1～8個(gè)碳原子的磺酰氧基、鹵素、氨基、硝基、氰基、羥基或羰基；
當(dāng)2，3位之間是雙鍵，12，13位之間是雙鍵，9，11位之間是單鍵時(shí)，R3和R4之間不能同時(shí)是氫。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含多個(gè)不飽和雙鍵的齊墩果烷三萜類化合物，其特征是所述化合物是
Ia.齊墩果烷-28-酸-2，11，13(18)-三烯；
Ib.齊墩果烷-28-酸-2，9(11)，12-三烯；
Ic.齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，11，13(18)-三烯；
Id.齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，9(11)，12-三烯；
Ie.28-羥基-齊墩果烷-2，11，13(18)-三烯；
If.28-羥基-齊墩果烷-2，9(11)，12-三烯；
Ig.11-羥基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯；
Ih.11-溴-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯；
Ii.1，11-二羥基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯；
Ij.1-羥基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯；
Ik.1-乙酰氧基-齊墩果烷-28-酸-2，12-二烯；
Il.11-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯；
Im.11-溴-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯；
In.1，11-二羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯；
Io.1-羥基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯；
Ip.1-乙酰氧基-齊墩果烷-28-羧酸甲酯-2，12-二烯；
Iq.11，28-二羥基-齊墩果烷-2，12-二烯；
Ir.11-溴-28-羥基-齊墩果烷-2，12-二烯；
Is.1，11，28-三羥基-齊墩果烷-2，12-二烯；
It.1，28-二羥基-齊墩果烷-2，12-二烯；
Iu.1-乙酰氧基-28-羥基-齊墩果烷-2，12-二烯。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的含多個(gè)不飽和雙鍵的齊墩果烷三萜類化合物及其可藥用鹽或溶劑化物在制備防治腫瘤疾病藥物中的應(yīng)用。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的含多個(gè)不飽和雙鍵的齊墩果烷三萜類化合物及其可藥用鹽或溶劑化物在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的應(yīng)用，其特征是所述藥物的制劑形式為片劑、膠囊劑、注射劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑或軟膏劑。
全文摘要
本發(fā)明一種含多個(gè)不飽和雙鍵的齊墩果烷三萜類化合物及其可藥用鹽或溶劑化物，具有式(1)所示的結(jié)構(gòu)通式。本發(fā)明的化合物具有一定的抑制腫瘤細(xì)胞生長活性，可在制備防治腫瘤疾病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明化合物對二甲苯致小鼠耳腫脹有顯著的抑制作用，可在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明式(1)所示的結(jié)構(gòu)通式。
文檔編號A61K31/56GK101240007SQ20071019895
公開日2008年8月13日 申請日期2004年12月29日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月29日
發(fā)明者昱 趙, 馮菊紅, 周長新, 驊 白, 巫秀美 申請人:浙江大學(xué)