專利名稱：：一種葛根芩連提取物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體涉及中藥復(fù)方提取物，特別是葛根芩連提取物。
背景技術(shù)：
：葛根芩連湯出自《傷寒論.太陽篇》，為醫(yī)圣張仲景名方，由葛根24g、黃芩9g、黃連9g、甘草6g水煎而成，有解表清里，升清止利之功效，主要用于治療"協(xié)熱下利"癥，對(duì)菌痢、急性腸炎及小兒病毒性腹瀉等有良好療效。2005版藥典收載該方的制劑有葛根芩連片、微丸，但這些制劑直接以原藥材粉末或藥材的粗提取物、浸膏等制成，提取工藝簡(jiǎn)單，方中各有效成分含量低，質(zhì)量難以控制，不能保證療效穩(wěn)定。國(guó)知局2006年10月25日公開了一項(xiàng)"葛根芩連湯的制備方法"的發(fā)明專利申請(qǐng)(申請(qǐng)?zhí)枮?00610038718.5)，該申請(qǐng)公開了一種制備葛根芩連湯的方法，該方法具體是以水為溶劑，將葛根、黃零、甘草合煎、黃連單煎，噴霧干燥后按比例混合，即可。用該方法制備葛根芩連湯，藥材中的葛根素、黃芩苷和小檗堿的轉(zhuǎn)移率達(dá)到65%以上，但是該方法對(duì)藥材仍采用粗提方法，所得提取物中含有較多雜質(zhì)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種有效成分含量高的葛根芩連提取物，以便于控制產(chǎn)品質(zhì)量，保證療效穩(wěn)定。本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案是一種葛根芩連藥物提取物，該提取物中含有以下重量百分比的主要活性物質(zhì)葛根總異黃酮13.521.0%，黃芩總黃酮20.532.5%，黃連總生物堿10.518.5%，甘草酸2.05.0%;所述的提取物由下列方法制得(1)按葛根黃芩黃連甘草=8:3:3:2的重量比取原料藥混合，力B612倍水煎煮0.51.5h，過濾，濾渣中再加入410倍水煎煮0.51.5h，過濾，合并兩次濾液，濃縮至原體積的1/41/3，加濃鹽酸調(diào)pHl-2，靜置1224h，分離沉淀物和上清液；取沉淀物水洗至pH56備用；上清液調(diào)pH56，濃縮至密度為1.101.20，加乙醇至含醇量為6575%，過濾，濾液濃縮至藥材重量的1/31/2，得濃縮液備用。(2)取濃縮液通過大孔樹脂柱，其中樹脂用量為藥材用量的1.33.0倍；先以46倍柱體積去離子水洗脫，再以35倍樹脂體積的40%70%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，浸膏與步驟(1)所得的沉淀物混合，烘干即得。本發(fā)明所述的葛根芩連提取物，該提取物的制備方法由下列步驟組成(1)按葛根黃芩黃連甘草=8:3:3:2的重量比取原料藥混合，力口6i2倍水煎煮0.51.5h，濾過，濾渣中再加入410倍水煎煮0.51.5h，濾過，合并兩次濾液，濃縮至原體積的1/41/3，加濃鹽酸調(diào)pH12，靜置1224h，分離沉淀物和上清液；取沉淀物水洗至pH56備用；上清液調(diào)pH56，濃縮至密度為U01.20，加乙醇至含醇量為6575%，過濾，濾液濃縮至藥材重量的1/31/2，得濃縮液備用。(2)取濃縮液通過大孔樹脂柱，其中樹脂用量為藥材用量的1.33.0倍；先以46倍柱體積去離子水洗脫，再以35倍樹脂體積的40%70%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，浸膏與步驟(1)所得的沉淀混合，烘干即可。本發(fā)明所述的提取物中主要有效部位的含量測(cè)定方法如下所述1、黃連總生物堿對(duì)照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，精密稱定，加乙醇制成每lml含lOng的溶液。供試品溶液的制備精密稱取提取物0.3g，置于100ml容量瓶中，加乙醇適量，70'C水浴10min，超聲30min,放至室溫，加乙醇稀釋至100ml，搖勻，濾過，取續(xù)濾液lml，置于中性氧化鋁柱(內(nèi)徑約7mm，長(zhǎng)120mm，4g氧化鋁)上，以25ml乙醇洗脫，收集洗脫液，乙醇定容至25ml。測(cè)定法用紫外分光光度法，以乙醇為空白，測(cè)定對(duì)照品溶液和供試品溶液在350nm處吸光度，根據(jù)吸光度計(jì)算黃連總生物堿的含量。2、葛根總異黃酮對(duì)照品溶液的制備取葛根素對(duì)照品適量，精密稱定，加乙醇制成每lml含10ug的溶液。供試品溶液的制備精密稱取提取物O.lg，置于100ml容量瓶中，加乙醇適量，7(TC水浴10min，超聲30min,放至室溫，加乙醇稀釋至100ml，搖勻，濾過，取續(xù)濾液lml，置于中性氧化鋁柱(內(nèi)徑約7mm，長(zhǎng)120mm，4g氧化鋁)上，先以25ml乙醇洗脫，再用35ml水飽和正丁醇洗脫，收集正丁醇洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖既芙猓ㄈ葜?5ml。測(cè)定法用紫外分光光度法，以乙醇為空白，測(cè)定對(duì)照品溶液和供試品溶液在250nm處吸光度，根據(jù)吸光度計(jì)算葛根總異黃酮的含量。3、黃芩總黃酮對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含10ng的溶液。供試品溶液的制備精密稱取提取物0.02g，置于100ml容量瓶中，加甲醇適量，70'C水浴10min，超聲30min，放至室溫，加甲醇稀釋至100ml，搖勻，濾過，取續(xù)濾液5ml至50ml容量瓶中，加甲醇定容，搖勻。測(cè)定法采用差示紫外分光光度法。取供試品溶液2ml兩份，置于甲、乙兩個(gè)25ml容量瓶中，甲瓶中精密加入5WALCL3甲醇溶液10ml，搖勻，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，放置30min;乙瓶加甲醇溶液稀釋至刻度；甲瓶溶液以5%ALCL3甲醇溶液為空白溶液，乙瓶溶液以甲醇為空白溶液測(cè)定339nm處吸光度，計(jì)算甲乙兩瓶溶液的吸光度之差，同時(shí)同法測(cè)定對(duì)照品溶液的吸光度之差，根據(jù)樣品及對(duì)照品吸光度之差計(jì)算黃零總黃酮的含量。4、甘草酸色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以甲醇0.02mol/L乙酸銨冰醋酸(66:33:l)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)254nm;理論塔板數(shù)按甘草酸銨峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備取甘草酸銨對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含50嗎的溶液。供試品溶液的制備精密取提取物1.0g,置于100ml容量瓶中，加甲醇適量，7(TC水浴l(kin，超聲30min，放至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。測(cè)定法分別精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各l(Hil，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算。本發(fā)明提取物加入藥用輔料，采用常規(guī)的方法可制備出治療菌痢、急性腸炎及小兒病毒性腹瀉的各種口服制劑。根據(jù)不同制劑的要求，添加不同的藥用輔料可制備成普通片劑、分散片、膠囊劑、顆粒劑、微丸、軟膠囊。本發(fā)明提取物的原料配方雖然出自傳統(tǒng)方藥葛根芩連湯，但是將粗提物的有效部位再進(jìn)一步純化，所得到的有效部位——葛根總異黃酮、黃芩總黃酮、黃連總生物堿、甘草酸的含量顯著提高、藥品質(zhì)量及療效均穩(wěn)定。下面將通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來證明本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)，以下實(shí)驗(yàn)中所用到的本發(fā)明提取物均為制備例2所述的提取物。l.抗腹瀉試驗(yàn)取SPF級(jí)昆明小鼠，18-22克，雌雄各半，隨機(jī)分5組模型對(duì)照組(空白對(duì)照組)、黃連素(陽性對(duì)照組)、葛根芩連微丸對(duì)照組(每克微丸相當(dāng)于7克藥材，由廣西花紅藥業(yè)有限公司生產(chǎn))、本發(fā)明提取物取制備例2所述的提取物(每克提取物相當(dāng)13.5克藥材)。動(dòng)物禁食不禁水12小時(shí)后，各組灌胃蓖麻油0.1ml/10g，0.5h后灌胃給藥。將動(dòng)物扣在小鼠籠蓋上的燒杯下，內(nèi)墊有濾紙.連續(xù)觀察3小時(shí)，按周干南的方法，統(tǒng)計(jì)每只小鼠的總便數(shù)、稀便數(shù)。并按照周氏法計(jì)算腹瀉指數(shù)(DI):稀便率與稀便級(jí)的乘積。稀便級(jí)的標(biāo)準(zhǔn)如下-級(jí)數(shù)1234污跡直徑<lcm1-1.9cm2-3cm>3cm統(tǒng)計(jì)指標(biāo)的確定糞便次數(shù)以每?；蛎慷?不能分清粒數(shù)者一次)。干便與稀便的區(qū)分以濾紙上有無污跡為標(biāo)準(zhǔn)。級(jí)數(shù)直徑的測(cè)量圓形者測(cè)其直徑，橢圓形或不規(guī)則形測(cè)其最長(zhǎng)和近似圓的直徑，兩者取平均數(shù)。以腹瀉指數(shù)為考察指標(biāo)，統(tǒng)計(jì)方法按照SPSS11.0軟件處理，采用重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)的方差分析。表1本發(fā)明提取物對(duì)動(dòng)物腹瀉指數(shù)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注:*，與模型相比，PO.Ol，1，與模型相比，PO.05.結(jié)論給藥1小時(shí)后，黃連素組、微丸組、本發(fā)明提取物組腹瀉指數(shù)與模型組相比，差異有顯著性意義，說明本發(fā)明提取物能夠降低腹瀉動(dòng)物的腹瀉指數(shù)。給藥2小時(shí)后黃連素組、微丸組、本發(fā)明提取物組腹瀉指數(shù)與模型組相比，差異有顯著性意義，說明本發(fā)明提取物能夠降低腹瀉動(dòng)物的腹瀉指數(shù)。給藥3小時(shí)后微丸組的腹瀉指數(shù)與模型組相比則差異無顯著性意義。說明給藥3小時(shí)后微丸不能減少腹瀉動(dòng)物的腹瀉指數(shù)。而黃連素組、本發(fā)明提取物組腹瀉指數(shù)與模型組相比，差異有顯著性意義，說明本發(fā)明提取物3小時(shí)后還能夠降低腹瀉動(dòng)物的腹瀉指數(shù)。2.小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)18-22g的SPF昆明小鼠，18-22克，雌雄各半，隨機(jī)分為5組正常對(duì)照組、復(fù)方地芬諾酯陽性對(duì)照組、葛根芩連微丸對(duì)照組、本發(fā)明提取物組(藥材服用量與微丸相等)。動(dòng)物禁食不禁水12小時(shí)后，各組均灌胃給藥1次，給藥后lh每只動(dòng)物灌胃4%活性炭羧甲基纖維素0.2ml/只，20分鐘后脫頸椎處死，開腹分離腸系膜，剪取上端至幽門下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將腸管拉直，用水沖洗。測(cè)量總長(zhǎng)度，將幽門至活性炭前沿的距離作為活性炭在小腸內(nèi)推進(jìn)距離，按照推進(jìn)率=小腸推進(jìn)距離/小腸總長(zhǎng)度計(jì)算。以推進(jìn)率為指標(biāo)考察，統(tǒng)計(jì)方法按照SPSS11.0軟件處理，采用單因素方差分析方法。表2本發(fā)明提取物對(duì)正常動(dòng)物小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注:*，與模型相比，PO.01.結(jié)論復(fù)方地芬諾酯組、葛根芩連微丸組、本發(fā)明提取物組的小腸推進(jìn)率與正常組相比差異有顯著性意義，說明本發(fā)明提取物能夠減少正常動(dòng)物小腸的推進(jìn)率。3.對(duì)新斯的明引起小鼠腸功能推進(jìn)亢進(jìn)的影響18-22g的SPF昆明小鼠，18-22克，雌雄各半，隨機(jī)分為6組正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、復(fù)方地芬諾酯陽性對(duì)照組、葛根芩連微丸對(duì)照組、本發(fā)明提取物組(藥材服用量與微丸相等)。動(dòng)物禁食不禁水12小時(shí)后，各組均灌胃給藥l次，各組動(dòng)物均皮下注射甲硫酸新斯的名0.15mg/kg,15分鐘后，每只動(dòng)物灌胃4n/。活性炭羧甲基纖維素0.2ml/只，20分鐘后脫頸椎處死，開腹分離腸系膜，剪取上端至幽門下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將腸管拉直，用水沖洗。測(cè)量總長(zhǎng)度，將幽門至活性炭前沿的距離作為活性炭在小腸內(nèi)推進(jìn)距離，按照推進(jìn)率=小腸推進(jìn)距離/小腸總長(zhǎng)度計(jì)算。以推進(jìn)率為指標(biāo)考察，統(tǒng)計(jì)方法按照SPSS11.0軟件處理，采用單因素方差分析方法。表3本發(fā)明提取物對(duì)新斯的明引起小鼠腸功能推進(jìn)亢進(jìn)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注:*，與模型相比，PO.01.結(jié)論復(fù)方地芬諾酯組、葛根芩連微丸組、本發(fā)明提取物組小腸推進(jìn)率與模型組相比差異有顯著性意義，說明本發(fā)明提取物能夠抑制新斯的明造成的小腸推進(jìn)功能亢進(jìn)，減少動(dòng)物小腸的推進(jìn)率。4.解熱實(shí)驗(yàn)SPF大鼠，140-160克，雌。實(shí)驗(yàn)前測(cè)量大鼠肛溫，取溫度范圍在36.8-38.3之間的動(dòng)物，然后除正常對(duì)照組外在其余各組動(dòng)物頸部以下的背部皮下注射15%的啤酒酵母生理鹽水溶液10ml/kg，正常對(duì)照組注射同體積生理鹽水。并且按摩注射部位以利充分吸收。室溫保持在22-24'C，注射后即禁食。18小時(shí)后再次測(cè)量動(dòng)物的肛溫，體溫低于38'C的不能用于實(shí)驗(yàn)。然后隨機(jī)分為6組模型對(duì)照組、安乃近陽性組、葛根芩連微丸對(duì)照組、本發(fā)明提取物組(藥材服用量與微丸相等)。并灌胃給藥，給藥1小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)、4小時(shí)分別測(cè)量動(dòng)物肛溫。以各組動(dòng)物給藥前后的溫度差為指標(biāo)考察，統(tǒng)計(jì)方法按照SPSS11.0軟件處理，采用重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)的方差分析。表4本發(fā)明提取物對(duì)發(fā)熱動(dòng)物的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注*,與模型相比，P<0.01.結(jié)論給藥1小時(shí)后，安乃近組、微丸組、本發(fā)明提取物組動(dòng)物體溫升高的度數(shù)與模型組相比有減少的趨勢(shì)，但是差異沒有顯著性意義。正常組動(dòng)物體溫的變化與模型組相比差異有顯著性意義，說明造模成功。給藥2小時(shí)后，安乃近組、微丸組、本發(fā)明提取物組動(dòng)物體溫升高的度數(shù)與模型組相比減少，差異有顯著性意義。給藥3小時(shí)后，安乃近組、微丸組、本發(fā)明提取物組動(dòng)物體溫升高的度數(shù)與模型組相比減少，差異有顯著性意義。給藥4小時(shí)后，安乃近組、微丸組、本發(fā)明提取物組動(dòng)物體溫升高的度數(shù)與模型組相比減少，差異有顯著性意義。說明本發(fā)明提取物組能夠降低發(fā)熱大鼠的體溫。上述動(dòng)物實(shí)驗(yàn)說明本發(fā)明所述提取物能有效減少動(dòng)物腹瀉、小腸推進(jìn)，并具有控制體溫升高以及退熱的作用。具體實(shí)施方式制備例例l取葛根2.4Kg，黃芩0.9Kg，黃連0.9Kg,甘草0.6Kg，以6倍量、4倍量水煎煮兩次，每次0.5小時(shí)，濾過，合并濾液，濃縮至l/4原體積，加濃鹽酸調(diào)pH12，靜置12h，分離沉淀物和上清液；取沉淀用水洗至pH56;取上清液調(diào)至pH56，濃縮至密度為1.10，加乙醇至含醇量為65%，過濾，濾液濃縮至1.6Kg，上大孔樹脂柱(大孔樹脂用量為6.2Kg)，先以4倍柱體積去離子水洗脫，再以3倍樹脂體積的40%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，浸膏與上述沉淀混合，烘干，得總提取物約238g，其中含葛根總異黃酮13.5%，黃芩總黃酮20.5%;黃連總生物堿10.5%，甘草酸2.0%。例2取葛根2.4Kg，黃苳0.9Kg，黃連0.9Kg，甘草0.6Kg，以10倍量、8倍量水煎煮兩次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濃縮至1/3原體積，加濃鹽酸調(diào)pH12，靜置18h后分離沉淀和上清液；取沉淀水洗至pH56備用；取上清液調(diào)pH56，濃縮至密度為1.15，加乙醇至含醇量為70%，過濾，濾液濃縮至2.0Kg,上大孔樹脂柱(大孔樹脂用量為9.6Kg)，先以5倍柱體積去離子水洗脫，再以4倍樹脂體積的50%乙醇洗脫，收集乙醉洗脫液，減壓回收溶劑，浸膏與上述沉淀混合，烘干，得總提取物約354g，其中含葛根總異黃酮17.0%，黃芩總.黃酮25.6%;黃連總生物堿14.5%，甘草酸3.6%。例3取葛根2.4Kg，黃芩0.9Kg，黃連0.9Kg，甘草0.6Kg，以12倍量、10倍量水煎煮兩次，每次1.5小時(shí)，濾過，合并濾液，濃縮至l/3原體積，加濃鹽酸調(diào)pH12，靜置24h后分離沉淀和上清液；取沉淀水洗至pH56備用；取上清液調(diào)pH56，濃縮至密度為1.20，加乙醇至含醇量為75%，過濾，濾液濃縮至2.4Kg，上大孔樹脂柱(大孔樹脂用量為14.4Kg)，先以6倍柱體積去離子水洗脫，再以5倍樹脂體積的70%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，浸膏與上述沉淀混合，烘干，得總提取物約542g,其中含葛根總異黃酮21.0%，黃芩總黃酮32.5%;黃連總生物堿18.5%，甘草酸5.0%。例4取葛根2.4Kg，黃苳0.9Kg，黃連0.9Kg，甘草0.6Kg，以6倍量、4倍量水煎煮兩次，每次0.5小時(shí)，濾過，合并濾液，濃縮至l/4原體積，加濃鹽酸調(diào)pH12，靜置18h，分離沉淀物和上清液；取沉淀用水洗至pH56;取上清液調(diào)至pH56,濃縮至密度為1.10，加乙醇至含醇量為70%，過濾，濾液濃縮至1.8Kg，上大孔樹脂柱(大孔樹脂用量為6.5Kg)，先以5倍柱體積去離子水洗脫，再以4倍樹脂體積的40%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，浸膏與上述沉淀混合，烘干，得總提取物約246g，其中含葛根總異黃酮14.1%，黃芩總黃酮21.6%;黃連總生物堿11.8%，甘草酸2.9%。例5取葛根2.4Kg，黃芩0.9Kg，黃連0.9Kg，甘草0.6Kg，以8倍量、6倍量水煎煮兩次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濃縮至l/3原體積，加濃鹽酸調(diào)pH12，靜置24h，分離沉淀物和上清液；取沉淀用水洗至pH56;取上清液調(diào)至pH56,濃縮至密度為1.15，加乙醇至含醇量為70%，過濾，濾液濃縮至2.4Kg，上大孔樹脂柱(大孔樹脂用量為10.0Kg)，先以5倍柱體積去離子水洗脫，再以5倍樹脂體積的60%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，浸膏與上述沉淀混合，烘干，得總提取物約375g，其中含葛根總異黃酮18.2%，黃芩總黃酮26.5%;黃連總生物堿15.4%，甘草酸3.8%。應(yīng)用例例1(膠囊劑)取制備例1所述的提取物100g，與188g乳糖、12g交聯(lián)PVP混合均勻，以70%乙醇為粘合劑制顆粒，低于60'C干燥，整粒，裝膠囊1000粒。成人每日服用3粒X3次。例2(顆粒劑)取制備例3所述提取物226g，與520g蔗糖粉、254g糊精混合均勻，以50%乙醇為粘合劑制顆粒，干燥，整粒，分裝為1000袋，即得。成人每日服用3袋X3次。例3(片劑)取制備例2所述的提取物148g，與127g微晶纖維素，以50^乙醇為粘合劑制顆粒，千燥，整粒，加入25g交聯(lián)CMC-Na，混合均勻，壓片1000片。成人每日服用3片X3次。例4(分散片)取制備例1所述提取物100g，粉碎成細(xì)粉，與230g微晶纖維素、100g交聯(lián)CMC-Na、20g阿斯巴甜混合均勻，以50%乙醇為粘合劑制顆粒，干燥，整粒，壓片1000片。成人每日服用3片X3次。例5(微丸劑)取制備例3所述的提取物226g,與滑石粉140g，微晶纖維素584g，阿斯巴甜50g，以50%乙醇為粘合劑過24目篩制顆粒，放入制丸機(jī)中制丸，干燥，分裝，包裝，得1000袋。成人每日服用3袋X3次。例6(軟膠囊)取制備例2所述的提取物148g,粉碎成細(xì)粉，352gPEG-400混合均勻，分裝成1000粒，成人每日服用3粒X3次。權(quán)利要求1、一種葛根芩連藥物提取物，該提取物中含有以下重量百分比的主要活性物質(zhì)葛根總異黃酮13.5～21.0％，黃芩總黃酮20.5～32.5％，黃連總生物堿10.5～18.5％，甘草酸2.0～5.0％；所述的提取物由下列方法制得(1)按葛根∶黃芩∶黃連∶甘草＝8∶3∶3∶2的重量比取原料藥混合，加6～12倍水煎煮0.5～1.5h，過濾，濾渣中再加入4～10倍水煎煮0.5～1.5h，過濾，合并兩次濾液，濃縮至原體積的1/4～1/3，加濃鹽酸調(diào)pH1～2，靜置12～24h，分離沉淀物和上清液；取沉淀物水洗至pH5～6備用；上清液調(diào)pH5～6，濃縮至密度為1.10～1.20，加乙醇至含醇量為65～75％，過濾，濾液濃縮至藥材重量的1/3～1/2，得濃縮液備用。(2)取濃縮液通過大孔樹脂柱，其中樹脂用量為藥材用量的1.3～3.0倍；先以4～6倍柱體積去離子水洗脫，再以3～5倍樹脂體積的40％～70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，浸膏與步驟(1)所得的沉淀物混合，烘干即得。2、權(quán)利要求l所述的葛根芩連提取物，該提取物的制備方法由下列步驟組成(1)按葛根黃芩黃連甘草=8:3:3:2的重量比取原料藥混合，力B612倍水煎煮0.51.5h，濾過，濾渣中再加入410倍水煎煮0.51.5h，濾過，合并兩次濾液，濃縮至原體積的1/41/3，加濃鹽酸調(diào)pH12，靜置1224h，分離沉淀物和上清液；取沉淀物水洗至pH56備用；上清液調(diào)pH56，濃縮至密度為1.101.20，加乙醇至含醇量為6575%,過濾，濾液濃縮至藥材重量的1/31/2,得濃縮液備用。(2)取濃縮液通過大孔樹脂柱，其中樹脂用量為藥材用量的1.33.0倍；先以46倍柱體積去離子水洗脫，再以35倍樹脂體積的40%70%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收溶劑，浸膏與步驟(1)所得的沉淀混合，烘干即可。3、一種治療菌痢、急性腸炎及小兒病毒性腹瀉的口服制劑，其特征是它由權(quán)利要求l所述的葛根芩連提取物和藥用輔料組成。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種治療菌痢、急性腸炎及小兒病毒性腹瀉的口服制劑，其特征是所述的口服制劑是普通片劑、分散片、膠囊劑、顆粒劑、微丸、軟膠囊。全文摘要本發(fā)明提供了一種葛根芩連提取物，該提取物是將葛根、黃芩、黃連、甘草四味藥物按8∶3∶3∶2的重量比混合，提取有效部位并精制后得到，其中含有如下重量百分比的主要有效部位葛根總異黃酮13.5～21.0％，黃芩總黃酮20.5～32.5％，黃連總生物堿10.5～18.5％，甘草酸2.0～5.0％。本發(fā)明提取物加入藥用輔料，采用常規(guī)的方法可制備出治療菌痢、急性腸炎及小兒病毒性腹瀉的各種口服制劑。文檔編號(hào)A61K36/718GK101156907SQ200710030819公開日2008年4月9日申請(qǐng)日期2007年10月12日優(yōu)先權(quán)日2007年10月12日發(fā)明者羅佳波,譚曉梅申請(qǐng)人:南方醫(yī)科大學(xué)