專利名稱：一種從紅豆杉中分離提取10－去乙酰基巴卡?、蟮姆椒?br> 技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從紅豆杉中分離提取10-去乙酰基巴卡丁III的方法，屬有機(jī)化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
隨著環(huán)境污染問題日益嚴(yán)重，癌癥發(fā)病率逐年上升，癌患人群不斷擴(kuò)大，治癌藥物的需求量，特別是療效確切的治癌新藥的需求量每年也以較高的速度增長。
1979年，生化藥理教授Su.Horwity研究發(fā)現(xiàn)了紫杉醇具獨(dú)特的抗癌作用機(jī)理，各國對此進(jìn)行了研究并取得了一定的成果。據(jù)美國腫瘤研究所(NCI)調(diào)查認(rèn)為，紫杉醇及多西紫杉醇將是人類未來二十年間最有效的抗癌藥物。這樣就為抗癌新藥紫杉醇提供了巨大的市場空間。據(jù)美國施貴寶公司統(tǒng)計(jì)，1999年該公司的紫杉醇針劑全年銷售額達(dá)到2.5億美元，到2000年國際紫杉醇市場原料藥貿(mào)易額突破15億美元。目前，美國幾家大的化學(xué)制藥公司及歐洲部分國家的藥業(yè)公司正在全球范圍內(nèi)廣泛尋求合作，以求建立自己的藥源供應(yīng)基地。
紅豆杉屬植物屬珍稀瀕危植物，產(chǎn)地及產(chǎn)量較少且植物體內(nèi)紫杉醇含量較少。因此，從植物紅豆杉(包括其他同系物種)中提取紫杉醇，獲得紫杉醇的量相當(dāng)少，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足醫(yī)藥行業(yè)的需求，為此有關(guān)的藥物研究人員致力于開拓紫杉醇的合成與半合成之路，以擴(kuò)大紫杉醇的來源，并成功利用紫杉醇的前體10-去乙?；涂ǘII(10-DAB III)為原料來半合成紫杉醇或紫杉醇的類似物如多西紫杉醇等，其抗癌活性及水溶性均優(yōu)于紫杉醇，并有望很快進(jìn)入工業(yè)化。
10-去乙?；涂ǘII是從紅豆杉中分離出的天然有機(jī)化合物，是紫杉系列產(chǎn)品中重要的中間體，被用于半合成紫杉醇及紫杉醇類化合物，其分子式如下 目前存在的問題是如何利用現(xiàn)有的資源能工業(yè)化地提取足夠多地半合成的原料，即獲得高純度10-DAB III精品，為此，醫(yī)藥界的有關(guān)人士期望生物工程方面的專家探索一條從植物紅豆杉中能高效地提取和純化10-DAB III地工業(yè)化之路，以推動(dòng)和支持抗腫瘤醫(yī)藥工業(yè)的技術(shù)進(jìn)步。
中國專利(ZL03129635.1)公開了一種從紅豆杉中分離提取10-去乙?；涂ǘII的方法。該方法首先將紅豆杉枝葉粉碎至粒徑小于10μm，然后用醇類溶劑提取有效成分，蒸發(fā)濃縮除醇，經(jīng)有機(jī)溶劑萃取，再經(jīng)硅膠柱層析，常壓色譜柱層析，水解后再次層析得到10-去乙酰基巴卡丁III。可見，該提取方法非常復(fù)雜。
中國專利(ZL02136678.0)公開了一種從紅豆杉枝葉殘?jiān)蟹蛛x提取10-去乙?；涂ǘII的方法。該方法使用種植的紅豆杉的樹葉、樹枝被提取出紫杉醇后的殘?jiān)?jīng)過常溫至70℃干燥脫除廢渣中的有機(jī)溶劑，將殘?jiān)湃胩崛」蓿尤胨?，?0-80℃下浸泡2-8小時(shí)；水與廢渣的重量比在2-5之間；殘?jiān)莺蟪脽徇^濾去除廢渣，濾液濃縮后得到10-去乙酰基巴卡丁III的粗提物；用噴霧干燥儀將10-去乙?；涂ǘII粗提物噴霧干燥，得到的干粉末用乙酸乙酯溶解色譜分離。
使用傳統(tǒng)的硅膠層析，其提取工藝得率低，從枝葉到95％產(chǎn)品的一次收率只有55％左右；產(chǎn)品含量低，產(chǎn)品純度一般只能達(dá)到95％，對后續(xù)的分離工作造成了麻煩；顏色差，產(chǎn)品質(zhì)量不高，從而影響了產(chǎn)品質(zhì)量；硅膠不能多次重復(fù)使用成本很大，氯仿做為洗脫溶劑毒性非常大對操作人員有很強(qiáng)的身體傷害。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種工藝簡單，10-去乙?；涂ǘII提取率高，價(jià)格低廉，無毒無污染的工業(yè)化生產(chǎn)方法。
10-DABIII是合成抗癌藥紫杉醇和多西紫杉醇的母體，它的工業(yè)化程度和成本從某種意義上講直接決定了合成紫杉醇和多西紫杉醇的工業(yè)化程度和成本。然由于10-DABIII在原植物中的含量通常在100ppm-1000ppm之間，要從成噸的植物里面提取100克-1000克的成品，其在分離過程中所花費(fèi)的有機(jī)溶劑成本之大主要集中在含量富集到50％以前，因此，降低成本的關(guān)鍵是將10-DABIII從ppm級分離到50％左右的粗品過程。
本發(fā)明實(shí)現(xiàn)過程如下首先用醇類溶劑提取紅豆杉枝葉，得到的提取液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮得濃縮液或干粉，再經(jīng)分離純化。
在分離純化過程中，濃縮液或干粉先過聚酰胺柱初次分離，使用乙醇或甲醇溶液梯度洗脫得粗品；粗品用硅膠柱色譜二次分離并結(jié)晶干燥。
所述的聚酰胺柱使用40-60目的聚酰胺，使用的填料聚酰胺與干粉重量比為4-7∶1；將干粉加2-3倍量10％的乙醇水溶液攪拌成糊狀，加于裝好的層析柱頂部，先用10％的乙醇水溶液沖柱，待流出液變?yōu)辄S色后，改用20％的乙醇水溶液沖柱，并按每個(gè)柱體積為一個(gè)餾分收集，每個(gè)餾分收集完成后按照10％遞加乙醇濃度，直到100％的純乙醇；對所有餾分用高效聚酰胺進(jìn)行薄層檢測，區(qū)分有料部分和無料部分，有料部分在60℃真空濃縮，待回收的乙醇濃度低于10％時(shí)，停止?jié)饪s，將有料部分放出，冷卻后置于冰柜中結(jié)晶得粗品；經(jīng)HPLC檢測，粗品中10-去乙?；涂ǘII含量不低于50％。
粗品用硅膠柱色譜二次分離，硅膠柱中加入的硅膠與粗品重量比為7-9∶1；先將粗品加入9-12倍量的乙醇使粗品充分溶解，然后加入與粗品重量等同的硅膠，蒸發(fā)回收乙醇，使粗品均勻的被硅膠吸附，待乙醇完全回收后，將粉末干燥、粉碎、過60目篩；用體積比為1∶1的乙酸乙脂與環(huán)己烷溶液沖柱，待流出液變?yōu)辄S色后，按每個(gè)柱體積為一個(gè)餾分收集，用硅膠薄層追蹤檢測直至有料部分完全沖出后停止；對所有餾分用HPLC進(jìn)行檢測，無料部分直接進(jìn)行濃縮回收溶劑，對有料部分HPLC歸一法≥85％和歸一法≤85％的有料部分各自進(jìn)行濃縮，回收溶劑；對于歸一法≥85％的部分，回收至干；歸一法≤85％的有料部分直接濃縮后拌入硅膠與下次硅膠層析合并過柱。
本發(fā)明所述的紅豆杉是南方紅豆杉、云南紅豆杉、加拿大紅豆杉、中國紅豆杉、尖杉紅豆杉、歐洲漿果紅豆杉；最好使用歐洲漿果紅豆杉，其生產(chǎn)綜合成本更低。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)①本發(fā)明使用聚酰胺柱，相比硅膠柱，成本大大降低，同時(shí)，聚酰胺可經(jīng)過處理反復(fù)使用幾十次，大大降低了過柱成本；不使用氯仿等有害有毒溶劑，保護(hù)了環(huán)境；②在分離階段，先采用了大型聚酰胺柱進(jìn)行初次分離，將大部分雜質(zhì)甩掉，使生產(chǎn)成本大大降低，然后采用乙酸乙酯和環(huán)己烷的梯度組分為流動(dòng)相，使一次性上樣可獲達(dá)3000克成品，分離效果顯著，操作方便，易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)；③由于利用了聚酰胺層析分離，產(chǎn)品除色效果好，產(chǎn)品色澤、外觀、品質(zhì)好；④兩套完全不同的分離系統(tǒng)同時(shí)應(yīng)用在一個(gè)產(chǎn)品的分離上，除雜的效果非常明顯，目標(biāo)產(chǎn)品的雜質(zhì)含量非常低，產(chǎn)品純度高；⑤該方法的產(chǎn)品一次收率在78％以上，產(chǎn)品純度在99.0％以上，最高可達(dá)99.9％，各類溶劑得回收率可達(dá)92％以上，廢水BOD在100以下，適合工業(yè)化生產(chǎn)；⑥發(fā)明人以2007年市場原料價(jià)格為參照，核算了傳統(tǒng)的硅膠層析法與本發(fā)明所述方法每生產(chǎn)1公斤成品所使用的原料成本(使用的各種溶劑及填料)，傳統(tǒng)的硅膠層析法原料成本為30450元，而本發(fā)明公開的方法原料成本18744元，可見，本發(fā)明所述方法價(jià)格低廉，易于工業(yè)化生產(chǎn)。


圖1為傳統(tǒng)硅膠層析工藝流程圖。
圖2為本發(fā)明的工藝流程圖。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合附圖對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)敘述。
層析溶劑的選擇目前廣泛用于工業(yè)上的層析溶劑主要分為兩類—有機(jī)溶劑和水，而幾乎所有的有機(jī)溶劑成本都偏高，比較低廉的層析溶劑無疑就是水和甲醇或者水和乙醇，因?yàn)榧状紝ρ劬τ休^強(qiáng)的傷害作用，故用水和乙醇做為層析溶劑就成為首選。
層析填料的選擇常規(guī)的工業(yè)填料有很多種，硅膠、氧化鋁、氧離子交換樹脂、陰離子交換樹脂、聚酰胺等等很多種，從使用乙醇水作為洗脫劑的角度分析，只能使用陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂、聚酰胺這些填料做為吸附劑。而10-DABIII是一種環(huán)萜類化合物，其分子量較大，少量的H+或者OH-都會(huì)對其結(jié)構(gòu)產(chǎn)生破壞作用，使目標(biāo)產(chǎn)品里面未知雜質(zhì)的含量偏高。發(fā)明人經(jīng)過長達(dá)2年的對比實(shí)驗(yàn)和篩選，最終確定了用聚酰胺作為吸附劑進(jìn)行分離，并把產(chǎn)品銷售給目標(biāo)客戶，同時(shí)也得到了目標(biāo)客戶的廣泛認(rèn)可。
具體如下齊魯制藥有限公司試用時(shí)間是2006年12月05日，意見是“含量99％以上，符合多西合成標(biāo)準(zhǔn)”；加拿大SINO PHARMACEUTICALS公司試用時(shí)間是2007年3月20日意見是“含量是99.5％以上，白色粉末，比旋度-35-40，未知雜質(zhì)含量符合USP29”；產(chǎn)品于2007年3月30日經(jīng)陜西藥檢所分析檢測中心檢測，純度為99.8％以上，產(chǎn)品質(zhì)量高。
本發(fā)明10-DABIII的純化步驟1、聚酰胺層析A裝柱準(zhǔn)確稱取用于層析的提取干粉5倍量的聚酰胺(40-60目)，用乙醇濃度10％的乙醇溶液充分拌勻，緩慢加入層析柱中，并不斷的用10％的乙醇水溶液反復(fù)淋洗3個(gè)小時(shí)，待氣泡完全排出后，將填料面整平加上篩板，并使液面高于填料面10cm，等待裝料。
B裝料將提取好的干粉，用2倍量(重量)10％的乙醇水溶液充分?jǐn)嚢璩珊隣睿徛佑谘b好的層析柱頂部并加蓋篩板。
C過柱分離先用10％的乙醇水溶液沖柱，待流出液變?yōu)辄S色后，改用20％的乙醇水溶液沖柱，并按每個(gè)柱體積為一個(gè)餾分收集。每個(gè)餾分收集完成后按照10％遞加乙醇濃度，直到100％的純乙醇。
D薄層檢測；對所有餾分用高效聚酰胺進(jìn)行薄層檢測，區(qū)分有料部分和無料部分，并對有料部分和無料部分各自進(jìn)行濃縮，回收乙醇。
E有料部分的收集；有料部分在60℃抽真空濃縮(真空度≤-0.09Mpa)待回收的乙醇濃度低于10％時(shí)，停止?jié)饪s，并將有料部分放出，置于密閉容器中放涼至室溫，然后放于冰柜中結(jié)晶24小時(shí)。
F粗品的過濾和干燥將結(jié)晶好的粗品，用布氏漏斗抽濾，并用水反復(fù)洗滌3次，抽干后放入真空干燥箱中干燥。溫度60℃、真空度-0.09Mpa、干燥時(shí)間48小時(shí)。
H粗品的質(zhì)量樣品經(jīng)HPLC檢測，10-DABIII含量不低于50％；干燥失重不高于6％；水份含量不高于5％。雜質(zhì)組分為10-Deacetyl-19-hydroxybaccatin III(NMT3％)、10-deacetyl-2-debenzoyl-2-tigloybaccatin III(NMT3％)、10-Deacetyl paclitaxel(NMT3％)、10-Deacetylpaclitaxel ethyl analog(NMT2％)、10-Deacetylpaclitaxel propyl analog(NMT 1％)、10-Deacetylcephalomannine(NMT1％)。
2、硅膠柱層析A裝柱準(zhǔn)確稱取用于層析的粗品8倍量的硅膠(100-200目)，用乙酸乙脂環(huán)己烷(1∶1V/V)溶液充分拌勻，緩慢加入層析柱中，并不斷的用流動(dòng)相反復(fù)淋洗6個(gè)小時(shí)，待氣泡完全排出后，將硅膠面整平加上篩板，并使液面高于填料面10cm，等待裝料。
B制樣將聚酰胺層析所得的粗品置于20L的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，加入10倍量的乙醇使粗品充分溶解，然后緩慢加入與粗品重量等同的硅膠，緩慢回收乙醇，使粗品均勻的被硅膠吸附，待乙醇完全回收后，將蒸發(fā)瓶中的粉末倒出，并置于真空干燥箱中干燥6小時(shí)，粉碎、過60目篩即可。
C裝料將制得的干粉，緩慢加于裝好的層析柱頂部并加蓋篩板。
D過柱分離用體積比乙酸乙脂∶環(huán)己烷＝1∶1的溶液沖柱，待流出液變?yōu)辄S色后，按每個(gè)柱體積為一個(gè)餾分收集，用硅膠薄層追蹤檢測直至有料部分完全沖出后停止。
EHPLC檢測對所有餾分用HPLC進(jìn)行檢測，無料部分直接進(jìn)行濃縮回收溶劑，對有料部分HPLC歸一法≥85％和歸一法≤85％的有料部分各自進(jìn)行濃縮，回收溶劑。
F有料部分的收集對于歸一法≥85％的部分(以下稱為半成品)，回收至干等待下一步的處理。歸一法≤85％的有料部分直接濃縮后拌入硅膠與下次硅膠層析合并過柱。
H結(jié)晶和干燥將半成品直接在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中用4倍量的熱丙酮使其充分溶解，并趁熱過濾，放入密閉容器在冰柜中結(jié)晶12小時(shí)。然后用布氏漏斗抽濾，抽干后放入真空干燥箱中干燥。溫度60℃、真空度-0.09Mpa、干燥時(shí)間12小時(shí)。此次所得的產(chǎn)品，以下稱為類成品。
將類成品在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中用10倍量純乙醇充分溶解，并趁熱過濾2次，然后濃縮掉一半的乙醇，放入密閉容器置冰柜中結(jié)晶24小時(shí)。然后用布氏漏斗抽濾，抽干后放入真空干燥箱中干燥。溫度60℃、真空度-0.09Mpa、干燥時(shí)間48小時(shí)，即得成品。
I.成品的規(guī)格要求樣品經(jīng)HPLC檢測，10-DABIII含量不低于99.0％；熔點(diǎn)225℃-230℃；旋光度-36.0°--40.0°；干燥失重不高于1.5％；水份含量不高于1％；有機(jī)溶劑含量不高于1.5％，其中甲醇不高于3000ppm(ICH)，丙酮不高于5000ppm(ICH)；雜質(zhì)組分為10-Deacetyl-19-hydroxybaccatin III(NMT1.0％)、10-deacetyl-2-debenzoyl-2-tigloybaccatin III(NMT1.0％)、10-Deacetyl paclitaxel(NMT1.0％)、10-Deacetylpaclitaxel ethyl analog(NMT0.3％)、10-Deacetylpaclitaxel propyl analog(NMT0.4％)、10-Deacetylcephalomannine(NMT0.5％)。
實(shí)施例1取含量為147ppm的南方紅豆杉1公斤，置于5L的廣口瓶加入5L甲醇60℃提取4次，合并提取液并濃縮回收甲醇，干燥后得225克粉末，等待上柱。
取1125克聚酰胺(40-60目)裝柱(10cm*150cm)，用乙醇水為流動(dòng)相梯度洗脫，每1L為一個(gè)收集單位，得有料部分6L，合并并濃縮有料部分，并按照發(fā)明工藝進(jìn)行結(jié)晶、抽濾。在溫度60℃、真空度-0.09Mpa、干燥48小時(shí)。得粗品0.25克，含量檢測為52.33％。
將0.25克粗品，用2克硅膠裝柱(2mm*20mm)用體積比乙酸乙脂∶環(huán)己烷＝1∶1的溶液沖柱，每5毫升為一個(gè)收集單位，HPLC追蹤檢測，得HPLC歸一法≥85％有料部分0.15克和歸一法≤85％的有料部分0.02克。
對于0.15克歸一法≥85％有料部分按工藝要求，細(xì)心操作，得0.1151克純品，含量檢測為99.68％收率為78.29％。
實(shí)施例2取含量為1320ppm的歐洲紅豆杉10公斤，置于100L的提取罐加入50L甲醇60℃提取4次，合并提取液并濃縮回收甲醇，干燥后得2.41公斤粉末，等待上柱。
取12.05公斤聚酰胺(40-60目)裝柱(20cm*180cm)，用乙醇水為流動(dòng)相梯度洗脫，每5L為一個(gè)收集單位，得有料部分50L，合并并濃縮有料部分，并按照發(fā)明工藝進(jìn)行結(jié)晶、抽濾。在溫度60℃、真空度-0.09Mpa、干燥48小時(shí)。得粗品22.0克，含量檢測為53.78％。
將22克粗品，用176克硅膠裝柱(5cm*20cm)用體積比乙酸乙脂∶環(huán)己烷＝1∶1的溶液沖柱，每100毫升為一個(gè)收集單位，HPLC追蹤檢測，得HPLC歸一法≥85％有料部分13.2克和歸一法≤85％的有料部分1.78克。
對于13.2克歸一法≥85％有料部分按工藝要求，細(xì)心操作，結(jié)晶、干燥得10.428克純品，含量檢測為99.63％收率為79％。
實(shí)施例3取含量為1450ppm的歐洲紅豆杉500公斤，置于5000L的提取罐加入2500L甲醇60℃提取4次，合并提取液并濃縮回收甲醇，干燥后得117.5公斤粉末，等待上柱。照次方法連續(xù)投料3000公斤，共制得干燥粉末712公斤。
按照本發(fā)明10-DAB純化工藝每20公斤提取粉末用100公斤聚酰胺(40-60目)裝柱(40cm*200cm)，用乙醇水為流動(dòng)相梯度洗脫，每5L為一個(gè)收集單位，得有料部分1000L，合并并濃縮有料部分，并按照發(fā)明工藝進(jìn)行結(jié)晶、抽濾。在溫度60℃、真空度-0.09Mpa、干燥48小時(shí)。尊照操作要求將712公斤提取粉末全部層析完成，共得粗品7.5公斤，含量檢測為52.17％。
將7.5公斤粗品，用60公斤硅膠裝柱(40cm*180cm)用體積比乙酸乙脂∶環(huán)己烷＝1∶1的溶液沖柱，每10升為一個(gè)收集單位，HPLC追蹤檢測，得HPLC歸一法≥85％有料部分4.5公斤和歸一法≤85％的有料部分0.63公斤。
對于4.5公斤歸一法≥85％有料部分按工藝要求，細(xì)心操作，結(jié)晶、干燥得純品3.4191公斤，含量檢測為99.73％ 收率為78.6％。
權(quán)利要求
1.一種從紅豆杉中分離提取10-去乙?；涂ǘII的方法，首先用醇類溶劑提取紅豆杉枝葉，得到的提取液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮得濃縮液或干粉，再經(jīng)分離純化，其特征在于濃縮液或干粉先過聚酰胺柱初次分離，使用乙醇或甲醇溶液梯度洗脫得粗品；粗品用硅膠柱色譜二次分離并結(jié)晶干燥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離提取10-去乙酰基巴卡丁III的方法，其特征在于聚酰胺柱使用40-60目的聚酰胺，使用的填料聚酰胺與干粉重量比為4-7∶1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的分離提取10-去乙?；涂ǘII的方法，其特征在于干粉加2-3倍量10％的乙醇水溶液攪拌成糊狀，加于裝好的層析柱頂部。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的分離提取10-去乙?；涂ǘII的方法，其特征在于先用10％的乙醇水溶液沖柱，待流出液變?yōu)辄S色后，改用20％的乙醇水溶液沖柱，并按每個(gè)柱體積為一個(gè)餾分收集，每個(gè)餾分收集完成后按照10％遞加乙醇濃度，直到100％的純乙醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的分離提取10-去乙?；涂ǘII的方法，其特征在于對所有餾分用高效聚酰胺進(jìn)行薄層檢測，區(qū)分有料部分和無料部分，有料部分在60℃真空濃縮，待回收的乙醇濃度低于10％時(shí)，停止?jié)饪s，將有料部分放出，冷卻后置于冰柜中結(jié)晶得粗品。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的分離提取10-去乙?；涂ǘII的方法，其特征在于經(jīng)HPLC檢測，粗品中10-去乙?；涂ǘII含量不低于50％。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離提取10-去乙?；涂ǘII的方法，其特征在于硅膠柱中加入的硅膠與粗品重量比為7-9∶1。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的分離提取10-去乙?；涂ǘII的方法，其特征在于粗品加入9-12倍量的乙醇使粗品充分溶解，然后加入與粗品重量等同的硅膠，蒸發(fā)回收乙醇，使粗品均勻的被硅膠吸附，待乙醇完全回收后，將粉末干燥、粉碎、過60目篩。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的分離提取10-去乙?；涂ǘII的方法，其特征在于用體積比為1∶1的乙酸乙脂與環(huán)己烷溶液沖柱，待流出液變?yōu)辄S色后，按每個(gè)柱體積為一個(gè)餾分收集，用硅膠薄層追蹤檢測直至有料部分完全沖出后停止。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的分離提取10-去乙?；涂ǘII的方法，其特征在于對所有餾分用HPLC進(jìn)行檢測，無料部分直接進(jìn)行濃縮回收溶劑，對有料部分HPLC歸一法≥85％和歸一法≤85％的有料部分各自進(jìn)行濃縮，回收溶劑；對于歸一法≥85％的部分，回收至干；歸一法≤85％的有料部分直接濃縮后拌入硅膠與下次硅膠層析合并過柱。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從紅豆杉中分離提取10－去乙酰基巴卡丁III的方法，具體的說，首先用醇類溶劑提取紅豆杉枝葉，得到的提取液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮得濃縮液或干粉，再經(jīng)分離純化。在分離純化過程中，濃縮液或干粉先過聚酰胺柱初次分離，使用乙醇或甲醇溶液梯度洗脫得粗品；粗品用硅膠柱色譜二次分離并結(jié)晶干燥。本發(fā)明使用聚酰胺柱，相比硅膠柱，成本大大降低，同時(shí)，聚酰胺可經(jīng)過處理反復(fù)使用幾十次，大大降低了過柱成本；不使用氯仿等有害有毒溶劑，保護(hù)了環(huán)境；聚酰胺柱分離得到的產(chǎn)品除色效果好，產(chǎn)品色澤、外觀、品質(zhì)好。
文檔編號A61K36/13GK101074219SQ20071001813
公開日2007年11月21日 申請日期2007年6月27日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月27日
發(fā)明者孫曉莉, 張生勇, 楊海鷹, 楊平 申請人:西安天豐生物科技有限公司