專利名稱：減少細(xì)胞膽固醇水平和/或治療或預(yù)防磷脂質(zhì)病的制作方法
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背景技術(shù)：

調(diào)節(jié)細(xì)胞膽固醇水平對(duì)于正確的細(xì)胞功能和發(fā)育是必不可少。一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的膽固醇水平部分地由膽固醇在各種隔間和膜之間的運(yùn)輸來(lái)調(diào)節(jié)。各種細(xì)胞膜之間的膽固醇的合適分布對(duì)于許多生物學(xué)功能是很重要，如信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與膜交換。膽固醇水平也可以通過(guò)運(yùn)輸從細(xì)胞中到去除膽固醇的細(xì)胞外受體而調(diào)解。這些膽固醇運(yùn)輸機(jī)制已被廣泛研究，并且調(diào)節(jié)細(xì)胞膽固醇水平的缺陷已與各種疾病聯(lián)系在一起。

尼曼-皮克二氏病是一類遺傳的脂質(zhì)儲(chǔ)存疾病。公認(rèn)有4種類型的尼曼-皮克二氏病A、B、C和D型。類型A和B是由能導(dǎo)致細(xì)胞中的鞘磷脂增加的神經(jīng)磷脂酶活性缺乏所造成的，通常導(dǎo)致細(xì)胞死亡。A型尼曼-皮克二氏病的患者往往死于2至4歲，而患上B型可能生存到童年的后期或成年。D型尼曼-皮克二氏病(也稱為新斯科舍變種)是與C型對(duì)等的，并且發(fā)生在新斯科舍省西部的后裔。

C型尼曼-皮克二氏病(NPC)是一種常染色體隱性遺傳性疾病，能引起一種膽固醇和其他脂類在許多類型的細(xì)胞中不正常的累積(1，2)。最嚴(yán)重的癥狀是由漸進(jìn)性神經(jīng)元退化所引起的，但肝及其他外周器官也表現(xiàn)出缺陷。雖然時(shí)間過(guò)程能被改變，但是癥狀往往發(fā)生在兒童早期，并且這種疾病通常在十幾歲致命。有很多嘗試來(lái)發(fā)展對(duì)NPC的治療(3-8)，但目前沒有有效的治療方法。

人類有兩個(gè)基因已與NPC缺陷相關(guān)聯(lián)，雖然這些蛋白活性的確切機(jī)制仍在研究中。NCP1是一個(gè)多跨度的膜蛋白，通常與晚期的內(nèi)涵體或溶酶體聯(lián)合(9)，降解細(xì)胞器，水解經(jīng)脂蛋白帶入細(xì)胞的膽固醇酯(10，11)。NPC1有一個(gè)甾醇敏感的跨膜結(jié)構(gòu)域，類似于在細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中所發(fā)現(xiàn)的能夠?qū)?xì)胞膽固醇的變化作出反應(yīng)的蛋白(12)。該NPC1蛋白有利于一些疏水分子的雙分子層運(yùn)輸，但它似乎并不直接參與膽固醇運(yùn)輸(13-16)。NPC2是一種可溶性內(nèi)腔蛋白，存在于晚期內(nèi)涵體中，并能結(jié)合膽固醇(17-19)。NPC2可以自由穿梭游離的膽固醇到晚期內(nèi)涵體和溶酶體限制的膜，其中NPC1顯然在其輸出到其他細(xì)胞位點(diǎn)發(fā)揮了作用(20)。功能性NPC1或NPC2的損失引起游離膽固醇在具有晚期內(nèi)涵體和/或溶酶體特征的內(nèi)吞細(xì)胞器中的累積。這些在此處提及的異常的細(xì)胞器為類溶酶體儲(chǔ)存細(xì)胞器(LSOs)。與NPC有關(guān)聯(lián)的LSOs與其他遺傳性鞘糖脂存儲(chǔ)疾病(往往由一種特定的脂質(zhì)的無(wú)法代謝所造成)相關(guān)的LSOs類似，類似之處在于儲(chǔ)存細(xì)胞器包含膜雙層的多層的內(nèi)部輪生體，該雙層含有膽固醇、鞘磷脂和大量的2-(單酰基甘油)-磷酸鹽(BMP)，也稱為溶-二磷脂酸(lyso-bisphosphatidic acid，LBPA)(21，22)。因此，即使這些疾病來(lái)自不同的遺傳缺陷，但是細(xì)胞表型的某些方面是十分相似的。

幾條證據(jù)鏈指向一個(gè)膽固醇在NPC中的運(yùn)輸?shù)娜毕?，雖然其他酯類的運(yùn)輸?shù)娜毕菀部砂l(fā)揮重要作用(23)。NPC細(xì)胞顯示異常高水平的非酯化的膽固醇，其累積主要是在LSOs。累積的膽固醇可使用菲里平檢測(cè)，這是一種能夠結(jié)合在膜上的游離膽固醇的熒光洗滌劑(24)。在野生型細(xì)胞中，從內(nèi)涵體運(yùn)送到細(xì)胞的過(guò)多的膽固醇要么是從細(xì)胞到胞外受體輸送，要么通過(guò)脂酰輔酶A酯化膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(ACAT)，一種位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的酶(25)。盡管游離膽固醇在LSOs中有高含量，培養(yǎng)NPC細(xì)胞的質(zhì)膜實(shí)際上比正常細(xì)胞有低的膽固醇含量(26)和膽固醇流出到胞外受體的缺陷(27)。此外，通過(guò)ACAT輸送脂蛋白源膽固醇用于酯化反應(yīng)有一個(gè)缺陷(28，29)。這些特征表明，膽固醇從晚期內(nèi)涵體流出是對(duì)NPC細(xì)胞有害的。

在NPC1基因中發(fā)現(xiàn)幾個(gè)不同的基因突變，人類中這對(duì)應(yīng)于95％的NPC疾病(13，30-33)。分子缺陷和嚴(yán)重癥狀的發(fā)病年齡之間的相關(guān)性并不明確。NPC疾病的臨床表現(xiàn)從成人的晚發(fā)性或癥狀輕微到嬰幼兒早發(fā)性急性癥狀(34，35)。這表明，在遺傳背景中的其他因素可以部分改善疾病。同樣，培養(yǎng)的細(xì)胞研究表明，影響膜運(yùn)輸?shù)母鞣N蛋白的過(guò)度表達(dá)可以減少膽固醇的累積。尤其是，小的調(diào)控鳥苷三磷酸酶(GTPases)、Rab7和Rab9的過(guò)度表達(dá)(36-38)降低了甾醇在培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞中的累積。由于這些蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)細(xì)胞膜運(yùn)輸?shù)脑S多方面，它們未必是良好的治療目標(biāo)。不過(guò)，人類的發(fā)病年齡的差異和外源基因過(guò)度表達(dá)的影響都表明藥物治療可能會(huì)發(fā)展以改善癥狀，即使NPC蛋白的確切的職能沒有被恢復(fù)。

磷脂質(zhì)病是一個(gè)磷脂在身體組織中有過(guò)度累積的情況。磷脂的過(guò)度累積被認(rèn)為是與磷脂的合成和/或代謝的改變有關(guān)。當(dāng)患者被給與某種藥物時(shí)磷脂質(zhì)病會(huì)發(fā)生。例如，當(dāng)給人類胺碘酮、哌克昔林、氟西汀、慶大霉素時(shí)可造成磷脂質(zhì)病。見M.J.Reasor et al.Exp.Biol.Med.2001，226，825。由于磷脂的過(guò)度累積是某些藥物的一種副作用，所以治療藥物誘導(dǎo)引起的磷脂質(zhì)病的組合物和方法將是非常需要的。

因此，需要對(duì)尼曼-皮克二氏病和其他由細(xì)胞膽固醇水平調(diào)節(jié)缺陷所引起的疾病的治療。還需要治療或預(yù)防藥物誘導(dǎo)磷脂質(zhì)病的方法。本發(fā)明滿足了這些需要并有其他相關(guān)優(yōu)勢(shì)。


發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一方面涉及可用于降低細(xì)胞中膽固醇量的化合物和藥物組合物。在某些實(shí)例中，本發(fā)明的化合物包括一個(gè)吡咯環(huán)或三嗪部分(moiety)。本發(fā)明的另一方面涉及一種治療具有膽固醇的細(xì)胞累積特點(diǎn)的患者的方法。在某些實(shí)例中，該發(fā)明涉及一種治療C型尼曼-皮克二氏病或動(dòng)脈粥樣硬化的方法。本發(fā)明的另一方面涉及一種通過(guò)將細(xì)胞暴露于本發(fā)明的一種化合物中而減少細(xì)胞中膽固醇量的方法。在某些實(shí)例中，該方法包括將細(xì)胞暴露于含有一個(gè)吡咯環(huán)或三嗪部分的化合物中。本發(fā)明的另一方面涉及一種治療或預(yù)防藥物誘導(dǎo)的磷脂質(zhì)病的方法。




圖1描述的是菲里平結(jié)合測(cè)定的結(jié)果，其中野生型CHO細(xì)胞(TRVb1)和NPC1突變型的CHO細(xì)胞(CT60)被放入384孔板中并在常規(guī)的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)48小時(shí)。細(xì)胞用PBS洗滌后，用1.5％PFA固定，用菲里平染色。利用365DCLP過(guò)濾器過(guò)濾得到的360/40nm激發(fā)和480/40nm發(fā)射光在每孔的2個(gè)位置獲得10倍放大倍數(shù)的圖像。(A)菲里平染色的TRVb1細(xì)胞圖像；(B)菲里平染色的CT60細(xì)胞圖像。標(biāo)尺＝30μM。利用平均菲利平強(qiáng)度和LSO區(qū)室比例(Compartment Ratio)進(jìn)行圖像分析。(C)平均菲里平強(qiáng)度值的直方圖；(D)LSO區(qū)室比例值的直方圖。

圖2描述的是菲里平結(jié)合測(cè)定的結(jié)果，其中細(xì)胞用PFA固定并菲里平標(biāo)記。(A)利用Discovery-1自動(dòng)熒光顯微鏡并利用365DCLP過(guò)濾器過(guò)濾得到的360/40nm激發(fā)和480/40nm發(fā)射光獲得10倍放大倍數(shù)的圖像。(B)校正陰影和背景后圖像。(C)高閾設(shè)置用來(lái)鑒定LSO區(qū)室。(D)高閾設(shè)置用來(lái)包括整個(gè)細(xì)胞區(qū)域。標(biāo)尺＝20μM。

圖3描述的是菲里平結(jié)合測(cè)定的結(jié)果，其中CT60細(xì)胞在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)過(guò)夜并用溶劑(A)或10μM中選化合物(1-a-13)(B)在篩選溶液中處理。經(jīng)20小時(shí)孵育后，細(xì)胞用PBS洗滌后，用1.5％PFA固定，用菲里平染色。獲得10倍放大倍數(shù)的圖像。標(biāo)尺＝25μM。

圖4描述了菲里平染色CT60細(xì)胞的圖像，該細(xì)胞受所添加的一些化合物的影響，它們能誘導(dǎo)形態(tài)學(xué)變化和/或增加菲里平的強(qiáng)度。(A)化合物1-c-1導(dǎo)致更為分散的熒光，其平均菲里平強(qiáng)度沒有顯著變化。(B)化合物1-c-2誘導(dǎo)更緊湊的LSOs，而菲里平強(qiáng)度沒有顯著變化。(C)化合物1-c-3在突變細(xì)胞中引起LSOs的核周聚集而變得更加分散。(D)化合物1-b-4在具有絲狀或管狀染色的菲里平強(qiáng)度中引起顯著增加。標(biāo)尺＝15μM。

圖5描述了14種從一級(jí)庫(kù)中得到的化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)(1-a-1、1-a-2、1-a-3、1-a-4、1-a-5、1-a-6、1-a-7、1-a-8、1-a-9、1-a-10、1-a-11、1-a-12、1-a-13和1-a-14)。化合物1-c-2和1-c-3引起形態(tài)學(xué)變化，化合物1-b-2引起菲里平強(qiáng)度的增加，并且化合物1-b-4增加菲利平強(qiáng)度同時(shí)誘導(dǎo)形態(tài)學(xué)變化。

圖6描述了14種從一級(jí)庫(kù)中得到的化合物的劑量響應(yīng)曲線(1-a-1、1-a-2、1-a-3、1-a-4、1-a-5、1-a-6、1-a-7、1-a-8、1-a-9、1-a-10、1-a-11、1-a-12、1-a-13和1-a-14)。CT60和CT43細(xì)胞種在有生長(zhǎng)培養(yǎng)基的384孔板中。24h后，添加化合物至最終濃度123nM、370nM、1.11μM、3.33μM和10μM，每濃度4孔，細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)夜。細(xì)胞用PBS洗滌后，用PFA固定，用菲里平染色。該LSO區(qū)室比例的確定(A)CT60細(xì)胞(平均5個(gè)實(shí)驗(yàn))及(B)CT43細(xì)胞(平均3個(gè)實(shí)驗(yàn))。實(shí)線表示溶劑對(duì)照的均值；虛線表示-3SD。

圖7描述了14種從一級(jí)庫(kù)中得到的化合物的細(xì)胞毒性分析(1-a-1、1-a-2、1-a-3、1-a-4、1-a-5、1-a-6、1-a-7、1-a-8、1-a-9、1-a-10、1-a-11、1-a-12、1-a-13和1-a-14)。CT60和CT43細(xì)胞種在有生長(zhǎng)培養(yǎng)基的384孔板中。24h后，添加化合物至最終濃度5、10和20μM，每濃度4孔，細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)夜。同等量的二甲基亞砜加入對(duì)照孔中。細(xì)胞用PBS洗滌后，用PFA固定，用核染色劑Hoechst33258染色。利用Discovery-1自動(dòng)熒光顯微鏡并利用365DCLP過(guò)濾器過(guò)濾得到的360/40nm激發(fā)和480/40nm發(fā)射光獲得4倍放大倍數(shù)的圖像。對(duì)每孔細(xì)胞計(jì)數(shù)，與對(duì)照相比細(xì)胞數(shù)量減少百分比的結(jié)果(A)CT60細(xì)胞(平均4個(gè)實(shí)驗(yàn))及(B)CT43細(xì)胞(平均3個(gè)實(shí)驗(yàn))。

圖8描述的是從二級(jí)庫(kù)中得到的7種化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)(2-a-1、2-a-3、2-a-8、2-a-9、2-a-12、2-a-13、2-a-15)。

圖9描述的是從二級(jí)庫(kù)中得到的7種化合物的影響(2-a-1、2-a-3、2-a-8、2-a-9、2-a-12、2-a-13、2-a-15)。劑量依賴性如圖中所描述的進(jìn)行確定。(A)CT60細(xì)胞(平均5個(gè)實(shí)驗(yàn))及(B)CT43細(xì)胞(平均3個(gè)實(shí)驗(yàn))。實(shí)的水平線表明溶劑對(duì)照的均值；虛線表示的是平均數(shù)-3SD。

圖10描述的是7種化合物的細(xì)胞毒性分析(2-a-1、2-a-3、2-a-8、2-a-9、2-a-12、2-a-13、2-a-15)。通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)和LDH釋放測(cè)定從二級(jí)庫(kù)中得到的7種中選化合物的細(xì)胞毒性。對(duì)于每孔細(xì)胞計(jì)數(shù)，按照?qǐng)D7中所描述的進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，與對(duì)照相比細(xì)胞數(shù)量減少百分比的結(jié)果(A)CT60細(xì)胞，及(B)CT43細(xì)胞。對(duì)于LDH細(xì)胞毒測(cè)定，在從二級(jí)中得到的7種中選化合物存在在情況下，釋放到培養(yǎng)基中的細(xì)胞LDH的測(cè)量(C)CT60細(xì)胞，參照低(無(wú)化合物)和高(溶解的細(xì)胞)對(duì)照。

圖11描述的是從二級(jí)庫(kù)中得到的7種化合物在不同時(shí)間的影響(2-a-1、2-a-3、2-a-8、2-a-9、2-a-12、2-a-13、2-a-15)。CT60細(xì)胞種在有生長(zhǎng)培養(yǎng)基的384孔板中。24h后，在4個(gè)不同的孔/濃度中，添加化合物至最終濃度1.11、3.33和10μM，并且孵育(A)4小時(shí)，(B)20小時(shí)，及(C)48小時(shí)。細(xì)胞用PBS洗滌后，用PFA固定，用菲里平染色。利用365DCLP過(guò)濾器過(guò)濾得到的360/40nm激發(fā)和480/40nm發(fā)射光在每孔的2個(gè)位置獲得10倍放大倍數(shù)的圖像。測(cè)量LSO區(qū)室比例(平均3個(gè)不同的實(shí)驗(yàn))。實(shí)的水平線表明溶劑對(duì)照的均值；虛線表示的是平均數(shù)-3SD。

圖12描述的是從二級(jí)庫(kù)中得到的7種化合物對(duì)U18666A處理正常的人成纖維細(xì)胞的影響(2-a-1、2-a-3、2-a-8、2-a-9、2-a-12、2-a-13、2-a-15)。正常人體成纖維細(xì)胞放入有常規(guī)培養(yǎng)基的384孔板生長(zhǎng)24小時(shí)，然后細(xì)胞用化合物U18666A(500nM或250nM)在篩選培養(yǎng)基中處理4小時(shí)。然后在U18666A繼續(xù)存在下，細(xì)胞和多種中選化合物(10μM)一起進(jìn)一步孵育過(guò)夜。最后，細(xì)胞用PBS洗滌3次，用1.5％PFA固定，用PBS洗后用菲里平染色。利用Discovery1顯微鏡獲得10倍放大的圖像并分析LSO比例。實(shí)的水平線是指各個(gè)濃度的Ul8666A處理的細(xì)胞的平均值，虛的水平線表明-3SD。

圖13描述的是增加的從25RA CHO細(xì)胞流出的膽固醇，對(duì)于CT60和CT43細(xì)胞株的親代細(xì)胞株沒有NPC突變，所述細(xì)胞孵育在10μM濃度的各種化合物中。

具體實(shí)施例方式
本發(fā)明的一方面提供了用于調(diào)節(jié)細(xì)胞膽固醇的水平的組合物和方法。本發(fā)明的組合物可以用來(lái)治療尼曼-皮克二氏病和其他與調(diào)節(jié)細(xì)胞膽固醇水平缺陷相關(guān)的疾病。如上文所述，適當(dāng)調(diào)節(jié)細(xì)胞膽固醇水平對(duì)于適當(dāng)?shù)募?xì)胞功能和發(fā)育是必要的?；衔飳?duì)細(xì)胞膽固醇水平的影響可利用菲里平結(jié)合法測(cè)定。

本文說(shuō)明了一種確定能夠部分逆轉(zhuǎn)C型尼曼-皮克二氏病(NPC)突變細(xì)胞表型的化合物的自動(dòng)篩選實(shí)驗(yàn)。該方法基于一種熒光洗滌劑菲里平與游離膽固醇的結(jié)合。在未經(jīng)處理的突變的細(xì)胞中，與對(duì)照細(xì)胞系相比有大量的游離膽固醇(42)。該游離膽固醇在與晚期內(nèi)涵體相關(guān)的LSOs、細(xì)胞器中是高濃度的，但也可以包含蛋白質(zhì)標(biāo)記，它們通常在晚期內(nèi)涵體中并不豐富(47)。NPC中的分子缺陷是一個(gè)突變或缺少與晚期內(nèi)涵體相關(guān)的兩個(gè)蛋白質(zhì)NPC1和NPC2之一。這些突變?cè)斐赡懝檀紡耐砥趦?nèi)涵體外排的缺陷，導(dǎo)致膽固醇在LSOs中高水平的累積。

開發(fā)了兩種篩選試驗(yàn)以評(píng)價(jià)測(cè)試化合物具有的對(duì)調(diào)節(jié)細(xì)胞膽固醇的水平的作用。第一種檢測(cè)方法采用了一種足夠確定每個(gè)包含細(xì)胞的圖像面積的菲里平-熒光強(qiáng)度閾值。使用此方法，在每個(gè)區(qū)域中每個(gè)細(xì)胞面積可以獲得總體的菲里平熒光。質(zhì)膜染色的強(qiáng)度提供了一個(gè)超過(guò)背景水平的細(xì)胞面積的明確差異。但是需要第二種檢測(cè)，因?yàn)橛脕?lái)確定細(xì)胞面積的閾值并沒有明確區(qū)分LSO區(qū)室和其他細(xì)胞區(qū)域。所用的檢測(cè)參數(shù)是用總熒光除以超過(guò)閾值以上的像素?cái)?shù)。此方法是用來(lái)評(píng)價(jià)每個(gè)細(xì)胞的總膽固醇，基于在各種條件下細(xì)胞面積保持不變這一近似。雖然這種檢測(cè)被認(rèn)為提供了可靠的每個(gè)細(xì)胞總膽固醇含量的測(cè)定，但是，如果細(xì)胞對(duì)一種處理做出反應(yīng)而發(fā)生明顯擴(kuò)散或聚集，或如果一些膽固醇有不同的結(jié)合菲里平的能力，檢測(cè)的結(jié)果可能會(huì)受到影響，。

雖然這種測(cè)定沒有使用亞細(xì)胞信息或單細(xì)胞分析，但是它可以使用自動(dòng)顯微鏡分析。首先，顯微鏡系統(tǒng)對(duì)于相對(duì)較弱的菲里平熒光是一個(gè)敏感的探測(cè)器。第二，測(cè)量?jī)H限于含有細(xì)胞的每一區(qū)域的面積，其降低了背景的貢獻(xiàn)。最后，用細(xì)胞覆蓋的面積除以總熒光強(qiáng)度提供了對(duì)測(cè)量時(shí)細(xì)胞密度差異的校正。

我們發(fā)現(xiàn)，提供足夠的突變型對(duì)野生型細(xì)胞的分辨力的每像素菲里平強(qiáng)度作為篩選檢測(cè)是有用的。當(dāng)我們調(diào)整用于檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)條件，如細(xì)胞密度和標(biāo)記條件時(shí)，采用這個(gè)參數(shù)。不過(guò)應(yīng)注意到，應(yīng)該對(duì)此加以注意，因?yàn)樵谀承┣闆r下僅通過(guò)少量標(biāo)準(zhǔn)偏差從對(duì)照細(xì)胞株分離出CT60細(xì)胞。

使用LSO區(qū)室比例檢測(cè)法，我們?nèi)〉昧艘吧蛯?duì)突變型細(xì)胞的較好的辨別，其中使用了一個(gè)閾值以鑒別含有重標(biāo)記細(xì)胞器的每一區(qū)域中的面積(即突變細(xì)胞中的LSOs)。因?yàn)樵贜PC細(xì)胞中有膽固醇聚集的位點(diǎn)，膽固醇庫(kù)的選擇性測(cè)量有望提供更好的突變型對(duì)野生型細(xì)胞的分辨力。這個(gè)附加的敏感性在確定部分有效成分篩選試驗(yàn)中是有用的。系數(shù)Z’(46)是篩選試驗(yàn)的區(qū)分能力的度量，并且LSO區(qū)室比例檢測(cè)具有一個(gè)0.61的Z’，相對(duì)的是平均菲里平強(qiáng)度檢測(cè)為0.22。通常認(rèn)為大于0.5的Z’值對(duì)于篩選試驗(yàn)是足夠的。

在第一輪篩選試驗(yàn)中，在10μM菲里平標(biāo)記中我們確定了14種化合物所引起的顯著下降，其中包括在123nM產(chǎn)生顯著減少的3種化合物。一級(jí)庫(kù)由126種模板組合合成。觀察到部分化合物在123nM有效，這表明有可能這些化合物中的一些和它們的目標(biāo)具有高親和力的相互作用。

用0.3至0.96范圍內(nèi)的Tanimoto相似系數(shù)篩選出一個(gè)化合物二級(jí)庫(kù)(高系數(shù)表明高的相似性)。平均Tanimoto相似系數(shù)約為0.75。篩選試驗(yàn)采用較低劑量的測(cè)試化合物并且比一級(jí)庫(kù)的篩選更加注重?zé)o毒性。即使在二級(jí)庫(kù)的檢測(cè)中測(cè)試化合物的劑量從10μM減少到1μM，與一級(jí)庫(kù)(0.1％)相比二級(jí)庫(kù)仍然含有更高分?jǐn)?shù)(0.18％)的選定化合物。因此，二級(jí)庫(kù)中化學(xué)藥品的選擇在潛在的多個(gè)中選對(duì)象(hits)中導(dǎo)致明顯的富集。此外，很多選擇的化合物與初次篩選得到的化合物相比有更大的療效和低毒性。這7種從二級(jí)庫(kù)中鑒別出的化合物是基于4個(gè)合成模板?；衔?-a-1、2-a-9、2-a-12和2-a-13是基于三嗪，而且這類化合物一直是藥物化學(xué)領(lǐng)域中的重要的興趣所在。見(48-52)。

從二級(jí)庫(kù)中選出的用于進(jìn)一步表征的7種化合物大致可以分為兩組。化合物2-a-1、2-a-9、2-a-12和2-a-13(I組)是基于一個(gè)1，3，5三嗪的核心，這類化合物一直是藥物化學(xué)領(lǐng)域中的重要的興趣所在(52-56)。第二組化合物(II組)有5元環(huán)的雜環(huán)核心(2-a-32-硫代-1，3-噻唑烷-4-酮衍生物，2-a-15包含一個(gè)次甲基相連的吡咯和吡咯-2-酮，2-a-8包含通過(guò)N連接到二氫吡唑的1，3-噻唑)。這兩組化合物都在核上發(fā)生大量取代，其中I組的三嗪主要帶有芳基或環(huán)胺(或帶有一個(gè)肼基)。組II也是芳基取代，其中化合物2-a-3的特點(diǎn)是通過(guò)雙鍵連接到2-硫代-1，3-噻唑烷-4-酮上的一個(gè)有趣的部分飽和的二乙基-氨基萘基部分?；衔?-a-15在擴(kuò)大的共軛體系中有三個(gè)芳環(huán)，而化合物2-a-8結(jié)合了6種不同的環(huán)體系，其中5個(gè)屬于芳香族的。I組和II組的化合物都表現(xiàn)為具有高不飽和度的、構(gòu)象限制性的分子。他們的外周趨向于非常疏水，而其中心是更親水性的。我們注意到這個(gè)特點(diǎn)意味著它們是一種空間雙親(外部疏水-內(nèi)部親水)的。雖然在某些情況下在邊緣有親水性基團(tuán)(值得注意的是2-a-13的硝基基團(tuán))，但是幾個(gè)氫鍵結(jié)合的部分一致地向這些結(jié)構(gòu)的核心分布表明，這些核心可協(xié)助它們對(duì)體內(nèi)目標(biāo)的特異性識(shí)別。

雖然開發(fā)的這種測(cè)定是用于CHO細(xì)胞系，但是經(jīng)過(guò)小的修改，它也應(yīng)該適用于分析膽固醇在其他類型的細(xì)胞中的累積。一種用于膽固醇累積的檢測(cè)不但對(duì)NPC而且對(duì)其他的糖脂儲(chǔ)存疾病是有用的。雖然這些疾病的生化基礎(chǔ)是不同的，但是許多這些疾病導(dǎo)致一個(gè)類似的表型，包括在LSOs中形成內(nèi)部膜螺環(huán)，其包含鞘磷脂、溶-二磷脂酸和膽固醇(53，54)。此處所描述的這種方法不是只可以用于化學(xué)篩選，而且也可用于分子遺傳學(xué)的篩選，如RNAi抑制和基因表達(dá)。使用傳統(tǒng)方法，已經(jīng)確定少數(shù)基因當(dāng)在細(xì)胞中過(guò)表達(dá)時(shí)可以校正NPC表型(36，38，55)。我們?cè)诒疚闹兴龅倪@種篩選可用于大規(guī)?；虮磉_(dá)的篩選。

這些篩選試驗(yàn)還確定了能夠增強(qiáng)菲里平染色甚至超過(guò)在NPC突變細(xì)胞中水平的化合物。經(jīng)進(jìn)一步研究，最初表現(xiàn)出能夠增加菲里平染色的一些化合物被發(fā)現(xiàn)在與菲里平光譜重疊的波段具有熒光性，因此，他們的熒光可能是檢測(cè)時(shí)增加熒光的基礎(chǔ)。然而，幾個(gè)非熒光的化合物同樣也被發(fā)現(xiàn)能夠增加NPC細(xì)胞的菲里平染色。我們也發(fā)現(xiàn)了一些化合物能夠產(chǎn)生富集游離膽固醇的隔間形態(tài)的顯著變化。特別是，化合物1-c-3產(chǎn)生一種被菲里平標(biāo)記的明顯的管狀細(xì)胞器的大的網(wǎng)絡(luò)。

我們還通過(guò)一種直接的化學(xué)方法測(cè)量受處理細(xì)胞的膽固醇含量。在篩選時(shí)大部分選定的化合物都確實(shí)能減少細(xì)胞膽固醇，雖然在一種氣相色譜分析中最初選定的3種化合物沒有顯示出減少膽固醇。因此，在某些情況下，應(yīng)該審慎核實(shí)由獨(dú)立的化學(xué)分析得到的菲里平結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

不被一個(gè)特定的理論約束，認(rèn)為膽固醇從晚期內(nèi)涵體溢出需要幾個(gè)步驟。這種溢出像許多胞內(nèi)運(yùn)輸?shù)牟襟E一樣，顯然主要是非囊泡的(56)。推測(cè)NPC2在從水解甾醇酯位點(diǎn)運(yùn)輸膽固醇到界膜中發(fā)揮作用(57)。推測(cè)NPC1和其他蛋白質(zhì)有助于膽固醇從界膜運(yùn)送到細(xì)胞質(zhì)載體。這些尚未從分子角度確定的載體，將膽固醇運(yùn)輸?shù)劫|(zhì)膜或其他細(xì)胞器(58，59)。細(xì)胞器中總游離膽固醇可以通過(guò)增加向胞漿中胞外受體的溢出，和/或通過(guò)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中ACAT對(duì)膽固醇的酯化而減少。減少膽固醇的攝取或減少合成也可導(dǎo)致在與化合物孵育時(shí)細(xì)胞膽固醇的減少。

使用類似于平均強(qiáng)度和LSO檢測(cè)的分析方法，我們測(cè)定了聚集在NPC細(xì)胞中的脂質(zhì)BMP的減少。二級(jí)庫(kù)中得到的中選化合物在經(jīng)16小時(shí)孵育后沒有產(chǎn)生BMP標(biāo)記的顯著減少(數(shù)據(jù)未顯示)。幾個(gè)從二級(jí)庫(kù)中得到的中選化合物確實(shí)引起經(jīng)U18666A處理的正常的人成纖維細(xì)胞的膽固醇累積的減少，從而導(dǎo)致膽固醇在LSOs中的積聚。這表明這些化合物不依賴于用于篩選的CHO細(xì)胞系的SCAP突變或其他特殊性能。

不被一個(gè)特定的理論約束，試驗(yàn)化合物的影響可以直接作用于LSOs，但同樣可能有間接影響。例如，Rab4，一個(gè)通常與內(nèi)涵體分類或胞吞回收艙相關(guān)的小GTPase的過(guò)度表達(dá)，可以部分校正NPC表型(60)。

篩選試驗(yàn)中鑒定的化合物在對(duì)培養(yǎng)的NPC1細(xì)胞無(wú)毒性的濃度能有效減少膽固醇累積。此外，幾種化合物(圖13)應(yīng)該能夠有效地降低膽固醇在正常細(xì)胞中的量，因?yàn)樗麄儽憩F(xiàn)出促進(jìn)膽固醇在25RA CHO細(xì)胞中溢出的效果。本發(fā)明的化合物也可以用于研究細(xì)胞調(diào)節(jié)膽固醇水平的機(jī)制。例如，本發(fā)明的化合物可以被光敏基團(tuán)修飾用于標(biāo)記結(jié)合的配體或連接生物素用于親和純化。此外，不被一個(gè)特定的理論約束，本發(fā)明的化合物可有效地減少膽固醇被細(xì)胞攝取和/或抑制膽固醇的生物合成。

本發(fā)明的另一方面涉及用于治療或預(yù)防藥物誘導(dǎo)的磷脂質(zhì)病的方法。當(dāng)一種藥物制劑被用于患者時(shí)，藥物誘導(dǎo)的磷脂質(zhì)病可以作為一種副作用出現(xiàn)。例如，以下藥物可導(dǎo)致磷脂質(zhì)病ABT-770、AC-3579、金剛烷胺、氨溴索，阿米卡星、胺碘酮、阿米替林(amitryptilline)、AY-9944、阿奇霉素、苯甲酰胺、波克昔定、溴己新、氯環(huán)嗪、氯喹、對(duì)氯苯丁胺、氯丙嗪、西酞普蘭、氯福雷司、氯丙咪嗪、氯氮平、復(fù)方200-15、賽克力嗪、DMP-777、紅霉素、芬氟拉明、氟西汀、氟伏沙明、慶大霉素、羥嗪、IA-3、米帕明、伊普吲哚、LY281389、馬普替林、氯苯甲嗪、米帕林、NE-10064、奈替米星、降氯環(huán)力嗪(norchlorcyclizine)、肟替林、哌克昔林、芬特明、PNU-177864、丙嗪、異丙嗪、心得安、RMl10.393、舍曲林、他莫昔芬、甲硫達(dá)嗪、tilar酮、妥布霉素、三甲丙咪嗪、曲帕拉醇、曲吡那敏(triperennamine)、丙大觀霉素、齊美利定、1-氯阿米替林(1-chloroamitryptiline)和4，4’-二乙基氨基乙氧基己烷雌酚。見M.J.Reasor et al.Exp.Biol.Med.2001，226，825；M.J.Reasor et al.Expert Opin.Drug Saf.2006，5，567；Lüllmann-Rauch R.，Drug-induced Lysosomal Storage Disorders，in LYSOSOMES INBIOLOGY AND PATHOLOGY，Vol.6.，pp.49-130(Dingle et al.eds.，AmsterdamNorth-Holland，1979)；Kodavanti et al.Pharmacol.Rev.1990，42，327；M.J.Reasor.Cationic Amphiphilic Drugs，inCOMPREHENSIVE TOXICOLOGY，Vol.8，TOXICOLOGY OF THERESPIRATORY SYSTEM pp.555-566(Sipes et al.eds.，New YorkElsevier Science，1997)；and Sawada et al.in Toxicol.Sci.，2005，83，282 and Toxicol.Sci.2006，89，554.。多種具有陽(yáng)離子親脂性結(jié)構(gòu)的藥物也可導(dǎo)致藥物誘導(dǎo)的磷脂質(zhì)病。這類藥物往往有一個(gè)至少由一個(gè)在生理pH值下帶正電荷的伯氮或取代氮基團(tuán)組成的親水區(qū)域，和一個(gè)含有可被鹵素任選取代的芳香和/或環(huán)脂肪族基團(tuán)的疏水區(qū)域。見M.J.Reasor et al.Exp.Biol.Med.2001，226，825。

用于確定造成磷脂質(zhì)病化合物的方法在本領(lǐng)域是眾所周知的。見如H.Sawada et al.Toxicol.Sci.2005，83，282。由于磷脂過(guò)度累積是某些藥物的一種不良的副作用，本發(fā)明的一方面涉及一種通過(guò)給與需要治療的患者治療有效量的本文所述通式I-IX中的任何一種化合物來(lái)治療或預(yù)防藥物誘導(dǎo)磷脂質(zhì)病的方法。在某些情況下，患者的藥物誘導(dǎo)的磷脂質(zhì)病不是由化合物U-18666A所造成的。在某些情況下，患者的藥物誘導(dǎo)的磷脂質(zhì)病是由ABT-770、AC-3579、金剛烷胺、氨溴索、阿米卡星、胺碘酮、阿米替林、AY-9944、阿奇霉素、苯甲酰胺、波克昔定、溴己新、氯環(huán)嗪、氯喹、對(duì)氯苯丁胺、氯丙嗪、西酞普蘭、氯福雷司、氯丙咪嗪、氯氮平、復(fù)方200-15、賽克力嗪、DMP-777、紅霉素、芬氟拉明、氟西汀、氟伏沙明、慶大霉素、羥嗪、IA-3、米帕明、伊普吲哚、LY281389、馬普替林、氯苯甲嗪、米帕林、NE-10064、奈替米星、降氯環(huán)力嗪、肟替林、哌克昔林、芬特明、PNU-177864、丙嗪、異丙嗪、心得安、RMI 10.393、舍曲林、他莫昔芬、甲硫達(dá)嗪、tilarone、妥布霉素、三甲丙咪嗪、曲帕拉醇、曲吡那敏、丙大觀霉素、齊美利定、1-氯阿米替林和4，4’-二乙基氨基乙氧基己烷雌酚的給藥所引起的。在某些情況下，患者的藥物誘導(dǎo)的磷脂質(zhì)病是由胺碘酮、哌克昔林、阿奇霉素、氟西汀、丙咪嗪、氯環(huán)嗪、他莫昔芬或慶大霉素的給藥所引起的。

本發(fā)明的另一方面涉及一種方法，包括給與需要的患者治療有效量的一種第一治療劑以及治療有效量的第二治療劑；其中，該第一治療劑是本說(shuō)明書所述的通式I-IX中的任何一種化合物；該第二治療劑是一種減食欲劑、抗心絞痛藥、抗心律失常藥、抗生素、抗癌劑、抗抑郁藥、抗雌激素劑、抗組胺劑、抗血脂劑、抗瘧藥物、止惡心藥、抗緊張劑、抗血栓劑、抗病毒藥劑、膽固醇合成抑制劑、二氮雜卓非典型抗精神病藥、組胺H1-阻滯劑、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑、中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑、殺血吸蟲劑、促分泌劑、選擇性5羥色胺再吸收抑制劑或?qū)е滤幬镎T導(dǎo)的磷脂質(zhì)病的鎮(zhèn)定劑。在某些情況下，所述第二治療劑是一種抗生素、抗心律失常、抗抑郁藥、組胺H1-阻滯劑或?qū)е滤幬镎T導(dǎo)的磷脂質(zhì)病的抗癌藥。

本發(fā)明的另一方面涉及一種治療發(fā)生藥物誘導(dǎo)磷脂質(zhì)病的哺乳動(dòng)物細(xì)胞的方法，包括給與所述細(xì)胞治療有效量的本說(shuō)明書所述的通式I-IX中的任何一種化合物。在某些情況下，患者的藥物誘導(dǎo)的磷脂質(zhì)病不是由化合物U-18666A所造成的。本發(fā)明的另一方面涉及一種治療發(fā)生藥物誘導(dǎo)磷脂質(zhì)病的哺乳動(dòng)物細(xì)胞的方法，包括給與所述細(xì)胞治療有效量的本說(shuō)明書所述的通式I-IX中的任何一種化合物，其中藥物誘導(dǎo)的磷脂質(zhì)病至少部分是由ABT-770、AC-3579、金剛烷胺、氨溴索，阿米卡星、胺碘酮、阿米替林、AY-9944、阿奇霉素、苯甲酰胺、波克昔定、溴己新、氯環(huán)嗪、氯喹、對(duì)氯苯丁胺、氯丙嗪、西酞普蘭、氯福雷司、氯丙咪嗪、氯氮平、復(fù)方200-15、賽克力嗪、DMP-777、紅霉素、芬氟拉明、氟西汀、氟伏沙明、慶大霉素、羥嗪、IA-3、米帕明、伊普吲哚、LY281389、馬普替林、氯苯甲嗪、米帕林、NE-10064、奈替米星、降氯環(huán)力嗪、肟替林、哌克昔林、芬特明、PNU-177864、丙嗪、異丙嗪、心得安、RMI 10.393、舍曲林、他莫昔芬、甲硫達(dá)嗪、tilarone、妥布霉素、三甲丙咪嗪、曲帕拉醇、曲吡那敏、丙大觀霉素、齊美利定、1-氯阿米替林和4，4’-二乙基氨基乙氧基己烷雌酚的給藥所引起的。

本發(fā)明的化合物的制備
圖5和8所述化合物是可商購(gòu)的。利用本領(lǐng)域已知的合成方法，通式I-XXXIX所表示的化合物可以由圖5和8所示化合物或其他可商購(gòu)的化合物制備，見例如J.March，Advanced Organic Chemistry，McGraw Hill Book Company，New York，(1992，4th edition)；Carey，F(xiàn).A.and Sundberg，R.J.Advanced Organic Chemistry Part BReactions and Synthesis，3rd Ed.；Plenum PressNew York，1990；and Organic Chemistry 2nd Ed.Ed.Bruice，P.Y.New JerseyPrentice Hall，1998。代表性的合成方法也在下面進(jìn)行了說(shuō)明。

通過(guò)在圖5和8中所示的化合物中的芳香環(huán)上插入新的官能團(tuán)或修飾現(xiàn)有的位于其上的官能團(tuán)，可以制備大量的化合物。例如，典型的官能團(tuán)操作包括通過(guò)在FeBr3存在時(shí)用Br2處理芳香族化合物而引入溴，通過(guò)在FeBr3存在時(shí)用酰基氯處理該芳香族化合物而引入?；?，用存在于HCl中的SnCl2處理硝基芳香族化合物而得到氨基芳香族化合物。其他官能團(tuán)操作包括用Na/NH3還原芳族基團(tuán)，根據(jù)反應(yīng)條件而得到環(huán)烯烴或環(huán)烷基化合物。例如，由于羧酸的影響，用Na/NH3還原1-a-13將選擇性地得到環(huán)己烯衍生物。見方案1。該環(huán)己烯中間體可進(jìn)一步還原得到一個(gè)環(huán)己基衍生物?；蛘?，環(huán)己烯中間體可以用一種氧化劑處理以形成一種環(huán)氧化物。該羧酸基也可在DCC存在下通過(guò)與醇例如甲醇或苯甲醇反應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N酯。
方案1

如方案2所示，利用鈀耦合技術(shù)可以由內(nèi)酰胺衍生物中間體制備大量化合物。鈀偶聯(lián)反應(yīng)是有優(yōu)勢(shì)的，因?yàn)樗鼈兘?jīng)常以高產(chǎn)率進(jìn)行并適用于各種官能團(tuán)。此外，相當(dāng)數(shù)量的有機(jī)硼烷是公知的并且/或者可商購(gòu)。此外，大量的芳香鹵化物和烯基鹵化物可商購(gòu)，它們可以容易地轉(zhuǎn)變成用于偶合反應(yīng)的有機(jī)硼烷原料。
方案2

用鈀偶聯(lián)反應(yīng)可以制備多種三嗪化合物。如方案3所示，可商購(gòu)的三嗪與芳基/雜芳基溴化物或碘化物的反應(yīng)可用來(lái)制備許多衍生物，它們均可通過(guò)上述芳香官能團(tuán)操作轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌衔?。值得注意的是，芳?雜芳基的溴化物或碘化物的鈀耦合也可以用來(lái)制備如方案4所示的各種三嗪基腙。
方案3
方案4

本發(fā)明的方法
本發(fā)明的一個(gè)方面涉及對(duì)患有特征為膽固醇細(xì)胞累積的病癥的患者進(jìn)行治療的一種方法，該方法包括以下步驟
給與需要的患者有效劑量的式I-IX中任意一種化合物，其中式I表示為
其中， X是O或-N(R7)-； Y是N或-C(R8)-； R1和R2獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基； R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR9＝CR9)n-芳基或-(CR9＝CR9)n-雜芳基； R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)可被任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子； R7是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R7一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； 每個(gè)R8和R9獨(dú)立地代表H或烷基；并且 n是1或2； 式II表示為
其中， X是O或-N(R6)-； R1和R2獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基； R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R6是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R6一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； 式III表示為
其中， R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R7)2)n-(CR7＝C(R7)2)； R2是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或烷基； R3的是氫、烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)；并且 R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵； 每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基； 每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且 A1和A2獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR7＝CR7)-芳基或-(CR7＝CR7)-雜芳基； 式IV表示為
其中， A是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基； R2是烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R3獨(dú)立地代表H或烷基； R4是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 式V表示為
其中， X是O、-N(R5)-、-N(R5)C(O)-、-C(O)N(R5)-、-OC(O)-、-CO2-或-N(R5)CO2-； Y是O、S或-N(R5)-； R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O； R3和R4獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且 n是1、2、3、4或5； 式VI表示為
其中， X是O、S或-N(R4)-； R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)； R2是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基； R3是H、烷基、烯基、芳基或雜芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子； 每個(gè)R4與R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且 n是1、2、3、4或5； 式VII表示為
其中， X是O或S； R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R5； R2是H或烷基； R3是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子； R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2； R5是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R5是一個(gè)可以被任意一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的芳基基團(tuán)；并且 每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 式VIII表示為
其中， X是O或S； R1、R3和A獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基； R5是一個(gè)可被任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子； 式IX表示為
其中， X1是-OR5、-SR5或-N(R5)2； 每個(gè)X2獨(dú)立地代表O、S或-N(R5)-； 每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、烯基、炔基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2； R2和R4獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R3是H、烷基或鹵素； 每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且 n是0、1、2、3或4。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述的病癥是C型尼曼-皮克二氏病。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述的病癥是動(dòng)脈粥樣硬化。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述的病癥是一種由鞘脂或鞘糖脂代謝紊亂引起的溶酶體貯積癥
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是O或-N(R7)-；Y是N；R1和R2獨(dú)立地代表烷基、鹵代烷基或芳基；R3是芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)；R4是氫；R5是雜環(huán)烷基或芳基；R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；R7是氫；或R1和R7一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是-N(R7)-；Y是N；R1和R2是芳基；R3是芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)；R4是氫；R5是雜環(huán)烷基或芳基；R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；R7是氫；或R1和R7一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是-N(R7)-；Y是-C(R8)-；R1和R2獨(dú)立地代表烷基、雜烷基或鹵代烷基；R3是氫、烷基、雜烷基或鹵代烷基；R4是氫；R5是雜芳基；R6是H或烷基；R7是氫、烷基、雜烷基或鹵代烷基；R8是H或烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式II的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式II的化合物，X是-N(R7)-；R1、R2和R5獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；并且R3、R4和R6獨(dú)立地代表氫或烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物；R1、R2、A1和A2獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R3是氫或烷基；R6是H或烷基；L是一個(gè)鍵。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物；R1是-(C(R7)2)n-(CR7＝C(R7)2)；R2是烷基；R3是烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)；R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵；每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基；每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且A1和A2獨(dú)立地代表烷基或雜烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物，其中R1包含一個(gè)羧酸基團(tuán)；R1是一個(gè)羧酸取代的芳基；R1是一個(gè)羧酸取代的苯基；和/或R1是一個(gè)羧酸對(duì)位取代的苯基；
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式IV的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式IV的化合物；A、R1和R4獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基；R2是烷基或芳基；每個(gè)R3獨(dú)立地代表H或烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式V的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式V的化合物；X是-C(O)N(R5)-或-CO2-；Y是O或S；R1、R3和R4獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O；R3和R4獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是芳基、雜芳基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)；R2是芳基、雜芳基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是芳基，R2是芳基，R3是H或烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是烷氧基取代的苯基，R2是二烷基氨基取代的苯基，R3是H。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是芳基、雜芳基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)；R2是-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基；R3是H或烷基；R2和R3一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物；X是O或S；R1的是芳基、雜芳基或-C(O)R5；R2是H或烷基；R3是烷基、雜芳基或一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；R5是一個(gè)可以被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的芳基基團(tuán)；每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、芳烷基或雜環(huán)烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物；X是O或S；R1的是芳基、雜芳基或-C(O)R5；R2是H或烷基；R3代表

R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；R5是一個(gè)可以被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的芳基基團(tuán)；每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、芳烷基或雜環(huán)烷基；m是0、1、2、3或4；每個(gè)R7獨(dú)立地代表鹵素、羥基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷基或烷氧基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物；X是O或S；R1、R3和A獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；R5是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物；X是O或S；R1、R3和A獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；R5代表

其中n是0、1、2、3或4；每個(gè)R7獨(dú)立地代表鹵素、羥基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷基或烷氧基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式IX的化合物；
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式IX的化合物；X1是-N(R5)2；每個(gè)X2獨(dú)立地代表O或S；每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2；R2和R4獨(dú)立地代表芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；R3是H、烷基或鹵素；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且n是0、1、2、3或4。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是


在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是如下所述的式X-XXXIX中的任何一種化合物。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種減少細(xì)胞中的膽固醇的量的方法，包括以下步驟
將哺乳動(dòng)物的細(xì)胞暴露在式I-IX中任意之一的一種化合物中，其中式I表示為
其中， X是O或-N(R7)-； Y是N或-C(R8)-； R1和R2分別獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基； R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR9＝CR9)n-芳基或-(CR9＝CR9)n-雜芳基； R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)可被任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子； R7是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R7一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； 每個(gè)R8和R9獨(dú)立地代表H或烷基；并且 n是1或2； 式II表示為
其中， X是O或-N(R6)-； R1和R2獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基； R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R6是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R6一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； 式III表示為
其中， R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R7)2)n-(CR7＝C(R7)2)； R2是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或烷基； R3是氫、烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)； R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵； 每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基； 每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且 A1和A2獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR7＝CR7)-芳基或-(CR7＝CR7)-雜芳基； 式IV表示為
其中， A是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基； R2是烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R3獨(dú)立地代表H或烷基； R4是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 式V表示為
其中， X是O、-N(R5)-、-N(R5)C(O)-、-C(O)N(R5)-、-OC(O)-、-CO2-或-N(R5)CO2-； Y是O、S或-N(R5)-； R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O； R3和R4獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且 n是1、2、3、4或5； 式VI表示為
其中， X是O、S或-N(R4)-； R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)； R2是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基； R3是H、烷基、烯基、芳基或雜芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子； 每個(gè)R4與R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且 n是1、2、3、4或5； 式VII表示為
其中， X是O或S； R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R5； R2是H或烷基； R3是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子； R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2； R5環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R5是一個(gè)可以被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的芳基基團(tuán)；并且 每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 式VIII表示為
其中， X是O或S； R1、R3和A獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基； R5是一個(gè)可被任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子； 式IX表示為
其中， X1是-OR5、-SR5或-N(R5)2； 每個(gè)X2獨(dú)立地代表O、S或-N(R5)-； 每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、烯基、炔基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2； R2和R4分別獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R3是H、烷基或鹵素； 每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且 n是0、1、2、3或4。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物通過(guò)增加所述細(xì)胞中膽固醇的排出而減少所述細(xì)胞中的膽固醇的量。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物通過(guò)抑制所述細(xì)胞的膽固醇攝取而減少膽固醇的量。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物通過(guò)抑制所述細(xì)胞的膽固醇合成而減少所述細(xì)胞中的膽固醇的量。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物通過(guò)促進(jìn)所述細(xì)胞的膽固醇的酯化作用而減少所述細(xì)胞中的膽固醇的量。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述細(xì)胞是人體細(xì)胞。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述細(xì)胞具有C型尼曼-皮克二氏缺陷。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是O或-N(R7)-；Y是N；R1和R2獨(dú)立地代表烷基、鹵代烷基或芳基；R3是芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)；R4是氫；R5是雜環(huán)烷基或芳基；R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；R7是氫；或R1和R7一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是-N(R7)-；Y是N；R1和R2是芳基；R3是芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)；R4是氫；R5是雜環(huán)烷基或芳基；R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；R7是氫；或R1和R7一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是-N(R7)-；Y是-C(R8)-；R1和R2獨(dú)立地代表烷基、雜烷基或鹵代烷基；R3是氫、烷基、雜烷基或鹵代烷基；R4是氫；R5是雜芳基；R6是H或烷基；R7是氫、烷基、雜烷基或鹵代烷基；R8是H或烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式II的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式II的化合物，X是-N(R7)-；R1、R2和R5獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；并且R3、R4和R6獨(dú)立地代表氫或烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物；R1、R2、A1和A2獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R3是氫或烷基；R6是H或烷基；L是一個(gè)鍵。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物；R1是-(C(R7)2)n-(CR7＝C(R7)2)；R2是烷基；R3是烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)；R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵；每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基；每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且A1和A2獨(dú)立地代表烷基或雜烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述方法，其中所述化合物是具有式III的化合物，R1包括一個(gè)羧酸基團(tuán)；R1是一個(gè)羧酸取代的芳基；R1是一個(gè)羧酸取代的苯基；和/或R1是一個(gè)羧酸對(duì)位取代的苯基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式IV的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式IV的化合物；A、R1和R4獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基；R2是烷基或芳基；每個(gè)R3獨(dú)立地代表H或烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式V的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式V的化合物；X是-C(O)N(R5)-或-CO2-；Y是O或S；R1、R3和R4獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O；R3和R4獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是芳基、雜芳基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)；R2是芳基、雜芳基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是芳基，R2是芳基，R3是H或烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是烷氧基取代的苯基，R2是二烷基氨基取代的苯基，R3是H。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是芳基、雜芳基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)；R2是-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基；R3是H或烷基；R2和R3一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物；X是O或S；R1的是芳基、雜芳基或-C(O)R5；R2是H或烷基；R3是烷基、雜芳基或一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；R5是一個(gè)可以被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的芳基基團(tuán)；每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、芳烷基或雜環(huán)烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物；X是O或S；R1的是芳基、雜芳基或-C(O)R5；R2是H或烷基；R3代表

R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；R5是一個(gè)可以被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的芳基基團(tuán)；每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、芳烷基或雜環(huán)烷基；m是0、1、2、3或4；每個(gè)R7獨(dú)立地代表鹵素、羥基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷基或烷氧基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物；X是O或S；R1、R3和A獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；R5是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物；X是O或S；R1、R3和A獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；R5代表

其中n是0、1、2、3或4；每個(gè)R7獨(dú)立地代表鹵素、羥基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷基或烷氧基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式IX的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式IX的化合物；X1是-N(R5)2；每個(gè)X2獨(dú)立地代表O或S；每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2；R2和R4分別獨(dú)立地代表芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；R3是H、烷基或鹵素；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且n是0、1、2、3或4。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是


在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是如下所述的式X-XXXIX中任意之一的一種化合物。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種治療或預(yù)防藥物引起的磷脂質(zhì)病的方法，包括以下步驟
給與需要的患者有效劑量的式I-IX中任意之一的一種化合物，其中式I表示為

其中， X是O或-N(R7)-； Y是N或-C(R8)-； R1和R2獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基； R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR9＝CR9)n-芳基或-(CR9＝CR9)n-雜芳基； R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)可被任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子； R7是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R7一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； 每個(gè)R8和R9獨(dú)立地代表H或烷基；并且 n是1或2； 式II表示為
其中， X是O或-N(R6)-； R1和R2獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基； R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R6是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R6一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； 式III表示為
其中， R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R7)2)n-(CR7＝C(R7)2)； R2是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或烷基； R3的是氫、烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)；并且 R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵； 每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基； 每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且 A1和A2獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR7＝CR7)-芳基或-(CR7＝CR7)-雜芳基； 式IV表示為
其中， A是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基； R2是烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R3獨(dú)立地代表H或烷基； R4是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 式V表示為
其中， X是O、-N(R5)-、-N(R5)C(O)-、-C(O)N(R5)-、-OC(O)-、-CO2-或-N(R5)CO2-； Y是O、S或-N(R5)-； R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O； R3和R4獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且 n是1、2、3、4或5； 式VI表示為
其中， X是O、S或-N(R4)-； R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)； R2是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基； R3是H、烷基、烯基、芳基或雜芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子； 每個(gè)R4與R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且 n是1、2、3、4或5； 式VII表示為
其中， X是O或S； R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R5； R2是H或烷基； R3是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子； R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2； R5是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R5是一個(gè)可以被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的芳基基團(tuán)；并且 每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 式VIII表示為
其中， X是O或S； R1、R3和A獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基； R5是一個(gè)可被任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子； 式IX表示為
其中， X1是-OR5、-SR5或-N(R5)2； 每個(gè)X2獨(dú)立地代表O、S或-N(R5)-； 每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、烯基、炔基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2； R2和R4獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R3是H、烷基或鹵素； 每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且 n是0、1、2、3或4。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是O或-N(R7)-；Y是N；R1和R2獨(dú)立地代表烷基、鹵代烷基或芳基；R3是芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)；R4是氫；R5是雜環(huán)烷基或芳基；R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；R7是氫；或R1和R7一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是-N(R7)-；Y是N；R1和R2是芳基；R3是芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)；R4是氫；R5是雜環(huán)烷基或芳基；R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；R7是氫；或R1和R7一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是-N(R7)-；Y是-C(R8)-；R1和R2獨(dú)立地代表烷基、雜烷基或鹵代烷基；R3是氫、烷基、雜烷基或鹵代烷基；R4是氫；R5是雜芳基；R6是H或烷基；R7是氫、烷基、雜烷基或鹵代烷基；R8是H或烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式II的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式II的化合物，X是-N(R7)-；R1、R2和R5獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；并且R3、R4和R6獨(dú)立地代表氫或烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物；R1、R2、A1和A2獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R3是氫或烷基；R6是H或烷基；L是一個(gè)鍵。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物；R1是-(C(R7)2)n-(CR7＝C(R7)2)；R2是烷基；R3是烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)；R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵；每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基；每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且A1和A2獨(dú)立地代表烷基或雜烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物；R1含有一個(gè)羧酸基團(tuán)；R1是一個(gè)羧酸取代的芳基；R1是一個(gè)羧酸取代的苯基；和/或R1是一個(gè)羧酸對(duì)位取代的苯基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式IV的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式IV的化合物；A、R1和R4獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基；R2是烷基或芳基；每個(gè)R3獨(dú)立地代表H或烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式V的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式V的化合物；X是-C(O)N(R5)-或-CO2-；Y是O或S；R1、R3和R4獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O；R3和R4獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2；
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是芳基、雜芳基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)；R2是芳基、雜芳基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基；R3是H或烷基；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是芳基，R2是芳基，R3是H或烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是烷氧基取代的苯基，R2是二烷基氨基取代的苯基，R3是H。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是芳基、雜芳基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)；R2是-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基；R3是H或烷基；R2和R3一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物；X是O或S；R1的是芳基、雜芳基或-C(O)R5；R2是H或烷基；R3是烷基、雜芳基或一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；R5是一個(gè)可以被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的芳基基團(tuán)；每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、芳烷基或雜環(huán)烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物；X是O或S；R1的是芳基、雜芳基或-C(O)R5；R2是H或烷基；R3代表

R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；R5是一個(gè)可以被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的芳基基團(tuán)；每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、芳烷基或雜環(huán)烷基；m是0、1、2、3或4；每個(gè)R7獨(dú)立地代表鹵素、羥基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷基或烷氧基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物；X是O或S；R1、R3和A獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；R5是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物；X是O或S；R1、R3和A獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；R5代表

其中n是0、1、2、3或4；每個(gè)R7獨(dú)立地代表鹵素、羥基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷基或烷氧基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式IX的化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是一種式IX的化合物；X1是-N(R5)2；每個(gè)X2獨(dú)立地代表O或S；每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2；R2和R4獨(dú)立地代表芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；R3是H、烷基或鹵素；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且n是0、1、2、3或4。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是


在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是如下所述的式X-XXXIX中任意之一的一種化合物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法，其中所述化合物是

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法中的任意一種，其中所述的患者是哺乳動(dòng)物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法中的任意一種，其中所述的患者是靈長(zhǎng)類動(dòng)物、馬科動(dòng)物、犬科動(dòng)物或貓科動(dòng)物。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的方法中的任意一種，其中所述的患者是人類。

本發(fā)明的化合物和組合物
本發(fā)明的一個(gè)方面涉及一種式X表示的化合物
其中， X是OH或N(R5)2； 每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、烯基、炔基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2； R2和R4獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、芳烷基、雜芳烷基或雜芳基，所述雜芳基具有選自N、O或S的1個(gè)雜原子； R3是H、烷基或鹵素； 每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； n是0、1、2、3或4；并且 條件是當(dāng)X是NH2時(shí)，R2和R4中至少之一不是芳基。
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的化合物，其中所述的X是NH2并且R2是芳基。
在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的化合物，其中所述的X是NH2并且R4是芳基。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種式XI表示的化合物
其中， R1和R3獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R2和R4獨(dú)立地代表氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R2一起形成一個(gè)3-8元環(huán)；或R3和R4一起形成一個(gè)3-8元環(huán)； R5、R6、R7和R8獨(dú)立地代表氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R5、R6、R7和R8一起形成一個(gè)至少被一個(gè)選自(C2-C6)烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、烯基、炔基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基、-N(R9)2、-OR9、-C(O)R9、-CO2R9或C(O)N(R9)2的官能團(tuán)取代的芳基或雜芳基；并且 每個(gè)R9獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的化合物，其中R1和R2形成一個(gè)6元環(huán)。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的化合物，其中R3和R4形成一個(gè)6元環(huán)。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的化合物，其中R5、R6、R7和R8一起形成一個(gè)芳香環(huán)。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種式XII表示的化合物
其中， X是O、S或-N(R4)-； R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R2是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基； R3是H、烷基、烯基、芳基或雜芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子； 每個(gè)R4與R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且 n是1、2、3、4或5； 或一種式XIII表示的化合物
其中， X是O、S或-N(R7)-； R4是-(C(R8)2)n-(CR8＝C(R8)2)； R5是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(CR8＝C(R8)2)； R6是H、烷基、烯基、芳基或雜芳基；或R5和R6一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子； 每個(gè)R7和R8獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基或雜環(huán)烷基、芳烷基或雜芳烷基；并且 n是1、2、3、4或5； 或一種式XIV表示的化合物
其中， X是O、S或-N(R12)-； R9是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、-芳基-OR14、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R10是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR13＝CR13)-芳基或-(CR13＝CR13)-雜芳基； R11是H、烷基、烯基、芳基或雜芳基； 每個(gè)R12與R13獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基； R14是雜烷基、雜環(huán)烷基、雜芳基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且 n是1、2、3、4或5。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XIII的化合物，其中X是S并且R4是烯丙基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XIII的化合物，其中X是S，R4是烯丙基并且R5是-(CR8＝C(R8)2)。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XIV的化合物，其中X是S并且R9是-烯丙基-OR14。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XIV的化合物，其中X是S并且R9是-烯丙基-OR14，R10是芳基，并且R11是H。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種式XIVa表示的化合物
其中， X是O、S或-N(R12)-； R9是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、-芳基-OR14、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R10是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR13＝CR13)-芳基或-(CR13＝CR13)-雜芳基； R11是H、烷基、烯基、芳基或雜芳基；或R10和R11一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子； 每個(gè)R12與R13獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基； n是1、2、3、4或5。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XIVa的化合物，其中X是S并且R9是芳基。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種式XV表示的化合物
其中， A是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基； R2是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R3獨(dú)立地代表H或烷基；并且 R4是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 或一種式XVI表示的化合物
其中， A是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R5是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR7＝CR7)-芳基或-(CR7＝CR7)-雜芳基； R6是烷基或芳基； 每個(gè)R7獨(dú)立地代表H或烷基；并且 R8是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 或一種式XVII表示的化合物
其中， A是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R9是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR11＝CR11)-芳基或-(CR11＝CR11)-雜芳基； R10是烷基或芳基； 每個(gè)R11獨(dú)立地代表H或烷基；并且 R12是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XVI的化合物，其中A是雜芳基并且R6是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XVI的化合物，其中A是雜芳基，R6是烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XVII的化合物，其中A是雜芳基，R9是芳基，并且R10是烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XVII的化合物，其中A是雜芳基，R9是芳基，并且R10是芳基。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種式XVIII表示的化合物
其中， R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基； R2是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或烷基； R3的是氫、烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)； R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵； 每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基； 每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且 A1和A2獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR7＝CR7)-芳基或-(CR7＝CR7)-雜芳基； 或一種式XIX表示的化合物
其中， R9是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R15)2)n-(CR15＝C(R15)2)； R10是芳基； R11是氫、烷基、-CO2R16或-C(O)N(R15)(R16)； R12與R13獨(dú)立地代表H或烷基；或R12與R13一起形成一個(gè)鍵； 每個(gè)R14和R15獨(dú)立地代表H或烷基； 每個(gè)R16獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； L是一個(gè)鍵、-C(R15)2-或-(CR15＝CR15)-； A3代表一個(gè)二價(jià)的環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR15＝CR15)-芳基-或-(CR15＝CR15)-雜芳基-；并且 A4代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR15＝CR15)-芳基或-(CR15＝CR15)-雜芳基； 或一種式XX表示的化合物
其中， R17是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R23)2)n-(CR23＝C(R23)2)； R18是芳基； R19是氫、烷基、-CO2R24或-C(O)N(R23)(R24)； R20與R21獨(dú)立地代表H或烷基；或R20與R21一起形成一個(gè)鍵； 每個(gè)R22和R23獨(dú)立地代表H或烷基； 每個(gè)R24獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； L是一個(gè)鍵、-C(R23)2-或-(CR23＝CR23)-； A5代表一個(gè)二價(jià)的環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR23＝CR23)-芳基-或-(CR23＝CR23)-雜芳基-；并且 A6代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR23＝CR23)-芳基或-(CR23＝CR23)-雜芳基； 或一種式XXI表示的化合物
其中， R25是-(C(R31)2)n-(CR31＝C(R31)2)； R26是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R27是氫、烷基、-CO2R32或-C(O)N(R31)(R32)； R28與R29獨(dú)立地代表H或烷基；或R28與R29一起形成一個(gè)鍵； 每個(gè)R30和R31獨(dú)立地代表H或烷基； 每個(gè)R32獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基； L是一個(gè)鍵、-C(R31)2-或-(CR31＝CR31)-；并且 A7和A8獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR31＝CR31)-芳基或-(CR31＝CR31)-雜芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XVIII的化合物，其中R1是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XVIII的化合物，其中R1是芳基，并且R4和R5一起形成一個(gè)鍵。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XVIII的化合物，其中R1是芳基，R4和R5一起形成一個(gè)鍵，L是一個(gè)鍵，并且A1是雜芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XVIII的化合物，其中R1是芳基，R4和R5一起形成一個(gè)鍵，L是一個(gè)鍵，A1是雜芳基，并且A2是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XVIII的化合物，其中R1包含一個(gè)羧酸基團(tuán)；R1是一個(gè)羧酸取代的芳基；R1是一個(gè)羧酸取代的苯基；和/或R1是一個(gè)羧酸對(duì)位取代的苯基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XX的化合物，其中R17包含一個(gè)羧酸基團(tuán)；R17是一個(gè)羧酸取代的芳基；R17是一個(gè)羧酸取代的苯基；和/或R17是一個(gè)羧酸對(duì)位取代的苯基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXI的化合物，其中R25是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXI的化合物，其中R25是芳基，并且R27是-CO2R32。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXI的化合物，其中R25是芳基，R27是-CO2R32，并且A7是雜芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXI的化合物，其中R25是芳基，R27是-CO2R32，A7是雜芳基并且A8是芳基。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種式XXII表示的化合物
其中， X是O、-N(R5)-、-N(R5)C(O)-、-C(O)N(R5)-、-OC(O)-、-CO2-或-N(R5)CO2-； Y是O、S或-N(R5)-； R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O； R3獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R4獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且 n是1、2、3、4或5； 或一種式XXIII表示的化合物
其中， X是O、-N(R10)-、-N(R10)C(O)-、-C(O)N(R10)-、-OC(O)-，-CO2-或-N(R10)CO2-； Y是O、S或-N(R10)-； R6是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R7獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R7一起形成＝O； R8是芳基； R9代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R10獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且 n是1、2、3、4或5； 或一種式XXIV表示的化合物
其中， X是O、-N(R15)-、-N(R15)C(O)-、-C(O)N(R15)-、-OC(O)-、-CO2-或-N(R15)CO2-； Y是O、S或-N(R15)-； R11是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R12獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R7一起形成＝O； R13是芳基； R14代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 每個(gè)R15獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且 n是1、2、3、4或5。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXII的化合物，其中R4是芳基，X是NH，并且R1是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXIII的化合物，其中R4是芳基，X是NH，并且R6是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXIV的化合物，其中R13是芳基，R14是芳基，并且X是NH。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種式XXV表示的化合物
其中， X是O或S； R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R5； R2是H或烷基； R3是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子； R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2； R5是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R5是一個(gè)可以被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的芳基基團(tuán)；并且 每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 或一種式XXVI表示的化合物
其中， X是O或S； R7是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R11； R8是H或烷基； R9是芳基； R10是H、烷基或-C(O)N(R12)2； R11是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R11是一個(gè)可以被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR12、-N(R12)2、-CO2R12、C(O)N(R12)2、氰基或硝基任選取代的芳基基團(tuán)；并且 每個(gè)R12獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 或一種式XXVII表示的化合物
其中， X是O或S； R13是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R17； R14是H或烷基； R15是芳基； R16是H、烷基、-CO2R18或-C(O)N(R18)2； R17是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且 每個(gè)R18獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 或一種式XXVIII表示的化合物
其中， X是O或S； R19是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R23； R20是H或烷基； R21是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子； R22是烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2； R23是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R23是一個(gè)可以被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR18、-N(R18)2、-CO2R18、C(O)N(R18)2、氰基或硝基任選取代的芳基基團(tuán)；并且 每個(gè)R18獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXV的化合物，其中X是S，R1是-C(O)R5，R2是H，并且R4是-CO2R6。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXVI的化合物，其中X是S，R7是-C(O)R11，并且R8是H。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXVII的化合物，其中X是S，R13是-C(O)R17，R14是H，并且R16是-CO2R18。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種式XXIX表示的化合物
其中， X是O； Y是C(R8)-； R1和R2獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基； R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR9＝CR9)n-芳基或-(CR9＝CR9)n-雜芳基； R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)可被任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子； 每個(gè)R8和R9獨(dú)立地代表H或烷基；并且 n是1或2； 或一種式XXX表示的化合物
其中 X是-N(R16)-； Y是-C(R17)-； R10和R11分別獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R12是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R11和R12一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； R13是H、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基； R14是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR18＝CR18)n-芳基或-(CR18＝CR18)n-雜芳基； R15是H或烷基；或R14和R15一起形成一個(gè)可被任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子； R16是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R10和R16一起形成一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的3-8元環(huán)； 每個(gè)R17和R18獨(dú)立地代表H或烷基；并且 n是1或2。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXX的化合物，其中R16、R10、R11和R12是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXX的化合物，其中R16、R10、R11和R12是芳基，并且R13是H。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXX的化合物，其中R16、R10、R11和R12是芳基，R13是H，并且R14是烷基。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種式XXXI表示的化合物
其中， R1和R3獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R2和R4獨(dú)立地代表氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R2一起形成一個(gè)3-8元環(huán)；或R3和R4一起形成一個(gè)3-8元環(huán)；并且 每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； 或一種式XXXII表示的化合物
其中， R6和R8分別獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R7和R9分別獨(dú)立地代表氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R6和R7一起形成一個(gè)3-8元環(huán)；或R8和R9一起形成一個(gè)3-8元環(huán)；并且 每個(gè)R10獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳烷基或雜芳烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXI的化合物，其中R1和R2一起形成一個(gè)7元環(huán)，并且R3和R4一起形成一個(gè)7元環(huán)。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXI的化合物，其中R1和R2一起形成一個(gè)7元環(huán)，R3和R4一起形成一個(gè)7元環(huán)，并且R5是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXII的化合物，其中R1和R2一起形成一個(gè)7元環(huán)，R3和R4一起形成一個(gè)7元環(huán)，并且R5是烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXI的化合物，其中R1和R3是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXI的化合物，其中R1、R3和R5是芳基。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種式XXXIII表示的化合物
其中， X是O； R1、R3和A獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基； R5是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子； 或一種式XXXIV表示的化合物
其中， X是S； R6代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R8和A獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R7和R9獨(dú)立地代表H或烷基； R10是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子； 或一種式XXXV表示的化合物

其中， X是S； R11和A獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R13代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R12和R14獨(dú)立地代表H或烷基； R15是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子； 或一種式XXXVI表示的化合物
其中， X是S； R16和R18獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； A代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R17和R19獨(dú)立地代表H或烷基； R20是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXIV的化合物，其中X是O；A是芳基，R10是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子，并且R8是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXV的化合物，其中X是S；A是芳基，R15是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子，并且R11是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXVI的化合物，其中X是S；R20是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子，R18是芳基，并且R16是芳基。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種式XXXVII表示的化合物
其中， R1、R2和R3獨(dú)立地代表H、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； A獨(dú)立地代表一個(gè)可被一個(gè)或多個(gè)鹵素、烷基、硝基、氨基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基、環(huán)烯基或雜環(huán)烯基任選取代的單環(huán)或雙環(huán)的芳基或雜芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的化合物，其中R1、R2和R3是H。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的化合物，其中R1、R2和R3是H，并且A是一個(gè)由氨基取代的芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的化合物，其中R1、R2和R3是H，并且A是一個(gè)由硝基取代的芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的化合物，其中R1、R2和R3是H，并且A是一個(gè)由鹵素取代的芳基。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種式XXXVIII表示的化合物
其中， R1獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R2和R3獨(dú)立地代表氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且 每個(gè)R4獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳烷基或雜芳烷基； 或一種式XXXIX表示的化合物
其中， R5獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基； R6和R7獨(dú)立地代表氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且 每個(gè)R8獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)烷基、芳烷基或雜芳烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXVIII的化合物，其中R1是鹵代烷基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXVIII的化合物，其中R1是鹵代烷基，并且R2和R3是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXVIII的化合物，其中R1是鹵代烷基，R2和R3是芳基，并且至少一個(gè)R4是氫。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXIX的化合物，其中R6和R7是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXIX的化合物，其中R6和R7是芳基，并且至少一個(gè)R8是芳基。

在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及前述的式XXXIX的化合物，其中R6和R7是芳基，一個(gè)R8是芳基，一個(gè)R8是氫。

本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及一種藥用組合物，該組合物含有一種藥學(xué)上可接受的賦形劑和通式X-XXXIX中任意之一的一種化合物，其中通式X-XXXIX如上所述。

定義
為方便起見，說(shuō)明書、實(shí)施例以及所附的權(quán)利要求書中所使用的一些術(shù)語(yǔ)收集于此處。

術(shù)語(yǔ)“ACAT”是指?；o酶A膽固醇?；D(zhuǎn)移酶。

術(shù)語(yǔ)“CHO”是指中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢。

術(shù)語(yǔ)“DMSO”是指二甲亞砜；
術(shù)語(yǔ)“FBS”是指胎牛血清。

術(shù)語(yǔ)“GC”，指的氣相色譜分析。

術(shù)語(yǔ)“HEPES”是指4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸。

術(shù)語(yǔ)“LBPA”是指溶-二磷脂酸(lyso-bis phosphatidic acid)。

術(shù)語(yǔ)“LDL”指的低密度脂蛋白。

術(shù)語(yǔ)“LSO”是指溶酶體貯藏細(xì)胞器。

術(shù)語(yǔ)“NPC”是指C型尼曼-皮克二氏病。

術(shù)語(yǔ)“PBS”是指磷酸鹽緩沖液。

術(shù)語(yǔ)“PFA”是指多聚甲醛。

術(shù)語(yǔ)“雜原子”是本領(lǐng)域所公知的，指一個(gè)碳或氫原子以外的其他的任何元素的原子。用作說(shuō)明的雜原子包括硼、氮、氧、磷、硫和硒。

術(shù)語(yǔ)“烷基”是本領(lǐng)域所公知的，包括飽和脂肪族基團(tuán)，包括直鏈烷基、支鏈烷基、環(huán)烷(脂環(huán))基、烷基取代的環(huán)烷基和環(huán)烷基取代的烷基。在某些實(shí)施例中，直鏈或支鏈烷基主鏈上有約30個(gè)或更少的碳原子(例如，C1-C30的直鏈，C3-C30的支鏈)，或者約20個(gè)或更少。同樣，環(huán)烷基在其環(huán)形結(jié)構(gòu)中有大約3-10個(gè)碳原子，或者在環(huán)形結(jié)構(gòu)中有約5、6或7個(gè)碳原子。

除非對(duì)碳原子數(shù)另有說(shuō)明，“低級(jí)烷基”是指一種如上定義的烷基，但其主鏈結(jié)構(gòu)中具有1至約10個(gè)碳原子，或者1至約6個(gè)碳原子。同樣，“低級(jí)烯基”和“低級(jí)炔基”也有類似的鏈長(zhǎng)。

術(shù)語(yǔ)“雜烷基”是本領(lǐng)域公知的，包括鏈中至少含有一個(gè)雜原子的飽和脂族基團(tuán)，包括鏈中至少含有一個(gè)雜原子的直鏈烷基，鏈中至少含有一個(gè)雜原子的支鏈烷基，環(huán)中含有至少一個(gè)雜原子的環(huán)烷(脂環(huán))基，環(huán)中至少含有一個(gè)雜原子的烷基取代的環(huán)烷基，和鏈中至少含有一個(gè)雜原子的環(huán)烷基取代的烷基。術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)烷基”是指一種環(huán)中含有至少一個(gè)雜原子的環(huán)烷(脂環(huán))基。

術(shù)語(yǔ)“烯基”和“炔基”是本領(lǐng)域公知的，是指具有與上文所述的烷基類似的長(zhǎng)度的不飽和脂族基團(tuán)，但分別至少包含一個(gè)雙鍵或三鍵。術(shù)語(yǔ)“烯基”和“炔基”包括未取代的不飽和脂族基團(tuán)，以及含有一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、烷基、烷氧基、羰基和羧基的取代基的不飽和脂組基團(tuán)。

術(shù)語(yǔ)“環(huán)烯基”是指一種至少有一個(gè)雙鍵的脂環(huán)基。術(shù)語(yǔ)“環(huán)烯基”包括未取代的不飽和脂環(huán)基，也包括含有一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、烷基、烷氧基、羰基和羧基的取代基的不飽和脂環(huán)基。

術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)烯基”是指一種含有至少一個(gè)雙鍵和至少一個(gè)選自N、O和S的雜原子的脂環(huán)基。術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)烯基”包括未取代的不飽和脂環(huán)基，以及含有一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、烷基、烷氧基、羰基或羧基的取代基的不飽和脂環(huán)基。

術(shù)語(yǔ)“芳基”是本領(lǐng)域公知的，指5、6和7元單環(huán)芳基，其環(huán)結(jié)構(gòu)由碳原子構(gòu)成，例如苯、萘、蒽、芘等等。芳香環(huán)可被取代基在一個(gè)或多個(gè)環(huán)位點(diǎn)所取代。代表取代基包括鹵素、疊氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、氨基、硝基、巰基、亞氨基、酰氨基、膦酸酯基、亞膦酸酯基、羰基、羧基、甲硅烷基、醚、烷硫基、磺?；?、亞磺酰氨基、酮、醛、酯、雜環(huán)基、芳基或雜芳環(huán)部分(moiety)、-CF3、-CN等等。術(shù)語(yǔ)“芳基”還包括有兩個(gè)或兩個(gè)以上環(huán)的多環(huán)體系，其中兩個(gè)或兩個(gè)以上的碳原子是兩個(gè)毗鄰的環(huán)(這些環(huán)是“稠環(huán)”)所共有，其中至少有一個(gè)環(huán)是芳香環(huán)，例如，其他環(huán)可以是環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、雜芳基和/或雜環(huán)。

術(shù)語(yǔ)“雜芳基”是本領(lǐng)域公知的，指環(huán)中有1到4個(gè)雜原子的5、6和7元單環(huán)芳基，例如吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、惡唑、噻唑類、三唑、吡唑、吡啶、吡嗪、噠嗪和嘧啶等等。那些環(huán)結(jié)構(gòu)中有雜原子的芳基也可稱為“芳基雜環(huán)”或“雜芳族化合物”。芳香環(huán)可以被如上所述的取代基在一個(gè)或多個(gè)環(huán)位點(diǎn)所取代，例如鹵素、疊氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、氨基、硝基、巰基、亞氨基、酰氨基、膦酸酯基、亞膦酸酯基、羰基、羧基、甲硅烷基、醚、烷硫基、磺?；?、亞磺酰氨基、酮、醛、酯、雜環(huán)基、芳基或雜芳環(huán)部分、-CF3、-CN等等。術(shù)語(yǔ)“雜芳基”還包括有兩個(gè)或兩個(gè)以上環(huán)的多環(huán)體系，其中兩個(gè)或兩個(gè)以上的碳原子是兩個(gè)毗鄰的環(huán)(這些環(huán)是“稠環(huán)”)所共有的，其中至少有一個(gè)環(huán)是雜芳環(huán)，例如，其他環(huán)可以是環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、雜芳基和/或雜環(huán)。

術(shù)語(yǔ)鄰、間、對(duì)是本領(lǐng)域公知的，分別指1，2-，1，3-和1，4-二取代苯。例如，1，2-二甲苯和鄰二甲苯是同義詞。

術(shù)語(yǔ)“芳烷基”是本領(lǐng)域公知的，指一種芳基取代的烷基。

術(shù)語(yǔ)“雜芳烷基”是本領(lǐng)域公知的，指一種雜芳基取代的烷基。

術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”是本領(lǐng)域公知的，指3到約10元環(huán)結(jié)構(gòu)，或者3到約7元環(huán)，其環(huán)結(jié)構(gòu)含有1到4個(gè)雜原子。雜環(huán)也可以是多環(huán)的。雜環(huán)基包括，例如，噻吩、噻蒽、呋喃、吡喃、異苯并呋喃、苯并吡喃、夾氧雜蒽、吩噻噁、吡咯、咪唑、吡唑、異噻唑、異惡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、吲嗪、異吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、異喹啉、喹啉、二氮雜萘、萘啶、喹喔啉、喹唑啉、喹唑啉、蝶啶、咔唑、菲啶、吖啶、嘧啶、二氮菲、吩嗪、吩吡嗪、吩噻嗪、呋咱、吩吡嗪、吡咯烷、四氫呋喃、四氫噻吩、惡唑、哌啶、哌嗪、嗎啉、內(nèi)酯、內(nèi)酰胺如氮雜環(huán)丁酮和吡咯酮、磺內(nèi)酰胺、磺內(nèi)酯等等。雜環(huán)可被如上所述的取代基在一個(gè)或多個(gè)環(huán)位點(diǎn)取代，所述取代基如鹵素、疊氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、氨基、硝基、巰基、亞氨基、酰氨基、膦酸酯基、亞膦酸酯基、羰基、羧基、甲硅烷基、醚、烷硫基、磺?；?、亞磺酰氨基、酮、醛、酯、雜環(huán)基、芳基或雜環(huán)芳香部分、-CF3、-CN等等。

術(shù)語(yǔ)“多環(huán)”或“多環(huán)基”是本領(lǐng)域公知的，指兩個(gè)或兩個(gè)以上的環(huán)(例如，環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基和/或雜環(huán)基)，其中兩個(gè)或兩個(gè)以上的碳原子為兩個(gè)毗鄰的環(huán)所公用，例如，這些環(huán)是“稠環(huán)”。通過(guò)非毗鄰的原子相連的環(huán)被稱為“橋”環(huán)。多環(huán)的每個(gè)環(huán)可被如上文所述的取代基取代，所述取代基如鹵素、烷基、芳烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、羥基、氨基、硝基、巰基、亞氨基、酰氨基、膦酸酯基、亞膦酸酯基、羰基、羧基、甲硅烷基、醚、烷硫基、磺?；?、酮、醛、酯、雜環(huán)基、芳基或雜環(huán)芳香部分、-CF3、-CN等等。

術(shù)語(yǔ)“碳環(huán)”是本領(lǐng)域公知的，指一種芳香環(huán)或非芳香環(huán)，其中環(huán)中的每個(gè)原子均為碳。

術(shù)語(yǔ)“硝基”是本領(lǐng)域公知的，指-NO2；術(shù)語(yǔ)“鹵素”是本領(lǐng)域公知的，指-F、-Cl、-Br或-I；術(shù)語(yǔ)“巰基”是本領(lǐng)域公知的，指-SH；術(shù)語(yǔ)“羥基”是指-OH。術(shù)語(yǔ)“磺?；笔潜绢I(lǐng)域公知的，指-SO2-。“鹵化物”指鹵素的相應(yīng)陰離子，并且“類鹵化物”具有在Cotton和Wilkinson編的“Advanced Inorganic Chemistry”的560頁(yè)給出了定義。

術(shù)語(yǔ)“胺”和“氨基”是本領(lǐng)域公知的，指未取代的和取代的胺，例如可由以下通式表示的部分
其中，R50、R51和R52各自獨(dú)立地代表氫、烷基、烯基、-(CH2)m-R61，或者R50和R51與其連接的N原子一起形成一個(gè)雜環(huán)，該雜環(huán)的環(huán)結(jié)構(gòu)中具有4到8個(gè)原子；R61代表芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)或多環(huán)；m是0或一個(gè)從1到8的整數(shù)。在某些實(shí)施方式中，R50或R51中只有一個(gè)可以是羰基，例如，R50、R51和氮一起不構(gòu)成酰亞胺。在其他的實(shí)施方式中，R50和R51(可選地，以及R52)各自獨(dú)立代表氫、烷基、烯基或-(CH2)m-R61。因此，術(shù)語(yǔ)“烷基胺”包括如上所定義的氨基，該氨基上帶有一個(gè)被取代的或未取代的烷基，即R50和R51中至少有一個(gè)是烷基。

術(shù)語(yǔ)“酰胺基”是本領(lǐng)域公知的，指的是一個(gè)可由以下通式表示的部分
其中，R50如以上所定義，R54代表氫、烷基、烯基或-(CH2)m-R61，其中m和R61如以上所定義。

術(shù)語(yǔ)“酰胺基”在本領(lǐng)域指的是氨基取代的羰基，包括一個(gè)可以由以下通式表示的部分
其中，R50和R51如以上所定義。本發(fā)明中酰胺的某些實(shí)施方式不包括可能不穩(wěn)定的酰亞胺。

術(shù)語(yǔ)“烷硫基”是指有一個(gè)硫基的如上所定義的烷基。在某些實(shí)施方式中，“烷硫基”部分代表-S-烷基、-S-烯基、-S-炔基和-S-(CH2)m-R61中之一，其中m和R61如以上所定義。代表性的烷硫基包括甲硫基、乙基硫等等。

術(shù)語(yǔ)“羧基”是本領(lǐng)域公知的，包括例如可由以下通式表示的部分
其中，X50是一個(gè)鍵，或代表一個(gè)氧或硫，R55和R56代表氫、烷基、烯基、-(CH2)m-R61或一種藥學(xué)上可接受的鹽，R56代表氫、烷基、烯基或-(CH2)m-R61，其中m和R61如上所定義。當(dāng)X50是氧并且R55或R56不是氫，則該通式代表“酯”。當(dāng)X50是氧，并且R55為如上述所定義，則該部分在此指羧基，尤其是當(dāng)R55是氫時(shí)，該通式代表“羧酸”。當(dāng)X50是氧，并且R56是氫，該通式代表“甲酸”。一般來(lái)說(shuō)，當(dāng)上述通式的氧原子被硫所取代時(shí)，該通式代表“硫代羰基”。當(dāng)X50是硫并且R55或R56不是氫時(shí)，該通式代表“硫酯”，而X50是硫并且R55是氫時(shí)，該通式代表“硫代羧酸”。當(dāng)X50是硫并且R56是氫時(shí)，該通式代表“硫代甲酸”。另一方面，當(dāng)X50是一個(gè)鍵，并且R55不是氫時(shí)，上述通式代表“酮基”。當(dāng)X50是一個(gè)鍵，并且R55是氫時(shí)，上述通式代表“醛基”。

術(shù)語(yǔ)“烷氧基”是本領(lǐng)域公知的并且指的是一種其上附有一個(gè)氧基的上述烷基。典型的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、叔丁氧基等?！懊选笔怯梢粋€(gè)氧共價(jià)相連的兩個(gè)碳?xì)浠衔铩Ｏ鄳?yīng)的，能夠使烷基成為醚的烷基取代基是或相似于烷氧基，例如可由-O-烷基、-O-烯基、-O-炔基、-O-(CH2)m-R61中之一所代表，其中m和R61如上文所述。

術(shù)語(yǔ)“磺酸鹽”是本領(lǐng)域公知的，指可由以下通式代表的部分
其中R57是一個(gè)電子對(duì)、氫、烷基、環(huán)烷基或芳基。

術(shù)語(yǔ)“硫酸酯”是本領(lǐng)域公知的，指可由以下通式代表的部分
其中R57如上述所定義。

術(shù)語(yǔ)“磺酰胺”是本領(lǐng)域公知的，指可由以下通式代表的部分
其中R50和R56如上述所定義。

術(shù)語(yǔ)“氨磺?；笔潜绢I(lǐng)域公知的，指可由以下通式代表的部分
其中R50和R51如上述所定義。

術(shù)語(yǔ)“磺?！笔潜绢I(lǐng)域公知的，指可由以下通式代表的部分
其中R58是下列之一氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基。

術(shù)語(yǔ)“亞砜基(sulfoxido)”是本領(lǐng)域公知的，指可由以下通式代表的部分
其中R58如上述所定義。

術(shù)語(yǔ)“磷?；笔潜绢I(lǐng)域公知的，可由以下通式表示
其中Q50代表S或O，并且R59代表氫、低級(jí)烷基或芳基。當(dāng)用于取代例如一個(gè)烷基時(shí)，磷酰烷基中的磷酰基可由以下通式代表
其中Q50和R59各自獨(dú)立地如上述定義，并且Q51代表O、S或N。當(dāng)Q50是S時(shí)，磷?；糠质恰傲虼姿狨ァ?。

術(shù)語(yǔ)“亞磷酰胺”是本領(lǐng)域公知的，可由以下通式表示
其中Q51、R50、R51和R59如上述所定義。

術(shù)語(yǔ)“胺基磷酸酯(phosphonamidite)”是本領(lǐng)域公知的，可由以下通式表示
其中Q51、R50、R51和R59如上述所定義，并且R60代表低級(jí)烷基或芳基。

類似的取代可用于烯基和炔基來(lái)產(chǎn)生例如氨基烯基、氨基炔基、酰氨基烯基、酰氨基炔基、亞胺基烯基、亞胺基炔基、硫代烯基、硫代炔基、羰基取代的烯基或炔基。

每個(gè)表達(dá)的定義，如烷基、m、n等等，當(dāng)它在任何結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)過(guò)一次以上時(shí)，獨(dú)立于它在相同結(jié)構(gòu)中的其他地方的定義。

術(shù)語(yǔ)“硒烷基”是本領(lǐng)域所公知，是指一種硒基取代的烷基。烷基上被取代的類似的“硒醚”是選自-硒-烷基、-硒-烯基、-硒-炔基、硒-(CH2)m-R61之一，m和R61如上述所定義。

術(shù)語(yǔ)triflyl、tosyl、mesyl、nonaflyl是本領(lǐng)域公知的并且分別是指三氟甲烷磺?；?duì)甲苯磺?；?、甲烷磺酰基、全氟丁基磺酰基。術(shù)語(yǔ)triflate、tosylate、mesylate、nonaflate是本領(lǐng)域公知的并且分別指三氟甲烷磺酰酯、對(duì)甲苯磺酰酯、甲烷磺酰酯、全氟丁基磺酰酯官能團(tuán)以及含有所述基團(tuán)的分子。

縮寫Me、Et、Ph、Tf、Nf、Ts和MS獨(dú)立地代表甲基、乙基、苯基、三氟甲烷磺?；?、全氟丁基磺?；?、對(duì)甲苯磺?；图淄榛酋；?。本領(lǐng)域內(nèi)具有普通技能有機(jī)化學(xué)工作者使用的一個(gè)更廣泛的縮寫名單出現(xiàn)在有機(jī)化學(xué)雜志(Journal of Organic Chemistry)的每一卷的第一期；這份名單通常出現(xiàn)在一個(gè)標(biāo)題為縮略語(yǔ)標(biāo)準(zhǔn)名單的表格中。

本發(fā)明中的組分中含有的某些化合物可能存在特別是幾何或立體異構(gòu)的形式。此外，本發(fā)明中聚合物也可能是光學(xué)活性的。本發(fā)明考慮了所有這些化合物，其中包括順式和反式異構(gòu)體、R-和S-對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映體、(D)-異構(gòu)體、(L)-異構(gòu)體，它們的外消旋混合物，及其組合，這都屬于發(fā)明的范圍。另外的不對(duì)稱碳原子可以存在于取代基中，如烷基中。所有這些異構(gòu)體以及它們的混合物都包括在本發(fā)明中。

例如，如果需要一種特定對(duì)映體形式的本發(fā)明化合物，它可以通過(guò)不對(duì)稱合成或用手性助劑衍化來(lái)制備，其中所產(chǎn)生的對(duì)映混合物被分離，并且輔助基團(tuán)被斷開以提供純的需要的對(duì)映體?；蛘撸诜肿又邪瑝A性官能團(tuán)如氨基，或酸性官能團(tuán)如羧基的情況下，對(duì)映體的鹽可通過(guò)具有適當(dāng)?shù)男庑缘乃峄驂A來(lái)形成，然后通過(guò)本領(lǐng)域公知的分步結(jié)晶和色譜手段來(lái)分辨這一對(duì)映體，隨后回收純的對(duì)映體。

應(yīng)當(dāng)理解的是“取代”或“用......取代”包含這樣的隱含條件這種取代符合被取代原子和取代基的準(zhǔn)許的化合價(jià)，并且取代結(jié)果是一個(gè)穩(wěn)定的化合物，例如它不會(huì)自發(fā)地進(jìn)行轉(zhuǎn)化，例如重排、環(huán)化、消除或其他反應(yīng)。

術(shù)語(yǔ)“取代的”也包括有機(jī)化合物的所有允許的取代基。在一個(gè)廣泛的方面，允許的取代基包括非環(huán)狀的和環(huán)狀的、支鏈的和非支鏈的、碳環(huán)的和雜環(huán)的、芳香和非芳香的機(jī)化合物取代基。示例性取代物包括例如本文以上所述的取代基。對(duì)適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)化合物而言，所容許的取代基可能有一個(gè)或多個(gè)并且可以相同或不同。對(duì)于本發(fā)明的目的，雜原子例如氮可具有氫取代基和/或本文所述的任何容許的有機(jī)化合物取代基來(lái)滿足雜原子的價(jià)態(tài)。本發(fā)明不希望以任何方式受限于有機(jī)化合物所允許的取代基。

本文使用的短語(yǔ)“保護(hù)基團(tuán)”表示臨時(shí)的取代基，它保護(hù)潛在的反應(yīng)官能團(tuán)不發(fā)生不希望的化學(xué)轉(zhuǎn)化。這些保護(hù)基團(tuán)的例子包括羧酸的酯類，醇類的甲硅烷酯，醛和酮的縮醛和縮酮。保護(hù)基團(tuán)化學(xué)的領(lǐng)域已有綜述(Greene，T.W.；Wuts，P.G.M.Protective Groups inOrganic Synthesis，2nd ed.；WileyNew York，1991)。本發(fā)明化合物的受保護(hù)的形式包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。

對(duì)于本發(fā)明的目的，化學(xué)元素的確定是按照元素周期表，CAS版本，物理和化學(xué)手冊(cè)(Handbook of Chemistry and Physics)，第67版，1986-87，內(nèi)封面。

藥物組合物
在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了藥學(xué)上可以接受的組合物，其中包含如上文所述的治療有效量的一種或一種以上的化合物，與一種或多種藥學(xué)上可接受的載體(添加劑)和/或稀釋劑進(jìn)行配制。如以下詳細(xì)說(shuō)明，本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的組合物可以為給藥而特別配制的固體或液體形式，包括適于以下方式的形式(1)口服給藥，例如，灌注(水性或非水溶液或懸浮液)、片劑，例如針對(duì)于口腔的、舌下的和全身吸收的，大丸藥、粉劑、顆粒、適用于舌的膏劑；(2)非經(jīng)腸給藥，例如經(jīng)皮下、肌肉、靜脈或硬膜外腔注射，以例如一種無(wú)菌溶液或懸浮液或緩釋制劑形式；(3)局部施用給藥，例如以霜?jiǎng)?、軟膏或施用于皮膚的控釋藥貼或噴霧劑；(4)陰道內(nèi)或直腸內(nèi)給藥，例如以栓劑、藥膏或泡沫的形式；(5)舌下給藥；(6)眼睛內(nèi)給藥；(7)經(jīng)皮給藥；或(8)鼻腔給藥。

用于此處的短語(yǔ)“治療有效量”表示的是一種化合物、材料或含有本發(fā)明的化合物的組合物的量，這一量在一個(gè)合理的受益/風(fēng)險(xiǎn)比率下對(duì)于動(dòng)物的至少一個(gè)細(xì)胞亞群可生產(chǎn)理想的療效，適用于任何醫(yī)學(xué)治療。

此處采用的短語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的”是指化合物、新材料、成分和/或劑型在合理的醫(yī)療判斷范圍內(nèi)，適合與人類和動(dòng)物的組織接觸，沒有過(guò)度的毒性、刺激性、過(guò)敏性反應(yīng)或其他問題或并發(fā)癥，有一個(gè)合理的受益/風(fēng)險(xiǎn)比率。

用于此處的短語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的載體”是指一種藥學(xué)上可接受的材料、組合物或載體，例如液體或固體填充劑、稀釋劑、賦形劑、制造輔助物(例如潤(rùn)滑劑、滑石粉鎂、硬脂酸鈣或鋅或硬脂酸)，或溶劑封裝材料，用于將目標(biāo)化合物從一個(gè)器官或身體部分?jǐn)y帶或運(yùn)送到另一個(gè)器官或身體部分。每種載體必須在某種意義上與組合物中的其他成分的相容性是“可以接受的”，并且對(duì)患者無(wú)害。一些可作為藥學(xué)上可接受的載體的材料的例子包括(1)糖，如乳糖，葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；(3)纖維素及其衍生物，如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和醋酸纖維素；(4)西黃蓍膠粉；(5)麥芽；(6)明膠；(7)滑石粉；(8)輔料，如可可脂和栓劑蠟；(9)油，如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；(10)乙二醇，如丙二醇；(11)多元醇，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；(12)酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)瓊脂；(14)緩沖劑，如氫氧化鎂和氫氧化鋁；(15)褐藻酸；(16)無(wú)熱原的水；(17)生理鹽水；(18)林格氏液；(19)乙醇；(20)pH值緩沖液；(21)聚酯、聚碳酸酯和/或聚酸酐；及(22)其他用于藥物配方的無(wú)毒性的相容的基質(zhì)。

如上文所述，本發(fā)明化合物的某些實(shí)施例可以含有一個(gè)堿性官能團(tuán)，如氨基或烷氨基，因此，能夠與藥學(xué)上可接受的酸形成藥學(xué)上可接受的鹽。術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”，在這方面是指本發(fā)明化合物的相對(duì)無(wú)毒性的無(wú)機(jī)和有機(jī)酸加成鹽。這些鹽可以在給藥載體和劑型的制造過(guò)程中原位形成，或由本發(fā)明的一種游離堿形式的純化合物與合適的有機(jī)或無(wú)機(jī)酸單獨(dú)反應(yīng)，并且分離該鹽從而在后續(xù)的純化過(guò)程中形成。代表性的鹽包括氫溴酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、重硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、醋酸鹽、戊酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、硬脂酸鹽、月桂酸、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、馬來(lái)酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、萘二甲酸酯、甲磺酸鹽、葡庚糖酸鹽、乳糖醛酸鹽、月桂基磺酸鹽等等。(例如見Berge et al.(1977)″Pharmaceutical Salts″，J.Pharm.Sci.661-19)。

主題化合物的藥學(xué)上可接受的鹽類包括常規(guī)的無(wú)毒鹽或這些化合物的季銨鹽，如來(lái)自無(wú)毒性的有機(jī)或無(wú)機(jī)酸。例如，這些常規(guī)無(wú)毒鹽類包括來(lái)自無(wú)機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等等的鹽類，以及來(lái)自有機(jī)酸的如醋酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、棕櫚酸、馬來(lái)酸、羥基馬來(lái)酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、對(duì)氨基苯磺酸、2-鄰乙酰氧基苯甲酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羥乙磺酸(isothionic)等等的鹽類。

在其他情況下，本發(fā)明的化合物可包含一個(gè)或多個(gè)的酸性官能團(tuán)，從而能夠與藥學(xué)上可接受的堿形成藥學(xué)上可接受的鹽。術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”在這方面是指本發(fā)明化合物的相對(duì)無(wú)毒性的無(wú)機(jī)和有機(jī)堿加成鹽。這些鹽可以在給藥載體和劑型的制造過(guò)程中原位形成，或由本發(fā)明的游離酸形式的純化合物和合適的堿單獨(dú)反應(yīng)形成，所述堿如藥學(xué)上可接受的金屬陽(yáng)離子的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽，氨，或藥學(xué)上可接受的有機(jī)的伯、仲或叔胺。代表性的堿或堿土金屬鹽包括鋰、鈉、鉀、鈣、鎂、鋁鹽等等?？捎糜谛纬蓧A加成鹽的代表性的有機(jī)胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。(例如見上述的Berge et al.的文章)。

潤(rùn)濕劑、乳化劑和潤(rùn)滑油，如十二烷基硫酸鈉和硬脂酸鎂，以及著色劑、釋放劑、涂層劑、甜味劑、調(diào)味劑和香料劑、防腐劑和抗氧化劑也可存在于本發(fā)明的組合物中。

藥學(xué)上可接受的抗氧化劑的例子包括(1)水溶性抗氧化劑，如抗壞血酸、半胱氨酸鹽酸鹽、硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸鈉等；(2)油溶性抗氧化劑，如抗壞血酸棕櫚酸酯、二丁基羥基茴香醚(BHA)、二叔丁對(duì)甲酚(BHT)、卵磷脂、沒食子酸丙酯、α-維生素E等等；(3)金屬螯合劑，如檸檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨醇、酒石酸、磷酸等。

本發(fā)明的制劑包括那些適合口腔、鼻腔、局部(包括口腔及舌下)、直腸、陰道和/或非經(jīng)腸給藥的制劑。該制劑可方便地以單位劑型呈現(xiàn)，并可以藥學(xué)領(lǐng)域公知的任何方法制備?？梢耘c載體材料結(jié)合以產(chǎn)生單一的劑型的活性成分的量將取決于被治療的主體以及具體的給藥方式?？梢院洼d體材料結(jié)合產(chǎn)生單一劑型的活性成分的量通常為產(chǎn)生治療效果的化合物量。通常，在100％中，這個(gè)量的范圍將從約0.1％到約99％的活性成分，優(yōu)選從約5％到約70％，最優(yōu)選從約10％到約30％。

在某些實(shí)施例中，本發(fā)明的制劑含有選自環(huán)糊精、纖維素、脂質(zhì)體、膠束形成劑如膽汁酸、高分子載體如聚酯和聚酸酐的一種賦形劑；以及本發(fā)明的一種化合物。在某些實(shí)施例中，上述的制劑使本發(fā)明的化合物具有經(jīng)口的生物有效性。

制備這些制劑或組合物的方法包括將本發(fā)明的一種化合物和載體以及任選的一種或多種附屬成分結(jié)合。一般來(lái)說(shuō)，制劑是通過(guò)將本發(fā)明化合物和液體載體或細(xì)碎的固體載體或兩者均一地、密切地結(jié)合，然后如有必要進(jìn)行產(chǎn)品成型而制得的。

適合于口服給藥的本發(fā)明制劑可以是以膠囊、扁膠囊、丸劑、片劑、含片(使用香味基材，通常是蔗糖和阿拉伯膠或西黃蓍膠)、粉末、顆粒，或作為一種溶液或一種水性或非水性的懸浮液，或作為一種水包油或油包水型液體乳膠，或作為一種丹藥或糖漿，或作為一種錠劑(使用惰性基材，如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠)和/或作為口洗劑等形式，每一種都含有一種預(yù)定量的本發(fā)明化合物作為有效成分。本發(fā)明的化合物也可以大丸劑、藥糖劑或泥膏劑形式給藥。

在本發(fā)明的用于經(jīng)口給藥的固體劑型(膠囊、片劑、丸劑、錠劑、粉末、顆粒、trouches等)中，活性成分與一種或多種藥學(xué)上可接受的載體混合，如檸檬酸鈉或磷酸氫鈣和/或以下任何一種(1)填充劑或增充劑，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；(2)粘結(jié)劑，例如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯膠；(3)稀釋劑，如甘油；(4)崩解劑，如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、褐藻酸、某些硅酸鹽、鈉碳酸鹽；(5)固化延緩劑，如石蠟；(6)吸收加速劑，如季銨鹽化合物及表面活性劑，如泊洛沙姆和十二烷基硫酸鈉；(7)潤(rùn)濕劑，例如十六烷基醇、單硬脂酸甘油酯、非離子表面活性劑；(8)吸收劑，如高嶺土和膨潤(rùn)土；(9)潤(rùn)滑劑，如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙烯乙二醇、十二烷基硫酸鈉、硬脂酸鋅、硬脂酸鈉、硬脂酸及其混合物；(10)著色劑；及(11)控制釋放劑，如交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮或乙基纖維素。至于膠囊、片劑和丸劑，藥品組合物可能還包括緩沖劑。一種類似類型的固體組合物也可被填充在軟、硬殼膠囊中，使用乳糖或奶糖以及高分子量聚乙烯乙二醇等賦形劑。

片劑可通過(guò)壓制或模壓制備，任選使用一種或多種附屬成分。壓片可以用粘結(jié)劑(例如明膠或羥丙基甲基纖維素)、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、崩解劑(例如淀粉羥乙酸鈉或交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)、表面活性劑或分散劑制備。模壓片可在一個(gè)合適的機(jī)器上將經(jīng)惰性液體稀釋劑濕潤(rùn)的粉末化合物的混合物而模壓而制備。

本發(fā)明藥物組合物的片劑和其他固體劑型，如錠劑、膠囊、丸劑和顆粒，可以任選和糖衣和外殼一起壓刻或制備，例如腸衣和制藥領(lǐng)域所熟知的其他糖衣。它們也可配制成能夠緩慢或控制釋放其中的活性成分，這是通過(guò)使用例如比例變化的羥丙基甲基纖維素以提供理想的釋放曲線，使用其他聚合物基質(zhì)、脂質(zhì)體和/或微球。它們可以被制成快速釋放，例如冷凍干燥。它們可以被滅菌，例如通過(guò)一個(gè)過(guò)濾細(xì)菌的過(guò)濾器，或通過(guò)在即將使用時(shí)加入可溶于無(wú)菌水中的、滅菌固體組合物形式的滅菌劑或其他無(wú)菌可注射介質(zhì)。這些組合物也可任選含有避光劑，并且可以僅僅或優(yōu)選以一種延遲的方式在胃腸道的某一部分釋放活性成分?？梢允褂玫陌窠M合物的例子包括高分子物質(zhì)和蠟?；钚猿煞忠部梢允俏⒛倚问剑绻线m具有一種或多種上述輔料。

本發(fā)明的化合物經(jīng)口給藥的液體劑型包括藥學(xué)上可接受的乳劑、微乳劑、溶液、懸浮液、糖漿和酏劑。除了活性成分，液體劑型可含有本領(lǐng)域常用的惰性稀釋劑，例如水或其他溶劑、增溶劑和乳化劑，如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1，3-丁烯乙二醇、油(特別是棉籽、花生、玉米胚芽、橄欖、蓖麻和芝麻油)、甘油，四氫糠醇、聚乙烯乙二醇和失水山梨醇的脂肪酸酯，及其混合物。

除了惰性稀釋劑，經(jīng)口組合物還可以含有佐劑，如潤(rùn)濕劑、乳化劑和懸浮劑、甜味劑、調(diào)味料、色素、防腐劑、香料和防腐劑。

懸浮液中除了活性成分，還可含有懸浮劑，例如乙氧基異硬脂醇、山梨醇和聚氧乙烯、脫水山梨糖醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁(aluminium metahydroxide)、膨潤(rùn)土、瓊脂和西黃蓍膠，及其混合物。

本發(fā)明的用于直腸或陰道的藥物組合物制劑可以是一種栓劑，它可通過(guò)將本發(fā)明的一種或多種化合物與一種或多種適合的非刺激性輔料或載體混合而制備，所述輔料或載體例如可可脂、聚乙二醇、栓劑蠟或水楊酸，并且在室溫下是固體但在體溫下是液體，因此可以在直腸或陰道腔熔融而釋放活性化合物。

適合陰道給藥的本發(fā)明制劑還包括含有本領(lǐng)域已知為合適的載體的陰道栓劑、棉塞、乳劑、凝膠劑、膏劑、泡沫或噴霧制劑。

本發(fā)明化合物的用于局部或透皮給藥的劑型包括粉末、噴霧劑、軟膏、膏劑、乳劑、洗劑、凝膠、溶液、補(bǔ)片和鼻吸劑?；钚曰衔锟梢栽跓o(wú)菌條件下與藥學(xué)上可接受的載體混合，而且使用任何可能需要的防腐劑、緩沖液或推進(jìn)劑。

除了本發(fā)明的活性化合物，軟膏、膏劑、乳劑和凝膠可以包含輔料，如動(dòng)物和植物脂肪、油、蠟、石蠟、淀粉、西黃蓍膠、纖維素衍生物、聚丙二醇、有機(jī)硅、膨潤(rùn)土、硅酸、滑石和氧化鋅，或其混合物。

除了本發(fā)明的活性化合物，粉末和噴霧劑可以包含輔料，如乳糖、滑石、硅酸、氫氧化鋁、鈣硅酸鹽和聚酰胺粉，或這些物質(zhì)的混合物。噴霧劑可以另外包含常用的推進(jìn)劑，如氯氟烴和揮發(fā)性非取代碳?xì)浠衔铮缍⊥楹捅椤?br>
透皮貼劑具有向人體提供控制釋放的本發(fā)明化合物的額外優(yōu)勢(shì)。這種劑型可以通過(guò)將該化合物溶解或分散到適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)中制備。吸收促進(jìn)劑也可以被用來(lái)增加化合物穿過(guò)皮膚的通量。該通量或者是通過(guò)提供一種速率控制膜來(lái)控制，或者是通過(guò)將化合物分散到聚合物基體或凝膠中來(lái)控制。

眼用制劑，眼藥膏、粉末、溶液等等，也在本發(fā)明考慮的范圍內(nèi)。

適合非經(jīng)腸給藥的本發(fā)明藥物組合物包括本發(fā)明的一種或多種化合物以及一種或多種藥學(xué)上可接受的無(wú)菌等滲水溶液或非水溶液、分散體、懸浮體或乳液，或可在使用前被復(fù)原成無(wú)菌注射溶液或分散體的無(wú)菌粉末，它可以含有糖、醇類、抗氧化劑、緩沖劑、硫雙二氯酚、能夠使制劑與預(yù)期的受體的血液等滲的溶質(zhì)，或懸浮劑或增稠劑。

可用于本發(fā)明的藥物組合物的合適的水和非水載體的例子包括水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)及其合適的混合物，植物油如橄欖油，和可注射的有機(jī)酯如油酸乙酯。適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)性能夠得以維持，例如通過(guò)使用包衣材料如卵磷脂，通過(guò)維持分散體情況下所需的顆粒大小，以及通過(guò)使用表面活性劑。

這些組合物也可以含有輔料，如防腐劑、潤(rùn)濕劑、乳化劑和分散劑。預(yù)防微生物對(duì)主題化合物的作用可以通過(guò)采用各種抗細(xì)菌和抗真菌劑而得以確保，例如，氨甲酸芐苯酯、三氯叔丁醇、苯酚山梨酸等。在該組合物中使用等滲劑是可取的，如糖、氯化鈉等等。此外，延長(zhǎng)可注射藥物形式的吸收可以通過(guò)采用能延緩吸收的藥劑來(lái)實(shí)現(xiàn)，如單硬脂酸鉛和明膠。

在某些情況下，為了延長(zhǎng)藥物的作用，減緩皮下或肌肉注射藥物的吸收是可取的。這可以通過(guò)使用具有弱的水溶性的晶體或無(wú)定形材料的液體懸浮液來(lái)實(shí)現(xiàn)。藥物的吸收率取決于其溶出率，從而可能取決于晶體的大小和結(jié)晶形式?；蛘撸环N非腸道給藥的藥物形式的延遲吸收是通過(guò)將藥物溶解或分散在油性載體中實(shí)現(xiàn)。

可注射的儲(chǔ)存形式是通過(guò)由主題化合物在生物降解聚合物如聚乳酸-聚乙交酯中形成微膠囊基質(zhì)來(lái)制備。根據(jù)藥物對(duì)聚合物的比例，以及采用的具體聚合物的性質(zhì)，藥物釋放率是可以控制的。其他的可生物降解的聚合物的例子包括聚原酸酯和聚酸酐?？勺⑸涞膬?chǔ)存形式液可通過(guò)將藥物包裹到脂質(zhì)體或微乳液中來(lái)實(shí)現(xiàn)，它們與人體組織是相容的。

當(dāng)本發(fā)明的化合物是作為藥物制劑來(lái)向人類和動(dòng)物給藥時(shí)，它們可以其本身給藥，或以一種藥物組合物的形式給藥，其中含有例如0.1％至99％(更優(yōu)選10％至30％)的活性成分以及藥學(xué)上可接受的載體。

本發(fā)明的制劑可以經(jīng)口、注射、局部或經(jīng)直腸給予。當(dāng)然它們以與每種給藥途徑適合的形式給藥。例如，它們以藥片或膠囊的形式注射、吸入，以洗眼液、軟膏、栓劑的形式注射、灌注或吸入；洗劑或軟膏的形式局部給藥；以栓劑形式直腸給藥。優(yōu)選口腔給藥。

此處使用的“非經(jīng)腸給藥”是指區(qū)別于其他的腸內(nèi)和局部給藥的給藥方式，通常是通過(guò)注射，包括但不限于靜脈、肌肉內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、鞘內(nèi)、囊內(nèi)、眶內(nèi)、心內(nèi)、皮內(nèi)、腹膜內(nèi)、氣管內(nèi)、皮下、表皮下、關(guān)節(jié)內(nèi)、囊下、蛛網(wǎng)膜下腔、椎管內(nèi)和胸骨內(nèi)注射和輸液。

此處使用的“全身給藥”和“周邊給藥”是指化合物、藥物或其他物質(zhì)的非直接進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)的給藥方式，因此它進(jìn)入患者的身體，并且發(fā)生代謝及其他類似的過(guò)程，例如皮下給藥。

這些用于治療的化合物可通過(guò)任何合適的給藥路線向人類和其他動(dòng)物給藥，包括經(jīng)口腔、經(jīng)鼻腔例如通過(guò)噴霧、經(jīng)直腸、經(jīng)陰道、注射、池內(nèi)和局部，例如由粉末、膏劑或滴劑，包括眼頰和舌下。

不論選擇的給藥路線如何，可以合適的水合形式使用的本發(fā)明化合物和/或本發(fā)明藥物組合物通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)方法制備成藥學(xué)上可接受的劑型。

本發(fā)明的藥物組合物中活性成分的實(shí)際劑量水平可以變化，以便獲得這樣一種活性成分量它對(duì)于具體患者能夠獲得預(yù)期的治療反應(yīng)、組合物和給藥方式，并且對(duì)患者無(wú)毒性。

選擇的劑量水平將取決于多種因素，包括本發(fā)明采用的特定化合物或其酯、鹽或酰胺的活性，給藥途徑，給藥時(shí)間，采用的特定化合物的排泄或代謝速率，吸收的速度和程度，治療的周期，與采用的特定化合物結(jié)合使用的其他藥物、化合物和/或材料，被治療患者的年齡、性別、體重、病癥、總體健康狀況和之前的用藥史，以及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域公知的類似因素。

本領(lǐng)域內(nèi)有普通技能的醫(yī)生或獸醫(yī)在可容易地確定和開出所需藥物組合物的有效量。例如，醫(yī)生或獸醫(yī)開始可以開出比達(dá)到預(yù)期治療效果低的劑量的含有本發(fā)明化合物的藥物組合物，并逐漸增加劑量，直至達(dá)到預(yù)期效果。

一般來(lái)說(shuō)，本發(fā)明化合物的合適的每日劑量將是這種化合物獲得治療效果的最低有效劑量。這樣一個(gè)有效劑量一般取決于上文所述的因素。一般來(lái)說(shuō)，用于人的口腔、靜脈注射、腦室內(nèi)及皮下使用的本發(fā)明化合物的劑量，在用于鎮(zhèn)痛作用時(shí)，范圍將從約0.0001至約100毫克每公斤體重每天。

如果需要，活性化合物的有效每日劑量可分成2、3、4、5、6或6以上的分劑量，任選以單位劑量的形式在全天內(nèi)以適當(dāng)?shù)臅r(shí)間間隔分別給藥，優(yōu)選的給藥方式是每天給藥一次。

雖然本發(fā)明的化合物可以單獨(dú)給藥，但優(yōu)選將該這種化合物以藥物制劑(組合物)的形式給藥。

與其它藥物類似，本發(fā)明的化合物可配制成任何方便用于人類或獸醫(yī)給藥的形式。

在另一方面，本發(fā)明提供了藥學(xué)上可接受的組合物，其中包括治療有效量的一種或多種如上文所述的主題化合物，以及一起配制的一種或多種藥學(xué)上可接受的載體(添加劑)和/或稀釋劑。如下面的詳細(xì)說(shuō)明，本發(fā)明的藥物組合物可以特別為固體或液體形式的給藥而制備，包括適用于下列給藥形式(1)口服給藥，例如飲劑(水性或非水性溶液或懸浮液)、片劑、大丸藥、粉劑、顆粒劑、適用于舌的膏劑；(2)非經(jīng)腸給藥，例如經(jīng)皮下、肌肉、靜脈或硬膜外腔注射，例如以無(wú)菌溶液或懸浮液的形式；(3)局部施用，例如施用于皮膚、肺或粘膜的霜?jiǎng)④浉嗷驀婌F劑；或(4)陰道內(nèi)或直腸內(nèi)給藥，例如以栓劑、膏劑或泡沫形式；(5)舌下或口腔給藥；(6)眼內(nèi)給藥；(7)經(jīng)皮給藥；或(8)鼻腔給藥。

術(shù)語(yǔ)“治療”旨在還包含預(yù)防、治療及治愈。

接受這種治療的患者是任何需要的動(dòng)物，包括靈長(zhǎng)類動(dòng)物，特別是人類和其他哺乳動(dòng)物，如馬，牛，豬和綿羊；和一般的家禽及寵物。

本發(fā)明的化合物可以以其本身或與藥學(xué)上可接受的載體混合給藥，也可以結(jié)合抗菌藥物給藥，如青霉素、頭孢菌素類、氨基糖苷類和糖肽類。因此，聯(lián)合治療包括在這種活性化合物第一次給藥的藥效還沒有完全消失時(shí)就進(jìn)行后續(xù)給藥這樣一種連續(xù)的、同時(shí)的和分開的給藥。

本發(fā)明的活性化合物添加到動(dòng)物飼料中優(yōu)選這樣實(shí)現(xiàn)制備一種含有有效量的活性化合物的合適的飼料預(yù)混料，并將這種預(yù)混料混入到完全飼料中。

或者，一種含有的活性成分的半成品濃縮物或飼料添加劑可以混入飼料中。這種預(yù)混料和完全飼料的制備和給藥方式在參考書中有說(shuō)明(如″Applied Animal Nutrition″，W.H.Freedman and CO.，SanFrancisco，U.S.A.，1969 or″Livestock Feeds and Feeding″O and Bbooks，Corvallis，Ore.，U.S.A.，1977)。

膠束
最近，制藥業(yè)引入了微乳液技術(shù)以提高一些親脂性(水不溶性)藥劑的生物利用度。例子包括Trimetrine(Dordunoo，S.K.，et al.，Drug Development and Industrial Pharmacy，17(12)，1685-1713，1991and REV 5901(Sheen，P.C.，et al.，J Pharm Sci 80(7)，712-714，1991)。除其他事項(xiàng)外，微乳劑通過(guò)優(yōu)先直接吸收到淋巴系統(tǒng)而非循環(huán)系統(tǒng)提供了增強(qiáng)的生物利用度，從而繞過(guò)肝臟，并防止該化合物在肝膽循環(huán)中被破壞。

在本發(fā)明的一方面，制劑含有本發(fā)明的一種化合物和至少一種雙親載體形成的膠束，其中該膠束具有一個(gè)小于約100nm的平均直徑。更優(yōu)選的是提供的膠束具有一個(gè)小于約50nm的平均直徑，最優(yōu)選的是提供的膠束具有一個(gè)小于約30nm的平均直徑，或甚至小于約20nm。

雖然考慮到所有合適的雙親載體，但是目前優(yōu)選的載體一般還是通常那些公認(rèn)無(wú)毒(GRAS)的，它們能夠增溶本發(fā)明的化合物并且在后期與一種復(fù)合的水相(如出現(xiàn)于人類胃腸道中的)接觸時(shí)能夠乳化該化合物。通常，滿足這些要求的兩親成分具有的HLB(親水對(duì)親脂性的平衡)值是2-20，其結(jié)構(gòu)包含C-6至C-20范圍內(nèi)的直鏈脂肪族原子團(tuán)。例如聚乙烯-乙二醇化的(glycolized)脂肪酸甘油酯和聚丙二醇。

特別優(yōu)選的兩親性載體是飽和和單不飽和聚乙二醇化的(polyethyleneglycolyzed)脂肪酸甘油酯，例如那些完全或部分氫化的各種植物油中獲得的。這種油可能有利地由相應(yīng)脂肪酸的3-、2-和單-脂肪酸甘油酯以及2-和單聚乙二醇酯組成，特別優(yōu)選的脂肪酸組合物包括癸酸4-10％、癸酸3-9％、月桂酸40-50％、肉豆蔻酸14-24％、棕櫚酸4-14％和硬脂酸5-15％。另一類有用的兩親性載體包括部分酯化的失水山梨醇和/或山梨醇，以及飽和或單不飽和脂肪酸(司班系列)或相應(yīng)的乙氧基類似物(吐溫系列)。

可商購(gòu)的雙親載體是特別考慮的，包括單硬脂酸甘油脂系列，油酰聚異二醇甘油酯，辛酸葵酸聚乙二醇甘油酯，或lauroglycol(均由法國(guó)Gattefosse Corporation，Saint Priest制造和銷售)，聚乙二醇單油酸，聚乙二醇-二油酸，聚乙二醇-單月桂酸和二月桂酸，卵磷脂，聚山梨醇酯80等(由多個(gè)美國(guó)及世界各地的公司制造和銷售)。

聚合物
適合用于本發(fā)明的親水性聚合物是那些易溶于水、可以共價(jià)連接到一個(gè)囊泡形成的脂質(zhì)上并且在體內(nèi)是能容忍的、無(wú)毒性效應(yīng)的(即生物相容的)聚合物。合適的聚合物包括聚乙二醇(PEG)、聚乳酸(也稱為聚丙交酯)、聚羥基乙酸(也稱為聚乙交酯)、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物、聚乙烯醇。優(yōu)選的聚合物是分子量從約100或120道爾頓到最多約5000或10000道爾頓，更優(yōu)選從約300道爾頓到約5000道爾頓。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，聚合物是一個(gè)分子量從約100到約5000道爾頓的聚乙二醇，更優(yōu)選分子量從約300至約5000道爾頓。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，聚合物是750道爾頓的聚乙二醇(PEG(750))。聚合物也可以由其中的單體數(shù)目定義；本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中使用至少約3個(gè)單體的聚合物，例如含有三個(gè)單體的PEG聚合物(約150道爾頓)。

其他適合用于本發(fā)明的親水性聚合物包括聚乙烯吡咯烷酮、聚甲噁唑啉(polymethoxazoline)、聚乙噁唑啉(polyethyloxazoline)、聚羥丙基異丁烯酰胺、聚甲基丙烯酰胺、聚二甲基丙烯酰胺、纖維素衍生物如羥甲基纖維素或羥乙基纖維素。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的制劑包括一種選自以下的生物相容性聚合物聚酰胺、聚碳酸酯、聚烯類聚合物、丙烯酸和甲基丙烯酸酯的聚合物、聚乙烯聚合物、聚乙交酯、聚硅氧烷、聚氨酯和它們的共聚物、纖維素、聚丙烯、聚乙烯、聚苯乙烯、乳酸和乙醇酸的聚合物、聚酸酐、聚(鄰)酯、聚(丁酸)、聚(戊酸)、聚(丙交酯-己內(nèi)酯)、多糖、蛋白質(zhì)、透明質(zhì)酸、聚腈基丙烯酸酯，以及它們的共混物、混合物或共聚物。

環(huán)糊精
環(huán)糊精是環(huán)狀寡糖，含有6、7或8個(gè)葡萄糖單元，由希臘字母α、β或γ分別命名。未知存在少于6葡萄糖單元的環(huán)糊精。葡萄糖單元由α-1，4-葡萄糖苷鍵聯(lián)接。作為一個(gè)糖單元的椅型構(gòu)象的結(jié)果，所有仲羥基(在C-2和C-3)位于環(huán)的一側(cè)，而所有在C-6的伯羥基位于另一側(cè)。因此，外部表面是親水性的，使環(huán)糊精具有水溶性。與此相反，環(huán)糊精的內(nèi)腔是疏水性的，因?yàn)樗鼈兣帕杏蠧-3和C-5的氫原子和類乙醚氧。這些基質(zhì)允許它與各種相對(duì)疏水性化合物絡(luò)合，其中包括例如類固醇化合物，如17-β-雌二醇(例如，見Van Udenet al.Plant Cell Tiss.Org.Cult.381-3-113(1994))。該絡(luò)合由范德華相互作用和氫鍵的形成而發(fā)生。對(duì)于環(huán)糊精化學(xué)性質(zhì)的一般性綜述見Wenz，Agnew.Chem.Int.Ed.Engl.，33803-822(1994)。

環(huán)糊精衍生物的物理化學(xué)性質(zhì)強(qiáng)烈地取決于種類和取代的程度。例如，它們?cè)谒械娜芙舛葟牟蝗苄?例如三乙?；?β-環(huán)糊精)到147％可溶性(w/v)(G-2-β-環(huán)糊精)。此外，它們?nèi)苡谠S多有機(jī)溶劑。環(huán)糊精的性質(zhì)使得能夠通過(guò)增加或減少各種制劑組分的溶解度來(lái)控制其溶解度。

很多環(huán)糊精和其制備方法已被記載。例如Parmeter(I)等(美國(guó)專利號(hào)3,453,259，通過(guò)引用納入本文)和Gramera等(美國(guó)專利號(hào)3,459,731，通過(guò)引用納入本文)所描述的電中性環(huán)糊精。其他衍生物包括具有陽(yáng)離子性能的環(huán)糊精[Parmeter(II)，美國(guó)專利號(hào)3,453,257，通過(guò)引用納入本文]、不溶的交聯(lián)環(huán)糊精(Solms，美國(guó)專利號(hào)3,420,788，通過(guò)引用納入本文)，以及具有陰離子性能的環(huán)糊精[Parmeter(III)，美國(guó)專利號(hào)3,426,011，通過(guò)引用納入本文]。其中在具有陰離子性能的環(huán)糊精中，羧酸、次磷酸、亞磷酸、膦酸、磷酸、硫代膦酸、硫代亞磺酸(thiosulphinic)、磺酸被附加到環(huán)糊精母體上[見上述的Parmeter(III)]。此外，環(huán)糊精磺烷基化衍生物已被Stella等所描述。(美國(guó)專利號(hào)5,134,127，通過(guò)引用納入本文)。

脂質(zhì)體
脂質(zhì)體由至少一種脂類雙層膜組成，所述雙層膜圍成一個(gè)水性內(nèi)部隔間。脂質(zhì)體可通過(guò)膜的類型和大小來(lái)表征。小的單層囊泡(SUVs)具有單個(gè)膜，并且直徑范圍通常在0.02和0.05μm之間；單層大囊泡(LUVS)通常大于0.05μm。寡層大囊泡和多層囊泡有多層膜，通常為同心膜，并且通常大于0.1μm。具有非同心膜的脂質(zhì)體，即幾個(gè)較小的囊泡包裹在一個(gè)較大的囊泡中，被稱為多囊泡。

本發(fā)明的一個(gè)方面涉及含有脂質(zhì)體的制劑，所述脂質(zhì)體含有一種本發(fā)明的化合物，其中制備脂質(zhì)體膜以提供具有提高的負(fù)載能力的脂質(zhì)體。作為選擇或者替代，本發(fā)明的化合物可以包含在脂質(zhì)體的脂質(zhì)體雙層內(nèi)，或吸附在脂質(zhì)體的脂質(zhì)體雙層上。本發(fā)明的化合物可以與脂質(zhì)表面活性劑聚集并在脂質(zhì)體內(nèi)部空間運(yùn)載；在這些情況下，制備的脂質(zhì)體膜抵制活性劑-表面活性劑聚集體的破壞效應(yīng)。

根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案，一個(gè)脂質(zhì)體的脂雙層包含用聚乙二醇(PEG)衍生的脂，如PEG鏈從脂雙層的內(nèi)表面延伸進(jìn)入被脂質(zhì)體包裹的室內(nèi)空間，并從脂雙層的外部延伸進(jìn)入周邊環(huán)境。

包含在本發(fā)明的脂質(zhì)體中的活性劑是溶解的形式。表面活性劑和活性劑的聚集體(如含有相關(guān)活性劑的乳液或膠束)根據(jù)本發(fā)明可包埋在脂質(zhì)體的室內(nèi)空間。表面活性劑起分散和增溶該活性劑的作用，并可以選自任何合適的脂肪族、環(huán)脂肪族或芳香族表面活性劑，包括但不限于不同鏈長(zhǎng)的、生物相容性的溶血磷脂膽堿(LPCS)(例如從約C.sub.14到C.sub.20)。聚合物衍生的脂，如PEG-脂也可用于膠束形成，因?yàn)樗鼈兤鹨种颇z束/膜融合的作用，并且將聚合物添加到表面活性劑分子中降低了表面活性劑的CMC并有助于膠束的形成。優(yōu)選的表面活性劑的CMC在微摩爾范圍內(nèi)；較高CMC的表面活性劑可以用來(lái)制備包埋在本發(fā)明脂質(zhì)體中的膠束，然而，膠束表面活性劑單體可能影響脂質(zhì)體雙層的穩(wěn)定，并且是設(shè)計(jì)一個(gè)理想的穩(wěn)定性的脂質(zhì)體的一個(gè)因素。

根據(jù)本發(fā)明的脂質(zhì)體可以通過(guò)任何本領(lǐng)域公知的各種技術(shù)來(lái)制備。見美國(guó)專利號(hào)第4,235,871；公布的PCT申請(qǐng)WO 96/14057，兩者都通過(guò)引用納入本說(shuō)明書；New RRC，LiposomesA practicalapproach，IRL Press，Oxford(1990)，pages 33-104；Lasic DD，Liposomes from physics to applications，Elsevier Science PublishersBV，Amsterdam，1993。

例如，本發(fā)明的脂質(zhì)體可通過(guò)將一種親水性聚合物衍生的脂擴(kuò)散到預(yù)先形成的脂質(zhì)體中而制備，如將預(yù)先形成的脂質(zhì)體暴露到脂質(zhì)接枝聚合物組成的膠束中，其中脂質(zhì)濃度對(duì)應(yīng)于脂質(zhì)體中所需要的衍生脂的最終摩爾百分?jǐn)?shù)。含有親水性聚合物的脂質(zhì)體也可以通過(guò)本領(lǐng)域公知的勻漿化、脂質(zhì)場(chǎng)水化或擠出技術(shù)而形成。

在另一個(gè)示例性的制備方法中，活性劑首先由超聲波分散在一種容易增溶疏水分子的溶血磷脂酰膽堿或其他低CMC的表面活性劑(包括聚合物接枝的脂)中。由此產(chǎn)生的活性劑的膠束懸浮體隨后用再水化一個(gè)干的脂樣本，該樣品含有一種合適的摩爾百分比的聚合物接枝脂或膽固醇。脂質(zhì)和活性劑懸浮體再利用本領(lǐng)域公知的擠出技術(shù)形成脂質(zhì)體，并將得到的脂質(zhì)體由標(biāo)準(zhǔn)柱分離從未包裹的溶液中分離出來(lái)。

在本發(fā)明的一個(gè)方面，制備的脂質(zhì)體在選定的尺寸范圍內(nèi)有大致均勻的尺寸。一個(gè)有效的成粒方法包括將脂質(zhì)體的水性懸浮體擠壓通過(guò)一系列具有選定的均一孔徑的聚碳酸酯膜；膜的孔徑將對(duì)大致對(duì)應(yīng)于通過(guò)擠出所產(chǎn)生的脂質(zhì)體的最大尺寸。見美國(guó)專利4,737,323，其通過(guò)引用納入本說(shuō)明書。

釋放調(diào)節(jié)物
本發(fā)明制劑的釋放特點(diǎn)依賴于封裝材料、封裝藥物濃度以及釋放調(diào)節(jié)物的存在。例如，可以將釋放操縱成pH值依賴性，例如，使用pH敏感包衣使其只在低pH值如胃，或較高pH值如腸道中時(shí)才釋放。一種腸溶衣可以用來(lái)防止釋放發(fā)生，直到通過(guò)胃以后才釋放。多種包衣或包裹在不同材料中的氰胺的混合物可以用來(lái)獲得在胃中的初步釋放，然后在腸道中進(jìn)行后續(xù)釋放。釋放可以通過(guò)引入鹽或成孔劑來(lái)操縱，它們可以提高水的吸收或藥物通過(guò)從膠囊中擴(kuò)散而釋放。能夠調(diào)節(jié)藥物溶解性的輔料也可以被用來(lái)控制釋放速率。也可以加入增加基質(zhì)降解或從基質(zhì)中釋放的試劑。它們可以添加到藥物中，作為單獨(dú)的相加入(即作為粒子)，或者根據(jù)有關(guān)化合物共同溶解在聚合物相中。在所有情況中，量應(yīng)介于0.1和30％(w/w聚合物)之間。降解促進(jìn)劑的類型包括無(wú)機(jī)鹽如硫酸銨和氯化銨，有機(jī)酸如檸檬酸、苯甲酸、抗壞血酸，無(wú)機(jī)堿如碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸鈣、碳酸鋅和氫氧化鋅，有機(jī)堿如硫酸魚精蛋白、精胺、膽堿、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺和表面活性劑，如Tween.RTM和Pluronic.RTM。能夠增加基質(zhì)微孔結(jié)構(gòu)的成孔劑(即水溶性化合物，如無(wú)機(jī)鹽和糖)以微粒方式加入。范圍應(yīng)介于1和30％(w/w聚合物)之間。

通過(guò)改變粒子在腸道的停留時(shí)間也可以操縱藥物的吸收。這可以例如通過(guò)以下方式實(shí)現(xiàn)用一種粘膜粘性聚合物涂敷這些粒子，或?qū)⑵溥x擇為封裝材料。實(shí)例包括大多數(shù)具有游離羧基的聚合物，如殼聚糖、纖維素，特別是聚丙烯酸酯(此處使用的聚丙烯酸酯是指含有丙烯酸酯基團(tuán)和改性丙烯酸酯基團(tuán)的聚合物，如氰丙烯酸鹽粘結(jié)劑和異丁烯酸鹽)。

組合文庫(kù)
主題化合物可以使用此部分所描述的組合合成法來(lái)合成?；衔锏慕M合文庫(kù)可用于篩選藥物、農(nóng)藥或其他生物學(xué)或醫(yī)學(xué)相關(guān)的活性物質(zhì)或材料相關(guān)的性質(zhì)。用于本發(fā)明目的的一個(gè)組合文庫(kù)是一種在化學(xué)上相關(guān)的化合物的混合物，它們可以為一種需要的性質(zhì)而被共同篩選；這種化合文庫(kù)可以是液體或共價(jià)連接到固體載體上。在一個(gè)單一反應(yīng)中制備許多相關(guān)的化合物能大大減少和簡(jiǎn)化需要進(jìn)行的篩選過(guò)程的數(shù)量。用于合適的生物、醫(yī)藥、農(nóng)藥或物理性質(zhì)的篩選可通過(guò)常規(guī)方法進(jìn)行。

化合物庫(kù)中的多樣性可以在各種不同層次上被創(chuàng)造。例如，用于組合方法中的基底芳香族基團(tuán)可以是芳香核具有多樣性的，例如環(huán)結(jié)構(gòu)的變化，和/或可以就其他取代基而變化。

在本領(lǐng)域多種技術(shù)都可以用于生成有機(jī)小分子的組合的化合物庫(kù)。例如，見Blondelle等人(1995)的Trends Anal.Chem.1483；Affymax的美國(guó)專利5,359,115和5,362,899Ellman的美國(guó)專利5,288,514Still等人的PCT公開文本W(wǎng)O 94/08051，其中均通過(guò)引用納入本說(shuō)明書；Chen等人(1994)JACS 1162661Kerr等(1993)JACS 115252；PCT公開文本W(wǎng)O92/10092、WO93/09668和WO91/07087；Lerner等的PCT公開文本W(wǎng)O93/20242，其中均通過(guò)引用納入本說(shuō)明書)。因此，約16至1,000,000甚至更多多樣體量級(jí)的各種化合物庫(kù)能被合成并篩選特定的活性或性質(zhì)。

在一個(gè)示例性實(shí)施方案中，一種取代的多樣體(diversomers)化合物庫(kù)可以采用Still等人在PCT公開文本W(wǎng)O 94/08051中描述的技術(shù)利用主題反應(yīng)合成，例如通過(guò)一個(gè)水解或光解基團(tuán)被連接到聚合物珠上，例如定位于底物的一個(gè)位置上。根據(jù)Still等人的技術(shù)，化合物庫(kù)是在一套珠子上合成，每個(gè)珠子包括一套識(shí)別珠子上的具體多樣體的標(biāo)簽。在一個(gè)特別適于發(fā)現(xiàn)酶抑制劑的實(shí)施方案中，珠子可以分散在一個(gè)滲透膜表面上，并且多樣體通過(guò)與珠子的連接的裂解而從珠子中釋放出來(lái)。從每個(gè)珠子釋放出的多樣體將擴(kuò)散穿過(guò)膜到測(cè)定區(qū)，在那里將與一種酶試樣相互作用。一些組合方法的詳細(xì)描述在下面提供。

A.直接表征
組合化學(xué)領(lǐng)域的一個(gè)發(fā)展趨勢(shì)是例如技術(shù)的敏感性，如質(zhì)譜(MS)，它可以用來(lái)表征亞毫微微摩爾量的化合物，并直接確定從組合的化合物庫(kù)中選出的一種化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。例如，如果化合物庫(kù)是被提供在不溶性的支持基質(zhì)上，個(gè)別化合物可以先從載體釋放出來(lái)并由MS表征。在其他的實(shí)施方案中，作為MS樣品制備技術(shù)的一部分，諸如MALDI的MS技術(shù)可被用來(lái)從載體中釋放出化合物，尤其是當(dāng)最初是一種不穩(wěn)定鍵用連接該化合物和載體。例如，一種從化合物庫(kù)選定的珠子可以在一個(gè)MALDI步驟中被輻射以便從載體中釋放多樣體，并且將該多樣體離子化以用于MS分析。

B.多中心合成法
主題方法的化合物庫(kù)可以采取多中心化合物庫(kù)格式。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，Geysen和合作者(Geysen et al.(1984)PNAS 813998-4002)引入了一種方法用于生成化合物庫(kù)，它是通過(guò)一種在排列成微孔板格式的聚丙烯酸接枝的聚乙烯針腳上的平行合成法。該Geysen技術(shù)使用多中心方法每星期可合成和篩選成千上萬(wàn)的化合物，并且連接的化合物可在許多檢測(cè)中重復(fù)使用。一些適當(dāng)?shù)倪B接部分(linker moieties)也可以被懸掛到針腳上，從而使該化合物在合成后可從載體上斷裂用于純化鑒定和進(jìn)一步的評(píng)價(jià)(c.f.，Bray et al.(1990)Tetrahedron Lett315811-5814；Valerio et al.(1991)Anal Biochem 197168-177；Brayet al.(1991)Tetrahedron Lett 326163-6166)。

C.分開-連接-再結(jié)合
在再一個(gè)實(shí)施方案中，利用分開-連接-再結(jié)合的策略能夠在一套珠子上提供一種多樣化的化合物庫(kù)(例如，見Houghten(1985)PNAS 825131-5135；美國(guó)專利4,631,211、5,440,016、5,480,971，其通過(guò)引用納入本說(shuō)明書)。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，顧名思義，在簡(jiǎn)并被引入到化合物庫(kù)的每一個(gè)合成步驟中，珠子被分為獨(dú)立的組，所述組的數(shù)目等于將要加在化合物庫(kù)中某一特定的位置的不同取代基的數(shù)目，不同的取代基與各反應(yīng)配對(duì)，并且珠子重組成為一個(gè)庫(kù)用于下一個(gè)重復(fù)。

在一個(gè)實(shí)施方案中，分開-連接-再結(jié)合的策略可以使用類似的首先由Houghten開發(fā)的稱為“茶葉袋”的方法進(jìn)行，其中化合物的合成發(fā)生在樹脂密封的多孔聚丙烯袋的內(nèi)部(Houghten et al.(1986)PNAS 825131-5135)。通過(guò)將這些袋子放入合適的反應(yīng)溶液中，取代基與負(fù)載化合物的樹脂連接，而所有的共同步驟，如樹脂的洗滌和脫保護(hù)，同時(shí)在一個(gè)反應(yīng)釜中發(fā)生。在合成最后，每個(gè)袋包含單一的化合物。

D.通過(guò)光定向、可空間定位的并行化學(xué)合成的組合化合物庫(kù)
一種組合合成的方案，其中一種化合物是通過(guò)它在一種合成基質(zhì)上的定位來(lái)鑒定，被稱為可空間定位合成。在一個(gè)實(shí)施方案中，組合過(guò)程的進(jìn)行是通過(guò)控制化學(xué)試劑加入到固相載體的特定位點(diǎn)來(lái)控制(Dower et al.(1991)Annu Rep Med Chem 26271-280；Fodor，S.P.A.(1991)Science 251767；Pirrung et al.(1992)美國(guó)專利號(hào)5,143,854，通過(guò)引用納入本說(shuō)明書；Jacobs et al.(1994)TrendsBiotechnol 1219-26)。光照平板印刷術(shù)的空間分辨率提供了小型化。這種技術(shù)可以通過(guò)使用與光敏保護(hù)團(tuán)體的保護(hù)/脫保護(hù)反應(yīng)來(lái)進(jìn)行。

這種技術(shù)的要點(diǎn)在Gallop等人的(1994)J Med Chem371233-1251中說(shuō)明。制備一種合成基底用于連接，所述連接是通過(guò)共價(jià)連接光敏的硝基二甲氧芐基氧羰基(NVCO)保護(hù)的氨基連接物或其他光敏連接物。光被用來(lái)選擇性地激活合成基底的一個(gè)用于連接的特定區(qū)域。通過(guò)光去除光敏的保護(hù)基團(tuán)(脫保護(hù))導(dǎo)致選定的區(qū)域的激活。激活后，首先是一組氨基酸類似物被暴露于整個(gè)表面，每個(gè)在末端氨基上載有光敏保護(hù)基團(tuán)。連接只發(fā)生在先前步驟中由光定位的區(qū)域。反應(yīng)停止后，將板洗滌，并且該基底通過(guò)第二套掩蔽物照射，激活用于與第二保護(hù)的構(gòu)件(building block)反應(yīng)的不同地區(qū)。掩蔽物的圖案及反應(yīng)物的順序確定了產(chǎn)品和他們的位置。由于這個(gè)過(guò)程中利用了光照平板印刷術(shù)，可以合成的化合物的數(shù)目?jī)H僅受到能夠以合適的分辨率定位的合成位點(diǎn)的數(shù)目的限制這。每個(gè)化合物的位點(diǎn)是精確可知的；因此，它與其他分子的相互作用可直接進(jìn)行評(píng)價(jià)。

在一種光定位的化學(xué)合成中，產(chǎn)物依賴于光照的圖案和反應(yīng)物的加入順序。通過(guò)改變光照?qǐng)D案，有很多套不同的測(cè)試化合物可以同時(shí)合成；這一特點(diǎn)導(dǎo)致許多不同的掩蔽策略的產(chǎn)生。

E.編碼的組合文庫(kù)
在另一個(gè)實(shí)施方案中的，主題方法采用了擁有一種編碼的標(biāo)記系統(tǒng)的一個(gè)化合物庫(kù)。從組合文庫(kù)中鑒定活性化合物的最近的進(jìn)展采用了多種利用標(biāo)簽的化學(xué)索引系統(tǒng)，這些標(biāo)簽對(duì)于一個(gè)給定的珠粒所經(jīng)歷的反應(yīng)步驟(以及經(jīng)推斷它所攜帶的結(jié)構(gòu))唯一地進(jìn)行編碼。從概念上來(lái)說(shuō)，這種做法模仿噬菌體展示庫(kù)，其中活性來(lái)自表達(dá)的多肽，但活性多肽的結(jié)構(gòu)是從相應(yīng)的基因組DNA序列推導(dǎo)出的。合成組合文庫(kù)的第一編碼利用DNA作為代碼。各種其他形式的編碼已有報(bào)道，包括用可測(cè)序的生物寡聚物編碼(例如寡核苷酸和多肽)，以及帶有外加的非可測(cè)序標(biāo)記的二元編碼。

1.用可測(cè)序的生物寡聚物標(biāo)記
利用寡核苷酸編碼組合的合成化合物庫(kù)的原理在1992年被說(shuō)明(Brenner et al.(1992)PNAS 895381-5383)，并且這種化合物庫(kù)的一個(gè)實(shí)例出現(xiàn)在第二年(Needles et al.(1993)PNAS9010700-10704)。一個(gè)名義上是77(＝823543)的組合文庫(kù)的多肽包括了Arg、Gln、Phe、Lys、Val、D-Val和Thr(三字母的氨基酸代碼)的所有組合，其中每個(gè)由一特定的二核苷酸編碼(分別是TA、TC、CT、AT、TT、CA和AC)，該庫(kù)通過(guò)一系列的交替輪回的多肽和寡核苷酸在固相載體上的合成制備。在這個(gè)工作中，胺在珠粒上連接的官能團(tuán)特別地區(qū)別于多肽或寡核苷酸的合成，這是通過(guò)同時(shí)用試劑孵育珠粒，所述試劑產(chǎn)生用于寡核苷酸合成的保護(hù)的OH基團(tuán)和用于多肽合成的保護(hù)的NH2(此處，以1∶20的比例)。當(dāng)完成后，每個(gè)標(biāo)簽含有69-mers，其中14個(gè)單位帶有代碼。該連有珠粒的化合物庫(kù)與熒光標(biāo)記抗體孵育，并且含有連接強(qiáng)烈發(fā)熒光的抗體珠粒通過(guò)熒光激活的細(xì)胞儀(FACS)分選。DNA標(biāo)簽通過(guò)PCR擴(kuò)增，測(cè)序，并預(yù)測(cè)合成的多肽。通過(guò)這些技術(shù)，能夠派生出用于主題方法的化合物庫(kù)，其中標(biāo)簽的寡核苷酸序列鑒定具體的珠粒經(jīng)歷的該連續(xù)的組合反應(yīng)，從而提供珠粒上的化合物的鑒定。

寡核苷酸標(biāo)簽的使用允許非常敏感的標(biāo)記分析。即使如此，該方法需要仔細(xì)選擇標(biāo)記和化合物庫(kù)成員的交替合成所需的保護(hù)基團(tuán)的正交集。此外，標(biāo)簽的化學(xué)不穩(wěn)定性，尤其是磷酸基和糖的異頭連接，可能會(huì)限制能夠用于非低聚物庫(kù)的合成的試劑和條件的選擇。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，化合物庫(kù)采用允許用于測(cè)定的測(cè)試化合物庫(kù)成員選擇性剝離的連接體。

多肽也被用作組合文庫(kù)的標(biāo)記分子。兩種示例性的方法在本領(lǐng)域已經(jīng)被描述，這兩種都采用連接到固相上的支化連接體，其中編碼和配基鏈?zhǔn)禽喠髦谱鞯摹Ｔ诘谝环N方法(Kerr JM et al.(1993)J AmChem Soc 1152529-2531)中，合成的正交性的取得是通過(guò)采用用于編碼鏈的酸不穩(wěn)定保護(hù)和用于化合物鏈的堿不穩(wěn)定保護(hù)。

在另一種可選擇的方法中(Nikolaiev et al.(1993)Pept Res6161-170)，采用支化連接體，使得編碼單元和試驗(yàn)化合物都能連接到相同的官能團(tuán)的樹脂上。在一個(gè)實(shí)施方案中，一種可斷裂的連接體可以放在分支點(diǎn)和珠之間，從而使斷裂釋放的一個(gè)分子含有代碼和化合物(Ptek et al.(1991)Tetrahedron Lett 323891-3894)。在另一實(shí)施方案中，可斷裂的連接體可以使測(cè)試化合物可以選擇性地與珠分離，留下代碼。后一構(gòu)造是特別有價(jià)值的，因?yàn)樗试S篩選測(cè)試化合物，而沒有編碼基團(tuán)的干擾。本領(lǐng)域中獨(dú)立的斷裂和肽庫(kù)成員的序列分析及它們相應(yīng)的標(biāo)記的例子已經(jīng)證明該標(biāo)簽?zāi)芫_的預(yù)測(cè)多肽的結(jié)構(gòu)。

2.非可測(cè)序的標(biāo)記二元編碼
一種可選擇的編碼測(cè)試化合物庫(kù)的形式采用了一套非可測(cè)序的、被用作一種二元代碼的電泳標(biāo)記分子(Ohlmeyer et al.(1993)PNAS 9010922-10926)。示例性的標(biāo)記是鹵代芳香烷基醚，由于它的三甲基硅醚，它在少于毫微微摩爾的水平可用電子俘獲氣相色譜(ECGC)檢測(cè)。烷基鏈長(zhǎng)度的變化以及芳族鹵化物的性質(zhì)和位置允許至少40種這樣標(biāo)簽的合成，這在原理上可以編碼240(例如，達(dá)到1012)種不同的分子。在最初的報(bào)道中(Ohlmeyer et al.，如上)通過(guò)可光斷裂的鄰硝基苯連接體，標(biāo)簽結(jié)合到一種多肽庫(kù)中約1％的有效胺基上。當(dāng)制備類多肽或其他含胺分子的組合的化合物庫(kù)時(shí)，這種途徑是方便的。不過(guò)，一種更通用的體系已經(jīng)開發(fā)出來(lái)，其允許編碼實(shí)際上任何組合的化合物庫(kù)。在此，化合物將通過(guò)可光斷裂的連接體連接到固相載體上，并且該標(biāo)記是通過(guò)一種鄰苯二酚醚連接體通過(guò)聚炔插入到珠?；|(zhì)上(Nestler et al.(1994)J Org Chem 594723-4724)。這種正交的結(jié)合策略允許溶液中的用于檢測(cè)的化合物庫(kù)成員選擇性脫離，并在標(biāo)記集氧化脫離后通過(guò)ECGC解碼。

雖然在本領(lǐng)域中有幾個(gè)酰胺相連化合物庫(kù)采用有連接到胺基的電泳標(biāo)記的二元編碼，直接連接這些標(biāo)記到珠基質(zhì)在可以在編碼組合文庫(kù)中制備的結(jié)構(gòu)上提供了更大的通用性。以這種方式連接，標(biāo)簽和它們的連接體是像珠?；|(zhì)一樣接近惰性。二元編碼的組合的化合物庫(kù)已報(bào)道，其中電泳標(biāo)記是直接連接到固相(Ohlmeyer et al.(1995)PNAS 926027-6031)，并為生成主體化合物庫(kù)提供指導(dǎo)。這兩個(gè)化合物庫(kù)是使用正交的連接策略構(gòu)成的，其中的化合物庫(kù)成員通過(guò)光敏連接體連接到固相載體，并且標(biāo)簽是通過(guò)交聯(lián)劑的強(qiáng)烈氧化斷裂被連接上。因?yàn)榛衔飵?kù)的成員可以重復(fù)地、局部地從固相載體上光洗脫下來(lái)，所以化合物庫(kù)的成員可以用于多重檢測(cè)。連續(xù)的光洗脫也允許一種非常高通量的反復(fù)篩選策略首先，多重珠粒被放置在96孔微孔板；其次，將化合物部分分離并轉(zhuǎn)移至測(cè)試板；第三，一種金屬結(jié)合分析法確定活性孔；第四，相應(yīng)的珠粒單獨(dú)的被重新排列到新的微孔板中；第五，單個(gè)的活性化合物被鑒定；第六，將結(jié)構(gòu)解碼。 參考文獻(xiàn)1.Pentchev，P.，Vanier，MT.，Suzuki，K.，and Patterson，MC.1995.Niemann-Pick Disease type CCellular cholesterol lipidosis.New YorkMcGraw-Hill.2625-2639 pp.2.Li，H.，Repa，J.J.，Valasek，M.A.，Beltroy，E.P.，Turley，S.D.，German，D.C.，and Dietschy，J.M.2005.Molecular，anatomical，andbiochemical events associated with neurodegeneration in mice withNiemann-Pick type C disease.J 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現(xiàn)在對(duì)本發(fā)明進(jìn)行一般性描述，通過(guò)參考以下的實(shí)施例它將更容易被理解，這些實(shí)施例只是為了說(shuō)明本發(fā)明的某些方面和實(shí)施方案，并不用于限制本發(fā)明。

實(shí)例1菲里平結(jié)合檢測(cè)
我們發(fā)展了利用菲里平用于校正在CHO細(xì)胞系中NPC的表型的測(cè)定法，它能結(jié)合到非酯化膽固醇，并已用于NPC細(xì)胞中自由膽固醇含量的可視化。最初的篩選是在CT60細(xì)胞中進(jìn)行的，它表達(dá)一種突變的倉(cāng)鼠NPC1蛋白和一種SCAP中的功能基因突變的增益(42)。這些細(xì)胞不能把低密度脂蛋白衍生出的膽固醇從晚期內(nèi)涵體運(yùn)輸出來(lái)，并且大量的膽固醇積聚在LSO區(qū)室。圖1A-B顯示的是在一種對(duì)照CHO細(xì)胞株TRVb1(45)(圖1A)及在CT60細(xì)胞(圖1B)中菲里平染色的圖像?？梢钥闯觯珻T60細(xì)胞比對(duì)照細(xì)胞顯示更多的菲里平染色并且在CT60細(xì)胞中的熒光是集中在核周圍的細(xì)胞器中。

為了篩選，使用有10倍物鏡的Discovery-1自動(dòng)顯微鏡系統(tǒng)來(lái)獲得圖像并且按方法中所述來(lái)校正背景和陰影。設(shè)定兩個(gè)閾值用于菲里平染色，低閾值包括所有細(xì)胞區(qū)域，高閾值用于核周圍LSOs中強(qiáng)烈的菲里平染色。設(shè)定的閾值用于每塊板的32個(gè)孔中未經(jīng)處理的CT60細(xì)胞的64個(gè)圖像的分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，同樣的閾值可用于一個(gè)實(shí)驗(yàn)中的多塊板，但閾值會(huì)隨不同方式進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)有所不同。在低閾值的顯影中，我們比較了基于有透射光圖像的閾值后的細(xì)胞圖像，并且這些閾值提供了與透射光細(xì)胞界限良好的一致性。

作為一種菲里平染色強(qiáng)度的簡(jiǎn)單測(cè)量，我們測(cè)量了閾值以上的每像素的菲里平強(qiáng)度。調(diào)整菲里平標(biāo)記(濃度和時(shí)間)條件以優(yōu)化CT60細(xì)胞和對(duì)照TRVb1細(xì)胞之間的區(qū)別。如圖1C所示，這種簡(jiǎn)單的方法提供了CT60細(xì)胞和TRVb1細(xì)胞之間的一個(gè)相當(dāng)高程度的辨別力。用于篩選的該方法的特性以統(tǒng)計(jì)參數(shù)Z′來(lái)表示(46) Z′＝1-(3σc++3σc-)/|μc+-μc-|
其中σc+和σc-是陽(yáng)性和陰性對(duì)照數(shù)據(jù)組的標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD)并且集σc+和σc-是陽(yáng)性和陰性對(duì)照的平均值。利用CT60對(duì)TRVb1細(xì)胞的平均菲里平強(qiáng)度計(jì)算的Z′值為0.22，這通常被認(rèn)為作大規(guī)模的篩選是不適當(dāng)?shù)?，因?yàn)楫?dāng)大量的孔被篩選時(shí)兩個(gè)分布預(yù)期會(huì)重疊。

雖然強(qiáng)度檢測(cè)可能有用，似乎更多的圖像信息可以提供更好的野生型對(duì)NPC細(xì)胞的區(qū)別。為此，我們利用了LSOs的菲里平標(biāo)記的空間分布，它們集中在核附近(圖1B)。我們對(duì)這些明亮的聚集應(yīng)用第二種更高的閾值。應(yīng)用這些閾值的一個(gè)例子如圖2所示。然后，我們測(cè)量選定的LSO的總的熒光強(qiáng)度(高閾值，圖2C)除以細(xì)胞中總像素的數(shù)目(低閾值，圖2D)。如圖1所示，這種LSO區(qū)室測(cè)定法給出了更強(qiáng)的CT60對(duì)比對(duì)照細(xì)胞的Z′值為0.61的辨別力。

使用上述篩選技術(shù)，我們篩選了14956種化合物的化合物庫(kù)添加到細(xì)胞16小時(shí)，終濃度為10μM，每種化合物使用一個(gè)孔。應(yīng)用這些化合物之前，細(xì)胞生長(zhǎng)在含有10％FBS的正常組織培養(yǎng)基中，因此，LSOs充滿了膽固醇(圖1B)。然后使用平均菲里平強(qiáng)度檢測(cè)和LSO區(qū)室測(cè)定法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行圖像處理和分析。一般而言，這兩種分析確定了能降低菲里平標(biāo)記的類似的化合物。

從溶劑處理的細(xì)胞的平均值中得到的平均菲里平強(qiáng)度超過(guò)3SD的孔被進(jìn)一步研究。這些選定孔的圖像是在視覺上可被檢測(cè)得，并且如果我們是從第二位置得到圖片，表現(xiàn)出弱聚焦的位點(diǎn)(約為總量的0.3％)都沒有被重新進(jìn)行分析。有低細(xì)胞數(shù)目的孔被認(rèn)為是一種毒性顯示，而這些細(xì)胞毒性化合物沒有進(jìn)一步追蹤。我們還研究了板的行和列中的排列的低放大倍數(shù)圖像以尋找細(xì)胞數(shù)量或亮度的模式，它們可能表明在自動(dòng)移液步驟中的機(jī)械錯(cuò)誤之一。在一個(gè)例子中，在一套8個(gè)板中看到一種譜帶模式，并且這些化合物在確定移液器問題后被重新篩選。

從這個(gè)初始篩選中，我們發(fā)現(xiàn)133種化合物能降低平均菲里平強(qiáng)度超過(guò)3SD，并且23種化合物能增加平均菲里平強(qiáng)度超過(guò)3SD。圖像的目檢也顯示19種化合物在菲里平染色模式中能產(chǎn)生的形態(tài)學(xué)變化，這不符合我們降低平均菲里平強(qiáng)度的標(biāo)準(zhǔn)。

然后在初始篩選相同條件下這175種化合物在10μM再被重新篩選，不同之處在于每個(gè)化合物被放置在每板兩個(gè)孔和2個(gè)板平行篩選。平均菲里平強(qiáng)度和LSO比例值都進(jìn)行了測(cè)定。從重新篩選中選取14種化合物能在10μM可重復(fù)地減少菲里平染色，并且8種化合物被發(fā)現(xiàn)可重復(fù)地增加菲里平染色。9種化合物被發(fā)現(xiàn)改變菲里平的形態(tài)分布。圖3顯示了溶劑處理的對(duì)照孔和化合物處理的孔的篩選板的圖像，顯示了降低的菲里平染色。

圖4顯示了4種化合物引起通過(guò)菲里平染色觀察到的形態(tài)學(xué)變化的效果。這些細(xì)胞顯示了重排，這表明膽固醇已被更改到不同的間隔，或LSOs本身的形態(tài)已經(jīng)改變(化合物1-c-3，圖4C)?；衔?-b-4的影響(圖4D)是非常強(qiáng)烈的，如菲里平染色的明亮的漩渦所觀察的。化合物1-b-4的影響與正常人體成纖維細(xì)胞相似(數(shù)據(jù)未顯示)，表明這種反應(yīng)與細(xì)胞的NPC表型是不相關(guān)的。這些能增加明顯菲里平染色以及造成形態(tài)學(xué)變化的化合物在本研究中并沒有被進(jìn)一步研究。

能降低菲里平標(biāo)記的14種化合物和造成重大形態(tài)學(xué)變化的2種化合物的結(jié)構(gòu)如圖5所示?；衔?-c-2和1-c-3引起形態(tài)學(xué)變化，化合物1-b-2和1-b-4增加菲里平強(qiáng)度。

用于篩選的材料與方法
材料細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基Hams F12和胎牛血清(FBS)購(gòu)自Invitrogen公司(Carlsbad，CA)。所有其他化學(xué)試劑，包括二甲基亞砜(DMSO)，菲里平/多聚甲醛(PFA)和Hoechst 33258購(gòu)自SigmaChemicals(St.Louis，MO)。用于篩選的化合物庫(kù)購(gòu)自ChemicalDiversity，Inc.(San Diego，CA)。Metamorph圖像分析軟件來(lái)自Molecular Devices Corporation(Downington，PA)。

細(xì)胞培養(yǎng)NPC1細(xì)胞系、CT60和CT43由T.Y.Chang提供((Dartmouth Medical School，Hanover，NH)。這些細(xì)胞系是來(lái)自親代細(xì)胞系25RA，這是一個(gè)在SREBP裂解激活蛋白(SCAP)中含有增益功能突變的CHO細(xì)胞株(42)。CT60和CT43細(xì)胞生長(zhǎng)在Hams F12培養(yǎng)基中，其中添加了1％青霉素/鏈霉素(PS)、2g/L的葡萄糖、含10％FBS的1.176克/升碳酸氫鈉[培養(yǎng)基A]，在一個(gè)含5％的CO2的濕潤(rùn)培養(yǎng)箱中保持在37℃。為了篩選，在30μl含10％FBS的生長(zhǎng)培養(yǎng)基A中的CT60細(xì)胞(650細(xì)胞/孔)或CT43細(xì)胞(700細(xì)胞/孔)分別種在Costar 384孔黑色聚苯乙烯的平的、透明底部的組織培養(yǎng)處理的板中(Corning，Inc.，NY)，以在細(xì)胞被進(jìn)行分析時(shí)獲得～80％融合。

正常人體成纖維細(xì)胞(GM5659E)生長(zhǎng)在有1％P/S和10％FBS的MEM中。為了顯微鏡檢查，成纖維細(xì)胞在正常生長(zhǎng)培養(yǎng)基中在35mm的玻璃底培養(yǎng)皿或在384孔板中鋪板。

化合物添加化合物庫(kù)中的化合物被格式化，用于在洛克菲勒大學(xué)的高通量篩選儀中進(jìn)行篩選。鋪板后用來(lái)自化學(xué)庫(kù)的化合物處理細(xì)胞1天。使用Packard MiniTrakTM機(jī)器人液體處理系統(tǒng)，我們每種化合物添加了0.1μl(5mM儲(chǔ)存在DMSO中)至25μl的由培養(yǎng)基A和1％FBS和20mM2-[4-(羥乙基)-1-哌嗪基]乙磺酸(HEPES)組成的、在Falcon 384孔V型底的聚丙烯板中的篩選培養(yǎng)基S中。為了獲得～10μM終濃度，23μl的預(yù)混化合物被分到含有細(xì)胞和30μl培養(yǎng)基A的板中。為了初步篩選，352種測(cè)試化合物被添加到每塊板中，其余32孔只加入DMSO作為對(duì)照。所有加了化合物的板在37℃孵育16h。然后利用Bio-Tek Elx405洗板機(jī)(Bio-Tek Instruments Inc.，Winooski，VT)用pH值7.4磷酸鹽緩沖液(PBS)洗3次。對(duì)每個(gè)清洗周期，分入70μl的PBS，然后抽吸到每孔殘留體積為16μl。最后，在室溫下細(xì)胞用PBS中的1.5％的PFA固定20分鐘，然后用PBS洗3次以上。

熒光標(biāo)記。對(duì)于固定細(xì)胞，在室溫下在45分鐘內(nèi)將菲里平加到PBS中至終濃度為50μg/ml，用于標(biāo)記游離膽固醇。細(xì)胞最后用PBS洗3次，并且標(biāo)記后立即獲得圖像。

熒光顯微鏡來(lái)自Molecular Devices Corporation的Discovery-1型自動(dòng)熒光顯微鏡用來(lái)獲取圖像，它配備有氙弧燈(PerkinElmer，CA)、尼康10X Plan Fluor 0.3NA物鏡和PhotometricsCoolSnapHQ相機(jī)(1392×1040像素；Roper Scientific，Tucson，AZ)。使用有一個(gè)365DCLP(DiChroic Long Pass)濾光器的60/40nm激發(fā)和480/40nm發(fā)射過(guò)濾器來(lái)獲得菲里平圖像。圖像文件在轉(zhuǎn)移到一個(gè)服務(wù)器前被存儲(chǔ)在本地主機(jī)電腦。

利用CRS CataLyst Express機(jī)器人(Thermo Electron Corp)將板從板的存放處運(yùn)送。在每孔2個(gè)位置獲得圖像，每個(gè)位置離孔中心大約50μm，使用2×2框并法，每個(gè)圖像的曝光時(shí)間為75ms。對(duì)于初次和二次篩選采用不同的方法進(jìn)行自動(dòng)調(diào)焦。在初次篩選中，使用基于圖象的聚焦和MetaMorph自動(dòng)聚焦的算法，每孔被聚焦超過(guò)一個(gè)±150μm的范圍并且每孔的每個(gè)位點(diǎn)被聚焦超過(guò)一個(gè)±20μm的范圍。用于聚焦的圖像利用8×8框并法通過(guò)15ms曝光時(shí)間以減少光漂白。對(duì)于二次篩選，基于激光的自動(dòng)聚焦(來(lái)自Molecular Devices的LAF v.2)被用來(lái)尋找板的底部?；趫D象的聚焦是用來(lái)確定板的底部和細(xì)胞之間的偏移量，然后每個(gè)位置被重新聚焦超過(guò)一個(gè)20μm的范圍。不論聚焦的方法，每板的采集時(shí)間為60-75分鐘。696×520像素圖像以每像素12強(qiáng)度比特獲得。每個(gè)像素在物體中是1.25×1.2μm。

圖像分析菲里平染色細(xì)胞的圖像利用Metamorph Discovery-1圖像分析軟件進(jìn)行分析。開發(fā)了兩種不同的圖像分析方法(1)平均菲里平強(qiáng)度檢測(cè)及(2)LSO區(qū)室比例檢測(cè)。首先，為了校正陰影，通過(guò)平均所有的從一個(gè)板中得到的圖像并利用低通濾波器平滑平均的圖象來(lái)創(chuàng)建一個(gè)圖像。然后圖像的每個(gè)像素乘以陰影圖像的平均強(qiáng)度，并將由此得到的像素強(qiáng)度再一個(gè)像素一個(gè)像素的除以陰影圖像。通過(guò)測(cè)定第5百分位數(shù)的強(qiáng)度值并從該圖像中的每個(gè)像素中扣除這個(gè)值來(lái)從陰影校正的圖像中扣除背景。在使用的鋪板密度下，所有區(qū)域有至少5％的圖像區(qū)域是沒有細(xì)胞的。接下來(lái)，將兩個(gè)不同的閾值應(yīng)用到這些菲里平圖像。首先，設(shè)置低閾值用于包括所有被細(xì)胞占據(jù)的區(qū)域。利用這一篩選值使細(xì)胞的輪廓與細(xì)胞的透射光圖像輪廓相一致。第二，通過(guò)選擇菲里平染色的明亮區(qū)域，設(shè)定更高的閾值用于CT60和/或Ct43細(xì)胞中明亮的染色區(qū)域，目的主要是鑒定細(xì)胞的核周圍區(qū)域的LSOs。對(duì)于平均菲里平強(qiáng)度測(cè)定，單獨(dú)使用低閾值，我們測(cè)定了低閾值以上的總菲里平強(qiáng)度除以每個(gè)區(qū)域的低閾值以上的像素?cái)?shù)。這給出了每個(gè)細(xì)胞區(qū)域的一個(gè)平均菲里平強(qiáng)度。對(duì)于LSO區(qū)室比例，我們有選擇性地測(cè)量了在該區(qū)域高閾值以上的總菲里平強(qiáng)度除以低閾值的像素?cái)?shù)。這給出了一個(gè)每細(xì)胞面積LSO菲里平的總強(qiáng)度的測(cè)量。



通過(guò)用每塊板中溶劑對(duì)照存在情況下獲得的值除以化合物存在情況下獲得的值而得到歸一化的值。類似的方法被用于分析化合物對(duì)用U18666A處理人體成纖維細(xì)胞引起膽固醇留在LSOs中的影響。

免疫熒光CT60細(xì)胞在蓋玻片底部的培養(yǎng)皿中長(zhǎng)至70％的融合。24h后，在含有20mM的HEPES的篩選培養(yǎng)基中的細(xì)胞中加入化合物(10μM)。用化合物處理16-22h后，細(xì)胞用PBS洗滌3次，用3.3％PFA在室溫固定20分鐘。然后細(xì)胞用50mM氯化銨處理10分鐘，用PBS洗3次。用0.1％牛血清白蛋白封閉20分鐘后，細(xì)胞用PBS洗滌，用0.05％的皂甙透化處理并且與抗-LBPA(1∶100)在室溫孵育30分鐘(J.Gruenberg，Univ.of Geneva的貢獻(xiàn))。然后細(xì)胞用PBS清洗3次，與羊抗鼠IgG-Alexa546(1∶200)和100μg/ml菲里平孵育30分鐘。最后，細(xì)胞用PBS洗滌3次，并且在配有PrincetonInstruments(Princeton，NJ)冷卻CCD照相機(jī)和MetaMorphImaging System軟件驅(qū)動(dòng)的Leica DMIRB顯微鏡(Leica Mikroscopieund Systeme GmbH，Germany)下獲得圖像。所有圖像獲得使用油浸物鏡(25×，1.4NA)。Alexa 546-Tf利用標(biāo)準(zhǔn)羅丹明過(guò)濾器立方體來(lái)成像，并且菲里平是利用Leica A4立方體來(lái)成像[360nm(40nm通帶)激發(fā)濾光器和470nm(40nm的帶通)發(fā)射濾光器]。使用Metamorph Discovery-1圖像分析軟件，利用用于篩選的圖像分析算法進(jìn)行圖像分析，以評(píng)價(jià)膽固醇和LBPA在存在和不存在化合物情況下的濃度。

實(shí)例2劑量依賴性檢測(cè)
劑量依賴性使用與篩選所用的相同的方法，化合物分別在4個(gè)孔中以10μM、3.33μM、1.11μM、370nM和123nM進(jìn)行測(cè)試。選擇的化合物的一次操作所需的量購(gòu)自Chemical Diversity，并在DMSO中制備10mM儲(chǔ)液。在篩選培養(yǎng)基中制備化合物的2倍濃度的次級(jí)儲(chǔ)存液板(20μM、6.66μM、2.22μM、740nM和246nM)。為獲得最終濃度，30μl的該次級(jí)儲(chǔ)存液被添加到每孔含有30μl的含有10％FBS的生長(zhǎng)培養(yǎng)基A的細(xì)胞中。二甲基亞砜的終濃度(0.2％v/v)在所有的孔中是相同的。細(xì)胞以650細(xì)胞/孔鋪到每孔含有30μl的含有10％FBS的生長(zhǎng)培養(yǎng)基A的costar 384孔板中。在化合物存在時(shí)孵育20小時(shí)，細(xì)胞用PBS洗滌后，如篩選試驗(yàn)所述，用PFA固定并用菲里平染色。來(lái)自一級(jí)化合物庫(kù)的14種中選化合物的劑量依賴性在獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)中的測(cè)定在CT60細(xì)胞至少作5次，在CT43細(xì)胞至少作3次。來(lái)自二級(jí)化合物庫(kù)的7種中選化合物的劑量依賴性在獨(dú)立實(shí)驗(yàn)中的測(cè)定在CT60細(xì)胞至少作3次，在CT43細(xì)胞至少作2次。

在一次檢測(cè)中，14種與篩選檢測(cè)中相同的選定化合物的劑量反應(yīng)曲線中如圖6A-B所示。其中的三個(gè)化合物在1.1μm的CT60細(xì)胞中降低菲里平染色到溶劑處理的平均值以下3SD，同樣化合物處理的細(xì)胞低于123nM的溶劑處理平均值2SD以上(圖6A)?；衔?-a-14有一條不尋常的劑量反應(yīng)曲線，這可能與它在高濃度的細(xì)胞毒作用相關(guān)。為了檢測(cè)是否這種影響對(duì)CT60細(xì)胞系有特異性，我們也檢測(cè)了這14種選定化合物對(duì)CT43細(xì)胞的劑量反應(yīng)，這是來(lái)源于母細(xì)胞株25RA的另一種NPC1突變的細(xì)胞系。大部分化合物在10μM的未處理平均值以下3SD以上是有效的，但在更低濃度下對(duì)CT43細(xì)胞失去了作用(圖6B)。有趣的是注意到在這兩個(gè)細(xì)胞系中這14種化合物的影響的一般趨勢(shì)是類似的，雖然一般化合物在一給定的劑量對(duì)CT60細(xì)胞更有效。

實(shí)例3時(shí)間過(guò)程檢測(cè)
利用類似于劑量依賴性的方法，測(cè)定了這些化合物在1.11、3.33和10μM濃度處理4、20、48h的影響。在第一天，CT60細(xì)胞以600細(xì)胞/孔種在3塊384孔板中的生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。為了保證在最終時(shí)間點(diǎn)保持同樣的細(xì)胞密度，化合物按時(shí)間順序加入。孵化過(guò)夜后，第一塊板(48h的時(shí)間點(diǎn))中的稀釋在培養(yǎng)基S中的化合物被加到孔中，以達(dá)到最終濃度1.11、3.33和10μM。細(xì)胞種植52h后，化合物以類似方式加入到第二塊板中，并孵育20h。最后，細(xì)胞種植68h后，化合物以類似的方式加入到第三塊板中，并孵育4h。所有三塊板用PBS洗3次，用1.5％PFA固定并用50μg/ml菲里平染色。每一實(shí)驗(yàn)中每一條件測(cè)量4個(gè)孔，對(duì)CT60和CT43每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次(CT43的數(shù)據(jù)未顯示)。

實(shí)例4毒性檢測(cè)
為了測(cè)量毒性，我們用化合物在5、10和20μM處理CT60和CY43細(xì)胞24小時(shí)。每孔的細(xì)胞數(shù)與用DMSO處理的對(duì)照細(xì)胞進(jìn)行對(duì)比(圖7)。孵育24h后，多數(shù)化合物在10μM沒有造成細(xì)胞數(shù)量明顯減少?；衔?-a-14在10μM引起CT60細(xì)胞數(shù)目減少50％，CT43細(xì)胞減少80％。化合物1-a-4、5、6、8和13有部分毒性，這由24小時(shí)后在10μM細(xì)胞數(shù)目有20-30％減少所表明。

用于細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法使用劑量依賴檢測(cè)方法類似的方法，將化合物平行四個(gè)重復(fù)以0(二甲亞砜溶劑對(duì)照組)、5、10及20μm的濃度加到種在384孔培養(yǎng)板的CT60和CT43細(xì)胞中，不同之處在于細(xì)胞用Hoechst 33258進(jìn)行核染色。二甲基亞砜的終濃度在孔中為0.2％。對(duì)于對(duì)照細(xì)胞，同等量的二甲基亞砜添加到細(xì)胞中。細(xì)胞培養(yǎng)24、48和72小時(shí)。每一個(gè)時(shí)間點(diǎn)后，洗滌細(xì)胞，然后用1.5％PFA固定。細(xì)胞用PBS洗3次后，室溫下用5μg/ml Hoechst 33258(25mg/ml DMSO儲(chǔ)存液)在PBS中細(xì)胞核染色45分鐘。最后，細(xì)胞用PBS洗3次，用Nikon 4X Plan Apo 0.2NA目鏡獲得圖像。對(duì)于Hoechst的成像，我們使用與菲里平相同的過(guò)濾器設(shè)置。在每像素12強(qiáng)度比特，我們每孔采集了一個(gè)520×696像素的圖像。在13個(gè)對(duì)象中每個(gè)像素是3.125×3.125μm。利用MetaMorph的Integrated MorphometryAnalysis功能，細(xì)胞通過(guò)每塊板以交互方式確定標(biāo)準(zhǔn)的單核區(qū)域(～200μm2)來(lái)計(jì)數(shù)。測(cè)定了超過(guò)一個(gè)閾值的每個(gè)目標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域的量，并且每個(gè)圖像的標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域的總量被用作細(xì)胞計(jì)數(shù)。在每個(gè)濃度和時(shí)間點(diǎn)計(jì)算與DMSO對(duì)照相比細(xì)胞數(shù)量減少的百分比。

實(shí)例5氣相色譜法測(cè)定膽固醇
由菲里平標(biāo)記確定的14種中選化合物降低膽固醇的效果通過(guò)一種可選擇的化學(xué)方法來(lái)測(cè)量，該方法包括溶劑提取的細(xì)胞脂質(zhì)的GC分離(43)。在與篩選測(cè)試同樣的條件下，CT60細(xì)胞用化合物在10μM處理細(xì)胞。氣相色譜法測(cè)定每細(xì)胞中FC濃度，所有所得值與平均菲里平強(qiáng)度的測(cè)定相比較(表1)。如表1所示，14種中選化合物的大部分引起細(xì)胞的全部FC濃度相對(duì)溫和的下降，這與平均菲里平法測(cè)量的一樣。從第一次篩選得到的中選對(duì)象對(duì)細(xì)胞膽固醇有不定的影響；包括一些明顯增加細(xì)胞中游離膽固醇的化合物。

表1 由平均菲里平強(qiáng)度和氣相色譜檢測(cè)的C T 60細(xì)胞經(jīng)選自一級(jí)化合物庫(kù)中的14種中選化合物處理后游離膽固醇含量。
1FC-游離膽固醇
在第一天將CT60或CT43細(xì)胞種在6孔板中。中選化合物以10μm的濃度加到細(xì)胞中。細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí)。用正己烷∶異丙醇(3∶2V/V)提取細(xì)胞脂質(zhì)。在正己烷中干燥并重新懸浮脂質(zhì)提取物，隨后采用β-谷甾醇作為內(nèi)標(biāo)在氣相色譜儀上分離。

方法CT60細(xì)胞種在含Ham’s F-12/1.176克/升碳酸氫鈉/2克/L葡萄糖/10％FBS的培養(yǎng)基的6孔板中。孵育24小時(shí)后，細(xì)胞用10μM的每一化合物處理，培養(yǎng)基被換成含Ham’s F-12/1.176克/升碳酸氫鈉/2克/L葡萄糖/5.5％FBS/20mM HEPES。每孔中培養(yǎng)基的改變是為了化合物加到細(xì)胞中后具有與用于篩選的相似的實(shí)驗(yàn)條件。經(jīng)過(guò)化合物處理18h，細(xì)胞用Hank’s平衡鹽溶液(HBSS)洗2次。細(xì)胞脂質(zhì)用正己烷/異丙醇(3∶2v/v)提取(43)，在正己烷中干燥和重懸，然后使用以下條件在氣相色譜儀(GC)上分離。一種HewlettPackard氣相色譜模式HP 5890系列II(Palo Alto，CA)被用于分離游離膽固醇，其配備有火焰離子化檢測(cè)器、分離-非分離注射器，和涂有厚度為1.5μm的5％苯基甲基硅氧烷薄膜的15米×0.53毫米HP-5毛細(xì)管柱。注射溫度維持在255℃，爐溫度等溫控制在260℃，使用氦氣以30mL/min流速作為流動(dòng)相。使用β-谷甾醇作為內(nèi)標(biāo)以校正提取過(guò)程中脂質(zhì)的損失，來(lái)對(duì)游離膽固醇(FC)進(jìn)行定量。

實(shí)例6二級(jí)化合物庫(kù)的篩選
評(píng)價(jià)含有3962種化合物的二級(jí)庫(kù)。這些化合物在就Tanimoto系數(shù)(47)而言的化學(xué)的相似性的基礎(chǔ)上選定。

我們使用了類似于初級(jí)庫(kù)篩選的方法對(duì)這3962種化合物進(jìn)行了篩選，不同之處在于化合物最初在10μM和1μM兩種濃度篩選。每種化合物加到一個(gè)單孔中，在每孔2個(gè)位置獲得圖像并且平均成一個(gè)值。二級(jí)庫(kù)的2個(gè)完全的篩選在兩個(gè)濃度進(jìn)行。使用平均菲里平強(qiáng)度和LSO區(qū)室比例兩種方法分析圖像。在10μM，我們用一種分析方法測(cè)定時(shí)發(fā)現(xiàn)574種化合物低于對(duì)照3SD，用兩種分析方法時(shí)發(fā)現(xiàn)34種化合物低于對(duì)照3SD。在1μM，我們用至少有一種分析方法發(fā)現(xiàn)202種化合物低于對(duì)照3SD，用2種方法時(shí)發(fā)現(xiàn)6種化合物低于對(duì)照3SD。

我們隨意選擇這202種化合物，并在1μM、300nM和100nM重新篩選2次。我們?cè)诿恳粷舛仍?個(gè)不同的孔中加入化合物，并平均每孔中2個(gè)位置的圖像的測(cè)量結(jié)果。通過(guò)2次篩選，在1μM、300nM和100nM我們由每個(gè)分析方法獲得了每個(gè)化合物共8個(gè)值。每個(gè)分析方法(平均菲里平強(qiáng)度和LSO區(qū)室比例)我們一共有1μM的10個(gè)值(來(lái)自第一次篩選的2個(gè)和隨意選擇的8個(gè))和300nM和100nM的8個(gè)值。根據(jù)這些數(shù)據(jù)，我們選了7種化合物作進(jìn)一步的分析，它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)如圖8所示。

7種選定的化合物的劑量反應(yīng)曲線如圖9所示。數(shù)據(jù)表明，4個(gè)化合物(2-a-8、2-a-9、2-a-12和2-a-13)在370nM的LSO區(qū)室測(cè)定法中表現(xiàn)出超過(guò)3SD的減少，并且3個(gè)化合物(2-a-8、2-a-9和2-a-12)在123nM也表現(xiàn)出對(duì)C T 60細(xì)胞低于溶劑對(duì)照2SD的效果。作為來(lái)自第一輪的中選對(duì)象，這些化合物的大部分也是對(duì)CT43細(xì)胞有效的(圖9B)。

實(shí)例7低密度脂蛋白的吸收
CT60細(xì)胞在96孔專門的光學(xué)培養(yǎng)板(Corning，Inc.，Corning，NY)生長(zhǎng)至70％融合。24小時(shí)后，細(xì)胞與DiI-LDL(6mg/ml)和中選化合物(10μM)在加有20mM HEPES的篩選培養(yǎng)基中孵育。每種化合物添加到8個(gè)孔中，并且等量的二甲基亞砜與DiI-LDL加入對(duì)照孔中。經(jīng)過(guò)20h后，細(xì)胞用PBS洗3次，用1.5％PFA固定20分鐘，并且用50μg/ml菲里平染色45分鐘。使用Discovery-1型自動(dòng)熒光顯微鏡在20倍放大倍數(shù)獲得圖像。使用535nm/40nm激發(fā)過(guò)濾器和有一個(gè)Chroma 51001bs DiChroic過(guò)濾器的610nm/60nm帶通獲得DiI-LDL的圖像。菲里平圖像的獲得如上文所述。每孔在4個(gè)位點(diǎn)獲得圖像，每個(gè)化合物產(chǎn)生32個(gè)圖像。該DiI-LDL圖像的背景和陰影校正如上文所述。設(shè)定低閾值來(lái)根據(jù)菲里平圖像確定細(xì)胞面積。最后，測(cè)量每個(gè)細(xì)胞區(qū)域的平均DiI-LDL強(qiáng)度。

如表2所示，經(jīng)20小時(shí)的孵育，除2-a-15外所有來(lái)自二級(jí)庫(kù)的中選化合物引起了低密度脂蛋白的攝取的減少。這將需要進(jìn)一步的工作以確定是否這是某些化合物的一個(gè)首要影響，或是否低密度脂蛋白的攝取的減少對(duì)于從LSOs釋放膽固醇是次要的。雖然，作為一個(gè)SCAP等位基因中一個(gè)點(diǎn)突變后果，CT60細(xì)胞在SCAP功能有部分缺損，但是所期望的是細(xì)胞將通過(guò)降低LDL受體的表達(dá)來(lái)對(duì)增加的膽固醇作出反應(yīng)。

表2 CT60細(xì)胞經(jīng)來(lái)自二級(jí)庫(kù)的7種中選化合物處理后DiI-LDL的吸收。

細(xì)胞與DiI-LDL(6μg/ml)在化合物(10μM)存在情況下培養(yǎng)20小時(shí)。每單位細(xì)胞面積強(qiáng)度的測(cè)量如方法中所述。數(shù)值被歸一化成對(duì)對(duì)照(溶劑處理)細(xì)胞的每細(xì)胞面積強(qiáng)度。數(shù)值是基于每個(gè)條件下來(lái)自8個(gè)孔的32個(gè)圖像?！繱EM。

實(shí)例8來(lái)自二級(jí)庫(kù)的化合物的毒性測(cè)定。

圖10顯示的是來(lái)自二級(jí)庫(kù)的7種中選化合物的毒性測(cè)定結(jié)果。24h后化合物2-a-12在20μm對(duì)兩種CT60和CT43細(xì)胞造成75％的細(xì)胞數(shù)目減少。其他化合物在此條件下對(duì)細(xì)胞沒有減少或造成的只有輕微的減少，而它們減少了菲里平染色。這些化合物細(xì)胞毒性的評(píng)估是通過(guò)測(cè)量釋放到培養(yǎng)基中的LDH。如圖10C所示，通過(guò)這種方法測(cè)得的細(xì)胞毒作用小于由細(xì)胞計(jì)數(shù)得到的減少，表明這些化合物經(jīng)24小時(shí)后可能減緩細(xì)胞的生長(zhǎng)而不引起細(xì)胞死亡。

在1.1、3.3和10μM濃度下，LSO區(qū)室比例中減少的時(shí)間過(guò)程如圖11所示。經(jīng)過(guò)4小時(shí)的處理，化合物2-a-3在LSO區(qū)室比例中表現(xiàn)出一種超過(guò)3SD的減少。經(jīng)過(guò)20小時(shí)，所有化合物在10μM表現(xiàn)出LSO區(qū)室比例的減少，并且?guī)讉€(gè)化合物在1.11和3.33μM是有效的。48小時(shí)處理后，減少LSO區(qū)室比例的效果一般被保留。

選自二級(jí)庫(kù)的7種化合物中的六種有低毒性，并且不僅在LSOs中而且在整個(gè)細(xì)胞中都能顯著降低FC。這些化合物中幾個(gè)的有效濃度低于0.5μM。表3總結(jié)了這些來(lái)自二級(jí)庫(kù)的6種中選化合物就膽固醇減少而言的作用以及毒性作用。

表3來(lái)自二級(jí)庫(kù)的7種化合物對(duì)CT60細(xì)胞影響的概括 1FC-游離膽固醇
實(shí)例9LDH的細(xì)胞毒性測(cè)定。

中選化合物的細(xì)胞毒作用是根據(jù)制造商的技術(shù)說(shuō)明書用LDH釋放測(cè)定試劑盒(Roche Diagnostic GmbH，Penzberg，Germany)來(lái)測(cè)定的。CT60細(xì)胞以3500細(xì)胞/孔種在96孔板中(Costar，Corning Inc.，Corning，NY)并孵育24小時(shí)。使用與劑量依賴性檢測(cè)類似的方法，化合物平行3個(gè)以0(二甲亞砜溶劑對(duì)照組)、5、10和20μM的濃度分別添加到CY60細(xì)胞中。處理24h后，取出100μl的組織培養(yǎng)上清液，使用SpectraMax M2熒光讀板機(jī)(Molecular Devices Inc.，Sunnyvale，CA)在492nm測(cè)量吸光度來(lái)測(cè)定LDH活性。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，因此得到9個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)的平均值。

如圖10C所示，通過(guò)這種方法測(cè)量的細(xì)胞毒性小于細(xì)胞計(jì)數(shù)測(cè)得的減少，表明這些化合物經(jīng)24小時(shí)后可能減緩細(xì)胞的生長(zhǎng)而不引起細(xì)胞死亡。

實(shí)例10對(duì)正常人體成纖維細(xì)胞的測(cè)定。

所有的上述結(jié)果是來(lái)自于CHO細(xì)胞，其除了有NPC1基因突變還有SCAP中的一個(gè)基因突變。為了確定是否該化合物可能對(duì)其他類型的細(xì)胞有影響，我們用化合物U18666A處理正常人體成纖維細(xì)胞，其能引起類似于NPC細(xì)胞系所示的膽固醇的累積(NL Jacobs etal.，J Lipid Res.1997Oct；38(10)1973-87)。通過(guò)菲里平染色(數(shù)據(jù)未顯示)和LSO區(qū)室比例方法測(cè)量(圖12)，我們發(fā)現(xiàn)用250nM或500nM U18666A處理細(xì)胞引起了膽固醇累積的顯著增加。當(dāng)用來(lái)自二級(jí)庫(kù)的中選化合物處理細(xì)胞時(shí)，這些化合物中的幾個(gè)引起菲里平染色顯著下降(圖12)。特別是，化合物2-a-1引起了菲里平染色的急劇下降。

實(shí)例11對(duì)25RACHO細(xì)胞的測(cè)定
25RACHO細(xì)胞與10μM濃度的化合物2-a-1、2-a-3，2-a-8、2-a-9和2-a-13培養(yǎng)。細(xì)胞載有3H膽固醇，然后在存在或不存在各種化合物的情況下追蹤(chase)過(guò)夜。取出細(xì)胞外的培養(yǎng)基，測(cè)量從細(xì)胞中釋放出的放射性。然后溶解細(xì)胞，并測(cè)量仍然留在細(xì)胞中的放射性。數(shù)據(jù)(圖13)表明這些化合物促進(jìn)膽固醇從25-RA細(xì)胞的外流，25-RA細(xì)胞是一個(gè)沒有尼曼-皮克二氏病的CHO細(xì)胞株，它用于選擇用于我們上述篩選的CT43和CT60細(xì)胞的母細(xì)胞株。25-RA細(xì)胞在SCAP中有一個(gè)缺損，它能改變膽固醇的體內(nèi)平衡，包括增加膽固醇的合成。

實(shí)例12溶酶體的酸性脂肪酶的抑制
本文公開的某些化合物通過(guò)抑制溶酶體酸性脂肪酶(LAL)可有治療作用。特別是化合物1-a-4、1-a-11、1-a-14、2-a-3、2-a-8、2-a-9、2-a-13、2-a-15，并且在定義了命名化合物的通式結(jié)構(gòu)范圍內(nèi)的其他化合物可通過(guò)LAL來(lái)抑制膽固醇酯的水解。
權(quán)利要求
1.一種用于對(duì)患有特征為膽固醇細(xì)胞累積的病癥的患者進(jìn)行治療的方法，包括以下步驟
給與一位有需要的患者一個(gè)治療有效量的、式I-IX中任意之一的化合物，其中式I表示為
其中，
X是O或-N(R7)-；
Y是N或-C(R8)-；
R1和R2獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基；
R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR9＝CR9)n-芳基或-(CR9＝CR9)n-雜芳基；
R6是H或烷基；或R5與R6一起形成一個(gè)可任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；
R7是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R7一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
每個(gè)R8和R9獨(dú)立地代表H或烷基；并且
n是1或2；
式II表示為
其中，
X是O或-N(R6)-；
R1和R2獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基；
R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R6是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、或雜芳烷基；或R1和R6一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
式III表示為
其中，
R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R7)2)n-(CR7＝C(R7)2)；
R2是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或烷基；
R3的是氫、烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)；
R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵；
每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基；
每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、芳基、雜烷基、芳烷基或雜芳烷基；
L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且
A1和A2獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR7＝CR7)-芳基或-(CR7＝CR7)-雜芳基；
式IV表示為
其中，
A是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基；
R2是烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R3獨(dú)立地代表H或烷基；并且
R4是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
式V表示為
其中，
X是O、-N(R5)-、-N(R5)C(O)-、-C(O)N(R5)-、-OC(O)-、-CO2-或-N(R5)CO2-；
Y是O、S或-N(R5)-；
R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O；
R3和R4獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且
n是1、2、3、4或5；
式VI表示為
其中，
X是O、S或-N(R4)-；
R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)；
R2是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基；
R3是H、烷基、烯基、芳基或雜芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子；
每個(gè)R4與R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且
n是1、2、3、4或5；
式VII表示為
其中，
X是O或S；
R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R5；
R2是H或烷基；
R3是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基，或一個(gè)任選取代的雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；
R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；
R5是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R5是被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的一個(gè)芳基基團(tuán)；并且
每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
式VIII表示為
其中，
X是O或S；
R1、R3和A獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；
R5是一個(gè)可任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子；
式IX表示為
其中，
X1是-OR5、-SR5或-N(R5)2；
每個(gè)X2獨(dú)立地代表O、S或-N(R5)-；
每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、烯基、炔基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2；
R2和R4獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R3是H、烷基或鹵素；
每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且
n是0、1、2、3或4。
2.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述的病癥是C型尼曼-皮克二氏病。
3.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述的病癥是動(dòng)脈粥樣硬化。
4.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述的病癥是一個(gè)由鞘脂或鞘糖脂代謝紊亂引起的溶酶體貯積失調(diào)。
5.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物。
6.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是O或-N(R7)-；Y是N；R1和R2獨(dú)立地代表烷基、鹵代烷基或芳基；R3是芳基；或R2和R3一起形成任選被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基取代的一個(gè)3-8元環(huán)；R4是氫；R5是雜環(huán)烷基或芳基；R6是H或烷基；或R5和R6一起形成任選被取代的一個(gè)單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；R7是氫；或R1和R7一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)。
7.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是-N(R7)-；Y是N；R1和R2是芳基；R3是芳基；或R2和R3一起形成被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；R4是氫；R5是雜環(huán)烷基或芳基；R6是H或烷基；或R5和R6一起形成任選被取代的一個(gè)單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；并且R7是氫；或R1和R7一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)。
8.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是-N(R7)-；Y是-C(R8)-；R1和R2獨(dú)立地代表烷基、雜烷基或代鹵代烷基；R3是氫、烷基、雜烷基或鹵代烷基；R4是氫；R5是雜芳基；R6是H或烷基；R7是氫、烷基、雜烷基或鹵代烷基；并且R8是H或烷基。
9.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式II的化合物。
10.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式II的化合物，X是-N(R6)-；R1、R2和R5獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；并且R3、R4和R6獨(dú)立地代表氫或烷基。
11.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物。
12.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物；R1、R2、A1和A2獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R3是氫或烷基；R6是H或烷基；并且L是一個(gè)鍵。
13.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物；R1是-(C(R7)2)n-(CR7＝C(R7)2)；R2是烷基；R3是烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)；R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵；每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基；每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且A1和A2獨(dú)立地代表芳基或雜芳基。
14.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式IV的化合物。
15.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式IV的化合物；A、R1和R4獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基；R2是烷基或芳基；并且每個(gè)R3獨(dú)立地代表H或烷基。
16.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式V的化合物。
17.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式V的化合物；X是-C(O)N(R5)-或-CO2-；Y是O或S；R1、R3和R4獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O；R3和R4獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。
18.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物。
19.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是芳基、雜芳基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)；R2是芳基、雜芳基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。
20.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物。
21.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物；X是O或S；R1的是芳基、雜芳基或-C(O)R5；R2是H或烷基；R3是芳基、雜芳基或一個(gè)任選被取代的雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；R5是被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的一個(gè)芳基基團(tuán)；每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。
22.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物；X是O或S；R1的是芳基、雜芳基或-C(O)R5；R2是H或烷基；R3代表
R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；R5是一個(gè)被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的一個(gè)芳基基團(tuán)；每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；m是0、1、2、3或4；每個(gè)R7獨(dú)立地代表鹵素、羥基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷基或烷氧基。
23.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物。
24.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物；X是O或S；R1、R3和A獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；R5是一個(gè)任選取代的雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子。
25.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物；X是O或S；R1、R3和A獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；R5代表
其中n是0、1、2、3或4；每個(gè)R7獨(dú)立地代表鹵素、羥基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷基或烷氧基。
26.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式IX的化合物。
27.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是一種式IX的化合物；X1是-N(R5)2；每個(gè)X2獨(dú)立地代表O或S；每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2；R2和R4獨(dú)立地代表芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；R3是H、烷基或鹵素；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且n是0、1、2、3或4。
28.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是
29.一種減少細(xì)胞中的膽固醇量的方法，包括以下步驟
將哺乳動(dòng)物細(xì)胞暴露于式I-IX中任意之一的化合物，其中式I表示為
其中，
X是O或-N(R7)-；
Y是N或-C(R8)-；
R1和R2獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基；
R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR9＝CR9)n-芳基或-(CR9＝CR9)n-雜芳基；
R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)可被任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；
R7是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R7一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
每個(gè)R8和R9獨(dú)立地代表H或烷基；并且
n是1或2；
式II表示為
其中，
X是O或-N(R6)-；
R1和R2獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基；
R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R6是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R6一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
式III表示為
其中，
R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R7)2)n-(CR7＝C(R7)2)；
R2是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或烷基；
R3的是氫、烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)；
R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵；
每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基；
每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且
A1和A2獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR7＝CR7)-芳基或-(CR7＝CR7)-雜芳基；
式IV表示為
其中，
A是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基；
R2是烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R3獨(dú)立地代表H或烷基；并且
R4是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
式V表示為
其中，
X是O、-N(R5)-、-N(R5)C(O)-、-C(O)N(R5)-、-OC(O)-、-CO2-或-N(R5)CO2-；
Y是O、S或-N(R5)-；
R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O；
R3和R4獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且
n是1、2、3、4或5；
式VI表示為
其中，
X是O、S或-N(R4)-；
R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)；
R2是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基；
R3是H、烷基、烯基、芳基或雜芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子；
每個(gè)R4與R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且
n是1、2、3、4或5；
式VII表示為
其中，
X是O或S；
R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R5；
R2是H或烷基；
R3是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或一個(gè)任選取代的雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；
R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；
R5是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R5是可以被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的一個(gè)芳基基團(tuán)；并且
每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
式VIII表示為
其中，
X是O或S；
R1、R3和A獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；
R5是一個(gè)任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子；
式IX表示為
其中，
X1是-OR5、-SR5或-N(R5)2；
每個(gè)X2獨(dú)立地代表O、S或-N(R5)-；
每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、烯基、炔基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2；
R2和R4獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R3是H、烷基或鹵素；
每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且
n是0、1、2、3或4。
30.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物通過(guò)增加從所述細(xì)胞中的膽固醇排出而減少所述細(xì)胞中的膽固醇的量。
31.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物通過(guò)抑制所述細(xì)胞的膽固醇攝取而減少所述細(xì)胞中的膽固醇的量。
32.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物通過(guò)抑制所述細(xì)胞的膽固醇合成而減少膽固醇的量。
33.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物通過(guò)促進(jìn)所述細(xì)胞中膽固醇的酯化作用而減少所述細(xì)胞中的膽固醇的量。
34.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述細(xì)胞是人細(xì)胞。
35.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述細(xì)胞具有C型尼曼-皮克二氏缺陷。
36.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物。
37.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是O或-N(R7)-；Y是N；R1和R2獨(dú)立地代表烷基、鹵代烷基或芳基；R3是芳基；或R2和R3一起形成被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；R4是氫；R5的是雜環(huán)烷基或芳基；R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；并且R7是氫；或R1和R7一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)。
38.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是-N(R7)-；Y是N；R1和R2是芳基；R3是芳基；或R2和R3一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；R4是氫；R5是雜環(huán)烷基或芳基；R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；并且R7是氫；或R1和R7一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)。
39.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是O或-N(R7)-；Y是-C(R8)-；R1和R2獨(dú)立地代表烷基、雜烷基或鹵代烷基；R3是氫、烷基、雜烷基或鹵代烷基；R4是氫；R5是雜芳基；R6是H或烷基；R7是氫、烷基、雜烷基或鹵代烷基；并且R8是H或烷基。
40.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式II的化合物。
41.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式II的化合物，X是-N(R6)-；R1、R2和R5獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；并且R3、R4和R6獨(dú)立地代表氫或烷基。
42.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物。
43.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物；R1、R2、A1和A2獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R3是氫或烷基；R6是H或烷基；并且L是一個(gè)鍵。
44.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物；R1是-(C(R7)2)n-(CR7＝C(R7)2)；R2是烷基；R3是烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)；R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵；每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基；每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且A1和A2獨(dú)立地代表芳基或雜芳基。
45.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式IV的化合物。
46.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式IV的化合物；A、R1和R4獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基；R2是烷基或芳基；每個(gè)R3獨(dú)立地代表H或烷基。
47.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式V的化合物。
48.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式V的化合物；X是-C(O)N(R5)-或-CO2-；Y是O或S；R1、R3和R4獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O；R3和R4獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。
49.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物。
50.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是芳基、雜芳基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)；R2是芳基、雜芳基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基；R3是H或烷基；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。
51.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物。
52.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物；X是O或S；R1的是芳基、雜芳基或-C(O)R5；R2是H或烷基；R3是芳基、雜芳基或一個(gè)任選被取代的雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；R5是可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的一個(gè)芳基基團(tuán)；并且每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。
53.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物；X是O或S；R1的是芳基、雜芳基或-C(O)R5；R2是H或烷基；R3代表
R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；R5是可以被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的一個(gè)芳基基團(tuán)；每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；m是0、1、2、3或4；并且每個(gè)R7獨(dú)立地代表鹵素、羥基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷基或烷氧基。
54.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物。
55.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物；X是O或S；；R1、R3和A獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；并且R5是一個(gè)任選被取代的雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子。
56.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物；X是O或S；R1、R3和A獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；R5代表
其中n是0、1、2、3或4；并且每個(gè)R7獨(dú)立地代表鹵素、羥基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷基或烷氧基。
57.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式IX的化合物。
58.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是一種式IX的化合物；X1是-N(R5)2；每個(gè)X2獨(dú)立地代表O或S；每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2；R2和R4獨(dú)立地代表芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；R3是H、烷基或鹵素；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且n是0、1、2、3或4。
59.權(quán)利要求29中所述的方法，其中所述化合物是
60.一種式X表示的化合物
其中，
X是OH或N(R5)2；
每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、烯基、炔基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2；
R2和R4獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、芳烷基、雜芳烷基，或具有選自N、O或S的1個(gè)雜原子的雜芳基；
R3是H、烷基或鹵素；
每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
n是0、1、2、3或4；并且
在X是NH2時(shí)，R2和R4中至少之一不是芳基。
61.權(quán)利要求60中所述化合物，其中X是NH2并且R2是芳基。
62.權(quán)利要求60中所述化合物，其中X是NH2并且R4是芳基。
63.一種式XI表示的化合物
其中，
R1和R3獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R2和R4獨(dú)立地代表氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R2一起形成一個(gè)3-8元環(huán)；或R3和R4一起形成一個(gè)3-8元環(huán)；
R5、R6、R7和R8獨(dú)立地代表氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R5、R6、R7和R8一起形成至少被一個(gè)官能基團(tuán)取代的一個(gè)芳基或雜芳基，所述官能基團(tuán)選自(C2-C6)烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、烯基、炔基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基、-N(R9)2、-OR9、-C(O)R9、-CO2R9或C(O)N(R9)2；并且
每個(gè)R9獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。
64.權(quán)利要求63中所述化合物，其中R1和R2形成一個(gè)6元環(huán)。
65.權(quán)利要求63中所述化合物，其中R3和R4形成一個(gè)6元環(huán)。
66.權(quán)利要求63中所述化合物，其中R5、R6、R7和R8一起形成一個(gè)芳香環(huán)。
67.一種式XII表示的化合物
其中，
X是O、S或-N(R4)-；
R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R2是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基；
R3是H、烷基、烯基、芳基或雜芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子；
每個(gè)R4與R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且
n是1、2、3、4或5；
或一種式XIII表示的化合物
其中，
X是O、S或-N(R7)-；
R4是-(C(R8)2)n-(CR8＝C(R8)2)；
R5是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(CR8＝C(R8)2)；
R6是H、烷基、烯基、芳基或雜芳基；或R5和R6一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子；
每個(gè)R7與R8獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基或雜環(huán)烷基、芳烷基或雜芳烷基；并且
n是1、2、3、4或5；
或一種式XIV表示的化合物
其中，
X是O、S或-N(R12)-；
R9是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、-芳基-OR14、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R10是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR13＝CR13)-芳基或-(CR13＝CR13)-雜芳基；
R11是H、烷基、烯基、芳基或雜芳基；
每個(gè)R12與R13獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；
R14是雜烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且
n是1、2、3、4或5。
68.權(quán)利要求67中所述的式XIII的化合物，其中X是S并且R4是烯丙基。
69.權(quán)利要求67中所述的式XIII的化合物，其中X是S，R4是烯丙基并且R5是-(CR8＝C(R8)2)。
70.權(quán)利要求67中所述的式XIV的化合物，其中X是S并且R9是-芳基-OR14。
71.一種式XV表示的化合物
其中，
A是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基；
R2是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R3獨(dú)立地代表H、烷基；并且
R4是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
或一種式XVI表示的化合物
其中，
A是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R5是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR7＝CR7)-芳基或-(CR7＝CR7)-雜芳基；
R6是烷基或芳基；
每個(gè)R7獨(dú)立地代表H或烷基；并且
R8是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
或一種式XVII表示的化合物
其中，
A是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R9是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR11＝CR11)-芳基或-(CR11＝CR11)-雜芳基；
R10是烷基或芳基；
每個(gè)R11獨(dú)立地代表H或烷基；并且
R12是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。
72.權(quán)利要求71中所述的式XVI的化合物，其中A是雜芳基并且R6是芳基。
73.權(quán)利要求71中所述的式XVI的化合物，其中A是雜芳基，R6是烷基。
74.權(quán)利要求71中所述的式XVII的化合物，其中A是雜芳基，R9是芳基，并且R10是烷基。
75.權(quán)利要求71中所述的式XVII的化合物，其中A是雜芳基，R9是芳基，并且R10是芳基。
76.一種式XVIII表示的化合物
其中，
R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基；
R2是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或烷基；
R3的是氫、烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)；
R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵；
每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基；
每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且
A1和A2獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR7＝CR7)-芳基或-(CR7＝CR7)-雜芳基；
或一種式XIX表示的化合物
其中，
R9是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R15)2)n-(CR15＝C(R15)2)；
R10是芳基；
R11是氫、烷基、-CO2R16或-C(O)N(R15)(R16)；
R12與R13獨(dú)立地代表H或烷基；或R12與R13一起形成一個(gè)鍵；
每個(gè)R14和R15獨(dú)立地代表H或烷基；
每個(gè)R16獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
L是一個(gè)鍵、-C(R15)2-或-(CR15＝CR15)-；
A3代表一個(gè)二價(jià)的環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR15＝CR15)-芳基-或-(CR15＝CR15)-雜芳基-；并且
A4代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR15＝CR15)-芳基或-(CR15＝CR15)-雜芳基；
或一種式XX表示的化合物
其中，
R17是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R23)2)n-(CR23＝C(R23)2)；
R18是芳基；
R19是氫、烷基、-CO2R24或-C(O)N(R23)(R24)；
R20與R21獨(dú)立地代表H或烷基；或R20與R21一起形成一個(gè)鍵；
每個(gè)R22和R23獨(dú)立地代表H或烷基；
每個(gè)R24獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
L是一個(gè)鍵、-C(R23)2-或-(CR23＝CR23)-；
A5代表一個(gè)二價(jià)的環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR23＝CR23)-芳基-或-(CR23＝CR23)-雜芳基-；并且
A6代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR23＝CR23)-芳基或-(CR23＝CR23)-雜芳基；
或一種式XXI表示的化合物
其中，
R25是-(C(R31)2)n-(CR31＝C(R31)2)；
R26是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R27是氫、烷基、-CO2R32或-C(O)N(R31)(R32)；
R28與R29獨(dú)立地代表H或烷基；或R28與R29一起形成一個(gè)鍵；
每個(gè)R30和R31獨(dú)立地代表H或烷基；
每個(gè)R32獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
L是一個(gè)鍵、-C(R31)2-或-(CR31＝CR31)-；并且
A7和A8獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR31＝CR31)-芳基或-(CR31＝CR31)-雜芳基。
77.權(quán)利要求76中所述的式XVIII的化合物，其中R1是芳基。
78.權(quán)利要求76中所述的式XVIII的化合物，其中R1是芳基，并且R4和R5一起形成一個(gè)鍵。
79.權(quán)利要求76中所述的式XVIII的化合物，其中R1是芳基，R4和R5一起形成一個(gè)鍵，L是一個(gè)鍵，并且A1是雜芳基。
80.權(quán)利要求76中所述的式XVIII的化合物，其中R1是芳基，R4和R5一起形成一個(gè)鍵，L是一個(gè)鍵，A1是雜芳基，并且A2是芳基。
81.權(quán)利要求76中所述的式XXI的化合物，其中R25是烯丙基。
82.權(quán)利要求76中所述的式XXI的化合物，其中R25是烯丙基，并且R27是-CO2R32。
83.權(quán)利要求76中所述的式XXI的化合物，其中R25是烯丙基，R27是-CO2R32，并且A7是雜芳基。
84.權(quán)利要求76中所述的式XXI的化合物，其中R25是烯丙基，R27是-CO2R32，A7是雜芳基并且A8是芳基。
85.一種式XXII表示的化合物
其中，
X是O、-N(R5)-、-N(R5)C(O)-、-C(O)N(R5)-、-OC(O)-、-CO2-或-N(R5)CO2-；
Y是O、S或-N(R5)-；
R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O；
R3代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R4代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且
n是1、2、3、4或5；
或一種式XXIII表示的化合物
其中，
X是O、-N(R10)-、-N(R10)C(O)-、-C(O)N(R10)-、-OC(O)-，-CO2-或-N(R10)CO2-；
Y是O、S或-N(R10)-；
R6是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R7獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R7一起形成＝O；
R8是芳基；
R9代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R10獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且
n是1、2、3、4或5；
或一種式XXIV表示的化合物
其中，
X是O、-N(R15)-、-N(R15)C(O)-、-C(O)N(R15)-、-OC(O)-、-CO2-或-N(R15)CO2-；
Y是O、S或-N(R15)-；
R11是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R12獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R12一起形成＝O；
R13代表芳基；
R14代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R15獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且
n是1、2、3、4或5；
86.權(quán)利要求85中所述的式XXII的化合物，其中R4是芳基，X是NH，并且R1是芳基。
87.權(quán)利要求85中所述的式XXIII的化合物，其中R9是芳基，X是NH，并且R6是芳基。
88.權(quán)利要求85中所述的式XXIV的化合物，其中R13是芳基，R14是芳基，并且X是NH。
89.一種式XXV所代表的化合物
其中，
X是O或S；
R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R5；
R2是H或烷基；
R3是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或一個(gè)任選被取代的雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；
R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；
R5是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R5是被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的一個(gè)芳基基團(tuán)；并且
每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
或一種式XXVI表示的化合物
其中，
X是O或S；
R7是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R11；
R8是H或烷基；
R9是芳基；
R10是H、烷基或-C(O)N(R12)2；
R11是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R11是被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR12、-N(R12)2、-CO2R12、C(O)N(R12)2、氰基或硝基任選取代的一個(gè)芳基基團(tuán)；并且
每個(gè)R12獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
或一種式XXVII表示的化合物
其中，
X是O或S；
R13是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R17；
R14是H或烷基；
R15是芳基；
R16是H、烷基、-CO2R18或-C(O)N(R18)2；
R17是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且
每個(gè)R18獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
或一種式XXVIII表示的化合物
XXVIII
其中，
X是O或S；
R19是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R23；
R20是H或烷基；
R21是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或一個(gè)任選被取代的雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；
R22是烷基、-CO2R18或-C(O)N(R18)2；
R23是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R23是可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR18，-N(R18)2、-CO2R18、C(O)N(R18)2、氰基或硝基任選取代的一個(gè)芳基基團(tuán)；并且
每個(gè)R18獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。
90.權(quán)利要求89中所述的式XXV的化合物，其中X是S，R1是-C(O)R5，R2是H，并且R4是-CO2R6。
91.權(quán)利要求89中所述的式XXVI的化合物，其中X是S，R7是-C(O)R11，并且R8是H。
92.權(quán)利要求89中所述的式XXVII的化合物，其中X是S，R13是-C(O)R17，R14是H，并且R16是-CO2R18。
93.一種式XXIX表示的化合物
其中，
X是O；
Y是-C(R8)-；
R1和R2獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基；
R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR9＝CR9)n-芳基或-(CR9＝CR9)n-雜芳基；
R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)可被任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；
每個(gè)R8和R9獨(dú)立地代表H或烷基；并且
n是1或2；
或由式XXX表示的一種化合物
其中，
X是-N(R16)-；
Y是-C(R17)-；
R10和R11獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R12是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R11和R12一起形成被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
R13是H、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基；
R14是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR18＝CR18)n-芳基或-(CR18＝CR18)n-雜芳基；
R15是H或烷基；或R14和R15一起形成可被任選取代的一個(gè)單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；
R16是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R10和R16一起形成被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
每個(gè)R17和R18獨(dú)立地代表H或烷基；并且
n是1或2。
94.權(quán)利要求93中所述的式XXX的化合物，其中R16、R10、R11和R12是烷基。
95.權(quán)利要求93中所述的式XXX的化合物，其中R16、R10、R11和R12是烷基，并且R13是H。
96.權(quán)利要求93中所述的式XXX的化合物，其中R16、R10、R11和R12是烷基，R13是H，并且R14是芳基。
97.一種式XXXI表示的化合物
其中，
R1和R3獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R2和R4獨(dú)立地代表氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R2一起形成一個(gè)3-8元環(huán)；或R3和R4一起形成一個(gè)3-8元環(huán)；并且
R5獨(dú)立地代表環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
或一種式XXXII表示的化合物
其中，
R6和R8獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R7和R9獨(dú)立地代表氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R6和R7一起形成一個(gè)3-8元環(huán)；或R8和R9一起形成一個(gè)3-8元環(huán)；并且
R10獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。
98.權(quán)利要求97中所述的式XXXI的化合物，其中R1和R2一起形成一個(gè)7元環(huán)，并且R3和R4一起形成一個(gè)7元環(huán)。
99.權(quán)利要求97中所述的式XXXI的化合物，其中R1和R2一起形成一個(gè)7元環(huán)，R3和R4一起形成一個(gè)7元環(huán)，并且R5是芳基。
100.權(quán)利要求97中所述的式XXXII的化合物，其中R1和R2一起形成一個(gè)7元環(huán)，R3和R4一起形成一個(gè)7元環(huán)，并且R5是烷基。
101.權(quán)利要求97中所述的式XXXI的化合物，其中R1和R3是芳基。
102.權(quán)利要求97中所述的式XXXI的化合物，其中R1、R3、和R5是芳基。
103.一種式XXXIII表示的化合物
其中，
X是O；
R1、R3和A獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；
R5是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子；
或一種式XXXIV表示的化合物
其中，
X是S；
R6代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R8和A獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R7和R9獨(dú)立地代表H或烷基；
R10是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子；
或一種式XXXV表示的化合物
其中，
X是S；
R11和A獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R13代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R12和R14獨(dú)立地代表H或烷基；
R15是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子；
或一種式XXXVI表示的化合物
其中，
X是S；
R16和R18獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
A代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R17和R19獨(dú)立地代表H或烷基；
R20是一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子。
104.權(quán)利要求103中所述的式XXXIV的化合物，其中X是S；A是芳基，R10是一個(gè)雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子，并且R8是芳基。
105.權(quán)利要求103中所述的式XXXV的化合物，其中X是S；A是芳基；R15是一個(gè)雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子，并且R11是芳基。
106.權(quán)利要求103中所述的式XXXVI的化合物，其中X是S；R20是一個(gè)雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子；R18是芳基，并且R16是芳基。
107.一種式XXXVII表示的化合物
其中，
R1、R2和R3獨(dú)立地代表H、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且
A獨(dú)立地是一個(gè)單環(huán)或雙環(huán)的芳基或雜芳基，所述芳基或雜芳基被鹵素、烷基、硝基、氨基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、環(huán)烷基或雜環(huán)烷基取代。
108.權(quán)利要求107中所述化合物，其中R1、R2和R3是H。
109.權(quán)利要求107中所述化合物，其中R1、R2和R3是H，并且A是由一個(gè)氨基取代的一個(gè)單環(huán)芳基。
110.權(quán)利要求107中所述化合物，其中R1、R2和R3是H，并且A是由一個(gè)硝基取代的一個(gè)單環(huán)芳基。
111.權(quán)利要求107中所述化合物，其中R1、R2和R3是H，并且A是由一個(gè)鹵素取代的一個(gè)單環(huán)芳基。
112.一種式XXXVIII表示的化合物
XXXVIII
其中，
R1代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R2和R3獨(dú)立地代表氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且
R4獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
或一種式XXXIX表示的化合物
其中，
R5代表烷基、雜烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R6和R7分別獨(dú)立地代表氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且
R8獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。
113.權(quán)利要求112中所述的式XXXVIII的化合物，其中R1是鹵代烷基。
114.權(quán)利要求112中所述的式XXXVIII的化合物，其中R1是鹵代烷基，并且R2和R3是芳基。
115.權(quán)利要求112中所述的式XXXVIII的化合物，其中R1是鹵代烷基，R2和R3是芳基，并且至少一個(gè)R4是氫。
116.權(quán)利要求112中所述的式XXXIX的化合物，其中R6和R7是芳基。
117.權(quán)利要求112中所述的式XXXIX的化合物，其中R6和R7是芳基；并且至少一個(gè)R8是芳基。
118.權(quán)利要求112中所述的式XXXIX的化合物，其中R6和R7是芳基，一個(gè)R8是芳基，一個(gè)R8是氫。
119.一種藥用組合物，含有一種藥學(xué)上可接受的賦形劑和權(quán)利要求60到118中的任何一項(xiàng)的化合物。
120.一種治療或預(yù)防藥物誘導(dǎo)的磷脂質(zhì)病的方法，包括以下步驟
對(duì)一位有需要的患者給與一個(gè)治療有效量的、式I到IX中任意之一的化合物，其中式I表示為
其中，
X是O或-N(R7)-；
Y是N或-C(R8)-；
R1和R2獨(dú)立地代表烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基、或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基；
R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR9＝CR9)n-芳基或-(CR9＝CR9)n-雜芳基；
R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)被任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；
R7是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R7一起形成被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
每個(gè)R8和R9獨(dú)立地代表H或烷基；并且
n是1或2；
式II表示為
其中，
X是O或-N(R6)-；
R1和R2獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R3是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R2和R3一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
R4是氫、烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基；
R5是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R6是氫、烷基、雜烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R1和R6一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；
式III表示為
其中，
R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R7)2)n-(CR7＝C(R7)2)；
R2是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或烷基；
R3的是氫、烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)；并且
R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵；
每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基；
每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且
A1和A2獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR7＝CR7)-芳基或-(CR7＝CR7)-雜芳基；
式IV表示為
其中，
A是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基；
R2是烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R3獨(dú)立地代表H或烷基；并且
R4是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
式V表示為
其中，
X是O、-N(R5)-、-N(R5)C(O)-、-C(O)N(R5)-、-OC(O)-、-CO2-或-N(R5)CO2-
Y是O、S或-N(R5)-；
R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O；
R3和R4獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且
n是1、2、3、4或5；
式VI表示為
VI
其中，
X是O、S或-N(R4)-；
R1是環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)；
R2是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基；
R3是H、烷基、烯基、芳基或雜芳基；或R2和R3一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子；
每個(gè)R4與R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且
n是1、2、3、4或5；
式VII表示為
其中，
X是O或S；
R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或-C(O)R5；
R2是H或烷基；
R3是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基或一個(gè)任選被取代的雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；
R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；
R5是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；或R5是被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的一個(gè)芳基基團(tuán)；并且
每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
式VIII表示為
其中，
X是O或S；
R1、R3和A獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；
R5是一個(gè)可被任選取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子；并且
式IX表示為
其中，
X1是-OR5、-SR5或-N(R5)2；
每個(gè)X2獨(dú)立地代表O、S或-N(R5)-；
每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、烯基、炔基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2；
R2和R4獨(dú)立地代表環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
R3是H、烷基或鹵素；
每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；
每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且
n是0、1、2、3或4。
121.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物。
122.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是O或-N(R7)-；Y是N；R1和R2獨(dú)立地代表烷基、鹵代烷基或芳基；R3是芳基；或R2和R3一起形成被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；R4是氫；R5是雜環(huán)烷基或芳基；R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；并且R7是氫；或R1和R7一起形成被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)。
123.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是-N(R7)-；Y是N；R1和R2是芳基；R3是芳基；或R2和R3一起形成被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)；R4是氫；R5是雜環(huán)烷基或芳基；R6是H或烷基；或R5和R6一起形成一個(gè)任選被取代的單環(huán)或雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；并且R7是氫；或R1和R7一起形成可被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基、烷氧基或氨基任選取代的一個(gè)3-8元環(huán)。
124.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式I的化合物，X是O或-N(R7)-；Y是-C(R8)-；R1和R2獨(dú)立地代表烷基、雜烷基或鹵代烷基；R3是氫、烷基、雜烷基或鹵代烷基；R4是氫；R5是雜芳基；R6是H或烷基；R7是氫、烷基、雜烷基或鹵代烷基；并且R8是H或烷基。
125.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式II的化合物。
126.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式II的化合物，X是-N(R6)-；R1、R2和R5獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；并且R3、R4和R6獨(dú)立地代表氫或烷基。
127.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物。
128.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物；R1、R2、A1和A2獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R3是氫或烷基；R6是H或烷基；并且L是一個(gè)鍵。
129.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物；R1是-(C(R7)2)n-(CR7＝C(R7)2)；R2是烷基；R3是烷基、-CO2R8或-C(O)N(R7)(R8)；R4與R5獨(dú)立地代表H或烷基；或R4與R5一起形成一個(gè)鍵；每個(gè)R6和R7獨(dú)立地代表H或烷基；每個(gè)R8獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；L是一個(gè)鍵、-C(R7)2-或-(CR7＝CR7)-；并且A1和A2獨(dú)立地代表烷基或雜烷基。
130.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式IV的化合物。
131.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式IV的化合物；A、R1和R4獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R1是環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、-(CR3＝CR3)-芳基或-(CR3＝CR3)-雜芳基；R2是烷基或芳基；并且每個(gè)R3獨(dú)立地代表H或烷基。
132.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式V的化合物。
133.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式V的化合物；X是-C(O)N(R5)-或-CO2-；Y是O或S；R1、R3和R4獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；每個(gè)R2獨(dú)立地代表H或烷基，或2個(gè)R2一起形成＝O；R3和R4獨(dú)立地代表環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烯基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。
134.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物。
135.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式VI的化合物；X是S；R1是芳基、雜芳基或-(C(R5)2)n-(CR5＝C(R5)2)；R2是芳基、雜芳基、-(CR5＝CR5)-芳基或-(CR5＝CR5)-雜芳基；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基或芳烷基；并且n是1或2。
136.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物。
137.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物；X是O或S；R1的是芳基、雜芳基或-C(O)R5；R2是H或烷基；R3是芳基、雜芳基或一個(gè)任選被取代的雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1或2個(gè)雜原子；R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；R5是被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的一個(gè)芳基基團(tuán)；并且每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基。
138.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式VII的化合物；X是O或S；R1的是芳基、雜芳基或-C(O)R5；R2是H或烷基；R3代表
R4是H、烷基、-CO2R6或-C(O)N(R6)2；R5是被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、-OR6、-N(R6)2、-CO2R6、C(O)N(R6)2、氰基或硝基任選取代的一個(gè)芳基基團(tuán)；每個(gè)R6獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；m是0、1、2、3或4；并且每個(gè)R7獨(dú)立地代表鹵素、羥基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷基或烷氧基。
139.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物。
140.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物；X是O或S；R1、R3和A獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；并且R5是一個(gè)任選被取代的雙環(huán)，所述環(huán)具有選自O(shè)、N和S的1、2或3個(gè)雜原子。
141.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式VIII的化合物；X是O或S；R1、R3和A獨(dú)立地代表芳基或雜芳基；R2和R4獨(dú)立地代表H或烷基；R5代表
其中n是0、1、2、3或4；每個(gè)R7獨(dú)立地代表鹵素、羥基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷基或烷氧基。
142.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式IX的化合物。
143.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述化合物是一種式IX的化合物；X1是-N(R5)2；每個(gè)X2獨(dú)立地代表O或S；每個(gè)R1獨(dú)立地代表烷基、鹵素、硝基、氰基、烷氧基、-N(R5)2、-OH、-C(O)R6、-CO2R5或C(O)N(R5)2；R2和R4獨(dú)立地代表芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；R3是H、烷基或鹵素；每個(gè)R5獨(dú)立地代表H、烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；每個(gè)R6獨(dú)立地代表烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基；并且n是0、1、2、3或4。
144.權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物是
145.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述的患者是哺乳動(dòng)物。
146.權(quán)利要求120中所述的方法，其中所述的患者是人類。
147.權(quán)利要求1、29、或120中所述的方法，其中所述化合物是一種式III的化合物，R1包含一個(gè)羧酸基團(tuán)；R1是一個(gè)羧酸取代的芳基；R1是一個(gè)羧酸取代的苯基；和/或R1的是一個(gè)羧酸對(duì)位取代的苯基。
148.權(quán)利要求76中所述的具有式XVIII的化合物，其中R1包含一個(gè)羧酸基團(tuán)；R1是一個(gè)羧酸取代的芳基；R1是一個(gè)羧酸取代的苯基；和/或R1的是一個(gè)羧酸對(duì)位取代的苯基。
149.權(quán)利要求76中所述的具有式XX的化合物，其中R17包含一個(gè)羧酸基團(tuán)；R17是一個(gè)羧酸取代的芳基；R17是一個(gè)羧酸取代的苯基；和/或R17的是一個(gè)羧酸對(duì)位取代的苯基。
全文摘要
本說(shuō)明書公開的化合物可用于本說(shuō)明書公開的方法中，所述方法用于降低細(xì)胞中膽固醇的量、用于對(duì)患有特征為膽固醇細(xì)胞累積的病癥的患者進(jìn)行治療(如C型尼曼-匹克病或動(dòng)脈粥樣硬化)和/或治療或預(yù)防磷脂質(zhì)病。在一些實(shí)施方案中，這些化合物可包括吡咯酮或三嗪部分。
文檔編號(hào)A61K31/53GK101351208SQ200680049880
公開日2009年1月21日 申請(qǐng)日期2006年11月1日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月1日
發(fā)明者F·馬克斯菲爾德, A·索夫 申請(qǐng)人:康乃爾研究基金會(huì)有限公司