專利名稱：：修正蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊的小型化合物及其使用的制作方法修正蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊的小型化合物及其使用相互參照的相關(guān)申請(qǐng)案本申請(qǐng)案以2005年7月27日所申請(qǐng)的美國(guó)第60/703，068號(hào)臨時(shí)申請(qǐng)案主張優(yōu)先權(quán)，其內(nèi)容在此并入作為參考。聯(lián)邦政府贊助研究所完成發(fā)明的權(quán)利說(shuō)明本工作是由國(guó)家眼科研究所贊助支持，批準(zhǔn)號(hào)為EY016070-01。政府可擁有本發(fā)明的一定權(quán)利。
背景技術(shù)：
：蛋白質(zhì)必須折疊成正確的三維構(gòu)象以達(dá)到其生物功能。一條多肽的天然構(gòu)象編碼在其初級(jí)的氨基酸序列中，而且即使只是在一條氨基酸序列中的單一突變，也會(huì)損害蛋白質(zhì)完成其適當(dāng)構(gòu)象的能力。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)無(wú)法正確折疊時(shí)，其在生物上和臨床上的作用會(huì)因而受到破壞。蛋白質(zhì)的聚集和錯(cuò)誤折疊是造成許多人類疾病的主要原因，例如常染色體顯性視網(wǎng)膜色素變性、阿爾茨海默癥(Alzheimer'sdisease)、a1-抗胰蛋白酶缺乏癥、囊狀纖維癥、腎源性尿崩癥和朊介導(dǎo)感染等。在特定的生化途徑中缺乏所需功能的蛋白質(zhì)量，會(huì)導(dǎo)致如囊狀纖維癥的疾病，其中，發(fā)生在囊狀纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白(CFTR)，也就是在上皮細(xì)胞頂端膜上所表達(dá)的cAMP激活氯離子通道的突變，會(huì)影響其形成、加工和運(yùn)送至需要其功能的細(xì)胞質(zhì)膜的能力。在其他蛋白質(zhì)折疊的疾病中，由于錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的細(xì)胞毒性作用所導(dǎo)致的疾病，有如因淀粉樣斑的聚集而造成神經(jīng)元損傷的阿爾茨海默癥。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的特色為通過(guò)在活體內(nèi)修正錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)，因而適于治療或預(yù)防蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病的組成物和方法，以及在真核細(xì)胞中增加表達(dá)具有生化功能構(gòu)象的重組蛋白質(zhì)的方法。一方面，本發(fā)明的特色大體而言是治療以患有蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病(PCD)(例如a1-抗胰蛋白酶、囊狀纖維癥、亨廷頓病(Huntington'sdisease)、帕金森氏癥(Parkinson，sdisease)、阿爾茨海默癥、腎源性尿崩癥、癌癥和Jacob-Creutzfeld病)為對(duì)象(例如人類的哺乳動(dòng)物)的方法。所述方法包括投予任何一種或更多種的下列化合物蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑，其中，所述對(duì)象被投予有效劑量的前述化合物以進(jìn)行治療。在一個(gè)具體例中，所述的PCD是選自由視網(wǎng)膜色素變性、老年黃斑變性、青光眼、角膜營(yíng)養(yǎng)不良、視網(wǎng)膜劈裂癥、斯特格病變(Stargardt，sdisease)、常染色體顯性玻璃膜疣和貝斯特黃斑營(yíng)養(yǎng)不良(Best'smaculardystrophy)所組成群組的眼部PCD。在另一個(gè)具體例中，所述方法進(jìn)一步涉及投予所述對(duì)象11-順式-視黃醛、9-順式-視黃醛或11-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體。至少一種前述化合物和11-順式-視黃酸、9-順式-視黃醛或11-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體的組合，特別適于治療視網(wǎng)膜色素變性和老年黃斑變性。在其他具體例中，所述的PCD為囊狀纖維癥，則前述方法進(jìn)一步涉及投予選自由抗生素、維生素A、D、E和K的補(bǔ)充劑、沙丁胺醇支氣管擴(kuò)張、鏈道酶和布洛芬所組成群組的試劑；所述的PCD為亨廷頓病，則前述方法進(jìn)一步涉及投予選自由氟呱啶醇、吩噻嗪、利血平、丁苯那嗪、金剛烷胺和輔酶Q10所組成群組的試劑；所述的PCD為帕金森氏癥，則前述方法進(jìn)一歩涉及投予選自由左旋多巴、金剛烷胺、溴隱停、培高利特、阿撲嗎啡、芐絲肼、麥角乙脲、美舒麥角、麥角脲、麥角腈、美金剛胺、甲麥角林、吡貝地爾、酪胺、酪氨酸、苯丙氨酸、甲磺酸溴隱亭、甲磺酸培高利特、抗組胺劑、抗抑郁藥和單胺氧化酶抑制劑所組成群組的試劑；所述的PCD為阿爾茨海默癥，則前述方法進(jìn)一步涉及投予選自由多奈呱齊、利斯的明、加蘭他敏和他克林所組成群組的試劑；所述的PCD病為腎源性尿崩癥，則前述方法進(jìn)一步涉及投予選自由氯噻嗪/氫氯噻嗪、阿米洛利和口引哚美辛所組成群組的試劑；所述的PCD是癌癥，則前述方法進(jìn)一步涉及投予選自由阿比特龍醋酸、六甲蜜胺、脫水長(zhǎng)春堿、auristatin、貝沙羅汀、比卡魯胺、BMS184476、2，3,4,5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧苯基)苯磺酰胺、博來(lái)霉素、N,N-二甲基-L-纈氨酰-L-纈氨酰-N-甲基-L-纈氨酰-L-脯氨酰-L-脯氨酸-t-丁酰胺、腫瘤壞死因子、西馬多丁、苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、3'，4'-二脫氫基-4'-脫氧-8'-去甲長(zhǎng)春堿、多西紫杉醇、多西他賽、卡鉑、卡莫司汀(BCNU)、順鉑、自念珠藻環(huán)肽、環(huán)磷酰胺、阿糖胞苷、達(dá)卡巴嗪(DTIC)、放線菌素、柔紅霉素、海兔毒素、多柔比星(阿霉素)、依托泊苷、5-氟尿嘧啶、非那雄胺、氟他胺、羥基脲和羥基脲紫杉烷、異環(huán)磷酰胺、利阿唑、氯尼達(dá)明、洛莫司汀(CCNU)、甲二氯甲二乙胺(氮芥)、美法侖、羥乙基磺酸米伏布林、根瘤菌素、sertenef、鏈脲佐菌素、絲裂霉素、甲氨蝶呤、尼魯米特、奧那司酮、紫杉醇、潑尼莫司汀、丙卡巴肼、RPR109881、磷酸雌二醇氮芥、他莫昔芬、他索那明、紫杉醇、維甲酸、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿、硫酸長(zhǎng)春地辛堿和長(zhǎng)春氟寧所組成群組的試劑在一個(gè)相關(guān)的方面中，本發(fā)明的特色是治療以被診斷患有視網(wǎng)膜色素變性為對(duì)象的方法，前述方法涉及投予所述對(duì)象11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛；以及投予至少一種額外選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的化合物，其中，11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和前述化合物是以有效的劑量同時(shí)或在14天內(nèi)相互投予所述對(duì)象以進(jìn)行治療。在前述方面的多個(gè)具體例中，11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和前述化合物是在24小時(shí)內(nèi)，5、10或14天內(nèi)相互投予；或是同時(shí)投予。在前述方面的其他具體例中，11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和前述化合物是投予眼部(例如眼內(nèi))。在前述方面的其他具體例中，ll-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和前述化合物各別混入提供其長(zhǎng)期釋放的組成物中(例如微球體、納米球體或納米乳劑)或使用給藥裝置以達(dá)到其長(zhǎng)期的釋放。在前述方面的其他具體例中，前述方法進(jìn)一步包括投予維生素A的補(bǔ)充劑。在又一個(gè)方面中，本發(fā)明的特色為在細(xì)胞內(nèi)提高具有生化功能構(gòu)象的蛋白質(zhì)量的方法，所述方法涉及將細(xì)胞與至少一個(gè)選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的有效量化合物接觸；以及識(shí)別前述具有生化功能構(gòu)象的蛋白質(zhì)量的提高。在一個(gè)具體例中，前述方法進(jìn)一步涉及將所述細(xì)胞與11-順式-視黃醛、9-順式-視黃醛或ll-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體接觸。在另一個(gè)具體例中，所述細(xì)胞(例如活體外或活體內(nèi)的哺乳動(dòng)物或人類細(xì)胞)包括形成聚集體或纖維蛋白質(zhì)的突變蛋白質(zhì)(例如視蛋白、肌纖蛋白、脂褐質(zhì)蛋白、3-H3)。在又另一個(gè)方面中，本發(fā)明的特色是一種用于治療眼部PCD的藥學(xué)組成物，其是在藥學(xué)上可接受的賦形劑中包含有有效劑量的11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和至少一個(gè)額外選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的有效量化合物。在又另一個(gè)方面中，本發(fā)明的特色是一種用于治療視網(wǎng)膜色素變性的藥學(xué)組成物，其是在藥學(xué)上可接受的賦形劑中包含有有效劑量的11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和至少一個(gè)額外選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的有效量化合物。在另一個(gè)方面中，本發(fā)明的特色是一種用于治療眼部PCD的試劑盒，所述試劑盒包括有效劑量的11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和至少一個(gè)額外選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的有效量化合物。在又另一個(gè)方面中，本發(fā)明的特色是一種用于治療視網(wǎng)膜色素變性的試劑盒，所述試劑盒包括有效劑量的11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和至少一個(gè)額外選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的有效量化合物。20在又另一個(gè)方面中，本發(fā)明的特色是一種識(shí)別適用于治療以患有眼部PCD為對(duì)象的化合物的方法，所述方法涉及在活體外將表達(dá)錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的細(xì)胞與候選化合物接觸；以及確定從所述細(xì)胞中恢復(fù)成正確折疊的蛋白質(zhì)相對(duì)于對(duì)照細(xì)胞的產(chǎn)量，其中，通過(guò)在所述被接觸細(xì)胞內(nèi)正確折疊蛋白質(zhì)產(chǎn)量的提高，識(shí)別適用于治療以患有PCD為對(duì)象的化合物。在又另一個(gè)方面中，本發(fā)明的特色是一種識(shí)別適用于治療以患有視網(wǎng)膜色素變性為對(duì)象的化合物的方法，所述方法涉及在活體外將表達(dá)錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的細(xì)胞與(i)ll-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛，以及(ii)候選化合物接觸；以及確定從所述細(xì)胞中恢復(fù)成正確折疊的蛋白質(zhì)相對(duì)于對(duì)照細(xì)胞的產(chǎn)量，其中，通過(guò)在所述被接觸細(xì)胞內(nèi)正確折疊蛋白質(zhì)產(chǎn)量的提高，識(shí)別適用于治療以患有視網(wǎng)膜色素變性為對(duì)象的化合物。在一個(gè)具體例中，所述的錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)(例如視蛋白)包含有突變(例如P23H突變)。在又另一個(gè)方面中，本發(fā)明的特色是一種治療以患有蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病(PCD)為對(duì)象的方法。本發(fā)明涉及投予所述對(duì)象有效劑量的蛋白酶體抑制劑或自噬抑制劑以治療所述對(duì)象。在又另一個(gè)方面中，本發(fā)明的特色是一種治療以患有視網(wǎng)膜色素變性為對(duì)象的方法，所述方法涉及投予所述對(duì)象有效劑量的蛋白酶體抑制劑或自噬抑制劑(例如3-甲基腺嘌呤)以治療所述對(duì)象。在一個(gè)具體例中，前述的蛋白酶體抑制劑是可逆性的蛋白酶體抑制劑(例如MG132)。在另一個(gè)具體例中，前述的自噬抑制劑選自由3-甲基腺嘌呤、3-甲基腺苷、腺苷、岡田酸、TV6-巰基嘌呤核糖核苷(A^-MPR)、胺基硫化腺苷類似物、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核糖核苷(AICAR)和巴佛洛霉素Al所組成的群組。在又另一個(gè)方面中，本發(fā)明的特色是一種用于產(chǎn)生具有生化功能構(gòu)象的重組蛋白質(zhì)的方法，前述方法涉及將表達(dá)前述重組蛋白質(zhì)的細(xì)胞(例如，真核細(xì)胞、酵母細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞)與選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp卯伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的化合物接觸；以及從所述細(xì)胞中分離前述的重組蛋白質(zhì)，其中，所述方法產(chǎn)生具有生化功能構(gòu)象的重組蛋白質(zhì)。在一個(gè)具體例中，所述方法進(jìn)一步包括測(cè)量前述蛋白質(zhì)的生物活性。在另一個(gè)具體例中，前述的生物活性是通過(guò)使用酶分析或分光光度法測(cè)得。在另一個(gè)具體例中，所述方法進(jìn)一步涉及將前述細(xì)胞與11-順式-視黃醛(例如11-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體)接觸。在任何前述方面的多個(gè)具體例中，所述的蛋白酶體抑制劑(例如可逆性的蛋白酶體抑制劑)是任何一種或更多種的MG132、乳胞素、分裂乳胞素-e-內(nèi)酯、PSI、MG-115、MG-101、N-乙?；?亮氨酸-亮氨酸-蛋氨酸-醛、N-羧苯甲?；?甘氨酸-脯氮酸-苯丙氨酸-亮氨酸-醛、N-羧苯甲?；?甘氨酸-脯氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-醛、N-羧苯甲?；?亮氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸-醛及其鹽或類似物；所述的自噬抑制劑是任何一種或更多種的3-甲基腺嘌呤、3-甲基腺苷、腺苷、岡田酸、#-巰基嘌呤核糖核苷(A^-MPR)、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核糖核苷(AICAR)、巴佛洛霉素Al及其鹽或類似物；所述的溶酶體抑制劑是任何一種或更多種的亮抑酶肽、反式-環(huán)氧琥珀酰-L-亮氨酰胺-(4-胍基)丁垸、L-蛋氨酸甲酯、氯化銨、甲胺、氯喹及其鹽或類似物；所述的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑是布雷菲德菌素A及其鹽或類似物；所述的Hsp90伴侶分子抑制劑是一種或更多種的苯醌安莎霉素類抗生素、格爾德霉素、17-丙烯胺基-17-脫甲氧基格爾德霉素、根赤殼菌素、新生霉素和結(jié)合于Hsp90ATP/ADP袋的Hsp90抑制劑及其鹽或類似物；所述的熱休克反應(yīng)激活劑是選自由雷公藤紅素、雷公藤紅素甲酯、二氫雷公藤紅素二乙酸、雷公藤紅素丁酯和二氫雷公藤紅素所組成的群組；所述的糖苷酶抑制劑是任何一種或更多種的鹽酸austmline、栗精胺、6-乙酰胺-6-脫氧-栗精胺、鹽酸脫氧巖藻糖野尻霉素(DFJ)、脫氧野尻霉素(DNJ)、鹽酸脫氧半乳糖野尻霉素(DGJ)、鹽酸脫氧甘露糖野尻霉素(DMJ)、2R,5R-雙(羥甲基)-3R,4R-二羥基吡咯垸(DMDP)、鹽酸1，4-二脫氧-1,4-亞氨基-D-甘露醇、鹽酸3R,4R，5R，6R-3,4,5,6-四羥基氮雜環(huán)庚烷、1，5-二脫氧-l，5-亞氨基-木糖醇、Kifunensine、N-丁基脫氧野尻霉素(BDNJ)、N-壬基DNJ(NDNJ)、N-己基DNJ(HDNJ)、N-甲基脫氧野尻霉素(MDNJ)及其鹽或類似物；所述的組蛋白去乙酰酶抑制劑是任何一種或更多種的Scriptaid、APHA化合物8、Apicidin、丁酸鈉、(-)-Depudecin、Sirtinol、曲古菌素A及其鹽或類似物。在任何前述方面的多個(gè)具體例中，所述的眼部PCD是任何一種的老年黃斑變性、視網(wǎng)膜色素變性、青光眼、角膜營(yíng)養(yǎng)不良、視網(wǎng)膜劈裂癥、斯特格病變、常染色體顯性玻璃膜疣或貝斯特黃斑營(yíng)養(yǎng)不良，或任何其他以眼部細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)聚集體或纖維沉積為特征的眼部疾病。在多個(gè)方面中，形成這些聚集體或纖維的突變蛋白質(zhì)是視蛋白、肌纖蛋白、脂褐質(zhì)蛋白或BIGH3P-H3。在任何前述方面的其他具體例中，所述對(duì)象包括影響蛋白質(zhì)折疊的突變(例如在視蛋白中的P23H突變)。圖1A和1B分別顯示MG132和11-順式-視黃醛對(duì)P23H突變和野生型視紫質(zhì)作用的吸收光譜吸光度。圖2A和2B顯示3-甲基腺嘌呤和11-順式-視黃醛對(duì)P23H突變和野生型視紫質(zhì)作用的吸收光譜吸光度。圖3A和3B顯示氯化銨和11-順式-視黃醛對(duì)P23H突變和野生型視紫質(zhì)作用的吸收光譜吸光度。圖4A和4B顯示布雷菲德菌素A和11-順式-視黃醛對(duì)P23H突變和野生型視紫質(zhì)作用的吸收光譜吸光度。圖5A和5B顯示格爾德霉素和11-順式-視黃醛對(duì)P23H突變和野生型視紫質(zhì)作用的吸收光譜吸光度。圖6A和6B顯示雷公藤紅素和11-順式-視黃醛對(duì)P23H突變和野生型視紫質(zhì)作用的吸收光譜吸光度。圖7A和7B顯示二氫雷公藤紅素和11-順式-視黃醛對(duì)P23H突變和野生型視紫質(zhì)作用的吸收光譜吸光度。圖8A和8B顯示Scriptaid和11-順式-視黃醛對(duì)P23H突變和野生型視紫質(zhì)作用的吸收光譜吸光度。具體實(shí)施方式定義"蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病"是指一種病理涉及錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)存在的疾病或病癥。在一個(gè)具體例中，蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病是因錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)干擾細(xì)胞、組織或器官的正常生物活性所造成。"蛋白酶體抑制劑"是指一種降低如泛醌蛋白降解的蛋白酶體活性的化合物。"自噬抑制劑"是指一種在細(xì)胞成分所在的細(xì)胞中降低其成分降解的化合物。"溶酶體抑制劑"是指一種降低通過(guò)溶酶體在細(xì)胞內(nèi)消化大分子的化合物。在一個(gè)具體例中，溶酶體抑制劑降低溶酶體的蛋白質(zhì)水解活性。"內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑"是指一種降低蛋白質(zhì)從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向高爾基體或從高爾基體向內(nèi)質(zhì)網(wǎng)運(yùn)輸?shù)幕衔铩?Hsp90伴侶分子抑制劑"是指一種降低Hsp90伴侶活性的化合物。在一個(gè)具體例中，所述抑制劑改變蛋白質(zhì)結(jié)合到Hsp90的ATP/ADP袋。"熱休克反應(yīng)激活劑"是指一種提高熱休克途徑成分的伴侶活性或表達(dá)的化合物。熱休克途徑成分包括，但不局限于，HsplOO、Hsp90、Hsp70、Hsp60、Hsp40和小型的HSP家族成員。"糖苷酶抑制劑"是指一種降低糖苷鍵分裂酶活性的化合物。"組蛋白去乙酰酶抑制劑"是指一種降低組蛋白去乙?；富钚缘幕衔?。"降低"或"增加"是指至少分別為10%、25%、50%、75%或100%的負(fù)向或正向改變。"生化功能的構(gòu)象"是指使蛋白質(zhì)具有其生物活性的三級(jí)結(jié)構(gòu)。當(dāng)突變蛋白質(zhì)呈現(xiàn)生化功能的構(gòu)象時(shí)，其生物活性提高。因此，具有生化功能構(gòu)象的突變蛋白質(zhì)可在某種程度上功能性地取代野生型蛋白質(zhì)。發(fā)明方法在一個(gè)具體例中，本發(fā)明提供治療疾病和/或病癥或其癥狀的方法，其包括投予所述對(duì)象(例如人類的哺乳動(dòng)物)包含前述配方的化合物且在治療上有效劑量的藥學(xué)組成物。因此，一個(gè)具體例為一種治療以患有或易受蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病或病癥或其癥狀影響為對(duì)象的方法。所述方法包括在前述疾病或病癥被治療的情況下，投予哺乳動(dòng)物醫(yī)療上有效24的劑量且足以治療前述疾病或病癥或其癥狀的化合物。在此的方法包括投予所述對(duì)象(包括經(jīng)識(shí)別需接受前述治療的對(duì)象)在此所描述有效劑量的化合物或組成物，以產(chǎn)生所述效果?？山?jīng)由所述對(duì)象或健康護(hù)理專業(yè)者的判斷和可主觀地(例如觀點(diǎn))或客觀地(例如通過(guò)測(cè)試或診斷方法測(cè)量)識(shí)別需接受前述治療的對(duì)象。在此所使用的術(shù)語(yǔ)"治療"及其類似者是指降低或改善病癥和/或與其相關(guān)的癥狀。可被理解的是，盡管治療的病癥或狀態(tài)未被排除，仍不需要所述病癥、狀態(tài)或其相關(guān)癥狀被完全消除。在此所使用的術(shù)語(yǔ)"預(yù)防"、"預(yù)防治療"及其類似者是指降低所述對(duì)象發(fā)展疾病或狀態(tài)的可能性，其中，所述對(duì)象雖未患有，但仍存在有發(fā)展疾病或狀態(tài)的風(fēng)險(xiǎn)或易受其影響。本發(fā)明的治療方法(包括預(yù)防治療)通常包括投予有效劑量的前述化合物，如投予所述對(duì)象(例如，動(dòng)物，人類)包括哺乳動(dòng)物，尤其為人類，其所需的配方化合物。所述治療將適合投予遭受、患有、易受影響于或?qū)膊?、病癥或其癥狀存在風(fēng)險(xiǎn)的所述對(duì)象，尤其為人類。對(duì)于確定"存在風(fēng)險(xiǎn)"的對(duì)象可通過(guò)任何診斷測(cè)試或所述對(duì)象或?qū)I(yè)健康護(hù)理提供者C例如基因測(cè)試、酶或蛋白質(zhì)標(biāo)記、標(biāo)記(如在此所定義)、家族史及其類似者)的觀點(diǎn)予以客觀或主觀地確定。所述的化合物也可用于治療任何其他涉及蛋白質(zhì)折疊(包括錯(cuò)誤折疊)的疾病。本發(fā)明的特征是在活體內(nèi)修正錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的組成物和方法。錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)可干擾正常的細(xì)胞功能，并可導(dǎo)致人類的蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病(PCD)。PCD包括a1-抗胰蛋白酶缺乏癥、囊狀纖維癥、亨廷頓病、帕金森氏癥、阿爾茨海默癥、腎源性尿崩癥、癌癥和朊相關(guān)疾病(例如Jacob-Creutzfeld病)。本發(fā)明的組成物和方法尤其適用于預(yù)防或治療眼部的PCD，包括視網(wǎng)膜色素變性、老年黃斑變性、青光眼、角膜營(yíng)養(yǎng)不良、視網(wǎng)膜劈裂癥、斯特格病變、常染色體顯性玻璃膜疣、貝斯特黃斑營(yíng)養(yǎng)不良和角膜營(yíng)養(yǎng)不良。本發(fā)明的組成物可用于治療前述的PCD，用以減緩受影響細(xì)胞的死亡、減輕由前述PCD所引起的癥狀或從初始階段預(yù)防PCD。本發(fā)明大致上是基于發(fā)現(xiàn)11-順式-視黃醛與蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑或組蛋白去乙酰酶抑制劑的組合可用于修正視蛋白錯(cuò)誤折疊的構(gòu)象或增加細(xì)胞內(nèi)正確折疊蛋白質(zhì)的量。特別的是，11-順式-視黃醛與蛋白酶體抑制劑MG132、自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤、溶酶體抑制劑氯化銨、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑布雷菲德菌素A、Hsp90伴侶分子抑制劑格爾德霉素、熱休克反應(yīng)激活劑雷公藤紅素或組蛋白去乙酰酶抑制劑Scriptaid的組合使視蛋白的P23H突變呈現(xiàn)生化功能的構(gòu)象，并結(jié)合11-順式-視黃醛以形成視紫質(zhì)。另外，蛋白酶體抑制劑MG132和自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤各自獨(dú)立地使用以修正P23H視蛋白突變的構(gòu)象，并使其形成視紫質(zhì)。蛋白酶體抑制劑26S蛋白酶體是將泛醌蛋白質(zhì)分裂為短肽的多催化性蛋白酶。蛋白酶體抑制劑是一類可單獨(dú)或與11-順式-視黃醛、9-順式-視黃醛或11-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體組合使用以治療PCD的化合物。MG-132是可單獨(dú)或與11-順式-視黃醛、9-順式-視黃醛或11-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體組合使用的蛋白酶體抑制劑。MG-132尤其適合治療視網(wǎng)膜色素變性和其他涉及蛋白質(zhì)聚集或蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊的眼部疾病。本發(fā)明方法中所使用的其他蛋白酶體抑制劑包括乳胞素(LC)、分裂乳胞素-P-內(nèi)酯、PSI(N-羧苯甲酰基-異亮氨酸-谷氨酸-(叔丁酯)-丙氨酸-亮氨酸-醛)、MG-132(N-羧苯甲?；?亮氨酸-亮氨酸-亮氨酸-醛)、MG-115(N-羧苯甲?；?亮氨酸-亮氨酸-正纈氨酸-醛)、MG-lOl(N-乙?；?亮氨酸-亮氨酸-正亮氨酸-醛)、ALLM(N-乙?；?亮氨酸-亮氨酸-蛋氨酸-醛)、N-羧苯甲酰基-甘氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-醛、N-羧苯甲?；?甘氨酸-脯氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-醛、N-羧苯甲?；?亮氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸-醛及其鹽或類似物。其他蛋白酶體抑制劑和其使用例示描述在美國(guó)第6,492,333號(hào)專利案中。自噬抑制劑自噬作用是一種在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)降解細(xì)胞內(nèi)成分的進(jìn)化保守機(jī)制，在饑餓細(xì)胞內(nèi)并作為一種細(xì)胞存活的機(jī)制。在細(xì)胞質(zhì)片段被封入細(xì)胞膜內(nèi)的自噬過(guò)程中，形成最終與溶酶體融合的自噬小體，以將其成分降解。自噬抑制劑可單獨(dú)使用或與11-順式-視黃醛、9-順式-視黃醛或11-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體組合以治療PCD。自噬抑制劑3-甲基腺26嘌呤尤其適于治療視網(wǎng)膜色素變性或其他涉及錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)聚集的眼部疾病。本發(fā)明方法所使用的自噬抑制劑包括，但不局限于，3-甲基腺嘌呤、3-甲基腺苷、腺苷、岡田酸、TV6-巰基嘌呤核糖核苷(A^-MPR)、胺基硫化腺苷類似物、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核糖核苷(AICAR)、巴佛洛霉素A1及其鹽或類似物。溶酶體抑制劑溶酶體是細(xì)胞蛋白質(zhì)降解的主要場(chǎng)所。通過(guò)質(zhì)膜蛋白質(zhì)受體所介導(dǎo)的內(nèi)吞作用或胞飲作用進(jìn)入細(xì)胞，使蛋白質(zhì)的降解在溶酶體內(nèi)發(fā)生。如氯化銨、亮抑酶肽、反式-環(huán)氧琥珀酰-L-亮氨酰胺-(4-胍基)丁烷、L-蛋氨酸甲酯、氯化銨、甲胺、氯喹及其鹽或類似物的溶酶體抑制劑與11-順式-視黃醛、9-順式-視黃醛或11-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體組合使用以治療PCD。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-高爾基體運(yùn)輸抑制劑新合成的蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中進(jìn)入生物合成-分泌途徑。為了從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中離開(kāi)，蛋白質(zhì)必須恰當(dāng)?shù)卣郫B，錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)則被留滯于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-高爾基體運(yùn)輸抑制劑適于治療PCD。布雷菲德菌素A是一個(gè)適于本發(fā)明方法使用的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-高爾基體運(yùn)輸抑制劑的實(shí)例。HSP90伴侶分子抑制劑熱休克蛋白90(Hsp90)的作用為伴護(hù)涉及細(xì)胞信號(hào)傳遞、增生和存活的蛋白質(zhì)，是許多蛋白質(zhì)構(gòu)象的穩(wěn)定性和功能所必須的。HSP90抑制劑與11-順式-視黃醛、9-順式-視黃醛或11-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體組合使用以治療PCD。HSP90抑制劑包括如格爾德霉素和17-丙烯胺基-17-脫甲氧基格爾德霉素(17-AGG)的苯醌安莎霉素類抗生素，其特異性地結(jié)合Hsp90，改變其功能，并促進(jìn)底物蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)水解。其他的HSP90抑制劑包括，但不局限于，根赤殼菌素、新生霉素和任何結(jié)合于Hsp90ATP/ADP袋的Hsp90抑制劑。熱休克反應(yīng)激活劑雷公藤紅素是一種啟動(dòng)人類熱休克反應(yīng)的醌甲基三萜，與11-順式-視黃醛、9-順式-視黃醛或ll-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體組合，使得雷公藤紅素和其他熱休克反應(yīng)激活劑適于治療PCD。熱休克反應(yīng)激活劑包括，但不局限于，雷公藤紅素、雷公藤紅素甲酯、二氫雷公藤紅素二乙酸、雷公藤紅素丁酯和二氫雷公藤紅素及其鹽或類似物。組蛋白去乙酰酶抑制劑基因表達(dá)的調(diào)控是通過(guò)數(shù)個(gè)機(jī)制所介導(dǎo)，包括通過(guò)動(dòng)態(tài)的乙?；腿ヒ阴；M(jìn)行的組蛋白翻譯后修飾。進(jìn)行可逆性乙?；?去乙酰化過(guò)程的酶相對(duì)應(yīng)地是組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白去乙酰酶(HDAC)。組蛋白去乙酰抑制劑包括Scriptaid、APHA化合物8、Apicidin、丁酸鈉、(-)-Depudecin、Sirtinol、曲古菌素A及其鹽或類似物。糖苷酶抑制劑糖苷酶抑制劑是一類用于治療蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病的化合物，尤其是與11-順式-視黃醛、9-順式-視黃醛或11-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體組合投予時(shí)。栗精胺是一種從植物來(lái)源所分離出抑制酶糖苷鍵水解的多羥基生物堿。栗精胺及其衍生物尤其適用于治療如視網(wǎng)膜色素變性的PCD。本發(fā)明方法所使用的其他糖苷酶抑制劑包括鹽酸australine、有效的氨基己糖苷酶抑制劑6-乙酰胺-6-脫氧-栗精胺、鹽酸脫氧巖藻糖野尻霉素(DFJ)、抑制糖苷酶I和II的脫氧野尻霉素(DNJ)、抑制a-D-牛乳糖的鹽酸脫氧半乳糖野尻霉素(DGJ)、鹽酸脫氧甘露糖野尻霉素(DMJ)、公知為2,5-二脫氧-2,5-亞氨基-D-甘露醇的2R，5R-雙(羥甲基)-3R，4R-二羥基吡咯烷(DMDP)、鹽酸1，4-二脫氧-l，4-亞氨基-D-甘露醇、抑制b-N-乙酰葡糖胺糖苷酶的鹽酸3R,4R,5R，6R-3,4,5,6-四羥基氮雜環(huán)庚垸、抑制e-葡糖苷酶的1,5-二脫氧-1,5-亞氨基-木糖醇和為甘露糖苷酶1抑制劑的Kifbnensine。也可使用N-丁基脫氧野尻霉素(BDNJ)、N-壬基DNJ(NDNJ)、N-己基DNJ(HDNJ)、N-甲基脫氧野尻霉素(MDNJ)和其他公知技藝中的糖苷酶抑制劑與9-順式-視黃醛或11-順式-視黃醛的組合。糖苷酶抑制劑可從市場(chǎng)上購(gòu)得，例如從IndustrialResearchLimited(Wellington,NewZealand)及使用如美國(guó)第4,894,388、5,043，273、5,103,008、5,844,102和6,831,176號(hào)專利案和美國(guó)第20020006909號(hào)專利公開(kāi)案中所描述的方法。眼部蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病本發(fā)明的組成物尤其適用于治療任何實(shí)質(zhì)上為眼部蛋白質(zhì)的構(gòu)象疾病(PCD)，所述疾病是以在眼內(nèi)積聚蛋白聚聚集或纖維的錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)為特征。視網(wǎng)膜色素變性是一種與視蛋白錯(cuò)誤折疊(例如P23H視蛋白)(GenBank編號(hào)NM一000539和NP—000530)及與碳酸酐酶IV(CA4)突變(GenBank編號(hào)NM—000171禾nNP—000708)相關(guān)的眼部PCD實(shí)例(Rebelloetal"ProcNatlAcadSciUSA.2004Apr27;101(]7):6617-22)。CA4是在人類眼部脈絡(luò)膜毛細(xì)血管內(nèi)高度表達(dá)的糖基磷脂酰肌醇錨定蛋白質(zhì)。R14W的突變?cè)斐蒀A4蛋白質(zhì)的錯(cuò)誤折疊，且具有此突變的病人受常染色體顯性視網(wǎng)膜色素變性所苦。本發(fā)明的組成物提高具有生化功能構(gòu)象的CA4量，適于治療與CA4多肽突變相關(guān)的常染色體顯性視網(wǎng)膜色素變性。X連鎖的青年性視網(wǎng)膜劈裂癥(RS)是另一種眼部PCD。RS是男性常見(jiàn)造成青年黃斑變性的原因。RS1的突變(NM—000330,NP—000321)或視網(wǎng)膜劈裂癥是造成X連鎖視網(wǎng)膜劈裂癥的原因，其為在男性所常見(jiàn)的早發(fā)性黃斑變性，會(huì)導(dǎo)致視網(wǎng)膜內(nèi)層分裂和嚴(yán)重的視力損失。RS1的突變破壞了蛋白質(zhì)的折疊(JBiolChem.2005Mar18;280(11):10721-30)。本發(fā)明的組成物提高具有生化功能構(gòu)象的RS1量，適于治療視網(wǎng)膜劈裂癥。青光眼是一種與肌纖蛋白突變相關(guān)的眼部PCD。肌纖蛋白在許多包括眼部的人類器官中廣泛表達(dá)，是具有未知功能的分泌型糖蛋白。在肌纖蛋白內(nèi)的突變?cè)斐梢环N世界上主要致盲原因的青光眼類型。肌纖蛋白的突變?yōu)榉e聚在轉(zhuǎn)染細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的不溶性聚積物(Aroca-Aguilaretal.,BiolChem.2005Jun3;280(22):21043-51;GenBank編號(hào)NM一000261禾BNP—000252)。本發(fā)明的組成物提高具有生化功能構(gòu)象的肌纖蛋白的量，適于治療與肌纖蛋白相關(guān)的青光眼。斯特格樣黃斑變性是一種與ELOVL4突變相關(guān)的眼部PCD。ELOVL4(Elongationofverylongchainfattyacid4)是ELO家族的成員中參與非常長(zhǎng)鏈脂肪酸生物合成的蛋白質(zhì)。ELOVL4的突變已在患有常染色體顯性斯特格樣黃斑變性(STGD3/adMD)的病人中被識(shí)別出。ELOVL4的突變蛋白質(zhì)為積聚在轉(zhuǎn)染細(xì)胞內(nèi)的大型聚集物(Graysonetal.,JBiolChem.2005Jul21;Epub)(GenBank編號(hào)NM—022726和NP—073563)。本發(fā)明的組成物提高具有生化功能構(gòu)象的ELOVL4的量，適于治療斯特格樣黃斑變性。MalattiaLeventinese(ML)和多恩蜂窩狀視網(wǎng)膜營(yíng)養(yǎng)失調(diào)(DHRD)是29指兩種以公知為玻璃膜疣的黃白色沉淀積聚在視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)下為特征的常染色體顯性PCD。EFEMP1參與視網(wǎng)膜玻璃膜疣的形成，并涉及黃斑變性的病因(Stoneetal.，NatGenet.1999Jun;22(2):199-202)(GenBank編號(hào)NM—004105和NP—004096)。EFEMP1突變?yōu)殄e(cuò)誤折疊，并滯留在細(xì)胞內(nèi)。本發(fā)明的組成物提高具有生化功能構(gòu)象的EFEMP1的量，適于治療常染色體顯性玻璃膜疣。貝斯特黃斑營(yíng)養(yǎng)不良是一種由VMD2突變(hBESTl)所引起的常染色體顯性PCD，其編碼一種名為Bestrophin的氯離子通道(Gomezetal.,DNASeq.2001Dec;12(5-6):431-5)(GenBank編號(hào)NM—004183和NP—004174)。Bestrophin的突變可能造成蛋白質(zhì)的錯(cuò)誤折疊。本發(fā)明的組成物提高正確折疊的bestrophin的量，適于治療貝斯特黃斑營(yíng)養(yǎng)不良。5q31連鎖的角膜營(yíng)養(yǎng)不良是一種以在角膜內(nèi)隨著年齡逐漸沉積蛋白質(zhì)沉淀，并隨后造成視力損傷為特色的常染色體顯性PCD。BIGH3基因(GenBank編號(hào)NM—000358)，也稱為TGFBI(3轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子所誘導(dǎo)的)的突變，據(jù)發(fā)現(xiàn)是病因的所有條件。通過(guò)涉及在角膜組織內(nèi)蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)改變的特別聚集途徑，Arg-124和其他殘基的取代導(dǎo)致編碼蛋白質(zhì)的角膜特異性沉淀(GenBank編號(hào)NP—000349)。本發(fā)明的組成物提高正確折疊的TGFBI蛋白質(zhì)量，適于治療5q31連鎖的角膜營(yíng)養(yǎng)不良。在一個(gè)具體例中，本發(fā)明提供監(jiān)控治療迸程的方法。所述方法包括確定診斷標(biāo)記(Marker)量的步驟(例如任何在此所描述通過(guò)前述化合物、蛋白質(zhì)或其指示劑等所調(diào)控的目標(biāo))或診斷測(cè)定(例如篩檢、分析)患有或易受蛋白質(zhì)折疊(包括錯(cuò)誤折疊)相關(guān)疾病或其癥狀影響的對(duì)象，其中所述對(duì)象被投予具有療效劑量的前述化合物，足以治療前所述的疾病或其癥狀。以前所述方法所確定的標(biāo)記量可用于和健康正常的對(duì)照組或其他患病病人的己知標(biāo)記量做比較，以確定所述對(duì)象的疾病狀態(tài)。在優(yōu)選的具體例中，所述對(duì)象的第二標(biāo)記量是在確定第一量后進(jìn)行確定，且前述的第二量被用于比較以監(jiān)控所述疾病的過(guò)程或治療的效果。在某些優(yōu)選的具體例中，所述對(duì)象的標(biāo)記預(yù)治療量在開(kāi)始根據(jù)本發(fā)明的治療前已被確定；此標(biāo)記的預(yù)治療量可隨后和所述對(duì)象在開(kāi)始治療后的標(biāo)記量做比較，用以確定治療的效果。藥學(xué)組成物本發(fā)明的特征為包括化合物與藥學(xué)上可接受的載體的藥學(xué)制備物，其中，所述化合物用以產(chǎn)生具有生化功能構(gòu)象的突變蛋白質(zhì)。如此制備物具有治療和預(yù)防的應(yīng)用。在一個(gè)具體例中，包括11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛與至少一種額外的化合物組合的藥學(xué)組成物，前述的額外化合物為蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑或組蛋白去乙酰酶抑制劑。11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和前述第二化合物為共同或分開(kāi)調(diào)配。在另一個(gè)具體例中，包括蛋白酶體抑制劑或自噬抑制劑的藥學(xué)組成物。本發(fā)明的化合物可作為藥學(xué)組成物的一部分予以投藥。前述組成物應(yīng)為無(wú)菌的，且包含以適當(dāng)?shù)闹亓炕蝮w積單位投予所述對(duì)象在治療上有效劑量的多肽。本發(fā)明的組成物和組合可為藥學(xué)包裝的部分，且其中每一化合物以個(gè)別的劑量存在。本發(fā)明所投予用于預(yù)防或治療的藥學(xué)組成物無(wú)菌的。消毒可通過(guò)無(wú)菌過(guò)濾膜過(guò)濾(例如0.2um膜)、伽馬放射或任何其他所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知的適當(dāng)手段輕易完成。治療的多肽組成物通常放置在具有消毒進(jìn)出口的容器內(nèi)，例如靜脈內(nèi)溶液包或具有可由皮下注射針頭刺穿的塞子的小瓶。前述的組成物一般以單元或多重劑量的容器儲(chǔ)存，例如密封于安瓿或小瓶?jī)?nèi)，作為水溶液或可于水中恢復(fù)的干凍配方。前述化合物可選擇地與藥學(xué)上可接受的賦形劑組合。在此所使用的術(shù)語(yǔ)"藥學(xué)上可接受的賦形劑"是指一種或更多種適合投予人類，且相容的固體或液體填充物、稀釋物或封裝物質(zhì)。術(shù)語(yǔ)"載體"是指天然或合成的有機(jī)或無(wú)機(jī)成分，可使其活性成分可被混合以便于投予。前述藥學(xué)上組成物的成分也可與本發(fā)明所述的分子，在不發(fā)生實(shí)質(zhì)上破壞理想藥學(xué)功效作用的情形下，相互間共同混合。本發(fā)明的化合物可包含在藥學(xué)上可接受的賦形劑內(nèi)。前述的賦形劑優(yōu)選地含有少量的添加劑，例如增強(qiáng)等張性和化學(xué)穩(wěn)定性的物質(zhì)。前述物質(zhì)在使用的劑量和濃度下，對(duì)接受者不具有毒性，并且包括如磷酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽和其他有機(jī)酸或其鹽類的緩沖溶液，；三羥基甲基氨基甲烷(TRIS)、二碳酸鹽、碳酸鹽和其他有機(jī)堿及其鹽類；如抗壞血酸的抗氧化劑；如多精氨酸、多賴氨酸、多谷氨酸或多門冬氨酸的低分子量(例如少于約io個(gè)殘基)多肽；如血清蛋白、明膠或免疫球蛋白的蛋白質(zhì)；如聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚丙二醇(PPG)和聚乙二醇(PEG)的親水聚合體；如甘氨酸、谷氨酸、門冬氨酸、組氨酸、賴氨酸或精氨酸的氨基酸；單糖、雙糖和其他包括纖維素或其衍生物、葡萄糖、甘露糖、蔗糖、糊精或如肝磷脂、硫酸軟骨素或硫酸右旋糖酐的硫酸化碳水化合物衍生物的碳水化合物；如包括鈣離子、鎂離子和錳離子二價(jià)金屬離子的多價(jià)金屬離子；如乙二胺四乙酸(EDTA)的螯合劑；如甘露醇或山梨糖醇的糖醇；如鈉或銨的抗衡離子；及/或如聚山梨醇酯或泊洛沙姆的非離子表面活性劑。其他添加劑可包括以常規(guī)量存在的穩(wěn)定劑、抗菌劑、惰性氣體、液體和營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑(也就是Ringer右旋糖)、電解質(zhì)補(bǔ)充劑及其類似者等。前述的組成物可以有效的劑量投予。所述的有效劑量取決于投藥的方式、特定的治療條件和所期望的結(jié)果，也可取決于條件的階段、所述對(duì)象的年齡和身體狀態(tài)、協(xié)同治療的性質(zhì)和任何如果可能醫(yī)藥人員所熟知的類似因素。對(duì)于治療的應(yīng)用而言，所述的劑量足以實(shí)現(xiàn)醫(yī)藥上所期望的結(jié)果。對(duì)于患有蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病或病癥的對(duì)象而言，有效的劑量是指足以提高細(xì)胞內(nèi)正確折疊蛋白質(zhì)的量。對(duì)于患有涉及錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的疾病或病癥的對(duì)象而言，有效的劑量是指足以穩(wěn)定、減緩或降低與病理相關(guān)癥狀的用量。一般而言，本發(fā)明化合物的劑量從大約每天0.01mg/kg到1000mg/kg?？梢员活A(yù)期的是，劑量范圍從約50到2000mg/kg也將適合。如靜脈注射的特定投藥形式將導(dǎo)致更低的劑量。在前述對(duì)象對(duì)初始使用劑量的反應(yīng)不足的情況下，更高的劑量(或通過(guò)不同、更局部的投藥路徑投予更高的有效劑量)可在病人可承受的范圍內(nèi)使用。每天多重的劑量可預(yù)期用以達(dá)到本發(fā)明組成物所適合的全身劑量。有多種的投藥途徑可供使用。一般來(lái)說(shuō)，本發(fā)明方法所使用任何醫(yī)藥上可接受的投藥形式皆可被實(shí)施，也就是指任何產(chǎn)生活性化合物的有效劑量而不會(huì)引起臨床上無(wú)法接受的副作用的形式。在一個(gè)優(yōu)選的具體例中，本發(fā)明的組成物是在眼內(nèi)投藥。其他的投藥方式包括經(jīng)由口的、直腸的、局部的、眼內(nèi)的、口腔的、陰道內(nèi)的、腦池內(nèi)的、腦室內(nèi)的、氣管內(nèi)的、鼻內(nèi)的、經(jīng)皮膚的、植入物內(nèi)/上或腸胃外的途徑。術(shù)語(yǔ)"腸胃外的"包括皮下的、囊內(nèi)的、靜脈內(nèi)的、肌肉內(nèi)的、腹膜內(nèi)的或灌注。包含本發(fā)明組成物的組成物可被添加入如玻璃體內(nèi)體液的生理液中。對(duì)于CNS的投藥，多種技術(shù)可用于促進(jìn)治療劑經(jīng)過(guò)血液腦屏障的傳送，包括通過(guò)手術(shù)或注射的破壞、暫態(tài)打開(kāi)CNS脈管系統(tǒng)內(nèi)皮細(xì)胞間粘合接觸的藥物，以及促進(jìn)通過(guò)所述細(xì)胞遷移的化合物。口腔投藥由于其對(duì)于病人的便利性和作為定量給藥的方案，可優(yōu)選地用于預(yù)防治療。本發(fā)明的藥學(xué)組成物只要其在投予所述對(duì)象時(shí)不會(huì)引起副作用，可選擇性地進(jìn)一步包含一種或更多種額外所需的蛋白質(zhì)，包括血漿蛋白質(zhì)、蛋白酶和其他生物物質(zhì)。合適的蛋白質(zhì)或生物物質(zhì)可通過(guò)任何公知和所屬領(lǐng)域技術(shù)人員可得到的純化方法，從人類或哺乳動(dòng)物的血漿內(nèi)得到；依照標(biāo)準(zhǔn)的重組DNA技術(shù)從包含可表達(dá)人類或哺乳動(dòng)物血漿蛋白質(zhì)基因的重組組織培養(yǎng)物的上清液、萃取物或溶解產(chǎn)物和病毒、酵母、細(xì)菌或其類似物已被引用；或依照標(biāo)準(zhǔn)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)從包含可表達(dá)人類血槳蛋白基因的液體(例如血液、乳汁、淋巴液、尿液或其類似物)或轉(zhuǎn)基因動(dòng)物已被引用。本發(fā)明的藥學(xué)組成物可包括一種或更多種的pH緩沖化合物，以保持配方的pH在預(yù)期反映的生理pH程度，如在約5.0到8.0的范圍內(nèi)。前述用于水溶液配方的pH緩沖化合物可為氨基酸或氨基酸混合物，如組氨酸或如組氨酸和甘氨酸的氨基酸混合物。前述pH緩沖化合物可選擇地優(yōu)選為維持配方的pH值在預(yù)期如約5.0到8.0的范圍內(nèi)的程度，且不與鈣離子螯合的試劑。前述的pH緩沖化合物實(shí)例包括，但不局限于，咪唑和醋酸離子。所述的pH緩沖化合物可以任何適合維持配方在預(yù)期程度pH值的量存在。本發(fā)明的藥學(xué)組成物也可包含一種或更多種的滲透調(diào)節(jié)劑，也就是調(diào)節(jié)配方的滲透性質(zhì)(例如張力、滲透度及/或滲透壓)至可被接受個(gè)體的血液和血液細(xì)胞能接受程度的化合物。前述的滲透調(diào)節(jié)劑可為不與鈣離子螯合的試劑。前述的滲透調(diào)節(jié)劑可為任何公知或所屬領(lǐng)域技術(shù)人員可調(diào)節(jié)其配方滲透性質(zhì)的化合物。所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
人員可依經(jīng)驗(yàn)決定在本發(fā)明配方中所提供使用的滲透調(diào)節(jié)劑的合適度。合適類型的滲透調(diào)節(jié)劑實(shí)例包括，但不局限于，如氯化鈉和醋酸鈉的鹽類；如蔗糖、右旋糖和甘露糖的糖類；如甘氨酸的氨基酸；及一種或更多種前述試劑和/或試劑類型的混合物。前述滲透調(diào)節(jié)劑可以任何足以調(diào)節(jié)配方滲透性質(zhì)的濃度存在。包含本發(fā)明化合物的組成物可含有如鈣離子、鎂離子和/或錳離子的多價(jià)金屬離子。任何幫助穩(wěn)定組成物并對(duì)接受個(gè)體無(wú)副作用的多價(jià)金屬離子皆可被使用?；诖硕?biāo)準(zhǔn)，所屬領(lǐng)域中具有技術(shù)的人員可憑經(jīng)驗(yàn)決定合適的金屬離子，且這些金屬離子的合適來(lái)源己為公知，且包括無(wú)機(jī)和有機(jī)鹽。本發(fā)明的藥學(xué)組成物也可為非水性液體配方。任何合適的非水性液體只要其提供在此所包含活性劑的穩(wěn)定性也可被使用。前述非水性配方優(yōu)選地為親水性溶液。合適的非水性溶液實(shí)例包括甘汕；二甲基亞砜(DMSO);聚二甲基硅烷(PMS);如乙二醇、二甘醇、三甘醇、聚乙二醇("PEG")200、PEG300和PEG400的乙二醇類；以及如二丙二醇、三丙二醇、聚丙二醇(PPG)425、PPG725、PPG1000、PPG2000、PPG3000禾卩PPG4000的丙二醇類。本發(fā)明的藥學(xué)組成物也可為混合的水性/非水性液體配方，只要其提供在此所包含化合物的穩(wěn)定性，任何如前所述合適的非水性液體配方可與任何如前所述的水性配方共同使用。前述配方中的非水性液體優(yōu)選地是親水性液體。合適的非水性液體實(shí)例包括甘油；DMSO;PMS;如PEG200、PEG300和PEG400的乙二醇；和如PPG425、PPG725、PPGIOOO、PPG2000、PPG3000禾卩PPG4000的丙二醇。合適的穩(wěn)定配方可允許在冷凍或未冷凍的液體狀態(tài)下儲(chǔ)存前述的活性劑。穩(wěn)定的液體配方可儲(chǔ)存于至少為-7(TC的溫度下，但也可取決于前述組成物的性質(zhì)，儲(chǔ)存在至少為ot:的更高溫度，或在約o.rc與42i:之間。所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
的人員通常知道蛋白質(zhì)和多肽對(duì)pH、溫度和多種其他可影響治療效果因素的改變相當(dāng)敏感。在某些具體例中，所需的投藥途徑可通過(guò)肺部氣溶膠。制備包含多肽的氣溶膠給藥系統(tǒng)技術(shù)是所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
人員所熟知的。一般而言，前述系統(tǒng)應(yīng)利用不會(huì)顯著破壞抗體生物性質(zhì)的成分，如不會(huì)破壞抗體決定簇的結(jié)合能力(參閱如Sciarra和Cutie，"Aerosols"在Remington'34sPharmaceuticalSciences,18thedition,1990,pp1694-1712;并入作為參考)。所屬領(lǐng)域技術(shù)人員可容易地修改多種制造多肽氣溶膠的參數(shù)和條件，而不用依靠過(guò)度的試驗(yàn)。其他的給藥系統(tǒng)可包括吋釋、延釋和緩釋的給藥系統(tǒng)。前述的系統(tǒng)可避免重復(fù)投予本發(fā)明的組成物，提高對(duì)所述對(duì)象和醫(yī)生的方便性。許多釋放給藥系統(tǒng)的類型已可得，且為所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員所公知，其包括基于聚合體的系統(tǒng)，如聚乳酸(美國(guó)第3,773,919號(hào)專利；歐洲第58,481號(hào)專利)、共聚草酸、聚己內(nèi)酯、聚酯酰胺、聚原酸酯、如聚-0-(-:)-3-羥基丁酸的聚羥基丁酸(歐洲第133，988號(hào)專利)、L-谷氨酸和Y-乙基-L-谷氨酸的共聚物(Sidman,K.R.etal.,Biopolymers22:547-556)、聚(2-羥基乙基甲基丙烯酸酯)或乙烯-醋酸乙烯(Langer,R.etal.,J.Biomed.Mater.Res.15:267-277;Langer,R.Chem,Tech.12:98-105)和聚酸酐。其他緩釋型組成物的實(shí)例包括在有形物件內(nèi)的半滲透性聚合體基材，例如薄膜或微膠囊。給藥系統(tǒng)也包括非聚合體系統(tǒng)包括如膽固醇和膽固醇酯的固醇和如單、雙和三酸甘油酯的脂肪酸或中性脂肪；如生物來(lái)源的生物再吸收水凝膠的水凝膠釋放系統(tǒng)(也就是幾丁質(zhì)水凝膠或殼聚糖水凝膠)；液體硅系統(tǒng)；基于多肽的系統(tǒng)；蠟涂層；使用常規(guī)結(jié)合劑和賦形劑的壓縮藥片；部分融合的植入物；及其類似物。特定的實(shí)例包括，但不局限于(a)侵蝕系統(tǒng)，其中所述試劑包含在如美國(guó)第4,452,775、4，667，014、4,748,034和5,239,660號(hào)專利所述的基材形態(tài)中及(b)擴(kuò)散系統(tǒng)，其中活性成分以控制的速率從如美國(guó)第3,832,253和3,854,480號(hào)專利所述的聚合體滲透。其他本發(fā)明方法和組成物可用的給藥系統(tǒng)類型是膠體分散系統(tǒng)。膠體分散系統(tǒng)包括水包油乳化劑、膠束、混合膠束和脂質(zhì)體等基于脂質(zhì)的系統(tǒng)。脂質(zhì)體是人工膜管，可作為活體外或活體內(nèi)的給藥載體。大小范圍介于0.2到4.0um的大型單片管(LUV)可于水性的內(nèi)部封入大型的巨分子，并以生物活性的形式送至細(xì)胞(Fraley,R.,和Papahadjopoulos,D.,TrendsBiochem.Sci.6:77-80)。脂質(zhì)體已通過(guò)與特異性配體耦合被定位至特定組織，如與單克隆抗體、糖、糖脂或蛋白質(zhì)耦合。商業(yè)上的脂質(zhì)體可購(gòu)自GibcoBRL，例如LIPOFECTIN禾QLIPOFECTACE，其由如N-[l-(2,3二油氧基)-丙基]-N,N,N-三甲基氯化鉸(DOTMA)和二甲基雙十八烷基溴化銨(DDAB)的陽(yáng)離子脂質(zhì)所形成。制備脂質(zhì)體的方法為所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
所熟知，并于許多公開(kāi)文獻(xiàn)中描述，例如在DE3,218,121;Epsteinetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)82:3688-3692(1985);Hwangetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)77:4030-4034(1980);EP52,322;EP36,676;EP88，046;EP143,949;EP142,641;日本第83-118008號(hào)專利申請(qǐng)案；美國(guó)第4,485,045和4,544，545號(hào)專利；及EP102,324。脂質(zhì)體也已經(jīng)由Gregoriadis,G"TrendsBiotechnol"3:235-241所回顧。其他的載體類型為適合植入哺乳動(dòng)物受體的生物可相容性微?；蛑踩胛铩Ｒ勒账龅姆椒?，可用的代表性生物可侵蝕植入物描述于PCT第PCT/US/03307號(hào)國(guó)際申請(qǐng)案(標(biāo)題為"聚合體的基因傳送系統(tǒng)"的第WO/95/24929號(hào)公開(kāi)案)。PCT/US/03307所描述的生物相容性，優(yōu)選為包含在合適啟動(dòng)子控制下的外源基因的生物可降解聚合體基材。前述聚合體基材可用于達(dá)到在所述對(duì)象體內(nèi)緩釋前述外源基因或基因產(chǎn)物。前述的聚合體基材優(yōu)選為如微球體的微粒形式(其中試劑分散遍布于固體聚合體基材)或微膠囊(其中試劑儲(chǔ)存于聚合體殼的核內(nèi))。前述含有藥物的聚合體微膠囊描述于如美國(guó)第5,075,109號(hào)專利案。其他包含試劑的聚合體基材形式包括薄膜、涂層、膠體、植入物和支架。前述聚合體基材裝置的大小和組成，以在組織內(nèi)產(chǎn)生有利的釋放動(dòng)力進(jìn)入基材所引入的位置做選擇。前述聚合體基材的大小進(jìn)一步依照使用的給藥方法選擇。當(dāng)使用氣溶膠途徑時(shí)，前述聚合體基材和組成物優(yōu)選地被包含在表面活性劑的載體中。前述聚合體基材可選擇具有較佳降解速率和形成生物可附著的物質(zhì)，以進(jìn)一步提高傳送的效果。前述的基材組成物也可選擇是不降解的，而是經(jīng)過(guò)一段延長(zhǎng)的時(shí)間后通過(guò)擴(kuò)散而釋放。前述的給藥系統(tǒng)也可為適合局部和位點(diǎn)特異性給藥的生物可相容性微球體。前述的微球體被揭示于Chickering，D.E.,etal.，Biotechnol.Bioeng.,52:96-101;Mathiowitz,E.,etal.,Nature386:410-414。非生物可降解的和生物可降解的聚合體基材皆可用于投予所述對(duì)象本發(fā)明的組成物。前述的聚合體可為天然或合成的聚合體。前述的聚合體是基于所需釋放的時(shí)間做選擇，通常為數(shù)小時(shí)至一年或更久。釋放的時(shí)間范圍典型地從數(shù)小時(shí)至3到]2個(gè)月為最理想。前述的聚合體可選擇地為水凝膠的形式，其可在水中吸收大約90%的自身重量，進(jìn)一步可選擇與多價(jià)離子或其他聚合體交聯(lián)。具代表可用于形成生物可降解給藥系統(tǒng)的合成聚合體包括聚酰胺、聚碳酸酯、聚烯烴、聚醚類、聚環(huán)氧垸、聚對(duì)苯二甲酸亞垸基酯、聚乙烯醇、聚乙烯醚、聚乙烯酯、聚乙烯鹵化物、聚乙烯吡咯酮、聚羥基乙酸、聚硅氧垸、聚氨酯及其共聚物、垸基纖維素、羥烷基纖維素、纖維素酯、纖維素醚、硝基纖維素、丙烯酸和甲基丙烯酸醚的聚合體、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥丁基甲基纖維素、醋酸纖維素、丙酸纖維素、丁酸乙酸纖維素、鄰苯二甲酸乙酸纖維素、羧乙基纖維素、三醋酸纖維素、纖維素硫酸鈉鹽、聚(甲基甲基丙烯酸酯)、聚(乙基甲基丙烯酸酯)、聚(丁基甲基丙烯酸酯)、聚(異丁基甲基丙烯酸酯)、聚(己基甲基丙烯酸酯)、聚(異癸基甲基丙烯酸酯)、聚(月桂基甲基丙烯酸酯)、聚(苯基甲基丙烯酸酯)、聚(甲基丙烯酸酯)、聚(異丙基丙烯酸酯)、聚(異丁基丙烯酸酯)、聚(十八垸基丙烯酸酯)、聚乙烯、聚丙烯、聚(乙二醇)、聚(環(huán)氧乙烷)、聚(對(duì)苯二甲酸乙二酯)、聚(乙烯醇)、聚乙酸乙烯酯、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚乙烯吡咯酮及乳酸和乙醇酸的聚合體、聚酸酐、聚(正)醚、聚(丁酸)、聚(戊酸)、及聚(交酯-共己內(nèi)酰酮)、及天然聚合體，如藻酸鹽和其他包括右旋糖和纖維素的多糖、膠原質(zhì)、其化學(xué)衍生物(化學(xué)基團(tuán)的取代和添加，例如烷基，烯基、羥基化、氧化和其他所屬領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)制作的修飾)、血清蛋白和其他親水性蛋白質(zhì)、玉米蛋白和其他醇溶谷蛋白和疏水蛋白質(zhì)、及其共聚物和混合物。一般而言，這些物質(zhì)通過(guò)活體內(nèi)酶水解或暴露于水后，經(jīng)由表面或大量的侵蝕而降解。眼部給藥的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明的組成物(例如蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑或組蛋白去乙酰酶抑制劑)特別適合治療眼部蛋白質(zhì)構(gòu)象的疾病，如青光眼、視網(wǎng)膜色素變性、老年黃斑變性、青光眼、角膜營(yíng)養(yǎng)不良、視網(wǎng)膜劈裂癥、斯特格病變、常染色體顯性玻璃膜疣和貝斯特黃斑營(yíng)養(yǎng)不良。在一種方法中，本發(fā)明所述的組成物通過(guò)適合直接移植入眼內(nèi)玻璃體的眼部裝置投予。本發(fā)明的組成物可以緩釋的組成物提供，例如描述于如美國(guó)第5,672,659和5,595,760號(hào)的專利案。據(jù)發(fā)現(xiàn)，前述裝置提供多種組成物的持續(xù)控制釋放以治療眼部，而不會(huì)產(chǎn)生有害的局部和全身副作用的風(fēng)險(xiǎn)。前述眼部給藥方法的目的是在延長(zhǎng)植入物的持續(xù)時(shí)間而最小化眼內(nèi)裝置或植入物尺寸時(shí)，使所包含的藥物量能最大化。參閱如美國(guó)第5，378，475、6,375,972和6,756,058號(hào)專利案及美國(guó)第20050096290和200501269448號(hào)專利公開(kāi)案。所述植入物可以為生物可降解的和/或生物可相容的植入物，或可為非生物可降解的植入物。生物可降解的眼部植入物描述于如美國(guó)第20050048099號(hào)專利公開(kāi)案。所述植入物對(duì)前述活性劑可以為具滲透性或不具滲透性，并且可插入于如前部或后部的眼腔內(nèi)，或可植入鞏膜、經(jīng)脈絡(luò)膜空間或玻璃體外部的非血管區(qū)域。作為儲(chǔ)存本發(fā)明組成物的接觸鏡也可選擇地用于藥物給送。在一個(gè)優(yōu)選具體例中，前述的植入物可定位于如鞏膜上的非血管區(qū)域，用以使藥物經(jīng)鞏膜擴(kuò)散至所需治療的位點(diǎn)，例如眼內(nèi)空間和眼部的黃斑。經(jīng)鞏膜擴(kuò)散的位點(diǎn)進(jìn)一步優(yōu)選為在臨近黃斑處。用于投送組成物的植入物實(shí)例包括，但不局限于，描述于美國(guó)第3,416,5303,828,777;4,014,335;4,300,557;4,327,725;4,946,450;4，997,652;5,147,647;5,164,188;5,178,635;;,322,691;5,403,901;，632,984;5,679,666;，766,619;5,770,592;,836,935;5,869,079,5,443,5055,710,1655,773,019,902,598;5,466,4665,725,4935,824,072;，904,144;5,476,511;5,743,274;5,824,073;;,916,584;4,853,2245,300,1145,516,5225,766,2425,830,1736,001,3866,074,661;6,110,485;6,126,687;6,146,366;6,251,090;禾卩6,299,895以及WO01/30323和WO01/28474專利案中的裝置，其所有內(nèi)容并入于此作為參考。實(shí)例包括，但不局限于以下的包括一個(gè)內(nèi)部?jī)?chǔ)存庫(kù)的緩釋藥物給藥系統(tǒng)，其包括有效劑量的試劑足以有效獲得所需的局部或全身生理或藥學(xué)的效果；一種對(duì)試劑的通過(guò)為非滲透性的內(nèi)管，所述內(nèi)管具有第一和第二末端，并且覆蓋于至少一部分的前述內(nèi)部?jī)?chǔ)存庫(kù)，所述內(nèi)管以能使其承受自身重量的大小和材質(zhì)制定，一種位于內(nèi)管第一末端的非滲透性成分防止前述試劑經(jīng)由所述內(nèi)管的第一末端流出前述的儲(chǔ)存庫(kù)，和一種位于所述內(nèi)管第二末端的滲透性成分允許前述試劑經(jīng)由所述內(nèi)管的第二末端流出前述的儲(chǔ)存物；一種投予本發(fā)明化合物至眼部部位的方法，所述方法包括的歩驟為植入投送本發(fā)明化合物的緩釋裝置至眼部玻璃體或植入投送本發(fā)明化合物的可植入緩釋裝置至眼部部位；一種緩釋的給藥裝置，包括a)藥核，其包括至少一種可有效獲得診斷效果或有效獲得所需的局部或全身生理或藥學(xué)效果在治療上有效劑量的第一試劑;b)至少一種實(shí)質(zhì)上對(duì)周圍所述試劑的通過(guò)為不具滲透性，且定義內(nèi)部空間以接受前述藥核的單元杯，所述的單元杯包括開(kāi)放式頂端，并具有至少一個(gè)嵌壁式凹槽環(huán)繞在至少一部分所述單元杯的開(kāi)放式頂端；c)對(duì)于前述試劑的通過(guò)為具滲透性的可滲透性塞子，其位于前述單元杯的開(kāi)放式頂端，其中前述凹槽與所述滲透性塞子相互作用，以維持其位置并關(guān)閉其開(kāi)放式頂端，所述的可滲透性塞子允許試劑通過(guò)可滲透性塞子，流出藥核和前述單元杯的開(kāi)放式頂端；以及d)至少一種可有效獲得診斷效果或有效獲得所需的局部或全身生理或藥學(xué)效果的第二試劑；或一種緩釋的藥物給予系統(tǒng)，其包括一種包含有效量試劑的內(nèi)核，其具有所需的溶解度和聚合體涂層，所述的聚合體層對(duì)前述的試劑為可滲透的，其中所述的聚合體涂層完全覆蓋在內(nèi)核上。其他的眼部給藥方法包括使用脂質(zhì)體以定位本發(fā)明的化合物至眼部，優(yōu)選地為至視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞和/或Bmch膜。例如前述的化合物可以所述的手段與脂質(zhì)體復(fù)合，且將所述的化合物/脂質(zhì)體復(fù)合物通過(guò)靜脈注射導(dǎo)引所述的化合物至患有眼部PCD病人所期望的眼部組織或細(xì)胞。直接注射脂質(zhì)體復(fù)合物至視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞或Bmch膜鄰近區(qū)域也可提供一些眼部PCD形式的復(fù)合物定位。在一個(gè)特定的具體例中，前述的化合物是通過(guò)在眼內(nèi)緩釋投送(如VITRASERT或ENVISION)。在一個(gè)特定的具體例中，前述的化合物是通過(guò)結(jié)膜后注射。在另一個(gè)特定的具體例中，含有本發(fā)明化合物的微乳劑顆粒被投于眼部組織，以吸收來(lái)自Bruch膜、視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞或兩者的脂質(zhì)。納米顆粒是一種膠質(zhì)載體系統(tǒng)，據(jù)顯示其通過(guò)延長(zhǎng)血清半衰期而改善封裝藥物的功效。聚氰基丙烯酸烷基酯(PACAs)納米顆粒是一種臨床上正在發(fā)展的聚合體膠質(zhì)藥物投予系統(tǒng)，如Stellaetal.，J.Pharm.Sci.,2000.89:p.1452-1464;Briggeretal.,Int.J.Pharm.,2001.214:p.37-42;Calvoetal.,Pharm.Res.,2001.18:p.1157-1166;以及Lietal.,Biol.Pharm.Bull.,2001.24:p.662-665所描述。生物可降解的聚(羥基酸)，如聚(乳酸)(PLA)和聚(交酉旨-共乙交酯)(PLGA)的共聚物已被廣泛地應(yīng)用于生物醫(yī)藥，并已得到FDA批準(zhǔn)在特定的臨床應(yīng)用。另夕卜，PEG-PLGA納米顆粒具有許多理想的載體特性，包括(i)封裝的試劑包含在總載體系統(tǒng)中合理高的重量分?jǐn)?shù)(負(fù)載)；(ii)用于封裝過(guò)程第一步的試劑量在合理高的水平并入最終載體(捕獲效率)；(iii)前述的載體具有凍干的能力，且再置于溶液中并無(wú)聚集；(iv)前述的載體為生物可降解的；(v)前述的載體系統(tǒng)為小型的；以及(vi)前述的載體增進(jìn)顆粒的持續(xù)性。納米顆粒使用任何實(shí)質(zhì)上所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
所公知的生物可降解外殼合成。在一個(gè)具體例中，使用如聚(乳酸)(PLA)或聚(交酯-共乙交酯)(PLGA)的聚合體。前述的聚合體為生物可相容且生物可降解的，并可以理想地進(jìn)行提高所述納米顆粒光化學(xué)功效和循環(huán)周期的修飾。在一個(gè)具體例中，前述的聚合體通過(guò)末端羧酸基(COOH)的修飾以提高所述顆粒的負(fù)電荷，因此，局限其與具負(fù)電荷的核酸適體相互作用。納米顆粒也可以聚乙二醇(PEG)進(jìn)行修飾，其也提高所述顆粒在循環(huán)中的半衰期和穩(wěn)定性。前述的COOH基團(tuán)可選擇地轉(zhuǎn)換為N-羥基丁二酰亞胺(NHS)酯，以共價(jià)結(jié)合胺修飾的適體。本發(fā)明的組成物和方法中所使用的生物可相容性聚合體包括，但不局限于，聚酰胺、聚碳酸酯、聚烯烴、聚醚類、聚環(huán)氧烷、聚對(duì)苯二甲酸亞垸基酯、聚乙烯醇、聚乙烯醚、聚乙烯酯、聚乙烯鹵化物、聚乙烯吡咯酮、聚羥基乙酸、聚硅氧垸、聚氨酯及其共聚物、烷基纖維素、羥烷基纖維素、纖維素酯、纖維素醚、硝基纖維素、丙烯酸和甲基丙烯酸酯的聚合體、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥丁基甲基纖維素、醋酸纖維素、丙酸纖維素、丁酸乙酸纖維素、鄰苯二甲酸乙酸纖維素、羧乙基纖維素、三醋酸纖維素、纖維素硫酸鈉鹽、聚(甲基甲基丙烯酸酯)、聚(乙基甲基丙烯酸酯)、聚(丁基甲基丙烯酸酯)、聚(異丁基甲基丙烯酸酯)、聚(己基甲基丙烯酸酯)、聚(異癸基甲基丙烯酸酯)、聚(月桂基甲基丙烯酸酯)、聚(苯基甲基丙烯酸酯)、聚(甲基丙烯酸酯)、聚(異丙基丙烯酸酯)、聚(異丁基丙烯酸酯)、聚(十八垸基丙烯酸酯)、聚乙烯、聚丙烯、聚(乙二醇)、聚(環(huán)氧乙垸)、聚(對(duì)苯二甲酸乙二酯)、聚(乙烯醇)、聚乙酸乙烯酯、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚乙烯吡咯酮、聚透明質(zhì)酸、酪蛋白、凝膠、明膠、聚酸酐、聚丙烯酸、藻酸鹽、殼聚糖、聚(甲基甲基丙烯酸酯)、聚(乙基甲基丙烯酸酯)、聚(丁基甲基丙烯酸酯)、聚(異丁基甲基丙烯酸酯)、聚(己基甲基丙烯酸酯)、聚(異癸基甲基丙烯酸酯)、聚(月桂基甲基丙烯酸酯)、聚(苯基甲基丙烯酸酯)、聚(甲基丙烯酸酯)、聚(異丙基丙烯酸酯)、聚(異丁基丙烯酸酯)、聚(十八烷基丙烯酸酯)及其任何的組合。在一個(gè)具體例中，本發(fā)明的納米顆粒包括PEG-PLGA聚合體。本發(fā)明的組成物也可為局部投藥。對(duì)于局部投藥，前述的組成物可以任何可用于眼部投藥的藥學(xué)上可接受賦形劑提供。前述的組成物優(yōu)選地以滴劑的形式投予眼部表面。對(duì)于一些應(yīng)用，前述組成物的投予是根據(jù)所述化合物通過(guò)角膜至眼內(nèi)的擴(kuò)散而定。所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員可知，使用本發(fā)明的化合物治療眼部PCD的最佳治療方案可直接被確定。其并不是實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題，而是一種常規(guī)地為藥學(xué)領(lǐng)域所操作的優(yōu)化。裸鼠的活體內(nèi)研究經(jīng)常提供開(kāi)始優(yōu)化劑量和給藥方案的起始點(diǎn)。如一些已實(shí)施在小鼠的研究中，注射的頻率初始可為一周一次，然而，這樣的頻率可依初始臨床實(shí)驗(yàn)所獲得的結(jié)果和特定病人的需要，而可優(yōu)化地調(diào)整為從一天至每?jī)芍苤撩吭隆Ｈ祟惖挠盟巹┝靠沙跏嫉赝ㄟ^(guò)從前述化合物于小鼠的使用劑量推算得到，所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員可知，通過(guò)比較動(dòng)物模型修正人類的劑量為所屬領(lǐng)域的常規(guī)方法。在某些具體例中，據(jù)推算所述劑量的差異可從約1mg化合物/Kg體重至約5000mg化合物/Kg體重；或從約5mg/Kg體重至約4000mg/Kg體重或從約10mg/Kg體重至約3000mg/Kg體重；或從約50mg/Kg體重至約2000mg/Kg體重；或從約100mg/Kg體重至約1000mg/Kg體重；或從約150mg/Kg體重至約500mg/Kg體重。在其他的具體例中，前述的劑量可為約1、5、10、25、50、75、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、1050、1100、1150、1200、1250、1300、1350、1400、1450、1500、1600、1700、1800、1900、2000、2500、3000、3500、4000、4500，5000mg/Kg體重。在其他的具體例中，更高的劑量可預(yù)期被使用，如劑量可在約5mg化合物/Kg體重至約20mg化合物/Kg體重的范圍內(nèi)。在其他的具體例中，前述的劑量可為約8、10、12、14、16或18mg/Kg體重。當(dāng)然，前述的劑量可依初始臨床實(shí)驗(yàn)所獲得的結(jié)果和特定病人的需要，如前述治療方案的常規(guī)操作而上調(diào)或下調(diào)。篩選分析正如在此所討論的，錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)通常會(huì)干擾具有正常生物功能的細(xì)胞，并造成PCD。在許多情況下，錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)聚集體累積，將造成細(xì)胞傷害和細(xì)胞毒性。合適的化合物通過(guò)提高具有生化活性構(gòu)象的突變蛋白質(zhì)量，以修正或防止蛋白質(zhì)的錯(cuò)誤折疊。多種方法可用于進(jìn)行識(shí)別前述化合物的篩選分析。在一個(gè)方法中，一個(gè)不能轉(zhuǎn)變?yōu)橐吧偷鞍踪|(zhì)構(gòu)象的突變蛋白質(zhì)在細(xì)胞中表達(dá)(例如活體外或活體內(nèi)的細(xì)胞)；前述細(xì)胞與候選化合物接觸；以及通過(guò)使用任何所屬領(lǐng)域的公知技術(shù)或在此所述的方法分析前述化合物對(duì)所述突變蛋白質(zhì)構(gòu)象的作用。當(dāng)一個(gè)化合物相較于未與化合物接觸的對(duì)照組細(xì)胞，能在被接觸的細(xì)胞中提高正確折疊蛋白質(zhì)出現(xiàn)的收率，則被考慮為適用于本發(fā)明的方法。正確折疊蛋白質(zhì)量的提高可通過(guò)如測(cè)量所述蛋白質(zhì)在特有波長(zhǎng)(例如視紫質(zhì)為500nm)的吸收、測(cè)量細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)聚集的減少、測(cè)量細(xì)胞毒性的降低、測(cè)量PCD相關(guān)顯性的減輕或使用任何標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)量所述蛋白質(zhì)生物活性的提高(例如酶活性、配體的結(jié)合)來(lái)加以分析。在一個(gè)相關(guān)的方法中，是在11-順式-視黃醛、9-順式-視黃醛或其類似物或衍生物存在下進(jìn)行篩選。適用的化合物提高具有生化功能構(gòu)象的蛋白質(zhì)量至少10%、15%或20%，或優(yōu)選地為25%、50%或75%;或最優(yōu)選地為至少100%、200%、300%或甚至400%。若需要，前述被識(shí)別化合物的功效分析在患有PCD的動(dòng)物模型內(nèi)進(jìn)行(例如患有視網(wǎng)膜色素變性、囊狀纖維癥、亨廷頓病、帕金森氏癥、阿茲阿爾茨海默癥、腎源性尿崩癥、癌癥(例如涉及p53突變的癌癥)和朊相關(guān)疾病(例如Jacob-Creutzfeld病)。42測(cè)試化合物和萃取物一般而言，能提高細(xì)胞內(nèi)正確折疊蛋白質(zhì)量的化合物，是依照所屬領(lǐng)域所公知的技術(shù)從大型天然產(chǎn)物或合成(或半合成)萃取物文庫(kù)或化學(xué)文庫(kù)中加以識(shí)別。藥物的發(fā)現(xiàn)和發(fā)展領(lǐng)域中的技術(shù)人員可理解到，測(cè)試萃取物或化合物的精確來(lái)源并非本發(fā)明篩選過(guò)程的關(guān)鍵。據(jù)此，事實(shí)上任何數(shù)目的化學(xué)萃取物或化合物可使用在此所述的方法以進(jìn)行篩選。前述的萃取物或化合物實(shí)例包括，但不局限于，以植物、真菌、原核或動(dòng)物為基礎(chǔ)的萃取物、發(fā)酵液、合成化合物，以及存在化合物的修飾。多種方法也可用于產(chǎn)生隨機(jī)或直接合成任何數(shù)量的化學(xué)化合物，包括，但不局限于，以醣、脂、肽和核酸為基礎(chǔ)的化合物。合成化合物的文庫(kù)可商業(yè)地購(gòu)自BrandonAssociates(Merrimack,N.H.)和AldrichChemical(Milwaukee,Wis.)。細(xì)菌、真菌、植物和動(dòng)物萃取物形式的天然化合物文庫(kù)，可商業(yè)上選擇地購(gòu)自一些包括Biotics(Sussex,UK)、Xenova(Slough,UK)、HarborBranchOceangraphicsInstiture(Ft.Pierce,Fla.)和PharmaMar,U.S.A.(Cambridge,Mass.)的來(lái)源。另外，若需要，天然和合成制造的文庫(kù)可依照所屬領(lǐng)域中的公知技術(shù)產(chǎn)生，例如通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的萃取和分離方法。更進(jìn)一步，若需要，任何文庫(kù)或化合物可使用標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)、物理或生化方法輕易地修改。另外，藥物的發(fā)現(xiàn)和發(fā)展領(lǐng)域中的技術(shù)人員可輕易地理解，用于去重復(fù)(如分類的去重復(fù)、生物的去重復(fù)和化學(xué)的去重復(fù)，或任何其組合)的方法或消除物質(zhì)的復(fù)制或重復(fù)以修正錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的活性為已知，并在可能的情況下使用。當(dāng)發(fā)現(xiàn)粗萃取物可修正錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的構(gòu)象時(shí)，進(jìn)一步的正向萃取物的分離為分離產(chǎn)生所觀測(cè)到效果的化學(xué)組成物所必須的。因此，萃取、分離和純化過(guò)程的目的是在可提高正確折疊蛋白質(zhì)產(chǎn)量的粗萃取物中仔細(xì)地特性描述和識(shí)別化學(xué)本質(zhì)。所述異源萃取物的分離和純化方法為所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
所公知的。若需要，所顯示為適用于治療任何涉及錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)聚集病理的試劑，可依照所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
所公知的方法進(jìn)行化學(xué)修飾。組合治療本發(fā)明用于治療PCD(例如視網(wǎng)膜色素變性、亨廷頓病、帕金森氏癥、阿茲阿爾茨海默癥、腎源性尿崩癥、癌癥和如Jacob-Creutzfeld病的朊相關(guān)疾病)的組成物，若需要，可與任何公知技術(shù)中的標(biāo)準(zhǔn)治療組合投予。對(duì)于視網(wǎng)膜色素變性，標(biāo)準(zhǔn)治療包括維生素A的補(bǔ)充劑。至于帕金森氏癥，標(biāo)準(zhǔn)治療包括投予任何一種或更多種以下的多巴胺受體激動(dòng)劑左旋多巴/卡比多巴、金剛烷胺、溴隱停、培高利特、阿撲嗎啡、芐絲肼、麥角乙脲、美舒麥角、麥角脲、麥角腈、美金剛胺、甲麥角林、吡貝地爾、酪胺、酪氨酸、苯丙氨酸、甲磺酸溴隱亭、甲磺酸培高利特；其他標(biāo)準(zhǔn)治療包括抗組胺劑、抗抑郁藥、多巴胺激動(dòng)劑和單胺氧化酶抑制劑。對(duì)于亨廷頓病，標(biāo)準(zhǔn)治療包括投予任何一種或更多種以下的氟呱啶醇、吩噻嗪、利血平、丁苯那嗪、金剛烷胺和輔酶QIO。對(duì)于阿爾茨海默癥，標(biāo)準(zhǔn)治療包括投予任何一種或更多種以下的多奈呱齊(艾里賽特)、利斯的明(艾斯能)、加蘭他敏(Razadyne)和他克林(Cognex)。對(duì)于腎源性尿崩癥，標(biāo)準(zhǔn)治療包括投予任何一種或更多種以下的氯噻嗪/氫氯噻嗪、阿米洛利和fi引哚美辛。對(duì)于癌癥，標(biāo)準(zhǔn)治療包括投予任何一種或更多種以下的醋酸阿比特龍、六甲蜜胺、脫水長(zhǎng)春堿、auristatin、貝沙羅汀、比卡魯胺、BMS184476、2，3,4，5,6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧苯基)苯磺酰胺、博來(lái)霉素、N,N-二甲基-L-纈氨酰-L-纈氨酰-N-甲基-L-纈氨酰-L-脯氨酰-L-脯氨酸-t-丁酰胺、腫瘤壞死因子、西馬多丁、苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、3',4'-二脫氫基-4'-脫氧-8'-去甲長(zhǎng)春堿、多西紫杉醇、多西他賽、環(huán)磷酰胺、卡鉑、卡莫司汀(BCNU)、順鉑、自念珠藻環(huán)肽、阿糖胞苷、達(dá)卡巴嗪(DTIC)、放線菌素、柔紅霉素、海兔毒素、多柔比星(阿霉素)、依托泊苷、5-氟尿嘧啶、非那雄胺、氟他胺、羥基脲和羥基脲紫杉烷、異環(huán)磷酰胺、利阿唑、氯尼達(dá)明、洛莫司汀(CCNU)、甲二氯甲二乙胺(氮芥)、美法侖、羥乙基磺酸米伏布林、根瘤菌素、sertenef、鏈脲佐菌素、絲裂霉素、甲氨蝶呤、尼魯米特、奧那司酮、紫杉醇、潑尼莫司汀、丙卡巴肼、RPR10988].、磷酸雌二醇氮芥、他莫昔芬、他索那明、紫杉醇、維甲酸、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿、硫酸長(zhǎng)春地辛堿和長(zhǎng)春氟寧。試劑盒本發(fā)明提供用于治療或預(yù)防PCD或其癥狀的試劑盒。在一個(gè)具體例中，所述的試劑盒包括含有有效劑量的11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和任何一種或更多種以下的蛋白酶體抑制劑(如MG132)、自噬抑制劑(如3-甲基腺嘌呤)、溶酶體抑制劑(如氯化銨)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑(如布雷菲德菌素A)、Hsp卯伴侶分子抑制劑(如格爾德霉素)、熱休克反應(yīng)激活劑(如雷公藤紅素)、糖苷酶抑制劑(如栗精胺)和組蛋白去乙酰酶抑制劑(如Scriptaid)的藥學(xué)包裝。前述的組成物優(yōu)選以單元?jiǎng)┝康男褪酱嬖?。在一些具體例中，前述的試劑盒包括含有治療或預(yù)防組成物的無(wú)菌容器；所述的容器可為盒、安瓿、瓶、小瓶、試管、袋、小袋、泡沫包裝或其他所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
所公知的合適容器形式。前述的容器可由塑膠、玻璃、片層紙、金屬箔或其他合適用于保存藥物的物質(zhì)所制成。若需要，本發(fā)明的組成物或其組合與投予患有或有發(fā)展為PCD風(fēng)險(xiǎn)的對(duì)象的指導(dǎo)說(shuō)明共同提供。前述的指導(dǎo)說(shuō)明通常包括使用治療或預(yù)防PCD的化合物的資訊。在其他具體例中，所述的指導(dǎo)說(shuō)明包括至少一種的以下內(nèi)容所述化合物的說(shuō)明或化合物的組合；治療PCD或其癥狀的劑量計(jì)劃表和投藥；預(yù)防；警告；指示；反向指示；過(guò)度劑量的資訊；副作用；動(dòng)物藥理學(xué)；臨床研究；和/或參考文獻(xiàn)。前述的指導(dǎo)說(shuō)明可直接印刷于容器上(若存在)，或以標(biāo)簽貼于容器上，或在容器內(nèi)或與容器一起提供的單獨(dú)紙張、小冊(cè)子、卡片或文件夾。以下所提供的實(shí)例目的在于說(shuō)明本發(fā)明，而非限制。所屬領(lǐng)域技術(shù)人員可理解以下所提供的特定解釋可以多種方式改變，當(dāng)保持前述化合物或其組合的關(guān)鍵性質(zhì)時(shí)，則與前述的發(fā)明相一致。重組多肽的表達(dá)由于本發(fā)明的組成物提高恢復(fù)具有生化活性構(gòu)象的重組多肽，因此，經(jīng)常用于增強(qiáng)任何公知技術(shù)中重組多肽實(shí)質(zhì)上的表達(dá)。本發(fā)明的組成物特別地適用于增強(qiáng)恢復(fù)傾向于形成非活性蛋白質(zhì)的聚集或形成包涵體的生物活性多肽。為了增強(qiáng)恢復(fù)所述蛋白質(zhì)生物活性的形態(tài)，至少一種或更多種本發(fā)明的組成物被添加入當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成被誘導(dǎo)后表達(dá)所述蛋白質(zhì)的重組細(xì)胞(如真核細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞或酵母細(xì)胞)培養(yǎng)液中。前述的組成物包括蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、糖苷酶抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑或組蛋白去乙酰酶抑制劑。為了提高重組或突變視蛋白的表達(dá)，11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛可在誘導(dǎo)時(shí)被添加入培養(yǎng)液中。-一般而言，重組多肽的產(chǎn)生是通過(guò)將在合適表現(xiàn)載體中全部或部分編譯多肽的核酸分子或其片段轉(zhuǎn)化入合適的宿主細(xì)胞中。分子生物學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員可理解任何廣泛多樣的表達(dá)系統(tǒng)可被使用以提供前述的重組蛋白質(zhì)。具體的宿主細(xì)胞使用并非本發(fā)明的關(guān)鍵。重組多肽可實(shí)質(zhì)地在任何真核宿主細(xì)胞(如Saccharomycescerevisiae、如Sf21細(xì)胞的昆蟲細(xì)胞或如NIH3T3、HeLa或優(yōu)選地為COS細(xì)胞的哺乳動(dòng)物細(xì)胞)內(nèi)產(chǎn)生。前述的細(xì)胞可得自多種來(lái)源(例如AmericanTypeCultureCollection,Rockland，Md.;另參見(jiàn)如Ausubeletal"CurrentProtocolinMolecularBiology,NewYork:JohnWiley和Sons,1997)。轉(zhuǎn)染的方法和表達(dá)載體的選擇將取決于所選擇的宿主系統(tǒng)。轉(zhuǎn)化方法描述于如Ausubeletal.(supra)中；表達(dá)載體可選自如CloningVectors:ALaboratoryManual(P.H.Pouwelsetal.，1985,Supp.1987)所提供。有多種表達(dá)系統(tǒng)存在以產(chǎn)生重組多肽。用于產(chǎn)生所述多肽的表達(dá)載體包括，但不局限于，源自于染色體、游離體和病毒的載體，例如源自于細(xì)菌質(zhì)粒、噬菌體、轉(zhuǎn)位子、酵母游離體、插入因子、酵母染色體因子、如桿狀病毒、SV40的乳多空病毒、牛痘病毒、腺病毒、禽痘病毒、偽狂犬病病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒的病毒的載體，以及源自于其組合的載體。一旦前述的重組多肽被表達(dá)，將使用如親和層析予以分離。在一個(gè)實(shí)施例中，所產(chǎn)生對(duì)抗前述多肽的抗體(例如在此所描述產(chǎn)生)可被附著于管柱上，并用于分離所述的重組多肽。多肽錨定細(xì)胞的溶解和分離先于通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法實(shí)現(xiàn)的親和層析(如參閱Ausubeletal.,supra)。一旦經(jīng)分離，若需要，所述的重組蛋白質(zhì)可進(jìn)一步通過(guò)如高效液相色譜分析純化(如參閱Fisher,LaboratroyTechniquesInBiochemistryandMolecularBiology,eds.,Work禾口Burdon,Elsevier,1980)。實(shí)施例視網(wǎng)膜色素變性包括導(dǎo)致桿狀光受體死亡的遺傳性視網(wǎng)膜疾病的異源組。視網(wǎng)膜色素變性的病人，其光受體的死亡將導(dǎo)致起因于外周視力的逐漸損失所造成的夜盲和之后的管狀視野。20至25%患有常染色體顯性視網(wǎng)膜色素變性(ADRP)的病人，其視紫質(zhì)基因具有突變，最常見(jiàn)的突變?yōu)镻23H。所述的P23H突變?cè)斐蔁o(wú)法與11-順式-視黃醛結(jié)合的錯(cuò)誤折疊視蛋白。錯(cuò)誤折疊的P23H蛋白質(zhì)滯留于細(xì)胞內(nèi)，并形成聚集(Salibaetal.,2002.JCS115:2907-2918;Illingetal.,2002.JBC277:34150-34160)。所述的聚集反應(yīng)將一些RP突變予以分類，包括作為蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病(PCD)的P23H。盡管以下的實(shí)施例直接使用P23H突變蛋白以識(shí)別降低錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)聚集和提高正確折疊蛋白質(zhì)產(chǎn)量的化合物，本發(fā)明并非局限于此。所識(shí)別用于在細(xì)胞內(nèi)提高正確折疊P23H產(chǎn)量的化合物，不單單僅用于治療視網(wǎng)膜色素變性。前述的化合物可能提高任何錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的產(chǎn)量，通常實(shí)質(zhì)上也用于治療任何蛋白質(zhì)構(gòu)象的疾病。特異性的藥學(xué)上伴侶分子，越來(lái)越多已顯示可用于挽救錯(cuò)誤折疊和聚集的蛋白質(zhì)。競(jìng)爭(zhēng)性酶抑制劑也已被用于作為藥學(xué)上的伴侶分子，有時(shí)在包括法布瑞氏癥(Fabry，s)、GMl-神經(jīng)節(jié)苷脂沉積癥、戈謝病(Gaucher)、家族黑蒙性癡呆(Tay-sachs)和RP17，稱為特異性的化學(xué)伴侶分子。為了確定是否通過(guò)一般所使用的蛋白質(zhì)折疊、運(yùn)輸和降解細(xì)胞的抑制過(guò)程，可提高細(xì)胞內(nèi)恰當(dāng)折疊蛋白質(zhì)的產(chǎn)量，以下分類的代表性化合物被測(cè)試蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑。先前的研究顯示，天然的11-順式-視黃醛伴侶分子可在數(shù)量上促進(jìn)活體內(nèi)P23H視蛋白的折疊和穩(wěn)定性，如同9-順式-視黃醛和11-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體(Noorwezetal.，J.Biol.Chem.2003Apr18;278(16):14442-50)。如同野生型的蛋白質(zhì)，前述被挽救的P23H突變蛋白質(zhì)形成色素，并獲得完全的糖基化被運(yùn)輸至細(xì)胞表面。在本研究中，多種細(xì)胞酶的抑制劑效果和可參與細(xì)胞內(nèi)P23H視蛋白命運(yùn)的途徑被分析。實(shí)施例1:使用表達(dá)P23H視蛋白的細(xì)胞株分析蛋白質(zhì)的折疊P23H突變和野生型視蛋白在11-順式-視黃酸和多種抑制劑存在下分別在四環(huán)素誘導(dǎo)的穩(wěn)定HEK293細(xì)胞株內(nèi)表達(dá)。在第48小時(shí)，前述的折疊蛋白質(zhì)通過(guò)免疫親和純化，并通過(guò)UV-可見(jiàn)光光譜分析定量。視蛋白的總量在280nm下進(jìn)行分析。具有生化功能構(gòu)象的視紫質(zhì)的量在500nm下進(jìn)行分析。免疫螢光顯微鏡也被用于確定所述蛋白質(zhì)的細(xì)胞位置。實(shí)施例2:蛋白酶體的抑制提高恢復(fù)成正確折疊的P23H一種可逆性的蛋白酶體抑制劑MG132，在誘導(dǎo)時(shí)被添加入描述于實(shí)施例1中的HEK293細(xì)胞株的培養(yǎng)基中。如圖1A所示，蛋白酶體抑制造成多于200-250%視紫質(zhì)的恢復(fù)。相比下，野生視紫質(zhì)的產(chǎn)量?jī)H提高35-40%(圖1B)。實(shí)施例3:自噬的抑制提高恢復(fù)成正確折疊的P23H通過(guò)在誘導(dǎo)時(shí)在培養(yǎng)基中加入3-甲基腺嘌呤，實(shí)施例1中HEK293細(xì)胞的自噬作用被抑制。這導(dǎo)致P23H視紫質(zhì)的恢復(fù)提高350-400%，而野生型的視紫質(zhì)僅有50-60%恢復(fù)(圖2A和2B)。實(shí)施例4:溶酶體的抑制提高恢復(fù)成正確折疊的P23H一種溶酶體抑制劑氯化銨在P23H蛋白質(zhì)被誘導(dǎo)合成時(shí)添加入實(shí)施例1中的HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基中。令人感興趣的是，溶酶體的抑制造成P23H視紫質(zhì)的恢復(fù)提高30%，而在野生型視紫質(zhì)的恢復(fù)則提高10%(圖3A和3B)。實(shí)施例5:阻止內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體的運(yùn)輸提高正確折疊P23H的產(chǎn)蛋白質(zhì)從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體順行性的運(yùn)輸，在誘導(dǎo)時(shí)通過(guò)在實(shí)施例1中的HEK293細(xì)胞內(nèi)添加布雷菲德菌素A而被阻止。前述的治療導(dǎo)致P23H視紫質(zhì)的產(chǎn)量提高2倍(圖4A)，所相應(yīng)在野生型視紫質(zhì)的產(chǎn)量則提高約60%(圖4B)。實(shí)施例6:Hsp90的抑制提高恢復(fù)成正確折疊的P23H48特定的Hsp90伴侶分子抑制劑格爾德霉素在誘導(dǎo)時(shí)被添加入實(shí)施例1中所描述的HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基中。投予表達(dá)野生型和P23H視蛋白的細(xì)胞格爾德霉素，導(dǎo)致P23H視紫質(zhì)的恢復(fù)提高60%(圖5A)，在野生型視紫質(zhì)的恢復(fù)則僅有為不足道的提高(圖5B)。實(shí)施例7:熱休克反應(yīng)的啟動(dòng)提高正確折疊P23H的產(chǎn)量熱休克反應(yīng)在誘導(dǎo)時(shí)通過(guò)添加雷公藤紅素于實(shí)施例1中的HEK293細(xì)胞時(shí)被啟動(dòng)。前述的治療造成P23H視紫質(zhì)40%的提高(圖6A)，雷公藤紅素對(duì)野生型視紫質(zhì)的恢復(fù)效果相對(duì)而言甚小(~5-7%)(圖6B)。實(shí)施例8:二氫雷公藤紅素提高恢復(fù)成野生型和P23H的視紫質(zhì)一種雷公藤紅素的衍生物二氫雷公藤紅素對(duì)P23H視紫質(zhì)的恢復(fù)作用，在實(shí)施例1的HEK293細(xì)胞中被分析。二氫雷公藤紅素對(duì)野生型和P23H視紫質(zhì)的恢復(fù)提高約5-10%(圖7A和7B)。實(shí)施例9:組蛋白去乙酰酶的抑制提高野生型和P23H視紫質(zhì)的恢復(fù)在誘導(dǎo)時(shí)添加入一種組蛋白去乙酰酶抑制劑Scriptaid至實(shí)施例1中的HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基中，Scriptaid對(duì)野生型和P23H視紫質(zhì)的恢復(fù)提高約30%(圖8A和8B)。實(shí)施例10:11-順式視黃醛在抑制劑存在下增強(qiáng)對(duì)視蛋白的挽救如表1所示，以下的每一種抑制劑在11-順式-視黃醛存在下提高恢復(fù)成折疊的視紫質(zhì)葡糖苷酶1和2(栗精胺)、從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體順行性的運(yùn)輸(布雷菲德菌素A)、Hsp90(格爾德霉素)、蛋白酶體(MG132)、自噬作用(3-MA)和溶酶體(氯化銨)。MG132和3-甲基腺嘌呤在前述折疊視紫質(zhì)的恢復(fù)上顯示最為顯著的效果。表l:抑制劑在視紫質(zhì)恢復(fù)上的效果<table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>為了確定抑制劑的效果是否需要特定的伴侶分子11-順式-視黃醛的存在，每一種抑制劑皆被單獨(dú)測(cè)試。MG132為一種在11-順式-視黃醛不存在的情況下，提高150%恢復(fù)成正確折疊的P23H視紫質(zhì)的蛋白酶體抑制劑。3-甲基腺嘌呤為在11-順式-視黃醛不存在的情況下提高200%恢復(fù)成正確折疊的P23H視紫質(zhì)的自噬抑制劑。當(dāng)細(xì)胞在其他抑制劑存在，但未添加11-順式-視黃醛時(shí)生長(zhǎng)，則有較低恢復(fù)量的正確折疊P23H視蛋白。P23H的突變使視蛋白變得不穩(wěn)定，并導(dǎo)致其在細(xì)胞內(nèi)聚集。不正確折疊的P23H不能結(jié)合其天然的配體11-順式-視黃醛。添加ll-順式-視黃醛至表達(dá)P23H突變的細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)，使得配體可接近早期折疊的視蛋白中間體，并達(dá)到提高5-6倍視紫質(zhì)的產(chǎn)量。前述的效果為突變所特有，并未發(fā)現(xiàn)在表達(dá)野生型視蛋白的細(xì)胞培養(yǎng)基中添加11-順式-視黃醛有效果。11-順式-視黃醛和每一種蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑或組蛋白去乙酰酶抑制劑的組合可提高恢復(fù)具有生化功能構(gòu)象的P23H。具有生化功能構(gòu)象的P23H蛋白在功能分析上，顯示其野生型蛋白質(zhì)的生物活性，例如P23H蛋白當(dāng)如同在此所述的表達(dá)時(shí)，能通過(guò)光啟動(dòng)轉(zhuǎn)化為變視紫紅素II。前述的轉(zhuǎn)化通過(guò)光譜分析監(jiān)視。另外，P23H蛋白當(dāng)如同在此所述的表達(dá)時(shí)，可被分離成為細(xì)胞膜的一部分。當(dāng)傳遞蛋白被添加入含有P23H的分離膜時(shí)，所述的P23H蛋白能啟動(dòng)異三聚體G蛋白傳遞蛋白，并通過(guò)傳遞蛋白的a亞基引發(fā)GDP轉(zhuǎn)換為GTP。在視網(wǎng)膜色素變性的動(dòng)物模型中，投予本發(fā)明的組成物(如11-順式-視黃醛與任合一種或更多種的蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑或組蛋白去乙酰酶抑制劑組合)可期待將功能性的挽救或改善與視網(wǎng)膜色素變性顯性相關(guān)的癥狀。材料和方法細(xì)胞株和細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定的野生型和表達(dá)P23H視蛋白的HEK293細(xì)胞株由Flp-lnT-Rex系統(tǒng)(Invitrogen)產(chǎn)生。所述的HEK293細(xì)胞在37°C、8%C02存在下，生長(zhǎng)于DMEM的高葡萄糖培養(yǎng)液中，并補(bǔ)充10%牛胎血清、抗生素-抗真菌素溶液、5ug/ml殺稻瘟菌素和潮霉素。視蛋白產(chǎn)生的誘導(dǎo)和抑制劑的添加表達(dá)視蛋白的HEK293細(xì)胞株允許被匯集，并在改變培養(yǎng)液后以1ug/ml的四環(huán)素誘導(dǎo)。在紅光下誘導(dǎo)后立即加入10UM的ll-順式視黃醛，同時(shí)加入如表2(下文)所示濃度的抑制劑。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>細(xì)菌盤經(jīng)過(guò)48小時(shí)的培養(yǎng)，在紅光下第一次應(yīng)用后，提供IOuM的視網(wǎng)膜24小時(shí)。細(xì)胞的收集和視紫質(zhì)的純化在誘導(dǎo)和投予抑制劑后48小時(shí)，所述的HEK293細(xì)胞被收集，且視紫質(zhì)本質(zhì)上如Noorwezetal.(JBiolChem.2004Apr16;279(16):16278-84)所描述被純化。使用VarianCary50光譜分析儀進(jìn)行光譜分析掃描。其他具體例由前述說(shuō)明可明顯知道，變化和修正可用于在此所描述的本發(fā)明，以使其適用于多種使用和條件。所述具體例也可在以下權(quán)利要求的范圍內(nèi)。列舉的文件列表在任何變數(shù)的定義中，在此包括所述變數(shù)作為所列元素的任何單一元素或組合(或次組合)的定義。在此所列舉的具體例包括作為任何單一具體例或與任何其他具體例或其部分組合的具體所有本說(shuō)明書提到的專利和刊物于此以相同范圍并入?yún)⒖迹缤恳粋€(gè)獨(dú)立的專利和刊物具體且單獨(dú)地被指明以并入?yún)⒖?。?quán)利要求1、治療患有蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病(PCD)的對(duì)象的方法，所述方法包括投予至少一種選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的化合物，其中，所述化合物是以有效的劑量投予以治療所述對(duì)象。2、如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述PCD是選自由視網(wǎng)膜色素變性、老年黃斑變性、青光眼、角膜營(yíng)養(yǎng)不良、視網(wǎng)膜劈裂癥、斯特格病變(Stargardt，sdisease)、常染色體顯性玻璃膜疣(autosomadominantdmzen)禾口貝其Jf斗寺黃珍王營(yíng)養(yǎng)不良(Best，smaculardystrophy)所'纟且成群組的眼部PCD。3、如權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述方法進(jìn)一步包括投予治療對(duì)象U-順式-視黃醛、9-順式-視黃醛或11-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體。4、如權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述眼部PCD是視網(wǎng)膜色素變性或老年黃斑變性。5、治療被診斷患有視網(wǎng)膜色素變性的對(duì)象的方法，所述方法包括a)投予所述對(duì)象11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛；以及b)投予至少一種額外選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的化合物，其中，所述11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和所述化合物是以有效的劑量同時(shí)或在14天內(nèi)分別投予所述對(duì)象。6、如權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述11-順式-視黃醛是11-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體。7、如權(quán)利要求1或5所述的方法，其中，所述對(duì)象包括影響蛋白質(zhì)折疊的突變。8、如權(quán)利要求7所述的方法，其中，所述突變發(fā)生在視蛋白內(nèi)。9、如權(quán)利要求8所述的方法，其中，所述視蛋白包括P23H突變。10、如權(quán)利要求1或5所述的方法，其中，所述蛋白酶體抑制劑選自由MG132、乳胞素(lactocystin)、分裂乳胞素-3-內(nèi)酯(clasto-lactocystin-beta-lactone)、PSI、MG-115、MG-101、N-乙?；?亮氨酸-亮氨酸-蛋氨酸-醛、N-芐酯基-甘氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-醛(N-carbobenzoyl-Gly-Pro-Phe-Leu-CHO)、N-節(jié)酯基-甘氨酸-脯氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-醛、N-芐酯基-亮氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸-醛及其鹽或類似物所組成的群組。11、如權(quán)利要求IO所述的方法，其中，所述蛋白酶體抑制劑是可逆性蛋白酶體抑制劑。12、如權(quán)利要求ll所述的方法，其中，所述可逆性蛋白酶體抑制劑是MG132。13、如權(quán)利要求1或5所述的方法，其中，所述自噬抑制劑選自由3-甲基腺嘌呤、3-甲基腺苷、腺苷、岡田酸、巰基嘌呤核糖核苷(7V^MPR)、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核糖核苷(AICAR)、巴佛洛霉素Al及其鹽或類似物所組成的群組。14、如權(quán)利要求13所述的方法，其中，所述自噬抑制劑是3-甲基腺嘌呤。15、如權(quán)利要求1或5所述的方法，其中，所述溶酶體抑制劑選自由亮抑酶肽、反式-環(huán)氧琥珀酰-L-亮氨酰胺-(4-胍基)丁烷(trans-epoxysaccinyl-L-leucylamide-(4-guanidino)butane)、L-蛋氨酸甲酯、氯化銨、甲胺、氯喹及其鹽或類似物所組成的群組。16、如權(quán)利要求15所述的方法，其中，所述溶酶體抑制劑是氯化銨。17、如權(quán)利要求1或5所述的方法，其中，所述內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑是布雷菲德菌素A及其鹽或類似物。18、如權(quán)利要求1或5所述的方法，其中，所述Hsp90伴侶分子抑制劑選自由苯醌安莎霉素類抗生素、格爾德霉素、17-丙烯胺基-17-脫甲氧基格爾德霉素、根赤殼菌素、新生霉素和結(jié)合于Hsp90ATP/ADP袋的Hsp90抑制劑及其鹽或類似物所組成的群組。19、如權(quán)利要求18所述的方法，其中，所述Hsp90伴侶分子抑制劑是格爾德霉素。20、如權(quán)利要求1或5所述的方法，其中，所述熱休克反應(yīng)激活劑選自由雷公藤紅素、雷公藤紅素甲酯、二氫雷公藤紅素二乙酸、雷公藤紅素丁酯和二氫雷公藤紅素所組成的群組。21、如權(quán)利要求20所述的方法，其中，所述熱休克反應(yīng)激活劑是雷公藤紅素。22、如權(quán)利要求20所述的方法，其中，所述熱休克反應(yīng)激活劑是二氫雷公藤紅素。23、如權(quán)利要求1或5所述的方法，其中，所述糖苷酶抑制劑選自由鹽酸australine、栗精胺、6-乙酰胺-6-脫氧-栗精胺、鹽酸脫氧巖藻糖野尻霉素(DFJ)、脫氧野尻霉素(DNJ)、鹽酸脫氧半乳糖野尻霉素(DGJ)、鹽酸脫氧甘露糖野尻霉素(DMJ)、2R,5R-雙(羥甲基)-3R,4R-二羥基吡咯烷(DMDP)、鹽酸1,4-二脫氧-l,4-亞氨基-D-甘露醇、鹽酸3R,4R,5R，6R)-3,4,5,6-四羥基氮雜環(huán)庚烷、1，5-二脫氧-1,5-亞氨基-木糖醇、Kifonensine、N-丁基脫氧野尻霉素(BDNJ)、N-壬基DNJ(NDNJ)、N-己基DNJ(HDNJ)、N-甲基脫氧野尻霉素(MDNJ)及其鹽或類似物所組成的群組。24、如權(quán)利要求20所述的方法，其中，所述糖苷酶抑制劑是栗精胺。25、如權(quán)利要求1或5所述的方法，其中，所述組蛋白去乙酰酶抑制劑選自由Scriptaid、APHA化合物8、Apicidin、丁酸鈉、(-)-Depudecin、Sirtinol、曲古菌素A及其鹽或類似物所組成的群組。26、如權(quán)利要求25所述的方法，其中，所述組蛋白去乙酰酶抑制齊廿是Scriptaid。27、如權(quán)利要求3或5所述的方法，其中，所述11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和所述化合物在10天內(nèi)分別投予。28、如權(quán)利要求27所述的方法，其中，所述ll-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和所述額外的化合物在5天內(nèi)分別投予。29、如權(quán)利要求28所述的方法，其中，所述11-順式-視黃醛或9-順式4見(jiàn)黃醛和所述額外的化合物在24小時(shí)內(nèi)分別投予。30、如權(quán)利要求29所述的方法，其中，所述ll-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和所述化合物為同時(shí)投予。31、如權(quán)利要求30所述的方法，其中，所述ll-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和所述化合物是投予到眼部。32、如權(quán)利要求31所述的方法，其中，所述投藥為眼內(nèi)投藥。33、如權(quán)利要求30至32中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和所述化合物各自混入提供其長(zhǎng)期釋放的組成物中。34、如權(quán)利要求30所述的方法，其中，所述組成物是微球體、納米球體或納米乳劑。35、如權(quán)利要求34所述的方法，其中，所述長(zhǎng)期釋放是通過(guò)給藥裝置。36、如權(quán)利要求5至36中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述方法進(jìn)一步包括投予維生素A補(bǔ)充劑。37、如權(quán)利要求l所述的方法，其中，所述PCD選自由al-抗胰蛋白酶缺乏癥、囊狀纖維癥、亨廷頓病、帕金森氏癥、阿爾茨海默癥、腎源性尿崩癥、癌癥和Jacob-Creutzfeld病所組成的群組。38、如權(quán)利要求37所述的方法，其中，所述PCD是囊狀纖維癥，并且所述方法進(jìn)一步包括投予選自由抗生素、維生素A、D、E和K補(bǔ)充劑、沙丁胺醇支氣管擴(kuò)張、鏈道酶和布洛芬所組成群組的試劑。39、如權(quán)利要求38所述的方法，其中，所述PCD是亨廷頓病，并且所述方法進(jìn)一步包括投予選自由氟呱啶醇、吩噻嗪、利血平、丁苯那嗪、金剛垸胺和輔酶Q10所組成群組的試劑。40、如權(quán)利要求37所述的方法，其中，所述PCD是帕金森氏癥，并且所述方法進(jìn)一步包括投予選自由左旋多巴、金剛烷胺、溴隱停、培高利特、阿撲嗎啡、芐絲肼、麥角乙脲、美舒麥角、麥角脲、麥角腈、美金剛胺、甲麥角林、吡貝地爾、酪胺、酪氨酸、苯丙氨酸、甲磺酸溴隱亭、甲磺酸培高利特、抗組胺劑、抗抑郁藥和單胺氧化酶抑制劑所組成群組的試劑。41、如權(quán)利要求37所述的方法，其中，所述PCD是阿爾茨海默癥，并且所述方法進(jìn)一歩包括投予選自由多奈呱齊、利斯的明、加蘭他敏和他克林所組成群組的試劑。42、如權(quán)利要求37所述的方法，其中，所述PCD是腎源性尿崩癥，并且所述方法進(jìn)一步包括投予選自由氯噻嗪/氫氯噻嗪、阿米洛利和吲哚美辛所組成群組的試劑。43、如權(quán)利要求37所述的方法，其中，所述PCD是癌癥，并且所述方法進(jìn)一步包括投予選自由阿比特龍醋酸、六甲蜜胺、脫水長(zhǎng)春堿、auristatin、貝沙羅汀、比卡魯胺、BMS184476、2,3,4,5,6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧苯基)苯磺酰胺、博來(lái)霉素、N,N-二甲基-L-纈氨酰-L-纈氨酰-N-甲基-L-纈氨酰-L-脯氨酰-l-L-脯氨酸-t-丁酰胺、腫瘤壞死因子、西馬多丁、苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、3',4'-二脫氫基-4'-脫氧-8'-去甲-長(zhǎng)春j|(3',4'-didehydro-4'-deoxy-8'-norvin-caleukoblastine)、多西紫杉醇、多西他賽、環(huán)磷酰胺、卡鉑、卡莫司汀(BCNU)、順鉬、自念珠藻環(huán)肽、阿糖胞苷、達(dá)卡巴嗪(DTIC)、放線菌素D、柔紅霉素、海兔毒素、多柔比星(阿霉素)、依托泊苷、5-氟尿嘧啶、非那雄胺、氟他胺、羥基脲和羥基脲紫杉烷、異環(huán)磷酰胺、利阿唑、氯尼達(dá)明、洛莫司汀(CCNU)、甲二氯二乙胺(氮芥)、美法侖、羥乙基磺酸米伏布林、根瘤菌素、sertenef、鏈脲佐菌素、絲裂霉素、甲氨蝶呤、尼魯米特、奧那司酮、紫杉醇、潑尼莫司汀、丙卡巴肼、RPR109881、磷酸雌二醇氮芥(stramustinephosphate)、他莫昔芬、他索那明、紫杉醇、維甲酸、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿、硫酸長(zhǎng)春地辛堿和長(zhǎng)春氟寧(vinflunin)所組成群組的試劑。44、在細(xì)胞內(nèi)提高具有生化功能構(gòu)象的蛋白質(zhì)的量的方法，所述方法包括a)將細(xì)胞與至少一個(gè)選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的有效量化合物接觸；以及b)識(shí)別所述具有生化功能構(gòu)象的蛋白質(zhì)的量的提高。45、如權(quán)利要求44所述的方法，其中，所述方法進(jìn)一步包括將所述細(xì)胞與11-順式-視黃醛、9-順式-視黃醛或11-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體接觸。46、如權(quán)利要求45所述的方法，其中，所述細(xì)胞包括形成聚集體或纖維的突變蛋白質(zhì)。47、如權(quán)利要求46所述的方法，其中，所述細(xì)胞包括突變視蛋白。48、如權(quán)利要求46所述的方法，其中，所述細(xì)胞包括突變肌纖蛋白。49、如權(quán)利要求46所述的方法，其中，所述細(xì)胞包括突變脂褐質(zhì)蛋白。50、如權(quán)利要求46所述的方法，其中，所述細(xì)胞包括突變I3-H3蛋白。51、如權(quán)利要求44至50中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述細(xì)胞是在體外的。52、如權(quán)利要求44至50中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述細(xì)胞是在體內(nèi)的。53、如權(quán)利要求44至52中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述細(xì)胞是哺乳動(dòng)物細(xì)胞。54、如權(quán)利要求53所述的方法，其中，所述細(xì)胞是人類細(xì)胞。55、用于治療眼部PCD的藥學(xué)組成物，是在藥學(xué)上可接受的賦形劑中包括有效量的11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和至少一個(gè)額外選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的有效量化合物。56、用于治療視網(wǎng)膜色素變性的藥學(xué)組成物，是在藥學(xué)上可接受的賦形劑中包括有效量的11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛和至少一個(gè)選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑，Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的有效量化合物。57、如權(quán)利要求55或56所述的組成物，其中，所述蛋白酶體抑制劑選自由MG132、乳胞素、分裂乳胞素-P-內(nèi)酯、PSI、MG-115、MG-lOl、N-乙?；?亮氨酸-亮氨酸-蛋氨酸-醛、N-芐酯基-甘氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-醛、N-芐酯基-甘氨酸-脯氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-醛、N-芐酯基-亮氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸-醛及其鹽或類似物所組成的群組。58、如權(quán)利要求57所述的組成物，其中，所述蛋白酶體抑制劑是可逆性蛋白酶體抑制劑。59、如權(quán)利要求55或56所述的組成物，其中，所述可逆性蛋白酶體抑制劑是MG132。60、如權(quán)利要求55或56所述的組成物，其中，所述自噬抑制劑選自由3-甲基腺嘌呤、3-甲基腺苷、腺苷、岡田酸、#-巰基嘌呤核糖核苷(A^-MPR)、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核糖核苷(AICAR)、巴佛洛霉素Al及其鹽或類似物所組成的群組。61、如權(quán)利要求60所述的組成物，其中，所述自噬抑制劑是3-甲基腺嘌吟。62、如權(quán)利要求55或56所述的組成物，其中，所述溶酶體抑制劑選自由亮抑酶肽、反式-環(huán)氧琥珀酰-L-亮氨酰胺-(4-胍基)丁烷、L-蛋氨酸甲酯、氯化銨、甲胺、氯喹及其鹽或類似物所組成的群組。63、如權(quán)利要求62所述的組成物，其中，所述溶酶體抑制劑是氯化銨。64、如權(quán)利要求55或56所述的組成物，其中，所述內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑是布雷菲德菌素A及其鹽或類似物。65、如權(quán)利要求55或56所述的組成物，其中，所述Hsp90伴侶分子抑制劑選自由苯醌安莎霉素類抗生素、格爾德霉素、17-丙烯胺基-n-脫甲氧基格爾德霉素、根赤殼菌素、新生霉素和結(jié)合于Hsp90ATP/ADP袋的Hsp90抑制劑及其鹽或類似物所組成的群組。66、如權(quán)利要求65所述的組成物，其中，所述Hsp90伴侶分子抑制劑是格爾德霉素。67、如權(quán)利要求55或56所述的組成物，其中，所述熱休克反應(yīng)激活劑選自由雷公藤紅素、雷公藤紅素甲酯、二氫雷公藤紅素二乙酸、雷公藤紅素丁酯和二氫雷公藤紅素所組成的群組。68、如權(quán)利要求67所述的組成物，其中，所述熱休克反應(yīng)激活劑是雷公藤紅素。69、如權(quán)利要求67所述的組成物，其中，所述熱休克反應(yīng)激活劑是二氫雷公藤紅素。70、如權(quán)利要求55或56所述的組成物，其中，所述糖苷酶抑制劑是選自由鹽酸austmline、栗精胺、6-乙酰胺-6-脫氧-栗精胺、鹽酸脫氧巖藻糖野尻霉素(DFJ)、脫氧野尻霉素(DNJ)、鹽酸脫氧半乳糖野尻霉素(DGJ)、鹽酸脫氧甘露糖野尻霉素(DMJ)、2R,5R-雙(羥甲基)-3R,4R-二羥基吡咯烷(DMDP)、鹽酸1,4-二脫氧-l,4-亞氨基-D-甘露醇、鹽酸3R，4R,5R,6R-3,4,5,6-四羥基氮雜環(huán)庚烷、1,5-二脫氧-1,5亞氨基-木糖醇、Kifunensine、N-丁基脫氧野尻霉素(BDNJ)、N-壬基DNJ(NDNJ)、N-己基DNJ(HDNJ)、N-甲基脫氧野尻霉素(MDNJ)及其鹽或類似物所組成的群組。71、如權(quán)利要求70所述的組成物，其中，所述糖苷酶抑制劑是栗精胺。72、如權(quán)利要求55或56所述的組成物，其中，所述組蛋白去乙酰酶抑制劑選自由Scriptaid、APHA化合物8、Apicidin、丁酸鈉、(-)-Depudecin、Sirtinol、曲古菌素A及其鹽或類似物所組成的群組。73、如權(quán)利要求72所述的組成物，其中，所述組蛋白去乙酰酶抑制齊IJ是Scriptaid。74、如權(quán)利要求55至73中任一項(xiàng)所述的組成物，其中，所述眼部PCD選自由老年黃斑變性、視網(wǎng)膜色素變性、青光眼、角膜營(yíng)養(yǎng)不良、視網(wǎng)膜劈裂癥、斯特格病變、常染色體顯性玻璃膜疣和貝斯特黃斑營(yíng)養(yǎng)不良所組成的群組。75、治療眼部PCD的試劑盒，所述試劑盒包括有效量的ll-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛；以及至少一個(gè)額外選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的有效量化合物。76、治療視網(wǎng)膜色素變性的試劑盒，所述試劑盒包括有效量的11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛；以及至少一個(gè)額外選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的有效量化合物。77、如權(quán)利要求75或76所述的試劑盒，其中，所述蛋白酶體抑制劑選自由MG132、乳胞素、分裂乳胞素-13-內(nèi)酯、PSI、MG-115、MG-101、N-乙?；?亮氨酸-亮氨酸-蛋氨酸-醛、N-芐酯基-甘氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-醛、N-芐酯基-甘氨酸-脯氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-醛、N-芐酯基-亮氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸-醛及其鹽或類似物所組成的群組。78、如權(quán)利要求75或76所述的試劑盒，其中，所述蛋白酶體抑制劑是可逆性蛋白酶體抑制劑。79、如權(quán)利要求78所述的試劑盒，其中，所述可逆性蛋白酶體抑制劑是MG132。80、如權(quán)利要求75或76所述的試劑盒，其中，所述自噬抑制劑選自由3-甲基腺嘌吟、3-甲基腺苷、腺苷、岡田酸、TV6-巰基嘌呤核糖核苷(A^-MPR)、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核糖核苷(AICAR)、巴佛洛霉素Al及其鹽或類似物所組成的群組。81、如權(quán)利要求80所述的試劑盒，其中，所述自噬抑制劑是3-甲基腺嘌呤。82、如權(quán)利要求75或76所述的試劑盒，其中，所述溶酶體抑制劑選自由亮抑酶肽、反式-環(huán)氧琥珀酰-L-亮氨酰胺-(4-胍基)丁垸、L-蛋氨酸甲酯、氯化銨、甲胺、氯喹及其鹽或類似物所組成的群組。83、如權(quán)利要求82所述的試劑盒，其中，所述溶酶體抑制劑是氯化銨。84、如權(quán)利要求75或76所述的試劑盒，其中，所述內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑是布雷菲德菌素A及其鹽或類似物。85、如權(quán)利要求75或76所述的試劑盒，其中，所述Hsp90伴侶分子抑制劑選自由苯醌安莎霉素類抗生素、格爾德霉素、17-丙烯胺基-]7-脫甲氧基格爾德霉素、根赤殼菌素、新生霉素和結(jié)合于Hsp90ATP/ADP袋的Hsp90抑制劑及其鹽或類似物所組成的群組。86、如權(quán)利要求85所述的試劑盒，其中，所述Hsp90伴侶分子抑制劑是格爾德霉素。87、如權(quán)利要求75或76所述的試劑盒，其中，所述熱休克反應(yīng)激活劑選自由雷公藤紅素、雷公藤紅素甲酯、二氫雷公藤紅素二乙酸、雷公藤紅素丁酯和二氫雷公藤紅素所組成的群組。88、如權(quán)利要求87所述的試劑盒，其中，所述熱休克反應(yīng)激活劑是雷公藤紅素。89、如權(quán)利要求87所述的試劑盒，其中，所述熱休克反應(yīng)激活劑是二氫雷公藤紅素。90、如權(quán)利要求75或76所述的試劑盒，其中，所述糖苷酶抑制劑選自由鹽酸australine、栗精胺、6-乙酰胺-6-脫氧-栗精胺、鹽酸脫氧巖藻糖野尻霉素(DFJ)、脫氧野尻霉素(DNJ)、鹽酸脫氧半乳糖野尻霉素(DGJ)、鹽酸脫氧甘露糖野尻霉素(DMJ)、2R，5R-雙(羥甲基)-3R，4R-二羥基吡咯烷(DMDP)、鹽酸1，4-二脫氧-l，4-亞氨基-D-甘露醇、鹽酸3R,4R，5R,6R-3,4,5,6-四羥基氮雜環(huán)庚烷、1,5-二脫氧-1，5-亞氨基-木糖醇、Kiflmensine、N-丁基脫氧野尻霉素(BDNJ)、N-壬基DNJ(NDNJ)、N-己基DNJ(HDNJ)、N-甲基脫氧野尻霉素(MDNJ)及其鹽或類似物所組成的群組。91、如權(quán)利要求90所述的試劑盒，其中，所述糖苷酶抑制劑是栗精胺。92、如權(quán)利要求75或76所述的試劑盒，其中，所述組蛋白去乙酰酶抑制劑選自由Scriptaid、APHA化合物8、Apicidin、丁酸鈉、(-)-Depudecin、Sirtinol、曲古菌素A及其鹽或類似物所組成的群組。93、如權(quán)利要求92所述的試劑盒，其中，所述組蛋白去乙酰酶抑制齊lj是Scriptaid。94、識(shí)別適用于治療患有眼部PCD的對(duì)象的化合物的方法，所述方法包括a)將在體外表達(dá)錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)的細(xì)胞與候選化合物接觸；以及b)確定從所述細(xì)胞中恢復(fù)成正確折疊的蛋白質(zhì)相對(duì)于對(duì)照細(xì)胞的收率，其中在所述接觸細(xì)胞內(nèi)正確折疊蛋白質(zhì)收率的提高識(shí)別適用于治療患有PCD的對(duì)象的化合物。95、識(shí)別適用于治療患有視網(wǎng)膜色素變性的對(duì)象的化合物的方法，所述方法包括a)將在體外表達(dá)錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的細(xì)胞與(i)ll-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛，以及(ii)候選化合物接觸；以及b)確定從所述細(xì)胞中恢復(fù)成正確折疊的蛋白質(zhì)相對(duì)于對(duì)照細(xì)胞的收率，其中在所述接觸細(xì)胞內(nèi)正確折疊蛋白質(zhì)收率的提高識(shí)別適用于治療患有視網(wǎng)膜色素變性的對(duì)象的化合物。96、如權(quán)利要求94或95所述的方法，其中，所述11-順式-視黃醛是1.1-順式-視黃醛的7環(huán)固定異構(gòu)體。97、如權(quán)利要求94或95所述的方法，其中，所述錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)包括突變。98、如權(quán)利要求94或95所述的方法，其中，所述錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)是視蛋白。99、如權(quán)利要求98所述的方法，其中，所述視蛋白包括P23H突變。100、用于治療患有蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病(PCD)的對(duì)象的方法，所述方法包括投予所述對(duì)象有效量的蛋白酶體抑制劑或自噬抑制劑以治療所述對(duì)象。101、用于治療患有視網(wǎng)膜色素變性的對(duì)象的方法，所述方法包括投予所述對(duì)象有效量的蛋白酶體抑制劑或自噬抑制劑以治療所述對(duì)102、如權(quán)利要求100或101所述的方法，其中，所述蛋白酶體抑制劑是可逆性蛋白酶體抑制劑。103、如權(quán)利要求02所述的方法，其中，所述可逆性蛋白酶體抑制劑是MG132。104、如權(quán)利要求IOO或101所述的方法，其中，所述自噬抑制劑選自由3-甲基腺嘌呤、3-甲基腺苷、腺苷、岡田酸、TV6-巰基嘌呤核糖核苷(A^-MPR)、胺基硫化(aminothiolated)腺苷類似物、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核糖核苷(AICAR)和巴佛洛霉素Al所組成的群組。105、如權(quán)利要求]04所述的方法，其中，所述自噬抑制劑是3-甲基腺嘌呤。106、用于產(chǎn)生具有生化功能構(gòu)象的重組蛋白質(zhì)的方法，所述方法包括a)將表達(dá)所述重組蛋白質(zhì)的細(xì)胞與選自由蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、Hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑和組蛋白去乙酰酶抑制劑所組成群組的化合物接觸；以及b)從所述細(xì)胞中分離所述重組蛋白質(zhì)，其中所述方法產(chǎn)生具有生化功能構(gòu)象的重組蛋白質(zhì)。107、如權(quán)利要求106所述的方法，進(jìn)一歩包括測(cè)量所述蛋白質(zhì)的生物活性。108、如權(quán)利要求107所述的方法，其中，所述生物活性是通過(guò)酶分析測(cè)得。109、如權(quán)利要求107所述的方法，其中，所述生物活性是通過(guò)分光光度法測(cè)得。110、如權(quán)利要求107所述的方法，進(jìn)一步包括將所述細(xì)胞與11-順式-視黃醛接觸。111、如權(quán)利要求107所述的方法，其中，所述細(xì)胞是真核細(xì)胞。112、如權(quán)利要求111所述的方法，其中，所述細(xì)胞是酵母細(xì)胞。113、如權(quán)利要求lll所述的方法，其中，所述細(xì)胞是哺乳動(dòng)物細(xì)胞。全文摘要本發(fā)明的特色為包括至少一種選自蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑、hsp90伴侶分子抑制劑、熱休克反應(yīng)激活劑、糖苷酶抑制劑或組蛋白去乙酰酶抑制劑的化合物的組成物和方法，其通過(guò)在活體內(nèi)修正錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)而適于治療或預(yù)防對(duì)象的蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病。所述的組成物和方法可進(jìn)一步包括11-順式-視黃醛或9-順式-視黃醛化合物。蛋白質(zhì)構(gòu)象病癥和/或疾病的例子可包括視網(wǎng)膜色素變性、老年黃斑變性、青光眼、角膜營(yíng)養(yǎng)不良、視網(wǎng)膜劈裂癥、斯特格病變(Stargardt’sdisease)、常染色體顯性玻璃膜疣(autosomaldominantdruzen)、貝斯特黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、α1-抗胰蛋白酶缺乏癥、囊狀纖維癥、亨廷頓病、帕金森氏癥、阿爾茨海默癥、腎源性尿崩癥、癌癥和/或Jacob-Creutzfeld病。文檔編號(hào)A61P11/00GK101600475SQ200680035439公開(kāi)日2009年12月9日申請(qǐng)日期2006年7月27日優(yōu)先權(quán)日2005年7月27日發(fā)明者S·M·努爾韋茲,S·考沙爾申請(qǐng)人:佛羅里達(dá)大學(xué)研究基金會(huì)有限公司