專利名稱：：一種治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種治療早、中期慢性腎衰的中藥組合物。
背景技術(shù)：
：慢性腎功能衰竭(ChronicRenalFailure)簡稱慢腎衰(CRF)，是指各種原因?qū)е履I臟慢性進行性損害，使其不能維持基本功能，臨床以代謝產(chǎn)物潴留，水、電解質(zhì)和酸堿平衡紊亂以及某些內(nèi)分泌功能異常等表現(xiàn)為特征的一組綜合征。臨床上不同病因的腎臟疾病，當(dāng)其腎功能失代償以后，發(fā)展成終末期腎臟疾病(ESRD)的速度略有差別，但總體趨勢無差異。一般認(rèn)為其腎臟病變呈潛在進行性發(fā)展，多為不可逆，而且在病程的某一階段可呈進行性發(fā)展和加重。其病情復(fù)雜多變，治療棘手，嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量，甚則危及生命。據(jù)國際腎臟病協(xié)會統(tǒng)計，CRF的年發(fā)病率是自然人群的百力—分之98至198。目前國內(nèi)CRF的年發(fā)病率約為自然人群的百萬分之50至100，并且呈逐年上升趨勢。隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展、透析替代療法和腎移植等治療手段的不斷完善，ESRD的療效已有顯著提高。但就如何延緩CRF進程而言，至今醫(yī)學(xué)界尚無突破性進展。世界上有多于透析病人數(shù)倍的早、中期患者，迫切需要一些能夠延緩乃至終止CRF進展的治療方法。對CRF進行早期防治，減慢CRF的病情進展，已成為腎臟病研究者目前面臨的重要課題?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，盡管腎臟損害的原發(fā)因素不同，但腎臟病變進展到終末期腎功能衰竭，均歸屬于一共同途徑，即腎纖維化，主要包括腎小球硬化、腎小管間質(zhì)纖維化以及腎臟小血管的透明變性和玻璃樣變。研究發(fā)現(xiàn)腎纖維化由于啟動了細(xì)胞和細(xì)胞、細(xì)胞和基質(zhì)相互作用的自我調(diào)節(jié)系統(tǒng)(autoregulationsystem)以及產(chǎn)生一系列連鎖放大反應(yīng)(cascadeeffect)而致腎臟損害持續(xù)進行性加劇。腎纖維化在人類腎臟疾病的轉(zhuǎn)歸中起著主導(dǎo)作用，是腎功能衰竭的主要病理基礎(chǔ)。近年來對慢腎衰的發(fā)病機理的研究表明，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)在參與慢腎衰腎臟纖維化過程中起著關(guān)鍵性的作用。多種細(xì)胞因子參與了腎臟纖維化過程，其中包括轉(zhuǎn)移生長因子(TGF-e)、胰島素樣生長因子(IGF)、血小板源生長因子(PDGF)、血管緊張素(ATII)、一氧化氮(N0)、結(jié)締組織生長因子(CTGP)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)。其中TGF-0、CTGF在細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)合成中起到了相當(dāng)重要的作用，它促使ECM沉枳，被認(rèn)為具有促硬化特性，是致腎小球硬化的主要細(xì)胞因子。轉(zhuǎn)化生長因子-e(TGF-e)即是目前公認(rèn)的致纖維化因子，具有多種生物活性，參與細(xì)胞生長、凋亡、分化及細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)合成的調(diào)節(jié)。TGF-e在人腎纖維化及纖維化動物模型中，對成纖維細(xì)胞具有十分重要的調(diào)節(jié)作用。眾多實驗觀察到TGF-e產(chǎn)生增多介導(dǎo)了腎臟肥大、腎小球基底膜增厚、ECM沉積一系列腎臟早期結(jié)構(gòu)性改變。TGF-P可增加基質(zhì)蛋白如膠原蛋白、纖維連接蛋白(FN)，層粘連蛋白(LN)以及蛋白聚糖等膠原成分，而使用TGF-e抗體治療則可以明顯減輕病變的嚴(yán)重程度。研究發(fā)現(xiàn)tgf-e不但可以直接誘導(dǎo)膠原和基質(zhì)的合成，而且可以誘導(dǎo)其他的生物活性前纖維化生長因子。結(jié)締組織生長因子(ctgf)是TGF-e的下游作用因子，受TGF-P強烈誘導(dǎo)，具有調(diào)節(jié)成纖維細(xì)胞增生和細(xì)胞外基質(zhì)分泌的作用。作為一種新發(fā)現(xiàn)的生長因子，CTGF在轉(zhuǎn)化生長因子TGF-e的誘導(dǎo)下有促進腎小球硬化的作用，其作用日益受到重視,CTGF在許多組織中都有表達，在腎臟中最多。在正常腎組織臟層與壁層上皮細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞、小管旁毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、間質(zhì)成纖維細(xì)胞中都有CTGFmRNA的表達。CTGF的過度表達主要表現(xiàn)在以細(xì)胞增生為特征的腎臟疾病中，CTGF介導(dǎo)了TGF-e誘導(dǎo)的FN、Col、CoIII、CoIV的tnRNA和蛋白質(zhì)的表達，其中CoIV是纖維化的一個重要的標(biāo)志o從現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)的角度看，腎纖維化的病理形態(tài)學(xué)改變符合中醫(yī)有關(guān)"癥積"的認(rèn)識，結(jié)合傳統(tǒng)中醫(yī)理論，可以認(rèn)為慢腎衰腎纖維化是發(fā)生在腎臟的微型癥積，濕濁瘀邪，內(nèi)阻腎絡(luò)當(dāng)為其主要病理基礎(chǔ)?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)對腎病瘀血的內(nèi)涵，也有較多認(rèn)同，病理解剖學(xué)檢查顯示原發(fā)性腎小球疾病的病理特征為毛細(xì)血管襻增殖，血管壁纖維蛋白原樣物質(zhì)沉積；毛細(xì)血管襻發(fā)生僵直、皺縮、玻璃樣變；細(xì)胞增殖、足突腫脹變形；晚期小球纖維化、縮小硬變。繼發(fā)性腎小球疾病的病理特征為增殖性、硬化性、類纖維變化、水腫性變、肉芽組織形成、血栓形成、梗死性、血管閉塞性病變等。這些均符合傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)關(guān)于"內(nèi)結(jié)為血瘀"及"久病入絡(luò)為血瘀"的學(xué)說。目前西醫(yī)對于慢腎衰大多采用對癥治療，其非透析現(xiàn)代一體化治療方案主要包括維持水、電解質(zhì)平衡，糾正酸中毒；營養(yǎng)治療(保證足夠能量攝入、低蛋白飲食、低蛋白飲食+必需氨基酸療法、低蛋白飲食+酮酸氨基酸治療、維生素的應(yīng)用)；重組促紅細(xì)胞生成素(r-EP0)的運用；吸附劑治療；腸道清除治療；控制高血壓等幾大方面。但這從根本上難以阻止CRF的進展，而祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)在這一方面，尤其是在延緩腎纖維化，保護殘腎功能方面具有獨特的優(yōu)勢和潛力，已引起國內(nèi)外腎病學(xué)者的日益重視
發(fā)明內(nèi)容-本發(fā)明的目的是提供一種治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物。本發(fā)明應(yīng)用中醫(yī)基礎(chǔ)理論結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)及科學(xué)技術(shù)手段，通過對慢腎衰中醫(yī)"證"的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)微觀研究，確定與證候密切相關(guān)的微觀指標(biāo)，根據(jù)慢腎衰正虛邪實的病機特點及脾腎兩虛、濕濁瘀阻的病機關(guān)鍵，在"內(nèi)結(jié)為血瘀"、"久病入絡(luò)為血瘀"的中醫(yī)理論指導(dǎo)下，獨辟蹊徑，審證求因，審因論治，以扶正降濁、活血化瘀并重為治療原則。采用中藥材黨參、仙靈脾、丹參、制大黃、紫蘇、姜半夏、黃連、桃仁、川芎和蟲草菌絲制成治療早中期慢腎衰的中藥組合物。本發(fā)明中藥組合物中君以黨參健脾益氣，仙靈脾回溫元陽，脾腎同調(diào)，培本固源；臣以丹參活血養(yǎng)血，去滯生新，大黃破積行瘀，推陳致新，補瀉兼施，補而不滯邪，瀉而不傷正；佐以紫蘇理氣合營，宣散血脈之邪，姜半夏燥濕和中、消散痰濁壅滯，合黃連苦寒堅陰、清血解毒，寒溫互用，溫而不傷陰，寒而不抑陽；使以桃仁破血行瘀、川芎行氣活血，益增祛瘀活血之力，更有蟲草菌絲壯命火，益精髓，補肺腎，拯虛損。諸藥合用扶正降濁、理氣活血、據(jù)證立法，燮理陰陽，執(zhí)簡馭繁，藥少力專，共奏扶正降濁、活血化瘀之功效，治療早中期慢腎衰患者?，F(xiàn)代藥理研究已證實黨參能增加紅血球及血紅蛋白，促進小腸局部血液循環(huán)，增加營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，并能增強機體抗寒能力且具有抗衰老的作用。經(jīng)多種途徑給藥，均發(fā)現(xiàn)黨參能使小鼠巨噬細(xì)胞數(shù)明顯增加，細(xì)胞體積增大，偽足增多，胞內(nèi)核酸、糖類、ATP酶、琥珀酸脫氫酶等多種酶活性增強，從而增強其吞噬作用。此外，黨參水溶性提取物對ADP所致血小板聚集有明顯的抑制作用，其機理可能與其抑制鈣調(diào)蛋白和磷酸二脂酶活性，增加血小板內(nèi)cAMP含量及抑制TXA2酶活性有關(guān)。不僅如此，實驗研究還發(fā)現(xiàn)，黨參能顯著降低大鼠全血粘度和血栓最大彈力度，因而具有益氣行血之功效。仙靈脾能擴張血管，降低血壓，使殘存腎單位壓力明顯降低，從而減輕高灌注、高壓力對腎小球的危害。此外，仙靈脾還具有一定的降血脂作用，能改善體內(nèi)脂質(zhì)代謝紊亂狀態(tài)，抑制由于血脂失衡導(dǎo)致的腎小球病變。其成分總黃酮可抑制家兔體外血栓形成，降低全血粘度。不僅如此，研究還發(fā)現(xiàn)仙靈脾具有增強機體免疫力的功效，并能通過減少細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)在腎臟的分布，延緩腎纖維化的進程。丹參能提高纖溶酶活性，促進纖維蛋白溶解，因而具有抗血栓形成的作用。其成分丹參素可抑制血小板聚集，丹參素中的苯基乳酸結(jié)構(gòu)可提高血小板內(nèi)cAMP的水平，從而抑制TXA2的合成。動物實驗用高分子右旋糖苷造成家兔外周微循環(huán)障礙，用丹參治療后，可見到微循環(huán)血液流速加快，流態(tài)趨向正常，毛細(xì)血管網(wǎng)開放增加，由此可見丹參能有效改善組織內(nèi)微循環(huán)。此外，丹參還能增強網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬作用，促進免疫復(fù)合物在體內(nèi)的降解和清除，減輕免疫損傷；能抑制脂質(zhì)過氧化物，減少氧自由基對細(xì)胞的損傷；能增加膠原酶的產(chǎn)生，并增強其活性，促進膠原降解；能提高血管舒緩素活性，促進前列腺素E的產(chǎn)生和分泌，從而擴張血管，消除或減輕腎小球內(nèi)高壓狀態(tài)，改善組織灌流，增加腎血流量(RBF)，使GFR增加。另有研究顯示，乃參對過度增生的纖維母細(xì)胞有抑制作用，且可促進機體吸收過多的結(jié)締組織，使人腎成纖維細(xì)胞ciyc蛋白表達增加，終止細(xì)胞增殖并使其陷入凋亡，從而達到抗腎纖維化的作用。大黃能抑制體蛋白，特別是肌蛋白的分解，改善氨基酸代謝，促進血中氨基酸合成蛋白質(zhì)，促進氮質(zhì)代謝產(chǎn)物排泄，降低血中非蛋白氮水平，從而能延緩CRF的發(fā)展。其有效成分大黃鞣質(zhì)可影響血槳游離氨基酸譜，抑制尿素合成，降解血氨，增強谷氨酸合成酶的活性，從而促進氮質(zhì)再利用過程。此外，大黃還能抑制系膜細(xì)胞的異常增殖，推遲腎小球硬化的發(fā)生；能明顯改善腎組織耗氧量，抑制殘存腎單位特別是腎小管的高代謝；能糾正脂質(zhì)代謝紊亂，使TG及LDL水平下降，HDL水平升高；能抑制殘存腎單位代償性肥大；并能糾正鈣磷代謝紊亂。另有體外實驗顯示，大黃素純品及大鼠灌服大黃后的血清均可抑制腎小球系膜細(xì)胞(MC)的增殖，并能拮抗促腎生長因子對MC的興奮作用，抑制IL-2的產(chǎn)生。除此之外，實驗研究還發(fā)現(xiàn)大黃能減少大鼠基質(zhì)的堆積，降低纖維連接蛋白濃度和IL-1的活性，從而能延緩腎纖維化的進程。蘇葉煎劑能促進消化液分泌，增進胃腸蠕動，由此推測，方中運用紫蘇，-一則可促氣行血暢，消散血中瘀毒之邪，一則當(dāng)可對CRF患者的胃腸功能紊亂現(xiàn)象起到正相調(diào)節(jié)作用。半夏中的葡萄糖醛酸甙、生物堿及甲硫氨酸能抑制嘔吐中樞而起到止嘔作用。此外，半夏還能顯著增強腸道蠕動，在離體腸管中對乙酰膽堿、組織胺、氯化鋇所引起的腸平滑肌收縮有拮抗作用，從而顯示半夏能對紊亂的胃腸功能起到雙向調(diào)節(jié)作用。黃連能刺激促皮質(zhì)激素釋放，從而起到抗炎的作用。此外，黃連和黃連素在體內(nèi)外均能增強白細(xì)胞和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能，從而提高機體防御機能。實驗提示，黃連中的小檗堿能通過競爭性阻斷a-腎上腺素能受體，擴張外周阻力血管，從而起到降壓的作用。黃連素對多種誘導(dǎo)劑如ADP、AA、膠原及鈣離子載體卡西霉素等誘導(dǎo)的血小板聚集和ATP釋放均有不同程度的抑制作用，其中以對膠原誘發(fā)的血小板聚集抑制最強。黃連素能明顯抑制由膠原、ADP和AA誘導(dǎo)的血小板TXA2的釋放，并呈現(xiàn)計量依賴關(guān)系。體外實驗發(fā)現(xiàn)，黃連素對ADP、AA和膠原誘導(dǎo)的TXB2生成亦有明顯的抑制作用。TXB2是強烈的血管收縮劑，可降低RBF和GFR;另一方面，TXB2還可促進系膜細(xì)胞增殖及基質(zhì)合成，促使腎小球硬化。故黃連對TXB2生成的抑制作用，當(dāng)對其改善腎臟微循環(huán)，延緩腎小球硬化進程具有積極意義。桃仁能提高血小板內(nèi)cAMP水平，抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集，抑制血栓形成，促進纖溶。實驗研究顯示，桃仁抗血小板聚集的作用強于當(dāng)歸、赤芍、紅花、益母草。此外，桃仁還具有抑制ECM合成，提高腎臟血流量，改善微循環(huán)，提高組織膠原活性的功效，從而能通過促進腎內(nèi)膠原分解、代謝，減少腎內(nèi)膠原含量，起到改善腎纖維化程度的作用。川芎的有效成分川芎嗪具有改善微循環(huán)、抗氧化、拮抗鈣離子及抗纖維化的作用。對于體外培養(yǎng)之成纖維細(xì)胞，川芎嗪能使其發(fā)生顯著形態(tài)學(xué)改變，抑制細(xì)胞核分裂和增殖。此外，川芎可通過對TXA2生物合成的抑制作用，達到抗血栓形成之目的?？赏ㄟ^抑制血小板的激活、聚集、釋放，阻斷或減輕由之啟動的慢性腎損害，改善RBF，達到抗腎纖維化的效果。另有實驗表明，川芎嗪能抑制MC及ECM的大量產(chǎn)生，阻遏腎小球內(nèi)皮細(xì)胞自分泌1L-6，從而避免了因MC肥大增殖導(dǎo)致的腎小球硬化及IL-6的異常產(chǎn)生所導(dǎo)致腎臟過度炎癥反應(yīng)而加速的腎纖維化進程。其主要成分阿魏酸鈉中的苯烯結(jié)構(gòu)具有拮抗ET的生物活性，能有效減輕微小血管循環(huán)障礙，改善腎血流，從而具有腎保護作用。蟲草菌絲含有10余種氨基酸和豐富的微量元素，能增強機體免疫功能。對CRF患者而言，蟲草菌絲能糾正細(xì)胞內(nèi)外氨基酸代謝紊亂，補充微量元素，調(diào)節(jié)鈣磷代謝；能減少蛋白尿，提高血清白蛋白及血色素，改善細(xì)胞免疫功能，防止繼發(fā)感染；能對抗高脂血癥，抑制由LDL引起的細(xì)胞增殖，抑制腎小球代償性肥大，抑制MC增生，抑制免疫復(fù)合物沉積，減輕腎臟局部炎性細(xì)胞浸潤，促進腎小管上皮細(xì)胞修復(fù)，改善腎臟病理變化。另有研究表明，蟲草提取液能明顯阻滯腎小球、腎小管及腎間質(zhì)的纖維化，從而起到延緩腎纖維化的作用。本發(fā)明的中藥組合物，它是由有效成分與藥物載體制成，其特征在于所述有效成分是由下列重量配比范圍的原料藥組分組成黨參5-60g、仙靈脾5-45g、丹參5-60g、制大黃5-30g、紫蘇5-30g、姜半夏3_20g、黃連2-10g、桃仁5-20g、川芎5-25g、蟲草菌絲2-10g(指每日生藥劑量)。所述的原料藥的優(yōu)選重量配比范圍是黨參10-45g、仙靈脾10-30g、丹參10-30g、制大黃10-20g、紫蘇10-20g、姜半夏5-15g、黃連3-9g、桃仁10-20g、川芎10-20g、蟲草菌絲3-6g(指每FI生藥劑量)。所述的原料藥的更優(yōu)選重量配比是黨參15g、仙靈脾12g、丹參18g、制大黃15g、紫蘇12g、姜半夏9g、黃連5g、桃仁15g、川芎18g、蟲草菌絲6g(指每日生藥劑量)。本發(fā)明組合物的原料藥組分其中的黨參可以用人參替代，人參替代量為3-15g,優(yōu)選劑量為5g，姜半夏可以用代赭石替代，赭石替代量為10^45g，優(yōu)選劑量為15g，桃仁可以用紅花替代，紅花替代量為2-10g，優(yōu)選劑量為3g，黃連可以用六月雪替代，六月雪替代量為10-50g，優(yōu)選劑量為30g。本發(fā)明中藥組合物可按常規(guī)方法制成各種口服制劑如顆粒劑、片劑、膠囊劑、合劑、散劑等。本發(fā)明中藥組合物通過下述方法制備取除蟲草菌絲的各藥混和后，水煎兩次，每次1小時，加水共8—10倍量，水煎液合并濃縮至比重為1.08—1.2(8(TC)，后進行純化處理，力卩95%乙醇使含醇量為50%，放置沉淀，隔日取上清液回收乙醇，濃縮至比重為1.3左右，加入蟲草菌絲，按常規(guī)方法加入適當(dāng)輔料，制成固體口服劑型如顆粒劑、片劑、膠囊劑、合劑或散劑。其中，加入糊精，噴霧干燥使成細(xì)粉，經(jīng)干法制粒制成顆粒；或加入羥甲基淀粉鈉、微粉硅膠、可溶性淀粉，乳糖和硬脂酸鎂，混合均勻，以95%乙醇制顆粒劑；8(TC千燥后壓片劑；加入適量微粉硅膠，混勻后，裝入膠囊；或部分細(xì)粉加入枸櫞酸、淀粉制成顆粒，其余細(xì)粉加入碳酸氫鈉、淀粉制成顆粒，兩種顆粒加入硬脂酸鎂后，混合均勻，壓片。本發(fā)明中藥組合物用于治療的主要適應(yīng)癥是早、中期慢腎衰。本發(fā)明中藥組合物，用于前期臨床治療早、中期慢腎衰患者，結(jié)果顯示，能顯著降低患者臨床癥狀積分，改善腎功能，減輕貧血加重情況，降低PTH，穩(wěn)定Ca、P代謝。其中醫(yī)證候總有效率為86.67%，顯著高于西藥對照組的42.86%(尸〈0.01);疾病總有效率為63.33%，明顯高于西藥對照組的35.71%(尸〈0.05)。動物實驗結(jié)果顯示，對Platt法切除5/6腎組織CRF動物模型具有顯著降低其Scr、Bun、TC、TG、P、PTH,升高Hb、HCT、Ca的作用;能通過降低機體代謝產(chǎn)物潴留，改善貧血，調(diào)節(jié)脂質(zhì)及鈣磷代謝，降低纖維化因子TGF-e,、CTGF在腎組織的表達，防治腎小球硬化，減輕腎小管損傷及腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤，延緩腎纖維化，有明顯的腎保護作用。實驗證實，本發(fā)明藥物療效明顯，能減慢早、中期慢腎衰患者的進程，改善其臨床癥狀，提高其生活質(zhì)量，能節(jié)約因病情加重所需的藥費開支，使患者的總體醫(yī)療費用明顯下降，避免透析帶來的沉重經(jīng)濟負(fù)擔(dān)，倍受早中、期慢腎衰患者的青睞。具有極大的社會和經(jīng)濟效益。圖1.正常組HE染色(10X10)圖2.模型組HE染色(10X4)圖3.模型組HE染色(10X10)圖4.中藥組合物組HE染色(10X4)圖5.中藥組合物組HE染色(10X10)圖6.科素亞組HE染色(10X4)圖7.科素亞組服染色(10X10)圖8.黨參組服染色(10X4)圖9.黨參組冊染色(10X10)圖10.桃仁組服染色(10X4)圖11.桃仁組HE染色(10X10)圖12.」王常組PAS染色(10X10)圖13.模型組PAS染色(10X4)圖14.模型組PAS染色(10X10)圖15.中藥組合物組PAS染色(10X4)圖16.中藥組合物組PAS染色(10X10)圖17.科素亞組PAS染色(10X4)圖18.科素亞組PAS染色(10X10)圖19.黨參組PAS染色(10X4)圖20.黨參組PAS染色(10X10)圖21.桃仁組PAS染色(10X4)圖22.桃仁組PAS染色(10X10)圖23.灌胃后60天各組大鼠腎組織TGF-g,mRNA表達情況圖24.灌胃后60天各組大鼠腎組織CTGFmRNA表達情況具體實施例方式實施例1中藥原料黨參5g、仙靈脾5g、丹參5g、制大黃5g、紫蘇5g、姜半夏3g、黃連2g、桃仁5g、川芎5g、蟲草菌絲2g。取除蟲草菌絲的上述各藥混和后，水煎兩次，每次1小時，加水共8—10倍量，水煎液合并濃縮至比重為1.08—1.2(80°C)，后進行純化處理，力的5%乙醇使含醇量為50%，放置沉淀，隔日取上清液回收乙醇，濃縮至比重為1.3左右，加入蟲草菌絲，按常規(guī)方法加入常用輔料，分別制成固體口服劑型如顆粒劑、片劑、膠囊劑、合劑或散劑。其中，加入糊精，噴霧干燥使成細(xì)粉，經(jīng)干法制粒制成顆粒；或加入羥甲基淀粉鈉、微粉硅膠、可溶性淀粉，乳糖和硬脂酸鎂，混合均勻，以95%乙醇制顆粒劑；8(TC干燥后壓片劑；加入適量微粉硅膠，混勻后，裝入膠囊；或部分細(xì)粉加入枸櫞酸、淀粉制成顆粒，其余細(xì)粉加入碳酸氫鈉、淀粉制成顆粒，兩種顆粒加入硬脂酸鎂后，混合均勻，壓片。實施例2取下述重量配比的中藥原料黨參60g、仙靈脾45g、丹參60g、制大黃30g、紫蘇30g、姜半夏20g、黃連10g、桃仁20g、川芎25g、蟲草菌絲10g，采用實施例l的方法制備顆粒劑、片劑、膠囊劑、合劑或散劑。實施例3取下述重量配比的中藥原料黨參10g、仙靈脾10g、丹參10g、制大黃10g、紫蘇10g、姜半夏5g、黃連3g、桃仁10g、川芎10g、蟲草菌絲3g，采用實施例l的方法制備顆粒劑、片劑、膠囊劑、合劑或散劑。實施例4取下述重量配比的中藥原料黨參45g、仙靈脾30g、丹參30g、制大黃20g、紫蘇20g、姜半夏15g、黃連9g、桃仁20g、川芎20g、蟲草菌絲6g，采用實施例l的方法制備顆粒劑、片劑、膠囊劑、合劑或散劑。實施例5取下述重量配比的中藥原料黨參15g、仙靈脾12g、丹參18g、制大黃15g、紫蘇12g、姜半夏9g、黃連5g、桃仁15g、川芎18g、蟲草菌絲6g，采用實施例l的方法制備顆粒劑、片劑、膠囊劑、合劑或散劑。實施例6取下述重量配比的中藥原料黨參60g、仙靈脾10g、丹參30g、制大黃30g、紫蘇10g、姜半夏6g、黃連9g、桃仁6g、川芎9g、蟲草菌絲3g，采用實施例l的方法制備顆粒劑、片劑、膠囊劑、合劑或散劑。實施例7臨床觀察實驗1臨床資料與方法1.1病例選擇全部病例符合慢腎衰診斷標(biāo)準(zhǔn)(參照中華內(nèi)科雜志編委會腎臟病專業(yè)組1993年擬定標(biāo)準(zhǔn)及K/DOQI指南制定)；Scr在133umol/L至442umol/L和/或15《GFR<60;年齡在1870歲；未接受透析治療。凡以上一項為"否"者不能入選病例。1.2分組70例患者，采取隨機平行對照法，分為本發(fā)明中藥組合物組和西藥對照組進行治療觀察。其中3例未完成治療，7例資料不全，2例進入透析替代治療，最終共有58例符合病例分析，其中本發(fā)明中藥組合物組30例，西藥對照組28例。本發(fā)明中藥組合物組30例男性18例，女性12例，年齡28-70歲(平均50.63士12.54歲)，病程最短2月，最長30年，平均病程7.99±8.08年。在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)一體化治療方案治療基礎(chǔ)上，采用本發(fā)明中藥組合物治療。西藥對照組28例男性16例，女性12例，年齡25-69歲(平均55.93±10.89歲)，病程最短2月，最長42年，平均病程10.95±13.22年。予現(xiàn)代醫(yī)學(xué)一體化治療方案治療。30天為一個療程，觀察2個療程。所述的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)一體化治療方案1、營養(yǎng)治療囑患者優(yōu)質(zhì)低蛋白飲食(一般為0.5-0.6g/kg.d)、適量的糖類、脂肪，以在不增加氮質(zhì)潴留的基礎(chǔ)上保證營養(yǎng)需要和正氮平衡(能量攝入一般為30—40kcal/kg'd)，低磷飲食；2、對癥治療針對原發(fā)病進行治療(如高血壓病、糖尿病、高尿酸血癥等)，祛除各種誘發(fā)和加重腎功能衰竭的因素，如控制感染、心衰，糾正貧血、水電解質(zhì)紊亂、酸堿平衡失調(diào)等，控制血壓以鈣離子拮抗劑、a受體阻滯劑和/或中樞性降壓藥為主。全身浮腫時，囑患者鈉鹽攝入應(yīng)限制在每日3g左右。1.3療效標(biāo)準(zhǔn)1.3.1中醫(yī)證候療效評定標(biāo)準(zhǔn)參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》制定臨床控制中醫(yī)臨床癥狀、體征消失或基本消失，證候療效率》90%。顯效中醫(yī)臨床癥狀、體征明顯改善，證候療效率》70%(<90%)。有效中醫(yī)臨床癥狀、體征均有好轉(zhuǎn)，證候療效率》30%(<70%)。無效中醫(yī)臨床癥狀、體征均無明顯改善，甚或加重，證候療效率<30%。1.3.2疾病療效判定標(biāo)準(zhǔn)參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》制定顯效①臨床癥狀積分減少》60%;②Ccr或GFR增加》20X;③Scr或Bun降低》20%。有效①臨床癥狀積分減少》30%(<60%);②Ccr或GFr增加》10^;③Scr或Bun降低>10%。穩(wěn)定①臨床癥狀有所改善，臨床癥狀積分減少〉0%(<30%);②Ccr或GFR無降低③Scr或Bun無增加。無效①臨床癥狀無改善或加重，臨床癥狀積分減少《0%;②Ccr或GFR降低；③Scr或Bun增加。注以上均①項必備，②、(D具備一項，即可判定。對于①項具備，但②、③項不具備者，其療效按降級判定。1.4觀察指標(biāo)及檢測方法1.4.1臨床癥狀和積分根據(jù)中醫(yī)辨證分型的各項主癥、次癥及舌象、脈象等，觀察患者治療前及治療2個療程后癥狀變化情況，評定相應(yīng)積分。癥狀好轉(zhuǎn)率=(治療后癥狀消失例數(shù)+治療后癥狀好轉(zhuǎn)例數(shù))+治療中出現(xiàn)癥狀例數(shù)X100W。1.4.2—般生化指標(biāo)所有病例于治療前及治療2個療程后檢測以下指標(biāo)-血肌酐(Scr，咖ol/L)、血尿素氮(Bun，mmol/L)、血清鈣(Ca，畫1/U、血清磷(P，畫ol/L)、腎小球率過濾(GFR，ml/min/1.73m2)、血紅蛋白(Hb，g/L)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、甲狀旁腺素(PTH，ng/d"Scr、Bim、Ca、P用AbboUAEROSET全自動生化分析儀測定(美國雅培公司產(chǎn)品)，腎小球濾過率(GFR)用簡化的MDRD公式計算，Hb、HCT用COULTER-HMX(三分類以上)全自動血球計數(shù)儀測定(BECKMANCOULTER產(chǎn)品)。PTH用SN-697全自動雙探頭放射免疫Y計數(shù)器采用競爭性放射免疫分析方法測定。1.5統(tǒng)計學(xué)方法計量資料統(tǒng)計中，同組治療前后指標(biāo)均數(shù)采用配對計量資料t檢驗判斷其療效顯著性，各組間比較采用單因素方差分析判斷其差異顯著性。作治療前后自身對照和組間對照的數(shù)據(jù)用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(^±SD)表示。以上統(tǒng)計均用SPSSl1.5軟件包進行分析。計數(shù)資料統(tǒng)計中，等級分組資料采用Ridit分析。2結(jié)果2.1臨床療效比較(見表l、表2、表3)表l:<table>complextableseeoriginaldocumentpage15<table>從表1、表2可見，中藥組合物組中醫(yī)證候療效總有效率為86.671顯著高于西藥對照組的42.86%(尸<0.01);中藥組合物組疾病療效總有效率為63.33%，明顯高于西藥對照組的35.71%(尸<0.05)?？梢娫诂F(xiàn)代醫(yī)學(xué)一體化治療的基礎(chǔ)上加用中藥組合物辨證治療慢腎衰，可明顯提高臨床療效。表3:二組治療前后臨床癥狀的變化比較(Ridit分析)<table>complextableseeoriginaldocumentpage15<table><table>complextableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>從表3可見，中藥組合物組與西藥對照組患者治療后臨床癥狀都有不同程度的改善。其中中藥組合物對倦怠乏力、氣短懶言、腰酸膝軟、脘腹脹滿、口淡不渴、肢體困重、口中粘膩、面色晦暗、肌膚甲錯的臨床療效最為突出(與西藥對照組相比尸〈0.01)，對食少納呆、畏寒肢冷、腰部冷痛、口干咽燥、五心煩熱、惡心、腰痛、肢體麻木等癥狀亦有明顯療效(與西藥對照組相比/3〈0.05)。2.2治療前后生化指標(biāo)的變化2.2.1治療前后腎功能指標(biāo)的變化(見表4、表5、表6)表4:二組治療前后Scr的變化(I土SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>Scr正常參考值30—120umoi/L表5:二組治療前后Bun的變化(7±SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>注與自身治療前相比*尸《0.05林尸《0.Q1與西藥對照組相比tt尸《0.05##F《0.01Bun正常參考值2.4—7.lmmol/L表6:二組治療前后GFR的變化(^±SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>從表4、表5、表6可見中藥組合物對降低早、中期慢腎衰患者Bun、升高GFR、維持Scn改善腎功能具有顯著療效。2.2.2治療前后Hb、HCT的變化(見表7、表8)表7:二組治療前后Hb的變化(Z土SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>注與自身治療前相比::*尸《0.05**尸《0.01與西藥對照組相比::tt尸《0.05時《0.01Hb正常參考值110—165g/L表8:二組治療前后HCT的變化(7±SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>注與自身治療前相比:*尸《0.05林尸《0.01與西藥對照組相比:#尸《0.05抑尸《0.01HCT正常參考值-0.37—0.50從表7、表8可見中藥組合物對維持早、中期慢腎衰患者Hb、HCT，減輕慢腎衰貧血進行性加重情況具有顯著療效。3.2.3治療前后Ca、P代謝及PTH的變化(見表9、表10、表ll)表9:治療前后二組Ca的變化(X士SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表10:治療前后二組P的變化(7土SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表11:治療前后二組PTH的變化(I±SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>從表9、表10、表11可見中藥組合物對穩(wěn)定鈣磷代謝具有一定療效，對降低體內(nèi)PTH毒素療效明顯。本發(fā)明中藥組合物能顯著降低早、中期慢腎衰患者的臨床癥狀積分，減輕早中期慢腎衰患者臨床癥狀，尤其是倦怠乏力、氣短懶由'、腰酸膝軟、脘腹脹滿、口淡不渴、肢體困重、口中粘膩、面色晦暗、肌膚甲錯癥狀，有效提高慢腎衰的臨床療效。本發(fā)明中藥組合物對降低早、中期慢腎衰患者Bun、升高GFR、維持Scr,改善腎功能具有顯著療效。本發(fā)明中藥組合物對維持早、中期慢腎衰患者Hb、HCT，減輕慢腎衰貧血進行性加重情況具有顯著療效。本發(fā)明中藥組合物中藥組合物對穩(wěn)定早、中期慢腎衰患者鈣磷代謝具有一定療效，對降低體內(nèi)PTH毒素療效明顯。綜上所述，本發(fā)明中藥組合物對早、中期慢腎衰患者的臨床療效顯著。以癥測方，提示以扶正降濁、活血化瘀為指導(dǎo)思想的中藥組合物在早中期慢腎衰的治療方面具有獨特療效。實施例8動物實驗結(jié)果(一)本發(fā)明中藥組合物對Platt法切除5/6腎組織CRF大鼠一般情況與體內(nèi)代謝產(chǎn)物潴留的影響動物實驗表明本中藥組合物能明顯改善CRF大鼠一般情況，降低其體內(nèi)代謝產(chǎn)物潴留。進一步拆方研究顯示本中藥組合物降低體內(nèi)代謝產(chǎn)物潴留、改善腎功能的機制可能與其通過活血化瘀藥物的應(yīng)用，擴張血管，改善組織灌注，增加腎血流量(RBF)，提高GFR，并在一定程度上減輕或消除血小板、紅細(xì)胞的聚合性所造成的血管床瘀塞，從而減少腎小球系膜細(xì)胞(MC)和毛細(xì)血管壁內(nèi)皮細(xì)胞的敏感性有關(guān)。其療效高于單味桃仁，提示中藥組合物中諸藥具有協(xié)同增效作用，進一步顯示了中藥復(fù)方的臨床價值。1材料與方法1.1材料1.l.l動物SPF級SD雄性大鼠70只，體重175—185g，由上海西普爾—必凱實驗動物有限公司提供，批號滬動合證字152號。大鼠分籠飼養(yǎng)于上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院實驗動物中心。維持室溫、12小時光照、45%濕度的環(huán)境。飼料為市售固體飼料，飲用水為自來水，自由飲用水及攝食。1.1.2藥物1.1.2.l本發(fā)明中藥鄉(xiāng)且合物水煎濃縮，每ml含生藥6.25g。1.1.2.2氯沙坦鉀(商品名科素亞)由杭州默沙東制藥有限公司提供，規(guī)格為100mg/片，批號S1095。研粉后溶于純凈水中，每ml含氯沙坦鉀5mg。1.1.2.3拆方1.1.2.3.l黨參:水煎濃縮，每ml含生藥0.75g。1.1.2.3.2桃仁水煎濃縮，每ml含生藥0.75g。1.2方法1.2.1造模方法所購大鼠喂養(yǎng)一周后，隨機分為正常組10只，造模組60只。對造模組大鼠參照文獻應(yīng)用Platt法切除大鼠5/6腎組織制作CRF動物模型。1.2.2分組處理造模2周后斷尾采血測定Scr，造模大鼠Scr顯著高于正常組均值為造模成功(/>《0.05)。最終造模成功存活大鼠共計50只，按Scr組間無顯著性差異隨機分為模型組、中藥組合物組、科素亞組、黨參組、桃仁組，每組10只。分組次日開始灌胃。每日一次，連續(xù)60天。藥物劑量為成人標(biāo)準(zhǔn)體重(60kg)常規(guī)用量的20倍，正常組與模型組予純凈水模擬治療，灌胃量^ml/100g(大鼠體重)*閂。1.2.3觀測指標(biāo)一般情況包括大鼠精神狀態(tài)、體毛、食量、體重等情況。血肌酐(Scr，umol/L)、血尿素氮(Bun,mmol/L)用AbbottAEROSET全自動生化分析儀測定。1.2.4標(biāo)本采集所有大鼠于灌胃前l(fā)天、灌胃后30天斷尾釆血，灌胃后60天腹主動脈采血，所采血液注入普管中，置水溫箱中37。C孵育30min，使血清充分析出，3000r/min離心10min，分離血清，待測實驗指標(biāo)。1.2.5統(tǒng)計學(xué)方法計量資料統(tǒng)計中，各組間比較采用單因素方差分析判斷其差異顯著性。作治療前后組間對照的數(shù)據(jù)用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(7±SD)表示。以上統(tǒng)計均用SPSSll.5軟件包進行分析。2結(jié)果2.1中藥組合物及其拆方對CRF大鼠一般情況的影響(見表l)在實驗進行過程中，正常組大鼠死亡3只，模型組大鼠死亡4只，中藥組合物組大鼠死亡3只，科素亞組大鼠死亡3只，黨參組大鼠死亡5只，桃仁組大鼠死亡4只。實驗期間，模型組大鼠精神萎靡，體毛蓬松稀疏，食量減少，中藥組合物組大鼠精神較好，體毛稍蓬松，食量較多，科素亞組、黨參組、桃仁組大鼠精神狀態(tài)、體毛生長狀況、食量及體重情況介于二者之間。表l:灌胃前后各組大鼠體重情況(X土SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>()內(nèi)為鼠數(shù)從表l可見中藥組合物在改善CRF大鼠消瘦等一般情況方面，具有明顯優(yōu)勢，其療效優(yōu)于科素亞、黨參、桃仁。而黨參對于增加CRF大鼠體重而言，其療效優(yōu)于科素亞、桃仁。2.2中藥組合物及其拆方對CRF大鼠Scr、Bun的影響(見表2、表3)表2:灌胃前后各組大鼠Scr情況(X土SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>注與同期正常組相比*尸《0.05**尸《0.01與同期模型組相比共P《0.05抑f《0.01()內(nèi)為鼠數(shù)表3:灌胃前后各組大鼠Bun情況(7土SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>注與同期正常組相比*p≤0.05**p≤0.Q1與同期模型組相比#p≤0.05##p≤0.01()內(nèi)為鼠數(shù)從表2、表3可見中藥組合物與科素亞，兩者對降低CRF大鼠Scr、Bun均有非常顯著療效。在降低Scr方面，二者之間無顯著差異。但在降低Bun方面，中藥組合物療效優(yōu)于科素亞。進一步拆方研究發(fā)現(xiàn)，桃仁組大鼠Bun與正常組大鼠Bim相比無高度顯著差異(0.05〉p>O.0l)，而同期科素亞組、黨參組大鼠Bun與正常組大鼠Bun相比均有高度顯著差異(p〈0.01)。(二)、本發(fā)明中藥組合物對Platt法切除5/6腎組織CRF大鼠腎性貧血的影響動物實驗表明中藥組合物在升高CRF大鼠Hb、HCT方面具有顯著療效。拆方研究顯示黨參對提高CRF大鼠Hb、HCT亦有明顯療效。在驗證扶正療法對糾正腎性貧血的積極作用的同時，揭示在扶正療法基礎(chǔ)上，運用活血化瘀、祛濕降濁療法能加強對腎性貧血的治療效果，佐證了祖國醫(yī)學(xué)祛瘀生新的學(xué)術(shù)理論。1材料與方法1.1材料、造模方法、分組處理及統(tǒng)計學(xué)方法同前。1.2觀察指標(biāo)血紅蛋白(Hb，g/L)、紅細(xì)胞壓積(HCT)，用COULTER-HMX(三分類以上)全自動血球計數(shù)儀測定。1.3標(biāo)本采集所有大鼠于灌胃前l(fā)天、灌胃后30天斷尾采血，灌胃后60天腹主動脈采血，所采血液注入抗凝管(預(yù)加EDTA鉀)中，待測實驗指標(biāo)。2結(jié)果中藥組合物及其拆方對CRF大鼠Hb、HCT的影響(見表4、表5)表4:<table>complextableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>中藥組合物組科素亞組黨參組桃仁組122.90±13.97(10)**125.00±17.22(10)**125.30±14.55(10)林125.80±17.45(10)林133.75±5.42(8)**時128.63±9.21(8)**抑131.20±2.28(5)**126.86±9.89(7)**將120.00±6.95(7)將107.43±5.38(7)**抑@@117.00±3.39(5)*&U4.17±4.22(6)林將注與同期正常組相比-與同期模型組相比-與同期中藥組合物組相比與同期科素亞組相比()內(nèi)為鼠數(shù)*jP《0.05**p《0.01#尸《0.05尸《0.01@尸《0.05@@尸《0.01&尸《0.05&&尸《0.01表5:實驗前后各組大鼠HCT情況(X士SD)組別HCT(灌胃前)HCT(灌胃后30天)HCT(灌胃后60天)正常組0.4080±0.0155(10)0.4163±0.0141(8)0.3571±0.0150(7)模型組0.3390±0.0526(10)**0.3250±0.0281(6)林0.2567±0.0266(6)**中藥組合物組0.3390±0.0428(10)**0.3838±0.0130(8)**抑0.3429±0.0198(7)科素亞組0.3380±0.0620(10)林0.3725±0.0255(8)**##0.3071±0.0180(7)**將瞎@黨參組0.3400±0.0464(10)**0.3800±0.0071(5)林##0.3300±0.0187(5)*站&桃仁組0.3460±0.0504(10)**0.3614±0.0273(7)林##@0.3183±0.0117(6)**#鵬注與同期正常組相比*尸《0.05林p《0.01與同期模型組相比U尸《0.05湘尸《0.01與同期中藥組合物組相比@尸《0.05@@尸《0.01與同期科素亞組相比&尸《0.05&&尸《0.01()內(nèi)為鼠數(shù)從表4、表5可見中藥組合物、科素亞、黨參、桃仁對升高CRF大鼠Hb、HCT均有非常顯著療效。其中，就療效排列順序而言，中藥組合物〉黨參〉桃仁〉科素亞。(三)、本發(fā)明中藥組合物對Platt法切除5/6腎組織CRF大鼠脂質(zhì)代謝紊亂的影響動物實驗研究表明，高脂血癥與局灶性腎小球硬化及腎功能損傷有密切關(guān)系，高脂血癥具有明顯的腎毒性作用。脂質(zhì)代謝紊亂已被認(rèn)定為慢腎衰患者腎功能惡化的重要誘發(fā)因素之一，而高TC、高LDL血癥對于CRF的影響更為明顯。實驗顯示本中藥組合物具有降低CRF大鼠TC、TG的作用，其降低TC的作用高于科素亞，其降低TG的作用與科素亞無明顯差別。進一歩拆方顯示桃仁降低TC的作用要高于黨參，桃仁與科素亞對TC的降低作用相差無多，桃仁及黨參對TG的降低作用不及中藥組合物與科素亞。以上結(jié)果表明本中藥組合物能明顯降低CRF大鼠TC、TG值，其作用機制可能與改善血液動力學(xué)及清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物有關(guān)。1材料與方法1.1材料、造模方法、分組處理及統(tǒng)計學(xué)方法同前。1.2觀察指標(biāo)總膽固醇(TC，mmol/L)、甘油三脂(TG，mmol/L)，用AbbottAEROSET全自動生化分析儀測定。1.3標(biāo)本采集所有大鼠于灌胃前l(fā)天、灌胃后30天斷尾采血，灌胃后60天腹主動脈采血，所采血液注入普管中，置水溫箱中37。C孵育30min，使血清充分析出，3000r/min離心10min，分離血清，待測實驗指標(biāo)。2結(jié)果中藥組合物及其拆方對CRF大鼠TC、TG的影響(見表6、表7)表6:實驗前后各組大鼠TC情況(^±SD)組別TC(灌胃前)TC(灌胃后30天)TC(灌胃后60天)(ramol/L)(mmol/L)(咖ol/L)正常組1.502±0.122(10)1.835±0.267(8)1.290±0.093(7)模型組2.312±0.509(10)**3.573±1.714(6)**2.793±0.700(6)*中藥組合物組2.497±0.528(10)**2.576±0.467(8)*tt1.834±0.329(7)*抑科素亞組2.239±0.570(10)**2.905±0.471(8)**1.926±0.223(7)*賴黨參組2.104±0.426(10)林2.112士0.276(5)2.218±0.625(5)**ft桃仁組2.381±0.471(10)**2.576±0.285(7)#2.065±0.174(6)*注與同期正常組相比*尸《0.05**尸《0.01與同期模型組相比-尸《0.05抑尸《0.01()內(nèi)為鼠數(shù)從表6可見中藥組合物、科素亞、黨參、桃仁均能不同程度地降低CRF大鼠TC值。其中，尤以中藥組合物療效最佳。表7:實驗前后各組大鼠TG情況(Z土SD)組別TG(灌胃前)(mmol/L)TG(灌胃后30天)(mmol/L)TG(灌胃后60天)(ramol/U正常組0.714±0.262(10)1.093±0.313(8)0.804±0.242(7)模型組0.719±0.254(10)1.022±0.369(6)0.970±0.253(6)中藥組合物組0.543±0.300(10)0.892.±0.346(8)0.514±0.208(7)*W科素亞組0.660±0.498(10)().763±0.180(8)0.553±0.232(7)抑黨參組0.580±0.267(10)0.810±0.265(5)0.672±0.178(5)#桃仁組0.623±0.278(10)0.830±0.204(7)0.662±0.304(6)#注與同期模型組相比ttP《0.05ttftP《0.01()內(nèi)為鼠數(shù)從表7可見中藥組合物與科素亞均能有效降低CRF大鼠TG值，而桃仁及黨參對CRF大鼠TG的降低作用不及中藥組合物與科素亞。(四)、本發(fā)明中藥組合物對Platt法切除5/6腎組織CRF大鼠高PTH及鈣磷代謝紊亂的影響有報道稱PTH除導(dǎo)致鈣、磷代謝紊亂及腎性骨病之外，還可導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化，使腎小球系膜細(xì)胞(MC)增殖及分泌膠原類物質(zhì)增多，最終導(dǎo)致腎纖維化程度不斷加重，是致使GFR降低的重要原因之一。故積極防治繼發(fā)性甲旁亢，可減輕腎纖維化進程，更好地改善預(yù)后，對慢腎衰患者具有相當(dāng)大的臨床價值。本發(fā)明動物實驗顯示，本中藥組合物在降低CRF大鼠PTH方面具有顯著優(yōu)勢。拆方研究顯示桃仁在降低PTH療效方面優(yōu)于科素亞，進一歩提示活血化瘀法對于CRF時體內(nèi)部分大分子毒素的清除具有獨到作用。1材料與方法1.1材料、造模方法、分組處理及統(tǒng)計學(xué)方法同前。1.2觀察指標(biāo)血清鈣(Ca，mmol/L)、血清磷(P,隱ol/L)，用AbbottAEROSET全自動生化分析儀測定。甲狀旁腺素(PTH，ng/dl)，用SN-697全自動雙探頭放射免疫Y計數(shù)器采用競爭性放射免疫分析方法測定。1.3標(biāo)本采集所有大鼠于灌胃前l(fā)天、灌胃后30天斷尾采血，灌胃后60天腹主動脈采血，所采血液注入普管中，置水溫箱中37。C孵育30min，使血清充分析出，3000r/min離心10min，分離血清，待測實驗指標(biāo)。2結(jié)果2.1中藥組合物及其拆方對CRF大鼠PTH的影響(見表8)表8:灌胃后60天各組大鼠PTH情況(y土SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>注與正常組相比:與模型組相比:*尸《0.05**#尸《0.05ttS尸《0.01尸《0.01與中藥組合物組相比@P《0,05鵬尸《0.01與科素亞組相比&尸《0.05&&尸《0.01從表8可見就降低CRF大鼠PTH療效而言，中藥組合物〉桃仁〉黨參〉科素亞。2.2中藥組合物及其拆方對CRF大鼠Ca、P的影響(見表9、表10)表9:實驗前后各組大鼠Ca情況(Z土SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注與同期正常組相比*尸《0.05**尸《0.01與同期模型組相比尸《0.05甜尸《0.01與同期科素亞組相比:&P《0.05&&/>《0.01()內(nèi)為鼠數(shù)表10:實驗前后各組大鼠P情況(I士SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注與同期正常組相比*尸《0.05林尸《0..01與同期模型組相比-#尸《0.05抑尸《0.01與同期科素亞組相比:&尸《0.05&&尸《0,.0]()內(nèi)為鼠數(shù)從表9、表10可見黨參在升高CRF大鼠血鈣方面作用最強，而中藥組合物與科素亞對降低CRF大鼠血磷均有一定療效。(五)、本發(fā)明中藥組合物對Platt法切除5/6腎組織CRF大鼠腎組織形態(tài)學(xué)病變的影響動物實驗顯示本中藥組合物與科素亞均能改善CRF大鼠殘腎組織形態(tài)學(xué)變化，其中中藥組合物對防治腎小球硬化，減輕腎小管損傷及腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤，延緩腎纖維化的作用優(yōu)于科素亞。拆方研究顯示同期黨參組、桃仁組大鼠的腎組織形態(tài)學(xué)變化介于模型組與中藥組合組之間。其中桃仁組大鼠腎小球硬化程度輕于科素亞組、黨參組。表明，活血化瘀法可能通過改善腎組織微循環(huán)，減輕機體血瘀狀態(tài)，起到改善腎纖維化的作用。本發(fā)明中藥組合物作為一復(fù)方湯劑，通過標(biāo)本兼顧，既除CRF濁瘀已成之標(biāo)，又?jǐn)嗥漯鰸岚l(fā)生之源，對CRF大鼠的殘腎組織形態(tài)能起到明顯保護作用。1材料與方法1.1材料、造模方法、分組處理及統(tǒng)計學(xué)方法同前。1.2觀察指標(biāo)腎組織病理形態(tài)，光鏡觀察。1.3標(biāo)本采集大鼠經(jīng)腹主動脈采血后處死，迅速取腎組織于10%中性緩沖福爾馬林液中固定，脫水，包埋制成石蠟切片，HE染色、PAS染色。2結(jié)果2.1HE染色2.1.1正常組腎小球結(jié)構(gòu)正常，毛細(xì)血管襻開放，基底膜厚度正常，包曼氏囊囊腔清晰，無擴張，腎小球與包曼氏囊無粘連，腎小管結(jié)構(gòu)清楚，無萎縮，管腔無擴張，未及蛋白管型，腎間質(zhì)無炎性細(xì)胞浸潤。(見附圖1)2.1.2模型組腎小球結(jié)構(gòu)紊亂，系膜重度增生，毛細(xì)血管基底膜明顯增厚，毛細(xì)血管腔嚴(yán)重受壓變窄，部分消失，腎小球呈彌漫性球性硬化，球囊粘連明顯，腎小球周圍纖維化。部分腎小球毛細(xì)血管襻塌陷，腎小球固縮，毛細(xì)血管腔閉塞，包曼氏囊擴張。腎小管管腔擴張明顯，可及大量蛋白管型。部分腎小管上皮細(xì)胞濁腫，部分腎小管纖維化，管徑縮窄。腎間質(zhì)水腫明顯，可及大量炎性細(xì)胞浸潤，部分腎間質(zhì)纖維化。(見附圖2、3)2.1.3本中藥組合物組腎小球病變輕微，系膜輕度增生，毛細(xì)血管基底膜輕度增厚，包曼氏囊存在，形態(tài)正常，未及明顯球囊粘連。腎小管結(jié)構(gòu)趨于正常，腎小管上皮細(xì)胞略腫脹，管徑稍窄，管腔無明顯擴張，未及明顯蛋白管型。間質(zhì)少量炎性細(xì)胞浸潤。(見附圖4、5)2.1.4科素亞組腎小球病變程度較模型組減輕，但明顯重于中藥組合物組?？梢娤的ぶ卸仍錾?，毛細(xì)血管基底膜普遍增厚，部分毛細(xì)血管腔受壓變窄，局部球囊粘連，腎小囊基底膜增厚。部分腎小球毛細(xì)血管襻萎縮，腎小球體積縮小，包曼氏囊擴張。部分腎小球出現(xiàn)分葉狀結(jié)構(gòu)。腎小管上皮細(xì)胞濁腫，管徑變小，部分腎小管管腔擴張，可及蛋白管型。腎間質(zhì)水腫，局部可及較多炎性細(xì)胞浸潤。(見附圖6、7)2.1.5黨參組腎小球病變程度較模型組減輕，系膜中度增生，毛細(xì)血管基底膜增厚，毛細(xì)血管腔受壓變窄，局部球囊粘連。部分腎小球毛細(xì)血管襻出現(xiàn)分葉狀結(jié)構(gòu)，包曼氏囊存在，未及明顯擴張。部分腎小管上皮細(xì)胞濁腫，管徑變小，部分腎小管擴張，蛋白管型明顯。腎間質(zhì)水腫，可及大量炎性細(xì)胞浸潤。(見附圖8、9)2.1.6桃仁組腎小球病變程度較模型組明顯減輕，腎小球結(jié)構(gòu)清晰，系膜中度增生，毛細(xì)血管基底膜略增厚，毛細(xì)血管腔輕度受壓。包曼氏囊存在，未及明顯擴張，腎小球未及明顯萎縮，球囊粘連不明顯。腎小管管腔未及明顯擴張，蛋白管型不明顯，部分腎小管上皮細(xì)胞略腫脹，管徑稍窄。腎間質(zhì)輕度水腫，局灶性炎性細(xì)胞浸潤。(見附圖10、11)2.2PAS染色2.2.1正常組腎小球毛細(xì)血管襻結(jié)構(gòu)正常，毛細(xì)血管基底膜呈線性，無增厚。(見病理附圖12)2.2.2模型組腎小球系膜重度增生，毛細(xì)血管基底膜增厚，失去正常線性形態(tài)，毛細(xì)血管管腔嚴(yán)重受壓閉塞，腎小球呈彌漫性球性硬化、纖維化，硬化區(qū)系膜基質(zhì)增生，細(xì)胞數(shù)減少，與包曼氏囊嚴(yán)重粘連，部分腎小球毛細(xì)血管襻出現(xiàn)分葉狀結(jié)構(gòu)。部分小動脈內(nèi)膜增厚玻璃樣變性，內(nèi)徑狹窄。(見附圖13、14)2.2.3本中藥組合物組腎小球系膜輕度增生，局部毛細(xì)血管基底膜輕度增厚，腎小球硬化不明顯，僅個別腎小球呈輕度節(jié)段性硬化。(見附圖15、16)2.2.4科素亞組腎小球系膜增生明顯，毛細(xì)血管基底膜普遍增厚，毛細(xì)血管腔受壓變窄。部分腎小球硬化縮小，留存的腎小球代償性肥大，部分腎小球呈球性硬化，部分腎小球呈節(jié)段性硬化。(見附圖17、18)2.2.5黨參組腎小球系膜中度增生，毛細(xì)血管基底膜普遍增厚，毛細(xì)血管腔受壓變窄，腎小囊基底膜增厚，腎小球呈局灶節(jié)段性硬化，腎間質(zhì)水腫明顯，局部大量炎性細(xì)胞浸潤。(見附圖19、20)2.2.6桃仁組腎小球系膜中度增生，毛細(xì)血管基底膜略增厚，毛細(xì)血管腔輕度受壓，腎小球呈局灶節(jié)段性硬化。(見附圖21、22)(六)、本發(fā)明中藥組合物對PIatt法切除5/6腎組織CRF大鼠腎組織TGF-P1、CTGFmRNA基因異常表達的影響。動物實驗顯示本中藥組合物能顯著降低CRF大鼠腎組織TGF-e,、CTGFmRNA表達，從而能有效延緩慢腎衰腎纖維化進展，起到明顯的腎保護作用。1材料與方法1.i材料、造模方法、分組處理及統(tǒng)計學(xué)方法同前。1.2觀察指標(biāo)檢測腎組織TGF-P1、CTGFmRNA水平。L3標(biāo)本采集大鼠經(jīng)腹主動脈采血后處死，迅速取腎組織置于液氮中保存，凍透后轉(zhuǎn)入低溫冰箱中一7(TC保存，RT-PCR法檢測腎組織TGF-e1、CTGFmRNA水平。2結(jié)果2.1本發(fā)明中藥組合物對CRF大鼠腎組織TGF-e,mRNA表達的影響(見表11、附圖23)表ll:灌胃后60天各組大鼠腎組織TGF-日,mRNA表達情況(Z土SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>從表ll可見就降低CRF大鼠腎組織中TGF-e,mRNA表達療效而言，中藥組合物〉科素亞〉桃仁〉黨參。2.2本發(fā)明中藥組合物對CRF大鼠腎組織CTGFmRNA表達的影響(見表12、附圖24)表12:灌胃后60天各組大鼠腎組織CTGFmRNA表達情況(7土SD)<table>complextableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>與模型組相比tt尸《0.05tttt尸《0.01與中藥組合物組相比@尸《0.05@@尸《0.01從表12可見就降低CRF大鼠腎組織中CTGFmRNA表達療效而言，中藥組合物〉黨參〉桃仁〉科素亞。綜上所述，動物實驗表明，本發(fā)明中藥組合物對Platt法切除5/6腎組織CRF模型動物具有降低機體代謝產(chǎn)物潴留，改善貧血，調(diào)節(jié)脂質(zhì)及鈣磷代謝，降低腎組織纖維化因子TGF-P,、CTGFmRNA表達水平，防治腎小球硬化，減輕腎小管損傷及腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤，延緩腎纖維化等腎保護作用。本發(fā)明中藥組合物的藥物制劑經(jīng)臨床和動物實驗證實具有減輕慢腎衰患者臨床癥狀，改善腎功能等作用。具有如下優(yōu)點l.臨床觀察表明，本發(fā)明中藥組合物能顯著降低早、中期慢腎衰患者的臨床癥狀積分，減輕早中期慢腎衰患者臨床癥狀，尤其是倦怠乏力、氣短懶言、腰酸膝軟、脘腹脹滿、口淡不渴、肢體困重、口中粘膩、面色晦暗、肌膚甲錯癥狀，有效提高慢腎衰的臨床療效。2.本發(fā)明中藥組合物對降低早、中期慢腎衰患者Bun、升高GFR、維持Scr，改善腎功能具有顯著療效。3.本發(fā)明中藥組合物對維持早、中期慢腎衰患者Hb、HCT，減輕慢腎衰貧血進行性加重情況具有顯著療效。4.本發(fā)明中藥組合物中藥組合物對穩(wěn)定早、中期慢腎衰患者鈣磷代謝具有療效，對降低體內(nèi)PTH毒素療效明顯。5.動物實驗結(jié)果表明，本發(fā)明中藥組合物對Piatt法切除5/6腎組織CRF模型動物具有降低機體代謝產(chǎn)物潴留，改善貧血，調(diào)節(jié)脂質(zhì)及鈣磷代謝，降低纖維化因子TGF-e,、CTGFmRNA在腎組織的表達，防治腎小球硬化，減輕腎小管損傷及腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤，延緩腎纖維化的腎保護作用。權(quán)利要求1、一種治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物，它是由有效成分與藥物載體制成，其特征在于所述有效成分是由下列原料藥組分組成黨參、仙靈脾、丹參、制大黃、紫蘇、姜半夏、黃連、桃仁、川芎、蟲草菌絲。2.按權(quán)利要求1所述的治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物，其特征在于所述的原料藥的重量配比是黨參5-60g、仙靈脾5-45g、丹參5-60g、制大黃5-30g、紫蘇5-30g、姜半夏3-20g、黃連2-10g、桃仁5-20g、川芎5-25g、蟲草菌絲2-10g。3.按權(quán)利要求1所述的治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物，其特征在于所述的原料藥的重量配比是黨參10-45g、仙靈脾10-30g、丹參10-30g、制大黃10-20g、紫蘇10-20g、姜半夏5-15g、黃連3-9g、桃仁10-20g、川芎10-20g、蟲草菌絲3-6g。4.按權(quán)利要求1所述的治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物，其特征在于所述的原料藥的重量配比是黨參5g、仙靈脾5g、丹參5g、制大黃5g、紫蘇5g、姜半夏3g、黃連2g、桃仁5g、川芎5g、蟲草菌絲2g。5.按權(quán)利要求1所述的治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物，其特征在于所述的原料藥的重量配比是黨參60g、仙靈脾45g、丹參60g、制大黃30g、紫蘇30g、姜半夏20g、黃連10g、桃仁20g、川芎25g、蟲草菌絲10g。6.按權(quán)利要求l所述的治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物，其特征在于所述的原料藥的重量配比是黨參i0g、仙靈脾10g、乃參10g、制大黃10g、紫蘇10g、姜半夏5g、黃連3g、桃仁10g、川芎10g、蟲草菌絲3g。7.按權(quán)利要求l所述的治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物，其特征在于所述的原料藥的重量配比是黨參45g、仙靈脾30g、丹參30g、制大黃20g、紫蘇20g、姜半夏15g、黃連9g、桃仁20g、川芎20g、蟲草菌絲6g。8.按權(quán)利要求1所述的治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物，其特征在于所述的原料藥的重量配比是黨參15g、仙靈脾12g、丹參18g、制大黃15g、紫蘇12g、姜半夏9g、黃連5g、桃仁15g、川彎18g、蟲草菌絲6g。9.按權(quán)利要求1所述的治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物，其特征在于所述的原料藥的重量配比是黨參60g、仙靈脾10g、丹參30g、制大黃30g、紫蘇10g、姜半夏6g、黃連9g、桃仁6g、川芎9g、蟲草菌絲3g。10.按權(quán)利要求i所述的治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物，其特征在于所述的原料藥其中的黨參用人參替代，姜半夏用代赭石替代，桃仁用紅花替代，黃連用六月雪替代。11.按權(quán)利要求l所述的治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物為顆粒劑、片劑、膠囊劑、合劑或散劑口服固體制劑。12.權(quán)利要求l所述的治療早、中期慢性腎功能衰竭的中藥組合物的制備方法，其特征在于包括下列步驟取除蟲草菌絲的各藥混和后，水煎兩次，每次l小時，加水共10倍量，水煎液合并濃縮至比重為1.2,力口95%乙醇使含醇量為50%，放置沉淀，隔R取上清液回收乙醇，濃縮至比重為1.3左右，加入蟲草菌絲，糊精，蔗糖粉，制粒，干燥，整粒，包裝。全文摘要本發(fā)明屬中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及治療早、中期慢性腎衰的中藥組合物。在“內(nèi)結(jié)為血淤”、“久病入絡(luò)為血淤”中醫(yī)理論指導(dǎo)下，審證求因，審因論治，以扶正降濁、活血化淤并重為治療原則，采用中藥黨參、仙靈脾、丹參、制大黃、紫蘇、桃仁等制成組合物，經(jīng)臨床和動物實驗證實具有改善早中期慢腎衰患者臨床癥狀，降低機體代謝產(chǎn)物潴留，改善貧血，調(diào)節(jié)脂質(zhì)及鈣磷代謝，降低纖維化因子在腎組織的表達，防治腎小球硬化，減輕腎小管損傷及腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤，延緩腎纖維化的腎保護作用。本發(fā)明安全、有效，價廉，適合早、中期慢腎衰患者長期服用。文檔編號A61K36/8888GK101194984SQ200610119268公開日2008年6月11日申請日期2006年12月6日優(yōu)先權(quán)日2006年12月6日發(fā)明者何立群,侯衛(wèi)國,琛王,王麗莉,鄭平東,高建東申請人:上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院