專利名稱：：丹參和蒲黃的藥用組合物的制作方法丹參和蒲黃的藥用組合物
技術領域：
1本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術領域：
，涉及丹參或丹參提取物和蒲黃或蒲黃提取物的藥物組合物及其制備方法、在制備治療心腦血管疾病的藥物中的應用和含有該藥物組合物的制劑。
背景技術：
1心腦血管疾病一直以來都是威脅人類健康的大敵，每年奪走1200萬人的生命，接近人口總死亡的1/4。隨著我國逐漸進入老年社會，且隨著經(jīng)濟的發(fā)展和生活方式、飲食習慣的改變,心腦血管疾病的患病率和死亡率正逐年上升，根據(jù)世界衛(wèi)生組織預測，至2020年，非傳染性疾病將占我國死亡原因的79%，其中心腦血管疾病將占首位。因此，如何有效防治心腦血管疾病也就引起人們的高度重視。心腦血管疾病包括冠心病、心絞痛、心肌梗塞、瘀血型肺心病、缺血性腦病、腦血栓、高血壓、高血脂等。這些疾病的主要發(fā)病原因是動脈硬化造成管腔狹窄、管道阻塞，從而導致心腦供血不足，才引起頭沉、頭暈、頭痛、胸悶等癥狀，嚴重者可導致腦中風及心肌梗塞的發(fā)生。心腦缺血后影響能量代謝，繼發(fā)乳酸堆積、鈣超載、自由基損傷等多種變化。多靶點逆轉或改善這些變化，提高綜合療效是藥物治療的重要目標。丹參是唇形科植物丹參SflMaAm7/iwr/7i加Bge的干燥根及根莖，味苦，性微寒，歸辛、肝經(jīng)。有祛瘀止痛，活血通經(jīng)，清心除煩之功效。用于月經(jīng)不調，經(jīng)閉痛經(jīng)，癥瘕積聚，胸腹刺痛，熱痹疼痛，瘡瘍腫痛，心煩不眠，肝脾腫大，心絞痛。丹參具有多方面的藥理作用對心血管系統(tǒng)可增加冠脈流量，降低心肌興奮性和傳導性，改善微循環(huán)，抗血小板的聚集和血栓的形成，使血液粘度下降，抗氧化，增加耐氧能力，抗菌消炎，改善腎功能，對腦組織缺血和再灌注損傷的保護等作用。丹參的有效成分可分為脂溶性的和水溶性的，其中，脂溶性成分有丹參酮I、丹參酮IIA、丹參酮IIB、隱丹參酮等;水溶性成分有丹參素鈉、原兒茶酸、原兒茶醛、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C等?？偟⒎铀釣榈⒒钛龅挠行С煞郑渲械し鬯酈的作用最強。蒲黃為香蒲科植物水濁香蒲7)^/ja朋gw幼/o/iflL、東方香蒲7)^/zaohe"/fl/^Presl、或同屬植物的干燥花粉。剪取雄花后，曬干，成為帶有雄花的花粉，即為草蒲黃。蒲黃還可經(jīng)炮制制成生蒲黃或蒲黃炭。味甘，性平，歸肝、心包經(jīng)。有止血，化瘀，通淋之功效。用于吐血，衄血，咯血，崩漏，外傷出血，經(jīng)閉痛經(jīng)，脘腹刺痛，跌撲腫痛，血淋澀痛。蒲黃主要含有甾類、黃酮類、烷類化合物、酸性成分、氨基酸、無機成分等，近年來有關蒲黃的藥理作用報道很多，尤其在心血管方面，具有改善微循環(huán)，降低血清膽固醇、抗動脈粥樣硬化之功效，可用于冠心病、心絞痛、心肌梗塞、高血脂、高血壓等心血管疾病，其中黃酮類化合物是其在心血管方面的主要有效成分。目前，利用丹參或丹參提取物和蒲黃或蒲黃提取物的相互作用，配伍組方，制備治療心腦血管疾病等方面的藥物，尚未見報道。[
發(fā)明內容l本發(fā)明的目的之一是提供一種用于制備治療心腦血管疾病藥物的組合物，制成該藥物組合物所含有效成分的原料藥為丹參、蒲黃，或者為丹參提取物、蒲黃提取物。制成該藥物組合物所含藥效成分的原料藥的組成為丹參2004000份，蒲黃100010000份，經(jīng)本發(fā)明人的大量篩選實驗證明，本發(fā)明藥物組合物在上述重量份范圍內均有協(xié)同增效的作用；優(yōu)選為丹參5002000份，蒲黃20005000份；進一步優(yōu)選為丹參1000份，蒲黃3000份。上述藥物組合物中，丹參和蒲黃可以用適宜的溶劑分別或混合經(jīng)過提取加工得到其提取物，提取物再和藥用輔料混合加工制成各種任何一種制劑。所述的溶劑是指藥學上常用的溶劑，優(yōu)選水或醇，提取方法可以用藥學上常規(guī)的方法進行提取，如浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法、連續(xù)提取法等。所得總提取物的有效成分主要為酚酸類和黃酮類化合物。上述藥物組合物中的丹參可以通過水提酸沉、醇提、水提醇沉或水提過柱等多種方式制備，本發(fā)明對丹參的提取工藝進行了優(yōu)選，步驟如下取丹參藥材，粉碎成粗粉，加水煎煮兩次，第一次加水12倍量，第二次加水10倍量，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度1.101.15(60'C)的濃縮液，加乙醇至含醇量達85%，冷藏24小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加鹽酸調pH值至2，用醋酸乙酯振搖提取3次，合并醋酸乙酯液，蒸干。殘渣加pH值2的酸水溶解，加于己處理好的聚酰胺柱上，先用2倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用4倍柱體積的95%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，并真空干燥，即得。通過上述工藝制備的丹參提取物，得率為1.52%，丹參總酚酸含量不低于70%,其中丹酚酸B的含量不低于30%。上述藥物組合物中的蒲黃可以通過水提醇沉、水提上柱、醇提、醇提上柱等多種方式制備，本發(fā)明對蒲黃的提取工藝進行了優(yōu)選，步驟如下取蒲黃藥材，加70%乙醇提取三次，每次提取3小時。第一、二次加醇14倍量，第三次加醇10倍量。合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至相對密度為1.041.06(50°C)的濃縮液，加等量水稀釋，混勻，4'C冷藏24小時，離心，取上清液，用等量石油醚振搖提取2次，棄去石油醚液，水液用等量水飽和正丁醇振搖提取3次，合并正丁醇提取液，濃縮至干，殘渣加少量水使溶解，上AB-8大孔樹脂柱，分別用水、35%乙醇、70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，回收乙醇，減壓干燥，即得。通過上述工藝制備的蒲黃提取物，得率為24%，黃酮類化合物的含量不低于50%。蒲黃除采用上述方法提取外，還可以通過下述方法提取制備，但不僅限于下述方法工藝一取蒲黃藥材，加水煎煮三次，第一、第二次每次煎煮3小時，加水12倍量，第三次煎煮2小時。加水10倍量。合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.101.15(60'C)的清膏，加入乙醇至含量達80%，攪勻，放置過夜，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至稠膏狀，真空干燥，即得。通過上述工藝制備的蒲黃提取物，得率為1020%，黃酮類化合物的含量不低于30%。工藝二取蒲黃藥材，加水煎煮三次，第一、第二次每次煎煮3小時，加水12倍量，第三次煎煮2小時。加水量10倍量。合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度為U01.15(60t:)的清膏，加入乙醇至含量達80%，放置過夜，濾過，濾液回收乙醇至相對密度為1.04~1.06(60。C)的濃縮液，加等量水稀釋后，用等量石油醚振搖提取2次，棄去石油醚液，水液用等量水飽和正丁醇振搖提取3次，合并正丁醇提取液，濃縮至稠膏狀，噴霧干燥，即得。通過上述工藝制備的蒲黃提取物，得率為510%，黃酮類化合物的含量不低于50%。工藝三取蒲黃藥材，加70%乙醇提取三次，每次提取3小時。第一、二次加醇14倍量，第三次加醇10倍量。合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至相對密度為1.041.06(50'C)的清膏，加等量水稀釋，混勻，4。C冷藏24小時，離心，取上清液，用等量石油醚振搖提取2次，棄去石油醚液，水液用等量水飽和正丁醇振搖提取3次，合并正丁醇提取液，濃縮至稠膏狀，噴霧干燥，即得。通過上述工藝制備的蒲黃提取物，得率為39%,黃酮類化合物的含量不低于50%。工藝四取蒲黃藥材，加水煎煮三次，第一、第二次每次煎煮3小時，加水12倍量，第三次煎煮2小時。加水量10倍量。合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.101.15(60'C)的清膏，加入乙醇至含量達80%，攪勻，放置過夜，濾過，濾液回收乙醇至相對密度為1.041.06(60°C)的濃縮液，加等量水稀釋后，用等量石油醚振搖提取2次，棄去石油醚液，水液用等量水飽和正丁醇振搖提取3次，合并正丁醇提取液，濃縮至干，殘渣加少量水使溶解，上大孔樹脂柱，先用l倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用2倍體積的35%乙醇洗脫，棄去35%乙醇洗脫液，然后用3倍柱體積的70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮至稠膏狀，噴霧干燥，即得。通過上述工藝制備的蒲黃提取物，得率為15%，黃酮類化合物的含量不低于50%。本發(fā)明藥物組合物還可以由丹參提取物和蒲黃提取物制成，按照提取物相對于藥材的得率計算(丹參提取物的得率為1.5%2.0%，蒲黃提取物的得率為2°/。4%)其重量份數(shù)為丹參提取物140份，蒲黃提取物15400份；優(yōu)選為丹參提取物530份，蒲黃提取物30250份；進一步優(yōu)選為丹參提取物1520份、蒲黃提取物60120份。上述藥物組合物中的丹參提取物的主要有效成分為丹參總酚酸，含量不低于70%，其中丹酚酸B不低于30Y。；蒲黃提取物的主要有效成分為黃酮類化合物，含量不低于30%，最好不低于50%。本發(fā)明藥物組合物中各藥物組分得用量是經(jīng)過發(fā)明人進行大量摸索總結得出的，各組分的用量在上述重量范圍內都有較好療效。上述組成，若以克為單位，可以制成10010000次用量的制劑。如作為片劑，可以制成10010000片，每次用量110片，每日15次。如作為注射劑，可以制成10010000支，每次用量110支，每日13次。以上組成在生產(chǎn)時可按照相應比例增大或減小，如大規(guī)模生產(chǎn)可以以千克為原料，或以噸為單位，小規(guī)模生產(chǎn)也可以以克為單位，重量可以增大或者減小，但各組成之間重量配比的比例不變。以上比例是經(jīng)過科學篩選得到的，對于特殊病人，可以相應調整組成的比例，增加或者減少不超過100%。本發(fā)明藥物組合物可用于制備治療心腦血管疾病的藥物。具有改善微循環(huán)，降低血清膽固醇，抗動脈粥樣硬化，增加冠脈流量，降低心肌興奮性和傳導性，抗血小板的聚集和血栓的形成，使血液粘度下降，抗氧化，增加耐氧能力，抗菌消炎，改善腎功能，對腦組織缺血和再灌注損傷的保護等作用。本發(fā)明藥物組合物可以與一種或多種藥學上可接受的載體混合制成任何一種臨床上或藥學上可接受的劑型，優(yōu)選口服制劑或注射劑，以口服或腸胃外給藥的方式施用于需要這種治療的患者。用于口服給藥時，可制成常規(guī)的固體制劑，如片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑等；也可制成口服液體制劑，如口服溶液劑、口服混懸劑、糖漿劑等。片劑系指藥物與適宜的輔料混勻壓制而成的圓片狀或異形片狀的固體制劑，以口服普通片為主，另有含片、舌下片、口腔貼片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡騰片、緩釋片、控釋片與腸溶片等。膠囊劑系指藥物或加有輔料充填于空心膠囊或密封于軟質囊材中的固體制劑，依據(jù)其溶解與釋放特性，可分為硬膠囊(通稱為膠囊)、軟膠囊(膠丸)、緩釋膠囊、控釋膠囊和腸溶膠囊等。丸劑系指藥物與適宜的輔料均勻混合，以適當方法制成的球狀或類球狀固體制劑，包括滴丸、糖丸、小丸等。顆粒劑系指藥物與適宜的輔料制成具有一定粒度的干燥顆粒狀制劑，可分為可溶顆粒(通稱為顆粒)、混懸顆粒、泡騰顆粒、腸溶顆粒、緩釋顆粒和控釋顆粒等?？诜芤簞┫抵杆幬锶芙庥谶m宜溶劑中制成供口服的澄清液體制劑。口服混懸劑系指難溶性固體藥物，分散在液體介質中，制成供口服的混懸液體制劑，也包括干混懸劑或濃混懸液。糖漿劑系指含有藥物的濃蔗糖水溶液。用于腸胃外給藥時，可制成注射劑。注射劑系指藥物制成的供注入體內的溶液、乳液或混懸液及供臨用前配制或稀釋成溶液或混懸液的粉末或濃溶液的無菌制劑，注射劑可分為注射液、注射用無菌粉末與注射用濃溶液。注射液系指藥物制成的供注射入體內用的無菌溶液型注射液、乳液型注射液或混懸型注射液，可用于肌內注射、靜脈注射、靜脈滴注等；其規(guī)格有l(wèi)ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、100ml、200ml、250ml、500ml等，其中供靜脈滴注用的大體積(一般不小于100ml)注射液也稱靜脈輸液。注射用無菌粉末系指藥物制成的供臨用前用適宜的無菌溶液配制成澄清溶液或均勻混懸液的無菌粉末或無菌塊狀物，可用適宜的注射用溶劑配制后注射，也可用靜脈輸液配制后靜脈滴注；無菌粉末用溶媒結晶法、噴霧千燥法或冷凍干燥法等制得。注射用濃溶液系指藥物制成的供臨用前稀釋供靜脈滴注用的無菌濃溶液。本發(fā)明藥物組合物制成口服制劑時，可以加入適宜的填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑等。常用填充劑包括淀粉、糖粉、磷酸鈣、硫酸鈣二水物、糊精、微晶纖維素、乳糖、預膠化淀粉、甘露醇等；常用粘合劑包括羧甲基纖維素鈉、PVP-K30、羥丙基纖維素、淀粉漿、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙甲纖維素、膠化淀粉等；常用崩解劑包括干淀粉、交聯(lián)聚維酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素等；常用潤滑劑包括硬脂酸鎂、滑石粉、十二烷基硫酸鈉、微粉硅膠等。制成注射劑時，可選用水性溶劑或非水性溶劑，可根據(jù)藥物的性質加入適宜的附加劑。最常用的水性溶劑為注射用水，也可用0.9%氯化鈉溶液或其他適宜的水溶液；常用的非水性溶劑為植物油，主要為供注射用大豆油，其他還有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。常用的附加劑包括滲透壓調節(jié)劑、pH值調節(jié)劑、增溶劑、填充劑、抗氧劑、抑菌劑、乳化劑、助懸劑等。常用的滲透壓調節(jié)劑包括氯化鈉、葡萄糖、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、山梨醇等，優(yōu)選氯化鈉或葡萄糖常用的pH值調節(jié)劑包括醋酸-醋酸鈉、乳酸、枸櫞酸-枸櫞酸鈉、碳酸氫鈉-碳酸鈉等；常用的增溶劑包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的填充劑包括乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酑等；常用的抗氧劑有亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉等；常用抑菌劑為苯酚、甲酚、三氯叔丁醇等。注射劑常用容器有玻璃安瓿、玻璃瓶、塑料安瓿、塑料瓶等。綜上所述，本發(fā)明藥物組合物具有以下優(yōu)點(1)首次采用丹參或其提取物與蒲黃或其提取物合理配伍，用于制備治療心腦血管疾病的藥物，并通過實驗證實兩者有協(xié)同增效作用，優(yōu)于兩者單獨用藥。(2)對本發(fā)明藥物組合物各配比進行藥效學研究，得出了本發(fā)明藥物組合物的最優(yōu)配比。(3)藥理藥效實驗研究結果表明，本發(fā)明藥物組合物，能使缺血再灌注損傷大鼠腦組織中NO含量降低，ChAT含量升高，ET含量降低，具有較好的治療腦缺血能力，能夠協(xié)同增效；顯著減小心肌梗塞面積；改善心肌缺血癥狀，明顯抑制心率失常的現(xiàn)象；降低心肌耗氧量，改善缺血心肌收縮功能，提高心肌組織中SOD活性極，降低MDA含量、-OH.含量；抑制血小板聚集，降低血液粘度，改善血液流變學和微循環(huán)；增大小鼠耳微動脈、微靜脈管徑，加快血流速度，改善微循環(huán)。在抗心腦血管疾病方面具有意想不到的效果。(4)藥理藥效實驗證明，本發(fā)明藥物組合物的藥效優(yōu)于單獨使用丹參或其提取物和蒲黃或其提取物的藥效，具有協(xié)同增效作用，用藥劑量相對減小，具有廣泛的應用前景。(5)本發(fā)明藥物組合物有效成分明確，含量高，制劑穩(wěn)定性好，制備工藝簡便易行，便于控制質量，可以保證臨床用藥安全。以下通過實驗例來進一步闡述本發(fā)明所述藥物組合物的有益效果，這些實驗例包括本發(fā)明藥物組合物的藥效學實驗，丹參或其提取物和蒲黃或其提取物的組合物以下簡稱丹蒲組合物。實驗例中的丹參提取物來自于實施例l，蒲黃提取物來自于實施例2。實驗例1:丹蒲組合物對腦缺血再灌注損傷大鼠的影響實驗動物Wistar大鼠210只，雄性，體重250g土10g。供試品丹參組丹參膠囊劑，自制；蒲黃組蒲黃膠囊劑，自制；丹蒲組合物組丹蒲組合物膠囊劑(不同劑量配比)，自制，17個不同配比組，丹參+蒲黃200g+3000g、200g+5000g、200g+10000g、500g+2000g、500g+3000g、500g+5000g、500g+10000g、1000g+2000g、1000g+3000g、1000g+5000g、2000g+1000g、2000g+2000g、2000g+3000g、2000g+5000g、4000g+1000g、4000g+3000g、4000g+5000g。實驗方法-動物分組隨機分成21組，每組10只。①假手術(SAM)組假手術后5d處死。②缺血再灌注(IR)組缺血30min后再灌注5d處死。③丹參組缺血30min再灌注30min后連續(xù)灌胃給予丹參5d(劑量為45mg/kg)，末次給藥lh后處死。④蒲黃組缺血30min再灌注30min后連續(xù)灌胃給予蒲黃5d(劑量為45mg/kg),末次給藥lh后處死。⑤丹蒲組合物(不同重量配比)組，25組，缺血30min再灌注30min后連續(xù)灌胃給予丹蒲組合物5d(劑量為45mg/kg)，末次給藥lh后處死。冰上迅速取腦，置液氮中凍存待測。動物模型Wistar大鼠麻醉，4V0法制備全腦缺血再灌注損傷動物模型，通過用動脈夾夾閉兩側頸總動脈控制大鼠腦缺血的再灌注時間。指標檢測乙酰膽堿(Ach)測定腦組織中Ach變化以膽堿乙?；?ChAT))活性來表示，ChAT活性采用放射化學法進行，組織中蛋白質含量按Lowry法進行，單位為pmo1/(h.mgPr)?！趸?NO)測定大鼠腦組織勻漿，4000Xg離心5min，取上清2ml加lml醋酸鈉和lml對氨基苯磺酰胺。檢測pH范圍在6.256.35，加鋅粉1015mg，渦振15min，過濾，取上清4ml，加2.0ml顯色劑，調pH至1.751.85，加NaC12.0g、正丁醇3.0ml，渦振，3000轉/分離心5min，取上清液，540nm處測樣品吸光度。雙縮脲法測樣品蛋白含量，計算樣品中NO含量，單位為nmol/mgPr。內皮素(ET)的測定按ET藥盒(解放軍總醫(yī)院)說明書放免測定腦組織勻漿中ET含量，單位為pg/mgPr。統(tǒng)計分析方法實驗數(shù)據(jù)用5±3表示，兩樣本均數(shù)間的比較均采用t檢驗。實驗結果及結論大鼠缺血再灌注后腦組織NO、Ach、ET含量變化，見表l。缺血再灌注組與假手術組相比，大鼠腦組織中NO含量升高，ChAT含量降低，ET含量升高，且差異極顯著(pO.Ol)，說明造模成功。丹參組與假手術組比較，大鼠腦組織中NO含量升高，ChAT含量降低，ET含量升高，差異顯著(p<0.05)，蒲黃組與假手術組比較，大鼠腦組織中NO含量升高，ChAT含量降低，ET含量升高，差異顯著(p0.05)。丹蒲組合物各劑量配比組與缺血再灌注組比較大鼠腦組織中NO含量降低，ChAT含量升高，ET含量降低，差異極顯著(p<0.01)，丹參組與缺血再灌注組相比較，大鼠腦組織中NO含量降低，ChAT含量升高，ET含量降低，差異顯著(p<0.05)，蒲黃與缺血再灌注組比較，大鼠腦組織中NO含量略有降低，ChAT含量略有升高，ET含量略有降低，差異不顯著。結果表明，丹蒲組合物各劑量配比組都能使缺血再灌注損傷大鼠腦組織中NO含量降低，ChAT含量升高，ET含量降低，表明丹參和蒲黃配伍具有協(xié)同抗腦缺血的作用。丹參5002000份，蒲黃20004000份范圍內各配比的效果更好；丹參1000份、蒲黃3000份時，效果最好，提示其可能為最佳配比。表l丹蒲組合物對缺血再灌注損傷大鼠腦組織中NO，ChAT及ET含量的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注*p<0.05，'與丹參組相比'pO.Ol，與假手術組相比；#p<0.05，##p<0.01，與缺血再灌注組相比；&p<0.05，$p<0.05，與蒲黃組相比。實驗例2丹蒲組合物對大鼠實驗性心肌梗塞范圍的影響受試動物Wistar大鼠，雄性，體重200220g，70只。供試品生理鹽水市購；丹參組丹參顆粒劑，自制；蒲黃組蒲黃顆粒劑，自制；丹蒲組合物組丹蒲組合物顆粒劑(丹參+蒲黃二1000g+3000g)，自制，分為高、中、低三個劑量組。實驗方法將大鼠隨機分為7個組，每組10只空白對照組、模型組、丹參組、蒲黃組、丹蒲組合物組高、中、低三個劑量組。各給藥組均為用生理鹽水配制成混懸液后灌胃給藥。大鼠實驗性心肌梗死模型動物戊巴比妥腹腔注射麻醉(45mg/kg)仰位固定。氣管插管，在胸骨左側作2cm的縱切口，近胸骨側剪斷第3、第4肋軟骨，打開胸腔后，連接人工呼吸機(通氣量2ml/100g，50次/min)。剪開心包膜，暴露心臟，冠狀動脈左前降支根部穿線以備結扎，記錄標準II導聯(lián)心電圖，穩(wěn)定10分鐘，結扎冠狀動脈左前降支，關閉胸腔。用針筒吸出動物喉部分泌物，使動物恢復自主呼吸。結扎冠狀動脈15min后，灌胃給藥。結扎冠狀動脈4小時后，摘取心臟，在結扎線以下橫切5片，進行氯化硝基四氮唑藍(N-BT)染色，計算心肌梗死塞區(qū)面積占心室及心臟面積的百分比，并進行統(tǒng)計學處理(t檢驗)。表2丹蒲組合物對大鼠實驗性心肌梗塞范圍的影響(5±s，n=10)組別，二T梗死區(qū)/心室(％)梗死區(qū)/心臟(％)_(mg/kg)_空白對照組-29.11±5.1323.59±4.79模型組-33.19±6.37#26.66±4.48*丹參組8028.32士6.11'23.17土5.66'蒲黃組8025.26土6.59'22.14土6.37'丹蒲組合物高劑量組8013.33±4.21**&$10.56±3.74"&$丹蒲組合物中劑量組4517.27±4.89**&$12.64±3.22"&s丹蒲組合物低劑量組2020.96±5.07"&$14.25±5.36**&$注#p<0.05，與空白對照組相比；'p<0.05，"p<0.01，與模型組相比；&p<0.05，與丹參組相比；$p<0.05,與蒲黃組相比。實驗結果及結論實驗結果見表2。(1)與空白對照組相比，模型組的心肌梗塞面積顯著增加(p<0.05)，說明造模成功。(2)與模型組相比，丹參組心肌梗塞面積顯著減小(p<0.05)，蒲黃組心肌梗塞面積顯著減小(p<0.05),丹蒲組合物高、中、低劑量組心肌梗塞面積均極顯著減小(p<0.01)。(3)與丹參組、蒲黃組相比，丹蒲組合物高、中、低劑量的抗心肌梗塞作用均優(yōu)于單用丹參(p<0.05)和蒲黃(p<0.05)的作用。丹蒲組合物高、中、低三個劑量組均可顯著減小心肌梗塞面積，且優(yōu)于單用丹參和蒲黃的效果，提示兩藥配伍有協(xié)同增效作用，且作用效果與劑量相關，高劑量時效果最好。實驗例3丹蒲組合物對實驗性大鼠急性心肌缺血保護作用的研究實驗動物Wistar大鼠，170只，體重在200士30g，雌雄各半。供試品空白對照組生理鹽水，市購；硝酸甘油組硝酸甘油片，規(guī)格0.5mg，北京益民藥業(yè)有限公司；丹參提取物組丹參提取物膠囊劑，自制；蒲黃那提取物組蒲黃提取物膠囊劑，自制；丹蒲組合物組丹蒲組合物膠囊劑(丹參提取物+蒲黃提取物)，自制。儀器六道生理記錄儀，上海醫(yī)用儀器廠。實驗方法取Wistar大鼠170只，隨機分為17組，每組10只，分別為空白對照組，硝酸甘油組，丹參提取物組，蒲黃提取物組，丹蒲組合物組13組(制備方法參見實施例4)，丹參提取物+蒲黃提取物(5mg+60mg、5mg+120mg、5mg+250mg、15mg+60mg、15mg十120mg、15mg+250mg、20mg+30mg、20mg+60mg、20mg+120mg、20mg+250mg、30mg十30mg、30mg+60mg、30mg+250mg)。各給藥組均為用生理鹽水配制成混懸液后灌胃給藥，各組動物每天灌胃給予1次，連續(xù)7天(硝酸甘油組于給垂體后葉素前舌下靜脈注射1次)。末次給藥后60min，用氨基甲酸乙酯(lg/kg)腹腔注射麻醉于六道生理記錄儀(上海醫(yī)用儀器廠)，連接肢體導聯(lián)和胸前導聯(lián)，于示波器觀測并記錄心電圖。舌下靜脈注射垂體后葉素5ul/kg后，立即記錄V3心電圖，并于15s、30s、lmin、2min、5min各描記l次，比較各組靜脈注入垂體后葉素后心電圖ST段上移及T波升高的幅度，并觀察各組出現(xiàn)心律失常的動物數(shù)。表3丹蒲組合物對抗垂體后葉素所致大鼠急性心肌缺血心電圖變化(x±s，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注'p<0.05,"p<0.01,空白對照組相比；&p<0.05，與丹參提取物組相比；$p<0.05，與蒲黃提取物組相比；xp<0.05，與丹參提取物組相比；#p<0.05，與蒲黃提取物組相比。實驗結果及結論:給予垂體后葉素后各組心電圖ST段上移及T波升高的幅度以及出現(xiàn)心率失常的動物數(shù)見表3，注射垂體后葉素后，空白對照組多數(shù)動物即刻出現(xiàn)ST段上移，2min內達到最高峰，5min基本恢復。T波即刻2min出現(xiàn)升高，隨之逐漸恢復，但5min未恢復至芷常。硝酸廿油組和丹蒲組奮物組ST段上移及T波升高出現(xiàn)的時間與對照組一致，但幅度明顯小于對照組，且恢復較快。與丹參提取物組、蒲黃提取物組相比，各組合物配比組的抗心電圖變化的作用均優(yōu)于單用丹參提取物和蒲黃提取物的作用，有顯著性差異(p<0.05)。丹參提取物1520份、蒲黃葉提取物60120份范圍內各配比的效果較好，有極顯著性差異(p<0.01)，且心率失常數(shù)少。實驗例4丹蒲組合物對心肌耗氧量及抗氧化酶的影響實驗動物雜種犬42只，體重I2.68kg±1.87kg，雌雄各半。供試品丹參提取物組丹參提取物片劑，自制；蒲黃提取物組蒲黃提取物片劑，自制；丹蒲組合物組丹蒲組合物片劑(丹參提取物+蒲黃提取物二20mg+120mg)，高、中、低三個不同劑量組，自制(制備方法參見實施例3)。實驗方法42只犬，隨機分為7組，每組6只假結扎組、模型對照組、丹參提取物組、蒲黃提取物組、丹蒲組合物組。各給藥組均為用生理鹽水配制成混懸液后灌胃給藥。犬心肌缺血模型制備給藥期滿的各組犬靜脈注射戊巴比妥鈉(30mg'kg—1)麻醉固定，監(jiān)測肢體n導聯(lián)心電圖；建立股靜脈通道，0.5%肝素鈉體內抗凝；分離股動脈，肝素化后股動脈插管連續(xù)監(jiān)測BP;分離氣管并插管，行人工呼吸機正壓呼吸(頻率1618次TnirT1，吸氣呼氣比1:1.5，潮氣量350550ml);開胸暴露心臟，分離左冠狀動脈左旋支，連接血流量計，測定冠脈血流量；分離左冠脈前降支第一分支下方2mm，除假結扎組只穿線不結扎外，其余各組均穿入兩條1號絲線，一期結扎前5min，按每公斤體重2mg，靜脈滴入利多卡因。第一條絲線結扎時將一根處理過直徑為lmm的9號針頭置于結扎線和血管之間，結扎后將針頭抽出，進行血管狹窄的一期結扎，30min后，再將第二條絲線結扎，進行血流阻斷的二期結扎，完成心肌缺血模型的制備。檢測指標血氧飽和度測定于結扎前、一期結扎10mm、二期結扎即刻、15min、30min、60min、120min測定并記錄冠脈血流量，并于結扎前和二期結扎120min時分別于冠狀竇(靜脈血)、頸主動脈各取血lml，測定血氧飽和度，按公式-心肌耗氧量(MV02)ml/(min-100g)=冠狀動脈血流量(CBF)ml/(min.lOOg)x(動脈血氧mP/。-冠狀竇血氧ml%)計算各組心肌耗氧量。心肌組織SOD、MDA、-OH'測定二期結扎120min各組立即取出心臟，用冰生理鹽水注射液沖洗、吸干、稱重后取左心室心尖部心肌組織lg,以生理鹽水注射液為介質，用勻漿器制成10%心肌組織勻槳，測定SOD活性、MDA和-OH'含量。實驗結果與結論實驗結果見表4。(1)對心肌耗氧量的影響模型組與假結扎組相比心肌耗氧量極顯著升高(p<0.01),說明造模成功。(2)丹參提取物組、蒲黃提取物組、丹蒲組合物高、中、低各劑量組心肌耗氧量均極顯著低于模型組，有極顯著性差異(p<0.01)。(3)與單用丹參提取物組、蒲黃提取物組相比，丹蒲組合物組優(yōu)于單用丹參提取物組(p<0.05)和蒲黃提取物組(p<0.05)。(4)對心肌組織中SOD、MDA及-OH，的影響模型組與假結扎組相比心肌組織中SOD活性極顯著升高(pO.Ol)，MDA及-OH'含量極顯著降低(p<0.01);丹參提取物組、蒲黃提取物組、丹蒲組合物高、中、低各劑量組，心肌組織中SOD活性極顯著高于模型組(pO.01);MDA含量、-OH'含量顯著降低均極顯著低于模型組(p<0.01)。丹蒲組合物各劑量組在冠脈結扎阻斷血流后，可顯著降低缺血心肌耗氧量；提高缺血心肌組織中抗自由基酶活性，增強心肌組織清除自由基的能力，減少心肌過氧化物及羥自由基的生成，且優(yōu)于但用丹參提取物和蒲黃提取物的效果，提示兩藥配伍具有協(xié)同增效作用，且作用效果與劑量相關，高劑量時效果最好。表4PS對犬缺血心肌耗氧量及SOD、MDA、-OH'的影響(^土s，n=6)心肌耗氧量i55^5Xmg/kgml-(min.l00g)-|(U-g-1prot)(nmol.ml"prot)注*p<0.01，與假結扎組比；p<0.05,"pO.Ol，與模型組比；&p<0.05，與丹參提取物組相比；Sp<0.05，與蒲黃提取物組相比。實驗例5丹蒲組合物的抗血小板聚集作用受試動物Wistar大鼠，雄性，體重200220g，60只。假結扎組模型組202020151017.25±0.9229.33±1.52#17.89士1.31"17.49土1.58"14.87±1.57"&$15.58±1.07**&$16.87±1.28**&$62.54±5.0012.63±4.19#46.55±5.29"47,67±4.94**59.04±3.17"&$7**&$55.27±4.4752.67±4.18*&$1.27±0.2710.15±1.72#1.67±0.60**1.62±0.59**1.32±0.29**&$1.37±0.28，1.4歸.58"&$38.49±11.9668.80±10.34#45.59±13.23**45.44土13.38"41.08±4.34"&s42.38±4.08**&s42.97±4.65**&$取取合量合量合量提組提組組齊組齊組齊參物黃物蒲高蒲中蒲低丹蒲丹物丹物丹物供試品空白對照組生理鹽水，市購；丹參提取物組丹參提取物片劑，自制；蒲黃提取物組蒲黃提取物片劑，自制；丹蒲組合物組丹蒲組合物片劑(丹參提取物+蒲黃提取物)，相當于原藥材丹參+蒲黃=1000mg+3000mg,自制(制備方法參見實施例3)，分為高、中、低三個劑量組。實驗方法將大鼠隨機分為6組，每組10只，分別為空白對照組，丹參提取物組，蒲黃提取物組，丹蒲組合物高、中、低劑量組。各給藥組均為用生理鹽水配制成混懸液后灌胃給藥，每日一次，連續(xù)給藥7天，末次給藥后l小時，動物麻醉后自腹主動脈取血，抗凝劑采用3.28%枸櫞酸鈉，與血液以1:9比例混合。將抗凝全血在2CTC條件下1500r/min離心5min獲得富血小板血漿(PPR)。留取定量PPR后，將剩余PPR再次以3000r/min離心10min,獲得自身對照貧血小板血拔(PPP)。以PPP調節(jié)PPR濃度，使各PPR濃度相同。將PPR在37'C的恒溫孔中預熱后，加入ADP(終濃度為^mol/L)引起血小板聚集，記錄最大聚集率。實驗結果及結論實驗結果見表5。(1)與空白對照組相比，丹參提取物組和蒲黃提取物組血小板最大聚集率均顯著降低(p<0.05)，組合物各劑量組血小板最大聚集率極顯著降低(pO.Ol)。(2)與丹參提取物組、蒲黃提取物組相比，丹蒲組合物各劑量組的血小板最大聚集率顯著降低(p<0.05，p<0.05)。丹蒲組合物各劑量均都能顯著抑制血小板聚集，且均優(yōu)于單用丹參提取物和蒲黃提取物的效果，表明丹參提取物與蒲黃提取物配伍有很好的協(xié)同作用，且作用效果與給藥劑量有關，高劑量時效果最好。表5丹蒲組合物的抗血小板聚集作用(5±s，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>注'pO.05,"p<0.01，與空白對照組相比；&p<0.05,與丹參提取物組相比；$p<0.05，與蒲黃提取物組相比。實驗例6:丹蒲組合物對小鼠耳廓微循環(huán)的影響受試動物雄性小鼠，60只，體重2025g，隨機分為6組，每組10只供試品對照組生理鹽水，市購。丹參提取物組丹參提取物片劑，自制；蒲黃提取物組蒲黃提取物片劑，自制；丹蒲組合物組丹蒲組合物片劑(丹參提取物+蒲黃提取物二20mg+120mg)，高、中、低三個不同劑量組，自制(制備方法參見實施例3)。實驗方法小鼠按表6的給藥劑量灌胃給藥，對照組灌胃給予同體積的生理鹽水，然后用烏拉坦lg/kg腹腔注射麻醉。麻醉后的小鼠置于鋪有棉花的托板上，保持室溫20土2'C。將小鼠右耳置于耳托架上，在右耳上滴少許液體石蠟，將托板置顯微鏡載物臺上，調節(jié)冷光源，使照明光線與耳廓平面成45。60°夾角，并與毛的生長方向相平行。先在低倍鏡下觀察耳廓全貌，選擇適當部位，換用高倍鏡進行定點連續(xù)觀察。觀察給藥后20min的微循環(huán)狀態(tài)，測量微動脈、微靜脈的直徑和血流速度。實驗結果及結論實驗結果見表6。與對照組相比較，丹參提取物組和蒲黃提取物組均可使小鼠耳微動脈、微靜脈管徑明顯增大(p<0.05)，血流速度明顯加快(pO.05);丹蒲組合物各劑量組均可使小鼠耳微動脈、微靜脈管徑極顯著增大(p<0.01)，血流速度極顯著加快(pO.Ol)。與丹參提取物組和蒲黃提取物組相比，丹蒲組合物各劑量組可使小鼠耳微動脈、微靜脈管徑明顯增大，血流速度明顯加快，且存在顯著性差異(p<0.05，p<0.05)。由上述結果可以看出，丹蒲組合物的作用均優(yōu)于丹參提取物和蒲黃提取物單獨給藥的效果，提示丹參提取物和蒲黃提取物合并用藥有協(xié)同增效作用，且作用效果與給藥劑量有關，高劑量時效果最好。表6丹蒲組合物對小鼠耳廓微循環(huán)的影響(S±s，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>注'p<0.05，"p<0.01，與對照組相比；&p<0.05，與丹參提取物組相比;取物組相比。實驗例7丹蒲組合物對結扎大鼠冠狀動脈所致心肌缺血的影響受試動物大鼠，60只，體重200220g，雌雄兼用，隨機分為6組，每組10只。供試品心肌缺血對照組生理鹽水，市購；丹參提取物組丹參提取物注射液，自制蒲黃提取物組蒲黃提取物注射液，自制；丹蒲組合物組丹蒲組合物注射液(丹參提取物+蒲黃提取物-20mg+120mg)，高、中、低三個不同劑量組，自制(制備方法參見實施例8)。實驗方法大鼠用烏拉坦lg/kg腹腔注射麻醉，背位固定，記錄心電，接人工呼吸機進行人工呼吸，打開胸腔，剪開心包，各組動物按各自藥物靜脈注射給藥(劑量單位mg/kg)，3min后結扎左側冠狀動脈前降枝，全程記錄心電30min，結扎后lh取血，檢測磷酸肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)。取出大鼠心臟，沿結扎線將心室肌均勻橫切4片，0.5%氯化硝基四氮唑蘭染色，用求積儀測每片心肌兩面的缺血面積，計算心肌缺血面積占心室面積的百分比。表7丹蒲組合物對結扎大鼠冠狀動脈所致心肌缺血的影響(》±S，n=10)組別給藥劑量CK(u/L)LDH(u/L)心肌缺血百分比心肌缺血對照組34021.54±997.222225.24±564.4245綠3.87丹參提取物組803054.34±796.57'1779.45±562.28*25.14士4.57'蒲黃提取物組803110.47士787.98'1854.47士757.12'28.25±4.14*丹蒲組合物高劑量組802757.35±697.47**&$1371.21±479.57"&$16.17±5.25"&$丹蒲組合物中劑量組452875.14±728.54"&$1451.94±608.57"&$18.62±3.98"&$丹蒲組合物低劑量組202912.78±701.42"&$1487.45±647.52"&s20.18±5.08"&$注'p<0.05，"p<0.01，與心肌缺血對照組相比較；&p<0.05，與丹參提取物組相比較；$p<0.05，與蒲黃提取物組相比較。實驗結果及結論實驗結果見表7。結扎后，心肌缺血對照組大鼠心電的QRS波均突然異常增高、加寬，心肌大范圍缺血，生化檢測表現(xiàn)為CK和LDH均異常增高。與心肌缺血對照組相比較，丹蒲組合物注射液各劑量組均能極顯著減小因結扎冠狀動脈所致的心電和生化指標的異常改變(pO.Ol)，極顯著減小心肌缺血范圍(p<0.01);丹參提取物組和蒲黃提取物組均能顯著減小因結扎冠狀動脈所致的心電和生化指標的異常改變(p<0.05)，顯著減小心肌缺血范圍(p<0.05)。與單用丹參提取物組或蒲黃提取物組相比較，丹蒲組合物組顯著減小因結扎冠狀動脈所致的心電和生化指標的異常改變(p0.05)，顯著減小心肌缺血范圍(p<0.05)，提示丹參提取物與蒲黃提取物具有協(xié)同增效作用，在治療缺血性心血管疾病方面將有顯著的療效。[具體實施方式以下通過實施例來進一步闡述本發(fā)明藥物組合物的制備方法。以下的實施例可以使本專業(yè)技術人員更全面的理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。實施例所用的丹參提取物來自于實施例l,蒲黃提取物來自于實施例2。實施例l丹參提取物提取工藝及制備丹參提取物的制備取丹參藥材，粉碎成粗粉，加水煎煮兩次，第一次加水12倍量，第一次加水10倍量，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度1.101.15(6(TC)的濃縮液，加乙醇至含醇量至85%，冷藏24小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加鹽酸調PH值至2，用醋酸乙酯振搖提取3次，合并醋酸乙酯液，蒸干。殘渣加pH值2的酸水溶解，加于已處理好的聚酰胺柱上，先用2倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用4倍柱體積的95%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，并真空干燥，得丹參提取物。分別制備三批丹參黃提取物，得率見表7。丹參提取物的含量測定總酚酸含量測定對照品溶液的制備精密稱取于105'C干燥至恒重的原兒茶醛對照品lmg，加水溶解，定容至100ml。供試品溶液的制備:精密稱取樣品50mg，置50ml容量瓶中，加水稀釋至刻度精密量取0.1ml置25ml容量瓶中加乙醇5ml，加入0.3Q/。十二烷基硫酸鈉2ml，0.6°/。鐵氰化鉀-0.9%三氧化鐵(臨用前等量混合)lml,如此暗處放置5min，加入0.1mol/L鹽酸溶液至刻度，搖勻，暗處放置20min后，置lena比色池中，720nm處測定。丹酚酸B的含量測定高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性實驗以十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-甲酸-水(30:10:1:59)為流動相；檢測波長為286nm。理論塔板數(shù)按丹參素峰計算應不低于1500。對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量，加75y。甲醇制成每lml含0.14mg的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品約0,2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75W甲醇50ml，稱定重量，加熱回流lh，取出，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20^d，注入液相色譜儀，測定，即得。對上述制備的三批丹參提取物分別進行含量測定，測定結果見表8。表8丹參提取物的含量測定結果和得率<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>實施例2蒲黃提取物提取工藝及制備蒲黃提取物的制備取蒲黃藥材，加70%乙醇提取三次，每次提取3小時。第一、二次加醇14倍量，第三次加醇10倍量。合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至相對密度為1.041.06(50°C)的濃縮液，加等量水稀釋，混勻，4'C冷藏24小時，離心，取上清液，用等量石油醚振搖提取2次，棄去石油醚液，水液用等量水飽和正丁醇振搖提取3次，合并正丁醇提取液，濃縮至干，殘渣加少量水使溶解，上AB-8大孔樹脂柱，分別用水、35%乙醇、70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，回收乙醇，減壓干燥，即得蒲黃提取物。分別制備三批蒲黃提取物，得率見表8。蒲黃提取物的含量測定黃酮類化合物含量測定色譜條件及系統(tǒng)適應性以十八垸基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.4%磷酸液(50:50)為流動相；檢測波長為360nm;以異鼠李素、山奈酚、槲皮素計算柱效，理論塔板數(shù)在30004000。對照品溶液的制備分別精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥過夜的槲皮素、山柰酚、異鼠李素對照品適量，各加甲醇制成每lml含0.04mg、0.02mg、O.lmg的溶液，作為對照品溶液。再逐級稀釋分別配成一系列對照品溶液，即得。供試品溶液的制備取蒲黃粉末1.0g，精密稱定，置250ml三角燒瓶中，加甲醇100ml超聲提取40min，放冷過濾，取濾液，提取液蒸干，殘渣加甲醇225%鹽酸(4:1)混合液25ml，回流45min，放冷，轉移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，取適量離心，即得。測定法分別精密吸取上述對照品溶液和供試品溶液各20nl，注入5^1定量管的液相色譜儀進樣器，測定，即得。對上述制備的三批蒲黃提取物分別進行含量測定，測定結果見表9。表9蒲黃提取物的含量測定結果和得率<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>實施例3丹蒲組合物片劑的制備處方一:處方二:丹參提取物17g相當于原藥材lkg蒲黃提取物32g相當于原藥材lkg預膠化淀粉觸g微晶纖維素30g低取代羥丙纖維素30g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂4g羧甲淀粉鈉8g共制備畫片丹參提取物17g相當于原藥材lkg蒲黃提取物63g相當于原藥材2kg預膠化淀粉110g微晶纖維素35g低取代羥丙纖維素35g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂5g羧甲淀粉鈉10g共制備麵片丹參提取物20g蒲黃提取物120g預膠化淀粉120g微晶纖維素40g低取代羥丙纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂6g羧甲淀粉鈉12g共制備薩片處方四:丹參提取物17g相當于原藥材lkg蒲黃提取物158g相當于原藥材5kg預膠化淀粉130g微晶纖維素50g低取代羥丙纖維素50g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂9g羧甲淀粉鈉15g共制備1000片丹參提取物17g相當于原藥材lkg蒲黃提取物315g相當于原藥材10kg預膠化淀粉150g微晶纖維素60g低取代羥丙纖維素60g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂12g羧甲淀粉鈉18g共制備1000片制備工藝原料中的丹參和蒲黃參照實施例1、2中的制備方法制成提取物。(1)將丹參提取物和蒲黃提取物粉碎過100目篩備用。(2)按照處方量稱取原料和輔料。(3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2%的水溶液備用。(4)將丹參提取物、蒲黃提取物、預膠化淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙纖維素混合均勻，加入2MHPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。(5)過20目篩制顆粒。(6)顆粒在60'C的條件下烘干。(7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂和羧甲淀粉鈉，過18目篩整粒，混合均勻。(8)取樣，半成品化驗。(9)按照化驗確定的片重壓片。(10)成品全檢，包裝入庫。實施例4丹蒲組合物膠囊劑的制備處方一丹參提取物9g相當于原藥材0.5kg蒲黃提取物63g相當于原藥材2kg預膠化淀粉115g微晶纖維素45g低取代羥丙纖維素25g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂_^_共制備1000粒處方二丹參提取物9g相當于原藥材0.5kg蒲黃提取物95g相當于原藥材3kg預膠化淀粉120g微晶纖維素50g低取代羥丙纖維素30g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂_^_共制備1000粒處方三-丹參提取物9g相當于原藥材0.5kg蒲黃提取物158g相當于原藥材5kg預膠化淀粉130g微晶纖維素60g低取代羥丙纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂__共制備1000粒處方四丹參提取物35g相當于原藥材2kg蒲黃提取物63g相當于原藥材2kg預膠化淀粉120g微晶纖維素50g低取代羥丙纖維素30g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂__共制備1000粒200610069277.5說明書第21/26頁處方五丹參提取物20g蒲黃提取物120g預膠化淀粉130g微晶纖維素60g低取代羥丙纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂_§|_共制備畫粒處方六丹參提取物35g相當于原藥材2kg蒲黃提取物158g相當于原藥材5kg預膠化淀粉140g微晶纖維素70g低取代羥丙纖維素50g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂__共制備1000粒制備工藝原料中的丹參和蒲黃參照實施例1、2中的制備方法制成提取物。(1)將丹參提取物和和蒲黃提取物粉碎過100目篩備用。(2)按照處方量稱取原料和輔料。(3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2%的水溶液備用。(4)將丹參提取物、蒲黃提取物、預膠化淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙纖維素混合均勻，加入2y。HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。(5)過20目篩制顆粒。(6)顆粒在60'C的條件下烘干。(7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂，過18目篩整粒，混合均勻。(8)取樣，半成品化驗。(9)按照化驗確定的裝量裝入膠囊。(10)成品全檢，包裝入庫。實施例5本發(fā)明藥物組合物軟膠囊的制備處方一丹參提取物17g相當于原藥材lkg蒲黃提取物95g相當于原藥材3kg大豆油500g大豆磷脂30g蜂蠟15g共制備聽粒丹參提取物20g蒲黃提取物95g大豆油夠大豆磷脂30g蜂蠟15g共制備1000粒制備工藝-原料中的丹參和蒲黃參照實施例1、2中的制備方法制成提取物'(1)處方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蠟加熱熔融，混勻，放冷;(2)加入丹參提取物和蒲黃提取物，混勻，過膠體磨；(3)取樣，半成品化驗；(4)壓制成軟膠囊；(5)成品全檢，包裝入庫。實施例6丹蒲組合物顆粒劑的制備處方一丹參提取物蒲黃提取物糖粉甜菊素檸檬香精20/oHPMC50。/。乙醇溶液9g相當于原藥材0.5kg32g相當于原藥材lkg1000g10g共制備處方二:丹參提取物蒲黃提取物糖粉甜菊素檸檬香精2yoHPMC50Q/。乙醇溶液1000包9g相當于原藥材0.5kg315g相當于原藥材10kg3000g30g畫包處方三丹參提取物35g相當于原藥材2kg蒲黃提取物32g相當于原藥材lkg糖粉1900g甜菊素14g檸檬香精適量2。/oHPMC50。/。乙醇溶液適量_共制備1000包處方四丹參提取物35g相當于原藥材2kg蒲黃提取物315g相當于原藥材10kg糖粉3500g甜菊素35g檸檬香精適量2。/oHPMC50。/。乙醇溶液適量_共制備1000包處方五丹參提取物6g相當于原藥材0.2kg蒲黃提取物63g相當于原藥材2kg糖粉1600g甜菊素12g檸檬香精適量20/oHPMC50n/。乙醇溶液適量_共制備1000包處方六丹參提取物6g相當于原藥材0.2kg蒲黃提取物95g相當于原藥材3kg糖粉2000g甜菊素15g檸檬香精適量20/oHPMC50。/。乙醇溶液適量_共制備1000包處方七丹參提取物20g蒲黃提取物120g糖粉2500g甜菊素20g檸檬香精適量2。/oHPMC50。/。乙醇溶液適量_共制備1000包處方八:丹參提取物蒲黃提取物糖粉2800g25g適量適量70g相當于原藥材4kg95g相當于原藥材3kg甜菊素檸檬香精2%HPMC50%乙醇溶液共制備1000包制備工藝原料中的丹參和蒲黃參照實施例1、2中的制備方法制成提取物。(1)將蔗糖粉碎過80目篩備用；將丹參提取物和蒲黃提取物粉碎過100目篩備用。(2)按照處方量稱取原料和輔料。(3)將丹參提取物、蒲黃提取物與糖粉、甜菊素以等量遞加的方法混合均勻，加入2。/oHPMC50M乙醇溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材，(4)過20目篩制顆粒。(5)顆粒在60'C的條件下烘干。(6)干顆粒過18目篩整粒，噴入適量檸檬香精。(7)取樣，半成品化驗顆粒中主藥的含量，確定裝量。(8)包裝，成品全檢，包裝入庫。實施例7丹蒲組合物口服液的制備處方一丹參提取物15g蒲黃提取物60g丙二醇1000ml苯甲酸鈉15g甜菊甙10g純化^C_加至10000ml_共制備畫支丹參提取物蒲黃提取物15g120g丙二醇苯甲酸鈉甜菊甙純化水20g15g加至10000ml共制備1000支處方三:丹參提取物20g蒲黃提取物60g丙二醇1000ml苯甲酸鈉15g甜菊甙10g純化水加至10000ml共制備1000支丹參提取物20g蒲黃提取物120g丙二醇1000ml苯甲酸鈉25g甜菊甙20g純化水加至10000ml共制備1000支制備工藝(1)將丹參提取物和蒲黃提取物加入配液量50%的純化水中加熱攪拌溶解完全；再加入丙二醇攪拌溶解完全。(2)將苯甲酸鈉和甜菊甙用配液量20%的水溶解完全。(3)合并上述溶液，補加純化水至全量。(4)過0.8pm的微孔濾膜過濾。(5)半成品化驗。(6)灌裝。成品全檢，包裝入庫。實施例8丹蒲組合物注射液的制備處方一丹參提取物15g蒲黃提取物60g聚山梨酯10g注射用水2000ml共制備1000支丹參提取物15g蒲黃提取物120g聚山梨酯20g注射用水2000ml共制備1000支處方三丹參提取物20g蒲黃提取物60g聚山梨酯10g注射用^C_2000ml_共制備畫支處方四物20g物120g20g_2000ml_共制備畫支制備工藝-(1)將生產(chǎn)用安瓿配液用容器具、儀器設備等進行清理、除菌、除熱原；(2)按處方稱取原料和輔料；(3)取聚山梨酯加配液量80%的注射用水，攪拌溶解；加入配液量0.05%的針用活性炭，攪拌15min，過濾，脫炭；(4)向溶液中加入丹參提取物和蒲黃提取物，攪拌溶解；(5)測溶液的pH值，必要時調pH值；(6)補加注射用水至全量，定容；(7)藥液經(jīng)過0.22pm的微孔濾膜精濾，檢査澄明度；(8)半成品檢驗；(9)將藥液裝于安瓿中；(10)IO(TC流通蒸汽滅菌30min;(11)檢漏，燈檢；(12)成品全檢，包裝入庫。取取酯水提提梨用參黃山射丹蒲聚注權利要求1、一種用于心腦血管疾病的藥物組合物，其特征在于，制成它所含藥效組分的原料藥的組成為丹參和蒲黃，其重量份數(shù)為丹參200～4000份，蒲黃1000～10000份。2、根據(jù)權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，丹參和蒲黃的重量份數(shù)為丹參5002000份，蒲黃20005000份。3、根據(jù)權利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，丹參和蒲黃的重量份數(shù)為丹參1000份，蒲黃3000份。4、根據(jù)權利要求13所述的任一藥物組合物的制備方法，其特征在于，所述的丹參和蒲黃可以用適宜的溶劑分別或混合經(jīng)過提取加工得到其提取物，總提取物再和藥用輔料混合加工制成制劑，所得總提取物的主要有效成分為酚酸類和黃酮類化合物。5、根據(jù)權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物還可以由丹參提取物和蒲黃提取物制成，其重量份數(shù)為丹參提取物140份，蒲黃提取物15400份。6、根據(jù)權利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，其重量份數(shù)為丹參提取物530份，蒲黃提取物30250份。7、根據(jù)權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，其重量份數(shù)為丹參提取物1520份，蒲黃提取物60120份。8、根據(jù)權利要求57所述的任一藥物組合物，其特征在于，所述的丹參提取物的主要成分為丹參總酚酸，含量不低于70%，其中丹酚酸B的含量不低于30W;蒲黃提取物的主要成分為黃酮類化合物，含量不低于30%。9、根據(jù)權利要求13、57所述的任一藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物可以與任一藥學上可接受的輔料結合制成任何一種臨床上或藥學上可接受的劑型。10、根據(jù)權利要求9所述的藥物組合物，其特征在于，所述的臨床上或藥學上可接受的劑型為口服制劑或注射劑。全文摘要本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術領域：
，公開了一種用于心腦血管疾病的藥物組合物，其制備方法及含有該藥物組合物的制劑，制成它所含藥效組分的原料藥的組成為丹參或丹參提取物和蒲黃或蒲黃提取物。該藥物組合物可制成臨床或藥學上可接受的劑型，優(yōu)選口服制劑或注射劑。主要用于制備治療冠心病、心絞痛、心肌梗塞、瘀血型肺心病、缺血性腦病、腦血栓、高血壓、高血脂等心腦血管疾病的藥物。該發(fā)明藥物組合物具有協(xié)同增效作用，比單用丹參或丹參提取物和蒲黃或蒲黃提取物的效果大大提高，且低毒，安全性高，穩(wěn)定性好。文檔編號A61K36/88GK101161268SQ20061006927公開日2008年4月16日申請日期2006年10月12日優(yōu)先權日2006年10月12日發(fā)明者黃振華申請人:黃振華