專利名稱：一種復(fù)合基質(zhì)的多功能動脈栓塞劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及復(fù)合基質(zhì)的多功能動脈栓塞劑的制備方法，具體地說是通 過化療藥物鹽酸阿霉素在油性顯影劑中乳化，形成乳液作為分散相，經(jīng)復(fù) 乳_內(nèi)部凝膠化法制備含有化療藥物和放射顯影劑的海藻酸鈣微球。這種
復(fù)合基質(zhì)的微球具有三種功能1.可以阻斷患處的動脈血供；2.化療藥物 在極端接近腫瘤組織的環(huán)境下持續(xù)釋放;3.放射自顯影功能。由于釆用了資 源豐富的天然多糖作為主要的基質(zhì)，提高其生物相容性，降低了制劑的成 本。這種多功能栓塞劑可用于腫瘤局部治療、術(shù)前輔助治療和非手術(shù)適應(yīng) 癥的姑息治療，可以有效降低手術(shù)風(fēng)險，提高治療效果。
背景技術(shù)：
目前，治療腫瘤的手段主要有手術(shù)治療、放射治療和化學(xué)藥物治療， 其中化學(xué)治療是最為常見和重要的方法。在化學(xué)藥物治療腫瘤的過程中， 理想的治療應(yīng)該是血藥濃度長期在最低治療水平和中毒水平之間的狹窄范 圍內(nèi)保持相對恒定。釆用局部介入緩釋技術(shù)來保證腫瘤部位有較高的藥物 濃度和較長的維持時間，是局部化療較新的研究方向。由于局部給藥全身 性毒副作用低，為很多由于全身毒副作用大無法在臨床大量應(yīng)用的傳統(tǒng)抗 腫瘤藥物開辟新用途。
隨著醫(yī)療儀器設(shè)備和臨床技術(shù)的不斷發(fā)展進步,經(jīng)導(dǎo)管動脈栓塞術(shù) (TCAE)日益完善。臨床上成功的應(yīng)用TCAE技術(shù)必須具備的基本要素響 理想的栓塞劑；嚴(yán)格的適應(yīng)癥；熟練的導(dǎo)管操作技術(shù)。但到目前為止,臨床 應(yīng)用中尚無十分理想的栓塞劑。微球以其基質(zhì)材料種類多、對特定組織器 官的靶向性高、栓塞效果好、可與化療藥及磁流體和放射性核素結(jié)合以及 可緩釋藥物等優(yōu)點，而受到越來越多的重視[Nakakuma K, Tashiro S, Hiraoka T，et al. J. Cancer, 1983,52 ( 12) :2193-2200]。臨床使用國產(chǎn)栓塞劑主要為明 膠顆粒，其多為手工自制的，粒徑不易控制。當(dāng)粒徑過小，可能經(jīng)動靜脈吻 合支直接進入靜脈系統(tǒng),而發(fā)生嚴(yán)重的系統(tǒng)性栓塞;而粒徑過大，栓塞效果不 理想。進口栓塞劑以聚乙烯醇微球為主，其特點為非水溶性,遇水性液體可 膨脹，體積將增加20 % ，生物相容性好,在體內(nèi)不被吸收。其粒徑在150 ~ 1500 Mm，可以機械性阻塞并誘發(fā)血栓形成，閉塞血管，但是價格昂貴[李維新， 封興華，馬威，等.實用口腔醫(yī)學(xué)雜志，2000, 16 (6): 469-473〗。此外， 在使用栓塞制劑進行栓塞的過程中需與造影劑混用來示蹤，以判斷栓塞效 果。注入目標(biāo)血管后，栓塞效果僅能憑借近心端的血管造影來觀察。而對于 栓塞結(jié)果的具體參數(shù)，如:被栓塞劑填塞血管段的長度，栓塞的是否致密，栓塞 血管的走行以及是否誤栓等,則無法做出準(zhǔn)確判斷[楊繼金，林琳，田建明, 等.介入放射學(xué)雜志，2003， 12 (2): 88-91 ;王建華，周康榮.現(xiàn)代實用醫(yī)學(xué)，
2003， 15( 1 ): 62- 65; Alexander Schwarz， Hongmin Zhang, Annick Metcalfe, et al. J.Biomaterials，2003，25 ( 21 ): 5209 — 5215]。
為更好地抑制腫瘤生長，殺滅腫瘤細胞，適應(yīng)長期栓塞，定期復(fù)查栓 塞效果的需要，在血管內(nèi)治療領(lǐng)域迫切需要一種廉價易得，質(zhì)量可控的同 時具有多種功能的栓塞劑制備方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對目前臨床上使用的微球栓塞劑價格昂貴，操作繁瑣，功能 單一，質(zhì)量不可控的不足，提供一種多功能微球栓塞劑的制備方法。通過 復(fù)乳-凝膠化法制備復(fù)合基質(zhì)的微球，實現(xiàn)降低制劑制作成本，集栓塞、 控釋、診斷示蹤效果于一體的多功能栓塞劑的制備方法。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明釆用的技術(shù)方案為
一種復(fù)合基質(zhì)的多功能動脈栓塞劑的制備方法，將鹽酸阿霉素溶液分 散在油性造影劑中，在表面活性劑的作用下，形成微乳和亞微乳，作為初 乳相E1;將初乳相均勻滴加至含有表面活性劑和碳酸鉤或嫌酸鉤微粉的海 藻酸鈉溶液的W相中，形成次級乳液E2;再將次級乳E2滴加至液體石蠟 中，形成終級乳液E3,在持續(xù)攪拌的條件下加入有機酸，完成交聯(lián)和成球 反應(yīng)，經(jīng)沉淀，除去上層液體，得到球形度良好、同時含有化療藥物和放 射顯影劑的微球栓塞劑。
具體操作過程如下
(1 )先將濃度為0.5 20g/L鹽酸阿霉素溶液作為分散相分散在連續(xù)相 油性造影劑砩化油中，在表面活性劑的條件下形成微乳或亞微乳，作為初 乳E,;其中碘化油中含有表面活性劑的體積為10~50%，微乳或亞微乳分 散相和連續(xù)相體積比可為1: 10~1:1;
初乳的制備反應(yīng)在20-3(TC恒溫條件下進行，機械攪拌轉(zhuǎn)速可為1500 ~ 28000rpm;
2) 配制海藻酸鈉溶液W，海藻酸鈉的重量體積濃度可為0:3 5%，其 中含有適量濃度的不溶性鈣鹽碳酸鉤；所用碳酸鉤或磷酸鈣微粉顆粒平均 粒徑可為100nm 100pm;碳酸鈣的重量體積濃度為0.3 5%;
3) 將E,作為分散相，分散在作為連續(xù)相的W中，形成次級乳液E2; E,和W體積比可為1: 5~1: 1;
次級乳液E2的制備在2-15°C恒溫條件下進行，機械攪拌速度可為200 ~ lOOOrpm;
4 )將次級乳液E2在機械攪拌的條件下分散在液體石蠟中，二者的體積 比可為1: 20~1: 1，形成終級乳液E3;
終級乳液的制備在20-30。C條件下進行，機械攪拌速度可為50 ~ 500rpm; 5-15分鐘后向體系中加入有機酸，有機酸的用量對應(yīng)于石蠟體積 比為0.6 10%,持續(xù)反應(yīng)2-5分鐘后靜置40-50分鐘后制得的微球沉淀，除 去上層的液體，得產(chǎn)物微球。
5 )收集的產(chǎn)物微球可以用含有體積濃度0.3-0.5%Tween80和重量濃度
0.5-2%甸離子的溶液清洗3~4次，最后用無菌注射用水清洗2~3次，保 存在密封容器中；
6)釆用美國Beckman-Coulter公司LS-100 Q型激光粒度儀測定高分子 微球的粒徑及粒徑分布； '
釆用德國Leica公司TCS SP2型激光掃描共聚焦顯微鏡考察微球的形 態(tài)和鹽酸阿霉素分布。
所述有機酸可為甲酸、乙酸、丙酸、草酸和/或丁酸；表面活性劑可為 span80、 span85或span60。所釆用的海藻酸鈉粘度為60 ~ 330cp，所采用的 各種液體配制后經(jīng)過濾除菌，整個操作過程在無菌環(huán)境下進行。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點
1、 本發(fā)明通過復(fù)乳-內(nèi)部凝膠化法制備復(fù)合基質(zhì)的多功能栓塞劑，可 以調(diào)整制備參數(shù)(機械攪拌力等)控制微球粒徑的分布，得到的栓塞劑能 夠滿足不同阻斷要求，同時具有診斷和治療功能。
2、 本發(fā)明釆用含量豐富的天然多糖為主要基質(zhì)，降低了制劑的成本。 總之，本發(fā)明通過同時控制反應(yīng)材料，實現(xiàn)將水溶性化療藥物和放射
顯影劑在一定表面活性劑的作用下，形成較為穩(wěn)定微乳和亞微乳，作為分 散相；再通過內(nèi)部凝膠化法將海藻酸鈉進行離子交聯(lián)，將微乳或亞微乳分 布在海藻酸鈣膠珠內(nèi)。本方法可以通過調(diào)整制備參數(shù)(機械攪拌力等)控 制微球粒徑的分布，得到不同規(guī)格的、具有診斷和治療功能的動脈栓塞微 球制劑。


圖1為本發(fā)明乳化裝置示意圖之一； 圖2為本發(fā)明乳化裝置示意圖之二；
圖3為本發(fā)明乳化裝置示意圖之三；其中1為碘化油，2為鹽酸阿霉 素溶液，3為初乳液，4為乳滴，5為水相，6為石蠟，7為復(fù)合乳滴，8 為有機酸，9為復(fù)合微球；
圖4為激光粒度儀測定的不同制備條件下幾種多功能微球粒徑分布圖； 圖5為本復(fù)合基質(zhì)多功能栓塞微球的激光掃描共聚焦顯微鏡照片；紅 色為分散在油性顯影劑中的鹽酸阿霉素自發(fā)熒光，外周是海藻酸^固化層； 圖6為空白對照X光投射機觀察顯影效果圖； 圖7為用過多功能栓塞劑的X光投射機觀察顯影效果圖。
具體實施例方式
如圖1所示，將鹽酸阿霉素溶液和分散在注射用砩化油中(其中含有 表面活性劑)形成初級乳液；如圖2所示，在機械攪拌力的作用下，初級 乳液分散到由海藻酸鈉溶液和碳酸鉤微粉組成的水相中形成次級乳液；如 圖3所示，液體石蠟作為連續(xù)相對次級乳液分散，加入有機酸進行離子交 聯(lián)，待反應(yīng)完全后收集復(fù)合基質(zhì)的微球。
實施例1
1、配制濃度為1.0g/L的鹽酸阿霉素溶液5ml，滴加至含有適量表面活
性劑span80的10ml精制磷化油中，保持25。C恒溫，機械轉(zhuǎn)速保持在 3000rpm,如圖1所示，攪拌3分鐘，制得初級乳液；其中鵬化汕中含有表 面活性劑的體積為45%;
2、 將平均粒徑為10|im的碳酸鈣微粉0.3g滴加至20ml濃度為20.0g/L 的海藻酸鈉溶液中，保持1(TC恒溫條件，械攪轉(zhuǎn)速保持在600rpm,攪拌20 分鐘后，保持轉(zhuǎn)速的條件下將1中制得的初級乳液滴加至其中，如圖2所 示，繼續(xù)攪拌15分鐘，制得次級乳液。
3、 將2中制得的次級乳液在機械攪拌的條件下分散在50ml液體石蠟 中，如圖3所示，25'C恒溫，機械攪拌轉(zhuǎn)速保持在200rpm條件下反應(yīng)5 分鐘后，將10ml體積比為20%石蠟冰醋酸溶液滴加至體系中，持續(xù)攪拌5 分鐘后停止攪拌，靜置1小時，待制得的微球沉淀，除去上層的液體。
4、 收集制備的微球，用適量的含有0.5。/。Tween80和1%鈣離子(其中 采用的為氯化鈣)的溶液清洗3 4次，最后用無菌注射用水清洗2 3次， 保存在密封容器中；
5、 采用美國Beckman-Coulter公司LS-100 Q型激光粒度儀測定高分子 微球的粒徑及粒徑分布(圖4)。
6、 采用德國Leica公司TCS SP2型激光掃描共聚焦顯微鏡考察微球的 形態(tài)和鹽酸阿霉素分布(圖5 )。
實施例2
與實施例1不同之處在于，步驟1中鹽酸阿霉素濃度為0.5g/L,鵬化汕 中SPAN80體積含量為35X，分散相與連續(xù)相體積比為1: 1;步驟3中機 械攪拌轉(zhuǎn)速分別為100rpm、 300rpm、 400 rpm;其它均與實施例1相同；
釆用美國Beckman-Coulter公司LS-100 Q型激光粒度儀測定高分子微 球的粒徑及粒徑分布(圖4)。
實施例3
其制備過程與實施例l相同。 ' 通過經(jīng)皮動脈栓塞術(shù)(TAE),按照1 ml/kg體重的比例，將制備好的 復(fù)合多功能微植入到實驗動物(日本大耳白兔)頸內(nèi)動脈。西南-IOOX光 投射機觀察顯影效果(圖6、圖7);圖6是沒有加藥的空白對照，箭頭所 示是在氣管(較暗的條狀區(qū))邊上的血管位置，沒有明顯的特征；圖7是 用過多功能栓塞劑的，箭頭所示實在氣管(較暗的條狀區(qū))邊上的血管位 置，有明顯放射顯影特征一一白色。 實施例4
與實施例i不同之處在于，步驟1中鹽酸阿霉素濃度為15.0g/L,碘化 汕中SPAN80體積含量為48X,分散相與連續(xù)相體積比為1: 2.5;其它均 與實施例1相同；
釆用不同PH值的模擬液對復(fù)合多功能微球的體外釋放動力學(xué)進行考 察，結(jié)果表明藥物呈PH依賴性釋放。
權(quán)利要求
1、一種復(fù)合基質(zhì)的多功能動脈栓塞劑的制備方法，其特征在于將鹽酸阿霉素溶液分散在油性造影劑中，在表面活性劑的作用下，形成微乳和亞微乳，作為初乳相E1；將初乳相均勻滴加至含有表面活性劑和碳酸鈣或磷酸鈣微粉的海藻酸鈉溶液的W相中，形成次級乳液E2；再將次級乳E2滴加至液體石蠟中，形成終級乳液E3，在持續(xù)攪拌的條件下加入有機酸，完成交聯(lián)和成球反應(yīng)，經(jīng)沉淀，除去上層液體，得到球形度良好、同時含有化療藥物和放射顯影劑的微球栓塞劑。
2、 按照權(quán)利要求1所述復(fù)合基質(zhì)的多功能動脈栓塞劑的制備方法，其 特征在于具體操作過程如下，(1 )先將濃度為0.5 20g/L鹽酸阿霉素溶液作為分散相分散在連續(xù)相 油性造影劑碘化油中，在表面活性劑的條件下形成微乳或亞微乳，作為初 乳E,;其中碘化油中含有表面活性劑的體積為10~50%，微乳或亞微乳分 散相和連續(xù)相體積比可為1: 10~1:1;初乳的制備反應(yīng)在20-3(TC恒溫條件 下進行，機械攪拌轉(zhuǎn)速可為1500~28000rpm;2) 配制海藻酸鈉溶液W，海藻酸鈉的重量體積濃度可為0.3 5%，其 中含有適量濃度的不溶性鈣鹽碳酸鈣；所用碳酸鈣或磷酸鈣微粉顆粒平均 粒徑可為100nm 100pm;碳酸鈣的重量體積濃度為0.3~5%;3) 將E,作為分散相，分散在作為連續(xù)相的W中，形成次級乳液E2; E,和W體積比可為1: 5~1: 1;次級乳液E2的制備在2-15°C恒溫條件下進行，機械攪拌速度可為200 ~ 1000rpm;4) 將次級乳液E2在機械攪拌的條件下分散在液體石蠟中，二者的體積 比可為1: 20~1: 1，形成終級乳液E3;終級乳液的制備在20-3(TC條件下進行，機械攪拌速度可為50 ~ 500rpm; 5-15分鐘后向體系中加入有機酸，有機酸的用量對應(yīng)子石蠟體積 比為0.6 10%,持續(xù)反應(yīng)2-5分鐘后靜置40-50分鐘后制得的微球沉淀，除 去上層的液體，得產(chǎn)物微球。
3、 按照權(quán)利要求2所述復(fù)合基質(zhì)的多功能動脈栓塞劑的制備方法，其 特征在于所述收集的產(chǎn)物微球可以用含有體積濃度0.3-0.5%Tween80和重 量濃度0.5-2%鈣離子的溶液清洗3~4次，最后用無菌注射用水清洗2~3 次，保存在密封容器中。
4、 按照權(quán)利要求2所述復(fù)合基質(zhì)的多功能動脈栓塞劑的制備方法，其 特征在于所述有機酸為甲酸、乙酸、丙酸、草酸和/或丁酸。
5、 按照權(quán)利要求l所述復(fù)合基質(zhì)的多功能動脈栓塞劑的制備方法，其 特征在于所釆用的海藻酸鈉粘度為60 330cp，所采用的各種液體配制后 經(jīng)過濾除菌，整個操作過程在無菌環(huán)境下進行。
6、 按照權(quán)利要求l所述復(fù)合基質(zhì)的多功能動脈栓塞劑的制備方法，其 特征在于所述表面活性劑為span80、 span85或span60。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種復(fù)合基質(zhì)的多功能動脈栓塞劑的制備方法，將鹽酸阿霉素溶液分散在油性造影劑中，在表面活性劑的作用下，形成微乳和亞微乳，作為初乳相E₁；將初乳相均勻滴加至含有表面活性劑和碳酸鈣或磷酸鈣微粉的海藻酸鈉溶液的W相中，形成次級乳液E₂；再將次級乳E₂滴加至液體石蠟中，形成終級乳液E₃，在持續(xù)攪拌的條件下加入有機酸，完成交聯(lián)和成球反應(yīng)，經(jīng)沉淀，除去上層液體，得到球形度良好、同時含有化療藥物和放射顯影劑的微球栓塞劑。本發(fā)明可以通過調(diào)整制備參數(shù)(機械攪拌力等)控制微球粒徑的分布，得到復(fù)合基質(zhì)的、具有診斷和治療功能的動脈栓塞微球制劑。
文檔編號A61P43/00GK101099725SQ20061004712
公開日2008年1月9日 申請日期2006年7月5日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月5日
發(fā)明者于偉婷, 包德才, 為 王, 衣洪福, 鷹 雄, 馬小軍 申請人:中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所