專利名稱：：一種預(yù)防與治療慢性肝纖維化和肝硬化的中藥制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療肝病的復(fù)方中藥制劑，特別是一種用于預(yù)防和治療非病毒性、免疫性肝損傷以及病毒性肝損傷所致的肝纖維化和肝硬化的復(fù)方中藥制劑，以及該制劑的制備方法。
背景技術(shù)：
：目前全世界肝病患者日益增多，肝病的發(fā)病率占各種傳染病法定報(bào)告的第一位。肝病，特別是肝硬化和肝纖維化的預(yù)防和治療仍是一道全球性難題。迄今為止，西藥對于肝硬化的治療在國內(nèi)外尚缺乏良策，化學(xué)療法對人體有極大的副作用，主要表現(xiàn)在對人體免疫系統(tǒng)的損害，而由此副作用帶來的后果往往是易反彈，病情反復(fù)不見好轉(zhuǎn)，康復(fù)率低。但肝纖維化和肝硬化并非不可逆轉(zhuǎn)[FriedmanSLHepaticfibrosis.[M]InSchiffER，SorrellMF，MddreyWC.Schiff，DiseaseoftheLiver.8thed.PhiladelphiaLippincott-Ra-ven，1999.371-386]。近年來，在中醫(yī)藥的科研與臨床中，發(fā)現(xiàn)中醫(yī)藥對各型肝病的治療顯示出一定優(yōu)勢，取得了較好的效果。[王英凱、王丹、唐彤宇，臨床肝膽病雜志，2002，4(18)253-255.]。本草綱目記載鱉甲能疏肝解郁，軟堅(jiān)散結(jié)，清虛熱，通血脈，滋肝腎之陰而潛納浮陽；絲瓜絡(luò)具有活血化淤，清熱化痰，行血脈之功效。而中醫(yī)認(rèn)為肝炎、肝纖維化和肝硬化是由于肝郁氣滯導(dǎo)致血淤，經(jīng)隧阻塞，血不養(yǎng)肝，氣血瘀滯是本病的主要特點(diǎn)，治療上宜以益氣活血為主。[李道寬，遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2000，2(4)288-289.]。已有實(shí)驗(yàn)證明鱉甲對早期或者晚期肝硬化大鼠均有促進(jìn)肝細(xì)胞恢復(fù)及纖維組織重吸收的作用。[王英凱，王丹，唐彤宇，臨床肝膽病雜志，2002，4(18)253-255.]?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)鱉甲可抑制肝、脾組織的增生，調(diào)節(jié)免疫功能，提高淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率，延長抗體存活時(shí)間，并促進(jìn)骨髓造血，有利于防止癌細(xì)胞的突變和擴(kuò)散，絲瓜絡(luò)具有鎮(zhèn)痛抗炎和抗肝損傷之功效。[肖培根，新編中藥志[M]，第一卷，第一版，北京化學(xué)工業(yè)出版社.2002.215-218.]。中國專利針對“鱉甲與絲瓜絡(luò)”的應(yīng)用公開了“治療痛風(fēng)病的中藥”(專利申請?zhí)?7107394.5)，其公開的處方是炒桑枝、(米泔水泡)蒼術(shù)、(鹽水炒)知母、萆、苦參、木通、防己、絲瓜絡(luò)、赤芍、王不留行、炙乳香、炙沒藥、地骨皮、牡丹皮、路路通、鱉甲、懷牛膝、(鹽水炒)黃柏、茜草根、簽草、羌活、獨(dú)活、甘草；其主要功效是治療痛風(fēng)病，無毒副作用，用藥安全。中國專利同時(shí)公開了“一種治療臟腑疾病的中草藥腎天素”(專利號(hào)為03145571.9)，它由黃柏、莪術(shù)、三棱、大黃、銀柴胡、梔子、胡黃連、青皮、鱉甲、秦艽、黃芩、山豆根、知母、防風(fēng)、地骨皮、貝母、牛膝、大腹皮、生地黃、麥冬、熟地黃、葶藶子、石菖蒲、茯神、款冬花、紫菀、川芎、白芷、薤白、百合、鹿茸、牡蠣、黃芪、甘草、赤芍、白芍、石決明、當(dāng)歸尾、刺疾藜、絲瓜絡(luò)、瓦楞子、守宮、凌霄花、龜版、劉寄奴、澤蘭、旋復(fù)花、木蝴蝶、厚樸、虻蟲、沉香加工制備而成。該中草藥對腎、肝、肺的治療有特殊的療效，無毒副作用。它可直接調(diào)解人體新陳代謝，清熱開竅、豁痰解毒、化濁生肌、消腫止痛，使五臟六腑恢復(fù)正常狀態(tài)。中國專利中尚未見以鱉甲與絲瓜絡(luò)為原料，制成用于預(yù)防和治療非病毒性、免疫性肝損傷以及病毒性肝損傷所致的肝纖維化和肝硬化的復(fù)方中藥制劑。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種具有活血化淤，軟堅(jiān)散結(jié)，調(diào)節(jié)免疫功能的用于預(yù)防和治療非病毒性、免疫性肝損傷以及病毒性肝損傷所致的肝纖維化和肝硬化的復(fù)方鱉甲軟肝制劑。本發(fā)明的另一目的在于提供該復(fù)方中藥制劑的制備方法。本發(fā)明的解決方案是基于祖國醫(yī)學(xué)對肝病發(fā)病機(jī)理的認(rèn)及治療原則，參考現(xiàn)代藥理研究成就，從祖國醫(yī)藥寶庫中，篩選出能疏肝解郁，軟堅(jiān)散結(jié)，清虛熱，通血脈，滋肝腎之陰而潛納浮陽的鱉甲和具有活血化淤，清熱化痰，行血脈之功效的天然食用植物藥絲瓜，按中醫(yī)理論組方，提取精華，使其發(fā)揮抑制肝、脾組織的增生，調(diào)節(jié)免疫功能，提高淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率，延長抗體存活時(shí)間，并促進(jìn)骨髓造血，防止癌細(xì)胞的突變和擴(kuò)散，以及鎮(zhèn)痛抗炎和抗肝損傷的作用。本發(fā)明制劑是由鱉甲和絲瓜絡(luò)按照下列重量配比鱉甲10-60絲瓜絡(luò)3-20。本發(fā)明所述中藥制劑是任何一種藥劑學(xué)上所說的劑型，包括針劑、散劑或塊劑。本發(fā)明所述中藥制劑的制備方法包括下列步驟A、原料制取1、選取和炮制處理鱉甲選取脊椎動(dòng)物鱉科鱉的背甲。稱取鱉甲10-60克，按照《中國藥典》2000版一部附錄規(guī)定的燙法進(jìn)行炮制處理，用沙炒至表面淡黃色，篩濾取出。2、選取和處理絲瓜絡(luò)將絲瓜絡(luò)碾制成粉末，備用；B、醋淬將炮制處理后的鱉甲趁熱用500ml濃度為5％-35％的乙酸溶液醋淬；C、烘干撈出鱉甲，除去殘肉，用清水洗凈，再放入60℃鼓風(fēng)烘箱中烘干待用；D、混合萃取將烘干后的鱉甲與制成粉末的絲瓜絡(luò)一起放入燒瓶中，倒入純凈水150-600ml；將燒瓶放入微波爐中，用微波強(qiáng)度為250-600W萃取；時(shí)間為10-50分鐘；鱉甲和絲瓜絡(luò)與純凈水的重量百分比為20-70∶600。E、蒸餾濃縮將包括藥物的萃取藥液進(jìn)行蒸餾，濃縮提取，制得藥劑。本發(fā)明所述的B醋淬步驟中，所用500ml濃度為5％-35％的乙酸溶液醋淬；時(shí)間為10-60分鐘。本發(fā)明所述的E蒸餾濃縮步驟中，將包括藥物的萃取液進(jìn)行蒸餾濃縮提取所需時(shí)間為30分鐘-2小時(shí)。本發(fā)明所述的A原料制取步驟中，所訴《中國藥典》2000版一部附錄規(guī)定的燙法為；常用的輔料為潔凈的沙子、蛤粉或滑石粉；取沙子、蛤粉或滑石粉置鍋內(nèi)，一般用武火炒熱后，加入凈藥材，不斷翻動(dòng)，燙至泡酥或規(guī)定的程度時(shí)，取出，篩去沙子、蛤粉或滑石粉，放涼；如需醋淬時(shí)，應(yīng)趁熱投入醋中淬酥。本復(fù)方制劑的制備方法還可以按上述數(shù)據(jù)比例同等倍數(shù)適當(dāng)擴(kuò)大或縮小。本方劑中鱉甲為鱉科動(dòng)物鱉的背甲，含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、鈣磷、鐵、維生素(A、B1、B2)、尼克酸、動(dòng)物膠、角蛋白、碘和維生素D等。疏肝解郁，軟堅(jiān)散結(jié)，清虛熱，通血脈，能滋肝腎之陰而潛納浮陽。漢代醫(yī)圣張仲景曾用鱉甲煎丸治療脾臟腫大?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)鱉甲可抑制肝、脾組織的增生，調(diào)節(jié)免疫功能，提高淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率，延長抗體存活時(shí)間，并促進(jìn)骨髓造血，有利于防止癌細(xì)胞的突變和擴(kuò)散。日本東京大學(xué)醫(yī)學(xué)部的研究人員將甲魚冷凍粉碎，制成粉末，投喂給接種了癌細(xì)胞的老鼠。30天后，結(jié)果發(fā)現(xiàn)每天喂給甲魚粉的老鼠體內(nèi)癌腫縮小了近1/3。體外實(shí)驗(yàn)表明，甲魚的上甲殼能抑制人體肝癌、胃癌細(xì)胞的呼吸，用美藍(lán)法試驗(yàn)對肝癌、胃癌、急性淋巴細(xì)胞白血病具有抑制組織增生，提高血漿蛋白含量，增強(qiáng)免疫功能。本方劑中絲瓜絡(luò)為葫蘆科植物絲瓜的干燥成熟果實(shí)的維管束，主要化學(xué)成分為氨基酸、蛋白質(zhì)、動(dòng)物膠、微量元素等。其主要成分為木聚糖、甘露聚糖、半乳聚糖、皂苷元、齊墩果酸、絲石竹皂苷元和絲石竹皂苷元內(nèi)酯等。《本草綱目》記載絲瓜絡(luò)具有活血化淤，清熱化痰，行血脈之功效，民間關(guān)于絲瓜絡(luò)的使用也極為廣泛。本發(fā)明所述的復(fù)方制劑選用藥膳同源的天然物質(zhì)為原料，無需煎煮、無苦澀感、營養(yǎng)豐富；各組分符合藥政法規(guī)定，對人體無毒無害，利用各味中藥的綜合作用治療肝病，尤其對非病毒性、免疫性肝損傷以及病毒性肝損傷所致的肝纖維化和肝硬化具有預(yù)防和治療作用。為表明本發(fā)明藥物制劑對肝病的治療效果，對本發(fā)明做一系列分析及對比實(shí)驗(yàn)分別如下本制劑對非病毒性、免疫性肝損傷以及病毒性肝損傷所致的肝纖維化和肝硬化的預(yù)防和治療作用的驗(yàn)證①對非病毒性、免疫性肝損傷所致的肝纖維化和肝硬化具有預(yù)防和治療作用，可以通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分別在以下多方面得到證實(shí)，具體內(nèi)容及過程如下實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)wistar雄性大鼠，210±10g(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)。藥品與試劑40％四氯化碳菜子油溶液(4℃保存?zhèn)溆?，分析純四氯化碳由天津市化學(xué)試劑一廠生產(chǎn)，菜子油為市售精裝人體食用成品油0.9％醫(yī)用生理鹽水系四川科倫藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)H51021157絲瓜絡(luò)、鱉甲復(fù)方制劑由生化實(shí)驗(yàn)室制備；白蛋白、球蛋白、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶測定試劑盒由北京中生北控生物科技股份有限公司提供；透明質(zhì)酸測定試劑盒由上海森雄科技實(shí)業(yè)有限公司提供，其余試劑均為分析純，水為重蒸水。實(shí)驗(yàn)方法大鼠適應(yīng)5天后，隨機(jī)分為對照組(11只)，模型組(75只)，大劑量組(15只)，小劑量組(15只)；前兩周每2天的上午除對照組外，其余各組按5ml/kg皮下注射40％四氯化碳菜子油溶液，以后每2天的上午注射劑量改為3ml/kg，對照組以等劑量醫(yī)用生理鹽水代替四氯化碳溶液；各組注射同日的下午，對照組和模型組按0.33ml/kg皮下注射生理鹽水，大、小劑量組分別按0.66、0.33ml/kg皮下注射復(fù)方制劑；除對照組飼喂自來水和普通標(biāo)準(zhǔn)飼料外，其余各組飲用10％的乙醇水(體積比)，且前兩周飼喂高脂低蛋白飼料(79.5％玉米面+20％豬油+0.5％的膽固醇)，以后改喂低蛋白飼料(99.5％玉米面+0.5％膽固醇)；在預(yù)防階段中，若大鼠體重比上一次下降10％，則停注四氯化碳溶液一次[5]。兩個(gè)半月后從模型組隨機(jī)抽出14只改喂普通標(biāo)準(zhǔn)飼料和自來水進(jìn)入治療階段外，其余大鼠均停食不停水18小時(shí)后乙醚麻醉，摘除眼球取血，室溫30min后4000r/min離心10min，取血清測定各指標(biāo)；觀察肝臟色澤、形態(tài)，肝、脾稱重并制作肝臟切片，預(yù)防階段結(jié)束。模型組抽出的14只大鼠再隨機(jī)分成兩組進(jìn)入治療階段，每組7只，治療對照組和治療組每2天按0.66ml/kg分別皮下注射生理鹽水和復(fù)方針劑，均飼喂普通標(biāo)準(zhǔn)飼料和自來水，18天后同法處理各組大鼠。驗(yàn)證方法血液生化指標(biāo)測定白蛋白、球蛋白、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶、透明質(zhì)酸酶測定采用試劑盒。肝臟病理取肝臟大葉，12％福爾馬林固定，石蠟包埋，常規(guī)切片，HE染色，光鏡下觀察各組大鼠肝組織病理學(xué)變化。數(shù)據(jù)分析采用STATISTICAL6.0處理數(shù)據(jù)，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±S)表示，組間比較用t檢驗(yàn)，P＜0.05為顯著性差異，P＜0.01為極顯著性差異。驗(yàn)證結(jié)果一、復(fù)方鱉甲軟肝制劑對非病毒性、免疫性肝損傷所致的肝纖維化、肝硬化的預(yù)防作用造模情況預(yù)防階段結(jié)束時(shí)，與對照組相比，模型組大鼠毛色灰暗，行動(dòng)呆板且活動(dòng)明顯減少，反應(yīng)遲鈍，食量、飲水量都明顯減少，大鼠肝、脾臟腫大(表3)，肝臟色澤暗淡，表面可見明顯結(jié)節(jié)及白色顆粒狀小突起，邊緣凹凸不平，其切片在光鏡下大多可見假小葉，肝竇變窄甚至消失，肝索排列紊亂(圖1)。ALT、AST、HA較對照組顯著升高(P＜0.01)，A、G顯著降低(P＜0.01)(表1)，肝硬化造模成功。表1復(fù)方針劑對大鼠肝功生化指標(biāo)的影響(，N＝7)注aP＜0.05，bP＜0.01與模型組相比；cP＜0.05與小劑量組相比。1.血液生化指標(biāo)與對照組比，模型組A、G顯著降低(P＜(0.01)，ALT、AST、HA顯著升高(P＜0.01)，A/G倒置。與模型組相比，大劑量針劑組顯著升高A(P＜0.01)和G(P＜0.05)，顯著降低ALT、AST(P＜0.01)和HA(P＜0.05)。小劑量組顯著降低AST(P＜0.05)外，其余肝功指標(biāo)與模型組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。大、小劑量組相比，大劑量組顯著升高A(P＜0.05)、顯著降低AST(P＜0.05)和ALT(P＜0.05)(表1)。說明該針劑對肝硬化具有一定的保肝和抗肝纖維化作用，大劑量效果好于小劑量。2.肝臟病理肝臟讀片及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)均由四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院病理教研室執(zhí)行，除纖維增生計(jì)為0、1、2、3、4分五個(gè)等級(jí)外，其余指標(biāo)均計(jì)0、1、2、3分四個(gè)等級(jí)，統(tǒng)計(jì)各組不同分值下的大鼠數(shù)量。模型組肝臟切片光鏡下明顯可見假小葉，與模型組相比，大劑量組脂肪變性、纖維增生、肝細(xì)胞壞死、肝竇血管化程度明顯減輕，無一例出現(xiàn)假小葉(圖1)。大劑量組除肝細(xì)胞水腫外，其余各指標(biāo)均顯著輕于模型組。小劑量組僅肝細(xì)胞壞死明顯輕于模型組。兩劑量組間相比，大劑量組脂肪變性、胞漿凝固、纖維增生、炎細(xì)胞浸潤程度明顯輕于小劑量組(表2)。表2大鼠肝臟切片評(píng)分情況(n＝7)<tablesid="tabl0002"num="0002"></tables>注肝細(xì)胞水腫數(shù)目在同一切片三個(gè)不同視野中平均數(shù)量小于10％計(jì)1分，10-15％計(jì)2分，15-20％計(jì)3分；同法可得脂肪變性細(xì)胞數(shù)量平均小于25％計(jì)1分，25-50％計(jì)2分，50-75％計(jì)3分；胞漿凝固細(xì)胞數(shù)量平均小于5％計(jì)1分，5-10％計(jì)2分，10-20％計(jì)3分；肝細(xì)胞壞死細(xì)胞數(shù)量平均小于5％計(jì)1分，5-10％計(jì)2分，10-20％計(jì)3分；纖維增生為可見增生計(jì)1分，明顯可見增生計(jì)2分，視野中未形成全部假小葉的計(jì)3分，整個(gè)視野全部形成假小葉的計(jì)4分。3.肝、脾指數(shù)及死亡率與對照組相比，模型組大鼠肝、脾明顯腫大，肝、脾指數(shù)顯著偏高(P＜0.01)。與模型組相比，大劑量組肝指數(shù)顯著偏低(P＜0.05)。兩劑量組相比，大劑量組的肝指數(shù)顯著低于小劑量組(P＜0.05)。除對照組外其余三組雖然肝、脾均有不同程度的腫大，但是大劑量組肝臟腫大程度明顯輕于模型組和小劑量組(P＜0.05)，脾指數(shù)在三者之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示脾腫大可能未受中藥影響，死亡率在四組之間兩兩比較差異較大(表3)。表3各組大鼠肝、脾指數(shù)及死亡率(，n＝7)<tablesid="table2"num="002"><tablewidth="727">組別肝指數(shù)脾指數(shù)死亡率對照組模型組小劑量組大劑量組3.41±0.26b5.65±0.865.16±0.514.02±0.42ac2.31±0.21b4.47±0.743.97±0.533.61±0.519.1％70.7％46.7％33.3％</table></tables>注aP＜0.05，bP＜0.01與模型組相比；cP＜0.05與小劑量組相比。二、復(fù)方針劑對非病毒性、免疫性肝損傷所致的肝纖維化、肝硬化的治療作用1.血液生化指標(biāo)在治療的第5、11、18天分別檢測了兩組大鼠肝功指標(biāo)。比較表1和表4可以看出，去除病因后，對照組和治療組大鼠A和G較以前有所升高，AST、ALT和HA較以前顯著降低，說明大鼠在去除病因后存在一定的自愈傾向。與同一時(shí)期對照組相比，治療組在第11天G、AST顯著降低(P＜0.05)、HA顯著升高(P＜0.05)，第18天時(shí)治療組顯著降低AST(P＜0.01)和ALT(P＜0.05)，說明此針劑具有一定的治療肝硬化效果，但在治療過程中治療組A、G和HA并非持續(xù)升高或降低，可能由于治療時(shí)間過短，治療效果未能充分穩(wěn)定所致(表4)。表4復(fù)方針劑對肝功生化指標(biāo)的影響(，n＝7)<tablesid="table3"num="003"><tablewidth="753">時(shí)間(天)組別A(g/L)G(g/L)A/GAST(U/L)ALT(U/L)HA(ng/mL)51118對照組治療組對照組治療組對照組治療組33.38±3.7435.85±2.7729.11±2.7931.20±1.3734.71±4.9538.68±2.5039.31±5.3344.01±5.0835.62±3.1128.59±1.49*44.01±5.0835.89±7.070.85±0.60.81±0.090.82±0.081.09±0.10*0.79±0.111.08±0.09*153.36±8.62141.14±8.25152.50±7.43131.61±5.91*148.22±6.50117.41±6.44**59.23±5.5757.78±4.1754.49±7.9349.16±3.3952.55±4.0541.62±5.23*16.47±1.1816.31±3.0221.19±2.2228.89±2.44*24.49±1.9826.41±2.11</table></tables>注*P＜0.05，**P＜0.01與同一時(shí)期對照組相比。2.肝臟病理肝臟讀片及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)仍由四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院病理教研室執(zhí)行，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)與預(yù)防階段2.3.2肝臟病理完全相同。與對照組相比，治療組大鼠肝臟表觀色澤大多好于對照組，表面白色小顆粒較少，光鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，治療組肝細(xì)胞水腫、胞漿凝固、纖維增生和炎細(xì)胞浸潤程度總體輕于對照組，但兩者仍可見假小葉(圖2，表5)。表5大鼠肝臟切片評(píng)分情況(n＝7)3.肝、脾指數(shù)及死亡率治療階段結(jié)束時(shí)，兩組大鼠均無死亡；對照組肝、脾指數(shù)分別為4.16±0.34、3.94±0.48；治療組肝、脾指數(shù)分別為3.98±0.54、3.16±0.21；雖然治療組肝、脾指數(shù)均小于對照組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以上研究結(jié)果表明復(fù)方鱉甲軟肝制劑對非病毒性、免疫性肝損傷所致的肝纖維化和肝硬化具有預(yù)防和治療作用。②對病毒性肝損傷所致的肝纖維化和肝硬化具有預(yù)防和治療作用，可以通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分別在以下多方面得到證實(shí)，具體內(nèi)容及過程如下實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)Balb/c雄性小鼠48只，8周齡，體重20±2g，購于四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。實(shí)驗(yàn)分為預(yù)防和治療兩個(gè)階段。預(yù)防階段，將健康小鼠隨機(jī)分為4組模型組24只，陰性對照組、大劑量組、小劑量組各8只。治療階段，將預(yù)防階段模型組抽樣后剩余的肝纖維化模型小鼠隨機(jī)分為陰性對照組和藥物治療組，每組各8只。藥品與試劑ConA規(guī)格為25mg/支，購自Sigma公司。實(shí)驗(yàn)時(shí)溶于醫(yī)用生理鹽水配成2.5mg/ml的溶液。白蛋白(Alb)、總蛋白(TP)測定試劑盒由北京中生北控生物科技股份有限公司提供；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(AST)由南京建成生物工程研究所提供；透明質(zhì)酸(HA)測定試劑盒，由上海森雄科技實(shí)業(yè)有限公司提供。由特殊工藝加工而成的絲瓜絡(luò)、炙鱉甲復(fù)方針劑。實(shí)驗(yàn)方法預(yù)防階段，陰性對照組小鼠按12.5mg/kg的劑量尾靜脈注射生理鹽水，其余各組等劑量尾靜脈注射ConA溶液。每周1次，持續(xù)9周。同時(shí)，絲瓜絡(luò)，炙鱉甲復(fù)方針劑按大(6.6ml/kg)、小(3.3ml/kg)劑量組皮下注射給藥。陰性對照組和模型組則按6.6ml/kg的劑量皮下注射生理鹽水，每3天1次，持續(xù)9周。9周后抽樣6只模型組小鼠，摘除眼球取血，室溫放置30min后以4000r/min離心10min，取血清測定各指標(biāo)，觀察肝臟外表，切取肝大葉，10％福爾馬林固定，石蠟包埋，常規(guī)切片，HE染色，光鏡下觀察肝組織病理學(xué)變化。確認(rèn)造模成功后，馬上以同樣方法處理陰性對照、大、小劑量各組小鼠。治療階段，陰性對照組小鼠按6.6ml/kg的劑量皮下注射生理鹽水，藥物治療組小鼠按6.6ml/kg的劑量皮下注射瓜絡(luò)，炙鱉甲復(fù)方針劑，持續(xù)31天。在此期間每周每組抽樣6只小鼠做毛細(xì)管穿刺眼眶靜脈叢取血，制備血清，測定各項(xiàng)指標(biāo)，動(dòng)態(tài)觀測小鼠的治療情況。驗(yàn)證方法血液生化指標(biāo)測定白蛋白、球蛋白、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶、透明質(zhì)酸酶測定采用試劑盒。肝臟病理取肝臟大葉，12％福爾馬林固定，石蠟包埋，常規(guī)切片，HE染色，光鏡下觀察各組大鼠肝組織病理學(xué)變化。數(shù)據(jù)分析采用STATISTICAL6.0處理數(shù)據(jù)，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±S)表示，組間比較用t檢驗(yàn)，P＜0.05為顯著性差異，P＜0.01為極顯著性差異。驗(yàn)證結(jié)果一、復(fù)方鱉甲軟肝制劑對病毒性肝損傷所致的肝纖維化、肝硬化的預(yù)防作用造模情況預(yù)防階段進(jìn)行到4周以后，模型組與陰性對組相比明顯出現(xiàn)了食欲不振，體毛凌亂，毛色灰暗，反應(yīng)遲鈍等現(xiàn)象。預(yù)防階段結(jié)束后取出肝臟肉眼觀察也可發(fā)現(xiàn)模型組小鼠肝臟色澤暗淡，邊緣凹凸不平。血清檢測結(jié)果(表1)顯示模型組ALT，AST，HA較陰性對照組皆極顯著偏高(P＜0.01)，G，A/G極顯著降低(P＜0.01)。這說明肝纖維化模型的構(gòu)建是成功的。但是，血清檢測中自蛋白這一項(xiàng)模型組與陰性對照組相比并沒有出現(xiàn)預(yù)期的顯著性差異，估計(jì)是因?yàn)榘椎鞍椎陌胨テ陂L達(dá)19天[11]，雖然模型組小鼠在肝損傷后減少了白蛋白的合成，肝損傷之前合成的白蛋白并沒有及時(shí)的分解掉，造成了檢測結(jié)果中模型組的暫時(shí)性假偏高。值得一提的是，藥劑組的白蛋白合成量與模型組、陰性對照組相比偏高，其中小劑量組產(chǎn)生了顯著性偏高(P＜0.05)。這個(gè)現(xiàn)象說明復(fù)合針劑可以提高肝臟白蛋白的合成能力，可能具有增強(qiáng)機(jī)體免疫的功效。1、血液生化指標(biāo)與模型組相比，小劑量組除能極顯著降低A/G(P＜0.01)之外，還能顯著提高A/G(0.05)和顯著降低ALT、AST(P＜0.05)，但是大部分指標(biāo)都與陰性對照組有顯著性差異(A、ALT、AST，P＜0.05)。而大劑量組則能顯著降低G(P＜0.05)、ALT、AST(P＜0.01)，顯著提高A/G(P＜0.01)，而且各項(xiàng)指標(biāo)都非常接近與陰性對照組(P＞0.05)。與小劑量組相比，大劑量組顯著降低ALT、AST(P＜0.05)(表6)。說明此針劑對肝硬化具有一定的保肝和抗肝纖維化作用，且藥效具有劑量依賴性。表6復(fù)方針劑對小鼠肝功指標(biāo)的影響(±SD，n＝6)t檢驗(yàn)與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01，與陰性對照相比△P＜0.05，△△P＜0.01，大小劑量組相比，▲P＜0.05，▲▲P＜0.012.肝臟病理模型組小鼠肝細(xì)胞嚴(yán)重水腫，大量肝細(xì)胞壞死，脂肪變性，匯管區(qū)內(nèi)炎細(xì)胞浸潤嚴(yán)重，局部區(qū)域出現(xiàn)明顯的纖維增生(圖3)。與模型組相比，大劑量組細(xì)胞壞死，炎細(xì)胞浸潤，纖維增生的情況已經(jīng)基本消失，細(xì)胞水腫，脂肪變性，胞漿凝集的病變程度也得到極大的緩解。小劑量組雖然也在一定程度上減輕了各種病變，但是其效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)比不上大劑量組(表7)。這就說明復(fù)合針劑可以有效的保護(hù)肝細(xì)胞，防止肝細(xì)胞的變性壞死，從而阻斷纖維增生的發(fā)生和發(fā)展。并且，這種效果是有劑量依賴性的。肝臟讀片及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)均由四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院病理教研室執(zhí)行，除纖維增生計(jì)為0、1、2、3、4分五個(gè)等級(jí)外，其余指標(biāo)均計(jì)0、1、2、3分四個(gè)等級(jí)。表7各組小鼠肝臟切片評(píng)分情況注肝細(xì)胞水腫數(shù)目在同一切片三個(gè)不同視野中平均數(shù)量小于10％計(jì)1分，10-15％計(jì)2分，15-20％計(jì)3分；同法可得脂肪變性細(xì)胞數(shù)量平均小于25％計(jì)1分，25-50％計(jì)2分，50-75％計(jì)3分；胞漿凝固細(xì)胞數(shù)量平均小于5％計(jì)1分，5-10％計(jì)2分，10-20％計(jì)3分；肝細(xì)胞壞死細(xì)胞數(shù)量平均小于5％計(jì)1分，5-10％計(jì)2分，10-20％計(jì)3分；纖維增生為可見增生計(jì)1分，明顯可見增生計(jì)2分，視野中未形成全部假小葉的計(jì)3分，整個(gè)視野全部形成假小葉的計(jì)4分。二、復(fù)方針劑對病毒性肝損傷所致的肝纖維化、肝硬化的治療作用1.血液生化指標(biāo)在治療的一個(gè)月內(nèi)對兩組小鼠作了4次血樣抽查。結(jié)果顯示，去除病因后，陰性對照組的ALT、HA的發(fā)展趨勢是降低的，是良性發(fā)展的。這說明小鼠有一定的自愈能力。但即便如此，與同一時(shí)期陰性對照組相比，藥物治療組依然體現(xiàn)了它愈合在程度方面的顯著差異(表8)。而且，ALT、HA在經(jīng)過31天的治療后都基本接近正常值。這說明劑量為6.6ml/kg的復(fù)合針劑對ConA誘導(dǎo)的肝損傷是有一定治療效果的。表8復(fù)方針劑對小鼠肝功指標(biāo)的影響(，n＝6)<tablesid="table6"num="006"><tablewidth="750">時(shí)間(天)組別A(g/L)ALT(U/L)HA(ng/mL)0對照組31.99±2.0260.55±9.2125.87±4.66治療組31.99±2.0260.55±9.2125.87±4.6610162431對照組治療組對照組治療組對照組治療組對照組治療組34.70±5.5837.62±2.4232.40±1.9633.21±2.6930.73±1.8431.69±2.4634.66±2.4134.87±2.4361.50±11.37*47.27±8.70*69.39±11.23**38.51±8.39**59.22±9.66*44.53±9.78*54.24±9.25**34.96±9.37**25.87±4.6623.55±5.2728.79±3.63**9.96±1.97**19.09±4.99*13.05±2.17*21.17±5.49**7.47±1.40**</table></tables>t檢驗(yàn)對照組與治療組相比，P*＜0.05，P**＜0.012.肝臟病理光鏡觀察結(jié)果(圖4)顯示，陰性對照組的肝細(xì)胞水腫和胞漿凝集的癥狀已經(jīng)惡化，其它癥狀有緩解的趨勢，但是其中脂肪變性和肝細(xì)胞壞死的癥狀的緩解情況比較輕微。這種現(xiàn)象說明，小鼠本身是有一定的自愈能力的。與陰性對照組相比，藥物治療組的所有肝臟病變指標(biāo)都有不同程度的改善，而且部分指標(biāo)已經(jīng)趨于正常，其中以肝細(xì)胞壞死，肝臟炎性細(xì)胞浸潤和纖維增生最為顯著(表9)。這就說明，復(fù)合針劑對ConA誘導(dǎo)的免疫性肝損傷是有一定治療效果的，它可以有效的清除壞死的肝細(xì)胞，加快降解增生的纖維組織，從而使病變的肝臟趨于正常。表9小鼠肝臟切片評(píng)分情況以上研究結(jié)果表明復(fù)方鱉甲軟肝制劑對病毒性肝損傷所致的肝纖維化和肝硬化具有預(yù)防和治療作用。圖1中A、B、C、D分別是在非病毒性、免疫性肝損傷所致的肝纖維化、肝硬化預(yù)防階段結(jié)束時(shí)對照組、模型組、小劑量組、大劑量組大鼠肝臟切片(HE染色，×40)。圖2中A、B分別是在非病毒性、免疫性肝損傷所致的肝纖維化、肝硬化治療階段結(jié)束時(shí)對照組和治療租大鼠肝臟切片(HE染色，×40)。圖3中A、B、C、D分別是在病毒性肝損傷所致的肝纖維化、肝硬化預(yù)防階段結(jié)束時(shí)對照組、模型組、小劑量組、大劑量組小鼠肝臟切片(HE染色，×40)。圖4中A、B分別是在病毒性肝損傷所致的肝纖維化、肝硬化治療階段結(jié)束時(shí)對照組和治療租小鼠肝臟切片(HE染色，×40)。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1本發(fā)明制劑是由鱉甲和絲瓜絡(luò)按照下列重量配比鱉甲10克絲瓜絡(luò)20克。本發(fā)明所述中藥制劑的制備方法包括下列步驟A、原料制取1、選取和炮制處理鱉甲選取脊椎動(dòng)物鱉科鱉的背甲。稱取鱉甲10克，按照《中國藥典》2000版一部附錄規(guī)定的燙法進(jìn)行炮制處理，用沙炒至表面淡黃色，篩濾取出。2、選取和處理絲瓜絡(luò)將絲瓜絡(luò)20克碾制成粉末，備用；B、醋淬將炮制處理后的鱉甲趁熱用500ml濃度為35％的乙酸溶液醋淬；C、烘干撈出鱉甲，除去殘肉，用清水洗凈，再放入60℃鼓風(fēng)烘箱中烘干待用；D、混合萃取將烘干后的鱉甲與制成粉末的絲瓜絡(luò)一起放入燒瓶中，倒入純凈水600ml；將燒瓶放入微波爐中，用微波強(qiáng)度為250W萃?。粫r(shí)間為50分鐘；鱉甲和絲瓜絡(luò)與純凈水的重量百分比為20∶600。E、蒸餾濃縮將包括藥物的萃取藥液進(jìn)行蒸餾，濃縮提取，制得藥劑。本發(fā)明所述的B醋淬步驟中，所用500ml濃度為35％的乙酸溶液醋淬；時(shí)間為60分鐘。本發(fā)明所述的E蒸餾濃縮步驟中，將包括藥物的萃取液進(jìn)行蒸餾濃縮提取所需時(shí)間為30分鐘。本發(fā)明所述的A原料制取步驟中，所訴《中國藥典》2000版一部附錄規(guī)定的燙法為常用的輔料為潔凈的沙子、蛤粉或滑石粉；取沙子、蛤粉或滑石粉置鍋內(nèi)，一般用武火炒熱后，加入凈藥材，不斷翻動(dòng)，燙至泡酥或規(guī)定的程度時(shí)，取出，篩去沙子、蛤粉或滑石粉，放涼；如需醋淬時(shí)，應(yīng)趁熱投入醋中淬酥。本發(fā)明所述中藥制劑是任何一種藥劑學(xué)上所說的劑型為針劑，按照常規(guī)的針劑制備方法獲得。實(shí)施例2同樣道理本發(fā)明制劑是由鱉甲和絲瓜絡(luò)按照下列重量配比鱉60克，絲瓜絡(luò)3克。本發(fā)明所述中藥制劑的制備方法包括下列步驟A、原料制取1、選取和炮制處理鱉甲選取脊椎動(dòng)物鱉科鱉的背甲。稱取鱉甲60克，按照《中國藥典》2000版一部附錄規(guī)定的燙法進(jìn)行炮制處理，用沙炒至表面淡黃色，篩濾取出。2、選取和處理絲瓜絡(luò)將絲瓜絡(luò)3克碾制成粉末，備用；B、醋淬將炮制處理后的鱉甲趁熱用500ml濃度為5％％的乙酸溶液醋淬；C、烘干撈出鱉甲，除去殘肉，用清水洗凈，再放入60℃鼓風(fēng)烘箱中烘干待用；D、混合萃取將烘干后的鱉甲與制成粉末的絲瓜絡(luò)一起放入燒瓶中，倒入純凈水150ml；將燒瓶放入微波爐中，用微波強(qiáng)度為600W萃?。粫r(shí)間為10分鐘；鱉甲和絲瓜絡(luò)與純凈水的重量百分比為70∶600。E、蒸餾濃縮將包括藥物的萃取藥液進(jìn)行蒸餾，濃縮提取，制得藥劑。本發(fā)明所述的B醋淬步驟中，所用500ml濃度為5％％的乙酸溶液醋淬；時(shí)間為10分鐘。本發(fā)明所述的E蒸餾濃縮步驟中，將包括藥物的萃取液進(jìn)行蒸餾濃縮提取所需時(shí)間為2小時(shí)。本發(fā)明所述中藥制劑是任何一種藥劑學(xué)上所說的劑型為針劑，按照常規(guī)的散劑制備方法獲得。實(shí)施例3本發(fā)明制劑是由鱉甲和絲瓜絡(luò)按照下列重量配比鱉甲40克絲瓜絡(luò)10克。本發(fā)明所述中藥制劑的制備方法包括下列步驟A、原料制取1、選取和炮制處理鱉甲選取脊椎動(dòng)物鱉科鱉的背甲。稱取鱉甲40克，按照《中國藥典》2000版一部附錄規(guī)定的燙法進(jìn)行炮制處理，用沙炒至表面淡黃色，篩濾取出。2、選取和處理絲瓜絡(luò)將絲瓜絡(luò)10克碾制成粉末，備用；B、醋淬將炮制處理后的鱉甲趁熱用500ml濃度為25％的乙酸溶液醋淬；C、烘干撈出鱉甲，除去殘肉，用清水洗凈，再放入60℃鼓風(fēng)烘箱中烘干待用；D、混合萃取將烘干后的鱉甲與制成粉末的絲瓜絡(luò)一起放入燒瓶中，倒入純凈水400ml；將燒瓶放入微波爐中，用微波強(qiáng)度為450W萃??；時(shí)間為30分鐘；鱉甲和絲瓜絡(luò)與純凈水的重量百分比為55∶600。E、蒸餾濃縮將包括藥物的萃取藥液進(jìn)行蒸餾，濃縮提取，制得藥劑。本發(fā)明所述的B醋淬步驟中，所用500ml濃度為25％的乙酸溶液醋淬；時(shí)間為450分鐘。本發(fā)明所述的E蒸餾濃縮步驟中，將包括藥物的萃取液進(jìn)行蒸餾濃縮提取所需時(shí)間為90分鐘。本發(fā)明所述中藥制劑是任何一種藥劑學(xué)上所說的劑型為按照常規(guī)方法制成的塊劑。實(shí)施例4同樣道理取沙子200g置鍋內(nèi)，用武火炒熱后，加入鱉甲60g，不斷翻動(dòng)，燙至表面淡黃色時(shí)取出，篩去沙子，放涼；用500ml濃度為35％的乙酸溶液醋淬，時(shí)間25分鐘。撈出除去殘肉，用清水洗凈，再放入60℃鼓風(fēng)烘箱中烘干干燥待用。將烘干后的鱉甲與制成粉末的絲瓜絡(luò)一起放入1000ml的燒瓶中，倒入純凈水200ml.。然后將燒瓶放入為微波爐中，用微波強(qiáng)度為70％萃取，時(shí)間為60分鐘。最后將萃取液(包括藥物)進(jìn)行2小時(shí)的蒸餾濃縮，制得針劑l。實(shí)施例5取沙子200g置鍋內(nèi)，用武火炒熱后，加入鱉甲50g，不斷翻動(dòng)，燙至表面淡黃色時(shí)取出，篩去沙子，放涼；用500ml濃度為5％的乙酸溶液淬取，時(shí)間30分鐘。撈出除去殘肉，用清水洗凈，再放入60℃鼓風(fēng)烘箱中烘干干燥待用。將烘干后的鱉甲與制成粉末的絲瓜絡(luò)一起放入1000ml的燒瓶中，倒入純凈水200ml.。然后將燒瓶放入為微波爐中，用微波強(qiáng)度為10％萃取，時(shí)間為10分鐘。最后將萃取液(包括藥物)進(jìn)行30分鐘的蒸餾濃縮，制得塊劑。實(shí)施例6取沙子200g置鍋內(nèi)，用武火炒熱后，加入鱉甲10g，不斷翻動(dòng)，燙至表面淡黃色時(shí)取出，篩去沙子，放涼；用500ml濃度為20％的乙酸溶液醋淬，時(shí)間20分鐘。撈出除去殘肉，用清水洗凈，再放入60℃鼓風(fēng)烘箱中烘干干燥待用。將烘干后的鱉甲與制成粉末的絲瓜絡(luò)一起放入1000ml的燒瓶中，倒入純凈水200ml.。然后將燒瓶放入為微波爐中，用微波強(qiáng)度為50％萃取，時(shí)間為40分鐘。最后將萃取液(包括藥物)進(jìn)行1小時(shí)的蒸餾濃縮，制得散劑。實(shí)施例7取沙子200g置鍋內(nèi)，用武火炒熱后，加入鱉甲30g，不斷翻動(dòng)，燙至表面淡黃色時(shí)取出，篩去沙子，放涼；用500ml濃度為10％的乙酸溶液醋淬，時(shí)間60分鐘。撈出除去殘肉，用清水洗凈，再放入60℃鼓風(fēng)烘箱中烘干干燥待用。將烘干后的鱉甲與制成粉末的絲瓜絡(luò)一起放入1000ml的燒瓶中，倒入純凈水200ml.。然后將燒瓶放入為微波爐中，用微波強(qiáng)度為30％萃取，時(shí)間為30分鐘。最后將萃取液(包括藥物)進(jìn)行90分鐘的蒸餾濃縮，制得片劑。實(shí)施例8取沙子200g置鍋內(nèi)，用武火炒熱后，加入鱉甲40g，不斷翻動(dòng)，燙至表面淡黃色時(shí)取出，篩去沙子，放涼；用500ml濃度為30％的乙酸溶液醋淬，時(shí)間10分鐘。撈出除去殘肉，用清水洗凈，再放入60℃鼓風(fēng)烘箱中烘干干燥待用。將烘干后的鱉甲與制成粉末的絲瓜絡(luò)一起放入1000ml的燒瓶中，倒入純凈水200ml.。然后將燒瓶放入為微波爐中，用微波強(qiáng)度為50％萃取，時(shí)間為50分鐘。最后將萃取液(包括藥物)進(jìn)行60分鐘的蒸餾濃縮，制得針劑。實(shí)施例9取沙子200g置鍋內(nèi)，用武火炒熱后，加入鱉甲30g，不斷翻動(dòng)，燙至表面淡黃色時(shí)取出，篩去沙子，放涼；用500ml濃度為25％的乙酸溶液醋淬，時(shí)間10分鐘。撈出除去殘肉，用清水洗凈，再放入60℃鼓風(fēng)烘箱中烘干干燥待用。將烘干后的鱉甲與制成粉末的絲瓜絡(luò)一起放入1000ml的燒瓶中，倒入純凈水200ml.。然后將燒瓶放入為微波爐中，用微波強(qiáng)度為60％萃取，時(shí)間為50分鐘。最后將萃取液(包括藥物)進(jìn)行60分鐘的蒸餾濃縮，制得針劑。權(quán)利要求1.一種預(yù)防與治療慢性肝纖維化和肝硬化的中藥制劑，其特征在于所述制劑是由鱉甲和絲瓜絡(luò)按照下列重量配比鱉甲10-60絲瓜絡(luò)3-20。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種預(yù)防與治療慢性肝纖維化和肝硬化的中藥制劑的制備方法，其特征在于包括下列步驟A、原料制取a、選取和炮制處理鱉甲選取脊椎動(dòng)物鱉科鱉的背甲；稱取鱉甲10-60克，按照《中國藥典》2000版一部附錄規(guī)定的燙法進(jìn)行炮制處理，用沙炒至表面淡黃色，篩濾取出；b、選取和處理絲瓜絡(luò)將絲瓜絡(luò)碾制成粉末，備用；B、醋淬將炮制處理后的鱉甲趁熱用500ml濃度為5％--35％的乙酸溶液醋淬；C、烘干撈出鱉甲，除去殘肉，用清水洗凈，再放入60℃鼓風(fēng)烘箱中烘干待用；D、混合萃取將烘干后的鱉甲與制成粉末的絲瓜絡(luò)一起放入燒瓶中，倒入純凈水150-600ml；將燒瓶放入微波爐中，用微波強(qiáng)度為250-600W萃??；時(shí)間為10-50分鐘；鱉甲和絲瓜絡(luò)與純凈水的重量百分比為20-70∶600；E、蒸餾濃縮將包括藥物的萃取藥液進(jìn)行蒸餾，濃縮提取，制得藥劑。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種預(yù)防與治療慢性肝纖維化和肝硬化的中藥制劑，其特征在于所述的B醋淬步驟中，所用500ml濃度為5％--35％的乙酸溶液醋淬；時(shí)間為10-60分鐘。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種預(yù)防與治療慢性肝纖維化和肝硬化的中藥制劑，其特征在于所述的E蒸餾濃縮步驟中，將包括藥物的萃取液進(jìn)行蒸餾濃縮提取所需時(shí)間為30分鐘-2小時(shí)。5.根據(jù)權(quán)利要求2述的一種預(yù)防與治療慢性肝纖維化和肝硬化的中藥制劑，其特征在于所述的A原料制取步驟中，所訴《中國藥典》2000版一部附錄規(guī)定的燙法為常用的輔料為潔凈的沙子、蛤粉或滑石粉；取沙子、蛤粉或滑石粉置鍋內(nèi)，一般用武火炒熱后，加入凈藥材，不斷翻動(dòng)，燙至泡酥或規(guī)定的程度時(shí)，取出，篩去沙子、蛤粉或滑石粉，放涼；如需醋淬時(shí)，應(yīng)趁熱投入醋中淬酥。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種預(yù)防與治療慢性肝纖維化和肝硬化的中藥制劑，其特征在于所述中藥制劑是任何一種藥劑學(xué)上所說的劑型，包括針劑、散劑或塊劑。全文摘要本發(fā)明涉及一種中藥制劑及其制備方法，尤其是一種預(yù)防與治療慢性肝纖維化和肝硬化的中藥復(fù)方鱉甲軟肝制劑極其制備方法。該制劑由包含重量組分為鱉甲10－60、絲瓜絡(luò)3－8的組分制成；該中藥制劑的制備方法包括炮制處理鱉甲、萃取、烘干、混合后萃取、蒸餾濃縮五個(gè)步驟；本發(fā)明所述的復(fù)方制劑選用藥膳同源的天然物質(zhì)為原料，無需煎煮、無苦澀感、營養(yǎng)豐富；各組分符合藥政法規(guī)定，利用各味中藥的綜合作用治療肝病，對人體無毒無害，尤其對非病毒性、免疫性肝損傷以及病毒性肝損傷所致的肝纖維化和肝硬化具有預(yù)防和治療作用。文檔編號(hào)A61K9/08GK1985871SQ200610022478公開日2007年6月27日申請日期2006年12月12日優(yōu)先權(quán)日2006年12月12日發(fā)明者陳竹平,孫群,張春筍,羅川,楊志榮申請人:四川大學(xué)