專利名稱：用于治療病毒感染尤其是hiv感染的抗病毒核苷類似物和方法
技術領域：
本發(fā)明涉及新的2’，3’-雙脫氧和雙脫氫核苷類似物以及相關的前藥以及其在用于治療多種病毒(其中，更具體地，逆轉錄病毒)感染和疾病狀態(tài)尤其是包括HIV以及相關的疾病AIDS中的用途。
該項工作得到源自國立衛(wèi)生研究院的公共衛(wèi)生服務資助AI-38204的支持。美國政府持有本發(fā)明的一些權利。
背景技術：
人免疫缺陷病毒(HIV/AIDS)已經(jīng)超過瘧疾和肺結核而成為全球的主要感染性死亡病因。WHO AIDS Epidemic Update，2002年12月的數(shù)據(jù)報道了310萬的死亡以及目前有4,200萬人患有AIDS。對具有更好療效的新治療性劑的需求是很顯然的。雙脫氧核苷是一類重要的抗病毒化合物(16，26，27)。其中，3’-疊氮基-3’-脫氧胸苷(AZT，Retovir，齊多夫定)是第一個批準用于治療HIV的藥物。其劑量限制性副作用是骨髓抑制(14、36、39)，并且這種副作用會被引起骨髓抑制或被肝臟代謝的其他藥物的伴隨給藥進一步惡化。接著2’，3’-雙脫氫-3’-脫氧胸苷(D4T，司他夫定，Zerit)由于更好的生物利用度記憶較低的急性毒性也被批準(1)。D4T被長期延遲毒性，外周感覺神經(jīng)病(4)所限制使用，后者與線粒體損傷有關(3、5、6、13、18、22、30、33、34)。2’，3’-雙脫氧肌苷(ddI，地達諾新，Videx)和2’，3’-雙脫氧胞嘧啶(ddC，扎西他濱)為雙脫氧核苷抗HIV化合物，并且也具有作為其主要副作用的外周神經(jīng)病。在尋找具有更少神經(jīng)病變抗HIV核苷類似物中，許多種類的化合物已經(jīng)被合成出來并評價其抗病毒活性以及細胞毒性包括其對線粒體DNA的影響。由β-L-2’，3’-雙脫氧-3’-硫雜胞嘧啶(3TC，拉米夫定)，其5-氟類似物(FTC，Emtricitabine)和β-L-2’，3’-雙脫氧-2’，3’-雙脫氫-5-氟胞嘧啶(LFd4C，Elvucitabine)代表的非天然L構型的雙脫氧核苷，已經(jīng)由我們(2、11、12、23-25)以及其他的研究者(8、9、15、37)證實具有良好的抗病毒活性以及低的線粒體毒性。但是，即使用對線粒體相對無毒性的化合物也缺乏持久的反應。這種情形是由抗性病毒的快速出現(xiàn)或被引起藥物代謝中的差異的宿主變化所引起的(10、19、35)。
與該問題斗爭的一個方法是開發(fā)具有更低的毒性以及對其他抗病毒藥物缺乏交叉抗性的化合物。當與這些化合物聯(lián)合使用的時候，可降低現(xiàn)有藥物需要的劑量以實現(xiàn)同樣的抗病毒效果同時具有更小的毒性。此外，這些化合物甚至可以延緩抗性的發(fā)作，其可能基于在治療期間的下降的病毒滴度。在尋找新的抗病毒化合物中，其他研究者著眼于4’-取代的dThd類似物(29)(32)，而我們合成了一系列的4’-取代的D4T類似物。篩選揭示4’-乙炔基D4T為測試的化合物中活性最強的(17)。在這里描述的研究中，我們描述了這類化合物的結構活性關系并更詳細地表征了4’-乙炔基D4T的HIV作用方式以及其與介導其活性的關鍵細胞酶的相互作用。
發(fā)明目的本發(fā)明的目的之一在于提供用于治療病毒感染或癌癥的化合物。
本發(fā)明的另一個目的在于提供可以用來治療病毒感染或癌癥的藥物組合物。
本發(fā)明的另一目的在于提供可與已知的抗病毒劑用于聯(lián)合治療的化合物和藥物組合物。
本發(fā)明另一種目標在于提供根據(jù)本發(fā)明的化合物的前藥形式，其可聯(lián)用其他的抗病毒劑進行配制。
本發(fā)明的另一目標在于提供用于治療如這里描述的多種病毒或癌癥的治療方法。
本發(fā)明的另一目的在于提供合成根據(jù)本發(fā)明化合物的方法。
本發(fā)明的這些和/或其他的目的從下述本發(fā)明的描述中可以很容易地得出。
附圖簡述

圖1描述了多種優(yōu)選的根據(jù)本發(fā)明化合物。
圖2描述了抗HIV化合物L(-)Fd4C、L(-)SddC、ddC和D4T。
圖3描述了優(yōu)選的根據(jù)本發(fā)明二核苷化合物。
圖4顯示了以路線A進行的TDK-4-152的化學合成。
圖5顯示了以路線B進行的TDK-4-114的化學合成。
圖5A顯示了TDK4-114的另一種化學合成方法。
圖5B顯示了根據(jù)本發(fā)明的酰氧基核苷化合物中間體的另一種制備，該中間體可用于制備圖5A的TKD-4-114。
圖6顯示了KMA-23-153的化學合成。
圖7A顯示了根據(jù)Nomura等J.Med.Chem.，42，2901-2908(1999)的方法從2’-脫氧核苷合成4’乙炔基-2’-脫氧核苷。注意SiR3為叔丁基二甲基甲硅烷基并且SiR’3為叔丁基二苯基甲硅烷基基團。X為鹵原子，如氯且B為核苷堿如尿嘧啶、腺嘌呤、鳥嘌呤或胞嘧啶。
圖7B顯示了根據(jù)Ohrui等J.Med.Chem.43，4516-4525(2000)的方法從保護的糖前體合成4’-乙炔基-2’-脫氧核苷。注意B為核苷堿。
圖7C顯示了從根據(jù)本發(fā)明相應的2’脫氧核苷類似物合成2’，3’-雙脫氫核苷化合物的一般方法。
圖8顯示了4’取代的D4T類似物的抗HIV活性4’-乙炔基D4T、D4T、4’-乙炔基甲基D4T和4’-氰基D4T的抗病毒活性按照在實施例中材料和方法部分中的描述的MT-2/HIVIIIB體系進行測定。通過將O.D.595nm的讀數(shù)與未感染未處理的(UIUT)對照MT-2細胞進行比較測定抑制水平。
圖9顯示了4’-乙炔基D4T、dThd(10μM)、dThd(1μM)和ddCyd(10μM)在THU(5μM)存在下加入到標準抗病毒分析中的抗HIV效果。通過比較O.D.595nm處的讀數(shù)以及未感染的未處理的(UIUT)對照MT-2細胞確定抑制水平。
圖10顯示了在MT-2/HIV IIIB系統(tǒng)中得到的數(shù)據(jù)得到的D4T和4’-乙炔基D4T與下述成分組合的抗病毒等效線圖A)3TC和B)LFd4C。各坐標軸顯示的數(shù)字與顯示的作為單劑的藥物的EC50(視作1)成比例。[單劑EC501.4μM D4T，0.5μM 4’-乙炔基D4T，1.0μM 3TC和0.18μM LFd4C]。各數(shù)據(jù)點代表了產(chǎn)生與任一單藥的EC50等效的活性的組合。協(xié)同指數(shù)(SI)計算為45°線至表示加和的藥物相互作用線的分數(shù)，總的距離為1.0。
圖11顯示了D4T類似物用胸苷磷酸化酶處理的結果dThd、D4T和4’-乙炔基D4T與源于人肝臟提取物的部分純化的TP制劑一起孵育。按照材料和方法部分的描述，利用反相HPLC在Beckman ODS柱上測定堿與核苷的比率。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及根據(jù)通式I、II、III、IV或V的新化合物 其中B為根據(jù)下述結構的核苷堿 R為H、F、Cl、Br、I、C1-C4烷基(優(yōu)選地CH3)、-C≡N、-C≡C-Ra、
或 X為H、C1-C4烷基(優(yōu)選地、CH3)、F、Cl、Br或I；Z為O或CH2，條件是當化合物為通式II的化合物，R3為-C≡C-H且R2為H或磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸或磷酸三酯基團的時候，Z為CH2且不為O；R1為H、?；?、C1-C20烷基或醚基團；R2為H、?；1-C20烷基或醚基團、磷酸酯(phosphate)、二磷酸酯(diphosphate)、三磷酸酯(triphosphate)、磷酸二酯基團或 或 基團； Nu為生物活性抗病毒化合物的基團以使所述的生物活性抗病毒化合物的氨基或羥基與相鄰的成分形成磷酸酯、氨基磷酸酯、碳酸酯或氨基甲酸乙酯基團；R8為H，或C1-C20烷基或醚基團，優(yōu)選地C1-C12烷基；k為0-12，優(yōu)選地，0-2；R3選自C1-C4烷基(優(yōu)選地，CH3)、-(CH2)n-C≡C-Ra、 或 R3a和R3b獨立地選自H、F、Cl、Br或I；R4和R5獨立地選自H、F、Cl、Br、I、OH、C1-C4烷基(優(yōu)選地，CH3)、-(CH2)n-C≡C-Ra、 或 條件是R4和R5不都為H；Ra為H、F、Cl、Br、I或-C1-C4烷基，優(yōu)選地H或CH3；Y為H、F、Cl、Br、I或-C1-C4烷基，優(yōu)選地H或CH3；并且
n為0、1、2、3、4或5，優(yōu)選地0、1或2；以及其差向異構體、可藥用鹽、溶劑合物，或多晶形。
優(yōu)選地，B為胸腺嘧啶堿(即，帶有5-甲基取代的尿嘧啶堿)或未取代的腺嘌呤堿。R1和R2優(yōu)選地H。R3為優(yōu)選地CH3、-C≡CH或-(CH2)n-CH＝CH2，其中n為1。
在另一個優(yōu)選的本發(fā)明發(fā)面，生物活性抗病毒劑為選自ddC、ddI、ddA、B-LFd4C、B-LFddC、AZT、阿巴卡韋、3TC、D4T和FTC的核苷化合物，其中生物活性劑通過核苷糖合成子的5’位羥基連接至磷酸酯、氨基磷酸酯、碳酸酯或氨基甲酸乙酯成分。
在另一種根據(jù)本發(fā)明的實施方案中，藥物組合物包括有效量的一或多種如上所述的化合物，任選組合可藥用載體、賦形劑或添加劑。
病毒感染和/或預防或延緩與病毒感染的有關的疾病的發(fā)作的治療方法是本發(fā)明的另一方面?；衔锟捎脕碇委熍c病毒相關的感染或疾病，所述的病毒包括，例如，人免疫缺陷病毒1和2(HIV-1和HIV-2)包括藥物抗性株、人T-細胞白血病病毒1和2(HTLV-1和HTLV-2)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人乳頭瘤病毒(HPV)、腺病毒、B型肝炎病毒(HBV)、C型肝炎病毒(HCV)、Epstein-Barr病毒(EBV)、水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)、巨細胞病毒(CMV)、單純皰疹病毒1和2(HSV-1和HSV-2)、人皰疹病毒8(HHV-8，已知也為卡波西肉瘤相關病毒)和黃病毒，包括黃熱病毒、登革病毒、日本腦炎和西尼羅腦炎病毒。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的化合物可用于治療HIV感染。此外，本發(fā)明的化合物可用于預防和/或降低病毒感染如HIV感染或繼發(fā)于病毒感染的疾病如AIDS、EBV-相關淋巴瘤或HHV-8相關的癌癥(肉瘤)發(fā)生的可能性。
發(fā)明詳述這里使用的術語“化合物”，除非另有指明，指這里公開的任何特定的化合物。在上下文的使用中，術語通常指單一的化合物優(yōu)選地，β差向異構體，但是在一些例子中也可以指立體異構體和/或光學異構體(包括消旋混合物)，優(yōu)選地為特定的對映體，具體地，β-D或β-L，優(yōu)選地公開的化合物的β-D核苷類似物或?qū)τ掣患幕旌衔铩Ｔ诒景l(fā)明的一些例子中，尤其是在本發(fā)明的雙重拮抗劑/二核苷前藥方面，根據(jù)本發(fā)明的化合物經(jīng)生物活性抗病毒劑的胺或羥基通過磷酸酯(包括多磷酸酯)、氨基磷酸酯、碳酸酯或氨基甲酸乙酯成分化學連接生物活性抗病毒劑。
術語“雙重拮抗劑”(在上下文中，“二核苷”)指包括兩種活性劑的前藥化合物，一種為根據(jù)本發(fā)明的活性核苷化合物并且另一種為已知的活性劑，優(yōu)選地已知的抗病毒劑，更優(yōu)選地具有游離的氨基或羥基的抗HIV劑，所述的游離的氨基或羥基可用于將所述的藥劑通過磷酸酯或碳酸酯基團連接至根據(jù)本發(fā)明的化合物。在本發(fā)明的雙重拮抗劑方面，具有游離的羥基或氨基的生物活性劑可通過磷酸酯或碳酸酯成分用于連接根據(jù)本發(fā)明的化合物以產(chǎn)生顯示生物活性的前藥化合物，優(yōu)選地抗病毒活性。在這方面，根據(jù)本發(fā)明的核苷類似物連接至生物活性劑，優(yōu)選地通過糖合成子5’OH位的伯醇以產(chǎn)生磷酸酯、氨基磷酸酯、碳酸酯或氨基甲酸乙酯(urethane)成分?；蛘?，本發(fā)明的核苷化合物的仲醇或游離胺可用于與在本發(fā)明的雙重拮抗劑方面中的其他的生物活性劑形成連接基。優(yōu)選地，β-D或β-L核苷類似物可用作生物活性劑并連接至本發(fā)明的核苷化合物(其自身可為對映體富集的β-D或β-L核苷化合物、消旋體或非對映體混合物)以形成二核苷前藥，取決于選擇使用的核苷化合物的活性。在優(yōu)選的本發(fā)明的方面，生物活性抗病毒劑優(yōu)選地為另一種抗病毒核苷劑如ddC、阿巴卡韋、ddI、ddA、3TC、AZT、D4T、FTC、FddC和Fd4C。優(yōu)選的二核苷化合物為在附圖3中顯示的那些。
示例性的可用于本發(fā)明的雙重拮抗劑方面的生物活性劑，尤其是抗HIV劑，包括，例如(化合物名稱以及通過連接根據(jù)本發(fā)明的核苷化合物的活性成分)Atazanavir(BMS-232632)，利用游離的二級羥基；雙(POM)-PMEA(阿德福韋二吡呋酯)，利用游離的胺基；雙(POC)-PMPA(Tenofovir disoproxil)，利用游離的胺基；Etecavir，利用碳環(huán)狀的糖合成子上的伯羥基；茚地那韋(Merck的Crixivan，MK-639 L-735，524)，利用游離的二級羥基；KHI-227(Nikko Kyodo Co.的Kynostatin)，利用游離的二級羥基；2-[3-[3-(S)-[[(四氫呋喃基氧基)羰基]氨基]-4-苯基-2(R)-羥基丁基]]-N-(1，1-二甲基乙基)十氫-3-異喹啉甲酰胺(Merck的異喹啉CON呋喃基氨基甲酸乙酯類似物)，利用游離的二級羥基；氨基甲酸，[3-{[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠(環(huán)戊基甲基)氨基]-2-羥基-1-(苯基甲基)丙基]-，四氫呋喃基酯(Vertex的VB-11，328)，利用游離的二級羥基；Nikko Kyodo Co.的KNI-174，利用游離的二級羥基(或游離胺)基團；Sandoz(Austria)的Val-Val-Sta，利用游離的二級羥基；Ciba-Geigy的CPG53820，利用游離的二級羥基；雙-Val HOEt-N2氮雜肽電子等排體，利用游離的二級羥基；Hoechst AG的C2-Sym次膦酸酰胺衍生物，利用游離的胺基；Abbott的2，5，-二氨基-N，N’-雙(N-芐氧基羰基uelyl)-1，6-二苯基-3(S)，4(S)-己烷二醇BzOCValPhe[二CHOH(SS]PheValBzOC，利用游離的二級羥基；Abbott的2，5，-二氨基-N，N’-雙(N-芐氧基羰基uelyl)-1，6-二苯基-3(R)，4(R)-己烷二醇BzOCValPhe[二CHOH(RR]PheValBzOC，利用游離的二級羥基；ddA的雙(S-乙?；?2-硫代乙基)磷酸三酯或[雙(SATE)ddAMP]，利用游離胺；BILA 2186 BS(Bio-Mega/Boehringer Ingelheim)，利用游離的二級羥基；Vertex/Kissei/Glaxo Wellcome的Agenerase(安潑那韋；VX-478；141W94)，利用游離的二級羥基或胺基團；Abbott的A-98881(氮雜環(huán)狀的脲衍生物)，利用游離的二級羥基或酚羥基；
Abbott的A-83962(Rifonavir衍生物)，利用游離的二級羥基；Abbott的A-80987(Rifonavir衍生物)，利用游離的二級羥基；Roche的(2-萘羰基)Asn[decarbonylPhe-羥基乙基]ProO叔丁基或2NaphCOAsnPhe[CHOHCH2]Pro-OtBu，利用游離的二級羥基；Sandoz的2-氨基芐基他汀Valyl Cbz衍生物，利用游離的二級羥基或胺；Sandoz的2-氨基芐基他汀Valyl Cbz衍生物，利用游離羥基；Sandoz的10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[14]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，利用游離二級羥基；Sandoz的10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[13]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，利用游離二級羥基；Sandoz的10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[13]二聚間二甲苯鄰甲酸(metacyclophane)衍生物，利用游離二級羥基；Sandoz的10H-2(Cbz-Tle)3PhPr[14]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，利用游離二級羥基；1-(20HPr)-4-取代的-哌嗪(環(huán)丙基)，噻吩基氨基甲酸酯衍生物(Merck)，利用游離的二級羥基；1-(20HPr)-4-取代的-哌嗪(環(huán)丁基)，噻吩基氨基甲酸酯衍生物(Merck)，利用游離的二級羥基；1-(20HPr)-4-取代的-哌嗪(3-戊基)，噻吩基氨基甲酸酯衍生物(Merck)，利用游離的二級羥基；10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[17]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物(Sandoz)，利用游離二級羥基；A-81525(Abbott)，利用游離的二級羥基；XM323(DuPont Merck的DMP-323)，利用游離伯或仲羥基；替拉那韋(Pharmacia & Upjohn的U-140690或PHU-140690)，利用酚羥基；噻酚并吡啶CON噻吩基氨基甲酸乙酯衍生物(Lilly的HOCH2CH2電子等排體)(芐基取代的衍生物或甲基巰基苯基取代的衍生物)，利用游離的二級羥基；SDZ PRI 053(Sandoz)，利用游離的二級羥基；SD146(DuPont Merck)，利用游離的二級羥基的醚；替利那韋(Searle/Monsanto的SC-52151)，利用游離的二級羥基或胺；(R)2喹啉COAsnPhe[CHOHCH2]PipCONHtBu(Roche)，利用游離的二級羥基或胺；沙奎那韋(Roche的Invirase或RO 31-8959)，利用游離的二級羥基或胺；沙奎那韋/Melfinavir衍生物(Lilly)，利用游離的二級羥基；異喹啉CON Thf-Thf氨基甲酸乙酯類似物(Merck)，利用游離的二級羥基；異喹啉CON噻吩基氨基甲酸乙酯類似物(Merck)，利用游離的二級羥基；R-87366(Sankyo的AHPBA類似物)，利用游離的胺基；DMP 460(Dupont Merck/Avid)，利用游離的二級羥基或任一苯胺胺基團；L685，434(Merck)，利用游離的二級羥基；L685，434-6-羥基衍生物(Merck)，利用游離的二級羥基；L685，434-OEtNMe2(Merck)，利用游離的二級羥基；L685，434-OPrMorph衍生物(Merck)，利用游離的二級羥基；L689，502(Merck)，利用游離的二級羥基；拉西那韋(CIBA/Novartis的CGP 61755)，利用游離的二級羥基；Aluviran(Abbott的洛匹那韋，ABT-378，RS-346 A157378)，利用游離的二級羥基；Nelfinavir-八氫-噻酚并吡啶類似物(Lilly)，利用游離的二級羥基；P9941(DuPot Merck)，利用任一游離的二級羥基；
帕利那韋(BIO-MEGA/Boehringer Ingelheim的BILA 2011BS)，利用游離的二級羥基；青霉素，2異喹啉-OHPrNH2類似物(Glaxo Wellcome)，利用游離的二級羥基等。
用于本發(fā)明的雙重拮抗劑方面的上述活性化合物以及其他的相關的生物活性劑可在NIH網(wǎng)址上見到//www.niaid.nih.gov/daids/dtpdb/，相關的部分這里引入作為參考。盡管不是必要的或重要的，優(yōu)選地在本發(fā)明的雙重拮抗劑方面，形成雙重拮抗劑的兩種活性劑具有不同的作用機理，如逆轉錄酶抑制、蛋白酶抑制、鋅指抑制、TAT抑制、整合酶抑制或其他的抑制性活性。注意的是事實上上述活性劑的每一種，不受限制地可與一或多種沒有被化學連接的本發(fā)明化合物一起給藥。
這里使用的術語“有效的”，除非另有指明，在上下文中，為了描述化合物的量，用于產(chǎn)生或?qū)崿F(xiàn)預定的結果，無論該結果涉及病毒疾病狀態(tài)或與病毒疾病相關的病癥或治療，或者，用于以產(chǎn)生另一種化合物、藥劑或組合物。該術語包括所有在本申請中沒有描述的其他的有效量或有效的濃度術語。
術語“患者”說明書中通篇使用的用來描述用根據(jù)本發(fā)明的組合物進行治療包括預防性治療的動物，通常哺乳動物并優(yōu)選地為人。對于對特定動物如人患者特異的這些感染、疾病或疾病狀態(tài)的治療而言，術語患者指特定的動物。
術語“病毒”用來描述所有類型的病毒，其生長或復制可利用一或多種根據(jù)本發(fā)明方法抑制或疾病狀態(tài)?？筛鶕?jù)本發(fā)明抑制的病毒包括，例如，人免疫缺陷病毒1和2(HIV-1和HIV-2)、人T-細胞白血病病毒1和2(HTLV-1和HTLV-2)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人乳頭瘤病毒(HPV)、腺病毒、B型肝炎病毒(HBV)、C型肝炎病毒(HCV)、Epstein-Barr病毒(EBV)、水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)、巨細胞病毒(CMV)、單純皰疹病毒1和2(HSV-1和HSV-2)、人皰疹病毒8(HHV-8，已知也為卡波西肉瘤相關病毒)和黃病毒，包括黃熱病毒，登革病毒、日本腦炎和西尼羅腦炎病毒等。
術語“人免疫缺陷病毒”用來描述人免疫缺陷病毒(HIV)及其感染，該術語應該用于包括人免疫缺陷病毒1(HIV-1)和人免疫缺陷病毒2(HIV-2)二者。
術語“人T-細胞白血病病毒”用來描述人T-細胞白血病病毒及其感染，該術語應該包括人T-細胞白血病病毒1(HTLV-1)合人T-細胞白血病病毒2(HTLV-2)二者。
術語“B型肝炎病毒(HBV)”用于描述在人中產(chǎn)生B型病毒肝炎的病毒(血清肝炎病毒)。與A型肝炎病毒(感染性肝炎病毒)具有短的潛伏期不同，該病毒疾病具有長的潛伏期(約50～160天)。病毒通常通過輸注了感染的血液或血液衍生物或僅僅通過使用了污染的針頭、小刀或其他的器械。臨床和病理上，該疾病類似于A型病毒肝炎；但是，沒有交叉保護性免疫。感染后，病毒抗原(HBAg)可見于血清。
說明書中通篇使用的術語“單純皰疹病毒”(HSV)用來描述HSV1和HSV2，其為皰疹感染包括生殖器皰疹感染的致病病毒。
說明書中通篇使用的術語“C型肝炎病毒(HCV)”用來描述非-A、非-B肝炎致病病毒的肝炎病毒。急性期的該疾病，通常較肝炎B溫和，但是更大比例的這種感染將變成慢性。
說明書中通篇使用的術語“Epstein-Barr病毒(EBV)”用來描述見于Burkitts淋巴瘤細胞培養(yǎng)物中的滑柱病毒(herpetovirus)。EBV是傳染性單核細胞增多癥以及多種其他有關的病癥/疾病狀態(tài)包括EBV-相關的淋巴瘤中致病因素。
術語“Varicella-Zoster病毒(VZV)”用于描述皰疹病毒科，已知也為水痘或帶狀皰疹。水痘源自病毒的初步感染；帶狀皰疹源自相同感染或感染再活化的繼發(fā)侵入，感染再活化在許多情形下可潛伏很多年。VZV的初步和繼發(fā)感染可利用根據(jù)本發(fā)明的組合物進行治療。
說明書中通篇使用的術語“呼吸道合胞病毒(RSV)”用來描述引起小的呼吸性感染的肺病毒屬的含RNA-病毒，在成人中引起鼻炎和咳嗽，但是在年輕的兒童中能引起支氣管炎以及支氣管肺炎。病毒根據(jù)其在組織培養(yǎng)物有形成合胞體的趨勢而命名。
說明書中通篇使用的術語“腺病毒”用來描述含有具有雙鏈DNA的病毒的腺病毒科的病毒，其傳染哺乳動物和鳥類。病毒顆粒為70～90nm直徑并且是裸露的(沒有包膜)。病毒在感染細胞的核中發(fā)育；由于實驗動物對明顯的感染不敏感，分離需要組織培養(yǎng)。該科包括兩個屬，哺乳動物腺病毒和Acvi腺病毒。
說明書中通篇使用的術語“人皰疹病毒8(HHV-8)”用來描述滑柱病毒，據(jù)信是AIDS患者中Kaposis肉瘤的致病因素。
說明書中通篇使用的術語“人乳頭瘤病毒(HPV)”用來描述引起生殖器疣的病毒。已知也為傳染性的疣病毒，HPV為普遍、常見的、經(jīng)常復發(fā)的病毒感染，具有大量的血清型。HPV感染可導致生殖器疣的形成，后者反過來，導致生殖器和/或?qū)m頸癌癥。HPV1、2、6、11、16和18型導致的生殖器疣通常通過性途徑轉播并且通常與宮頸和/或生殖器癌癥相關。HPV可成熟以產(chǎn)生乳突腫瘤或疣，其為限定的相對于周圍表面突出的良性上皮腫瘤。其通常良性上皮腫瘤，由腫瘤細胞覆蓋的纖維血管間質(zhì)的絨毛狀或喬木狀贅疣組成。
術語“黃病毒”說明書中通篇使用的用來描述屬于披膜病毒科黃病毒屬的病毒。根據(jù)病毒分類學，約50病毒包括C型肝炎病毒(HCV)、黃熱病毒、登革病毒、日本腦炎病毒、西尼羅腦炎病毒以及相關的黃病毒屬于該屬。屬于黃病毒屬的病毒簡單地稱為黃病毒。這些病毒以前歸類為B組蟲媒病毒。黃病毒是傳染性疾病的致病因素并主要在東、東南以及南亞和非洲流行，盡管它們也可見于世界的其他地方。
術語“黃熱病毒”用于描述為黃熱致病因素的黃病毒。黃熱為熱帶的蚊子攜帶的病毒肝炎，由于黃熱病毒(YFV)，具有通過Aedes aegypti傳播的城市形式，并在鄉(xiāng)村，由Haemagogus物種復合物的多種蚊子傳播的源自樹棲哺乳動物的熱帶植叢或森林形式。黃熱臨床特征為發(fā)熱、遲脈、蛋白尿、黃疸、面部淤血以及出血，尤其是嘔血(黑色嘔吐物)。死亡率約占病例的5-10％。
說明書中通篇使用的術語“登革病毒”描述為登革發(fā)熱/登革出血性發(fā)熱致病因素的黃病毒。登革為熱帶和亞熱帶地區(qū)流行發(fā)生的一種疾病并由登革病毒引起，引起出血性發(fā)熱綜合征的蟲媒病毒之一。根據(jù)嚴重程度分為4級I級發(fā)熱和全身癥狀，級III級以及自發(fā)性出血(皮膚、齦或胃腸道)，III級II級以及精神激動和循環(huán)衰竭以及級IV深度休克。該疾病由Aedes屬的蚊子(通常A.aegyptiI，但是更通常地，A.albopictus)傳播。也稱為Aden，bouquet、breakbone、dandy、date、登革(出血性)或polka、solar發(fā)熱、失枕發(fā)熱、scarlatina rheumatica或exanthesis arthorosia。出血性登革為更具致病性的流行的登革形式，近年已經(jīng)在太平洋地區(qū)爆發(fā)流行了多次。
說明書中通篇使用術語“可藥用鹽”用來描述一或多種組合物成分的鹽形式(并且具體地根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的方面，磷酸鹽)，以增加化合物在鹽水中的溶解度適于腸胃外給藥或在患者的胃腸道中的胃液中溶解度以促進化合物的溶解和生物利用度。可藥用鹽包括那些衍生自可藥用無機或有機堿和酸的鹽。合適的鹽包括那些衍生自堿金屬如鉀和鈉，堿土金屬如鈣、鎂和銨鹽以及制藥領域公知的其他的酸的鹽。鈉和鉀鹽是特別優(yōu)選的，因為是根據(jù)本發(fā)明成分包含羧酸以及游離磷酸的中和鹽。術語“鹽”應該指與本發(fā)明化合物用途一致的任何鹽。在其中化合物用于藥用目的，包括治療腫瘤包括癌癥的時候，術語“鹽”應該指與化合物用作藥劑一致的可藥用鹽。
說明書中通篇使用的術語″可藥用衍生物″用來描述任何可藥用前藥形式(如酯或醚或其他的前藥基團)，其一旦給藥于患者，直接地或間接地提供本發(fā)明地化合物或本發(fā)明化合物的代謝物。
在上下文中的術語“烷基”指C1-C20，優(yōu)選地C1-C10線性的、支鏈或環(huán)狀的完全飽和的烴基團。術語“醚”指C1-C20醚基團，由氧和烷基在本發(fā)明化合物糖成分上形成，或者，也可在烷基鏈中包含至少一個氧原子。
說明書中通篇使用的術語“酰基”用來描述核苷類似物(即在糖合成子中的游離羥基位)5′位的基團，其包含C1-C20線性的、支鏈的或環(huán)狀的烷基鏈。5′位的酰基，與5′羥基結合產(chǎn)生酯，其在給藥后，可裂解以產(chǎn)生本發(fā)明的游離核苷形式。根據(jù)本發(fā)明的酰基用下述結構表示 其中R4為C1-C20線性的、支鏈的或環(huán)狀的烷基、烷氧基烷基、芳基氧基烷基，如苯氧基甲基、芳基、烷氧基，其中，優(yōu)選的?；鶠槟切┢渲蠷4為C1至C10烷基的基團。根據(jù)本發(fā)明的?；€包括，例如，那些衍生自下列這些酸的?；郊姿嵋约跋嚓P的酸、3-氯苯甲酸、琥珀酸、羊蠟酸和正己酸、十二烷酸、十四[烷]酸、棕櫚酸硬脂酸以及油酸以及其他的酸包括甲磺酸。本領域的普通技術人員將意識到酰基在本發(fā)明中有用，或者用于合成目標藥用化合物或作為根據(jù)本發(fā)明核苷的前藥形式。
說明書中通篇使用的術語“磷酸酯”或“磷酸二酯”用來描述在二氧雜環(huán)己基(dioxanyl)成分或糖合成子的5′位的單-磷酸酯基團，其被二酯化以使磷酸酯成為中性，即，具有中性電荷。用于本發(fā)明的磷酸酯包括下述結構代表的那些 或 其中R5、R6和R”選自C1至C20線性的、支鏈的或環(huán)狀的烷基、烷氧基烷基、芳基氧基烷基，如苯氧基甲基、芳基和烷氧基等，并且R7為C1至C20線性的、支鏈的或環(huán)狀的烷基或?；⑼檠趸榛?、芳基氧基烷基，如苯氧基甲基、芳基和烷氧基等，優(yōu)選的用于根據(jù)本發(fā)明的前藥形式的單磷酸酯酯為那些其中R5為C1至C20為線性的或支鏈的鏈烷基，更優(yōu)選地C1～C3烷基。
術語“保護基”或“封閉基團(blocking group)”在上下文中，指化學基團或成分，用于預防其他的化學成分如胺、羥基或巰基參與指定反應路線的反應并且其在溫和的條件下容易去除，所述的溫和條件不對保護基連接的分子或化合物產(chǎn)生不利的影響。在本發(fā)明中，可以使用多種保護基以產(chǎn)生根據(jù)本發(fā)明的化合物，優(yōu)選的基團包括苯甲酸酯基以保護或封閉伯或仲羥基以及甲硅烷基基團(具體地，叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基或三甲基甲硅烷基或相關的甲硅烷基保護基)以封閉伯(或仲)羥基。本領域的普通技術人員將意識到可用于產(chǎn)生本發(fā)明化合物和中間體的多種保護基。
說明書中通篇使用的術語″抑制性有效的濃度″或″抑制性有效量″用來描述基本上或顯著地抑制易感病毒的生長或復制的根據(jù)本發(fā)明化合物的濃度或量，所述的病毒尤其是包括人免疫缺陷病毒1和2(HIV-1和HIV-2)、人T-細胞白血病病毒1和2(HTLV-1和HTLV-2)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人乳頭瘤病毒(HPV)、腺病毒、B型肝炎病毒(HBV)、C型肝炎病毒(HCV)、Epstein-Barr病毒(EBV)、水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)、巨細胞病毒(CMV)、單純皰疹病毒1和2(HSV-1和HSV-2)、人皰疹病毒8(HHV-8，已知也為卡波西肉瘤相關病毒)和黃病毒、包括黃熱病毒、登革病毒、日本腦炎和西尼羅腦炎病毒等。
說明書中通篇使用的術語“預防有效量”用來描述本發(fā)明化合物的濃度或用量，對在預防、降低下列病毒感染的可能性或延緩患者中由下列病毒引起的感染的發(fā)作的預防有效人免疫缺陷病毒1和2(HIV-l和HIV-2)、人T-細胞白血病病毒1和2(HTLV-1和HTLV-2)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人乳頭瘤病毒(HPV)，、腺病毒、B型肝炎病毒(HBV)、C型肝炎病毒(HCV)、Epstein-Barr病毒(EBV)、水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)、巨細胞病毒(CMV)、單純皰疹病毒1和2(HSV-1和HSV-2)、人皰疹病毒8(HHV-8，已知也為卡波西肉瘤相關病毒)和黃病毒，包括黃熱病毒、登革病毒、日本腦炎和西尼羅腦炎病毒等。
術語“同時給藥”或“聯(lián)合治療”用于描述一種療法，其中至少兩種活性化合物以有效量同時于治療病毒感染。盡管術語同時給藥優(yōu)選地包括將兩種活性化合物同時給藥患者，但是并不是必要地所述的化合物同時給藥子患者，盡管單個化合物的有效量同時存在于患者體內(nèi)。根據(jù)本發(fā)明化合物可與一或多種抗病毒劑一起給藥，所述的藥劑包括抗HIV劑如核苷逆轉錄酶抑制劑(NRTI)、非-核苷逆轉錄酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、融合抑制劑，其中，示例性的化合物可包括，例如，3TC(拉米夫定)、AZT(齊多夫定)、(-)-FTC、ddI(地達諾新)、ddC(扎西他濱)、阿巴卡韋(ABC)、替諾福韋(PMPA)、D-D4FC(逆t)、D4T(司他夫定)、Racivir、L-FddC、L-FD4C、NVP(奈韋拉平)、DLV(地拉韋啶)、EFV(依法韋侖)、SQVM(甲磺酸噻喹努佛)、RTV(利托那韋)、IDV(茚地那韋)、SQV(沙奎那韋)、NFV(Nelfinavir)、APV(安潑那韋)、LPV(洛匹那韋)、融合抑制劑如T20，其中，fuseon及其混合物，包括目前在臨床試驗或在開發(fā)中的抗HIV化合物。共同給藥也包括二核苷類似物(即，其中至少兩種生物活性核苷通過化學連接基團進行化學連接的化合物，所述的的連接基團如，例如，不限于，磷酸酯基團或羧酸酯基團等)或其他雙重拮抗劑的給藥，其中二核苷化合物中至少一種活性核苷化合物為不是這里描述的化合物。
根據(jù)本發(fā)明的化合物可用于具有生物/藥理活性的藥物組合物，以用于治療例如病毒感染以及許多其他的疾病和/或疾病狀態(tài)，所述的疾病或疾病狀態(tài)繼發(fā)于病毒感染出現(xiàn)或發(fā)生。這些組合物包括有效量的上述公開的化合物中任何一或多種，任選結合可藥用添加劑、載體或賦形劑。根據(jù)本發(fā)明化合物也可用作用于合成顯示生物活性的化合物中間體以及判定本發(fā)明的化合物以及其他的生物活性化合物的生物活性的標準。
本發(fā)明的組合物可一或多種可藥用載體按照常規(guī)的方式進行配方。可用于這些藥物組合物的可藥用載體包括，但不限于，離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白如人血清白蛋白，緩沖物質(zhì)如磷酸鹽、氨基乙酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和的植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、鹽或電解質(zhì)如硫酸谷醇溶蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠體硅酸、三硅酸鎂、聚乙烯基吡咯烷酮、基于纖維素的物質(zhì)、聚乙二醇、羧基甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙基烯嵌段聚合物、聚乙二醇以及羊毛脂。
本發(fā)明的組合物可經(jīng)口服、腸胃外、吸入噴霧、局部、直腸、鼻、面頰、陰道或通過植入的長效制劑給藥。這里使用的術語″腸胃外″包括皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、關節(jié)內(nèi)、滑液內(nèi)、胸內(nèi)、鞘內(nèi)、肝臟內(nèi)、損害部位內(nèi)以及顱內(nèi)注射或輸液技術。優(yōu)選地，組合物經(jīng)口服、腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥。
本發(fā)明的組合物的無菌注射形式可為水性或油性懸浮液。這些懸浮液可根據(jù)本領域公知的技術進行配制，利用合適的分散或濕潤劑以及助懸劑。無菌注射劑也可為在無毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌注射溶液或懸浮液，例如為在1，3-丁二醇中的溶液?？墒褂玫目山邮艿娜苊胶腿軇樗?、Ringer′s溶液以及等張的氯化鈉溶液。此外，無菌的、不揮發(fā)性油通常用作溶劑或懸浮介質(zhì)。為了這種目的，可以使用任何溫和的不揮發(fā)性油包括合成的單-或二-甘油酯。脂肪酸，如油酸以及其甘油酯衍生物可用于制備注射劑，如天然的藥用可接受的油，如橄欖油或蓖麻油，尤其是其 聚氧乙烯化的衍生物。這些油溶液或懸浮液也可包含長-鏈 醇 稀釋劑或分散劑，如Ph.Helv或類似的醇。
本發(fā)明的藥物組合物可以任何口服可接受的劑型經(jīng)口服給藥，包括但不限于，膠囊、片劑、水性懸浮液或溶液。在口服片劑的情形下，通常使用的載體包括乳糖和玉米淀粉。潤滑劑，如硬脂酸鎂，也可典型地加入。對于膠囊形式的口服給藥，有用的稀釋劑包括乳糖以及干燥的玉米淀粉。當需要水性懸浮液用于口服的時候，活性成分與乳化以及混懸劑混合。如果需要，一些甜味劑、調(diào)味劑或著色劑劑也可加入。或者，本發(fā)明的藥物組合物可以栓劑的形式經(jīng)直腸給藥。這些劑型可通過將所述的藥劑與合適的非刺激性的賦形劑進行混合物，所述的賦性劑在室溫為固體但是在直腸唯獨為液體并因此在直腸中熔化從而釋放藥物。所述的物質(zhì)包括可可脂、蜂蠟和聚乙二醇。
本發(fā)明的藥物組合物還可經(jīng)局部給藥，尤其是治療的目標包括局部應用容易接觸的區(qū)域或器官的時候，包括眼睛、皮膚或較末端的腸道。合適的局部制劑容易配制以用于這些區(qū)域或器官的每一種。
用于較末端的腸道的局部應用可用直腸制劑(見上)實現(xiàn)或以合適的灌腸劑實現(xiàn)。局部-透皮貼劑也可使用。
對于局部應用，藥物組合物可配制在合適的軟膏種，活性成分懸浮或溶解在一或多種載體中。用于本發(fā)明化合物局部給藥的載體包括，但不限于，礦物油、液體凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蠟以及水?；蛘?，藥物組合物可配制在合適的洗液或乳膏中，活性成分懸浮或溶解在一或多種可藥用載體中。合適的載體包括但不限于礦物油、脫水山梨醇單硬脂酸酯，聚聚山梨酯60、鯨蠟基1酯蠟、cetearyl醇、2-辛基十二(烷)醇、芐基醇以及水。
對于眼用，藥物組合物可配制成在等張、調(diào)節(jié)pH的無菌鹽水中微粉化的懸浮液，或，優(yōu)選地，為在等張、調(diào)節(jié)pH的無菌鹽水溶液，有或無防腐劑如benzyl alkonium chloride?；蛘?，對于眼科使用，藥物組合物在軟膏如凡士林中配制。
本發(fā)明的藥物組合物也可經(jīng)鼻氣霧劑或吸入給藥。所述的組合物可根據(jù)制劑領域公知的技術進行配制并可配制成鹽水溶液，使用芐基醇或其他合適的防腐劑、吸收促進劑以提高生物利用度、碳氟化合物和/或其他常規(guī)的助溶或分散劑。
可與載體物質(zhì)混合物以產(chǎn)生單一劑型的本發(fā)明新穎核苷的用量隨治療的宿主、具體的給藥方式而變。優(yōu)選地，組合物應該配制成以使劑量介于約0.01和150之間，優(yōu)選地約0.5～約25mg/kg患者/天/新穎核苷可對接受這些組合物的患者給藥。
應該理解為針對任何特定的患者的具體的劑量和治療方案將取決于多種因素，包括使用具體化合物的活性、年齡、體重、一般狀況、性別、飲食、給藥時間、排泄速率、藥物聯(lián)用以及治療醫(yī)師的判斷以及具體治療疾病或病癥的嚴重程度。
活性化合物的給藥可在連續(xù)(靜脈滴注)至每天口服給藥數(shù)次(例如，Q.I.D.)并可包括口服、局部、腸胃外、肌肉內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮下、透皮(其可包括滲透增強劑)、含服以及栓劑給藥以及其他的給藥途徑。腸溶包衣的片劑也可用于提高化合物口服給藥途徑的生物利用度。最有效的劑型取決于選擇的具體藥劑的藥代動力學以及患者疾病的嚴重程度?？诜┬褪翘貏e優(yōu)選的，由于服藥方便以及預期的有利的患者順從性。
為了制備根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物，根據(jù)常規(guī)的制藥混合技術，將治療上有效量一或多種根據(jù)本發(fā)明的化合物優(yōu)選地與可藥用載體密切混合以產(chǎn)生劑型。載體可采取多種形式，取決于期望給藥如口服或腸胃外的制劑形式。在制備口服劑型的藥物組合物的時候，可以使用任何常規(guī)的藥用介質(zhì)。因此，對于液體口服制劑如混懸劑、酏劑和溶液、合適的載體以及添加劑包括水、二醇、油類、醇、調(diào)味劑、防腐劑、著色劑等可以使用。對于固體口服制劑如散劑、片劑、膠囊，并且對于固體制劑如栓劑，合適的載體合添加劑包括淀粉、糖載體，如葡聚糖、甘露醇、乳糖以及相關的載體、稀釋劑、成粒劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等可以使用。如果需要，片劑或膠囊劑可以利用標準的技術進行腸溶包衣或緩釋。這些急性的使用可以顯著地改善患者體內(nèi)的化合物的生物利用度。
對于腸胃外制劑，載體通常包括無菌水或氯化鈉水溶液，盡管其他的成分，包括有助于分散的那些，也可包括在其中。當然，其中無菌水可以使用并保持無菌狀態(tài)，組合物和載體也必須是無菌的。也可制備注射懸浮液，在這種情形下適當?shù)囊簯B(tài)載體、助懸劑等也可使用。
脂質(zhì)體懸浮劑(包括靶向病毒抗原的脂質(zhì)體)也可利用常規(guī)的方法進行制備以產(chǎn)生可藥用載體。這對輸送游離核苷、?；?烷基核苷或根據(jù)本發(fā)明的核苷化合物的磷酸酯酯前藥形式是適當?shù)摹?br> 具體地，根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選的實施方案，所述的化合物和組合物可用于治療、預防或延遲哺乳動物病毒感染的發(fā)作，并且具體地HIV、HBV、HSV1和/或II、EBV、HHV-8和黃病毒感染等。在該優(yōu)選的實施方案中，所述的化合物可用于治療HIV、HSVI和/或II、HBV、EBV或HHV-8感染，尤其是人的HIV感染。優(yōu)選地，對于治療、預防或延遲病毒感染的發(fā)作，所述的組合物以約250毫克高達約500mg或更多劑量口服劑型進行給藥，用于治療性治療的劑量范圍內(nèi)至少每天給藥一次，優(yōu)選地，高達每天4次。本發(fā)明的化合物優(yōu)選地經(jīng)口服給藥，但是可經(jīng)腸胃外、局部以栓劑或其他的形式給藥。
根據(jù)本發(fā)明的化合物，由于其對宿主細胞的低毒性，可有利地預防性使用以預防病毒感染或以預防與病毒感染相關的臨床癥狀的發(fā)生，例如繼發(fā)于HIV的AIDS、繼發(fā)于EBV淋巴瘤或繼發(fā)于HHV-8的Kaposi’s肉瘤。因此，本發(fā)明還包括病毒感染預防性治療的方法(預防、降低發(fā)作的可能性或延緩發(fā)作)，并且具體地HIV和EBV以及具體地，繼發(fā)于這些病毒的病癥。在本發(fā)明的這方面，本發(fā)明的組合物可用于預防降低可能性或延緩病毒感染的發(fā)作，具體地，HIV、HSV、EBV或另一種病毒感染或病毒有關的疾病或病癥如AIDS或EBV-有關的淋巴瘤或Kaposi’s肉瘤(HHV-8)。該預防性方法包括對需要所述治療的患者或處于發(fā)展HIV、EBV、HHV-8或其他病毒感染的患者給藥有效減輕、預防或延緩病毒感染的發(fā)作的一定量的本發(fā)明化合物。在根據(jù)本發(fā)明的預防性治療中，優(yōu)選的利用的抗病毒化合物為低毒性并優(yōu)選地對患者無毒性。在本發(fā)明這方面特別優(yōu)選的使用的化合物應該對抗病毒最大地有效并對患者的毒性應該最小。在本發(fā)明的化合物用于預防性病毒感染的治療的情形下，這些化合物可以在用于治療性治療的同樣的劑量范圍給藥(如上所述，作為預防性劑以預防病毒感染或或者的增殖，延長病毒感染的發(fā)作或降低患者顯示病毒感染自身臨床癥狀的可能性。
此外，根據(jù)本發(fā)明化合物可單獨給予或組合其他試劑給予，包括其他的本發(fā)明化合物。一些本發(fā)明化合物可有效用于提高一些根據(jù)本發(fā)明的藥劑的生物活性，通過降低代謝、分解代謝或其他化合物的失活等，為了這種效果可共同給藥。
如上所示，根據(jù)本發(fā)明的化合物可單獨給藥或連用其他的抗病毒劑用于治療上面沒有描述的其他病毒感染，尤其是包括本發(fā)明的其他的化合物或其他地方公開的可用于治療HIV或黃病毒的化合物，包括那些目前用于治療HIV的藥物如核苷逆轉錄酶抑制劑(NRTI)、非核苷逆轉錄酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、融合抑制劑，其中，其示例性的化合物可包括，例如，3TC(拉米夫定)、AZT(齊多夫定)、(-)-FTC、ddI(地達諾新)、ddC(扎西他濱)、阿巴卡韋(ABC)、替諾福韋(PMPA)、D-D4FC(逆t)、D4T(司他夫定)、Racivir、L-FddC、L-D4FC、NVP(奈韋拉平)、DLV(地拉韋啶)、EFV(依法韋侖)、SQVM(甲磺酸噻喹努佛)、RTV(利托那韋)、IDV(茚地那韋)、SQV(沙奎那韋)、NFV(Nelfinavir)、APV(安潑那韋)、LPV(洛匹那韋)、融合抑制劑如T20等，fuseon及其混合物，包括目前正在進行臨床試驗或正在開發(fā)的抗HIV化合物，以及尤其在下述專利文獻中公開的化合物，U.S.6,240,690；6,316,505；6,316,492；6,232,120；6,180,604；6,114,327；5,891,874；5,821,242；5,532,215；5,491,135；5,179,084；以及4,880,784，其中，相關的部分這里引入作為參考。
在上述參考的專利中公開的化合物可與本發(fā)明的化合物聯(lián)合用藥以利用其加和活性或抗HIV和/或抗病毒的治療特性，并且在一些情形下，利用與本發(fā)明化合物的協(xié)同作用。優(yōu)選的與本發(fā)明化合物聯(lián)用的第二種或其他的化合物是那些不抑制HIV或另一種病毒的化合物。一些根據(jù)本發(fā)明的化合物可有效提高一些根據(jù)本發(fā)明藥劑的生物活性，通過降低代謝、分解代謝或其他化合物的失活等，為了這種效果可共同給藥。
本發(fā)明將在下述實施例中進行描述，僅僅是舉例說明。本領域的普通技術人員應該理解這些實施例不以任何方式進行限定并且在不偏離本發(fā)明的精神和范圍的前提下，可以有細節(jié)的變化。
化學本發(fā)明的新化合物通常按照圖4-7C中顯示的一般性的合成描述進行制備。其他的化合物可類似地容易地合成得到。通常，初始制備核苷類似物(即，含堿和糖合成子的化合物)，并按照路線A和B中一般性地描述將相應的4’基團導入，或者按照實驗部分其他的記載。本領域的普通技術人員容易合成根據(jù)本發(fā)明的化合物，通過類似地按照在實驗部分中提供的合成方法，并不需要額外的實驗。
如圖4中所顯示，5’-碘，3’-O-保護的2’-脫氧核苷轉化成4’5’-乙烯基保護的核苷2，后者然后經(jīng)過一系列的步驟通過4’5’-環(huán)氧乙烷保護的核苷4轉化成4’-乙烯基化合物TDK-4-152。如圖5中所示，TKD-4-114從5’-碘-3’-O-保護的核苷化合物7進行合成，通過形成4’，5’-乙烯基化合物8，在保護的核苷的4’-位引入乙炔基以形成核苷10a并最終通過化合物13的3’位甲磺?；牧u基的消去形成2’，3’不飽和的雙鍵。根據(jù)本發(fā)明的其他化合物類似地利用上述化學路線進行合成。
圖5A顯示了從圖5的中間體9合成TDK-4-114的另外一條路線。在本發(fā)明的該方面，中間體9與苯甲酸鉛Pb(OCOPh)或四乙酸鉛Pb(OAc)4在清除堿如三乙基胺、二異丙基乙基胺，或吡啶存在下在合適的溶劑中反應以產(chǎn)生4’5’-二酰基(苯甲?；蛞阴；?保護的核苷2(圖5A)，取決于使用的d鉛(Pb)?；瘎?。引入4’乙炔基通過中間體保護的核苷2，利用鋁乙炔劑EtAl(Cl)-C≡SiMe3(參見圖5A)的作用在溶劑中以產(chǎn)生4’乙炔核苷化合物3(圖5A)。TKD-4-114的合成方法較為直接，消去甲磺?；牧u基形成4’-乙炔基-2’，3’不飽和的核苷化合物7。注意圖5A(和5B)的中間體3可另外從圖5A和5B的4’，5’乙烯基保護的核苷化合物1(與圖5的化合物9相同)合成得到，通過兩步反應以形成圖5B二-O-苯甲酰基化合物3(或二-O-乙?；?的，利用第一步碘和苯甲酸銀(乙酸銀)在溶劑中形成中間體2(圖5B)，其可進一步與苯甲酸銀(乙酸銀)在溶劑中在升高的溫度下反應以形成中間體3(或類似地二-O-乙酰基化合物)。
在圖6中的化學合成路線舉例說明了不飽和的碳環(huán)狀的類似物KMA-23-153(圖6)的合成形成環(huán)戊酮酯1(圖6)，其經(jīng)過多種中間體以形成中間體8(圖6)，可與核苷堿縮合形成中間體9，其中4’酯可轉化成4’-乙炔基化合物10，然后去除5’保護基以產(chǎn)生KMA-23-153。
圖7A顯示了按照Nomura，等，J.Med.Chem.，42，2901-2908(1999)的一般方法進行4’-乙炔基-2’-脫氧核苷化合物的合成，通過在核苷的4’位引入鹵代的乙烯基，發(fā)生脫去鹵化氫形成4’-乙炔基核苷化合物8(圖7A)。圖7B顯示了從易得的糖前體9合成4’-乙炔基-2’-脫氧核苷的步驟(圖7B)，將4’-鹵化的乙烯基導入糖合成子10的4’-甲?；纬?1(圖7B)，然后脫鹵化氫，引入核苷堿并經(jīng)過系列步驟轉化2’羥基形成化合物18。圖7C路線3顯示了在4’-乙炔基類似物中引入2’，3’-雙鍵，利用甲磺酰化3’OH基團然后將甲磺?；闹虚g體與強堿反應以產(chǎn)生在糖的2’，3’位形成雙鍵。
按照一或多種上述合成方法并利用本領域中公知的常規(guī)合成方法，本領域的普通技術人員很容易地得到根據(jù)本發(fā)明的化合物。
具體實施例按照圖5和圖6中的路線A和B的化學合成TKD-4-152(圖4)的合成TKD-4-152(4′-烯丙基胸苷)利用在圖5路線A中顯示的系列反應進行合成，起始物質(zhì)化合物1根據(jù)已經(jīng)發(fā)表的文獻進行合成J.P.H.Verheyden和J.G.Moffatt，J.Org.Chem.，39，3573-3579(1974)。
1-[3-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-2，5-雙脫氧-β-D-甘油基-呋喃戊糖-4-烯基]胸腺嘧啶(3)在0℃氬氣氣氛下，向1(11.9g，30.19mmol)的CH3CN(150mL)溶液中加入DBN(11.2mL，90.57mmol)，并將整個反應在室溫攪拌過夜。用AcOH中和后，將反應混合物蒸發(fā)至干并將殘留物在CHCl3/飽和的NaHCO3水溶液之間分配(200mL×2/50mL)。有機層的硅膠柱層析(己烷/AcOEt＝5/1-1/2)得到為泡沫的2(6.98g，87％)。將化合物2(6.90g，25.92mmol)用飽和的NH3的MeOH溶液(350mL)在0℃處理過夜。將反應混合物蒸發(fā)至干并真空干燥過夜。在0℃氬氣氣氛下向殘留物的DMF溶液(60mL)中加入咪唑(5.29g，77.75mmol)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯(7.81g，51.83mmol)，并將混合物在室溫攪拌過夜。將反應混合物在AcOEt/H2O之間分配(300mL/100mL×5)。有機層的硅膠柱層析(己烷/AcOEt＝10/1-3/1)得到為泡沫的3(7.87g，90％)UV(MeOH)λmax264nm(ε11100)，λmin234nm(ε4900)；1H NMR(CDCl3)δ0.13(6H，s，SiMe)，0.91(9H，s，SiBu-t)，1.94(3H，d，J6，Me＝1.2Hz，Me)，2.13-2.20(1H，m，H-2′a)，2.40(1H，ddd，Jgem＝13.6Hz，J2’b，3’＝3.4Hz and J1’，2’b＝6.2Hz，H-2′b)，4.24(1H，d，Jgem＝2.0Hz，H-5′a)，4.54(1H，d，Jgem＝2.0Hz，H-5′b)，4.75(1H，dd，J2’a，3’＝6.0 and J2’，b，3’＝3.4Hz，H-3′)，6.49(1H，t，J1’，2’a＝J1’，2’b＝6.2Hz，H-1′)，6.98(1H，d，J6，Me＝1.2Hz，H-6)，8.47(1H，br，NH)；FAB-MS m/z 339(M++H)。C16H26N2O4Si分析計算值C，56.78；H，7.74；N，8.28。實測值C，57.04；H，7.99；N，8.14。
3’-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)胸苷4’，5’-環(huán)氧化物(4)在-30℃氬氣氣氛下，向3(20mg，0.059mmol)的CH2Cl2(3mL)溶液中加入二甲基dioxirane(0.072M的丙酮溶液，1.2mL，0.089mmol)，并將反應混合物在-30℃攪拌30分鐘。蒸發(fā)溶劑得到為固體的41H NMR(CDCl3)δ0.09，0.10(6H，各為s，SiMe)，0.90(9H，s，SiBu-t)，1.95(3H，d，J6，Me＝1.3Hz，Me)，2.25(1H，ddd，Jgem＝14.0Hz，J2’a，3’＝4.9Hz and J1’，2’a＝7.1Hz，H-2′a)，2.52(1H，ddd，Jgem＝14.0Hz，J2’b，3’＝1.6Hz and J1’，2’b＝6.2Hz，H-2′b)，3.07(1H，d，Jgem＝3.3Hz，H-5′a)，3.36(1H，d，Jgem＝3.3Hz，H-5′b)，4.26(1H，dd，J2’a，3’＝4.9and J2’，b，3’＝1.6Hz)，6.12(1H，dd，J1’，2’a＝7.1Hz and J1’，2’b＝6.2Hz，H-1′)，7.27(1H，d，J6，Me＝1.3Hz，H-6)，9.06(1H，br，NH)；FAB-MS m/z 355(M++H)。
3’-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-4’-α-烯丙基胸苷(5)在30℃氬氣氣氛下，向3(80mg，0.24mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入二甲基dioxirane(0.098M的丙酮溶液，3.6mL，0.36mmol)，并將混合物在-30℃攪拌30分鐘。蒸發(fā)溶劑并將殘留物真空干燥1小時得到4。在-30℃氬氣氣氛下，向4的CH2Cl2(5mL)溶液中加入烯丙基三甲基甲硅烷(0.11mL，0.71mmol)和SnCl4(1M的CH2Cl2溶液，0.71mL，0.71mmol)，并將混合物在-30℃攪拌4小時。用飽和的NaHCO3水溶液終止后，將反應混合物濾過celite墊。將濾液在CHCl3/飽和的NaHCO3水溶液之間分配(60mL×3/20mL)。將有機層蒸發(fā)至干并將殘留物用飽和的NH3的MeOH溶液(30mL)在室溫處理12小時。有機層蒸發(fā)然后經(jīng)制備性TLC(己烷/EtOAc＝2/3)純化得到泡沫的5(75mg，80％)UV(MeOH)λmax267nm(ε12700)，λmin235nm(ε5900)；1H NMR(CDCl3)δ0.08，0.08(6H，各為s，SiMe)，0.89(9H，s，SiBu-t)，1.87(3H，d，J6，Me＝1.1Hz，Me)，2.16(1H，dd，Jgem＝14.5Hz和J6’a，7’＝8.1Hz，CH2CH＝CH2)，2.27-2.39(2H，m，H-2′)，2.44(1H，dd，Jgem＝14.5Hz和J6’b，7’＝6.3Hz，CH2CH＝CH2)，2.94(1H，br，OH)，3.52(1H，dd，Jgem＝11.8Hz和J5’，OH＝6.1Hz，H-5′a)，3.73(1H，dd，Jgem＝11.8Hz和J5’，OH＝2.7Hz，H-5′b)，4.62(1H，dd，J2’a，3’＝5.8Hz和J2’，b，3’＝7.0Hz，H-3′)，5.07-5.13(2H，m，CH2CH＝CH2)，5.83-5.93(1H，m，CH2CH＝CH2)，6.11(1H，dd，J1’，2’a＝5.8Hz和J1’，2’b＝6.9Hz，H-1′)，7.45(1H，d，J6，Me＝1.1Hz，H-6)，9.40(1H，br，NH)；nOe實驗，H-1’/CH2CH＝CH2(0.8％)，CH2-5’/H-3’(5.3％)，CH2-5’/H-6(0.6％)，HO-5’/H-3’(0.7％)和HO-5’/H-6(1.2％)；FAB-MS m/z 397(M++H)。分析計算值C19H32N2O5Si·1/3H2OC，56.69；H，8.18；N，6.96。實測值C，56.46；H，8.18；N，6.87.
TKD-4-152(4′-烯丙基胸苷)圖4將5(59mg，0.149mmol)和氟化四丁基銨(58mg，0.223mmol)在THF(3mL)中的混合物在室溫攪拌12小時。反應混合物蒸發(fā)后硅膠柱層析(CHCl3/MeOH＝20/1)得到為泡沫的TKD-4-152(37.7mg，90％)UV(MeOH)λmax267nm(ε9300)，λmin235nm(ε2000)；1HNMR 1.86(3H，d，J6，Me＝1.2Hz，Me)，2.27-2.35(3H，m，H-2′和CH2CH＝CH2)，2.42-2.48(1H，m，CH2CH＝CH2)，3.56(1H，d，Jgem＝11.8Hz，H-5′a)，3.64(1H，d，Jgem＝11.8Hz，H-5′b)，4.48(1H，t，J2’a，3’＝J2’b，3’＝5.8Hz，H-3′)，5.04-5.13(2H，m，CH2CH＝CH2)，5.88-5.98(1H，m，CH2CH＝CH2)，6.23(1H，t，J1’，2’a＝J1’，2’b＝6.5Hz，H-1′)，7.89(1H，d，J6，Me＝1.2Hz，H-6)；FAB-MS m/z 283(M++H)，321(M++K)。C13H18N2O5·1/2H2O分析計算值C，54.16；H，6.57；N，9.62。實測值C，53.87；H，6.49；N，9.28.
TKD-4-114(2′，3′-雙脫氫-3′-脫氧-4′-乙炔基胸苷，4′-乙炔基-d4T)利用在路線B中顯示的系列反應進行合成，起始物化合物6根據(jù)發(fā)表的文獻進行合成B.V.Joshi和C.B.Reese，Tetrahedron Lett.，32，2371-2374(1992)。
1-(3-O-乙酰基-2，5-雙脫氧-5-碘-β-D-蘇-呋喃戊糖基)-胸腺嘧啶(7)將6(5.3g，15.05mmol)和Ac2O(4.3mL，45.15mmol)在吡啶(30mL)中的混合物在室溫攪拌13小時。將反應混合物在CHCl3/飽和的NaHCO3水溶液之間分配(250mL×3/50mL)。有機層的硅膠柱層析(己烷/EtOAc＝1/1-1/2)得到為泡末的7(5.53g，93％)1H NMR(CDCl3)δ1.96(3H，s，Me)，2.11(3H，s，Ac)，2.11-2.16(1H，m，H-2’a)，2.82(1H，ddd，Jgem＝15.8Hz，J1’，2’b＝8.0Hz和J2’b，3’＝5.7Hz，H-2’b)，3.32-3.39(2H，m，H-5’)，4.28(1H，dt，J3’，4’＝3.3Hz andJ4’，5’＝7.1Hz，H-4’)，5.48(1H，dd，J2’b，3’＝5.7Hz and J3’，4’＝3.3Hz H-3’)，6.30(1H，dd，J1’，2’a＝2.8Hz和J1’，2’b＝8.0Hz，H-1’)，7.38(1H，d，J6，Me＝0.7Hz，H-6)，8.59(1H，br，NH)；FAB-MS m/z 395(M++H)。
1-(3-O-乙?；?2，5-雙脫氧-β-L-甘油基-呋喃戊糖-4-烯基)-胸腺嘧啶(8)在0℃，向7(5.5g，13.95mmol)的CH3CN(40mL)溶液中加入DBN(6.9mL，55.81mmol)，并將反應混合物在室溫攪拌17小時。用AcOH中和后，將反應混合物蒸發(fā)至干。將殘留物在CHCl3/飽和的NaHCO3水溶液之間分配(200mL×3/50mL)。有機層的硅膠柱層析(己烷/EtOAc＝2/1-1/1)得到為泡沫的8(3.34g，90％)1H NMR(CDCl3)δ1.96(3H，d，J6，Me＝1.3Hz，Me)，2.06(3H，s，Ac)，2.21(1H，dt，Jgem＝15.2Hz，J1’，2’a＝J2’a，3’＝2.7Hz，H-2’a)，2.83(1H，dt，Jgem＝15.2Hz，J1’，2’b＝J2’b，3’＝7.1Hz，H-2’b)，4.51(1H，dd，Jgem＝2.4 Hz，J3’，5’a＝0.8Hz，H-5’a)，4.73(1H，dd，Jgem＝2.4Hz和J3’，5’b＝0.7Hz，H-5’b)，5.70-5.73(1H，m，H-3’)，6.44(1H，dd，J1’，2’a＝2.7Hz和J1’，2’b＝7.1Hz，H-1’)，7.25(1H，d，J6，Me＝1.3Hz，H-6)，8.54(1H，br，NH)；FAB-MS m/z 267(M++H)。
1-[3-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-2，5-雙脫氧-β-L-甘油基-呋喃戊糖-4-烯基]胸腺嘧啶(9)將化合物8(5.2g，19.53mmol)在飽和的NH3的MeOH溶液(150mL)中在室溫保持9小時。蒸發(fā)后，將殘留物溶解在DMF(60mL)中。在0℃向其中加入咪唑(5.32g，78.12mmol)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯(8.83g，58.59mmol)。將反應混合物在室溫攪拌11小時，并且然后在EtOAc/H2O之間分配(250mL/50mL×4)。有機層的硅膠柱層析(己烷/EtOAc＝10/1)得到為泡沫的9(6.43g，97％)UV(MeOH)λmax266nm(ε11600)，λmin236nm(ε5700)；1H NMR(CDCl3)δ0.11和0.14(6H，各為s，SiMe)，0.88(9H，s，SiBu-t)，1.92(3H，d，J6，CH3＝1.2Hz，Me)，2.03(1H，dt，Jgem＝10.8Hz，J1’，2’a＝3.2Hz和J2’a，3’＝3.2Hz，H-2’a)，2.61-2.68(1H，m，H-2’b)，4.25(1H，d，Jgem＝2.2Hz，H-5’a)，4.57(1H，d，Jgem＝2.2Hz，H-5’b)，4.68(1H，dd，J2’a，3’＝3.2Hz，J2’b，3’＝6.8HzH-3’)，6.46(1H，dd，J1’，2’a＝3.2Hz and J1’，2’b＝7.2Hz，H-1’)，7.44(1H，d，J6，CH3＝1.2Hz，H-6)，9.12(1H，br，NH)；FAB-MS m/z 339(M++H)。C16H26N2O4Si分析計算值C，56.78；H，7.74；N，8.28。實測值C，56.61；H，7.87；N，8.17.
1-[2-脫氧-3-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-4-乙炔基-β-D-蘇-呋喃戊糖基]胸腺嘧啶(10a)和1-[2-脫氧-3-O-(叔丁基二甲基-甲硅烷基)-4-乙炔基-β-L-赤-呋喃戊糖基]胸腺嘧啶(10b)在-30℃，向9(60mg，0.177mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入二甲基dioxirane(0.09M的丙酮溶液，3.0mL，0.266mmol)。攪拌0.5小時后，將混合物蒸發(fā)并真空干燥1小時。將殘留物溶解在CH2Cl2(5mL)中。在-30℃氬氣氣氛下，向該溶液中加入三乙炔基鋁(0.3M的CH2Cl2溶液，1.8mL，0.532mmol)，并將反應混合物在室溫攪拌17小時。用飽和的NH4Cl水溶液終止后，將反應混合物濾過celite墊。將濾液在CHCl3/飽和的NH4Cl水溶液之間分配(60mL×3/20mL)。有機層的HPLC分離(己烷/EtOAc＝2/3)得到10a(tR＝10.8分鐘，39.3mg，58％，泡沫)和10b(tR＝16.2分鐘，18.8mg，28％，固體)。10a的物理數(shù)據(jù)UV(MeOH)λmax266nm(ε12100)，λmin235nm(ε6000)；1H NMR(CDCl3)δ0.11和0.16(6H，各為s，SiMe)，0.90(9H，s，SiBu-t)，1.91(3H，d，J6，Me＝1.3Hz，Me)，1.91-1.96(1H，m，H-2’a)，2.33(1H，br，OH)，2.62(1H，s，乙炔基)，2.95(1H，ddd，Jgem＝14.6Hz，J1’，2’b＝7.9Hz和J2’b，3’＝5.5Hz，H-2’b)，3.93(1H，d，Jgem＝11.6Hz，H-5’a)，3.99(1H，d，Jgem＝11.6Hz，H-5’b)，4.49(1H，dd，J2’a，3’＝2.0Hz和J2’b，3’＝5.5Hz，H-3’)，6.39(1H，dd，J1’，2’a＝3.7Hz和J1’，2’b＝7.9Hz，H-1’)，7.65(1H，d，J6，CH3＝1.3Hz，H-6)，8.72(1H，br，NH)；FAB-MS m/z 381(M++H)。分析計算值C18H28N2O5Si·H2OC，54.24；H，7.59；N，7.03。實測值C，54.46；H，7.20；N，6.72.
10b的物理數(shù)據(jù)mp 96-98℃；UV(MeOH)λmax267nm(ε9300)，λmin235nm(ε1700)。1H NMR(CDCl3)δ0.08和0.13(6H，各為s，SiMe)，0.89(9H，s，SiBu-t)，1.93(3H，d，J6，CH3＝0.9Hz，Me)，2.12-2.17(1H，m，H-2’a)，2.63(1H，br，OH)，2.71-2.77(1H，m，H-2’b)，2.75(1H，s，乙炔基)，3.67(1H，d，Jgem＝11.5Hz，H-5’a)，3.74(1H，d，Jgem＝11.5Hz，H-5’b)，4.47(1H，t，J2’a，3’＝J2’b，3’＝5.3Hz，H-3’)，6.30(1H，dd，J1’，2’a＝4.8Hz和J1’，2’b＝6.9Hz，H-1’)，7.80(1H，d，J6，CH3＝0.9Hz，H-6)，9.00(1H，brs，NH)；FAB-MS m/z 381(M++H)。分析計算值C18H28N2O5SiC，56.82；H，7.42；N，7.36。實測值C，56.57；H，7.58；N，7.19.
1-[5-O-乙?；?2-脫氧-3-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-4-乙炔基-β-D-蘇-呋喃戊糖基]胸腺嘧啶(11)在0℃，向10a(161mg，0.423mmol)的吡啶(4mL)溶液中加入Ac2O(120mL，1.269mmol)，并將混合物在室溫攪拌11小時，將反應混合物在CHCl3/飽和的NaHCO3水溶液之間分配(60mL×3/20mL)。有機層的硅膠柱層析(己烷/EtOAc＝3/1)得到為泡沫的11(169.7mg，95％)UV(MeOH)λmax266nm(ε9200)，λmin234nm(ε2000)；1H NMR(CDCl3)δ0.10和0.14(6H，各為s，SiMe)，0.90(9H，s，SiBu-t)，1.90-1.94(4H，m，H-2’a和Me)，2.14(3H，s，Ac)，2.58(1H，s，乙炔基)，3.01(1H，ddd，Jgem＝14.8Hz，J1’，2’b＝8.3Hz和J2’b，3’＝5.0Hz，H-2’b)，4.37(1H，d，Jgem＝11.1Hz，H-5’a)，4.45(1H，d，J2’b，3’＝5.0Hz，H-3’)，4.53(1H，d，Jgem＝11.1Hz，H-5’b)，6.40(1H，dd，J1’，2’a＝2.8Hz和J1’，2’b＝8.3Hz，H-1’)，7.53(1H，d，J6，Me＝1.3Hz，H-6)，8.04(1H，br，NH)；FAB-MS m/z 461(M++K)。分析計算值C20H30N2O6SiC，56.85；H，7.16；N，6.63。實測值C，56.84；H，7.35；N，6.26.
1-(5-O-乙酰基-2-脫氧-4-乙炔基-β-D-蘇-呋喃戊糖基)-胸腺嘧啶(12)在氬氣氣氛下，向11(169.7mg，0.402mmol)的THF(4mL)溶液中加入氟化四丁基銨(1M的THF溶液，602L，0.602mmol)。在室溫攪拌1小時后，蒸發(fā)溶劑，將殘留物硅膠柱層析(CHCl3/MeOH＝100/1)得到為泡沫的12(114.7mg，93％)UV(MeOH)λmax265nm(ε8400)，λmin233nm(ε1700)；1H NMR(CDCl3，加入D2O后)δ1.93(3H，d，J6，Me＝1.3Hz，Me)，2.14-2.18(1H，m，H-2’a)，2.18(3H，s，Ac)，2.59(1H，s，乙炔基)，2.94-3.02(1H，m，H-2’b)，4.22(1H，d，Jgem＝11.4Hz，H-5’a)，4.31(1H，d，J2’b，3’＝5.5Hz，H-3’)，4.68(1H，d，Jgem＝11.4Hz，H-5’b)，6.24(1H，dd，ssJ1’，2’a＝2.9Hz和J1’，2’b＝9.0Hz，H-1’)，7.60(1H，d，J6，Me＝1.3Hz，H-6)；13C NMR(CDCl3)δ12.52，20.84，38.76，63.30，74.73，76.23，79.85，82.08，85.33，111.41，137.93，150.53，163.63，171.98；FAB-HR-MS m/z C14H17N2O6計算值309.1087(M++H)，實測值309.1074.
1-(5-O-乙?；?2-脫氧-3-O-甲烷磺酰基-4-乙炔基-β-D-蘇-呋喃戊糖基)胸腺嘧啶(13)在0℃，向12(76mg，0.247mmol)的吡啶(4mL)溶液中加入甲烷磺酰氯(57μL，0.74mmol)，并將混合物在室溫攪拌16小時。將反應混合物在CHCl3/飽和的NaHCO3水溶液(60mL×3/20mL)之間分配。有機層的硅膠柱層析(CHCl3/MeOH＝100/0-100/1)得到泡沫的13(95.0mg，100％)1H NMR(CDCl3)δ1.96(3H，d，J6，Me＝1.2Hz，Me)，2.16(3H，s，Ac)，2.38(1H，ddd，Jgem＝16.0Hz，J1’，2’a＝3.5Hz和J2’a，3’＝0.7Hz，H-2’a)，2.70(1H，s，乙炔基)，3.11(1H，s，Ms)，3.19(1H，ddd，Jgem＝16.0Hz，J1’，2’b＝8.4Hz和J2’b，3’＝5.5Hz，H-2’b)，4.48(1H，d，Jgem＝11.3Hz，H-5’a)，4.53(1H，d，Jgem＝11.3Hz，H-5’b)，5.27-5.28(1H，m，H-3’)，6.52(1H，dd，J1’，2’a＝3.5Hz和J1’，2’b＝8.4Hz，H-1’)，7.33(1H，d，J6，Me＝1.2Hz，H-6)，8.86(1H，brs，NH)；FAB-MS m/z 387(M++H)。
TKD-4-114(2′，3′-雙脫氫-3′-脫氧-4′-乙炔基胸苷)將13(105mg，0.272mmol)和DBN(101μL，0.815mmol)在CH3CN(10mL)中的混合物回流11小時。用AcOH終止后，將反應混合物在CHCl3/飽和的NaHCO3水溶液(60mL×3/20mL)之間分配。經(jīng)有機層經(jīng)硅膠柱層析(己烷/EtOAc＝1/1)純化后得到的產(chǎn)物溶解在飽和的NH3的MeOH(30mL)溶液中，并在室溫保持12小時。蒸發(fā)溶劑，然后經(jīng)制備性TLC(己烷/EtOAc＝1/1)純化得到固體的TKD-4-114(49.6mg，74％)mp 207-209℃；UV(MeOH)λmax264nm(ε10800)，λmin235nm(ε4800)；1H NMR(CDCl3)δ1.83(3H，s，Me)，2.63(1H，s，乙炔基)，3.47(1H，br，OH)，3.88(1H，d，Jgem＝12.5Hz，H-5’a)，3.96(1H，d，Jgem＝12.5Hz，H-5’b)，5.91(1H，dd，J1’，2’＝1.1Hz和J2’，3’＝5.9Hz，H-2’)，6.30(1H，dd，J1’3’＝2.0Hz和J2’，3’＝5.9Hz，H-3’)，7.16-7.17(1H，m，H-1’)，7.44(1H，d，J6，Me＝1.1Hz，H-6)，9.06(1H，br，NH)；FAB-MS m/z 249(M++H)。C12H12N2O41/6H2O分析計算值C，57.37；H，4.95；N，11.15。實測值C，57.36；H，4.69；N，10.98.
TDK-4-114(圖5A)的另一種化學合成TKD-4-114(2′，3′-雙脫氫-3′-脫氧-4′-乙炔基胸苷，4′-乙炔基-d4T)利用在反應路線(參見圖5A)中顯示的系列反應進行合成，起始物質(zhì)化合物1的制備前面已經(jīng)報告。
二苯甲?；衔?(兩種非對映體的混合物)的制備在0℃氬氣氣氛下，向1(3.98mg，11.76mmol)的甲苯(70mL)溶液中加入i-Pr2NEt(5.1mL，29.4mmol)和Pb(OCOPh)4(20.33g，29.4mmol)，并將混合物攪拌4小時。將反應混合物用飽和的NaHCO3水溶液終止，并濾過celite。將濾液在CHCl3/飽和的NaHCO3水溶液之間分配。有機層經(jīng)硅膠柱層析(己烷/AcOEt＝2/1)純化得到泡沫的2(4.84g，71％)1H NMR(CDCl3)δ0.02，0.07，0.15和0.20(6H，各為s，SiMe)，0.75和0.93(9H，各為s，SiBu-t)，1.69和1.91(3H，各為d，J6，Me＝1.2Hz，Me-5)，1.91-2.00，2.33-2.40，2.76-2.83和2.94-3.01(2H，各為m，H-2’)，4.73和4.95(1H，t和d，J2’3’＝6.8和4.4Hz，H-3’)，4.91，5.08，5.11和5.19(2H，各為d，Jgem＝12.0Hz，CH2-5’)，4.24(1H，d，Jgem＝2.0Hz)，6.34和6.64(1H，d和dd，J1’，2’＝6.4和J1’，2’＝2.8，8.2Hz，H-1’)，7.32-7.37，7.45-7.51，7.58-7.67，7.92-7.94，8.02-8.04和8.04-8.13(11H，各為m，H-6和Ph)，8.92(1H，br，NH)；FAB-MS(m/z)581(M++H)。C30H36N2O8Si分析計算值C，62.05；H，6.25；N，4.82。實測值C，61.85；H，6.37；N，4.70。
1-[5-O-苯甲?；?3-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-2-脫氧-4-(三甲基甲硅烷基)乙炔基-β-D-蘇-呋喃戊糖基]胸腺嘧啶(3)在0℃氬氣氣氛下，向HC≡CSiMe3(3.2mL，22.44mmol)的甲苯(40mL)溶液中加入BuLi(2.44M的己烷溶液)(9.2mL，22.44mmol)，并將混合物攪拌30分鐘。在0℃，向該溶液中加入EtAlCl2(0.94M的己烷溶液)(23.4mL，22.44mmol)。將混合物攪拌30分鐘后，在0℃加入2(3.26g，5.61mmol)的CH2Cl2溶液(50mL)，并將混合物攪拌過夜。將反應混合物在CHCl3/飽和的NaHCO3水溶液之間分配。將有機層經(jīng)硅膠柱層析(己烷/EtOAc＝3/1)純化得到為泡沫的3(1.14g，37％)1H NMR(CDCl3)δ0.09和0.13(6H，各為s，SiMe)，0.12(9H，s，C≡CSiMe3)，0.89(9H，s，SiBu-t)，1.90(3H，d，JMe，6＝0.8Hz，Me-5)，1.95(1H，ddd，J1’，2’a＝2.8，J2’a，3’＝1.2和J2’a，2’b＝14.6Hz，H-2’a)，3.02(1H，ddd，J1’，2’b＝8.2，J2’b，3’＝5.2和J2’a，2’b＝14.6Hz，H-2’b)，4.50(1H，dd，J2’a，3’＝1.2和J2’b，3’＝5.2Hz，H-3’)，4.64(1H，d，J5’a，5’b＝10.8Hz，H-5’a)，4.68(1H，d，J5’a，5’b＝10.8Hz，H-5’b)，6.40(1H，d，J1’，2’a＝2.8和J1’，2’b＝8.2Hz，H-1’)，7.44-7.48，7.57-7.61和8.07-8.10(6H，各為m，H-6和Ph)，8.24(1H，br)；FAB-MS(m/z)557(M++H)1-[5-O-苯甲?；?2-脫氧-4-乙炔基-β-D-蘇-呋喃戊糖基]胸腺嘧啶(4)在0℃，向3(208.2mg，0.37mmol)的THF(5mL)溶液中加入Bu4NF3H2O(290.2mg，1.11mmol)，并將混合物攪拌1小時。將反應混合物蒸發(fā)至干。將殘留物硅膠柱層析(2％MeOH的CH2Cl2溶液)得到為泡沫的3(115.3mg，84％)1H NMR(CDCl3+D2O)δ1.94(3H，d，JMe，6＝1.2Hz，Me-5)，2.15(1H，dd，J1’，2’a＝3.2和J2’a，2’b＝15.0Hz，H-2’a)，2.60(1H，s，C≡CH)，3.01(1H，ddd，J1’，2’b＝9.0，J2’b，3’＝5.2和J2’a，2’b＝15.0Hz，H-2’b)，4.34(1H，d，J2’b，3’＝5.2Hz，H-3’)，4.40(1H，d，J5’a，5’b＝11.2Hz)，4.96(1H，d，J5’a，5’b＝11.2Hz)，6.34(1H，d，J1’，2’a＝3.2和J1’，2’b＝9.0Hz，H-1’)，7.46-7.51，7.61-7.65和8.09-8.11(5H，各為m，Ph)，7.70(1H，d，JMe，6＝1.2Hz)，8.47(1H，br)；FAB-MS(m/z)371(M++H)。
1-[5-O-苯甲?；?2-脫氧-4-乙炔基-3-O-甲烷磺酰基-β-D-蘇-呋喃戊糖基]胸腺嘧啶(5)在0℃氬氣氣氛下，向4(110.9mg，0.30mmol)的吡啶(3.5mL)溶液中加入MsCl(0.12mL，1.5mmol)，并將混合物攪拌6小時。將反應混合物在CHCl3/飽和的NaHCO3水溶液之間分配。有機層的硅膠柱層析(1.5％MeOH的CH2Cl2溶液)得到為泡沫的5(105.2mg，78％)1H NMR(CDCl3)δ1.92(3H，d，JMe，6＝1.2Hz，Me-5)，2.43(1H，dd，J1’，2’a＝3.6和J2’a，2’b＝16.0Hz，H-2’a)，2.72(1H，s，C≡CH)，3.07(3H，s，SO2Me)，3.23(1H，ddd，J1’，2’b＝8.2，J2’b，3’＝5.2和J2’a，2’b＝16.0Hz，H-2’b)，4.72(1H，d，J5’a，5’b＝11.2Hz)，4.76(1H，d，J5’a，5’b＝11.2Hz)，5.37(1H，d，J2’b，3’＝5.2Hz，H-3’)，6.56(1H，d，J1’，2’a＝3.6和J1’，2’b＝98.2Hz，H-1’)，7.36(1H，d，JMe，6＝1.2Hz)，7.47-7.51，7.60-7.64和8.07-8.10(5H，各為m，Ph)，8.32(1H，br)；FAB-MS(m/z)449(M++H)。
5’-O-苯甲?；?2’，3’-雙脫氫-3’-脫氧-4’-乙炔基胸苷(6)在0℃氬氣氣氛下，向5(101.9mg，0.23mmol)的CH3CN(4mL)溶液中加入DBN(67μL，0.54mmol)，并將混合物在80℃攪拌9小時。將反應混合物加入AcOH中和，并在CHCl3/飽和的NaHCO3水溶液之間分配。硅膠柱層析(1.5％MeOH的CH2Cl2溶液)有機層的得到固體的6(60mg，74％)1HNMR(CDCl3)δ1.42(3H，d，JMe，6＝1.2Hz，Me-5)，2.70(1H，s，C≡sCH)，)，4.59(1H，d，J5’a，5’b＝12.0Hz，H-5’a)，4.76(1H，d，J5’a，5’b＝12.0Hz，H-5’b)，5.99(1H，dd，J1’，2’＝1.2，J2’，3’＝5.9，H-2’)，6.38(1H，dd，J1’，3’＝2.0和J2’，3’＝5.9Hz，H-3’)，6.98(1H，d，JMe，6＝1.2Hz)，7.12(1H，m，H-1’)，7.45-7.49，7.60-7.63和8.00-8.03(5H，各為m，Ph)，8.37(1H，br)；FAB-MS(m/z)353(M++H)。
2’，3’-雙脫氫-3’-脫氧-4’-乙炔基胸苷(7)(TKD-4-114，4’-乙炔基-d4T)在0℃氬氣氣氛下，向6(56mg，0.16mmol)的MeOH(3mL)懸浮液中加入1M NaOMe(0.32mL，0.32mmol)，并將混合物在室溫攪拌0小時。將反應混合物加入AcOH中和并在硅膠柱上層析(2％MeOH的CH2Cl2溶液)得到固體的7(35.8mg，90％)。
7(TKD-4-114)的物理數(shù)據(jù)同上。
KMA-23-153TKD-4-114的碳環(huán)類似物(參見圖6)的化學合成利用在圖6中顯示的反應路線的順序，KMA-23-153制備成外消旋混合物(等量的D-和L-對映體混合物)。起始物質(zhì)2的制備方法已經(jīng)發(fā)表參見，Kato等，Chem.Pharm.Bull.，47，1256-1264(1999)。
1-羥基甲基-2-氧代環(huán)戊烷羧酸甲基酯(3，圖6)在0℃正壓干燥的氬氣下，向2(10g，55.48mmol)和HMPA(29mL，166.44mmol)的THF(450ml)懸浮液中加入Bu3SnCl(16.5mL，61.0mmol)。在0℃攪拌30分鐘后，將(CH2O)n(8.32g，277.4mmol)加入至混合物中并將整個反應混合物在室溫攪拌48小時。將反應混合物在AcOEt和鹽水之間分配。將有機層干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)，并在硅膠柱上層析(己烷/EtOAc＝1/1)。得到油狀的3(7.13g，77％)。
1HNMR(CDCl3)δ1.97-2.18(2H，m，CH2)，2.21-2.25(1H，m，CH2)，2.29-2.53(3H，m，OH和CH2)，2.62-2.66(1H，m，CH2)，3.74(3H，s，Me)，3.81(1H，dd，J＝11.2和8.0Hz，CH2OH)，3.89(1H，dd，J＝11.2和4.4Hz，CH2OH)。
1-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基甲基)-2-氧代-環(huán)戊烷羧酸甲基酯(圖6的4)將3(10.35g，60.1mmol)、咪唑(8.18g，120.2mmol)和TBDPSCl(15.6ml，60.1mmol)在DMF(40ml)中的混合物在室溫在正壓干燥的氬氣下攪拌16小時。將混合物在EtOAc和飽和的NaHCO3水溶液之間分配。將有機層干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)。將得到的糖漿殘留物用MeOH(約40ml)處理得到沉淀的4。將該步驟再重復3次得到白色固體的4(18.97g，77％)。
1HNMR(CDCl3)δ1.02(9H，s，SiBu-t)，2.03-2.11(2H，m，CH2)，2.26-2.35(1H，m，CH2)，2.41-2.53(3H，m，CH2)，3.65(3H，s，Me)，3.87(1H，d，J＝9.6Hz，CH2OSi)，4.09(1H，d，J＝9.6Hz，CH2OSi)，7.37-7.46(6H，m，Ph)，7.61-7.65(4H，m，Ph)。
1-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基甲基)-2-氧代環(huán)戊-3-烯羧酸甲基酯(5，圖6)在0℃正壓干燥的氬氣下，向攪拌的4(3.58g，8.72mmol)和Et3N(6.1ml，43.6mmol)的混合物中加入Me3SiOSO2CF3(2.56mL，13.0mmol)。將混合物在同樣的溫度下攪拌30分鐘，并且然后在CH2Cl2和飽和的NaHCO3水溶液之間分配。將有機層干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)。將殘留物溶解在DMSO(12mL)中。向該溶液中加入Pd(OAc)2(98mg，0.44mmol)，并將混合物在正壓O2下攪拌36小時。將混合物在EtOAc和鹽水之間分配。將有機層干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)，并在硅膠柱上層析(己烷/EtOAc＝5/1)得到為白色固體的5(3.13g，88％)。
1HNMR(CDCl3)δ0.97(9H，s，SiBu-t)，2.99-3.05(1H，m，CH2)，3.21-3.26(1H，m，CH2)，3.66(3H，s，Me)，3.98(1H，d，J＝10.0Hz，CH2OSi)，4.18((1H，d，J＝10.0Hz，CH2OSi)，6.24-6.26(1H，m，CH＝CH)，7.37-7.45(6H，m，Ph)，7.58-7.62(4H，m，Ph)，7.86-7.88(1H，m，CH＝CH)。
1-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基甲基)-(反式-2-乙酰氧基)環(huán)戊-3-烯羧酸甲基酯(6，圖6)將NaBH4(628mg，16.6mmol)和MeOH(50ml)的混合物冷卻并在-70℃攪拌。向其中用15分鐘滴加5(3.39g，8.3mmol)和CeCl37H2O(3.1g，8.3mmol)在THF/MeOH＝1/1(50ml)中的混合物。將得到的懸浮液在-70℃攪拌1小時。加入AcOH(約1mL)終止反應。將反應混合物蒸發(fā)。將殘留物懸浮在MeCN(15ml)中。向該懸浮液中加入DMAP(1.02g，8.3mmol)、i-Pr2NEt(1.45mL，8，3mmol)和Ac2O(1.57mL，16.6mmol)。將混合物在0°在干燥的氬氣正壓下攪拌30分鐘，并在CH2Cl2和飽和的NaHCO3水溶液之間分配。將有機層干燥(Na2SO4)、蒸發(fā)并在硅膠柱上層析(己烷/EtOAc＝4/1)。得到油狀的6(3.74g，100％)。
1HNMR(CDCl3)δ1.02(9H，s，SiBu-t)，1.87(3H，s，Ac)，2.50-2.55(1H，m，CH2)，2.91-2.97(1H，m，CH2)，3.71(3H，s，Me)，3.87(1H，d，J＝9.6Hz，CH2OSi)，4.08(1H，d，J＝9.6Hz，CH2OSi)，5.76-5.78(1H，m，CH＝CH)，5.99-6.00(1H，m，CH＝CH)，6.07-6.08(1H，m，AcOCH)，7.29-7.45(4H，m，Ph)，7.61-7.65(4H，m，Ph)。
1-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基甲基)-(反式-4-羥基)環(huán)戊-2-烯羧酸甲基酯(7，圖6)將6(1.87g，4.13mmol)、PdCl2(MeCN)2(106mg，0.41mmol)和對醌224mg，2.07mmol)在THF(17mL)中的混合物在氬氣正壓下回流3小時。將混合物在CH2Cl2以及飽和的Na2S2O3水溶液之間分配。將有機層干燥(Na2SO4)、蒸發(fā)。將殘留物溶解在MeOH(5ml)中并在攪拌下用K2CO3(685mg，4.96mmol)處理1小時。將混合物在CHCl3和鹽水之間分配。將有機層干燥(Na2SO4)、蒸發(fā)并在硅膠柱上層析(己烷/EtOAc＝6/1)。得到油狀的7(1.14g，67％)。
1HNMR(CDCl3)δ1.02(9H，s，SiBu-t)，1.87(1H，dd，J＝14.4和2.4Hz，CH2)，2.73(1H，dd，J＝14.4和7.2Hz，CH2)，3.65(3H，s，Me)，3.79(1H，d，J＝9.6Hz，CH2OSi)，3.85(1H，d，J＝9.6Hz，CH2OSi)，4.82-4.87(1H，m，CHOH)，5.84-5.87(1H，m，CH＝CH)，6.02-6.04(1H，m，CH＝CH)，7.38-7.44(6H，m，Ph)，7.63-7.65(4H，m，Ph)。
1-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基甲基)-(順式-4-羥基)環(huán)戊-2-烯羧酸甲基酯(8，圖6)在氬氣正壓下，將7(1.08g，2.63mmol)、Ph3P(897mg，3.42mmol)和AcOH(301μL，5.26mmol)在THF(10mL)中的混合物冷卻到0℃。向其中滴加偶氮二羧酸二乙基酯(2.3M的甲苯溶液，1.49mL，3.42mol)。攪拌30分鐘后，將混合物在CH2Cl2以及飽和的NaHCO3水溶液之間分配。將有機層干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)。將殘留物用K2CO3(727mg，5.26mmol)的MeOH溶液(5mL)處理1小時。將混合物在CHCl3和鹽水之間分配。將有機層干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)，并在硅膠柱上層析(己烷/EtOAc＝4/1)。得到油狀的8(892mg，83％)。
1HNMR(CDCl3)δ1.02(9H，s，SiBu-t)，2.20-2.31(3H，m，CH2和OH)，3.70(1H，d，J＝9.6Hz，CH2OSi)，3.71(3H，s，Me)，3.87(1H，d，J＝9.6Hz，CH2OSi)，4.76-4.81(1H，m，CHOH)，5.88(1H，d，J＝5.6Hz，CH＝CH)，6.03(1H，dd，J＝5.6和2.4Hz，CH＝CH)，7.36-7.46(6H，m，Ph)，7.61-7.65(4H，m，Ph)。
1-[順式-4-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基甲基)-反式-4-甲氧基羰基環(huán)戊-2-烯-1-基]胸腺嘧啶(9，圖6)在0°正壓干燥的氬氣下，向PPh3(2.28g，8.68mmol)的THF(25mL)溶液中滴加偶氮二羧酸二乙基酯(2.3M的甲苯溶液，3.63mL，8.35mol)。攪拌30分鐘后，滴加包含8(1.37g，3.34mmol)和N3-苯甲?；叵汆奏?1.15g，5.01mmol)的THF(76mL)懸浮液。將混合物在在室溫攪拌70小時，蒸發(fā)并且然后用2M NaOMe的MeOH(6.7mL)溶液處理2小時。用AcOH(1.15mL)中和反應混合物并且然后在CH2Cl2和飽和的NaHCO3水溶液之間分配。將有機層干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)，并在硅膠柱上層析(己烷/EtOAc＝1/1)。得到白色泡沫的9(1.21g，70％)。
1HNMR(CDCl3)δ1.05(9H，s，SiBu-t)，1.74(3H，d，J＝1.2Hz，胸腺嘧啶-5-Me)，1.75(1H，dd，J＝14.0和6.8Hz，CH2)，3.01(1H，dd，J＝14.0和8.4Hz，CH2)，3.70(3H，s，Me)，3.87(1H，d，J＝10.0Hz，CH2OSi)，3.90(1H，d，J＝10.0Hz，CH2OSi)，5.79(1H，dd，J＝5.2和2.0Hz，CH＝CH)，5.83-5.88(1H，m，CHN)，6.10(1H，dd，J＝5.2和2.4Hz，CH＝CH)，6.88(1H，q，J＝1.2Hz，胸腺嘧啶-H-6)，4.36-7.47(6H，m，Ph)，7.61-7.64(4H，m，Ph)，8.89(1H，br，胸腺嘧啶-NH)。
1-[順式-4-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基甲基)-反式-4-乙炔基環(huán)戊-2-烯-1-基]胸腺嘧啶(10，圖6)在-70℃正壓干燥的氬氣下，向9(550mg，1.06mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液中滴加i-Bu2AlH(1.01M的甲苯溶液，1.16mL，1.17mmol)。攪拌20分鐘后，加入另外的異Bu2AlH(2.32mL，2.34mmol)并再攪拌20分鐘。用AcOH(200mL)終止后蒸發(fā)。短硅膠柱層析(己烷/EtOAc＝1/5)得到反式-4-羥基甲基衍生物(294mg)。將反式-4-羥基甲基衍生物溶解在CH2Cl2(10mL)中，并用Dess-Martin periodinane(477mg，1.12mmol)氧化。攪拌1.5小時后，將混合物在CH2Cl2和飽和的NaHCO3水溶液之間分配。將有機層干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)得到粗制的反式-4-醛(274mg)。將醛溶解在包含K2CO3(310mg，2.24mmol)的MeOH中，并在0°正壓干燥的氬氣下攪拌10分鐘。向其中加入二甲基(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸酯*(270mg，1.4mmol)。將混合物攪拌1小時，并且然后在EtOAc和飽和的NaHCO3水溶液之間分配。將有機層干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)，并在硅膠柱上層析(己烷/EtOAc＝1/1)。得到白色泡沫的10(138mg，27％)。
1HNMR(CDCl3)δ1.07(9H，s，SiBu-t)，1.71(3H，d，J＝1.2Hz，胸腺嘧啶-5-Me)，2.02(1H，dd，J＝13.2和7.6Hz，CH2)，2.20(1H，s，C≡CH)，2.70(1H，dd，J＝13.2和8.0Hz，CH2)，3.69(1H，d，J＝9.6Hz，CH2OSi)，3.83(1H，d，J＝9.6Hz，CH2OSi)，5.76(1H，dd，J＝5.2和2.0Hz，CH＝CH)，5.91-5.95(1H，m，CHN)，6.02(1H，dd，J＝5.2和2.4Hz，CH＝CH)，6.98(1H，q，J＝1.2Hz，胸腺嘧啶-H-6)，7.37-7.48(6H，m，Ph)，7.63-7.66(4H，m，Ph)，8.20(1H，br，胸腺嘧啶-NH)。
FAB-MS(m/z)485(M++H)。
*該試劑的制備參見P.Callant，L.D’Haenes和M.Vandewalle，Synth.Commun.，14，155-161(1984)。
*該試劑用于將RCHO轉化為RC≡CHI.Gillaizeau，I.M.Lagoja，S.P.Nolan，V.Aucagne，J.Rozenski，P.Herdewijn和L.A.Agrofoglio，Eur.J.Org.Chem.，666-671(2003)。
1-(順式-4-羥基甲基-反式-4-乙炔基環(huán)戊-2-烯-1-基)胸腺嘧啶(11，圖6)KMA-23-153將10(101mg，0.21mmol)和Bu4NF(1M的THF溶液，230μL，0.23mmol)在THF(3mL)中的混合物在室溫攪拌2小時。向該混合物中加入4-二甲基氨基吡啶(51mg，0.42mmol)、i-Pr2NEt(73μL，0.42mmol)和Ac2O(80μL，0.84mmol)。將反應混合物攪拌30分鐘，并在CH2Cl2和飽和的NaHCO3水溶液之間分配。將有機層干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)，并在硅膠柱上層析(AcOEt)。得到為白色固體的乙酸酯(52mg)。將該乙酸酯用NH3/MeOH(35ml)在低于0℃下處理12小時。蒸發(fā)溶劑過程中，出現(xiàn)沉淀。將沉淀用熱苯(50ml)洗滌得到分析純的11(31mg，60％)。
1HNMR(CDCl3)δ1.96-1.94(5H，m，CH2，OH和胸腺嘧啶-5-Me)，2.30(1H，s，C≡CH)，2.81(1H，dd，J＝13.6和8.8Hz，CH2)，3.65(1H，dd，J＝10.0和7.6Hz，CH2OH)，3.78(1H，dd，J＝10.0和4.8Hz，CH2OH)，5.78-5.80(1H，m，CH＝CH)，5.85-5.89(1H，m，CHN)，6.04-6.06(1H，m，CH＝CH)，7.10(1H，q，J＝1.2Hz，胸腺嘧啶-H-6)，8.09(1H，br，胸腺嘧啶-NH)。C13H14N2O31/5H2O分析計算值C，62.49；H，5.81；N，11.21。實測值C，62.57；H，5.65；N，11.22。
生物活性方法和材料化學品4’-D4T類似物(圖1)在Dr.Hiromichi實驗室Tanaka，School ofPharmaceutical Sciences，Showa University，Japan中合成。dThd、D4T和AZT從Sigma-Aldrich Corp.St.Louis，MO購買得到。ddI從ICN Biochemicals Inc.，Aurora，OH購得。3TC從Triangle Pharmaceuticals，Durham，NC得到。LFd4C從Vion Inc.，New Haven，CT得到。使用的所有其他試劑為試劑級或更高。
細胞系以及病毒用于毒性研究和病毒繁殖的H9細胞系，以及用于抗病毒活性研究的MT-2細胞系都從AIDS Research and Reference ReagentProgram of the National Institutes of Health得到，并由Dr.Robert Gallo和Dr.Douglas Richman分別惠贈。HIV-1林IIIB來自Dr.John Mellors。
抗病毒活性的測定基本上按照前述的方法(31)，將化合物在用HIV-1株IIIB感染的MT-2細胞中測試。簡言之，將連續(xù)稀釋的藥物以一式三份地放入到96孔組織培養(yǎng)板中，然后將在補充10％透析的胎牛血清和10μg/ml卡那霉素的RPMI 1640培養(yǎng)基中生長的MT-2細胞，以104細胞/100μl±0.1m.o.i.的HIV-1IIIB。5天后，將MTT染料加入到孔中并在595nm處測定染料的顏色用來定量細胞活力(20)。按照描述進行百分保護的計算以及isobologram組合研究(12)。
核苷類似物的細胞毒性這些dThd類似物已經(jīng)在數(shù)種細胞系H9、CEM、MT-2和HepG2中進行評價。基本的步驟類似。將細胞以低濃度接種，然后加入連續(xù)稀釋的受試化合物。我們使用的CEM、MT-2和H9細胞系，將其在RPMI 1640中生長，補充10％透析的胎牛血清和10μg/ml卡那霉素。在5％CO2濕度培養(yǎng)箱中在37℃培養(yǎng)48～96小時后，終止分析。將藥物處理的樣品與未處理的對照樣品進行比較。懸浮細胞系利用細胞計數(shù)進行實現(xiàn)，或者用血細胞計數(shù)器或利用Coulter Counter。HepG2細胞，一種人肝癌細胞系，在DMEM培養(yǎng)基中生長，補充10％透析的胎牛血清和10μg/ml卡那霉素。在傾析生長培養(yǎng)基后，對HepG2單層細胞系的作用，用溶解在50％乙醇中的1.0％亞甲基藍染料染色定量。然后將細胞層溶解在5％肌氨酰溶液中，將形成的顏色在Molecular Devices model Vmax板讀數(shù)分光光度計(Menlo Park，CA)上在595nm處測定。未處理的對照的顏色與藥物處理的樣品進行比較。
線粒體DNA核苷類似物對mtDNA含量的作用按照前述方法進行評估(2)。簡言之，將保持在補充了10％透析胎牛血清的RPMI 1640中的CEM細胞以2×105/ml鋪板在24孔組織培養(yǎng)板中。用以作為單獨試劑或聯(lián)用的不同的濃度的藥物處理細胞生長4天。然后富集細胞，用蛋白酶K和無DNase的RNase處理。將提取物應用到尼龍膜上并用mtDNA探針雜交。去除膜后，通過用Alu探針再雜交膜，將負載歸一化。將斑點用帶有ImageQuaNT分析軟件的Molecular Dynamics個人光密度計SI定量。
胸苷激酶對類似物的單磷酸化測試所有的類似物被源自CEM細胞的胸苷激酶(TK-1)磷酸化的能力。該酶利用該實驗室中發(fā)展的親和柱技術進行純化(7)。將胸苷類似物(250uM)在混合物中進行孵育，所述的混合物包含150mM Tris HCl pH 7.5，2.4mM ATP，2.4mM MgCl2，0.6mgs磷酸肌氨酸、5.8單位的肌氨酸磷酸激酶、0.19mgs白蛋白和0.07單位的TK-1，總體積200ul。在孵育結束的時候，加入3部分冷的HPLC級甲醇終止反應。在冰上孵育至少10分鐘后，將甲醇不溶物利用離心沉淀并將甲醇可溶的上清放置在干凈的微量離心管中。將這些樣品在Speedvac Centrifuge至干。將樣品溶解在水中并在Shimatzu HPLC model SCL 10Avp上分離，利用水至300mM磷酸鉀的梯度溶液和Whatman 10/25微粒SAX柱上。Km和相對的Vmax研究按照類似的方式進行，利用同樣的混合物以及不同量的底物和酶。
酸穩(wěn)定性研究核苷樣品與1N HCl混和并在37℃孵育2.5小時。然后，然后通過HPLC利用Bechman ODS柱使用水至80％甲醇的梯度溶液考察樣品。
胸苷磷酸化酶分析核苷類似物(100μM)在75mM磷酸鉀緩沖液pH 7.3在37℃孵育，利用部分純化的人肝臟提取物制劑(28)作為胸苷磷酸化酶(TP)源。孵育后，將反應通過加入三氯乙酸至終濃度15％終止反應。然后將樣品在冰上孵育。離心去除酸不溶成分后，通過用一半體積的三辛胺/氟利昂(45∶55)萃取兩次使上清液中性。將水性上清液利用HPLC檢測，利用Beckman ODS柱方法，如在酸穩(wěn)定性研究中所記載的。
胸苷激酶分析胸苷激酶分析與以前記載的方法相同(21)。簡言之，分析使用[14C]-dThd(100μM，6.7mCi/mmol)的混合物溶液，所述的混合物包含2.4mM ATP-Mg，156mM Tris-HCl pH 7.5，0.23mg磷酸肌氨酸、7μg肌氨酸磷酸激酶、67μg BSA和1.9mM DTT，體積75μl。將反應孵育不同的時間，然后通過將50μl等分噴到DE-81陰離子交換圓片(Whatman Inc.，Clifton，NJ)上終止，立即在95％乙醇中浸泡。經(jīng)在乙醇中另外洗滌2次后，將圓片干燥丙放置在含5ml SafeScint Scintillation Cocktail(AmericanBioanalytical，Natick，MA)的閃爍小瓶中。在Beckman LS5000TD ScintillationCounter(Beckman Instruments Inc.，Palo Alto，CA)中定量放射活性的量，該量表征形成的dTMP量。
生物活性結果4’-取代的D4T類似物的抗病毒效果在MT-2/IIIB抗HIV-1體系中進行實驗，加入在D4T的4’位被甲基、乙烯基、乙炔基、乙炔基甲基、乙炔基氯、烯丙基或氰基取代的化合物(圖1)。結果表明與母體化合物D4T相比，4’-乙炔基類似物具有更有效的抗HIV作用以及更小的毒性作用。其中，4’-氰基D4T和4’-乙炔基甲基D4T活性弱于D4T的抗HIV活性(圖8)；4’-甲基、4’-乙烯基、4’-乙炔基氯和4’-烯丙基取代的D4T類似物的EC50沒有達到濃度100μM。這些化合物以及D4T的抗HIV的EC50總結在下表1中。
表14’-取代的D4T類似物對HIV的效果
a)在MT-2細胞中實現(xiàn)50％免于HIV感染需要的有效的濃度b)50％抑制MT-2細胞生長需要的濃度c)測試的最高濃度。
d)以前報道的EC50(17)。
為了確定4’-乙炔基D4T是否與dThd類似物一樣抗HIV作用，考察了加入dThd或dCyd對4’-乙炔基D4T抗病毒活性的影響。為了預防在細胞中dCyd脫氨基成dUrd的可能性，也加入無毒水平的胞嘧啶脫氨基抑制劑四氫尿嘧啶。觀察到dThd以濃度依賴的方式降低了4’-乙炔基D4T的抗病毒效果。但是，dCyd對4’-乙炔基D4T的抗HIV活性沒有顯著的作用(圖9)。
為了評價與其他的抗病毒核苷類似物的相互作用，得到了4’乙炔基D4T聯(lián)用3TC、LFd4C、ddI和AZT的抗病毒等效線圖。4’乙炔基D4T顯示出與3TC和LFd4C對HIV具有協(xié)同的相互作用(圖10)，并且測量相對于表征加和藥物作用線的距離測定協(xié)同指數(shù)(SI)。但是，其與ddI和AZT的抗病毒作用只是加和性的(數(shù)據(jù)未顯示)。
細胞毒性4’-取代的D4T類似物對細胞生長和mtDNA含量的作用在CEM中進行了測定(表2a，見下面描述)。這些類似物中沒有一種，除了4’-乙炔基氯D4T，可以阻滯4天的細胞生長，ID50小于100μM。在HepG2細胞中的72小時毒性研究結果也顯示D4T、4’-乙烯基D4T和4’-乙炔基D4T的ID50大于100μM。4’-乙炔基D4T可降低細胞內(nèi)線粒體DNA，ID50為100μM，其比D4T的濃度高10倍。考慮4’-乙炔基D4T與3TC和LFd4C抗HIV的協(xié)同作用，也評價了這些化合物對細胞生長的相互作用。在H9細胞中，在48小時的分析期間沒有觀察到毒性相互作用的顯著升高(表2b，見下)。
表2aCEM細胞中的核苷類似物毒性
材料和方法中記載的步驟a)與未處理的對照相比通過細胞計數(shù)測定毒性。b)利用Southern印跡分析以及密度測定讀數(shù)測定線粒體DNA含量并與未處理的CEM對照細胞進行比較。數(shù)據(jù)為引起50％對照細胞抑制的μM濃度以及標準差。括號中的數(shù)字表示在標示的濃度下未處理的CEM對照細胞的百分比的平均值以及標準偏差。
表2b以相對于未處理的對照的百分比表示的4’-乙炔基D4T在H-9細胞中單用以及與其他的抗HIV化合物的聯(lián)用的毒性*
*H-9細胞按照在材料和方法中記載的方法在單種化合物或組合化合物存在下生長48小時。對于各條件，利用Coulter Counter對3或多個孔一式二份計數(shù)。數(shù)字表示平均值以及標準偏差。
4’-取代的D4T類似物與TK-1的相互作用評價了由純化的人TK-1對化合物磷酸化的可能性(表3a，見下面)。AZT轉化成單磷酸形式的速度同dThd一樣快，然而4’-甲基D4T以及4’-乙烯基D4T的速率類似于D4T的速率(約為dThd的2％)。4’-乙炔基D4T的轉化率優(yōu)于D4T，置信水平為0.06。利用two tailed測試，置信水平為0.91的時候，4’-乙炔基D4T和4’-乙炔基氯D4T的磷酸化率沒有明顯的差異。4’-乙炔基D4T的Km估計為52μM，低于D4T的133μM，但是高于dThd。為了確證這些dThd類似物中無一種可作為TK-1的潛在抑制劑，甚至它們也不是底物，將dThd、AZT、D4T和D4T的4’-取代的類似物加入到胸苷激酶分析中，濃度為[14C]-dThd濃度的10倍，然后將轉化為[14C]-dTMP的量與未加入的反應進行比較(見下表3b)。被TK-1良好磷酸化的化合物如AZT能影響磷酸化的dThd的量。加入磷酸化不佳的D4T或其類似物，甚至在10倍過量的情形下，對由TK-1導致的[14C]-dThd磷酸化的作用，仍然小于AZT。
表3a人胞質(zhì)胸苷激酶的磷酸化
250μM dThd或類似物和2.4mMATP與0.07單位的TK-1在37℃孵育285分鐘。以前發(fā)表的數(shù)值(21)。
表3b加入胸苷類似物對胸苷激酶分析的影響*
*分析基本上按照材料和方法中描述的步驟進行，除了將分析中的[14C]-dThd濃度降低至25μM并且加入的核苷的濃度為250μM。
4’-乙炔基D4T與胸苷磷酸化酶的相互作用以及酸穩(wěn)定性源于人肝的部分純化的胸苷磷酸化酶(TP)制劑用于這些研究。dThd快速分解而D4T慢至少10倍。在研究的整個孵育期，分解的4’乙炔基D4T低于檢測水平(圖11)。D4T和4’-乙炔基D4T在pH 1和在37℃的穩(wěn)定性考察了2.5小時。任一種化合物沒有檢測到可檢測到的裂解。
討論D4T為有效的抗HIVD-雙脫氧-胸苷類似物。長期治療的時候其有限的臨床毒性，為外周神經(jīng)病變，與其降低外周神經(jīng)元的線粒體DNA含量有關(4、5、33、34)。D4T的生化作用不同于3TC、ddI或ddC。D4T的類似物，其具有更強的抗HIV活性以及對核或線粒體DNA合成具有較小的作用，可比D4T具有更好的治療效果并可取代D4T用于抗HIV的組合治療。因此，具有更好藥理特性的的D4T類似物的合成已經(jīng)成為抗HIV藥物發(fā)現(xiàn)中的方向。在由我們以及其他人合成的4’-取代的D4T類似物中，4’-乙炔基D4T為抗培養(yǎng)的HIV活性最強的一種。Maag等描述了4’-疊氮基D4T，其在無毒性水平對HIV沒有活性(29)以及O-Yang等描述了3種4’-取代的D4T類似物，其無毒性并且也沒有抗HIV活性(32)。
D4T相當快地被肝臟中的肝細胞(38)發(fā)生分解代謝成β-氨基異丁酸和胸腺嘧啶。負責該斷裂的酶為TP，在磷酸酯存在下裂解dThd成胸腺嘧啶和2-脫氧-D-核糖-1-磷酸。通過將4’-乙炔基D4T和D4T與部分純化的人肝臟TP制劑孵育，顯示4’-乙炔基D4T比D4T對TP更具抗性。這表明從藥代動力學的角度4’-乙炔基比D4T更具有優(yōu)勢。此外，在模仿胃的酸性條件下，4’-乙炔基D4T與D4T一樣穩(wěn)定(數(shù)據(jù)未顯示)。這暗示4’-乙炔基D4T可與D4T一樣成為口服的活性劑。在將來的某個時候進行詳細的藥代動力學研究。由于4’-乙炔基D4T活性強于D4T，可以想到4’-乙炔基D4T會具有更低的病毒藥物抗性問題。當4’-乙炔基D4T以與D4T以相同的劑量對患者給藥的時候，病毒滴度將變得更小，從而，降低抗性株出現(xiàn)的可能性。也可能以高于D4T的劑量給藥4’-乙炔基D4T，由于4’-乙炔基D4T對細胞生長具有更小的抑制性并引起更低的線粒體DNA降低，與D4T相比。但是，安全使用4’-乙炔基D4T的量的測定需要進一步的考察。
與組合療法相比，單一療法將導致病毒的抗性株出現(xiàn)更為容易。因此必須將抗病毒化合物與其他批準的具有不同的藥物抗性生化機制抗病毒藥物一起使用。如果化合物在其抗病毒活性方面而不是其對宿主細胞的細胞毒性作用方面為協(xié)同作用，或至少為加和作用，可以實現(xiàn)改進的治療。的確，對HIV的組合療法已經(jīng)在AIDS的管理方面取得巨大的進步，并且D4T通常用作組合方案中的一種藥物。為了評價組合療法中4’-乙炔基D4T的潛在應用，我們考察了該化合物與4種抗病毒核苷類似物的相互作用。在抗HIV活性方面，而不是細胞毒性方面(表2b)，4’-乙炔基D4T與3TC和LFd4C具有協(xié)同作用(圖9)并且與AZT和ddI具有加和作用(數(shù)據(jù)未顯示)。這暗示4’-乙炔基D4T可能為用于組合療法的有用的化合物，并可用于對抗對目前使用的核苷有抗性的病毒，通過協(xié)同反應增加其有效性。4’-乙炔基D4T對其他的核苷類似物的有抗性的病毒的活性目前正在考察。
使4’-乙炔基D4T比其他的4’-取代的D4T類似物在抗HIV研究中活性更強的潛在機制還不清楚。脫氧核苷類似物一般轉化成5’三磷酸代謝物，后者為病毒DNA聚合酶的底物。已知的抗HIV雙脫氧核苷的三磷酸代謝物優(yōu)選與病毒逆轉錄酶相互作用并當它們摻入到DNA鏈中的時候充當鏈終止子。單磷酸酯代謝物的形成是成為三磷酸代謝物過程中的第一步。4’-取代的D4T化合物，與D4T一樣，為dThd類似物，因此我們使用純化的TK-1以檢測其是否磷酸化這些類似物至其各自的單磷酸酯形式。結果表明4’-乙炔基D4T磷酸化的速度是D4T的兩倍，盡管比dThd或AZT的磷酸化速度要慢。很有趣地注意到4’-甲基D4T和4’-乙烯基D4T類似物以與D4T同樣的速率磷酸化，但是無一種具有顯著的抗HIV活性。因此，可以認為這些4’-取代的D4T類似物中的一些化合物的的抗HIV活性的喪失不是因為它們不能被TK-1磷酸化。TK-1對4’-乙炔基D4T的磷酸化是一個必要的步驟，但是不足以具有抗病毒活性。由于其抗病毒活性可被dThd而不是dCyd中和，4’-乙炔基D4T，與D4T一樣，如dThd類似物一樣發(fā)揮作用，4’-乙炔基D4T的抗病毒作用機制仍然與D4T有很大的不同。我們未發(fā)表的結果表明D4T比4’-乙炔基D4T可以更有效地磷酸化得到三磷酸代謝物，利用CEM細胞提取物補充部分純化的TK-1以及重組的人dTMP激酶。這又提出了4’-乙炔基D4TMP而不是4’-乙炔基D4TTP為活性代謝物的問題，并且需要進一步的研究。
總之，在細胞培養(yǎng)中，與D4T相比，4’-乙炔基D4T更有更強的抗HIV活性以及更低的毒性。由于其不是胸苷磷酸化酶底物，預期比D4T有更佳的藥代動力學優(yōu)勢。因此，4’-乙炔基D4T顯示了作為新的抗HIV藥物的優(yōu)良的潛能。
本領域的普通技術人員應該理解，前述的描述和實施例只是實施本發(fā)明的說明，并不以任何方式限制本發(fā)明。在不偏離由下述權利要求限定的本發(fā)明的精神和范圍的前提下，可以對這里提供的細節(jié)進行改變。
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權利要求
1.根據(jù)式I、II、III、IV或V的化合物 其中B為根據(jù)下述結構的核苷堿 R為H、F、Cl、Br、I、C1-C4烷基、-C≡N、-C≡C-Ra、 或 X為H、C1-C4烷基(優(yōu)選地，CH3)、F、Cl、Br或I；Z為O或CH2，條件是當化合物是通式II的化合物，R3為-C≡C-H且R2為H或磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯或磷酸三酯基團的時候，Z為CH2且不為O；R1為H、?；1-C20烷基或醚基團；R2為H、?；?、C1-C20烷基或醚基團、磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、磷酸二酯基團或 或 基團；Nu為生物活性抗病毒化合物的基團以使所述的生物活性抗病毒化合物的氨基或羥基與鄰近的部分形成磷酸酯、氨基磷酸酯、碳酸酯或氨基甲酸乙酯基團；R8為C1-C20烷基或醚基團；k為0-12，優(yōu)選地，0-2；R3選自C1-C4烷基(優(yōu)選地，CH3)、-(CH2)n-C≡C-Ra、 或 R3a和R3b獨立地選自H、F、Cl、Br或I；R4和R5獨立地選自H、F、Cl、Br、I、OH、C1-C4烷基(優(yōu)選地，CH3)、-(CH2)n-C≡C-Ra、 或 條件是R4和R5不都為H；Ra為H、F、Cl、Br、I或-C1-C4烷基，優(yōu)選地H或CH3；Y為H、F、Cl、Br、I或-C1-C4烷基，優(yōu)選地H或CH3；以及n為0、1、2、3、4或5，優(yōu)選地0、1或2；以及其差向異構體、可藥用鹽、溶劑合物或其多晶形。
2.根據(jù)權利要求1的式II或IV化合物，其中B為
3.根據(jù)權利要求1或2的式IV化合物，其中R3為乙炔基；R為C1-C3烷基；R3a和R3b者為H；并且R2為H、?；⒘姿狨?、二磷酸酯、三磷酸酯或磷酸二酯基團。
4.根據(jù)權利要求1-3中任一項的化合物，其中R2為H或?；?。
5.根據(jù)權利要求2的式II或IV化合物其中R3為乙炔基或-CH2-CH＝CH2；R為C1-C3烷基；R3a和R3b都為H；并且R2為 或 基團；Nu為選自3TC、BLFd4C、FTC、BLFddC、AZT、d4T、ddI、ddC、阿巴卡韋和ddA的抗HIV核苷的基團，其中所述的抗HIV核苷的5’羥基形成磷酸酯或碳酸酯連接基；R8為H或C1-C20烷基或醚基團；并且k為0～2。
6.根據(jù)權利要求1-5中任一項的化合物，其中R為CH3。
7.根據(jù)權利要求5的式IV化合物其中R3為乙炔基；R為CH3；以及R3a和R3b都為H。
8.根據(jù)權利要求1-7中任一項的化合物，其中Z為O。
9.根據(jù)權利要求1-7中任一項的化合物，其中Z為CH2。
10.根據(jù)權利要求1-9中任一項的化合物，其中R2為H。
11.根據(jù)權利要求1-9中任一項的化合物，其中R2為 基團；R8為H或C1-C20烷基或醚基團；并且k為0～2。
12.根據(jù)權利要求1、5或11中任一項的化合物，其中R8為H或C1-C12烷基且k為0。
13.根據(jù)權利要求1、5、11或12中任一項的化合物，其中R8為H。
14.根據(jù)權利要求6的式II化合物，其中R3為-CH2-CH＝CH2。
15.一種藥物組合物，包括有效量的根據(jù)權利要求1-14中任一項的化合物以及可藥用載體、添加劑或賦形劑。
16.一種藥物組合物，包括有效量的根據(jù)權利要求1-14中任一項的化合物以及可藥用載體、添加劑或賦形劑以及至少一種另外的抗HIV劑。
17.根據(jù)權利要求16的組合物，其中所述的抗HIV劑選自ddC、阿巴卡韋、ddI、ddA、3TC、AZT、D4T、FTC、FddC、Fd4C、Atazanavir、阿德福韋二吡呋酯、Tenofovir disoproxil、Etecavir、茚地那韋、KHI-227、2-[3-[3-(S)-[[(四氫呋喃基氧基)羰基]氨基]-4-苯基-2(R)-羥基丁基]]-N-(1，1-二甲基乙基)十氫-3-異喹啉甲酰胺、VB-11，328、KNI-174、Val-Val-Sta、CPG53820、雙-Val HOEt-N2氮雜-肽等排物、C2-Sym次膦酸酰胺衍生物、2，5-二氨基-N，N’-雙(N-芐氧基羰基uelyl)-1，6-二苯基-3(S)，4(S)-己烷二醇BzOCValPhe[二CHOH(SS]PheValBzOC、2，5，-二氨基-N，N’-雙(N-芐氧基羰基uelyl)-1，6-二苯基-3(R)，4(R)-己烷二醇BzOCValPhe[二CHOH(RR]PheValBzOC、[雙(SATE)ddAMP]、BILA 2186 BS、Agenerase、A-98881、A-83962、A-80987、(2-萘基羰基)Asn[decarbonylPhe-羥基乙基]ProO叔丁基、2-氨基芐基他汀Valyl Cbz衍生物、10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[14]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[13]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[13]二聚間二甲苯鄰甲酸衍生物，10H-2(Cbz-Tle)3PhPr[14]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，1-(20HPr)-4-取代的-哌嗪(環(huán)丙基)，噻吩基氨基甲酸酯衍生物、1-(20HPr)-4-取代的-哌嗪(環(huán)丁基)，噻吩基氨基甲酸酯衍生物，1-(20HPr)-4-取代的-哌嗪(3-戊基)，噻吩基氨基甲酸酯衍生物，10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[17]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，A-81525、XM323、替拉那韋、噻酚并吡啶CON噻吩基氨基甲酸乙酯衍生物，SDZ PRI 053、SD146、替利那韋、(R)2喹啉COAsnPhe[CHOHCH2]PipCONHtBu、沙奎那韋/Melfinavir衍生物、異喹啉CON Thf-Thf氨基甲酸乙酯類似物、異喹啉CON噻吩基氨基甲酸乙酯類似物、R-87366、DMP 460、L685，434、L685，434-6-羥基衍生物、L685，434-OEtNMe2、L685，434-OPr嗎啉衍生物、L689，502、拉西那韋、Aluviran、Nelfinayir-八氫-噻酚并吡啶類似物、P9941、帕利那韋、以及青霉素，2-異喹啉-OHPrNH2類似物。
17.根據(jù)權利要求16的組合物，其中所述的抗HIV劑選自ddC、阿巴卡韋、ddI、ddA、3TC、AZT、D4T、FTC、FddC和Fd4C。
18.一種治療需要的患者中病毒感染的方法，包括對所述的患者施用在可藥用添加劑、載體或賦形劑中的有效量的根據(jù)權利要求1-14中任一項的化合物。
19.根據(jù)權利要求18的方法，其中所述的病毒感染由病毒引起，所述的病毒選自人免疫缺陷病毒1和2(HIV-1和HIV-2)、人T-細胞白血病病毒1和2(HTLV-1和HTLV-2)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人乳頭瘤病毒(HPV)、腺病毒、B型肝炎病毒(HBV)、C型肝炎病毒(HCV)、Epstein-Barr病毒(EBV)、水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)、巨細胞病毒(CMV)、單純皰疹病毒1和2(HSV-1和HSV-2)、人皰疹病毒8(HHV-8，已知也為卡波西肉瘤相關病毒)和黃病毒，包括黃熱病毒、登革病毒、日本腦炎和西尼羅腦炎病毒。
20.根據(jù)權利要求19的方法，其中所述的病毒為HIV1或2。
21.根據(jù)權利要求18-20中任一項的方法，其中所述的化合物與至少一種抗HIV劑共同給藥。
22.根據(jù)權利要求21的方法，其中所述的抗HIV劑選自ddC、阿巴卡韋、ddI、ddA、3TC、AZT、D4T、FTC、FddC、Fd4C、Atazanavir、阿德福韋二吡呋酯、Tenofovir disoproxil、Etecavir、茚地那韋、KHI-227、2-[3-[3-(S)-[[(四氫呋喃基氧基)羰基]氨基]-4-苯基-2(R)-羥基丁基]]-N-(1，1-二甲基乙基)十氫-3-異喹啉甲酰胺、VB-11，328、KNI-174、Val-Val-Sta、CPG53820、雙-Val HOEt-N2氮雜-肽等排物、C2-Sym次膦酸酰胺衍生物、2，5-二氨基-N，N’-雙(N-芐氧基羰基uelyl)-1，6-二苯基-3(S)，4(S)-己烷二醇BzOCValPhe[二CHOH(SS]PheValBzOC、2，5，-二氨基-N，N’-雙(N-芐氧基羰基uelyl)-1，6-二苯基-3(R)，4(R)-己烷二醇BzOCValPhe[二CHOH(RR]PheValBzOC、[雙(SATE)ddAMP]、BILA 2186 BS、Agenerase、A-98881、A-83962、A-80987、(2-萘基羰基)Asn[decarbonylPhe-羥基乙基]ProO叔丁基、2-氨基芐基他汀Valyl Cbz衍生物、10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[14]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[13]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[13]二聚間二甲苯鄰甲酸衍生物，10H-2(Cbz-Tle)3PhPr[14]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，1-(20HPr)-4-取代的-哌嗪(環(huán)丙基)，噻吩基氨基甲酸酯衍生物、1-(20HPr)-4-取代的-哌嗪(環(huán)丁基)，噻吩基氨基甲酸酯衍生物，1-(20HPr)-4-取代的-哌嗪(3-戊基)，噻吩基氨基甲酸酯衍生物，10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[17]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，A-81525、XM323、替拉那韋、噻酚并吡啶CON噻吩基氨基甲酸乙酯衍生物，SDZ PRI 053、SD146、替利那韋、(R)2喹啉COAsnPhe[CHOHCH2]PipCONHtBu、沙奎那韋/Melfinavir衍生物、異喹啉CON Thf-Thf氨基甲酸乙酯類似物、異喹啉CON噻吩基氨基甲酸乙酯類似物、R-87366、DMP 460、L685，434、L685，434-6-羥基衍生物、L685，434-OEtNMe2、L685，434-OPr嗎啉衍生物、L689，502、拉西那韋、Aluviran、Nelfinavir-八氫-噻酚并吡啶類似物、P9941、帕利那韋、青霉素，2-異喹啉-OHPrNH2類似物及其混合物。
23.根據(jù)權利要求20的方法，其中所述的抗HIV劑選自ddC、阿巴卡韋、ddI、ddA、3TC、AZT、D4T、FTC、FddC和Fd4C。
24.一種降低有感染風險的患者中病毒感染的可能性或延緩病毒感染發(fā)作的方法，所述的方法包括對所述的患者施用有效量的根據(jù)權利要求1-14中任一項的化合物。
25.根據(jù)權利要求24的方法，其中所述的病毒選自人免疫缺陷病毒1和2(HIV-1和HIV-2)、人T-細胞白血病病毒1和2(HTLV-1和HTLV-2)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人乳頭瘤病毒(HPV)、腺病毒、B型肝炎病毒(HBV)、C型肝炎病毒(HCV)、Epstein-Barr病毒(EBV)、水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)、巨細胞病毒(CMV)、單純皰疹病毒1和2(HSV-1和HSV-2)、人皰疹病毒8(HHV-8，已知也為卡波西肉瘤相關病毒)和黃病毒，包括黃熱病毒、登革病毒、日本腦炎和西尼羅腦炎病毒。
26.根據(jù)權利要求25的方法，其中所述的病毒為HIV1或2。
27.根據(jù)權利要求26的方法，其中所述的化合物與至少一種另外的抗HIV劑一起給藥。
28.根據(jù)權利要求27的方法，其中所述的另外的抗HIV劑選自ddC、阿巴卡韋、ddI、ddA、3TC、AZT、D4T、FTC、FddC、Fd4C、Atazanavir、阿德福韋二吡呋酯、Tenofovir disoproxil、Etecavir、茚地那韋、KHI-227、2-[3-[3-(S)-[[(四氫呋喃基氧基)羰基]氨基]-4-苯基-2(R)-羥基丁基]]-N-(1，1-二甲基乙基)十氫-3-異喹啉甲酰胺、VB-11，328、KNI-174、Val-Val-Sta、CPG53820、雙-Val HOEt-N2氮雜-肽等排物、C2-Sym次膦酸酰胺衍生物、2，5-二氨基-N，N’-雙(N-芐氧基羰基uelyl)-1，6-二苯基-3(S)，4(S)-己烷二醇BzOCValPhe[二CHOH(SS]PheValBzOC、2，5，-二氨基-N，N’-雙(N-芐氧基羰基uelyl)-1，6-二苯基-3(R)，4(R)-己烷二醇BzOCValPhe[二CHOH(RR]PheValBzOC、[雙(SATE)ddAMP]、BILA 2186 BS、Agenerase、A-98881、A-83962、A-80987、(2-萘基羰基)Asn[decarbonylPhe-羥基乙基]ProO叔丁基、2-氨基芐基他汀Valyl Cbz衍生物、10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[14]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[13]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[13]二聚間二甲苯鄰甲酸衍生物，10H-2(Cbz-Tle)3PhPr[14]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，1-(20HPr)-4-取代的-哌嗪(環(huán)丙基)，噻吩基氨基甲酸酯衍生物、1-(20HPr)-4-取代的-哌嗪(環(huán)丁基)，噻吩基氨基甲酸酯衍生物，1-(20HPr)-4-取代的-哌嗪(3-戊基)，噻吩基氨基甲酸酯衍生物，10H-2(Cbz-ValNH)3PhPr[17]二聚對二甲苯鄰甲酸衍生物，A-81525、XM323、替拉那韋、噻酚并吡啶CON噻吩基氨基甲酸乙酯衍生物，SDZ PRI 053、SD146、替利那韋、(R)2喹啉COAsnPhe[CHOHCH2]PipCONHtBu、沙奎那韋/Melfinavir衍生物、異喹啉CON Thf-Thf氨基甲酸乙酯類似物、異喹啉CON噻吩基氨基甲酸乙酯類似物、R-87366、DMP 460、L685，434、L685，434-6-羥基衍生物、L685，434-OEtNMe2、L685，434-OPr嗎啉衍生物、L689，502、拉西那韋、Aluviran、Nelfinavir-八氫-噻酚并吡啶類似物、P9941、帕利那韋、以及青霉素，2-異喹啉-OHPrNH2類似物。
29.根據(jù)權利要求27或28的方法，其中所述的抗HIV劑選自ddC、阿巴卡韋、ddI、ddA、3TC、AZT、D4T、FTC、FddC和Fd4C。
30.一種降低處于有發(fā)展所述病癥患者中繼發(fā)于病毒感染的病癥的可能性或延緩繼發(fā)于病毒感染的病癥發(fā)作的方法，所述的方法包括對所述的患者給藥有效量的根據(jù)權利要求1～14中任一項的化合物。
31.根據(jù)權利要求30的方法，其中所述的病癥為AIDS。
32.一種用組合療法治療需要患者HIV的感染的方法，所述的方法包括對所述的患者施用有效量的至少一種根據(jù)權利要求1～14中任一項的化合物以及至少一種選自下述的化合物的組合核苷逆轉錄酶抑制劑(NRTI)、非核苷逆轉錄酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、融合抑制劑及其混合物。
33.一種用組合療法治療需要患者中HIV感染的方法，所述的方法包括對所述的患者給藥有效量的至少一種根據(jù)權利要求1～14中任一項的化合物以及至少一種選自下述的化合物的組合3TC(拉米夫定)、AZT(齊多夫定)、(-)-FTC、ddI(地達諾新)、ddC(扎西他濱)、阿巴卡韋(ABC)、替諾福韋(PMPA)、D-D4FC(reverset)、D4T(司他夫定)、Racivir、L-FddC、L-D4FC、NVP(奈韋拉平)、DLV(地拉韋啶)、EFV(依法韋侖)、SQVM(甲磺酸噻喹努佛)、RTV(利托那韋)、IDV(茚地那韋)、SQV(沙奎那韋)、NFV(Nelfinavir)、APV(安潑那韋)、LPV(洛匹那韋)、T20、fuseon及其混合物。
34.根據(jù)權利要求1～14中任一項的化合物在制備用于治療病毒為致病因素的感染的藥物中的用途。
35.根據(jù)權利要求34的用途，其中所述的病毒選自人免疫缺陷病毒1和2(HIV-1和HIV-2)、人T-細胞白血病病毒1和2(HTLV-1和HTLV-2)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人乳頭瘤病毒(HPV)、腺病毒、B型肝炎病毒(HBV)、C型肝炎病毒(HCV)、Epstein-Barr病毒(EBV)、水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)、巨細胞病毒(CMV)、單純皰疹病毒1和2(HSV-1和HSV-2)、人皰疹病毒8(HHV-8，已知也為卡波西肉瘤相關病毒)和黃病毒包括黃熱病毒、登革病毒、日本腦炎和西尼羅腦炎病毒。
36.利用化學方法合成下述化學結構的化合物的方法 其中R10為H或C1-C4烷基；Ac為苯甲?；蛞阴；?；并且BL為三烷基甲硅烷基保護基；包括將根據(jù)下述結構的化合物 與四乙酸鉛或苯甲酸鉛在溶劑和胺堿存在下反應。
37.根據(jù)權利要求36的方法，其中BL為叔丁基二甲基甲硅烷基，Ac為苯甲?；⑶襌10為甲基并且在甲苯和二異丙基乙基胺存在下使用苯甲酸鉛。
38.合成下述化學結構的化合物的方法 包括將根據(jù)下述結構的化合物 其中R10為H或C1-C4烷基；Ac為乙?；虮郊柞；灰约癇L為三烷基甲硅烷基保護基；與烷基Al(Cl)-C≡CSiMe3在溶劑中反應，其中烷基為C1-C3烷基。
39.根據(jù)權利要求38的方法，其中R10為甲基，Ac為苯甲?；⑶褺L為叔丁基二甲基。
40.制備下述化學結構的化合物的方法 其中R10為H或C1-C4烷基，包括選擇性地去除下述化學結構的化合物中的硅保護基 以產(chǎn)生下述化學結構的化合物
41.制備下述化學結構的化合物的方法 其中R10為H或C1-C4烷基，包括將下述化學結構的化合物 與甲烷磺酰氯或甲苯磺酰氯反應以產(chǎn)生中間體M 中間體M其中MeTo為甲基或甲苯基；并且將中間體M在乙腈中用DBN處理然后去除Ac基團以產(chǎn)生下述化合物
42.根據(jù)權利要求41的方法，其中R10為甲基且MeTo為甲基。
43.合成下述化學結構的化合物的方法 其中R10為H或C1-C4烷基，Ac為苯甲?；蛞阴；⑶褺L為三烷基甲硅烷基保護基，包括將下述化學結構的化合物 與苯甲酸銀或乙酸銀在碘存在下在溶劑中反應以得到 中間體IAc并且然后將所述的中間體Iac與苯甲酸銀或乙酸銀在溶劑中在升高的溫度下反應以產(chǎn)生
44.根據(jù)權利要求43的方法，其中Ac為苯甲酸基，R10為甲基且BL為叔丁基二甲基甲硅烷基，所述的溶劑為二甲苯并且所述的升高的溫度為約150℃。
45.化合物 其中R10為H或C1-C4烷基且Ac為乙?；虮郊柞；?。
46.根據(jù)權利要求45的化合物，其中R10為CH3且Ac為苯甲?；?。
全文摘要
本發(fā)明涉及根據(jù)通式(I、II、III、IV或V)的新化合物，其中B為根據(jù)結構(VI)的核苷堿；R為H、F、Cl、Br、I、C
文檔編號A61K31/70GK1777432SQ200480010529
公開日2006年5月24日 申請日期2004年2月18日 優(yōu)先權日2003年2月19日
發(fā)明者田中博道, 馬場昌范, 鄭永齊 申請人:耶魯大學, 田中博道, 馬場昌范