專利名稱：原人參二醇低元醇衍生物及制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的原人參二醇衍生物及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
原人參二醇具有很強(qiáng)的抗腫瘤作用，其作用強(qiáng)度強(qiáng)于人參皂苷(陳英杰，王紅燕等，《中國自然科學(xué)基金》1995，446～48)，且毒性小，但由于其水溶性差，因此限制了應(yīng)用。為了增加原人參二醇的水溶性，本發(fā)明對(duì)其進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾，提供了一系列衍生物，增加了其水溶性，提高了藥效，從而使其得到了廣泛應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了原人參二醇衍生物。
本發(fā)明提供了原人參二醇衍生物的制備方法。
本發(fā)明提供了原人參二醇衍生物作為藥物的應(yīng)用。
本發(fā)明提供了原人參二醇衍生物在制備治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明所述的原人參二醇衍生物具有式I的通式，式I為 其中R1＝H或CO-Alk1-COOM1；R2＝H或CO-Alk2-COOM2；Alk1和Alk2彼此獨(dú)立，分別代表含1-4個(gè)碳原子的亞烷基或含2-4個(gè)碳原子的亞烯基；M1和M2彼此獨(dú)立，分別代表H或堿金屬元素。
當(dāng)R1＝CO-Alk1-COOM1且R2＝CO-Alk2-COOM2時(shí)，式I所示的化合物為原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯及其堿金屬鹽，優(yōu)選為原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯及其堿金屬鹽，分子式為C38H58O9M(M代表H或堿金屬元素)。
當(dāng)R2＝H、R1＝CO-Alk1-COOM1時(shí)，式I所表示的化合物為原人參二醇-3-脂肪酸酯及其堿金屬鹽，優(yōu)選化合物為原人參二醇-3-琥珀酸酯及其堿金屬鹽，分子式為C34H55O6M1。
當(dāng)R1＝H、R2＝CO-Alk2-COOM2時(shí)，式I所表示的化合物為原人參二醇-12-脂肪酸酯及其堿金屬鹽，優(yōu)選的化合物為原人參二醇-12-琥珀酸酯及其堿金屬鹽，分子式為C34H55O6M2。
原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯及其堿金屬鹽的制備方法為a，取原人參二醇，二元羧酸酐，吡啶，按1～2.5∶3～9∶10～30(重量比)的比例混合，加熱攪拌反應(yīng)4～30小時(shí)，稍冷，傾入冷水中，析出沉淀，過濾得到灰白色沉淀物，將沉淀物溶于乙醇中，加熱溶解，加活性炭脫色，過濾，干燥，得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯；b，將原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯加入丙酮中攪拌溶解，滴加堿金屬的氫氧化物的無水乙醇或甲醇溶液，攪拌至沉淀完全，靜置，過濾，沉淀物用少量丙酮潤洗，減壓過濾，得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯堿金屬鹽。
原人參二醇-3-脂肪酸酯及其堿金屬鹽和原人參二醇-12-脂肪酸酯及其堿金屬鹽的制備方法為a，取原人參二醇，二元羧酸酐，吡啶，按1∶0.5～8∶10～25(重量比)的比例混合，加熱攪拌反應(yīng)4～25小時(shí)，稍冷，傾入冷水中，析出沉淀，過濾得到灰白色沉淀物，經(jīng)硅膠柱層析，乙酸乙酯/正己烷(15～30％)洗脫，分別得到原人參二醇-3-脂肪酸酯和原人參二醇-12-脂肪酸酯；b，分別將原人參二醇-3-脂肪酸酯和原人參二醇-12-脂肪酸酯加入丙酮中攪拌溶解，滴加堿金屬的氫氧化物的無水乙醇或甲醇溶液，攪拌至沉淀完全，靜置，過濾，沉淀物用少量丙酮潤洗，減壓過濾，分別得到原人參二醇-3-脂肪酸酯堿金屬鹽和原人參二醇-12-脂肪酸酯堿金屬鹽。
含有原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯(鹽)、原人參二醇-3-脂肪酸酯(鹽)和原人參二醇-12-脂肪酸酯(鹽)的組合物的制備方法為取原人參二醇，二元羧酸酐，吡啶，按1～3∶0.5～8∶10～25(重量比)的比例混合，加熱攪拌反應(yīng)，稍冷，傾入冷水中，析出沉淀，過濾得到灰白色沉淀物，將沉淀物溶于乙醇中，加熱溶解，加活性炭脫色，減壓過濾，回收乙醇，干燥，即得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯、原人參二醇-3-脂肪酸酯和原人參二醇-12-脂肪酸酯的組合物；b，將上述組合物加入丙酮中攪拌溶解，滴加堿金屬的氫氧化物的無水乙醇或甲醇溶液，攪拌至沉淀完全，靜置，過濾，沉淀物用少量丙酮潤洗，減壓過濾，得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯堿金屬鹽、原人參二醇-3-脂肪酸酯堿金屬鹽和原人參二醇-12-脂肪酸酯堿金屬鹽的組合物。
具體實(shí)施例方式
制備例1原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯及其鈉鹽的制備(A)原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯的制備原人參二醇1g和3g琥珀酸酐溶于25ml吡啶中，在75～80℃油浴中攪拌反應(yīng)25小時(shí)，然后將反應(yīng)混合物傾入250ml冷水中攪拌靜置，過夜，過濾，干燥，得到1.35g灰白色固體，
將此固體溶于30ml 95％乙醇中，加適量活性炭脫色，過濾，真空干燥得白色固體1.21g，收率84.6％。
(B)原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽的制備將2.0g原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯溶于50ml丙酮中，在不斷攪拌下滴入7ml 1N NaOH乙醇溶液，滴至沉淀完全，繼續(xù)攪拌30分鐘，靜置，過濾，真空干燥得1.97g白色固體，收率92.5％。
該化合物能溶于水，微溶于乙醇，難溶于丙酮，乙醚和氯仿。
1H-NMR(600MHz C5D5N)0.71(s，3H)0.90(s，3H)0.93(s，3H)0.94(s，6H)1.39(s，3H)1.70(s，3H)1.71(s，3H)2.88(m，2H)2.91(m，2H)2.99(m，2H)3.01(m，2H)4.70(m，1H)5.30(m，1H)5.43(t，1H)13C-NMR(150MHz C5D5N)174.8 174.7 172.4 172.3 130.7 126.380.7 75.1 73.5 56.0 53.1 52.5 50.1 45.8 39.9 38.3 38.1 37.4 37.1 34.7 31.4 30.7 30.330.0 30.0 28.9 28.0 27.0 26.9 25.7 23.8 23.1 18.3 17.7 17.6 16.7 16.1 15.7 ESI-MS643.53(M-H2O+H)683.48(M+Na)制備例2原人參二醇-3-琥珀酸酯及其鉀鹽，原人參二醇-12-琥珀酸酯及其鉀鹽的制備(A)原人參二醇-3-琥珀酸酯和原人參二醇-12-琥珀酸酯的制備原人參二醇2g和1.5g琥珀酸酐溶于45ml吡啶中，在70~75℃油浴中攪拌反應(yīng)20h，然后將反應(yīng)混合物傾入300ml水中，攪拌，靜置，過夜，干燥，得2.33g灰白色固體，經(jīng)200～300目硅膠柱層析，乙酸乙酯/正己烷(15～30％)梯度洗脫先后分別得到類白色固體原人參二醇-3-琥珀酸酯0.75g，收率37.5％；類白色固體原人參二醇-12-琥珀酸酯0.80g，收率40.0％。
(B)原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽的制備原人參二醇-3-琥珀酸酯1.5g溶于80ml丙酮中，充分?jǐn)嚢?，緩慢滴?N KOH乙醇溶液共4ml，繼續(xù)攪拌30分鐘，靜置，待沉淀完全，減壓過濾，沉淀物用丙酮洗滌數(shù)次，干燥，稱重得白色固體1.4g，得率89.7％(C)原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽的制備原人參二醇-12-琥珀酸酯1g溶于60ml丙酮中，充分?jǐn)嚢?，緩慢滴?N KOH乙醇溶液共3ml，繼續(xù)攪拌30分鐘，靜置，待沉淀完全，減壓過濾，沉淀物用適量丙酮洗滌3次，沉淀物干燥，稱重得白色固體0.92g，得率88.5％。
原人參二醇-3-琥珀酸酯1H-NMR(600MHz C5D5N)0.82(s，3H)0.93(s，6H)0.96(s，3H)0.98(s，3H)1.42(s，3H)1.63(s，3H)1.66(s，3H)2.88(m，2H)2.92(m，2H)4.73(m，1H)5.31(t，1H)13C(150MHz，C5D5N)174.7 172.4 130.7 126.3 80.8 72.9 70.9 56.1 54.7 51.7 50.3 48.6 40.038.6 38.1 37.2 35.9 35.0 32.1 31.3 30.3 30.0 28.1 27.1 26.8 25.7 24.0 23.0 18.4 17.617.0 16.7 16.2 15.8 ESI-MS 525.50(M-2H2O+H)543.52(M-H2O+H)583.50(M+Na)原人參二醇-12-琥珀酸酯1H-NMR(600MHz C5D5N)0.82(s，3H)0.93(s，3H)0.98(s，3H)1.00(s，3H)1.19(s，3H)1.40(s，3H)1.71(s，3H)1.72(s，3H)2.99(m，2H)3.01(m，2H)3.38(m，1H)5.28(m，1H)5.42(t，1H)13C(150MHz，C5D5N)174.8 172.4 130.7 126.377.9 75.3 73.5 56.3 53.2 52.5 50.4 45.8 39.9 39.5 39.1 37.5 37.3 34.9 31.5 30.7 30.028.9 28.6 28.1 27.0 26.9 25.8 23.1 18.7 17.7 17.6 16.24 16.16 15.7 ESI-MS543.49(M-H2O+H)583.50(M+Na)制備例3含有原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯、原人參二醇-3-琥珀酸酯和原人參二醇-12-琥珀酸酯及其鈉鹽組合物的制備(A)原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯、原人參二醇-3-琥珀酸酯和原人參二醇-12-琥珀酸酯的組合物的制備原人參二醇2g，琥珀酸酐4g，吡啶40ml，裝入100ml三頸瓶中，75～78℃油浴中，攪拌回流20h放冷，傾入500ml冷水中，析出沉淀，減壓抽濾，得白色沉淀物，將此溶于80ml95％乙醇中加熱溶解，加活性炭脫色，靜置，過濾，回收乙醇干燥即得2.62g產(chǎn)品。
(B)原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯鈉鹽、原人參二醇-3-琥珀酸酯鈉鹽和原人參二醇-12-琥珀酸鈉鹽組合物的制備取上述(A)中衍生物的組合物2.5g，溶于150ml丙酮中，充分?jǐn)嚢?，邊攪拌邊滴?NNaOH乙醇溶液至沉淀完全后，繼續(xù)攪拌30分鐘，靜置，待沉淀完全，減壓過濾，沉淀物用適量丙酮洗滌3次，抽干，干燥，稱重得白色粉末2.28g。
試驗(yàn)例1原人參二醇衍生物對(duì)體外培養(yǎng)人源腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用1.1材料和試劑原人參二醇-3-琥珀酸鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽按制備例制備；RPMI1640培養(yǎng)基GIBCO公司生產(chǎn)；新生牛血清(超級(jí))，杭州四季青生物工程材料有限公司，生產(chǎn)批號(hào)020523；胰蛋白酶，Sigma公司生產(chǎn)；磺基羅丹明B(sulforhadamine B，SRB)，Sigma公司；
注射用鏈霉素，山東瑞陽制藥有限公司，1g(100萬單位)/支，批號(hào)200105101；注射用青霉素鈉，山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司，80萬單位/支，批號(hào)L020318；其它常用化學(xué)試劑均為國產(chǎn)分析純。
細(xì)胞株人肺腺癌細(xì)胞株A549購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京腫瘤研究所藥理室。
儀器CO2培養(yǎng)箱，超凈工作臺(tái)，酶標(biāo)儀，倒置顯微鏡，細(xì)胞培養(yǎng)瓶(Costar，USA)，96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(Costar，USA)。
軟件Microsoft Excel 7.0統(tǒng)計(jì)分析軟件；Microcal Origin 6.0數(shù)據(jù)處理軟件。
1.2實(shí)驗(yàn)方法RPMI1640培養(yǎng)基一袋加水一升，補(bǔ)加2克碳酸氫鈉，10萬單位青霉素和100mg鏈霉素，調(diào)節(jié)pH值至7.4，用0.22μm除菌濾膜過濾除菌。90ml培養(yǎng)基加滅活新生牛血清10ml即為完全培養(yǎng)液。胰蛋白酶用D-hanks緩沖液配成0.25％溶液后過濾除菌。
準(zhǔn)確稱取原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽各80.0mg于滅菌離心管中，加入DMSO 1ml，配成80mg/ml原液。取10μl原液加到10ml的完全培養(yǎng)液中，即成為80μg/ml應(yīng)用液，再分別用完全培養(yǎng)液稀釋為40、20、10和5μg/ml的應(yīng)用液。
細(xì)胞貼壁培養(yǎng)于含10ml完全培養(yǎng)液細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，于37℃、5％CO2、飽合濕度下培養(yǎng)。細(xì)胞長滿瓶底后用滅菌D-hanks液洗兩次，加0.25％胰蛋白酶消化細(xì)胞2分鐘，倒掉胰蛋白酶，待輕搖細(xì)胞能完全脫落后，加完全培養(yǎng)液30ml后，用移液管吹散細(xì)胞，分裝于3個(gè)新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，繼續(xù)培養(yǎng)。
取處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞一瓶，胰蛋白酶消化后用完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞數(shù)目至1×105個(gè)細(xì)胞/毫升。于96孔板中每孔加入細(xì)胞懸100μl細(xì)胞懸液加到96孔板中，另用一培養(yǎng)板加同樣細(xì)胞懸液做本底對(duì)照。加完細(xì)胞的培養(yǎng)板于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12小時(shí)后倒掉原培養(yǎng)液，96孔板中分別加入不同濃度的藥物及完全培養(yǎng)液作正常對(duì)照。加完藥后培養(yǎng)板置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。上述實(shí)驗(yàn)均在嚴(yán)格無菌條件下進(jìn)行。
將對(duì)照用培養(yǎng)板取出于含細(xì)胞孔中輕輕加入25μl 50％預(yù)冷的三氯醋酸溶液于培養(yǎng)液面上，靜置5分鐘后，在4℃冰箱放置1小時(shí)，棄去上層液體，用去離子水洗5遍，置空氣中干燥后留待與加藥培養(yǎng)板一并染色分析。加藥培養(yǎng)48小時(shí)后，取出培養(yǎng)板，于每孔加入50ul預(yù)冷的50％三氯醋酸，靜置5分鐘后移入4℃冰箱中靜置1小時(shí)，取出用去離子水洗5遍，空氣中干燥，待完全干燥后每孔加入1％的乙酸配制的0.4％的SRB 100ul，染色20分鐘后倒掉染液，用1％乙酸洗5次，去除未結(jié)合的染料。空氣中干燥后用pH 10.5的10mmol/L的非緩沖Tris堿液150ul溶解，在平板振蕩器上振蕩5分鐘，在BioRad酶標(biāo)儀上測定各孔在490nm的光吸收。本底對(duì)照板的細(xì)胞同樣處理測定OD490。根據(jù)各孔OD490計(jì)算藥物對(duì)細(xì)胞增殖的抑制率

根據(jù)藥物濃度對(duì)數(shù)與抑制率，用Microcal Origin軟件作直線回歸，得到直線方程，計(jì)算抑制率在50％時(shí)對(duì)應(yīng)的藥物濃度即為原人參二醇衍生物對(duì)腫瘤細(xì)胞的半抑制濃度(IC50)。
1.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果表1.不同濃度藥物對(duì)A549細(xì)胞的增殖抑制率和半抑制濃度(IC50，μg/ml)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽均可濃度依賴性地抑制體外培養(yǎng)的人肺腺癌A549的體外增殖，半抑制濃度IC50分別為14.9、20.6和29.4μg/ml，說明這三個(gè)化合物具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒活性。
試驗(yàn)例2原人參二醇衍生物對(duì)小鼠體內(nèi)移植瘤增殖的抑制作用2.1材料和試劑原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽，按制備例制備。
C57BL/6小鼠，60只，體重18-22g，購自上海西普爾-畢凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。
Lewis肺癌瘤株，購自醫(yī)科院北京藥物所。
2.2實(shí)驗(yàn)方法取已接種10天的Lewis肺癌、生長狀態(tài)良好的小鼠，脫頸處死，用酒精消毒皮膚后，剝?nèi)∧[瘤組織，加入五倍重量的生理鹽水后用組織勻漿器研磨成勻漿，100目滅菌不銹鋼網(wǎng)過濾。消毒每只小鼠左側(cè)腋皮膚，接種瘤液0.2ml。接瘤后第二天隨機(jī)分為5組，分別為模型組、順鉑對(duì)照組(10mg/kg×1d)、原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽(50mg/kg)、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽(50mg/kg)、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽(50mg/kg)組。順鉑用生理鹽水配成0.5mg/ml，給藥量0.2ml/10g體重，接種第二天腹腔給藥一次。原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽分別用注射用生理鹽水配成2.5mg/ml，接種第二天起每日腹腔給藥，連續(xù)10天，給藥量0.2ml/10g體重。末次給藥后第二天處死小鼠，剝?nèi)×鼋M織稱重。計(jì)算抑瘤率。

2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2，結(jié)果表明，原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽注射給藥對(duì)小鼠Lewis腫瘤均具有明顯的抑制作用，抑瘤率分別達(dá)61.9％、63.7％和65.5％，與順鉑組(69.0％)比較未見明顯差異。給藥組各組小鼠一般狀態(tài)觀察表明，順鉑組小鼠毛色暗淡，活動(dòng)減少，精神狀態(tài)較差，順鉑組體重明顯低于模型組及其他各給藥組。而原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽三組小鼠一般狀態(tài)明顯優(yōu)于順鉑組，體重與模型組比較沒有明顯降低。表明原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽具有明顯的抗腫瘤作用，且毒副作用較順鉑小。
表2.原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽對(duì)Lewis肺癌體內(nèi)增殖的抑制作用

與模型組比較**，P＜0.01；與順鉑組比較##，P＜0.01。
試驗(yàn)例3原人參二醇衍生物對(duì)H22肝癌腹水小鼠生命延長的作用3.1材料和試劑
原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽，按制備例方法制備。
昆明種小鼠，60只，體重18～22g，山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心動(dòng)物中心提供。
H22肝癌瘤株，購自醫(yī)科院北京藥物所。
3.2實(shí)驗(yàn)方法取已接種10天的H22肝癌腹水小鼠，脫頸處死，用酒精消毒腹部皮膚后，抽取腹水，加入三倍重量的生理鹽水稀釋。消毒每只小鼠腹部皮膚，接種瘤液0.2ml。接瘤后第二天隨機(jī)分為5組，分別為模型組、順鉑對(duì)照組(10mg/kg×1d)、原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽(50mg/kg)、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽(50mg/kg)、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽(50mg/kg)組。順鉑用生理鹽水配成0.5mg/ml，給藥量0.2ml/10g體重，接種第二天腹腔給藥一次。原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽分別用注射用生理鹽水配成2.5mg/ml，接種第二天起每日靜脈給藥，連續(xù)7天，給藥量0.2ml/10g體重。給藥結(jié)束后繼續(xù)飼養(yǎng)小鼠，觀察記錄小鼠死亡時(shí)間。根據(jù)各組小鼠平均存活時(shí)間計(jì)算藥物對(duì)小鼠的生命延長率。

3.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果表3.原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽對(duì)H22肝癌腹水小鼠生命延長作用

與模型組比較**，P＜0.01。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3，結(jié)果表明，原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽注射給藥對(duì)H22肝癌腹水小鼠均具有明顯的延長存活期的作用，生命延長率分別達(dá)91.3％、104.8％和99.2％，與順鉑組(134.1％)比較未見明顯差異。
權(quán)利要求
1.式I所示的新的原人參二醇低元醇衍生物 式I其中R1＝H或CO-Alk1-COOM1；R2＝H或CO-Alk2-COOM2；Alk1、Alk2選自1-4個(gè)碳原子的亞烷基或含2-4個(gè)碳原子的亞烯基，M1和M2選自H或堿金屬元素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的衍生物，其優(yōu)選為R1＝H或CO-Alk1-COOM1；R2＝H或CO-Alk2-COOM2；Alk1、Alk2選自含兩個(gè)碳原子的亞烷基，M1和M2選自堿金屬元素。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的衍生物，當(dāng)R1＝CO-Alk1-COOM1，R2＝CO-Alk2-COOM2時(shí)，式I所示的化合物為原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯及其堿金屬鹽；當(dāng)R2＝H，R1＝CO-Alk1-COOM1時(shí)，式I所表示的化合物為原人參二醇-3-脂肪酸酯及其堿金屬鹽；當(dāng)R1＝H，R2＝CO-Alk2-COOM2時(shí)，式I所表示的化合物為原人參二醇-12-脂肪酸酯及其堿金屬鹽。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的衍生物，原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯及其堿金屬鹽優(yōu)選為原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯及其堿金屬鹽；原人參二醇-3-脂肪酸酯及其堿金屬鹽優(yōu)選為原人參二醇-3-琥珀酸酯及其堿金屬鹽；原人參二醇-12-脂肪酸酯及其堿金屬鹽優(yōu)選為原人參二醇-12-琥珀酸酯及其堿金屬鹽。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的衍生物，其特征在于堿金屬元素優(yōu)選為鈉或鉀。
6.權(quán)利要求3所述的衍生物的制備方法，原人參二醇-3，12--雙脂肪酸酯及其堿金屬鹽的制備方法為a.取原人參二醇，二元羧酸酐，吡啶，按1～2.5∶3～9∶10～20的比例(重量比)混合，加熱攪拌反應(yīng)4～30小時(shí)，稍冷，傾入冷水中，析出沉淀，過濾得到灰白色沉淀物，將沉淀物溶于乙醇中，加熱溶解，加活性炭脫色，過濾，干燥，得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯；b.將原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯加入丙酮中攪拌溶解，滴加堿金屬的氫氧化物的無水乙醇或甲醇溶液，攪拌至沉淀完全，靜置，過濾，沉淀物用少量丙酮潤洗，減壓過濾，即得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯堿金屬鹽；其中二元羧酸酐具有如下通式 ALK選自Alk1或Alk2。
7.權(quán)利要求3所述的衍生物的制備方法，原人參二醇-3-脂肪酸酯及其堿金屬鹽和原人參二醇-12-脂肪酸酯及其堿金屬鹽的制備方法為a.取原人參二醇，二元羧酸酐，吡啶，按1∶0.5～8∶10～25(重量比)的比例混合，加熱攪拌反應(yīng)4～25小時(shí)，稍冷，傾入冷水中，析出沉淀，過濾得到灰白色沉淀物，經(jīng)硅膠柱層析，乙酸乙酯/正己烷(15～30％)洗脫，分別得到原人參二醇-3-脂肪酸酯和原人參二醇-12-脂肪酸酯；b分別將原人參二醇-3-脂肪酸酯和原人參二醇-12-脂肪酸酯按權(quán)利要求6中b所述方法處理，分別得到原人參二醇-3-脂肪酸酯堿金屬鹽和原人參二醇-12-脂肪酸酯堿金屬鹽。
8.權(quán)利要求3所述的衍生物的制備方法，組合物的制備方法為取原人參二醇，二元羧酸酐，吡啶，按1～3∶0.5～8∶10～25(重量比)的比例混合，加熱攪拌反應(yīng)，稍冷，傾入冷水中，析出沉淀，過濾得到灰白色沉淀物，將沉淀物溶于乙醇中，加熱溶解，加活性炭脫色，減壓過濾，回收乙醇，干燥，即得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯、原人參二醇-3-脂肪酸酯和原人參二醇-12-脂肪酸酯的組合物；b.將上述組合物按權(quán)利要求6中b所述方法處理，即得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯堿金屬鹽、原人參二醇-3-脂肪酸酯堿金屬鹽和原人參二醇-12-脂肪酸酯堿金屬鹽的組合物。
9.權(quán)利要求1-5任一所述的衍生物在藥物中的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求1-5任一所述的衍生物在制備治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了新的原人參二醇衍生物及其制備方法，及其在制備治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明提供的原人參二醇衍生物為原人參二醇－3，12－雙脂肪酸酯及其堿金屬鹽、原人參二醇－3－脂肪酸酯及其堿金屬鹽或原人參二醇－12－脂肪酸酯及其堿金屬鹽，本發(fā)明還提供了原人參二醇衍生物在藥物方面的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K31/575GK1778810SQ20041009751
公開日2006年5月31日 申請(qǐng)日期2004年11月23日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月23日
發(fā)明者馬雙剛, 姚建文, 王振華, 劉珂 申請(qǐng)人:山東綠葉天然藥物研究開發(fā)有限公司