專利名稱：Dna誘變損傷的修復(fù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及牛尿酚、脫氫牛尿酚、異黃3烯和異黃烷化合物在促進(jìn)DNA誘變損傷的修復(fù)方面的用途。
金屬硫蛋白(MT)是應(yīng)答于DNA損傷劑，例如UVR而合成或過量表達(dá)的蛋白(Hansen等人，1997)。在絕大多數(shù)動物和組織培養(yǎng)物的研究中，較高劑量的輻射用于誘導(dǎo)MT，且因此，很難推知人暴露于較低水平的UVR下或反復(fù)照射UVR的結(jié)果(Cai等人，1999)。MT的誘導(dǎo)合成被認(rèn)為是涉及對低劑量UVR照射的適應(yīng)反應(yīng)的機(jī)理之一，且MT水平的升高似乎與對UVR的防護(hù)有關(guān)，很可能是通過清除皮膚中的ROS而介導(dǎo)的(Hanada等人，1992)。同樣，正如在MT＝I和II敲除小鼠中證實(shí)的那樣，MT涉及防止UVR對細(xì)胞介導(dǎo)的應(yīng)答的免疫抑制作用(Reeve等人，2000)。UVR在角質(zhì)形成細(xì)胞和皮膚成纖維細(xì)胞中誘導(dǎo)免疫組織化學(xué)可檢測的MT，同時伴有p53的光電導(dǎo)，其表明這些蛋白系統(tǒng)在功能方面是保護(hù)性的且有益的。UV照射后2小時，可在皮膚成纖維細(xì)胞中檢測到MT(Anstey等人，1996)。
牛尿酚、脫氫牛尿酚、isofla-3-ene和異黃烷化合物以及用于生產(chǎn)它們的方法在相關(guān)的國際專利申請PCT/AU03/00427和WO98/08503中描述，它們引入此處作為參考。
UV照射皮膚引起DNA損傷，進(jìn)而導(dǎo)致癌發(fā)生。人類最普遍的腫瘤是基底細(xì)胞癌(BCC)，其次是鱗狀上皮細(xì)胞癌(SCC)，更少見惡性黑素瘤。
現(xiàn)在本申請人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)把本發(fā)明的化合物施用于皮膚上時，導(dǎo)致皮膚、特別是被輻射皮膚的基底層中產(chǎn)生的金屬硫蛋白升高。
如上所述，金屬硫蛋白可影響并促進(jìn)UV照射過的被試者皮膚的DNA誘變損傷的修復(fù)。
根據(jù)本發(fā)明，提供牛尿酚、脫氫牛尿酚、異黃3烯或異黃烷結(jié)構(gòu)用于保護(hù)皮膚免受與UV照射有關(guān)的DNA誘變損傷的用途。
另一方面，本發(fā)明提供牛尿酚、脫氫牛尿酚、異黃3烯或異黃烷結(jié)構(gòu)用于在皮膚，特別是皮膚基底層中過量表達(dá)金屬硫蛋白的用途。
根據(jù)本發(fā)明另一方面，提供一種保護(hù)皮膚免受UV誘導(dǎo)的DNA誘變損傷的方法，其包括給皮膚施用含有混合皮膚可接受載體的牛尿酚、脫氫牛尿酚、異黃3烯或異黃烷化合物中的一種或多種的組合物。
異黃3烯和異黃烷化合物，包括其藥學(xué)可接受的鹽和衍生物可由通式(II)代表 其中R1、R2、R3和R4獨(dú)立地是氫、羥基、OR9、OC(O)R10、OS(O)R10、CHO、C(O)R10、COOH、CO2R10、CONR11R12、烷基、鹵代烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、烷芳基、烷氧芳基、硫代、烷基硫代、氨基、烷氨基、二烷氨基、硝基或鹵素，或R3和R4是如前面所定義的，且R1和R2與和它們相連的碳原子共同形成選自以下的五元環(huán) R1和R4是如前面所定義的，且R2和R3與和它們相連的碳原子共同形成選自以下的五元環(huán) 或
R1和R2是如前面所定義的，且R3和R4與和它們相連的碳原子共同形成選自以下的五元環(huán)且其中 R5、R6和R7獨(dú)立地是氫、羥基、OR9、OC(O)R10、OS(O)R10、CHO、C(O)R10、COOH、CO2R10、CONR11R12、烷基、鹵代烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、硫代、烷基硫代、氨基、烷氨基、二烷氨基、硝基或鹵素，R8是氫、羥基、烷基、芳基、氨基、硫代、NR11R12、CONR11R12、C(O)R13，其中R13是氫、烷基、芳基、芳烷基或氨基酸、或CO2R14，其中R14是氫、烷基、鹵代烷基、芳基或芳烷基，R9是烷基、鹵代烷基、芳基、芳烷基、C(O)R13，其中R13是如前面所定義的、或Si(R15)3，其中每個R15獨(dú)立地是氫、烷基或芳基，R10是氫、烷基、鹵代烷基、氨基、芳基、芳烷基、氨基酸、烷氨基或二烷氨基，R11是氫、烷基、芳烷基、烯基、芳基、氨基酸、C(O)R13，其中R13是如前面所定義的、或CO2R14，其中R14是如前面所定義的，R12是氫、烷基或芳基，或R11和R12與和它們相連的氮原子共同形成吡咯烷基或哌啶基，圖 代表單鍵或雙鍵，優(yōu)選雙鍵，T獨(dú)立地是氫、烷基或芳基，且X是O、NR12或S，優(yōu)選O。
牛尿酚與通式(II)相對應(yīng)，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8是氫，R5是羥基，X是O，且 是單鍵。脫氫牛尿酚與通式(II)相對應(yīng)，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8是氫，R5是羥基，X是O，且 是雙鍵。
皮膚可接受的載體和洗劑是本領(lǐng)域熟知的，且在下列文獻(xiàn)中描述，例如Remington’s Pharmaceutical Sciences，Gennaro A.第18版，Mack Publishing Co.，Easton，PA，1990，pp.1492-1517。任何皮膚可接受的載體均可用于本發(fā)明的組合物中。此處所用的“皮膚病學(xué)可接受的載體”是指賦形劑、稀釋劑、載體，其可包括已知用于皮膚病學(xué)組合物中的助劑、添加劑、或賦形劑。本發(fā)明的組合物包括，但不限于，霜劑、軟膏劑、溶液、棒狀物、拭紙、潔面劑和/或凝膠。本發(fā)明的化合物可簡單混合，與適宜的載體混合或摻在一起，從而產(chǎn)生適合施用于皮膚上的組合物。皮膚可接受的載體可包括一種或多種防曬劑。防曬劑包括通常用于阻斷紫外線的那些物質(zhì)。舉例性的化合物包括桂皮酸鹽的衍生物、PABA、和水楊酸鹽。例如，可使用辛基甲氧基桂皮酸鹽和2-羥基-4-甲氧基二苯甲酮(也稱作羥苯甲酮)。辛基甲氧基桂皮酸鹽和2-羥基-4-甲氧基二苯甲酮可商業(yè)獲得，商標(biāo)分別為Parsol MCX和Benzophenone-3。所用防曬劑的準(zhǔn)確量可根據(jù)所需的防止陽光中UV輻射的程度而定。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，將通式(II)的一種或多種化合物配制成化妝品?；瘖y品的例子包括霜劑、凝膠、粉劑、糊劑、餅狀物等。通常，這種化妝品可被稱作“化妝品”和/或粉底(通常用于提供平滑、均一外觀的皮膚并作為彩妝的基礎(chǔ))。
通式(II)的化合物可以0.001％-100％、優(yōu)選0.1％-20％、最優(yōu)選0.1％-10％w/w的量用于組合物中。例如，組合物可含有1μm-500mmol、如20μm-400μm牛尿酚或通式(II)的其它化合物。組合物的其余部分可包含一種或多種本領(lǐng)域熟知的皮膚病學(xué)可接受的載體和賦形劑。組合物中可使用一種或多種化合物，特別優(yōu)選牛尿酚和脫氫牛尿酚?？稍陉柟庹丈渲?、之中和/或之后局部給予皮膚所述組合物。通常，劑量約1-500mg/天，優(yōu)選2-100mg/天的劑量。
根據(jù)本發(fā)明另一方面，提供一種用于治療、改善或預(yù)防皮膚癌，如基底細(xì)胞癌(BCC)、鱗狀上皮細(xì)胞癌(SCC)及惡性黑素瘤的方法，其包括將含有通式(II)的牛尿酚、脫氫牛尿酚、或異黃3烯或異黃烷化合物中的一種或多種的組合物施用于被試者的皮膚上。
本發(fā)明另一方面提供一種增加皮膚中，如皮膚基底層中金屬硫蛋白產(chǎn)生的方法，其包括將牛尿酚、脫氫牛尿酚、異黃3烯或異黃烷化合物中的一種或多種結(jié)合皮膚可接受的載體施用于皮膚上。
申請人還發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物可促進(jìn)DNA修復(fù)。促進(jìn)DNA修復(fù)可以是通過增加環(huán)丁烷嘧啶二聚物(CPD)的修復(fù)率、通過降低p53表達(dá)而促進(jìn)DNA修復(fù)、和/或通過促進(jìn)金屬硫蛋白(MT)形成中的一種或多種實(shí)現(xiàn)的。
CPD的形成被認(rèn)為是UV照射的重要的致命和誘變結(jié)果(Mitchell等人，1989；Liardet等人，2000)。動物模型已經(jīng)證實(shí)了表皮CPD修復(fù)與皮膚癌發(fā)生之間的反涵數(shù)關(guān)系(Young等人，1996)。P53蛋白(TP53)是在UV輻射導(dǎo)致DNA損傷之后表達(dá)。P53是一種轉(zhuǎn)錄因子，其阻斷G1-S期的細(xì)胞進(jìn)程，由此防止受損DNA復(fù)制(Campbell等人，1993)。P53蛋白可起腫瘤促進(jìn)劑的作用(Murphey等人，2001)。
將參考下列非限制性實(shí)施例描述本發(fā)明。
實(shí)施例1牛尿酚對CPD誘導(dǎo)的作用是在受到與模擬日光的紫外線輻射(SSUV)的沒有毛發(fā)的小鼠(人皮膚病學(xué)研究的標(biāo)準(zhǔn)模型)皮膚中檢測的。在SSUV后的各個時間點(diǎn)，切下背部皮膚，在標(biāo)準(zhǔn)固定介質(zhì)(HistoChoiceTM，Amersco Inc，Solon，Ohio，USA)中固定6小時，處理并用石蠟包埋。嘧啶二聚物是用檸檬酸抗原恢復(fù)和H3抗-嘧啶二聚物抗體進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測的。以40x的放大倍率，在每只小鼠的30個視野中人工計(jì)算二聚物-陽性細(xì)胞數(shù)。
在用1×3MED的SSUV輻射前以及輻射后，每天施用牛尿酚洗劑(含20μM牛尿酚)共7天，牛尿酚的作用可降低二聚物的初始誘導(dǎo)，并提高它們的修復(fù)率，這是由24小時時的二聚物數(shù)的降低加以證實(shí)的(表1)。
表1UV輻射后表皮CPD-陽性細(xì)胞的誘導(dǎo)收集時間 處理 CPD+ve細(xì)胞/線性的cm正常皮膚0SSUV后1小時賦形劑+SSUV 300±18牛尿酚+SSUV 238±22賦形劑+SSUV 340±55SSUV后24小時牛尿酚+SSUV 167±17在SSUV照射后立即施用牛尿酚(且持續(xù)5天)導(dǎo)致輻射后第1天(顯著降低23％)和第二天(顯著降低42％-沒有給出數(shù)據(jù))二聚物顯著降低。
在SSUV照射之前7天和之后5天施用牛尿酚洗劑(20μM)時，與對照組(單獨(dú)的賦形劑)相比，在照射后的第1、24和48小時，CPD數(shù)立即顯著降低(p＜0.05；CPD數(shù)分別降低54％、50％和26％)。
實(shí)施例2在UV輻射后立即，和4小時和6小時后，將牛尿酚施用于5名人類志愿者的皮膚上。還使用了不含牛尿酚的對照洗劑。UV輻射后24小時，采集皮膚活檢樣品并利用免疫組織化學(xué)測量MT的產(chǎn)生。
表2表示基底真皮和表面真皮中的顯示MT陽性染色的細(xì)胞數(shù)?；渍嫫ぶ写蠹s一半的細(xì)胞以基線水平組成型表達(dá)MT，而在更表面的真皮層中，幾乎沒有細(xì)胞表達(dá)MT。照射2.5MED SSUV后24小時，在用牛尿酚處理過的切片和用基礎(chǔ)洗劑(賦形劑)中的DMSO處理過的那些之間，MT在真皮基底層中的表達(dá)有明顯差異。在所有5名參與者中，MT在用牛尿酚處理過的皮膚中的表達(dá)水平更高，差異的大小在+4％-+21％之間。
表2治療組5名人類志愿者的表皮中MT陽性染色的細(xì)胞比例總真皮 上層真皮 基底真皮受試者處理 陰性 陽性％ 陰性 陽性％ 陰性陽性％NO1DWH基線 303 201 40 99 0 0 204 201 5010mins255 179 41 72 0 0 183 179 49DMSO 282 185 40 70 0 0 212 185 47牛尿酚303 382 56 185 2 1 118 380 76NO3PPA基線 227 109 32 97 0 0 130 109 4610mins231 237 51 77 4 5 154 233 60DMSO 317 236 43 96 4 4 221 232 51牛尿酚270 271 50 82 0 0 188 271 59NO6MED基線 420 413 50 169 0 0 251 413 6210mins437 565 56 168 1 1 269 564 68DMSO 440 442 50 130 6 4 310 436 58牛尿酚315 539 63 76 8 10 239 531 69N13PDO基線 267 217 45 112 0 0 155 217 5810mins468 703 60 270 10 4 198 693 78DMSO 465 405 47 144 0 0 321 405 56牛尿酚323 527 62 169 5 3 154 522 77N14GBO基線 270 127 32 113 0 0 157 127 4510mins381 242 39 247 0 0 134 242 64DMSO 276 217 44 111 4 3 165 213 56牛尿酚225 234 51 68 1 1 157 233 60注釋“基線”是指在照射2.5MED SSUV前采集的刺取活檢樣品的皮膚切片。
“10分鐘”是指在照射2.5MED SSUV后10分鐘采集的刺取活檢樣品的皮膚切片。該皮膚沒有用基礎(chǔ)洗劑(賦形劑)中的DMSO或200μM牛尿酚處理過。
“DMSO”是指在照射2.5MED SSUV后24小時采集的刺取活檢樣品的皮膚切片。該皮膚來源于用基礎(chǔ)洗劑(賦形劑)中的DMSO處理過的格柵。
“牛尿酚”是指在照射2.5MED SSUV后24小時采集的刺取活檢樣品的皮膚切片。該皮膚來源于用200μM牛尿酚處理過的格柵。
剛剛照射過UV的個體的基底和基底上角質(zhì)形成細(xì)胞中MT免疫反應(yīng)性的增加在已用牛尿酚處理過的皮膚中是最高的。
實(shí)施例3
利用免疫組織化學(xué)測試實(shí)施例2中5名人類志愿者的皮膚活檢樣品的環(huán)丁烷嘧啶二聚物的形成。
表3給出用CPD抗體陽性染色的細(xì)胞數(shù)和百分比。這些數(shù)據(jù)證實(shí)了，正如所預(yù)期的，在用2.5MED輻射前，表皮中基本沒有CPD-陽性細(xì)胞。然而，從UV照射后10分鐘的所有參與者采集的皮膚切片顯示出高水平的DNA損傷，陽性染色的細(xì)胞比例為36％(參與者N01DWH和N03PPA)-87％(參與者N14GBO)。
UV照射后24小時所采集的皮膚切片顯示出在所有被試者中，CPD損傷水平均顯著降低。對于5名參與者中的4名而言，與用基礎(chǔ)洗劑(賦形劑)中的DMSO處理過的皮膚切片相比，用牛尿酚洗劑處理過的皮膚切片中的CPD-陽性細(xì)胞成比例地減少。
表3治療組5名人類志愿者的表皮中CPD陽性染色的細(xì)胞比例總真皮 上層真皮基底真皮受試者處理陰性陽性 ％ 陰性陽性 ％ 陰性 陽性 ％NO1DWH基線345 0 0134 0 02110 010mins 162 10740 64 51 44 98 56 36DMSO231 10531 81 47 37 15058 28牛尿酚 164 39 19 70 23 25 94 16 15NO3PPA基線309 0 0104 0 02050 010mins 204 19148 56 10665 14885 36DMSO179 25 12 55 20 27 1245 4牛尿酚 349 18 570 17 20 2791 0NO6MED基線309 0 090 0 02190 010mins 136 36473 19 19891 11716659DMSO339 65 16 112 59 35 2276 3牛尿酚 279 92 25 98 71 42 18121 10N13PDO基線205 0 060 0 01450 010mins 69 19574 20 94 82 49 10167DMSO105 68 39 78 51 40 27 17 39牛尿酚 213 94 31 79 50 39 13444 25N14GBO基線255 0 098 0 01570 010mins 34 38992 0 157100 34 23287DMSO240 13135 93 69 43 14762 30牛尿酚 188 85 31 63 44 41 12541 25注釋“基線”是指在照射2.5MED SSUV前采集的刺取活檢樣品的皮膚切片。
“10分鐘”是指在照射2.5MED SSUV后10分鐘采集的刺取活檢樣品的皮膚切片。該皮膚沒用基礎(chǔ)洗劑(賦形劑)中的DMSO或200μM牛尿酚處理過。
“DMSO”是指在照射2.5MED SSUV后24小時采集的刺取活檢樣品的皮膚切片。該皮膚來源于用基礎(chǔ)洗劑(賦形劑)中的DMSO處理過的格柵。
“牛尿酚”是指在照射2.5MED SSUV后24小時采集的刺取活檢樣品的皮膚切片。該皮膚來源于用含200μM牛尿酚的洗劑處理過的格柵。當(dāng)把所有參與者的數(shù)據(jù)匯集在一起時，可以看出用牛尿酚處理過的皮膚切片在第24小時的CPD損傷水平適度降低。
實(shí)施例4在UV輻射后，測試實(shí)施例2中5名人類志愿者的皮膚活檢樣品的P53染色。結(jié)果在表4中給出。
表4治療組5名人類志愿者的表皮中p53陽性染色的細(xì)胞比例總真皮 上層真皮基底真皮受試者 處理陰性陽性 ％ 陰性陽性 ％ 陰性 陽性 ％NO1DWH 基線261 0 0115 0 01460 010mins 343 1 0154 1 11890 0DMSO187 12 679 4 51088 7牛尿酚 270 94 26 109 48 31 16146 22NO3PPA 基線274 2 1112 1 11621 110mins 316 2 1114 2 22020 0DMSO223 55 20 81 31 28 14224 14牛尿酚 337 87 21 165 72 30 17215 8NO6MED 基線412 1 0134 0 02781 010mins 402 3 1153 1 12492 1DMSO462 13322 165 77 32 29756 16牛尿酚 500 50 9250 19 725031 11N13PDO 基線325 0 0141 0 01840 010mins 304 0 0140 0 01640 0DMSO222 45 17 109 8 711337 25牛尿酚 287 13 4147 4 31409 6N14GBO 基線321 0 0149 0 01720 010mins 292 4 1185 2 11072 2DMSO217 19047 106 10650 11184 43牛尿酚 227 76 25 109 35 24 11841 26
注釋“基線”是指在照射2.5MED SSUV前采集的刺取活檢樣品的皮膚切片。
“10分鐘”是指在照射2.5MED SSUV后10分鐘采集的刺取活檢樣品的皮膚切片。該皮膚沒用基礎(chǔ)洗劑(賦形劑)中的DMSO或200μM牛尿酚處理過。
“DMSO”是指在照射2.5MED SSUV后24小時采集的刺取活檢樣品的皮膚切片。該皮膚來源于用基礎(chǔ)洗劑(賦形劑)中的DMSO處理過的格柵。
“牛尿酚”是指在照射2.5MED SSUV后24小時采集的刺取活檢樣品的皮膚切片。該皮膚來源于用200μM牛尿酚處理過的格柵。
正如所預(yù)期的，在用2.5MED輻射前，在所有參與者的表皮中均基本上沒有表達(dá)p53的細(xì)胞。類似的，與文獻(xiàn)所述一致的是，在UV照射后10分鐘，從參與者采集的皮膚切片顯示可忽略不計(jì)的p53表達(dá)水平。
與UV照射后24小時采集的皮膚切片在所有被試者中顯示明顯更高的p53表達(dá)水平。在5名用牛尿酚處理過的被試者中的4名中，上層和/或基底表皮中的p53表達(dá)百分比降低。例如，與賦形劑對照組相比，在被試者N13PDO和N14GBO中，p53染色的百分比顯著降低(通常高于50％)。
結(jié)論在這些實(shí)驗(yàn)中評價的生物標(biāo)記是以它們和皮膚癌的生物學(xué)相關(guān)性為基礎(chǔ)而選擇的(其與UV-誘導(dǎo)的DNA誘變損傷直接相關(guān))。
UV-誘導(dǎo)的氧化損傷現(xiàn)在被認(rèn)為可能是皮膚癌的重要原因。MT是具有抗-氧化性的分子，它們應(yīng)答于UV照射而被特異性誘導(dǎo)。本研究發(fā)現(xiàn)了一致的證據(jù)，即用牛尿酚，且據(jù)信用通式(II)的其它化合物處理過的人類皮膚可較之用基礎(chǔ)洗劑處理過的皮膚誘導(dǎo)更多的MT。
CPD是UV輻射后，分子損傷的最早期指示劑，且如果不被修復(fù)將導(dǎo)致皮膚細(xì)胞DNA的固定突變。因此，照射后處理的作用的其中一個機(jī)理是增加對這些損傷的修復(fù)率。這里進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)表明CPD修復(fù)可由局部施用牛尿酚組合物及含有一種或多種通式(II)化合物的其它組合物來提高。
很明顯P53是一種重要的調(diào)節(jié)基因，其通常在表皮皮膚癌中突變。此外，在正常皮膚細(xì)胞中，p53在UV照射后被向上調(diào)節(jié)，從而防止DNA損傷修復(fù)前的有絲分裂。對5名被試者中的4名而言，在引起表達(dá)p53的上表皮或基底表皮中的細(xì)胞數(shù)降低的研究中牛尿酚可調(diào)節(jié)p53的表達(dá)。
在本說明書和權(quán)利要求書中，除非另有說明，詞語“包含”，可理解為暗含包括規(guī)定的整體或整體的步驟或組或步驟，但不排除任何其它整體或整體的步驟或組或步驟。
本說明書中的任何現(xiàn)有技術(shù)的參考文獻(xiàn)都不是，且不應(yīng)被認(rèn)為是澳大利亞常規(guī)知識的現(xiàn)有技術(shù)形式的確認(rèn)或任何形式的暗示。
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權(quán)利要求
1.一種用于保護(hù)皮膚免受UV誘導(dǎo)的DNA誘變損傷的方法，其包括給皮膚局部施用含有混合皮膚病學(xué)可接受載體的一種或多種通式(II)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或衍生物的組合物 其中R1、R2、R3和R4獨(dú)立地是氫、羥基、OR9、OC(O)R10、OS(O)R10、CHO、C(O)R10、COOH、CO2R10、CONR11R12、烷基、鹵代烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、烷芳基、烷氧芳基、硫代、烷基硫代、氨基、烷氨基、二烷氨基、硝基、或鹵素，或R3和R4是如前面所定義的，且R1和R2與和它們相連的碳原子共同形成選自以下的五元環(huán) R1和R4是如前面所定義的，且R2和R3與和它們相連的碳原子共同形成選自以下的五元環(huán) 或R1和R2是如前面所定義的，且R3和R4與和它們相連的碳原子共同形成五元環(huán) 且其中R5、R6和R7獨(dú)立地是氫、羥基、OR9、OC(O)R10、OS(O)R10、CHO、C(O)R10、COOH、CO2R10、CONR11R12、烷基、鹵代烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、硫代、烷基硫代、氨基、烷氨基、二烷氨基、硝基、或鹵素，R8是氫、羥基、烷基、芳基、氨基、硫代、NR11R12、CONR11R12、C(O)R13，其中R13是氫、烷基、芳基、芳烷基或氨基酸，或CO2R14，其中R14是氫、烷基、鹵代烷基、芳基或芳烷基，R9是烷基、鹵代烷基、芳基、芳烷基、C(O)R13，其中R13是如前面所定義的、或Si(R15)3，其中每個R15獨(dú)立地是氫、烷基或芳基，R10是氫、烷基、鹵代烷基、氨基、芳基、芳烷基、氨基酸、烷氨基或二烷氨基，R11是氫、烷基、芳烷基、烯基、芳基、氨基酸、C(O)R13，其中R13是如前面所定義的、或CO2R14，其中R14是如前面所定義的，R12是氫、烷基或芳基，或R11和R12與和它們相連的氮原子共同形成吡咯烷基或哌啶基，圖 代表單鍵或雙鍵，優(yōu)選雙鍵，T獨(dú)立地是氫、烷基或芳基，且X是O、NR12或S，優(yōu)選O。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述一種或多種通式(II)化合物包括牛尿酚和脫氫牛尿酚。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其是用于預(yù)防皮膚癌形成的方法。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中皮膚癌選自基底細(xì)胞癌、鱗狀上皮細(xì)胞癌及惡性黑素瘤。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中通過增加環(huán)丁烷-嘧啶二聚物的修復(fù)率、促進(jìn)金屬硫蛋白的形成、和降低p53表達(dá)中的一種或多種來保護(hù)皮膚免受UV-誘導(dǎo)的誘變損傷。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5所述的方法，其中在UV照射之前、之中和/或之后給予所述組合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中在UV照射之前給予所述組合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中在UV照射之前和之后給予所述組合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8所述的方法，其中所述組合物包含20μm-500mmol的通式(II)化合物。
10.混合皮膚病學(xué)可接受載體的一種或多種通式(II)化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或衍生物用于制備保護(hù)皮膚免受與UV照射有關(guān)的DNA誘變損傷的局部組合物的用途， 其中R1、R2、R3和R4獨(dú)立地是氫、羥基、OR9、OC(O)R10、OS(O)R10、CHO、C(O)R10、COOH、CO2R10、CONR11R12、烷基、鹵代烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、烷芳基、烷氧芳基、硫代、烷基硫代、氨基、烷氨基、二烷氨基、硝基或鹵素，或R3和R4是如前面所定義的，且R1和R2與和它們相連的碳原子共同形成選自以下的五元環(huán) R1和R4是如前面所定義的，且R2和R3與和它們相連的碳原子共同形成選自以下的五元環(huán) 或R1和R2是如前面所定義的，且R3和R4與和它們相連的碳原子共同形成選自以下的五元環(huán) 且其中R5、R6和R7獨(dú)立地是氫、羥基、OR9、OC(O)R10、OS(O)R10、CHO、C(O)R10、COOH、CO2R10、CONR11R12、烷基、鹵代烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、硫代、烷基硫代、氨基、烷氨基、二烷氨基、硝基或鹵素，R8是氫、羥基、烷基、芳基、氨基、硫代、NR11R12、CONR11R12、C(O)R13，其中R13是氫、烷基、芳基、芳烷基或氨基酸，或CO2R14，其中R14是氫、烷基、鹵代烷基、芳基或芳烷基，R9是烷基、鹵代烷基、芳基、芳烷基、C(O)R13，其中R13是如前面所定義的、或Si(R15)3，其中每個R15獨(dú)立地是氫、烷基或芳基，R10是氫、烷基、鹵代烷基、氨基、芳基、芳烷基、氨基酸、烷氨基或二烷氨基，R11是氫、烷基、芳烷基、烯基、芳基、氨基酸、C(O)R13，其中R13是如前面所定義的、或CO2R14，其中R14是如前面所定義的，R12是氫、烷基或芳基，或R11和R12與和它們相連的氮原子共同形成吡咯烷基或哌啶基，圖 代表單鍵或雙鍵，優(yōu)選雙鍵，T獨(dú)立地是氫、烷基或芳基，且X是O、NR12或S，優(yōu)選O。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的用途，其中所述一種或多種通式(II)化合物包括牛尿酚和脫氫牛尿酚。
12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的用途，其是用于預(yù)防皮膚癌形成的方法。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的用途，其中皮膚癌選自基底細(xì)胞癌、鱗狀上皮細(xì)胞癌及惡性黑素瘤。
14.根據(jù)權(quán)利要求10所述的用途，其中通過增加環(huán)丁烷-嘧啶二聚物的修復(fù)率、促進(jìn)金屬硫蛋白的形成、和降低p53表達(dá)中的一種或多種來保護(hù)皮膚免受DNA誘變損傷。
15.根據(jù)權(quán)利要求10-14所述的用途，其中在UV照射之前、之中和/或之后給予所述組合物。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的用途，其中在UV照射之前給予所述組合物。
17.根據(jù)權(quán)利要求15所述的用途，其中在UV照射之前和之后給予所述組合物。
18.根據(jù)權(quán)利要求10-17所述的用途，其中所述組合物包含20μm-500mmol的通式(II)化合物。
19.通式(II)的化合物用于保護(hù)皮膚免受與UV照射有關(guān)的DNA誘變損傷的用途。
20.根據(jù)權(quán)利要求1-9所述的方法，其中所述組合物包括化妝或防曬組合物。
21.根據(jù)權(quán)利要求10-19所述的用途，其中所述組合物包括化妝或防曬組合物。
22.一種化妝或防曬組合物，其包含與一種或多種皮膚可接受的載體或賦形劑相結(jié)合的如上文所定義的一種或多種通式(II)化合物。
23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的化妝組合物，其包含化妝或粉底組合物。
全文摘要
本發(fā)明描述了用于保護(hù)皮膚免受UV－誘導(dǎo)的DNA誘變損傷的方法，包括給予混合皮膚可接受載體的牛尿酚、脫氫牛尿酚、異黃3烯和異黃烷化合物中的一種或多種。本發(fā)明還描述了用于預(yù)防皮膚癌形成的方法。
文檔編號A61K31/35GK1688285SQ03824011
公開日2005年10月26日 申請日期2003年9月5日 優(yōu)先權(quán)日2002年9月6日
發(fā)明者G·E·凱利, A·哈斯班德, C·沃爾克 申請人:諾沃根研究有限公司