專利名稱：二水合脫氫表雄酮和采用其組合物治療哮喘或慢性阻塞性肺部疾病的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種呼吸道干粉制劑，它含有藥學(xué)或獸醫(yī)學(xué)上可接受的載體和共價連接到多價無機(jī)或有機(jī)二羧酸上的脫氫表雄酮(DHEA)，或其藥學(xué)或獸醫(yī)學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還涉及該干粉制劑的制備和輸送方法，用于治療哮喘、慢性阻塞性肺部疾病(COPD)或其他呼吸疾病或狀況，包括微生物(包括細(xì)菌)或病毒引起的呼吸疾病，例如嚴(yán)重的急性呼吸道綜合癥(SARS)。
背景技術(shù)：
與多種疾病和狀況有關(guān)的哮喘和COPD和其他呼吸疾病在人群中是極為常見的，在某些種族中更為常見，例如非洲裔美國人。呼吸疾病包括微生物感染或病毒感染(例如SARS)。在許多情形下，它們伴有炎癥，使肺部狀況惡化。例如哮喘是一種工業(yè)化國家中最常見的疾病。在美國，它占衛(wèi)生保健總成本的約1％。有報道說，在過去十年中，哮喘的流行和死亡率都有警報性升高，而且據(jù)預(yù)測哮喘在未來十年內(nèi)將是主要的肺部疾病。雖然工業(yè)化國家中，哮喘的死亡率升高歸因于治療中依賴β促效藥，但是引起哮喘的深層起因仍了解不足。
哮喘的特征是可變的，在許多情形下，它可逆地阻塞氣管。該過程與肺部發(fā)炎相關(guān)，總的來說，與肺部變態(tài)反應(yīng)有關(guān)。許多病人具有劇烈的急性發(fā)作，稱為“哮喘發(fā)作”，其他人則受到慢性狀況的折磨。據(jù)認(rèn)為在一些病例中，哮喘過程是由過敏患者吸入抗原引發(fā)的。該狀況通常稱為“外因性哮喘”。其他哮喘則具有內(nèi)在的誘因，由此稱為“內(nèi)因性哮喘”，它可以包括不同起因的狀況，包括由腺苷受體介導(dǎo)引起的，由免疫IgE介導(dǎo)反應(yīng)所間接引起的變態(tài)反應(yīng)狀況和其他原因。所有的哮喘都具有一組癥狀，其特征是支氣管收縮、肺部發(fā)炎肺部表面活性物質(zhì)減少?，F(xiàn)有的支氣管擴(kuò)張藥和消炎藥能夠買到，并規(guī)定是用于治療哮喘。最常見的消炎藥和皮質(zhì)醇具有很多的副作用，但是仍然經(jīng)常在處方中使用。更重要的是可以購買的用于治療哮喘的大多數(shù)藥在少數(shù)患者中幾乎無效。
慢性阻塞性肺部疾病(COPD)引起氣管內(nèi)氣流的持續(xù)阻塞。COPD的特征是氣流阻塞，這通常由慢性支氣管炎、肺氣腫或兩者所引起。通常，氣管阻塞多數(shù)是不可逆的。在慢性支氣管炎中，氣管阻塞起因于反常的氣管粘液的慢性和過多分泌、發(fā)炎、支氣管痙攣和感染。慢性支氣管炎的特征也在于在排除慢性咳嗽的其他原因情形下，在至少連續(xù)兩年內(nèi)的至少三個月的慢性咳嗽、產(chǎn)生粘液或兩者都有。在肺氣腫中，末端支氣管中的結(jié)構(gòu)成分(彈性蛋白)被損壞，導(dǎo)致氣管壁坍塌，不能排除“廢氣”。在肺氣腫中，具有長期的氣泡損壞。肺氣腫的特征是空氣阻隔在末梢與末端細(xì)支氣管之間，引起反常的長期擴(kuò)張，伴隨有氣管壁的損壞，而且沒有明顯的纖維化。COPD也能夠?qū)е吕^發(fā)性高血壓。繼發(fā)性高血壓自身是一種失調(diào)狀態(tài)其中肺部動脈內(nèi)的血壓反常地高。在嚴(yán)重的病例中，心臟的右側(cè)必須工作得比平常更費力，送出血液，以抵抗高血壓。如果這樣的狀態(tài)長期持續(xù)，右側(cè)心臟就擴(kuò)張，功能變差，血液集中在腳部(水腫)和腹部。最終，左側(cè)心臟也開始變差。肺部疾病引起的心臟變差稱為肺心病。
COPD的特征是侵襲中年人和老年人，它是世界范圍內(nèi)發(fā)病率和死亡率最高的病因之一。在美國，它侵襲約1400萬人，死亡率位據(jù)第四，致殘率位據(jù)第三。但是，其發(fā)病率和死亡率仍然在升高。據(jù)估計，在美國自1982年以來，該疾病的流行率升高了41％，年齡校正過的死亡率在1966-1985年之間升高了71％。這與同時期年齡校正過的所有病因的死亡率的下降(下降了22％)和心血管疾病的死亡率的下降(下降了45％)呈相反的趨勢。在1998年，COPD在美國共死亡112,584例。
但是，COPD是可以預(yù)防的，因為據(jù)認(rèn)為它的主要起因是接觸香煙煙霧。長期抽煙是COPD的最常見的起因。它占所有病例的80-90％。一個抽煙的人死于COPD的可能性比不抽煙的人高10倍。該病在終身不抽煙的人身上很少見，而接觸抽煙環(huán)境的人會有至少部分氣管阻塞。提出的其他病因包括氣管的超易反應(yīng)性或高敏性、周圍空氣的污染和變態(tài)反應(yīng)。COPD中的氣管阻塞在連續(xù)抽煙的人身上通常是漸進(jìn)的。這導(dǎo)致了早期的致殘并縮短壽命。停止抽煙使肺部功能的下降轉(zhuǎn)變?yōu)椴怀闊熑说乃街?。其他危險性的因素包括遺傳、二手抽煙、接觸工作時和環(huán)境中的空氣污染、兒童時期的呼吸道感染史。COPD的癥狀包括慢性咳嗽、胸部緊張、呼吸縮短、呼吸費力、產(chǎn)生的粘液增多和頻繁的咽喉清理。
目前，尚不能有效地減輕COPD的癥狀，預(yù)防其惡化，并保持最好的肺部功能，和改善日常活動和提高生活質(zhì)量。許多患者在余生會長期使用藥物，這樣就需要增大劑量，而且在惡化時需要其他藥物。目前COPD患者的處方用藥包括快速作用的β2-促效藥、抗膽堿能支氣管擴(kuò)張藥、長效的支氣管擴(kuò)張藥、抗生素和化痰藥。在目前有效的治療COPD的藥物中，在施用抗膽堿能藥、β2腎上腺素能促效藥和口服類固醇中，發(fā)現(xiàn)了短期療效而不是長期療效。
短效和長效的吸入的β2腎上腺素能促效藥達(dá)到短期的支氣管擴(kuò)張效果，并使COPD患者的部分癥狀減輕。但是，它對于疾病的漸進(jìn)過程顯示不出有意義的維持效果。短期作用的β2腎上腺素能促效藥改善COPD患者的癥狀，例如提高練習(xí)容量，并產(chǎn)生部分程度的支氣管擴(kuò)張，甚至在一些嚴(yán)重的病例中，提高肺部功能。發(fā)現(xiàn)更新的長效的吸入的β2腎上腺素能促效藥的最大效果是能夠比得上短期作用的β2腎上腺素能促效藥。發(fā)現(xiàn)沙美特羅改善癥狀，并提高生活質(zhì)量，盡管它僅產(chǎn)生中等的肺部功能或在肺部功能方面沒有變化。但是，在哮喘方面，β2腎上腺素能促效藥與死亡危險性的增大、哮喘控制的惡化和肺部功能的下降是相關(guān)的。β2促效藥例如舒喘寧有助于擴(kuò)張狹窄的氣管。使用β2促效藥能夠產(chǎn)生奇異的支氣管痙攣，會威脅COPD患者的生命。另外，使用β2促效藥能夠產(chǎn)生心血管方面效果，例如改變脈搏率、血壓和心電圖結(jié)果。在很少的病例中，使用β2促效藥能夠產(chǎn)生過敏性反應(yīng)，例如蕁麻疹、血管性水腫、皮疹和口咽部水腫。在這些病例中，使用β2促效藥應(yīng)當(dāng)是不連續(xù)的。用支氣管擴(kuò)張藥異丙托二溴銨或非諾特羅連續(xù)治療哮喘和COPD患者，與在需要的基礎(chǔ)上提供的治療相比，導(dǎo)致肺部功能更快地下降。由此說明它們不適于維持性治療。另一方面，β2腎上腺素能促效藥的最常見直接副作用是震顫，在高劑量下會引起血漿中的鉀含量、節(jié)律障礙下降，并降低動脈氧壓力。β2腎上腺素能促效藥與抗膽堿能藥物的組合與這些藥物單獨使用相比，幾乎不能提供額外的支氣管擴(kuò)張。但是，相對于單獨的各藥物，在約90天吸入的β2腎上腺素能促效藥的標(biāo)準(zhǔn)劑量基礎(chǔ)上，額外的異丙托二溴銨在穩(wěn)定的COPD患者身上產(chǎn)生一部分改善作用。發(fā)現(xiàn)在COPD患者身上，抗膽堿能劑與抗膽堿能劑組合，產(chǎn)生比β2腎上腺素能促效藥更大的支氣管擴(kuò)張?？偟膩碚f，β2腎上腺素能促效藥的副作用的出現(xiàn)，例如震顫和節(jié)律障礙，比使用抗膽堿能更頻繁。因此，抗膽堿能和β2腎上腺素能促效藥都不能對COPD患者產(chǎn)生作用，兩者組合也沒有作用。
抗膽堿能藥物達(dá)到短期的支氣管擴(kuò)張，并減輕COPD患者部分癥狀。但是，即使有吸入藥物，也不能改善長期預(yù)后。多數(shù)COPD患者有至少部分的氣管阻塞，通過異丙托二溴銨可以減輕一些?！胺尾拷】笛芯俊卑l(fā)現(xiàn)在男性和女性抽煙者身上有早期COPD的肺活量征兆。經(jīng)過5年的三次治療比較，發(fā)現(xiàn)異丙托二溴銨對于患者肺部的功能有效量的下降沒有顯著作用，而停止抽煙會使肺部的功能有效量緩慢下降。但是，異丙托二溴銨產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用，例如心臟病癥、高血壓、皮疹和膀胱滯留?？鼓憠A能支氣管擴(kuò)張藥，例如異丙托二溴銨和茶堿衍生物，有助于擴(kuò)張狹窄的氣管。長效的支氣管擴(kuò)張藥有助于緩解氣管的縮窄，并有助于防止與COPD相關(guān)的支氣管痙攣。茶堿在COPD患者身上具有很小的支氣管擴(kuò)張作用，然而它們具有一些共同的副作用，而且假設(shè)需要15-20mg/l的血濃度以便達(dá)到最佳效果，它們就具有很小的治療范圍。副作用包括惡心、腹瀉、頭痛、刺激、煩躁、癲癇和心臟心律失常，而且它們在高可變血濃度下發(fā)生，在許多人身上，它們出現(xiàn)在治療范圍內(nèi)。茶堿的劑量必須根據(jù)抽煙習(xí)慣、感染和其他治療逐個調(diào)整，很繁雜。雖然有人聲稱茶堿曾在哮喘方面具有消炎作用，尤其是較低劑量下，盡管它們的支氣管擴(kuò)張短期作用看起來與安慰劑在統(tǒng)計數(shù)據(jù)上不同，但是在COPD方面尚無報道。茶堿的副作用和需要頻繁監(jiān)視限制了它們的用途。沒有證據(jù)表明抗膽堿能劑影響肺部功能的下降，粘液溶解顯示出降低了惡化的頻率，但是會對肺部功能有害。β2腎上腺素能促效藥、口服皮質(zhì)醇和抗生素的長期作用尚無評價，但是迄今，沒有其他藥物顯示出影響疾病的進(jìn)程或生存率。
口服皮質(zhì)醇部分改善穩(wěn)定COPD患者的基線功能有效量。但是發(fā)現(xiàn)皮質(zhì)醇全身性給藥是有害的，至少導(dǎo)致部分骨質(zhì)疏松，并引發(fā)顯性糖尿病。長期施用口服皮質(zhì)醇對COPD可能是有用的，但是必須衡量它們的有用性與副作用。發(fā)現(xiàn)吸入的皮質(zhì)醇在氣管對于組胺的超易反應(yīng)性方面沒有實際的短期作用，但是在肺部功能方面，例如在預(yù)支氣管擴(kuò)張的功能性有效量方面，具有很小的長期作用。COPD患者的氟地松治療顯示出中等和嚴(yán)重(而不是輕微的)惡化的顯著降低，在肺部功能和6分鐘步行距離方面有很小但是很明顯的改善?？诜娔崴升?、吸入倍氯米松或兩者都對于COPD患者沒有作用，但是口服皮質(zhì)醇改善肺部功能。粘液溶解物對于惡化的持續(xù)和頻率有中等的益處，但是對于肺部功能有副作用。然而N-乙酰半胱氨酸或其他的粘液溶解物對于嚴(yán)重COPD患者(功能有效量＜50％)都沒有顯著的作用，盡管曾證明會大大降低惡化的頻率。N-乙酰半胱氨酸產(chǎn)生腸胃副作用。對血氧不足(hypoxaemic)的COPD和強(qiáng)心劑無效的充血患者施用長期氧療，在前500天左右，對于患者的死亡率幾乎沒有影響，但是，隨后男性的存活率有提升，并在后5年期間保持不變。但是，在整個研究過程中，氧降低女性患者的死亡率。對血氧不足的COPD患者持續(xù)進(jìn)行氧療(預(yù)測功能有效量＜70％)達(dá)19.3年，會降低總的死亡風(fēng)險。但是，迄今為止，發(fā)現(xiàn)僅生活方式改變、停止抽煙和長期用氧療(在血氧不足的患者身上)就可以改變COPD的長期進(jìn)程。
在最先有呼吸道感染的征兆出現(xiàn)時，也常常采用抗生素，防止進(jìn)一步損害和病肺的感染?；祫┯兄谒缮⒑团懦鰪臍夤芊置诘恼骋?，并有助于使呼吸輕松。
另外，其他藥物也可以列入處方來控制與COPD有關(guān)的狀況。它們可以包括利尿劑(用于治療以免除與右側(cè)心臟損壞相關(guān)的過量水留存)、洋地黃(強(qiáng)化心臟的搏擊力)、止痛藥、咳嗽抑制劑和催眠劑。后來列出的藥物有助于減輕與COPD有關(guān)的癥狀，但是不醫(yī)治COPD。
由此可知，目前幾乎沒有有效的方式來減輕COPD癥狀、防止其惡化、保持最佳的肺部功能、并改善日常的活動量和生活質(zhì)量。
嚴(yán)重的急性呼吸道綜合癥(SARS)是一種呼吸疾病，它最近在亞洲、北美洲和歐洲有報道?？偟膩碚f，SARS患者最初都經(jīng)歷100.4°F(＞38.0℃)以上的高熱。它可以伴隨或后發(fā)有頭痛、全身不適、和身體疼痛。某些患者還會有呼吸道癥狀。在后來的2-7天，SARS患者還會有干咳和呼吸困難。SARS最初是由人與人的近距離接觸而傳播。多數(shù)SARS患者是曾經(jīng)照料SARS患者或與SARS患者生活在一起的人們，或與另一名SARS患者的感染物(例如呼吸道分泌物)直接接觸的人。能夠傳播SARS的潛在途徑包括接觸染上傳染性飛沫的其他人的皮膚或物體，然后接觸自己的眼睛、鼻子或嘴。當(dāng)某個人患上了SARS咳嗽或打噴嚏將飛沫打到它們自己身上、其他人身上或附近的表面上時，就會發(fā)生這樣的傳播。
疾病控制和預(yù)防中心(CDC)的科學(xué)家們和其他實驗室在SARS患者身上檢測出了以前未知的冠狀病毒SARS-CoV，這是SARS起因的主要推測(見網(wǎng)址http//www.sciencemag.org/cgi/rapidpdf/1085952vl.pdf)。SARS-CoV的序列已經(jīng)被排序，所有的序列，除了前導(dǎo)序列，都直接來自于病毒RNA。SARS冠狀病毒的基因組是29,727核苷長度，基因組的組織與其他冠狀病毒相似。開放讀框已經(jīng)被識別，它對應(yīng)于預(yù)定的聚合酶蛋白質(zhì)(聚合酶1a，1b)、穗狀花序(spike)蛋白質(zhì)(S)、小膜蛋白質(zhì)(E)、膜蛋白質(zhì)(M)和核殼體蛋白質(zhì)(N)(見網(wǎng)址http//www.cdc.gov/ncidod/sars/pdf/nucleoseq.pdf)。
世界范圍的研究者一直在辛勤工作，找出SARS的治療方法。但是，目前尚無治療方法可以有效地阻止與SARS相關(guān)的SARS-CoV冠狀病毒。目前使用或考慮用于治療SARS的抗病毒藥物包括病毒唑、6-氮雜尿苷、吡唑霉素、菌酚酸和甘草素。但是，所有這些藥物都有嚴(yán)重的副作用(例如甘草素的副作用包括增高血壓和降低鉀含量)。用消炎藥甲基強(qiáng)的松龍治療在SARS患者身上顯示出部分改善(見LK.等人的“嚴(yán)重急性呼吸道綜合癥的標(biāo)準(zhǔn)治療議定書的進(jìn)展”，Lancet 361(9369)1615-7，2003)。由此可知，目前幾乎沒有有效的方法減輕SARS的癥狀。
脫氫表雄酮是非糖皮質(zhì)激素類固醇。DHEA也稱為5-雄烯-3β-醇-17-酮和DHEA硫酸鹽(DHEA-S)、硫酸鹽化的DHEA形式是內(nèi)生性荷爾蒙，由靈長類動物和一些非靈長類動物的腎上腺皮質(zhì)在對ACTH的釋放作出反應(yīng)時分泌。DHEA是在幾個內(nèi)分泌過程中重要的雄激素和雌激素類固醇荷爾蒙兩者的前體。目前DHEA的醫(yī)學(xué)應(yīng)用局限于受控的臨床實驗，而且作為食物的補充，據(jù)認(rèn)為對于中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的DHEA含量、精神、內(nèi)分泌、婦科、產(chǎn)科、免疫和心血管官能都有作用。
據(jù)認(rèn)為DHEA-S或其醫(yī)學(xué)上可以接受的鹽可以改善子宮頸的成熟和子宮肌肉在后期妊賑對催產(chǎn)素的敏感性。據(jù)認(rèn)為DHEA-S其醫(yī)學(xué)上可以接受的鹽在以下方面有效癡呆治療、高血脂治療、骨質(zhì)疏松治療、潰瘍治療、與高水平腺苷相關(guān)的失調(diào)或與腺苷的高敏感性相關(guān)的失調(diào)(例如依賴于類固醇的哮喘和其他呼吸道和肺部疾病)。脫氫表雄酮自身以前在臨床試驗上這樣施用靜脈輸入、皮下輸入、經(jīng)皮輸入、陰道輸入、局部施用和口服。但是，在預(yù)制劑研究方面，發(fā)現(xiàn)無水形式的DHEA硫酸鈉(DHEA-SNa)對于水份不穩(wěn)定，發(fā)現(xiàn)其二水合物形式(DHEA-SNa)在正常濕度條件下更穩(wěn)定。
正如已經(jīng)知道的那樣，在制藥過程中，藥物會經(jīng)歷各種加工，這些加工常常影響其成分的物理化學(xué)性能和穩(wěn)定性。脫氫表雄酮二水合硫酸鈉的長期研磨使結(jié)晶點下降，并失去水份，后者還會降低儲存穩(wěn)定性，并產(chǎn)生降解成分DHEA。
因此，需求一種粉制劑的脫氫表雄酮化合物、它們的類似物和鹽，它們能夠顯示出優(yōu)良的分散性和儲存穩(wěn)定性，也具有合適的可呼吸性能。這樣的制劑就使脫氫表雄酮化合物、其類似物和鹽能夠以高效和成本有效的方式被輸送。
美國專利№5527789揭示了一種抗癌癥的方法向患者施用脫氫表雄酮(DHEA)或其相關(guān)的化合物，和施用泛醌治療由脫氫表雄酮(DHEA)或其相關(guān)的化合物誘發(fā)的心力衰竭。
美國專利N№6087351揭示了一種通過向患者施用脫氫表雄酮(DHEA)或其相關(guān)的化合物來降低或耗盡患者組織內(nèi)腺苷水平的體內(nèi)方法。美國專利№6087351揭示了含有微?；钚曰衔锏目珊粑闪５墓虘B(tài)粒狀組合物可以這樣制備用研缽和杵研磨干活性化合物，然后將微?；M合物經(jīng)過400目篩網(wǎng)，打碎或分離大團(tuán)粒。含有活性化合物的固態(tài)粒狀組合物也任選含有分散劑，該分散劑用于促進(jìn)氣霧劑的形成，合適的分散劑是乳糖，乳糖可以與活性化合物以任何合適的比例共混(例如1∶1重量比)。
已經(jīng)描述了DHEA和DHEA-S用于治療COPD(美國專利申請№10/454061，2003年6月3日提出，和國際申請№PCT/US02/12555,2002年4月21日提出，2002年10月31日公布)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及一種粉狀藥物組合物，它含有一種藥劑和藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可以接受的載體或稀釋劑，所述藥劑含有共價連接到多價的無機(jī)或有機(jī)二羧酸上的二水合脫氫表雄酮(DHEA)化合物。所述干粉藥物組合物優(yōu)選是可呼吸粒子或可吸入的尺寸。所述藥劑優(yōu)選是脫氫表雄酮二水合硫酸鹽(DHEA-S)，其中硫酸鹽共價連接到DHEA上。所述干粉藥物組合物優(yōu)選具有這樣的粒徑約80％以上的粒子的直徑約為0.1-100微米。所述脫氫表雄酮化合物或其類似物含有化學(xué)式(I)和(II)的化合物，各自單獨配制或與粉狀、液態(tài)或氣態(tài)載體混合。所述藥物組合物可以進(jìn)一步含有、也可以不含賦形劑。該制劑可以與另外的治療劑(一種或多種)一同施用到患者身上，該另外的治療劑或在同一組合物內(nèi)，或以不同的組合物形式一同施用。
所述藥劑優(yōu)選是二水合物形式(DHEA-S·2H2O)的DHEA-S。DHEA-S的二水合物形式比其無水形式更穩(wěn)定。DHEA-S的無水形式比DHEA-S的二水合物形式的熱不穩(wěn)定性更大。載體優(yōu)選是乳糖。所述藥劑優(yōu)選是粉狀。所述藥劑優(yōu)選是結(jié)晶形式。所述藥劑更優(yōu)選是結(jié)晶粉狀。
本發(fā)明的另一方面是預(yù)防或治療哮喘的方法，該方法包括根據(jù)這樣的預(yù)防或治療，向需要的患者施用治療有效量的粉狀藥物組合物。
本發(fā)明的又一方面是預(yù)防或治療慢性阻塞性肺部疾病的方法。該方法包括根據(jù)這樣的預(yù)防或治療的需要，向患者施用治療有效量的粉狀藥物組合物。
本發(fā)明的再一方面是降低或耗盡患者組織內(nèi)的腺苷的方法。該方法包括根據(jù)這樣的治療的需要，向患者施用治療有效量的粉狀藥物組合物，以便降低或耗盡患者組織內(nèi)腺苷水平。
本發(fā)明的再一方面是預(yù)防或治療與患者組織內(nèi)的高水平腺苷相關(guān)的、或?qū)颊呓M織內(nèi)的腺苷敏感性相關(guān)的失調(diào)或狀況的方法。該方法包括根據(jù)這樣的預(yù)防或治療方法的需要，向患者施用治療有效量的粉狀藥物組合物，以便降低患者組織內(nèi)腺苷水平，并預(yù)防或治療該失調(diào)。
所述患者優(yōu)選患的是氣管炎、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、呼吸障礙、囊性纖維變性、慢性阻塞性肺部疾病(COPD)、變態(tài)反應(yīng)性鼻炎、急性呼吸窘迫綜合癥、微生物感染、病毒感染例如SARS、肺性高血壓、肺炎、支氣管炎、氣管阻塞或支氣管縮窄。
所述干粉制劑優(yōu)選這樣制備從干藥物藥劑開始，改變該藥劑的粒徑，形成這樣的粉狀制劑80％以上粒子的直徑約為0.1-100微米，例如通過研磨如流體能研磨來改變粒徑，過篩，均勻化造粒，和/或其他已知的工序。
本發(fā)明的粉狀制劑可以這樣從呼吸道輸送從一個裝置直接施用，或自身的形式直接施用，或與粉狀、液態(tài)或氣態(tài)載體或推進(jìn)劑一同施用。本文所述的制劑適于治療任何例如與呼吸和肺部疾病相關(guān)的疾病，例如支氣管縮窄、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、肺炎、慢性阻塞性肺部疾病(COPD)、變態(tài)反應(yīng)性鼻炎、ARDS、囊性纖維變性、癌癥和炎癥和其他疾病。
本發(fā)明的再一方面是脫氫表雄酮化合物、或其類似物或其水合物形式，在預(yù)防或治療哮喘、COPD、肺炎、任何呼吸失調(diào)或狀況、或降低或耗盡患者組織內(nèi)的腺苷的藥物的制備方面的用途。本發(fā)明的再一方面是一個藥盒，它包含一個裝置，該裝置將所述粉狀藥物組合物到輸送到患者身上。該裝置優(yōu)選是可以施壓的噴霧器或煙霧器，也包含粉狀制劑。所述藥盒優(yōu)選還包含具有制劑的一個或多個膠囊、筒盒或發(fā)泡劑，其中所述的膠囊、筒盒或發(fā)泡劑在使用之前塞入該裝置中。
附圖的簡要說明

圖1示出了從單劑量Acu呼吸吸入器中送出的純微?；疍HEA-S·2H2O的細(xì)粒子百分率與流率之間的函數(shù)關(guān)系。結(jié)果表示為DHEA-S的結(jié)果。實際上無水微粒化DHEA-S的IDL數(shù)據(jù)也顯示在該圖中，其中30L/min的結(jié)果被設(shè)定為零，因為沒有可測出的量進(jìn)入撞擊器。
圖2示出了實質(zhì)無水的DHEA-S在以純物質(zhì)和乳糖共混物形式于50℃儲存1周后的HPLC色譜圖。對照物是室溫下儲存的純DHEA-S。
圖3示出了散裝的DHEA-S·2H2O在以純物質(zhì)和乳糖共混物形式于50℃儲存1周后的HPLC色譜圖。對照物是室溫下儲存的純DHEA-S·2H2O。
圖4示出了DHEA-S的溶解度與氯化鈉濃度在兩個溫度下的函數(shù)關(guān)系。
圖5示出了DHEA-S的溶解度與鈉陽離子濃度的倒數(shù)在24-25℃的函數(shù)關(guān)系。
圖6示出了DHEA-S的溶解度與鈉陽離子濃度的倒數(shù)在7-8℃的函數(shù)關(guān)系。
圖7示出了DHEA-S的溶解度與氯化鈉濃度在室溫下在具有緩沖劑或沒有緩沖劑情形下的函數(shù)關(guān)系。
圖8示出了DHEA-S的溶解度與鈉陽離子濃度的倒數(shù)在24-25℃在具有緩沖劑或沒有緩沖劑情形下的函數(shù)關(guān)系。
圖9示出了DHEA-S的溶液濃度與時間在兩個儲存條件下關(guān)系。
圖10示出了DHEA的溶液濃度與時間在兩個儲存條件下的關(guān)系。
圖11示出了噴霧實驗的簡圖。
圖12示出了置于旁通收集器內(nèi)的DHEA-S的量與置于噴霧器內(nèi)的起始溶液濃度之間的函數(shù)關(guān)系。
圖13示出了DHEA-S噴霧溶液的級式?jīng)_擊的粒徑。
所示出的數(shù)據(jù)都是7次噴霧實驗的平均值。
具體實施例方式
詞匯“藥劑”本文中使用的“藥劑”指化學(xué)化合物、化學(xué)化合物的混合物、合成的化合物、治療化合物、有機(jī)化合物、無機(jī)化合物、核酸、寡聚核苷酸(寡)、蛋白質(zhì)、生物分子、大分子、脂肪、油、填料、溶液、細(xì)胞或組織。藥劑包含活性化合物(一種或多種)，該活性化合物是DHEA、其衍生物或其藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可接受的鹽。所述藥劑可以加入，來制備這樣的制劑，該制劑包含活性化合物，并以制劑的形式使用，或以藥盒的形式用于醫(yī)藥或獸醫(yī)。
“氣管”本文中使用的“氣管”指與空氣接觸的患者的呼吸系統(tǒng)的一部分或全部。所述氣管包括而不局限于咽喉、氣管、鼻道、竇、呼吸道、肺、肺內(nèi)層等?！皻夤堋币舶夤?、支氣管、細(xì)支氣管、末端細(xì)支氣管、呼吸道細(xì)支氣管、肺泡管和肺泡囊。
“氣管炎”本文中使用的術(shù)語“氣管炎”指與患者氣管上發(fā)炎相關(guān)的疾病或狀況。氣管炎可以由以下癥狀引起或伴隨有以下癥狀變態(tài)反應(yīng)(一種或多種)、哮喘、障礙性呼吸、囊性纖維變性(CF)、慢性阻塞性肺部疾病(COPD)、變態(tài)反應(yīng)性鼻炎(AR)、急性呼吸窘迫綜合癥(ARDS)、微生物或病毒感染、肺性高血壓、肺炎、支氣管炎、氣管阻塞和支氣管縮窄。
“載體”本文中使用的術(shù)語“載體”指生物學(xué)上可以接受的氣態(tài)、液態(tài)、固態(tài)載體及其混合物，它們適于預(yù)定的不同的施藥途徑。載體優(yōu)選是藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可以接受的載體。
所述組合物可以任選含有其他藥劑，例如本行業(yè)內(nèi)已知的其他的用于治療疾病或狀況的醫(yī)用化合物、抗氧化劑、調(diào)味劑、著色劑、填料、揮發(fā)性油、緩沖劑、分散劑、表面活性劑、RNA鈍化劑、推進(jìn)劑和防腐劑、和已知用于醫(yī)藥組合物的其他藥劑。
“組合物”本文中使用的術(shù)語“組合物”指含有干粉制劑的混合物，所述干粉制劑含有用于本發(fā)明的活性化合物和載體。所述組合物也可以含有其他藥劑。所述組合物優(yōu)選是藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上的組合物。
“有效量”本文中使用的術(shù)語“有效量”指提供治療或預(yù)防的益處的用量。
“防止”或“預(yù)防”本文中使用的術(shù)語“防止”或“預(yù)防”指在人得病之前，或得到病狀況的癥狀之前，進(jìn)行的預(yù)防性治療，這樣它就能夠使人避免得上疾病的癥狀或與之相關(guān)的狀況。
“呼吸疾病”本文中使用的術(shù)語“呼吸疾病”指與呼吸系統(tǒng)相關(guān)的疾病或狀況。其例子包括而不局限于氣管炎、變態(tài)反應(yīng)(一種或多種)、哮喘、障礙性呼吸、囊性纖維變性(CF)、慢性阻塞性肺部疾病(COPD)、變態(tài)反應(yīng)性鼻炎(AR)、急性呼吸窘迫綜合癥(ARDS)、肺性高血壓、肺炎、支氣管炎、氣管阻塞、支氣管縮窄、微生物感染和病毒感染例如SARS。
“標(biāo)鈀”本文中使用的術(shù)語“標(biāo)鈀”指受活性化合物(一種或多種)影響并與疾病或狀況相關(guān)的器官和組織。
“治療”本文中使用的術(shù)語“治療”指降低受到這樣治療的患者表現(xiàn)出疾病或其他狀況的癥狀的概率的治療。
本發(fā)明提供一種粉狀制劑，該制劑含有DHEA、和/或其藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可以接受的鹽或其水合物形式，單獨或連同藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可以接受的載體或稀釋劑，其中一部分制劑的粒子，約80％粒子例如大于約80％粒子的直徑約為0.1-200微米。適用于本發(fā)明的DHEA、其類似物及其鹽的例子由下述的化學(xué)式(I)和(II)表示。一組由化學(xué)式(I)的化合物表示 其中R包括H或鹵素，位置5上的H可以是α或β構(gòu)型，或兩種構(gòu)型的消旋體混合物，R1包括共價連接到化合物上的多價無機(jī)或有機(jī)二羧酸。該多價的無機(jī)或有機(jī)二羧酸優(yōu)選是SO2OM、磷酸鹽或碳酸鹽。該多價的有機(jī)二羧酸優(yōu)選是丁二酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽或合適的二羧酸鹽。
M包括平衡離子，例如H、鈉、鉀、鎂、鋁、鋅、鈣、鋰、銨、胺、精氨酸、賴氨酸、組氨酸、三乙胺、乙醇胺、膽堿、三乙醇胺(triethanoamine)、普魯卡因、芐星青霉素、氨丁三醇(tromethanine)、吡咯烷、哌嗪、二乙胺、硫脂(sulphatide)
或磷脂(phosphatide) 其中R2和R3，可以相同或不同，包括直鏈或支鏈C1-14烷基或葡萄糖苷酸 和其藥學(xué)上可以接受的鹽。
R1可以是共價連接到DHEA上的酸性或堿性化合物。如果R1是酸性化合物，那么向藥劑中加入堿形成鹽。堿優(yōu)選是會形成該藥劑的鹽的任何合適的堿，例如氫氧化鈉、氫氧化鉀等。如果R1是堿性化合物，那么向藥劑中加入酸形成鹽。酸優(yōu)選是會形成該藥劑的鹽的任何合適的酸，例如有機(jī)酸如富馬酸、馬來酸、乳酸，或無機(jī)酸如鹽酸、硝酸、硫酸等。
所述藥劑優(yōu)選是二水合形式的DHEA-S(DHEA-S·2H2O)。DHEA-S的二水合物形式比其無水形式更穩(wěn)定。DHEA-S的無水形式比DHEA-S的二水合物形式的熱不穩(wěn)定性更大。載體優(yōu)選是乳糖。所述藥劑優(yōu)選是粉狀。所述藥劑優(yōu)選是結(jié)晶形式。所述藥劑更優(yōu)選是結(jié)晶粉狀。
本發(fā)明是首次報道在藥物組合物中使用二水合形式的DHEA-S，和DHEA-S的二水合形式具有意外好的性能，即具有比無水DHEA-S更好的穩(wěn)定性，尤其在高溫下例如等于或大于50℃，具有更好的穩(wěn)定性。與乳糖混合的無水DHEA-S的穩(wěn)定性遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于與乳糖混合的結(jié)晶二水合DHEA-S。該發(fā)現(xiàn)屬于本發(fā)明首次報道(見實施例3和5)。
如上式(I)所示的化合物包括脫氫表雄酮(DHEA)自身，其中R和R1各是H，存在雙鍵；16-α溴表雄酮，其中R包括Br，R1包括H，存在雙鍵；16-α氟表雄酮，其中R包括F，R1包括H，存在雙鍵；本膽烷醇酮，其中R和R1各包括H，沒有雙鍵；脫氫表雄酮硫酸鹽，其中R包括H，R1包括SO2OM，M包括上述的硫脂(sulphatide)，存在雙鍵；脫氫表雄酮二水合硫酸鈉，其中R是H，R1是SO2OM，M是上述的鈉基團(tuán)，存在雙鍵等。在式(I)化合物中，R優(yōu)選包括鹵素，例如溴、氯或氟，R1包括H，存在雙鍵。式(I)化合物更優(yōu)選包括16-α氟表雄酮和這樣的式(I)化合物其中R包括H，R1包括SO2OM，M包括硫脂(sulphatide)而且存在雙鍵；式(I)化合物更優(yōu)選包括是具有以下化學(xué)式(II)的二水合形式的脫氫表雄酮硫酸鈉(DHEA-S·2H2O) 式(I)和(II)的化合物可以由本行業(yè)內(nèi)的普通技術(shù)人員都知道的已知工序或變化了的工序合成。見例如美國專利№4956355，英國專利№2240472，歐洲專利№429187，PCT公開專利№91/04030；M.Abou-Gharbia等人發(fā)表于《藥物科學(xué)雜志》第70卷、第1154-1157頁(1981)的文章，Merck索引專題論文№7710、第11版(1 989)。
用于本發(fā)明的化合物可以以自身的形式施用，或以藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可以接受的鹽的形式施用，所有這些形式都稱為“活性化合物”。藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可以接受的載體或稀釋劑的例子包括本行業(yè)內(nèi)已知的生物學(xué)上可以接受的載體，包括乳糖和其他的氣態(tài)、液態(tài)或固態(tài)的惰性或G.R.A.S(通常指安全)的藥劑，其中制劑的最終形式是粉狀，或具有可以處于壓力下的推進(jìn)劑和或共溶劑的粉狀。
所述干粉制劑優(yōu)選這樣制備從含有脫氫表雄酮、其類似物其鹽或其混合物的干制品藥劑開始，改變該藥劑的粒徑，形成直徑約為0.01-500微米的粒徑的干制劑，選擇制劑粒子，使制劑包括至少或大于約80％、約85％、約90％、約95％、或約100％粒子的粒徑為它們的直徑是自0.01微米、0.1微米或0.5微米至約100微米、或200微米。要求粒徑低于約200微米，優(yōu)選在自約0.05微米、約0.1微米、約1微米、約2微米至約5微米、約6微米、約8微米、約10微米、約20微米、約50微米、約100微米的范圍內(nèi)。所選出的制劑粒子的直徑優(yōu)選是約0.1微米-200微米，更優(yōu)選其直徑是0.1微米-100微米，再優(yōu)選其直徑是0.1微米-10微米，再優(yōu)選0.1微米-8微米，進(jìn)一步再優(yōu)選0.1微米-5微米。
接著，可以改變干藥劑的粒徑，以便在吸入制劑時，能夠使大量藥劑吸入肺部。藥物的粒徑可以由任何已知的方法減小，例如研磨或微粉化。藥劑的粒徑一般這樣改變研磨干藥劑自身或其與制劑組分的組合物至合適的平均粒徑，優(yōu)選在約0.05微米-約5微米范圍(吸入)，或約10微米-約50微米(鼻輸送或肺滴入)?？梢圆捎脟娚溲心?也稱為流體能研磨)，它在采用已知裝置形成所要求的粒徑的工序中是優(yōu)選的。噴射研磨是優(yōu)選的方法。應(yīng)當(dāng)明白雖然大百分率粒子在所要求的窄范圍內(nèi)，但是通常不是全部粒子都在所要求的范圍內(nèi)。因此，可以預(yù)見總粒徑范圍會比所述的優(yōu)選范圍寬。根據(jù)特定制劑的需求，處于優(yōu)選范圍內(nèi)的粒子的百分率可以大于約80％、約85％、約90％、約95％等等。
也可以通過過篩、均勻化和/或造粒等等來改變粒徑。這些技術(shù)可以單獨使用或彼此組合使用。一般采用研磨、均勻化和造粒，然后過篩，得到粒徑改變的干制劑。這些工序可以相對于各組分單獨使用，或相對于加入到一起的組分使用，然后配制制劑。
可以采用的制劑組分的例子包括而不局限于賦形劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、粉末流動性改進(jìn)劑、聚結(jié)性改進(jìn)劑、表面活性劑、其他的生物活性劑、著色劑、芳香劑、抗氧化劑、填料、揮發(fā)性油、分散劑、調(diào)味劑、緩沖劑、膨脹劑、推進(jìn)劑或防腐劑。一種優(yōu)選的制劑包含活性藥劑和賦形劑(一種或多種)和/或推進(jìn)劑(一種或多種)。
粒徑不僅可以在干性氣氛中改變，也可以在中間步驟中，通過將活性藥劑置于溶液、懸浮液或乳液中進(jìn)行改變。活性藥劑可以在改變粒徑之前或之后，置于溶液、懸浮液或乳液中。該實施方式的一個例子可以這樣實施將所述藥劑溶解于一種合適的溶劑溶液中，加熱至合適的溫度。溫度可以保持在合適溫度的附近達(dá)預(yù)定時間，使形成結(jié)晶。然后，將溶液和初形成的晶體冷卻至第二較低溫度，并將溫度保持于該第二溫度一段時間，使晶體生長。這是本行業(yè)內(nèi)已知的。接著，當(dāng)再結(jié)晶結(jié)束，藥劑的晶體充分長成時，使晶體達(dá)到室溫。藥劑的粒徑也可以通過從溶液、懸浮液或乳液中自合適的溶劑中進(jìn)行樣品沉淀來改變。
噴霧干燥在改變粒徑方面也很有用?！皣婌F干燥”指藥劑或組合物由這樣的方法制備其中將藥劑在溶劑中的均勻混合物或本文稱為“預(yù)噴霧制劑”的組合物，由霧化器例如雙流體噴頭、旋流片或一個等效的裝置，以細(xì)霧滴形式噴到一個已經(jīng)被加熱的氣氛中，或噴到一種冷流體中。所述溶液可以是水溶液、懸浮液、乳液、漿料等，只要它是均勻的，能夠保證溶液形式的物料均勻分散，最終形成粉狀制劑。當(dāng)物料噴到加熱氣體或空氣流中時，各霧滴干燥成固態(tài)粒子。藥劑噴到冷流體中會很快形成霧滴，一旦溶劑蒸發(fā)就形成粒子。收集粒子，然后可以脫除任何殘留溶劑，通常在真空狀態(tài)下，通過升華(冷凍干燥)來脫除溶劑。如下所述，粒子在干燥之前可以例如通過升高溫度來生長。這就形成了具有特定粒子尺寸和粒子特征的細(xì)干粉，下面將詳細(xì)說明。合適的噴霧干燥方法也小下面有描述。見例如美國專利№3963559、6451349和6458738，它們相關(guān)的內(nèi)容結(jié)合引用于此。
本文所述的“粉”指由精細(xì)分散的固體粒子組成的組合物，所述粒子相對可以自由流動，而且在吸入裝置或干粉裝置中易于分散，隨后被患者吸入，這樣使得粒子能夠到達(dá)肺的預(yù)定區(qū)域。由此，所述粉是“可呼吸”的，并適于肺部輸送。當(dāng)后繼藥劑或制劑的粒徑大于約10微米時，這樣尺寸粒子的相當(dāng)一部分會沉積在鼻腔中，從那里被吸收。
術(shù)語“可分散性”指干粉制劑可以分散的程度，即懸浮于氣流中，使被分散的粒子可以被呼吸或吸入肺部或通過患者的鼻腔壁吸收。由此，僅20％可分散的粉指僅20％粒子量可以懸浮被吸入肺部。雖然其他數(shù)據(jù)也是可以的，但是本發(fā)明的制劑優(yōu)選具有1-99％的可分散性。
干粉制劑的特征可以基于許多參數(shù)，包括而不局限于平均粒徑、粒徑范圍、細(xì)粉百分率(FPF)、平均粒子密度、質(zhì)量中位氣動直徑(MMAD)，正如本行業(yè)內(nèi)已知的那樣。
在一個優(yōu)選的實施方式中，藥劑是二水合結(jié)晶形式的DHEA-S。所述DHEA-S首先結(jié)晶成二水合物晶體形式。然后，該晶體經(jīng)過噴射研磨，形成粉狀形式。該制劑還可以包含乳糖，所述乳糖被單獨過篩，或研磨、并與粉狀結(jié)晶二水合DHEA-S進(jìn)行混合。
在一個優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的干粉制劑的特征基于它們的上述平均粒徑。干粉藥劑或制劑的平均粒徑可以由常規(guī)技術(shù)測量為質(zhì)量平均直徑(MMD)。術(shù)語“約”指數(shù)值可以具有約10％范圍的誤差。本發(fā)明的干粉制劑的特征也可以基于其細(xì)粒子百分率(FPF)。該FPF是粉的氣霧性能的衡量，其中該百分率值越高，性能就越好。FPF定義為粉具有低于6.8微米的質(zhì)量中位氣動直徑，采用具有玻璃喉管的多級液體撞擊器(MLSI，Astra，英國諾丁漢的Copley儀器公司)、經(jīng)由干粉吸入器(DryhalterTM，Dura藥物公司)測試。因此，本發(fā)明的干粉制劑優(yōu)選的FPF值至少約為10％，更優(yōu)選至少約為20％，再優(yōu)選至少約為30％。一些體系能夠被賦予很高的FPF，約40-50％。
干粉制劑的特征也可以基于含有本發(fā)明藥劑的粒子密度。在一個優(yōu)選實施方式中，粒子的輕敲密度低于約0.8g/cm3，優(yōu)選低于0.4g/cm3，更優(yōu)選低于0.1g/cm3。干粉粒子的輕敲密度可以采用本行業(yè)內(nèi)已知的GeoPycTM(微米制儀器公司)測試。輕敲密度是包封物料密度的標(biāo)準(zhǔn)度量值，通常定義為粒子的質(zhì)量除以包封物料的最小球形包封體積。
在另一個優(yōu)選實施方式中，干粉制劑的氣動粒徑以以一般實施例描述的為特征。同樣，粒子的質(zhì)量中位氣動直徑(MMAD)可以采用本行業(yè)內(nèi)已知的技術(shù)進(jìn)行評價。這些粒子的特征也可以基于它們通常的形態(tài)。
術(shù)語“干”指制劑具有這樣的水份含量它使得粒子易于分散于吸入裝置中，以便形成氣霧。本發(fā)明中的干粉制劑優(yōu)選包含大量活性化合物，盡管尤其在長期儲存期間會出現(xiàn)一些團(tuán)粒。正如已知的那樣，對于許多干粉制劑，粉狀制劑中一部分百分率的物料會團(tuán)聚，導(dǎo)致部分喪失活性。因此，干粉制劑具有至少約為70％重量的活性化合物，以現(xiàn)有的化合物總重量為基準(zhǔn)，優(yōu)選具有至少約為80重量％的活性化合物，更優(yōu)選至少約為90重量％活性化合物。也考慮了含量更高的活性化合物或藥劑，它們可以由本發(fā)明方法制備，它們具有的活性大于約95％和更高?；衔锟偭康臏y量依賴于化合物，通常以本行業(yè)內(nèi)已知的方式測量，以活性檢測為基礎(chǔ)。藥劑的活性的檢測依賴于化合物，本行業(yè)內(nèi)的普通技術(shù)人員會明白該檢測以合適的生物活性檢測為基礎(chǔ)來進(jìn)行。
在噴霧干燥中，由于霧化(剪切力和空氣-液體界面張力)、冷或熱的變化、任選冷凍(冰-水界面張力和剪切力)、和/或脫水，個別應(yīng)力會升高。在冷凍干燥期間，分別使用了防凍劑和防溶劑(lyoprotectant)，來抵抗冷凍的失穩(wěn)、脫水和長期儲存失穩(wěn)。防凍劑分子例如糖、氨基酸、多元醇等，被廣泛用于穩(wěn)定與冷凍結(jié)晶相關(guān)的高濃縮未冷凍液體中的活性化合物。這些是制劑中不需要的。
含有活性化合物的干粉制劑可以含有或不含賦形劑。包括防凍劑和防溶劑的“賦形劑”或“保護(hù)劑”通常指這樣的化合物或物質(zhì)它們作為稀釋劑加入，或在噴霧干燥步驟和隨后步驟中保證或提高活性化合物的可流動性和氣霧分散性，并提高粉狀制劑的長期可流動性。合適的賦形劑通常是相對自由流動的固體粒子，與水接觸時不會增稠或聚合，當(dāng)它位于患者的呼吸道內(nèi)時，基本無害，而且基本不會以改變其生物活性的方式與活性化合物發(fā)生相互作用。
合適的賦形劑包括而不局限于蛋白質(zhì)例如人和牛血清白蛋白、明膠、免疫球蛋白、碳水化合物包括單糖(半乳糖、D-甘露糖、山梨糖、果糖、葡萄糖等)、二糖(乳糖、海藻糖、蔗糖、麥芽糖等)、環(huán)糊精和多糖(蜜三糖、麥芽糖糊精、葡聚糖、木蘇糖、淀粉、纖維素等)、氨基酸例如谷氨酸單鈉、甘氨酸、丙氨酸、精氨酸或組氨酸、和憎水性氨基酸(色氨酸、酪氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸等)、潤滑劑例如硬脂酸鎂、甲胺例如甜菜堿、賦形劑鹽例如硫酸鎂、多元醇例如三元或更高的糖醇如甘油、赤藻糖醇、甘醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、山梨糖醇和甘露醇、丙二醇、聚乙二醇、普盧蘭尼克、表面活性劑、(脂肪和非脂肪表面活性劑)和它們的組合。優(yōu)選的賦形劑是海藻糖、蔗糖、山梨糖醇、乳糖、及其混合物。當(dāng)使用賦形劑時，它們通常的用量是自約0.1、約1、約2、約5、約10，至約15、約10、約15、約20、約40、約60、約99％重量/重量組合物。優(yōu)選的是這樣的制劑，它含有乳糖、或低含量賦形劑或其他成分。
在另一個優(yōu)選實施方式中，本發(fā)明的干粉制劑基本不含賦形劑。所述的“基本不含”指制劑含有低于約10％重量/重量、優(yōu)選低于約5％、更優(yōu)選低于約2-3％、再優(yōu)選低于約1％的任何非藥劑組分。通常，為了實現(xiàn)本發(fā)明的目的，所述制劑可以包括推進(jìn)劑和共溶劑、緩沖劑或鹽，和剩余的水。在一個優(yōu)選的實施方式中，干粉制劑(加入下述的膨脹劑之前)由所述藥劑和作為主組分的蛋白質(zhì)組成，它們具有少量緩沖劑(一種或多種)、鹽(一種或多種)和剩余的水。在該實施方式中，噴霧干燥方法通常包括干燥之前的升溫步驟，下面將有詳細(xì)說明。
在另一個優(yōu)選實施方式中，預(yù)噴霧干燥過的制劑，即用于噴霧干燥方法中的溶液制劑包含處于溶液例如水溶液中的活性藥劑，僅有可以忽略量的緩沖劑或其他組分。含有很少或不含賦形劑的預(yù)噴霧干燥過的制劑不會長期非常穩(wěn)定。由此，就要求在形成預(yù)噴霧干燥過的制劑之后的合理的短時間內(nèi)，實施噴霧干燥工序。雖然使用很少或不使用賦形劑的預(yù)噴霧干燥過的制劑不會非常穩(wěn)定，由其制成的干粉仍可以、而且通常既具有意外好的穩(wěn)定性由具有非常好可分散性，如實施例所述。
進(jìn)行噴霧干燥來形成本發(fā)明制劑的藥劑包含該藥劑和任選的緩沖劑，而且可以含有或不含附加的鹽。溶液中緩沖劑的pH值的合理范圍是本行業(yè)內(nèi)的普通技術(shù)人員容易確定的。盡管本發(fā)明的藥劑在很寬的pH值范圍例如酸性pH值范圍內(nèi)都可以流動，但是它通常在生理學(xué)的pH值范圍內(nèi)。由此，預(yù)噴霧干燥過的制劑的優(yōu)選pH值范圍是自約1、3、5、6，至約7、8、10，尤其優(yōu)選7。本行業(yè)內(nèi)的普通技術(shù)人員會明白有大量的合適緩沖劑可以使用。合適的緩沖劑包括而不局限于乙酸鈉、檸檬酸鈉、丁二酸鈉、磷酸鈉、二碳酸銨和碳酸鹽。緩沖劑的通常摩爾濃度的用量范圍是自約1mM、約2mM，至約200mM、約10mM、約0.5M、約1M、約2M，尤其優(yōu)選約50M。
當(dāng)在制備過程中使用水、緩沖劑或溶劑時，它們可以額外含有已經(jīng)描述過的鹽。
另外，本發(fā)明的干粉制劑通?；静缓胺€(wěn)定劑”。但是，該制劑可以含有額外的表面活性劑，該表面活性劑具有其自身的性能或在肺的呼吸系統(tǒng)具有醫(yī)療作用。這些活性藥劑可以補償失去的肺部表面活性劑，或通常通過其他機(jī)理起作用。本發(fā)明的干粉制劑也通常不含形成微球的聚合物。見例如WO97/44013、美國專利№5019400。也就是說，本發(fā)明的粉通常包含活性藥劑(一種或多種)和賦形劑、而不需使用用于結(jié)構(gòu)或其他用途的聚合物。本發(fā)明干粉制劑也優(yōu)選是穩(wěn)定的?！胺€(wěn)定”可以指兩種情形中的一種隨著時間推移，保持生物活性和保持可分散性，優(yōu)選的實施方式在這兩種情形中都顯示出穩(wěn)定性。
本發(fā)明的干粉制劑通常隨著時間推移保持生物活性，例如在儲存時保持物理和化學(xué)穩(wěn)定性和完整性。生物活性的喪失通常是由于團(tuán)聚、和/或藥劑粒子的氧化所造成。但是，當(dāng)藥劑在賦形劑粒子周圍團(tuán)聚時，形成的團(tuán)粒就非常穩(wěn)定，而且具有活性。本行業(yè)內(nèi)的普通技術(shù)人員明白作為噴霧干燥的結(jié)果，會有初始的生物活性的喪失，這是由于該方法采用的極限溫度所致。但是，從制粉時的測試測得一旦發(fā)生生物活性的喪失，活性的進(jìn)一步喪失就可以忽略。此外，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明干粉制劑隨著時間推移，保持可分散性，由隨著時間推移的高FPF保持力來量化，隨著時間推移，觀察到最小的團(tuán)聚、結(jié)塊或叢聚。
本發(fā)明的藥劑(一種或多種)由本行業(yè)內(nèi)已知的方法制備。見例如美國專利№6087351、5175154和6284750。為了液態(tài)或固態(tài)形式制劑的穩(wěn)定性，可以制備預(yù)噴霧干燥的組合物。為了噴霧干燥，液態(tài)制劑通常根據(jù)需要經(jīng)受透濾和/或超濾，對于緩沖劑交換(或脫除)和/或濃縮，見本行業(yè)內(nèi)已知的方式。預(yù)噴霧干燥制劑包含自約1mg/ml、約5mg/ml、約10mg/ml、約20mg/ml，至約60mg/ml、約75mg/ml的藥劑。緩沖劑和賦形劑如果存在，它們的濃度在上面已經(jīng)有描述。接著，預(yù)噴霧干燥的制劑就以這樣的方式進(jìn)行噴霧干燥將藥劑分散入熱空氣或氣體中，或?qū)⑺鼑婌F到冷流體或冷凍流體中，例如冷凍液體或氣體。預(yù)噴霧干燥制劑可以以本行業(yè)內(nèi)已知的方式噴霧，例如采用過濾過的加壓空氣由雙流體或超聲波噴嘴噴霧到例如一種流體中?？梢允褂脟婌F干燥設(shè)備(Buchi；Niro Yamato；Okawara；Kakoki)。通常優(yōu)選的是略微加熱噴嘴，例如用加熱帶包住噴嘴來進(jìn)行加熱，以預(yù)防使用冷流體時噴頭凍結(jié)。預(yù)噴霧干燥制劑可以在自約-200℃至約-100℃、約-80℃的溫度下噴霧到冷流體中。該流體可以是液體，例如液態(tài)氮或其他惰性流體，或氣體例如被冷卻的空氣?？梢允褂靡掖贾械母杀部梢允褂贸R界流體。在一個實施方式中，盡管可以不需要，但是優(yōu)選的是在噴霧過程發(fā)生時，攪拌液體。
微粉化技術(shù)包括將散裝藥物置于合適的研磨機(jī)內(nèi)。這樣的研磨機(jī)可以購自例如巴拿馬、布里斯托爾的DT工業(yè)公司，商品名為STOKESTM。簡要地說，散裝藥物被置于封閉的空腔，通過機(jī)械力作用移動內(nèi)部部件，例如板、葉片、錘、球、石頭等。另外，除了所述部件碰撞散裝藥物以外，包住所述空腔的殼也可以轉(zhuǎn)動或旋轉(zhuǎn)，強(qiáng)制散裝藥物隨著部件的運動而反方向運動。一些研磨機(jī)例如流體能研磨機(jī)或噴氣研磨機(jī)，包括高壓空氣流，強(qiáng)迫散裝粉進(jìn)入封閉空腔內(nèi)的空氣中，與內(nèi)部部件逆向接觸。一旦達(dá)到藥物的尺寸和形狀，就可以停止該過程，就回收具有合適尺寸和形狀的藥物。但是，通常具有所要求粒徑范圍的粒子由淘選方式連續(xù)回收。
有許多不同類型的減小尺寸的技術(shù)能夠用來減小粒子的尺寸。有一個切割方法，采用切割研磨機(jī)，它能夠?qū)⒘Ｗ映叽鐪p小至約100微米。有加壓方法，采用端輥研磨機(jī)，能夠?qū)⒘Ｗ映叽鐪p小至低于約50微米。有沖擊方法，采用振動研磨機(jī)，能夠?qū)⒘Ｗ映叽鐪p小至約1微米，或錘研磨機(jī)，能夠?qū)⒘Ｗ映叽鐪p小至約8微米。有磨耗方法，采用輥式研磨機(jī)，能夠?qū)⒘Ｗ映叽鐪p小至約1微米，有組合的沖擊和磨耗組合的方法，采用銷釘，能夠?qū)⒘Ｗ映叽鐪p小至約10微米，球研磨機(jī)，能夠?qū)⒘Ｗ映叽鐪p小至約1微米，流體能研磨機(jī)(或噴射研磨機(jī))，能夠?qū)⒘Ｗ映叽鐪p小至約1微米。本行業(yè)內(nèi)的普通技術(shù)人員能夠通過常規(guī)的實驗，確定減小粒子尺寸的方法和裝置，來制備具有所要求尺寸的組合物。
可以采用超臨界流體方法來改變藥劑的粒徑。超臨界流體方法包括通過快速膨脹超臨界溶劑來沉淀、氣體的逆溶劑方法、和從被氣體飽和的溶劑中沉淀。超臨界流體在超過其臨界溫度(Tc)和臨界壓力(Pc)的溫度和壓力下施加，或?qū)⒘黧w壓縮成液態(tài)。已知的是在接近臨界的溫度下，在臨界壓力附近(0.9-1.5Pc)，較中等的壓力變化，就會導(dǎo)致自氣態(tài)狀到液態(tài)狀物質(zhì)的流體密度和輸送性能的很大改變。雖然液體幾乎是不可壓縮的，并具有低擴(kuò)散性，但是氣體具有更高的擴(kuò)散性和低溶解能力。超臨界流體能夠制成具有這些性能的最佳組合性能。超臨界流體的高可壓縮性(即較小的壓力變化就導(dǎo)致較大的流體密度改變，使得能夠很高地控制溶解能力)，結(jié)合它們的液體樣的溶解能力和比液體好的輸送性能(與液體相比，更高的擴(kuò)散性、更低的粘度和更低的表面張力)，就提供了這樣一種方法在含有溶質(zhì)(例如藥物)的溶劑與超臨界流體之間進(jìn)行可控制的質(zhì)量傳遞(混合)。
近期受到關(guān)注的采用超臨界流體制備粒子的兩種方法是(1)超臨界溶液的快速膨脹(RESS)(Tom，J.W.Debenedetti，P.G.，1991，快速膨脹超臨界溶液形成生物易侵蝕的聚合物微球和微粒，《生物技術(shù)進(jìn)展》7403-411)；和(2)氣體逆溶劑(GAS)再結(jié)晶(Gallagher，P.M.，Coffey，M.P.，Krukonis，V.J.，和Klasutis，N.，1989，“氣體逆溶劑再結(jié)晶在可溶和超臨界流體中再結(jié)晶化合物的新方法”，Am.Chem.Sypm.Ser.，№406；Yeo等人(1993)；Krukonis等人的美國專利№5360478；Gallagher等人的美國專利№5389263)。在RESS方法中，溶質(zhì)(粒子從該溶質(zhì)中形成)首先溶解于超臨界二氧化碳中，形成溶液。接著，該溶液例如由噴嘴噴霧到較低壓力的氣態(tài)介質(zhì)中。以超聲速率通過噴嘴的溶液的膨脹，使該溶液快速減壓。該快速膨脹和二氧化碳密度和溶解能力的降低導(dǎo)致溶液的過飽和，和隨后的實質(zhì)上無污染物粒子的再結(jié)晶。但是，RESS方法不會適于從極性化合物中形成粒子，因此，這樣的包括藥物的化合物，在超臨界二氧化碳中幾乎不表現(xiàn)出溶解性?？梢韵蚨趸贾屑尤牍踩軇?例如甲醇)，來提高極性化合物的溶解性。但是，這會影響產(chǎn)物純度和另外的RESS方法的環(huán)境良性性能。RESS方法也受到與噴嘴堵塞相關(guān)的操作上和擴(kuò)大規(guī)模的問題，這是由于粒子會在噴嘴內(nèi)聚結(jié)，和由伴隨大壓力降的Joule-thompson效應(yīng)而產(chǎn)生的二氧化碳冷凍所致。
在GAS方法中，通常使用常規(guī)的噴嘴，如孔或毛細(xì)管，將成溶液形式或溶解在常規(guī)溶劑以形成溶液的感興趣的溶質(zhì)(通常是藥物)噴射到超臨界CO2中，后者將噴射的液滴分散，結(jié)果引起溶劑膨脹。因為CO2-膨脹的溶劑的增溶能力低于純?nèi)軇?，因此化合物可以是高度過飽和的，溶質(zhì)被強(qiáng)迫沉淀或結(jié)晶。GSA方法不RESS方法具有很多優(yōu)點。優(yōu)點包括與RESS方法相比具有溶質(zhì)負(fù)荷(生產(chǎn)量)較高、溶劑選擇靈活和操作問題較少。與其他常規(guī)的技術(shù)相比，GAS技術(shù)在方法參數(shù)設(shè)定方面更靈活，且許多組分可再循環(huán)使用，因此從環(huán)境上來說是更可接受的。此外，用于此方法中的高壓(達(dá)到2500psig)還可為所加工的藥物顆粒潛在地提供無菌的介導(dǎo)。但是，要使此方法可行的話，所選擇的超臨界液體應(yīng)至少能部分與有機(jī)溶劑混溶，且溶質(zhì)優(yōu)選應(yīng)在該超臨界液體中不溶。
Gallagher等(1989)指出使用超臨界CO2來使一批硝基胍溶液膨脹，然后使不溶溶質(zhì)顆粒重結(jié)晶。Yeo等(1993)在隨后的研究中揭示，使用激光鉆孔的、25-30微米毛細(xì)噴嘴將有機(jī)溶液噴射到CO2中。還報道了100微米和151微米毛細(xì)噴嘴的使用〔Dixon，D.J.和Johnston，K.P.，1993，“使用壓縮液體抗溶劑通過沉淀形成微孔聚合物纖維和導(dǎo)向纖絲”，J.App.Polymer Sci.，501929-1942；Dixon，D.G.、Luna-Barcenas，G.和Johanson，K.P.，1994，“使用壓縮液體抗溶劑通過沉淀的微孔微球體和微球”，Polymer，353998-4005)。
溶劑的例子包括二氧化碳(CO2)、氮氣(N2)、氦氣(He)、氧氣(O2)、乙烷、乙烯、乙烯、乙烷、甲醇、乙醇、三氟甲烷、一氧化二氮、氯仿(CHF3)、二甲醚、丙烷、丁烷、異丁烷、丙烯、氯三氟甲烷(CClF3)、六氟化硫(SF6)、溴三氟甲烷(CBrF3)、氯二氟甲烷(CHClF2)、六氟乙烷、四氟化碳、二氧化碳、1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷、氙、乙腈、二甲亞砜(DMSO)、二甲基甲酰胺(DMF)，以及兩種或多種溶劑的混合物。
通?？刂旗F化的各種條件，包括霧化氣體流速、霧化氣體壓力、液體流速等，以產(chǎn)生獲得平均直徑為約0.5微米、約1微米、約5微米到約10微米、約30微米、約50微米、約100微米的液滴，其中約10微米和約5微米的平均大小是優(yōu)選的。通常使用常規(guī)的噴干裝置。(Buchi，Niro Yamato，Okawara，Kakoki等)。一旦產(chǎn)生液滴，通過除去水和留下活性藥劑、任何賦形劑和殘留的緩沖劑、溶劑或鹽而將它們干燥。這可采用本領(lǐng)域已知的各種方式進(jìn)行，如凍干。即，冷凍成塊狀而非液滴狀。通常，且優(yōu)選的是在如約相同溫度下發(fā)生冷凍時使用真空。但是，可在施加真空稍前或施加過程中，通過提高冷凍顆粒的溫度而釋放一些冷凍應(yīng)力給該藥劑。這種方法稱為“退火”，它減少藥劑的失活。它可在一步或多步中完成，如在真空干燥步驟之前或過程中溫度可增加一次或多次，優(yōu)選的方式是利用至少兩次熱增加。在施加真空之前可培育顆粒一段通常足以達(dá)到熱平衡的時間，即根據(jù)樣品大小和熱交換效率確定時間；然后施加真空，進(jìn)行另一退火步驟?？蓛龈深w粒一段足以除去與晶體結(jié)果無關(guān)的大部分水的時間，實際的時間依溫度、真空強(qiáng)度、樣品大小等而不同。
團(tuán)塊化(spheronization)涉及基本上成球形的顆粒的形成，這也是本領(lǐng)域已知的。用于將藥物團(tuán)塊化的市售機(jī)器是已知的，包括如LCI公司(Charlotter，N.C.)的MarumerizerTM和Vector公司(maroin，Iowa)的CF-Granulator。這些機(jī)器包括一具有出料口的封閉腔、圓形板和翻轉(zhuǎn)該板的工具，如馬達(dá)。將從混合器/制粒機(jī)中得到的塊狀藥物或潮濕的藥物顆粒進(jìn)料到選擇的板上，該板使這些藥物靠向該封閉腔的內(nèi)壁。該方法產(chǎn)生球形顆粒?？刹捎玫膱F(tuán)塊化的另一方式包括使用受控條件下的噴干。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知使用噴干技術(shù)將顆粒團(tuán)塊化所需的各種條件，這些條件在各種相關(guān)文獻(xiàn)和教科書中有描述，如“藥劑學(xué)科學(xué)和實踐”(The Science and Practice of Pharmacy)，Twentieth版(Easton，Pa.Mack出版公司，2000)。
在一優(yōu)選的實施方式中，在約0℃、約10℃到約25℃進(jìn)行第二次凍干步驟，以除去多余的水，優(yōu)選的溫度是約20℃。然后采用常規(guī)的技術(shù)收集粉末，如果需要的話，可將加入增量劑，雖然并不總是需要。一旦制得，本發(fā)明的干粉制劑可容易被干粉吸入裝置分散，接著被患者吸入，以便這些顆粒滲透入肺的目標(biāo)區(qū)域?？蓪⒈景l(fā)明的粉末配制成含有治療有效量的活性藥劑的單位劑量，用于送遞給患者，例如，用于預(yù)防和治療呼吸道和肺失調(diào)。
以與良好醫(yī)學(xué)實踐一致的方式配制和給予本發(fā)明的干粉制劑，加以考慮的包括如待治療的疾病類型、個體患者的臨床癥狀、活性藥劑釋放是預(yù)防性或治療性目的、藥劑中的濃度、先前的治療、患者病史和他/她對活性藥劑的應(yīng)答、給藥方法、給藥方案、主治醫(yī)師的判斷力以及從業(yè)者所知的其他因素。滿足本專利目的活性化合物的“有效量”或“治療有效量”包括預(yù)防性或治療性給藥，依賴于活性藥劑的特性，因而可由這些事項進(jìn)行測定，該量也是增加和維持治療對象相關(guān)的、有利的生物學(xué)應(yīng)答的量。適當(dāng)?shù)?，可一次給予患者該活性藥劑，或者在一系列治療中給予多次，優(yōu)選是一天一次?？稍陔S后的診斷后的任何時間給予患者該活性藥劑?！皢挝粍┝俊痹诒疚闹兄负兄委熡行Я康奈⒎刍钚运巹┑膯挝粍┝拷邮芷?receptacle)。劑量接受器是裝在適當(dāng)?shù)奈胙b置中的一個裝置，它通過使干粉制劑分散到氣流中氣溶膠化而形成氣溶膠。該裝置可以是膠囊、箔袋、發(fā)泡藥、小瓶等?？墒褂萌魏晤愋偷牟牧闲纬蛇@些容器，包括塑料、玻璃、箔等，而且可將其丟棄或用填充的膠囊、袋、發(fā)泡藥等替換。容器通常裝有干粉制劑，并包括使用說明。單位劑量容器可連接著將粉末送遞給患者的吸入器。這些吸入器可任選地具有多個粉末分散于其中的室，以適合被患者吸入。
可以其他方式進(jìn)一步配制本發(fā)明的干粉制劑，如將其配制成持續(xù)釋放的組合物如植入物、貼片等。持續(xù)釋放組合物的合適例子包括成成形制品形式的半滲透性聚合物基質(zhì)，如膜或微囊體。持續(xù)釋放基質(zhì)包括如聚交酯類。例如可參見美國專利3773919、EP58481。L-谷氨酸和γ-乙基-L谷氨酸酯的共聚物也是適當(dāng)?shù)?。例如可參見Sidman等，Biopolymers，22547-556(1983)，聚(2-羥乙基甲基丙烯酸酯)。參見Langer等，J.Biomed.Mater.Res.，15167-277(1981)；Langer，Chem.Tech.，1298-105(1982)。合適的例子還有乙烯乙酸乙烯酯和聚-D-(-)-3-羥基丁酸。參見Langer等，同上；EP133988。持續(xù)釋放組合物還包括脂質(zhì)體包囊的制劑，這類制劑可采用常規(guī)的方法制備。可參見如DE 3218121；Epstein等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，823688-3692(1985)；EP88046；EP 143949；EP 142641；日本專利申請83-118008；美國專利4485045和4544545；EP102324。本文將所有提及的技術(shù)的相關(guān)章節(jié)都納入本文作為參考。通常，脂質(zhì)體是一種較小的單層脂質(zhì)體，約200-800埃，其脂質(zhì)含量大約為30摩爾％膽固醇，根據(jù)最佳的治療調(diào)整所選擇的比例。
在優(yōu)選的實施例中，可不以吸入方式給予本發(fā)明干粉制劑，而是使用用于注射粉末的相對較新的注射裝置和方法以干粉形式進(jìn)行注射。在此實施方式中，粉末的可分散性和可呼吸性是不重要的，粒度可以稍大一些，例如約10微米以內(nèi)、約20-40微米、約50-70微米、約100微米。也可重新配制本發(fā)明的干粉制劑，用于注射。由于本發(fā)明的粉末顯示良好的穩(wěn)定性，可使用稀釋劑將其重新配制成液體，然后通過非肺途徑給藥，如通過注射、皮下、靜脈內(nèi)等途徑?？墒褂靡阎南♂寗?，包括生理鹽水、其他緩沖液、鹽以及非水性液體等。還可以重新配制本發(fā)明的干粉，用其形成液態(tài)氣溶膠形式，用于通過鼻或肺內(nèi)給藥或吸入給藥而實現(xiàn)肺部送遞。在本文中，術(shù)語“治療”指治療性和維持性的治療以及預(yù)防性和防護(hù)性的調(diào)節(jié)。需要治療的對象包括已診斷患有疾病的那些個體、傾向于患有疾病的個體以及將進(jìn)行疾病預(yù)防的個體。連續(xù)的治療或給藥指至少以天為基礎(chǔ)無間斷地進(jìn)行了一天或多天的治療的治療。間歇性治療或給藥或以間歇方式進(jìn)行的治療或給藥指不連續(xù)而實際上是循環(huán)的治療。本文中的治療方案可以是連續(xù)的或間歇性的，或者是任何合適的方式?？刹捎萌邕^濾、凍干、噴霧-凍干、噴干和凍結(jié)干燥(freeze drying)等方法獲得干粉制劑。可組合這些方法，以獲得改善的效果。過濾時可使用過濾器，這是本領(lǐng)域技術(shù)人員周知的?？稍趩我徊襟E中改變和選擇藥劑的粒度，較佳的是在有效獲得前述所需粒度的條件下通過微粉化而進(jìn)行。
然后可在受控的溫度、濕度、光、壓力等條件下貯存干粉制劑，只要能保持該制劑的流動性即可?？稍谶x定溫度下測試貯存后制劑在選定的時間內(nèi)的穩(wěn)定性，并且為了快速篩選，可運行各種條件矩陣，如在2-8℃、30℃、有時在40℃進(jìn)行2、4和24周的時間。制劑應(yīng)當(dāng)保持穩(wěn)定的時間長度和條件依賴于各種因素，包括上述因素、每批的量、貯存條件、產(chǎn)品的流通等。這些測試通常在38％(rh)相對濕度下進(jìn)行。在這些條件下，制劑在18個月內(nèi)通常損失少于約30％的生物活性，有時少于約20％，或少于約10％。本發(fā)明的干粉損失少于約50％FPF，在一些情況下少于約30％，在另一些情況下少于約20％。
可將本發(fā)明的干粉制劑與制劑成分如增量劑或載體混合，這些制劑成分用于減少干粉中送遞給患者的制劑的濃度。加入這些成分到制劑中并不是必需的，但是，在一些情況下，每單位劑量具有較大體積的材料是合乎需要的。增量劑還可用于提高粉末在分散裝置中的流動性和可分散性，或者改善粉末的處理特征。這與某些減小粒度方法(如噴干)過程中使用的增量劑或載體是有區(qū)別的。合適的增量劑或賦形劑通常是結(jié)晶的(以避免水吸附)，包括但不限于乳糖和甘露醇。如果加入乳糖，如以約99∶1∶5的量，活性制劑對增量劑約1∶99是優(yōu)選的，且從約5到約5和從約1∶10到約1∶20。
本發(fā)明的干粉制劑可含有其他藥物，如可將各種治療劑的混合物一起加工，如噴干；或者可分別加工然后混合；或者可噴干一個組分而不噴干另一組分；當(dāng)然可以本文所能夠采用的其他任一方式進(jìn)行加工。藥物的組合將依賴于給定藥物所針對的疾病，這對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。本發(fā)明的干粉制劑還可包含作為制劑成分的賦形劑、防腐劑、去污劑、表面活性劑、抗氧化劑等，且可采用將該制劑以各種合適方法送遞給氣管的各種方式給藥，但作為可呼吸的制劑，優(yōu)選是通過呼吸道系統(tǒng)給藥，更優(yōu)選是以含有該制劑顆粒和任選的其他治療劑和制劑成分的氣溶膠或噴沫的形式給藥。
在另一實施方式中，干粉制劑可含有本發(fā)明的干藥劑和一種或多種表面活性劑。用于增強(qiáng)用于本發(fā)明的活性化合物的攝取的合適的表面活性劑或表面活性劑組分包括合成的和天然的化合物，以及全長或截短形式的表面活性劑蛋白A、表面活性劑蛋白B、表面活性劑蛋白C、表面活性劑蛋白D和表面活性劑蛋白E、雙飽和的卵磷脂(而不是二棕櫚酰基)、二棕櫚?；蚜字⒙蚜字?、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酸、泛醌、溶血磷脂酰乙醇胺、溶血卵磷脂、棕櫚?；?溶血卵磷脂、脫氫表雄酮、多萜醇、硫苷脂酸(sulfatidic acid)、甘油-3-磷酸酯、二羥基丙酮磷酸酯、甘油、甘油-3-磷酸膽堿、二羥基丙酮、棕櫚酸酯、胞嘧啶二磷酸(CDP)、二?；视汀DP膽堿、膽堿、磷酸膽堿；以及天然或人造的薄層體，該薄層體是下述表面活性劑組分的天然的載體ω-3-脂肪酸，多烯酸(polyenic acid)多烯酸(polyenoic acid)，外源凝集素，棕櫚酸，乙烯或丙烯氧化物、聚氧丙烯、單體或聚合的聚氧乙烯、單體或單體的聚(乙烯胺)與葡聚糖和/或烷酰基側(cè)鏈形成的非離子性嵌段共聚物，Brij 35、Triton X-100，和合成的表面活性劑ALEC、Exosurf、Survan，和Atovaquone，以及其他。這些表面活性劑可單獨使用，或者可作為制劑中的多組分表面活性劑，或者可共價偶聯(lián)于其他活性化合物。
用于本發(fā)明制劑的其他治療劑的例子是鎮(zhèn)痛劑，如對乙酰氨基酚(Acetaminophen)、阿尼利定(Anilerdine)、阿司匹林、丁丙諾啡(Buprenorphine)、異丁巴比妥(Butabital)、環(huán)丁羥嗎喃(Butorpphanol)、水楊酸膽堿、可待因(Codeine)、地佐辛(Dezocine)、雙氯芬酸(Diclofenac)、雙氟尼酸、雙氫可待因(Dihydrocodeine)、依降鈣素(Elcatoninin)、依托度酸(Etodolac)、非諾洛芬(Fenoprofen)、氫可酮(Hydrocodone)、氫嗎啡酮(Hydromorphone)、布洛芬(Ibuprofen)、酮洛芬(Ketoprofen)、酮咯酸(Ketorolac)、左啡諾(Levorphanol)、水楊酸鎂、甲氯滅酸鹽(Meclofenamate)、甲芬那酸(Mefenamic Acid)、哌替啶(Meperidine)、美沙酮(Methadone)、左美丙嗪(Methotrimeprazine)、嗎啡(Morphine)、納布啡(Nalbuphine)、萘普生(Naproxen)、阿片(Opium)、羥考酮(Oxycodone)、羥嗎啡酮Oxymorphone)、噴他佐辛(Pentazocine)、苯巴比妥(Phenobartital)、右丙氧芬(Propoxyphene)、雙水楊酯(Salsalate)、水楊酸鈉、曲馬多(Tramadol)和除上述列出的藥物外的其他麻醉用止痛劑。可參見Mosby′sPhysician′s GenRx。
也可使用抗焦慮藥，包括阿普唑侖(Alprazolam)、溴西泮(Bromazepam)、丁螺環(huán)酮(Buspirone)、利眠寧(Chlordiazepoxide)、氯美扎酮(Chlormezanone)、氯氮(Clorazepate)、地西泮(Diazepam)、哈拉西泮(Halazepam)、羥嗪(Hydroxyzine)、酮唑(Ketaszolam)、勞拉西泮(Lorazepam)、甲丙氨酯(Meprobamate)、奧沙西泮(Oxazepam)和普拉西泮(Prazepam)以及其他的抗焦慮藥。與精神壓抑相關(guān)的抗焦慮藥，如氯氮(Chlordiazepoxide)、阿米替林(Amitriptyline)、洛沙平(Loxapine)、馬普替林(Maprotiline)和奮乃靜(Perphenazine)以及其他的抗焦慮藥。抗炎劑如非風(fēng)濕性的阿司匹林、水楊酸膽堿、雙氯芬酸、雙氟尼酸、依托度酸、非諾洛芬、夫洛非寧(Floctafenine)、氟比洛芬(Flurbiprofen)、布洛芬、吲哚美辛(Indomethacin)、酮洛芬、水楊酸鎂、甲氯滅酸鹽、甲芬那酸、萘丁美酮(Nabumetone)、萘普生、奧沙普秦(Oxaprozin)、保泰松(Phenylbutazone)、吡羅昔康(Piroxicam)、雙水楊酯、水楊酸鈉、舒林酸(Sulindac)、替諾昔康(Tenoxicam)、噻洛芬酸(Tiaprofenic Acid)、托耳米丁(Tolmetin)；用于眼睛處理的抗炎劑如雙氯芬酸、氟比洛芬、吲哚美辛、酮咯酸、利美索龍(Rimexolone)(通常用于手術(shù)后的治療)；用于非感染性鼻應(yīng)用的抗炎劑如丙酸倍氯米松(Beclomethaxone)、布地奈德(Budesonide)、地塞米松(Dexamethasone)、氟尼縮松(Flunisolide)、曲安西龍(Triamcinolone)等等。催眠類藥物(抗失眠劑/引起睡眠的藥劑)如用于治療失眠的藥劑，包括阿普唑侖(Alprazolam)、溴西泮(Bromazepam)、地西泮(Diazepam)、苯海拉明(Diphenhydramine)、多西拉敏(Doxylamine)；諸如三環(huán)類的抗抑郁劑的治療，包括鹽酸阿米替林(Elavil)、鹽酸阿米替林、奮乃靜(Triavil)和鹽酸多塞平(Sinequan)。鎮(zhèn)定劑的例子包括艾司唑侖(Estazolam)、氟西泮(Flurazepam)、哈拉西泮(Halazepam)、凱他唑侖(Ketazolam)、勞拉西泮(Lorazepam)、硝西泮(Nitrazepam)、普拉西泮(Prazepam)、夸西泮(Quazepam)、替馬西泮(Temazapam)、三唑侖(Triazolam)、唑吡坦(Zolpidem)和索皮可龍(Sopiclone)以及其他藥物。止痛劑包括苯海拉明、羥嗪、左美丙嗪、異丙嗪(Methotrimeprazine)、丙泊酚(Propofol)、褪黑激素(Melatonin)、阿利馬嗪(Trimeprazine)等。
鎮(zhèn)靜劑和用于治療小發(fā)作和震顫以及其他疾病藥劑包括如鹽酸阿米替林、氯氮、異戊巴比妥(Amobartital)、司可巴比妥(Secobarbital)、阿普比妥(Aprobarbital)、仲丁比妥(Butabarbital)、乙氯戊烯炔醇(Ethchiorvynol)、格魯米特(Glutethimide)、L-色氨酸、甲苯比妥(Phenobarbital)、甲己炔巴比妥鈉(Secobarbital Na)、鹽酸咪達(dá)唑侖(Midazolam HCl)、奧沙西泮(Oxazepam)、戊巴比妥鈉(Pentobarbital Na)、苯巴比妥(Phenobarbital)、司可巴比妥鈉、硫戊巴比妥鈉(Thiamylal Na以及許多其他藥物。用于治療頭部外傷(腦損傷/基部缺血)的藥劑如鹽酸依那朵林(如用于治療嚴(yán)重頭部損傷，孤兒狀態(tài)，WarnerLambert)；細(xì)胞保護(hù)劑(cytoprotective agents)和用于治療月經(jīng)、月經(jīng)癥狀(治療)的藥劑如麥角胺、顛茄生物堿和苯巴比妥；用于治療月經(jīng)舒縮癥狀的藥劑如可樂定(Clonidine)、妊馬雌酮和甲羥孕酮、雌二醇、環(huán)戊丙酸雌二醇、戊酸雌二醇、雌激素、妊馬雌酮、酯化雌酮、Estropipate和乙炔雌二醇。用于治療月經(jīng)前癥狀(PMS)的藥劑例子是黃體酮、孕酮、促性腺激素釋放激素、口服避孕藥、達(dá)那唑、Luprolide Acetate、維生素B6。用于治療情感/精神病方面的藥劑以及抗抑郁劑和抗焦慮劑的例子是地西泮(Valium)、勞拉西泮(Ativan)、阿普唑侖(Xanax)、SSRI′s(選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑)、鹽酸氟西汀(Prozac)、鹽酸Sertaline(Zoloft)、鹽酸帕羅西汀(Paxil)、馬來酸氟伏沙明(Luvox)、鹽酸文拉法辛(Effexor)、5-羥色胺、5-羥色胺激動劑(芬氟拉明)以及其他非處方藥。
可采用常規(guī)的技術(shù)制備這些組合的治療劑?？赡苄枰獙⑦@些活性化合物和任何載體(如果合適的話，即當(dāng)不需要規(guī)則的混合物)在合適的粉碎機(jī)中微粉化，例如在加工中一些點上的噴射研磨中微粉化，以生產(chǎn)主要顆粒的大小范圍適合于在下呼吸道中獲得最大沉積的顆粒(即約0.1-10微米)。例如，適當(dāng)時技術(shù)人員可干混DHEA和載體，然后將這些物質(zhì)一起微粉化；或者，可分別微粉化這些物質(zhì)，然后再混合。在待混合的化合物具有不同的物理特性如硬度和脆性的情況下，微粉化的抗性會不同，且可能需要不同的壓力以將它們粉碎成合適的粒度。因此，當(dāng)一起微粉化時，組分中的一種的粒度可能是不令人滿意的。在這種情況下，有利的是首先分別微粉化不同的組分，然后再混合它們。
在不需要指定的混合物的情況下，還可以先將活性組分溶解在合適溶劑如水中的任何載體中，以獲得分子水平上的混合。此方法還使得技術(shù)人員可將pH值調(diào)整到所需的水平。必須對吸入產(chǎn)品的藥學(xué)上可接受的pH限制，即3.0-8.5，加以考慮，因為pH在此范圍之外的產(chǎn)品可能會引起氣管刺激和收縮。為了獲得粉末，必須采用能保留DHEA的生物學(xué)活性的方法除去溶劑。合適的干燥方法包括真空濃縮、開放式干燥、噴干、凍結(jié)干燥以及使用超臨界液體進(jìn)行干燥。通常應(yīng)避免不要使溫度超過50℃少許分鐘，因為DHEA可能或出現(xiàn)一些降解。干燥后，如果需要，可研磨固體物質(zhì)，獲得粗糙的粉末，然后需要的話再微粉化。
如果需要，在將其加入到即將使用的吸入裝置之前，可加工微粉化的粉末，以提供流動特性，如通過干?；纬删哂袃?yōu)異的處理特征的球狀團(tuán)塊。在這種情況下，構(gòu)件該裝置，以確保這些團(tuán)塊在離開該裝置前基本上被去團(tuán)塊化，這樣進(jìn)入患者呼吸道的考慮大部分都在所需的大小范圍內(nèi)。當(dāng)需要指定的混合物時，可例如微粉化活性化合物，以獲得所需的特定大小范圍內(nèi)的顆粒。還可如加工載體，以獲得所需的大小和合乎要求的表面特性，如特定的表面/重量比，或者獲得某種特質(zhì)，并且確保該指定化合物中具有最佳的粘附力。對指定混合物的這些物理要求是已知的，為獲得滿足所述要求的指定混合物采用的各種方法也是已知的，并可由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地測定。
本發(fā)明干粉制劑可作為具有可呼吸大小顆粒的制劑給予呼吸道，即具有足夠小以在吸入給藥、經(jīng)鼻給藥或肺灌輸后能通過鼻、口、喉或肺到達(dá)肺支氣管和肺泡的粒度。通常，可呼吸的粒度約為0.1-100微米，可吸入的顆粒為約0.1微米到約10微米、到約5微米大小。主要地，當(dāng)被吸入時，包含在氣溶膠中的具有不可呼吸大小的顆粒傾向于在喉嚨中沉積，并被咽下，如此則減少了氣溶膠中不可呼吸顆粒的量。對于經(jīng)鼻給藥，優(yōu)選使用約10微米到約20微米、約50微米、約60微米或約100微米的粒度，以確保藥物在鼻腔中滯留。
可采用已知的技術(shù)分析顆粒的大小和形狀，以測定和確保具有正確的顆粒形態(tài)。例如，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在顯微鏡下用眼檢查顆粒，和/或使顆粒通過網(wǎng)篩而測定其大小。顆粒的優(yōu)選可視化技術(shù)包括掃描電子顯微鏡(SEM)和透射式電子顯微鏡(TEM)?？墒褂眉す庋苌浞ǚ治隽６取Ｍㄟ^激光衍射分析粒度的可從市場上購得的系統(tǒng)有Clausthal-Zellerfeld，德國(HELOS H1006)。
可使用能產(chǎn)生固體顆粒氣溶膠的任何裝置如氣溶膠或噴霧產(chǎn)生器送遞本發(fā)明的干粉制劑。這些裝置產(chǎn)生可呼吸的顆粒(如上所述)，并以適合于給予人或動物的速率產(chǎn)生含有預(yù)定計量劑量的藥劑的氣溶膠或噴沫體積。固體顆粒氣溶膠或噴霧產(chǎn)生器的一個闡述性類型是吹藥器，它適用于給予給予微細(xì)粉碎的粉末。也可以鼻吸的方式將該粉末吸入鼻腔中。在吹藥器中，粉末如能有效執(zhí)行本文所述的治療的計量劑量的藥劑包含在膠囊或藥包中。這些膠囊或藥包通常由明膠、箔或塑料制成，可被原位刺穿或打開，之后粉末通過吸入作用或人工操作的泵而被吸過該裝置。吹藥器中使用的干粉制劑可單獨由藥劑組成，也可由含有該藥劑的粉末混合物組成，藥劑通常占該制劑的0.01-100％w/w。干粉制劑通常含有約0.01％w/w、約1％w/w、約5％w/w到約20％w/w、約40％w/w、約99.99％w/w的活性化合物。但其他成分和其他量的藥劑在本發(fā)明范圍內(nèi)也是適用的。
在優(yōu)選的實施方式中，使用噴霧器送遞干粉制劑。這是一種尤其適用于經(jīng)自身努力仍不能吸入或呼吸粉末狀藥學(xué)組合物的患者或?qū)ο蟮难b置。在嚴(yán)重的情況下，患者或?qū)ο笠扇斯ず粑鼨C(jī)來維持其生命。噴霧器可使用任何藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可接受的載體，如弱的鹽水溶液。較佳的是，弱鹽水溶液含有少于約0.2％或0.5％的氯化鈉。更佳的是，弱鹽水溶液是少于約0.2％或O.15％的氯化鈉溶液。更佳的是，弱鹽水溶液是少于約0.12％氯化鈉溶液。噴霧器是將粉末狀藥學(xué)組合物送遞給患者或?qū)ο髿夤苤械陌袠?biāo)的裝置。可通過消除或減少包含該化合物的密封容器(如瓶子)中的水含量來維持或增加無水化合物如無水DHEA-S的穩(wěn)定性。較佳的是，除了該化合物外，該密封容器內(nèi)部是真空。
還可以各種適合于不同給藥方法和送藥途徑的形式提供本發(fā)明的制劑。所考慮的制劑是，例如，皮下給予的還含有賦形劑和其他適合通過皮膚、口腔、鼻子、陰道、肛門、眼睛和其他體腔送遞的制劑的透皮制劑，作為持續(xù)釋放制劑，胸內(nèi)，血管內(nèi)，吸入，經(jīng)鼻，肺內(nèi)給藥，送遞到器官中，植入，栓劑，作為乳酪，凝膠等，這些都是本領(lǐng)域已知的。在一個實施例中，干粉制劑含有可呼吸的制劑，如氣溶膠或噴沫。本發(fā)明的干粉制劑成批、成單位形式以及成植入物、膠囊、發(fā)泡藥或藥包的形式提供，這些形式都是本領(lǐng)域已知的可打開或刺穿的。還提供藥盒，它包括送遞裝置和裝在分離的容器中的本發(fā)明干粉制劑，任選地還包括其他賦形劑和治療劑，還包括指導(dǎo)使用該藥物組分的說明書。
在一個優(yōu)選的實施方式中，以懸浮計量劑量吸附(MDI)制劑送遞該藥劑?？墒褂醚b備有推進(jìn)劑如氫氟烷(HFA)的送遞裝置送遞這種MDI制劑。較佳的是，HFA推進(jìn)劑含有100份/百萬(PPM)或更少的水。N.C.Miller(“呼吸藥物的送遞”，P.R.Bryon編輯，CRC出版社，Boca Raton，1990，第249-257頁〕對水含量對MDI懸浮液中晶體生長的影響進(jìn)行評述。當(dāng)無水DHEA-S暴露于水時，它將水解并最終形成大顆粒。這種水合過程會在無水DHEA-S在含有水的HFA推進(jìn)劑的懸浮液中發(fā)生。由于形成強(qiáng)的顆粒間鍵的緣故，這種水合過程將加速晶體生長，并導(dǎo)致形成大顆粒。相反，二水合物已經(jīng)水合，因而更穩(wěn)定，因而在MDI中是更佳的無水形式，因為該二水合物將不會再形成較大的顆粒。如果DHEA-S與HFA推進(jìn)劑形成能量比二水合物低的溶劑合物，擇該DHEA-S溶劑合物將是最穩(wěn)定的，因此是更佳的用于MDI的形式。
在一個優(yōu)選實施方式中，送遞裝置包括送遞單劑或多劑所述制劑的干粉吸入器(DPI)。單劑吸入器可以一次性藥物形式提供，該一次性藥盒預(yù)先無菌地加了足夠使用一次的制劑。還可以加壓吸入器方式提供吸入器，制劑提供在可刺穿或可打開的膠囊或藥包中。藥盒還可任選地包括裝載單獨的容器中的藥劑，如其他治療化合物、賦形劑、表面活性劑(打算作為治療劑以及制劑成分)、抗氧化劑、調(diào)味劑和著色劑、填充劑、揮發(fā)性油、緩沖劑、分散劑、表面活性劑、抗氧化劑。調(diào)味劑、增量劑、推進(jìn)劑和防腐劑以及其他用于不同制劑的適當(dāng)添加劑。在治療和/或預(yù)防與支氣管狹窄、過敏性反應(yīng)、肺癌和/或炎癥相關(guān)的疾病或癥狀中，可使用本發(fā)明干粉制劑本身，或者也可以組合物或各種制劑的形式使用本發(fā)明干粉制劑。疾病的例子包括氣管炎癥、過敏性反應(yīng)、哮喘、妨礙性呼吸、CF、COPD、AR、ARDS、肺動脈高血壓、肺炎、支氣管炎、氣管阻塞、支氣管狹窄、微生物感染、病毒感染(如SARS)等等。明顯的是，可給予本發(fā)明制劑用于治療使對象痛苦的任何疾病，以上列出的僅僅是例子。通常，給予本發(fā)明的干粉制劑以提供有效量的所述藥劑，以減少或改善疾病或病癥的癥狀。
可直接將干粉制劑給予肺，較佳是作為可呼吸的粉末、氣溶膠或噴沫形式給予。雖然技術(shù)人員根據(jù)本專利的教導(dǎo)將知道如何滴定測量待給予的干粉制劑相對于治療對象重量的量，但優(yōu)選以有效獲得約0.05到約10μM、較佳至多約5μM的本發(fā)明藥劑的量給予本發(fā)明藥劑?？稍趬毫l件下使用推進(jìn)劑，它們也可以攜帶有共溶劑?？梢愿鞣N途徑送遞本發(fā)明的干粉制劑，包括透皮或全身途徑、口服、腔內(nèi)、鼻內(nèi)、肛門內(nèi)、陰道內(nèi)、透皮、口腔內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮下、肌肉內(nèi)、腫瘤內(nèi)、腺體內(nèi)、植入、皮內(nèi)等等方式，包括植入物、緩釋、透皮釋放、持續(xù)釋放制劑，以及用一種或多種大分子包衣，以避免藥劑在達(dá)到靶組織前受到破壞。可能會由本發(fā)明藥劑治療的對象總的包括人和其他動物，具體是脊椎動物，尤其是哺乳動物，更具體是小的和大的、野生的和家養(yǎng)的、海生的和畜養(yǎng)的動物，優(yōu)選是人和家養(yǎng)的和畜養(yǎng)的動物和寵物。
下述實施例將更詳細(xì)描述使用上述發(fā)明的方式，并描述了實施本發(fā)明各方面的最佳實施方式。應(yīng)理解，這些實施例無論如何都不限定本發(fā)明的真實范圍，而僅僅是闡述性目的。本文將文中引用到的所有文獻(xiàn)的相關(guān)部分全文引入作為參考。在這些實施例中，μM指微摩爾，mM指毫摩爾，cm指厘米。℃指攝氏度，μg指微克，mg指毫克，g指克，kg指千克，M指摩爾，h指小時。
實施例實施例1無水DHEA-S的空氣噴射研磨和可呼吸劑量的確定以不同于吸入皮質(zhì)類固醇治療的每天一次哮喘治療的方式評估DHEA-S，前者預(yù)計并不具有與該類化合物相關(guān)的安全考慮。已研究了成塊的和研磨的DHEA-S、脫氫表雄酮硫酸鈉(NaDHEA-S)或普拉睪酮(prasterone)硫酸鈉的固態(tài)穩(wěn)定性(Nakagawa，H.，Yoshiteru，T.和Fujimoto，Y.，1981，Chem.Pharm.Bull.，29(5)，1466-1469；Nakagawa，H.，Yoshiteru，T.和Sugimoto，I.，1982，Chem.Pharm.Bull.，30(1)，242-248〕。DHEA-S是最穩(wěn)定的，并結(jié)晶為二水合物形式。DHEA-S無水形式具有低的結(jié)晶度，并且是非常吸濕的。只要DHEA-S在貯存時沒有吸水，其無水形式是穩(wěn)定的。保持部分晶體的材料無水分需要特定的生產(chǎn)和包裝技術(shù)。對于耐用的產(chǎn)品，在其開發(fā)過程中將其對水分的敏感性減到最低是必需的。
(1)DHEA-S的微粉化使用噴射研磨機(jī)(Jet-O-Mizer #00系列100-120PSI nitrogen)微粉化無水DHEA硫化物。使大約1g的樣品通過噴射研磨機(jī)一次，將大約2g的樣品通過噴射研磨機(jī)2次。將從各研磨機(jī)中獲得的顆粒懸浮在己烷中，DHEA-S在己烷中不溶，加入Spa85表面活性劑，以阻止結(jié)塊。超聲處理所得溶液3分鐘，顆粒完全分散。在Malvern Mastersizer X上用小體積采樣器(SVS)附件測試分散的溶液。測試一份分散的樣品5次。未研磨物質(zhì)的平均粒度或D(v，0.5)是52.56微米，％RSD(相對標(biāo)準(zhǔn)偏差)是7.61(5個值)。通過噴射研磨機(jī)一次的D(v，0.5)是3.90微米，％RSD是1.27，通過噴射研磨機(jī)2次的D(v，0.5)是3.25微米，％RSD是3.10。這證明可通過噴射研磨而獲得適用于吸入的粒度的DHEA-S。
(2)HPLC分析使用兩瓶(A通過一次，150mg；B，通過兩次，600mg)微粉化藥物測定噴射研磨微粉化過程中藥物的降解。將從A瓶和B瓶中獲得的等份(重量)的DHEA-S與未研磨DHEA-S(10mg/ml)的乙腈-水溶液(1∶1)的標(biāo)準(zhǔn)溶液比較。未研磨藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液的HPLC分析的色譜峰面積是23.427，在乙腈-水溶液(1∶1)中配制A瓶等份(重量)試樣和B瓶等份(重量)試樣。A瓶和B瓶的色譜峰面積分別為11.979和11.677。很明顯，在噴霧研磨微粉化過程中藥物沒有發(fā)生可檢測到的降解。
(3)噴出劑量研究將DHEA-S粉末收集到Nephele管中，采用HPLC分析。對測試的三個干粉吸入器中的每一個以各空氣流速進(jìn)行三次試驗(Rotahaler，Diskhaler andIDL′s DPI裝置)。將Nephele管的一端裝上玻璃過濾器(Gelman Science，A/E型，25μm)，將其與空氣流連接，以收集從測試的各干粉吸入器噴出的藥物的劑量。在Nephele管的另一端固定一具有開口以接受各測試的干粉吸入器的噴口的硅酮適配器。使所需的氣流，即30、60或90L/min通過Nephele管。然后將各干粉吸入器噴口插入硅酮橡膠適配器中，繼續(xù)吹入氣流約4秒鐘，然后移開該管，用蓋子蓋上各管的該開口端。移開該管不包括過濾器的蓋子，將10毫升HPLC級的水-乙腈溶液(1∶1)加到該管中。重新蓋上蓋子，搖動管子1-2分鐘。然后從管上移走蓋子，將溶液轉(zhuǎn)移到裝有過濾器(Cameo 13NSyringe Filter，Nylon，0.22μm)的10毫升塑料注射器中。將等量的溶液直接過濾到HPLC瓶中，用于稍后的HPLC藥物分析。使用裝在明膠膠囊(Rotahaler)或Ventodisk發(fā)泡藥(Diskhaler和單劑DPI(IDL))中的微粉化DHEA-S(約12.5或25毫克)進(jìn)行上述噴出劑量試驗。當(dāng)稱重微粉化DHEA-S(僅使用B瓶)，將其加到明膠膠囊或發(fā)泡藥(blister)中時，微粉化粉末出現(xiàn)些許聚集。以30、60和87.8L/min的流速進(jìn)行的噴出劑量測試的結(jié)果顯示在表1到表4中。表1是Rotahaler試驗中3個不同流速的結(jié)果。表2是Diskhaler試驗中3個不同流速的結(jié)果。表3是多劑試驗中3個不同流速的結(jié)果。表4總結(jié)了這些試驗的結(jié)果。
表1使用Rotahaler噴出的劑量

表2使用Diskhaler噴出的劑量


表3IDL多劑噴出劑量試驗


表4三種不同干粉吸入裝置噴出劑量的比較


(4)可呼吸劑量的研究使用標(biāo)準(zhǔn)的階式碰撞取樣器(Andersen)進(jìn)行可呼吸劑量(可呼吸分?jǐn)?shù))研究，該取樣器由入口錐體(在此使用取樣器預(yù)分離器替換)、9個工作臺、8個收集板和8個鋁工作臺內(nèi)的備用過濾器組成，該8個鋁工作臺由3彈簧夾和O-環(huán)密封襯墊一起支撐著，其中各取樣器工作臺包括多個精確鉆孔。當(dāng)氣流通過取樣器時，各工作臺中的多個空氣噴氣流將氣載顆粒吹向該工作臺收集板的表面。各工作臺的噴氣流的大小是恒定的，但各工作臺的氣流大小依次變小。顆粒是否撞擊到各工作臺上要依賴于各工作臺的噴氣流速度以及當(dāng)前工作臺的截留值。未被第一工作臺收集的所有顆粒都隨著該板邊緣四周的氣流進(jìn)入下一工作臺，在那顆粒要么撞擊在板上要么通過該板并進(jìn)入下一工作臺，依次類推，直到噴氣流的速率足夠用于撞擊。為了防止進(jìn)行階式碰撞取樣器試驗時顆粒彈起，各取樣器板都包涂有己烷-油脂(高真空)溶液(100∶1)。如上所述，取樣器板上的顆粒截留值依不同空氣流速而改變。例如，工作臺2在60L/min時對應(yīng)于大于6.2微米顆粒的截留值，在30L/min時對應(yīng)于大于5.8微米顆粒的截留值；工作臺3在90L/min時的粒度截留值大于5.6微米。因而，在可比的氣流速率時優(yōu)選使用類似的顆粒截留值，即，在5.6-6.2微米的范圍。美國Phamacopeia提出的測試干粉吸入器的裝置由連接于玻璃喉管(用50毫升的圓底燒瓶替換)的噴口適配器(在此實施例中為硅酮)和引導(dǎo)預(yù)分離器的玻璃末端咽管(引導(dǎo)部分)以及Andersen采樣器組成。該預(yù)分離器樣品包括從噴口適配器、玻璃喉管、末端咽管和預(yù)分離器得到的洗滌物。在進(jìn)行階式碰撞取樣器試驗前，先將5毫升乙腈∶水(1∶1)溶劑放到該預(yù)分離器中。對3種不同的干粉吸入器，分別以30、60和90L/min的氣流速率進(jìn)行兩次該階式碰撞取樣器試驗。采用HPLC分析在階式碰撞取樣器板上收集到的藥物，對各Diskhaler和多劑階式碰撞取樣器試驗進(jìn)行藥物物料衡算(mass balance)，包括測定殘留在發(fā)泡藥中的藥物的量、殘留在裝置(僅Diskhaler)中的藥物的量、殘留在硅酮橡膠噴口適配器、玻璃喉管、玻璃末端咽管和預(yù)分離器上的不可吸入的藥物的量，將它們都混成一份樣品，然后測定可呼吸的劑量，即工作臺2中在30和60L/min的空氣氣流下通過過濾器碰撞取樣器板的劑量和在工作臺1中在90L/min試驗中通過過濾器碰撞取樣器板的劑量。
表5階式碰撞取樣器試驗(90L/min)

*a沒有洗滌多劑裝置，因為溶劑會攻擊SLA組分。獲得多劑裝置滯留百分比不同。
*b烘烤干燥的藥物80分鐘*c烘烤干燥的藥物20小時下述結(jié)論得自噴出劑量和階式碰撞取樣器試驗。在階式碰撞取樣器試驗中獲得低的可吸入劑量值，這是因為藥物顆粒集結(jié)的緣故，集結(jié)的藥物顆粒即使在最高的氣流速率下也不能被分離。我們的意見是，藥物的集結(jié)是在用于減少粒度的機(jī)械研磨加工中建立起來的靜電而導(dǎo)致的結(jié)果，這一狀態(tài)進(jìn)一步被接下來的顆粒水分吸收復(fù)合。產(chǎn)生較少靜電或較少吸濕的完全水合的DHEA-S晶體(即二水合物形式)的微粉化方法應(yīng)能提供減少集結(jié)可能性的更自由流動的粉末。
實施例2無水DHEA硫酸鹽的噴干和可呼吸劑量的測定(1)藥物的微粉化將1.5g無水DHEA硫酸鹽溶解在100毫升50％乙醇水中，得到1.5％溶液。用B-191 Mini噴干器(Buchi，F(xiàn)lawil，Switzerland)噴干該溶液，入口溫度為55℃、出口溫度為40℃、100％吸入器、10％泵、氮氣氣流為40mbar、噴霧流速為600單位。將噴干產(chǎn)品懸浮在己烷中，加入Span85表面活性劑以減少聚集。超聲處理分散液，冷卻3-5分鐘以完全分散，在裝備有小體積采樣器(SVS)附件的Malvern Mastersizer X上測試該分散液。
發(fā)現(xiàn)兩批噴干物質(zhì)的平均粒度分別為5.07±0.70微米和6.66±0.91微米。采用光學(xué)顯微鏡對各批分散物的肉眼檢查證實，噴干產(chǎn)生了小的可呼吸粒度。各批的平均粒度分別是2.4微米和2.0微米。這證明可將DHEA-S噴干成適合于吸入的粒度。
(2)可呼吸劑量的研究如實施例1所述進(jìn)行階式碰撞取樣器試驗。進(jìn)行四個階式碰撞取樣器試驗，其中三個使用IDL多劑裝置，一個使用Diskhaler，所有試驗的氣流速度都是90L/min。所有階式碰撞取樣器試驗的結(jié)果列在表6中。
表6使用噴干的藥物產(chǎn)品進(jìn)行的階式碰撞取樣器試驗結(jié)果

與微粉化無水DHEA-S的可呼吸劑量相比，這些試驗中噴干的無水物質(zhì)產(chǎn)生了兩倍的增加。雖然與噴射研磨相比噴干方法確實獲得了增加的可呼吸劑量，但是可呼吸劑量的％仍然是低的。這是因為可能是無水形式吸水聚集而導(dǎo)致的結(jié)果。
實施例3DHEA-S二水合物(DHEA-S·2H2O)的空氣噴射研磨和可呼吸劑量的測定(1)DHEA-S二水合物的重結(jié)晶將無水DHEA-S溶解在90％乙醇/水的沸騰混合物中。在干冰/乙醇浴中快速冷卻此溶液，使DHEA-S重結(jié)晶。濾出晶體，用冷的乙醇洗滌兩次，然后放在室溫下的真空干燥器中總共36小時。干燥過程中，用刮刀定期攪拌該物質(zhì)，以破壞大的聚集塊。干燥后，使該物質(zhì)通過500微米篩。
(2)微粉化和物理化學(xué)測試在氮氣中在噴射研磨機(jī)中微粉化DHEA-S，文氏管壓力為40PSI、研磨機(jī)壓力為80PSI、進(jìn)料裝置為25、產(chǎn)品進(jìn)料速率約為120-175g/小時。使用5點BET分析測定表面積，使用Micromeritics TriStar表面積分析儀以氮氣作為吸附氣體(P/Po＝0.05到0.30)進(jìn)行該BET分析。使用Micromeritics Satum Digisizer通過激光衍射分析粒度分布，其中顆粒懸浮在礦物油中，使用二辛基磺化琥珀酸鈉作為分散劑。采用Karl Fischer滴定(Schott Titroline KF)測量藥物物質(zhì)的水含量。以純水作為標(biāo)準(zhǔn)，三個試驗的所有相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于1％。直接將粉末加到滴定培養(yǎng)基中。微粉化前和微粉化后的DHEA-S二水合物的物理化學(xué)特性列在表7中。
表7微粉化前和微粉化后的DHEA-S二水合物的物理化學(xué)特性

所測得明顯變化僅僅是粒度的變化。水的損傷并不明顯，雜質(zhì)的增加也不明顯。微粉化物質(zhì)的表面積與平均大小為3-4微米的無規(guī)則形狀顆粒的表面積一致。微粉化成功經(jīng)粒度減少到適合于吸入的范圍，而且在固態(tài)化學(xué)中沒有產(chǎn)生可測量的變化。
(3)DHEA-S二水合物的氣溶膠化用單劑Acu-Breathe裝置評估DHEA-S二水合物。將約10毫克純DHEA-S二水合物填充到箔發(fā)泡藥中，并密封。促使這些發(fā)泡藥進(jìn)入流速為30-75L/min的Andersen的8個工作臺階式碰撞取樣器中，該取樣器具有一玻璃雙碰撞器喉管。一起清洗Andersen碰撞取樣器的1-5工作臺，獲得細(xì)粉末分?jǐn)?shù)的估計值。將從多個工作臺收集得到的藥物合并為一個檢測樣品使此方法更佳靈敏。這一系列試驗的結(jié)果顯示在圖1中。
在所有的流速下，二水合物產(chǎn)生的細(xì)顆粒分?jǐn)?shù)高于實際上無水物質(zhì)的分?jǐn)?shù)。由于使用單劑吸入器將二水合物粉末氣溶膠化，因此可以合理得出氣溶膠特征明顯好于實際上無水物質(zhì)結(jié)論。較高的結(jié)晶度和穩(wěn)定的水分含量是導(dǎo)致二水合物具有如此優(yōu)異的氣溶膠特征的最有可能的因素。DHEA-S二水合物的這種獨特特征還未在現(xiàn)有技術(shù)中報道。
雖然二水合物形式的DHEA-S氣溶膠性能的改善很明顯，但是純藥物物質(zhì)可能并不是最佳的制劑。使用粒度較大的載體通常能提高微粉化藥物物質(zhì)的氣溶膠性能。
實施例4有或無乳糖的情況下無水DHEA-S和DHEA-S二水合物的穩(wěn)定性采用高壓液相色譜(HPLC)測定無水DHEA和DHEA-S二水合物的初始純度(時間＝0)。然后以純粉末的形式或以50∶50的比例將DHEA和DHEA-S二水合物分別與乳糖混合，放在開口玻璃瓶中，然后將溫度維持在50℃4周。利用這些條件使這些制劑受到應(yīng)力，以預(yù)測它們的長時間穩(wěn)定性結(jié)果。密封僅含有DHEA-S(無水或二水合物)的對照瓶，并將其溫度保持在25℃至4周。在第0、1、2和4周獲得樣品，并進(jìn)行HPLC分析，測定降解的量，即通過測定DHEA的形成測定降解的量。
1周后，在50℃下貯存的密封玻璃瓶中混合有乳糖的實際上無水的DHEA-S(50％，標(biāo)稱)產(chǎn)生褐色的色調(diào)，比乳糖混合物暗。這種顏色變化伴隨著色譜的顯著變化(如圖1所示)。主要的降解物是脫氫表雄酮或DHEA。從圖2的定量數(shù)據(jù)看，混合物中DHEA的量高于其他兩份樣品中的量。為了定量測定樣品中的DHEA％，將DHEA峰的面積除以DHEA-S和DHEA峰的總面積(結(jié)果列于表8中)?；旌衔锏妮^高的降解比例表明乳糖和實際上無水的DHEA-S之間發(fā)生了特殊的反應(yīng)。與DHEA增加相對應(yīng)的是，加速貯存(accelerated storage)的粉末的褐色也隨著時間的推移而增加。稱取樣品用于化學(xué)分析過程中發(fā)生的結(jié)塊現(xiàn)象也證實了加速貯存的物質(zhì)顯示出與時間更緊密的關(guān)系。基于這些結(jié)果，不能用乳糖配制實際上無水的DHEA-S。這是非常不利的，因為乳糖是干粉制劑最常用的吸入賦形劑。繼續(xù)用實際上無水的形式則意味著要將制劑限制到純粉末，或者要使用新的賦形劑的話需要進(jìn)行更廣泛的安全性研究。
表850℃從無水DHEA-S形成的DHEA的百分比

與圖2不同，在50℃下貯存1周后實際上沒有DHEA產(chǎn)生(見圖3)。此外，物質(zhì)的顏色沒有發(fā)生變化。DHEA-S二水合物的水分含量在50℃貯存1周后實際上沒有改變。與初始的8.8％相比，加速貯存后水分含量是8.66％。在此穩(wěn)定性程序中測得的DHEA％顯示在表9中。
表950℃下由DHEA-S二水合物形成的DHEA百分比

通過比較圖1、2和表8、9，可以看出DHEA-S的二水合物形式是更穩(wěn)定的形式，適用于進(jìn)一步的研究?，F(xiàn)有專利和研究文獻(xiàn)中也沒有報道DHEA-S二水合物與乳糖混合物相對于實際上無水物質(zhì)的優(yōu)異兼容性。下一部分將描述這種物質(zhì)的溶解性，作為噴霧器溶液研發(fā)工作的一個部分。
實施例5DHEA-S二水合物/乳糖混合物、可呼吸劑量和穩(wěn)定性的測定(1)DHEA-S二水合物/乳糖混合物手動混合等重量的DHEA-S二水合物和吸入等級的乳糖(Foremost Aero Flo95)，然后使混合物通過500μm篩，制得預(yù)混合物。然后將此預(yù)混合物和余下的乳糖放到BelArt Micro研磨機(jī)中，獲得10％w/w的DHEA-S混合物?；旌掀髋c可變電壓電線連接，以調(diào)節(jié)攪拌器的速率。混合器的電壓分別以30％、40％、45％和30％的全壓循環(huán)1、3、1.5和1.5分鐘。通過HPLC分析測定混合物的含量均一性(content uniformity)。表10顯示此混合物含量均一性樣品的結(jié)果。目標(biāo)值是10％w/w的DHEA-S?；旌衔锖渴橇钊藵M意的，接近目標(biāo)值和含量差異。
表10DHEA-S二水合物與乳糖的混合物的含量差異

(2)將DHEA-S二水合物/乳糖混合物的氣溶膠化將大約25毫克的該粉末填充到箔發(fā)泡藥中，并密封，然后使用單劑裝置以60L/min氣溶膠化。各測試分別使用兩劑發(fā)泡藥，細(xì)顆粒分?jǐn)?shù)(工作臺1-5中的物質(zhì))的結(jié)果顯示在表11中。
表11兩個不同試驗中乳糖混合物的細(xì)顆粒分?jǐn)?shù)

此初步研究的粉末混合物的氣溶膠結(jié)果對于呼吸藥物送遞系統(tǒng)而言是令人滿意的。優(yōu)化粉末混合物和發(fā)泡藥/裝置構(gòu)型是有可能獲得較高的細(xì)顆粒分?jǐn)?shù)的。測試2的整個粒度分布顯示在表12中。
表12氣溶膠化的DHEA-S二水合物/乳糖混合物的粒度分布

此DHEA-S氣溶膠的平均直徑為～2.5微米。此直徑小于采用激光衍射所測得的微粉化的DHEA-S二水合物的平均直徑。無規(guī)則形狀的顆粒在空氣動力學(xué)上可作為較小的顆粒發(fā)揮作用，這是因為它們的最長的尺度傾向于與氣流場排列。因此，通常可以看到兩種方法之間存在差異。衍射測量是用于輸入物質(zhì)的質(zhì)量控制測試，而階式碰撞取樣器則是用于最終產(chǎn)品的質(zhì)量控制測試。
(3)DHEA-S二水合物/乳糖混合物的穩(wěn)定性還將此乳糖制劑置于50℃的加速穩(wěn)定性程序中。關(guān)于DHEA-S含量的結(jié)果顯示在表13中。對照是在室溫貯存的混合物。
表13DHEA-S二水合物/乳糖混合物50℃的應(yīng)力穩(wěn)定性

在任一種條件下DHEA-S含量都沒有隨著時間推移而改變的趨勢，所有結(jié)果都在含量均一性測試中采集的樣品的范圍之內(nèi)(參見表13)。此外，沒有發(fā)生顏色變化，色譜中也沒有觀察到不規(guī)則的地方。混合物表現(xiàn)出化學(xué)穩(wěn)定性。
實施例6DHEA-S的噴霧制劑
DHEA-S的溶解性。將根據(jù)“DHEA-S二水合物的重結(jié)晶(實施例4)”制得的過量的DHEA-S二水合物加到溶劑介導(dǎo)中，使其平衡至少14小時，同時定期搖動。然后將該懸浮液濾過0.2微米注射器過濾器，然后立即稀釋，以進(jìn)行HPLC分析。為制備冷卻的樣品，使用前將注射器和過濾器保存在電冰箱中至少1小時。
吸入純水可導(dǎo)致咳嗽刺激。因此，重要的是要將鹵化物離子加到噴霧制劑中，氯化鈉是作常用的鹽。由于DHEA-S是鈉鹽，因此由于共同的離子作用的緣故，氯化鈉會降低溶解性。圖4顯示了作為氯化鈉濃度的函數(shù)的DHEA-S在室溫(24-26℃)和在冷藏(7-8℃)時的溶解度。
DHEA-S的溶解度隨著氯化鈉濃度而下降。在所有氯化鈉濃度下，降低貯存溫度都會降低溶解度。在高氯化鈉濃度時，溫度影響較弱。在三個平行試驗中，～25℃和0％氯化鈉的溶解度為16.5-17.4mg/mL，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.7％。在0.9％氯化鈉冷藏情況中，三個試驗的溶解度范圍是1.1-1.3mg/mL，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為8.3％。
固態(tài)和液態(tài)DHEA-S之間的平衡如下所示NaDHEA-S固態(tài)□DHEA-S-+Na+K＝[DHEA-S-][Na+]/[NaDHEA-S]固態(tài)由于DHEA-S固態(tài)的濃度是恒定的(即，物理狀態(tài)穩(wěn)定的二水合物)，該平衡式可表示為Ksp＝[DHEA-S-][Na+]基于此假設(shè)，將DHEA-S溶解度與總的鈉陽離子濃度的倒數(shù)作圖，所得直線的傾斜等于Ksp。這分別在圖5和圖6中顯示，分別為室溫和冷藏情況下的平衡。
基于相關(guān)系數(shù)，該模型與室溫和冷藏情況下的數(shù)據(jù)都能合理吻合，在該兩種情況下，平衡常數(shù)分別為2236和665mM2。為了使溶解度最大，氯化鈉的水平應(yīng)盡可能地低。噴霧用溶液的最小鹵化物離子含量應(yīng)為20mM或0.12％氯化鈉。
為了評估溶液的DHEA-S濃度，在使用時將噴霧器中的溫度下降10℃(即15℃)。平衡常數(shù)與絕對溫度倒數(shù)間的插值，即15℃時的Ksp為～1316mM2。各摩爾的DHEA-S向溶液提供1摩爾的鈉陽離子，因此Ksp＝[DHEA-S][Na+]＝[DHEA-S-][Na++DHEA-S-]
＝[DHEA-S-]2+[Na+][DHEA-S-]它用二次方程來計算[DHEA-S-]。Ksp為1316mM2的20mM Na+溶液是27.5mM的DHEA-S-或10.7mg/mL。因此，選用10mg/mL DHEA-S的0.12％氯化鈉溶液為好的候選制劑，用于進(jìn)一步的測試。此式子的估算值并沒有將由于水從噴霧器中蒸發(fā)而導(dǎo)致的濃度影響加以考慮。
含有10mg/mL DHEA-S的0.12％氯化鈉溶液的pH為4.7-5.6。雖然對于吸入制劑而言這是個可以接受的值，但是評估了使用20mM磷酸鹽緩沖液的效果。緩沖液和非緩沖液在室溫下的溶解度結(jié)果顯示在圖7中。
制劑中緩沖液的存在抑制了溶解度，尤其是氯化鈉水平低的時候。如圖8所示，緩沖溶液的溶解度數(shù)據(jù)落在與非緩沖溶液的平衡直線相同的直線上。使用緩沖液導(dǎo)致的溶解度下降是由額外的鈉陽離子含量所引起的。
使溶解度最大是一個重要的目標(biāo)，而用緩沖液配制制劑降低了溶解度。此外，Ishihora和Sugimoto〔1979，Drug.Dev.Indust.Pharm.，5(3)263-275)的研究并沒有顯示在中性pH時NaDHEA-S的穩(wěn)定性有顯著提高。
穩(wěn)定性研究。在0.12％氯化鈉中配制10mg/mL的DHEA-S制劑，用于短期的溶液穩(wěn)定性研究。將此溶液的等份試樣加到清晰的玻璃瓶中，分別在室溫(24-26℃)和40℃保存。每天檢測樣品中的DHEA-S含量、DHEA含量和外觀。在各時間點上，從各瓶中獲得雙份試樣并稀釋。圖9和10顯示了DHEA-S含量與此次研究時間長度的關(guān)系。
在加速條件下，溶液顯示較快的降解，并在保存兩天后出現(xiàn)渾濁。在室溫下保存的溶液較穩(wěn)定，在第3天出現(xiàn)些許沉淀。在第3天停止該研究。DHEA-S的分解伴隨著DHEA含量的增加，如圖10所示。
由于DHEA在水中是不溶的，在制劑中它只需要少量即可產(chǎn)生渾濁的溶液(加速保存)或結(jié)晶沉淀(室溫保存)。這就解釋了為什么對DHEA-S溶解度進(jìn)行的較早的肉眼評估嚴(yán)重低估了該化合物的溶解度少量的DHEA將導(dǎo)致試驗者得出已超出DHEA-S的溶解度限度的結(jié)論。雖然這并不是一個有商業(yè)前途的制劑，但是在臨床試驗中，在重新配制的那一天溶液應(yīng)當(dāng)是穩(wěn)定的。以下部分描述該制劑的氣溶膠特性。
噴霧研究。使用Pari ProNeb Ultra壓縮機(jī)和LC Plus噴霧器使DHEA-S霧化。圖11顯示了此試驗裝置的示意圖。將5毫升溶液加到噴霧器中，持續(xù)進(jìn)行霧化，直到輸出的物質(zhì)變得視覺上不明顯為止(4.5到5分鐘)。使用具有USP喉管的Califonia Instruments AS-6型6工作臺碰撞取樣器測試霧化溶液。在霧化一分鐘后，以30L/min操作該碰撞取樣器8秒鐘，收集樣品。在該試驗的所有其他時間里，以約33L/min將氣溶膠引入旁路收集器中，用流動相清洗收集裝置、噴霧器和碰撞取樣器，進(jìn)行HPLC分析。在噴霧器中使用5毫升DHEA-S的0.12％氯化鈉溶液。將此體積選擇為臨床研究中實際使用的上限。第一批5個試驗的結(jié)果列在下表中。
表14使用DHEA-S進(jìn)行噴霧研究的結(jié)果

*僅僅評估從噴霧器中倒出的液體，沒有稱重氣溶膠化前和之后的重量或清洗全部單元使噴霧器#1干燥約5分鐘，而使噴霧器#2干燥稍少于約4.5分鐘。在各種情況下，殘留在噴霧器中的液體體積大約是2毫升。從噴霧器中取出后，該液體最初是渾濁的，然后在3-5分鐘內(nèi)變?yōu)榍逦＜词惯^了該時間后，10mg/mL的溶液也顯示少量的粗糙沉積物?？雌饋硎窃撘后w中細(xì)空氣泡導(dǎo)致了最初的渾濁。DHEA-S顯示出了表面活性(即，促進(jìn)泡沫形成)，這使液體中的氣泡穩(wěn)定。10mg/mL中的沉積物表明，藥物的溶解度在噴霧器環(huán)境中超過在其他環(huán)境中的溶解度。因此，在較低的濃度下進(jìn)行表15所示的額外噴霧試驗。
表15顯示“劑量”線性比溶液濃度的額外數(shù)據(jù)。
表15使用DHEA-S進(jìn)行的額外噴霧試驗的結(jié)果

干燥噴霧器#3稍少于約4.5分鐘。將旁路收集器中的質(zhì)量與最初的溶液濃度作圖，如圖12所示。
半定量地，從0到7.5mg/mL顯示出良好的線性，之后所收集的量開始出現(xiàn)偏離。雖然冷卻減少的溶解度也包括在10mg/mL溶液的計算中，但是對藥物和氯化鈉含量的任何濃度影響都被忽略。因此，通過噴霧液體的過飽和來形成沉淀物是有可能的。圖12所示的數(shù)據(jù)和在噴霧后10mg/mL溶液中觀察到的一些顆粒表明，作為臨床制劑概念上的證據(jù)，最高的溶液濃度大約為7.5mg/mL。
將一氣溶膠樣品引入階式碰撞取樣器中，進(jìn)行粒度分析。沒有可檢測的與溶液濃度或噴霧器數(shù)量相關(guān)的粒度分布的傾向。所有噴霧試驗中所獲得的平均粒度分布顯示在圖13中。氣溶膠顆粒測量值與該噴霧器的公開/廣告結(jié)果一致(即，直徑中值～2微米)。
雖然體外試驗證明噴霧器制劑可送遞可呼吸的DHEA-S氣溶膠，但是該制劑是不穩(wěn)定的，而且需要4-5分鐘的連續(xù)霧化。因此，穩(wěn)定的DPI制劑具有顯著的優(yōu)點。DHEA-S二水合物被鑒定為用于DPI制劑的最穩(wěn)定的固態(tài)狀態(tài)。如果通過消除該無水形式在霧化前與水接觸而維持其穩(wěn)定性的話，無水形式也適合用噴霧器給予。
對于DHEA-S的臨床試驗，最佳的噴霧制劑是7.5mg/mL的DHEA-S的0.12％氯化鈉溶液。不需要緩沖系統(tǒng)制劑的pH也是可以接受的。通過將鈉陽離子濃度減到最小而使DHEA-S的水溶解度最大化。無緩沖液的最低的氯化鈉水平可實現(xiàn)此目標(biāo)。這是用20mM的Cl-獲得的最高的藥物濃度，它在霧化過程中將不會產(chǎn)生沉淀。這種制劑在室溫下至少能穩(wěn)定存在1天。
雖然已結(jié)合前述優(yōu)選實施例描述了本發(fā)明，但是應(yīng)理解，在不偏離本發(fā)明經(jīng)書的情況下可作出各種改動。
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權(quán)利要求
1.一種粉狀藥物組合物，它含有一種藥劑和藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可以接受的賦形劑，其中所述藥劑含有如化學(xué)式(I)所示的化合物，或其藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可以接受的鹽 其中R包括H或鹵素，位置5上的H是α或β構(gòu)型，或兩種構(gòu)型的消旋體混合物，R1包括多價的無機(jī)或有機(jī)二羧酸；其中所述的化合物是二水合物晶體，其中所述的干粉藥物組合物是可呼吸尺寸或可吸入尺寸的粒子。
2.如權(quán)利要求1所述的粉狀藥物組合物，其中所述的多價的無機(jī)酸是SO2OM、磷酸鹽或碳酸鹽，所述的多價的有機(jī)二羧酸是丁二酸鹽、馬來酸鹽或延胡索酸鹽；其中所述的M包括H、鈉、鉀、鎂、鋁、鋅、鈣、鋰、銨、胺、精氨酸、賴氨酸、組氨酸、三乙胺、乙醇胺、膽堿、三乙醇胺、普魯卡因、芐星青霉素、氨丁三醇、吡咯烷、哌嗪、二乙胺、硫脂 或磷脂 其中R2和R3可以相同或不同，包括直鏈或支鏈C1-14烷基或葡萄糖苷酸
3.如權(quán)利要求1所述的粉狀藥物組合物，其中所述的藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可以接受的賦形劑是選自以下的一種乳糖、人蛋白質(zhì)、牛血清白蛋白、明膠、免疫球蛋白、半乳糖、D-甘露糖、山梨糖、海藻糖、蔗糖、環(huán)糊精、蜜三糖、麥芽糖糊精、葡聚糖、谷氨酸單鈉、甘氨酸、丙氨酸、精氨酸或組氨酸、色氨酸、酪氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、甜菜堿、硫酸鎂、硬脂酸鎂、甘油、赤蘚糖醇、甘醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、山梨糖醇和甘露醇、丙二醇、聚乙二醇、普盧蘭尼克、表面活性劑及其混合物。
4.如權(quán)利要求3所述的粉狀藥物組合物，其中所述的藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可以接受的賦形劑是乳糖。
5.如權(quán)利要求1所述的粉狀藥物組合物，其中所述的藥劑包括一種如化學(xué)式(II)所示的化合物
6.如權(quán)利要求5所述的粉狀藥物組合物，其中所述的藥學(xué)上或獸醫(yī)學(xué)上可以接受的賦形劑是乳糖。
7.如權(quán)利要求1所述的粉狀藥物組合物，其中所述的粉狀藥物組合物采用噴霧器、干粉吸入器、吹藥器、或氣霧或噴霧發(fā)生器輸送。
8.如權(quán)利要求1所述的粉狀藥物組合物，其中所述的粉狀藥物組合物通過微粉化、霧化、超臨界流體研磨或噴射研磨制成。
9.如權(quán)利要求1所述的粉狀藥物組合物，其中所述粒子的80％以上的直徑約為0.1-100微米。
10.如權(quán)利要求9所述的粉狀藥物組合物，其中所述的粒子的80％以上約為0.1-50微米。
11.如權(quán)利要求10所述的粉狀藥物組合物，其中所述的粒子的80％以上約為0.1-10微米。
12.如權(quán)利要求11所述的粉狀藥物組合物，其中所述的粒子的90％以上約為0.1-5微米。
13.如權(quán)利要求1所述的粉狀藥物組合物，它還包含一種選自以下的治療藥劑腺苷A1受體的抑制劑、腺苷A2b受體的抑制劑、腺苷A3受體的抑制劑、腺苷A2a受體刺激劑、消炎劑、抗菌劑、抗膿血癥劑、腎活性保持劑或腎活性恢復(fù)劑、以及用于肺部血管收縮治療劑、發(fā)炎、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、障礙性呼吸、呼吸窘迫綜合癥、疼痛、囊性纖維變性(CF)、肺部高血壓、肺部血管收縮、肺氣腫、慢性阻塞性肺部疾病(COPD)、變態(tài)反應(yīng)性鼻炎(AR)、SARS和肺癌的治療的藥劑。
14.一種藥盒，它包含噴霧器或干粉吸入器和權(quán)利要求1所述的粉狀藥物組合物。
15.一種預(yù)防或治療哮喘的方法，它包括向需要這樣的預(yù)防或治療的患者施用治療有效量的權(quán)利要求1所述粉狀藥物組合物。
16.一種預(yù)防或治療慢性阻塞性肺部疾病的方法，它包括向需要這樣的預(yù)防或治療的患者施用治療有效量的權(quán)利要求1所述粉狀藥物組合物。
17.一種降低或耗盡患者組織內(nèi)腺苷的方法，它包括向需要這樣的治療的患者施用治療有效量的權(quán)利要求1所述粉狀藥物組合物，來降低或耗盡患者組織內(nèi)的腺苷水平。
18.如權(quán)利要求18所述的方法，其中所述的患者患有氣管炎、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、呼吸障礙、囊性纖維變性、慢性阻塞性肺部疾病、變態(tài)反應(yīng)性鼻炎、急性呼吸窘迫綜合癥、微生物感染、SARS、肺性高血壓、肺炎、支氣管炎、氣管阻塞或支氣管縮窄。
19.一種預(yù)防或治療與患者組織內(nèi)高水平腺苷相關(guān)的、或?qū)颊呓M織內(nèi)腺苷的敏感性相關(guān)的失調(diào)或狀況的方法，它包括向有此預(yù)防或治療需要的患者施用治療有效量的權(quán)利要求1所述的粉狀藥物組合物，來降低患者組織內(nèi)的腺苷水平，并預(yù)防或治療所述失調(diào)。
20.如權(quán)利要求19所述的方法，其中所述的失調(diào)或狀況是氣管炎、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、呼吸障礙、囊性纖維變性、慢性阻塞性肺部疾病、變態(tài)反應(yīng)性鼻炎、急性呼吸窘迫綜合癥、微生物感染、SARS、肺性高血壓、肺炎、支氣管炎、氣管阻塞或支氣管縮窄。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種粉制劑，它含有共價連接到硫酸鹽上的二水合脫氫表雄酮、其類似物或其鹽，以及藥學(xué)或獸醫(yī)學(xué)可接受的載體，并具有約為0.1－100微米的粒徑。該制劑能夠用于治療或預(yù)防哮喘、慢性阻塞性肺部疾病、肺炎、SARS和其他呼吸疾病或狀態(tài)。該制劑可以由噴射制粉方式制備，可以通過呼吸道或其他途徑輸送。該制劑置于一個裝置和一個醫(yī)療藥盒內(nèi)供應(yīng)。
文檔編號A61P9/12GK1658884SQ03813691
公開日2005年8月24日 申請日期2003年6月17日 優(yōu)先權(quán)日2002年6月17日
發(fā)明者S·A·倫納德, K·A·約翰遜 申請人:埃匹吉尼斯醫(yī)藥有限公司