專利名稱：一種新的西維來司鈉凍干制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，具有地說涉及一種新的西維來司鈉的凍干制劑。
背景技術(shù)：
西維來司鈉(sivelestat sodium hydrate)化學(xué)結(jié)構(gòu)式如(I) 為日本小野藥品工業(yè)公司(Ono)開發(fā)的全球首個治療伴有全身性炎癥反應(yīng)綜合征的急性肺損傷的藥物，商品名為Elaspol，于2002年4月11日在日本獲得生產(chǎn)許可。全身性炎癥反應(yīng)綜合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)大多是由嚴(yán)重感染、嚴(yán)重創(chuàng)傷及胰腺炎等誘發(fā)，能引起與重癥炎癥或局部炎癥無直接關(guān)系的肺、肝臟、腎臟等多臟器功能障礙，病情嚴(yán)重時還會造成死亡。在伴有SIRS的臟器功能障礙中，最難治療的就是急性肺損傷(ALI)。目前，尚未闡明急性肺損傷的發(fā)病機制，一般認(rèn)為，肺部炎癥細(xì)胞的聚集并釋放炎癥介質(zhì)，從而損傷肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞和肺泡上皮細(xì)胞，引發(fā)急性肺損傷。而其中中性粒細(xì)胞及其釋放的彈性蛋白酶(NE)起了重要作用。
西維來司鈉是彈性蛋白酶抑制劑，能選擇性地抑制中性粒細(xì)胞釋放NE，改善呼吸功能，縮短病人使用呼吸器的時間，降低安裝呼吸器引起的壓力及呼吸道感染癥的并發(fā)率。另外，本品還能使病人盡早脫離危險期，從重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)中撤出，降低了醫(yī)療成本。本品能改善SIRS及特發(fā)性肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)等引發(fā)的急性肺損傷。禮來公司正在進(jìn)行本品用于呼吸窘迫綜合征的II期臨床研究。
今年以來世界許多國家出現(xiàn)的非典型性肺炎，其臨床表現(xiàn)為呼吸窘迫并伴有大面積的肺纖維化，因此，西維來司鈉是針對性很強的藥物。我國目前正對該藥進(jìn)行治療“非典”的臨床試驗。
本品在日本上市的劑型為粉針劑，使用時將其溶解于生理鹽水。通常劑量為4.8mg/Kg/日(0.2mg/Kg/小時)，不間斷地靜脈滴注。用藥時間為14日以內(nèi)。
由于本品水溶性極小，在水中的溶解度不到0.4mg/ml，而患有急性肺部病癥的病人的病情嚴(yán)重，必須使用非腸道藥品，因此在在專利申請CN1341591A中，通過用氫氧化鈉或氫氧化鉀或磷酸三鈉調(diào)節(jié)pH值，使配制溶液的pH值達(dá)到一個特定值時本品完全溶解，再制成凍干劑。但氫氧化鈉及氫氧化鉀為強堿，考慮到西維來司鈉結(jié)構(gòu)中存在酯及酰胺，穩(wěn)定性研究表明，該化合物對堿很不穩(wěn)定，在大量的工業(yè)化生產(chǎn)時用強堿調(diào)PH，因堿用量大且攪拌難均勻形成局部過堿而影響到藥物的穩(wěn)定性。此外，磷酸三鈉作為PH調(diào)節(jié)劑時用量較大，按日本專利JP88/145，450用量為磷酸三鈉∶西維來司鈉＝1∶2.2，而該物質(zhì)尚未列入中華人民共和國藥典及任何地方標(biāo)準(zhǔn)，也未有其作為藥用輔料的報道，因而在注射劑中較大量使用時安全性存在隱患。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種新的西維來司鈉的凍干制劑，其采用一種或兩種符合中華人民共和國藥典標(biāo)準(zhǔn)的PH調(diào)節(jié)劑作為助溶劑，使該凍干制劑既有水溶性好、貯存穩(wěn)定的優(yōu)點，又有對血管刺激小，對人體安全性好的優(yōu)點，更適于臨床應(yīng)用。
在對化合物I的凍干制劑的研究中，本課題組驚奇地發(fā)現(xiàn)，采用助溶劑如硼砂、甘油磷酸鈉制成的凍干制劑不僅具有優(yōu)良的保存穩(wěn)定性，并且，再溶解時溶解迅速，溶液的澄明度好，更重要的是硼砂和甘油磷酸鈉均已列入中華人民共和國藥典二000年版，符合臨床要求，毒性小，對人體刺激性小，作為藥物制劑中的輔劑更適合臨床應(yīng)用，其具有更好的用藥安全性。
本發(fā)明的詳細(xì)內(nèi)容如下一種含西維來司鈉的凍干制劑，它含有活性化合物I、助溶劑和賦型劑，其中助溶劑選自硼砂、甘油磷酸鈉的一種或兩種。
其中溶劑優(yōu)選水；為進(jìn)一步減少凍干溶媒的體積，溶劑進(jìn)一步優(yōu)選水和有機醇的混合物，以及水和其他注射用溶媒的混合物。
其中有機醇優(yōu)選自乙醇、異丙醇、丙二醇、正丁醇、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚乙二醇6000；其他注射溶媒優(yōu)選二甲基亞砜。
本發(fā)明的凍干制劑，其中助溶劑的量相對于活性化合物I的量優(yōu)選為20-100％重量百分比。
本發(fā)明的凍干制劑，其中賦形劑優(yōu)選甘露醇和/或葡萄糖。特別優(yōu)選甘露醇。
本發(fā)明的凍干制劑，其凍干前溶液的pH值為7.2-8.5，其凍干后再溶解時的pH值為7.5-9.0。
本發(fā)明的凍干制劑凍干前的溶液優(yōu)選由活性化合物I、硼砂、乙醇、甘露醇和水組成。
本發(fā)明的凍干制劑凍干前的溶液還可優(yōu)選由活性化合物I、硼砂、二甲基亞砜、甘露醇和水組成。
本發(fā)明的凍干制劑凍干前的溶液還可優(yōu)選由活性化合物I、甘油磷酸鈉、乙醇、甘露醇和水組成。
本發(fā)明凍干制劑的制備方法如下將賦形劑溶于水中，向混合物中加入活性化合物I，在攪拌下加入助溶劑，可適當(dāng)微熱以使化合物完全溶解，然后按常規(guī)方法灌裝、凍干。
為了考察本發(fā)明凍干制劑的穩(wěn)定性，我們對本發(fā)明的凍干制劑進(jìn)行了強光(4500±500Lx)、高溫60℃、高濕(相對濕度90±5％)考察，放置十天后，含量均在97％以上，并且色澤無變化，pH值穩(wěn)定。以上實驗結(jié)果表明，采用本發(fā)明制備的PFA凍干制劑對強光、高熱、高濕均質(zhì)量穩(wěn)定，在包裝及貯存上無需特殊的要求。
本產(chǎn)品在臨床使用前將其溶解于注射用水或其它溶劑如生理鹽水、葡萄糖注射液中。
由于本發(fā)明采用了特殊的pH調(diào)節(jié)劑，在凍干后再溶解時溶液的pH穩(wěn)定，溶液澄明度好。
采用助溶劑如硼砂、甘油磷酸鈉制成的凍干制劑不僅具有優(yōu)良的保存穩(wěn)定性，并且，再溶解時溶解迅速，溶液的澄明度好，更重要的是硼砂和甘油磷酸鈉均已列入中華人民共和國藥典二000年版，毒性小，對人體刺激性小，作為藥物制劑的輔劑其安全性好，具堅實的法律基礎(chǔ)。
以下是本發(fā)明凍干制劑的藥理、毒理學(xué)數(shù)據(jù)1注射用西維來司鈉溶血試驗[摘要] 注射用西維來司鈉在試管內(nèi)終濃度達(dá)0.1mg/ml時，對兔紅血球無溶血作用。觀察注射用西維來司鈉對兔紅血球有無溶血作用。
規(guī)格 100mg/瓶。
溶媒0.9％氯化鈉注射液。
配制方法將100mg/瓶注射用西維來司鈉溶解于100ml生理鹽水中備用。
來源、種屬、品系、許可證新西蘭兔，南京安立默科技有限公司提供，生產(chǎn)許可證號SCXK(蘇)2002-0002。
取兔血10ml，加玻璃珠振搖去纖維蛋白，離心，棄去上清液，加生理鹽水洗滌二次，取沉淀紅血球加生理鹽水配制成2％紅血球懸液，置冰箱中備用。取試管7支，1-5管分別加入注射用西維來司鈉溶液0.1ml，0.2ml，0.3ml，0.4ml，0.5ml；各管分別加入生理鹽水2.4ml，2.3ml，2.2ml，2.1ml，2.0ml，2.5ml和蒸餾水2.5ml；每管加2％兔紅血球懸液2.5ml。搖勻，置37℃水浴中，分別于不同時間觀察溶血情況。
表1. 西維來司鈉注射用溶血試驗結(jié)果管號 1 2 34 5 6 7注射用西維來司鈉(ml) 0.10.20.30.40.5 0.0 0.0生理鹽水(ml) 2.42.32.22.12.0 2.5 0.0蒸餾水(ml)0.00.00.00.00.0 0.0 2.52％紅血球(ml) 2.52.52.52.52.5 2.5 2.537℃ 水 浴 保 溫溶 0.5h - - - - - - +血 1.0h - - - - - - +情 2.0h - - - - - - +況 3.0h - - - - - - +注-不溶血、+溶血判斷標(biāo)準(zhǔn)如果溶液變清并染有紅色，即表示溶血。凡第三管或第三管以前的各管在1小時出現(xiàn)溶血，部分溶血或出現(xiàn)凝集反應(yīng)的制劑，不宜作靜脈注射用。
肉眼觀第7管呈全溶血，1-6管無溶血，鏡下觀1-6管未見紅細(xì)胞凝集。
注射用西維來司鈉在試管里終濃度(第5管)達(dá)0.1mg/ml時，觀察三小時對兔紅血球無溶血作用。2注射用西維來司鈉對兔耳靜脈刺激性試驗[摘要] 注射用西維來司鈉經(jīng)兔耳靜脈注射10ml/kg(1mg/ml)，每日1次，連續(xù)14天，局部血管未見明顯刺激性。觀察注射用西維來司鈉經(jīng)靜脈滴注，對局部血管的刺激反應(yīng)，為臨床用藥提供依據(jù)。
名稱注射用西維來司鈉。
規(guī)格 100mg/瓶。
溶媒 0.9％氯化鈉注射液。
配制方法將100mg/瓶注射用西維來司鈉溶解于100ml生理鹽水中備用。
來源、種屬、品系、許可證新西蘭兔，南京安立默科技有限公司提供，生產(chǎn)許可證號SCXK(蘇)2001-0007。
體重2.0-2.5kg。
性別雌雄各半。
動物數(shù)4只(其中對照組右耳，給藥組左耳)。
劑量設(shè)置注射用西維來司鈉8 10ml/kg(1mg/ml)和對照組0.9％氯化鈉注射液10ml/kg。
每只動物接受容量靜脈滴注均給10ml/kg，按體重給藥。
取新西蘭兔4只，雌雄各半。右耳給0.9％氯化鈉注射液，左耳給注射用西維來司鈉，靜脈滴注速度為6ml/分鐘，每日一次，連續(xù)給藥14天，試驗中觀察刺激反應(yīng)，末次給藥后24小時取材做組織病理切片檢查。
肉眼主要觀察有無紅腫、出血、壞死等，以鏡檢為主。
靜脈滴注注射用西維來司鈉 10ml/kg(1mg/ml)與對照組0.9％氯化鈉注射液10ml/kg，肉眼觀察注射部位未見紅腫、血管異常等刺激反應(yīng)，見表21.2；在距注射點1.3cm、2.6cm、4.0cm處分別取材，鏡檢所見對照組與給藥組各取材點耳緣靜脈管壁完整，血管無明顯擴(kuò)張，內(nèi)皮細(xì)胞清晰、無腫脹、壞死，管壁及管周無明顯炎細(xì)胞浸潤，管腔內(nèi)無明顯血栓形成等病變。
注射用西維來司鈉10ml/kg(1mg/ml)經(jīng)兔耳靜脈給藥后，每日一次，連續(xù)14天，與對照組相比，局部血管未見明顯刺激性。
表2 注射用西維來司鈉對兔耳緣靜脈組織病理學(xué)觀察


注部位“近”----距進(jìn)針點1.3cm；“中“----距進(jìn)針點2.6cm；“遠(yuǎn)“----距進(jìn)針點4.0cm3注射用西維來司鈉過敏性試驗[摘要] 注射用西維來司鈉給豚鼠以0.5ml/只腹腔注射致敏，1.0ml/只靜脈注射攻擊的過敏試驗為陰性。
觀察注射用西維來司鈉經(jīng)靜脈注射的過敏反應(yīng)，為臨床安全用藥提供依據(jù)。
名稱注射用西維來司鈉。
批號 021103。
規(guī)格 100mg/瓶。
溶媒 0.9％氯化鈉注射液。
配制方法將100mg/瓶注射用西維來司鈉溶解于100ml生理鹽水中備用。
陽性對照10％小牛血清，由省疾病預(yù)防控制中心提供，批號030315。
來源、種屬、品系、許可證豚鼠18只，南京市江寧青龍山動物繁殖場，生產(chǎn)許可證號SCXK(蘇)2001-0010。
體重250-300g。
性別雌雄各半。
分組情況給藥組、陰性對照組(0.9％氯化鈉注射液)、陽性對照組(10％小牛血清)。
每組動物數(shù)6只。
致敏、攻擊劑量致敏劑量為0.5ml(1mg/ml)/只，攻擊劑量為1.0ml(1mg/ml)/只。
致敏、攻擊次數(shù)致敏三次，隔日一次；攻擊時間，分別于首次致敏后第14天和第21天。
給藥部位致敏為豚鼠腹腔注射，攻擊為豚鼠后肢靜脈注射。給藥組6只豚鼠，分別腹腔注射(0.5ml/只)注射用西維來司鈉致敏，隔日一次，連續(xù)三次，于首次注射后第14天和第21天各取3只豚鼠靜脈注射(1.0ml/只)進(jìn)行攻擊，觀察有無過敏反應(yīng)。
陰性對照組和陽性對照組分別給予0.9％氯化鈉注射液和10％小牛血清，方法同上。
豚鼠過敏反應(yīng)級數(shù)反應(yīng)級數(shù) 反 應(yīng) 癥 狀0 無明顯反應(yīng)1 只有輕微抓鼻、顫抖或豎毛2 有幾次咳嗽、有抓鼻、顫抖或豎毛3 多次或連續(xù)咳嗽、伴有呼吸困難或痙攣、抽搐等4 痙攣、抽搐、大小便失禁、休克死亡[觀察指標(biāo)] 按表計算過敏反應(yīng)級數(shù)；反應(yīng)級數(shù)達(dá)2級以上(包括2級)時，該試品為不合格。
給藥后15分鐘。
注射用西維來司鈉組及陰性對照組均有個別動物出現(xiàn)輕微抓鼻，其他未見過敏反應(yīng)，陽性對照組(10％小牛血清)動物均出現(xiàn)強陽性反應(yīng)，動物全部死亡。
表3 注射用西維來司鈉對豚鼠過敏試驗結(jié)果觀察時間 藥物 動物數(shù) 反應(yīng)級數(shù)結(jié)果(天) (只) 01234反應(yīng)動物數(shù)(n)注射用西維來司鈉 3 30000 陰性14 陰性對照 3 30000 陰性小牛血清 3 00003 陽性注射用西維來司鈉 3 21000 陰性21 陰性對照 3 30000 陰性小牛血清 3 00003 陽性[結(jié)論]本發(fā)明的注射用西維來司鈉給豚鼠以0.5ml/只腹腔注射致敏，1.0ml/只靜脈注射攻擊的過敏試驗為陰性。
以上藥理、毒理學(xué)試驗結(jié)果顯示，本發(fā)明的凍干制劑不會引起溶血、并且刺激性小，低劑量不會引起過敏反應(yīng)，因此在臨床應(yīng)用中具有安全性。
以下是本發(fā)明的實施例，但本發(fā)明并不僅僅限于下列實施例。
實施例2
稱取西維來司鈉0.5g、甘露醇100mg、硼砂0.3g溶于10ml蒸餾水中，向混合溶液中滴加乙醇至澄清，加水至15ml，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，此時pH為8.05。按常規(guī)方法灌裝、凍干。
實施例3稱取西維來司鈉0.5g、甘露醇100mg、硼砂0.3g溶于10ml蒸餾水中，向混合溶液中滴加聚乙二醇300至澄清，加水至15ml，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，此時pH為7.94。按常規(guī)方法灌裝、凍干。
實施例4稱取西維來司鈉0.5g、甘露醇100mg、硼砂0.3g溶于10ml蒸餾水中，向混合溶液中滴加聚乙二醇400至澄清，加水至15ml，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，此時pH為8.15。按常規(guī)方法灌裝、凍干。
實施例5稱取西維來司鈉0.5g、甘露醇100mg、硼砂0.3g溶于10ml蒸餾水中，向混合溶液中滴加丙二醇至澄清，加水至15ml，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，此時pH為7.36。按常規(guī)方法灌裝、凍干。
實施例6稱取西維來司鈉0.5g、甘露醇100mg、硼砂0.3g溶于10ml蒸餾水中，向混合溶液中滴加二甲亞砜至澄清，加水至15ml，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，此時pH為8.22。按常規(guī)方法灌裝、凍干。
實施例7稱取西維來司鈉0.5g、葡萄糖100mg、硼砂0.3g溶于10ml蒸餾水中，向混合溶液中滴加乙醇至澄清，加水至15ml，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，此時pH為8.47。按常規(guī)方法灌裝、凍干。
實施例8稱取西維來司鈉0.5g、葡萄糖100mg、硼砂0.3g、聚乙二醇6000 0.35g溶于15ml蒸餾水中，稍加熱冷卻后得澄清溶液，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，此時pH為7.85。按常規(guī)方法灌裝、凍干。
權(quán)利要求
1.含式(I)化合物的凍干制劑，含有活性化合物I、助溶劑和賦型劑，其特征是其中助溶劑選自硼砂和/或甘油磷酸鈉。
2.權(quán)利要求1的凍干制劑，其中溶劑是水。
3.權(quán)利要求1的凍干制劑，其中溶劑是水和有機醇的混合物，其中有機醇選自乙醇、異丙醇、丙二醇、正丁醇、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚乙二醇6000的一種或幾種。
4.權(quán)利要求1的凍干制劑，其中溶劑是水和注射用溶媒的混合物。
5.權(quán)利要求3的凍干制劑，其中注射用溶酶為二甲基亞砜。
6.權(quán)利要求1的凍干制劑，其中助溶劑的量相對于化合物I的量為20-100％重量百分比。
7.權(quán)利要求1的凍干制劑，其中賦形劑是甘露醇和/或葡萄糖。
8.權(quán)利要求1的凍干制劑，其凍干前溶液的pH值為7.2-8.5，其凍干后再溶解時的pH值為7.5-9.0。
9.權(quán)利要求1的凍干制劑，其凍干前的溶液由活性化合物I、硼砂、乙醇、甘露醇和水組成。
10.權(quán)利要求1的凍干制劑，其凍干前的溶液由活性化合物I、甘油磷酸鈉、乙醇、甘露醇和水組成。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，公開了一種新的西維來司鈉的凍干制劑，其通過在配方中加入硼砂和/或甘油磷酸鈉助溶劑，增加西維來司鈉的水溶性及穩(wěn)定性，同時，該助溶劑對人體血管刺激性小，更具安全性，適合臨床應(yīng)用。
文檔編號A61P29/00GK1456152SQ03131629
公開日2003年11月19日 申請日期2003年6月3日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月3日
發(fā)明者蔡惠明 申請人:蔡惠明