專利名稱：芒果葉總苷止咳中藥制劑及其生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有止咳、化痰、平喘、抗炎作用的中藥制劑，特別是以芒果葉或扁桃葉為原料提取其有效成分作為止咳藥的中藥制劑及其生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
芒果和扁桃是味道鮮美、營養(yǎng)豐富的熱帶水果，芒果為漆樹科植物Mangiferae L.；扁桃為漆樹科植物Mangiferae persiciformis C.Y.Wu et T.L.Ming。隨著人們生活的普遍提高，兩種果樹栽種的面積越來越多。尤其是芒果，二十多年來，我國的廣西、廣東、海南、云南等省區(qū)不斷引進(jìn)和培育新品種，使我國成為了芒果生產(chǎn)大國。廣西的芒果樹種植面積就超過10萬公頃，扁桃樹種植面積5萬公頃，因此芒果葉和扁桃葉的數(shù)量也很多，每年修枝和果樹淘汰所產(chǎn)生的葉子有上千萬噸。以往果農(nóng)對芒果葉和扁桃葉的處理一般是將它們當(dāng)作柴火燒掉或者任其在果園中腐爛，造成了資源的極大浪費(fèi)。芒果葉和扁桃葉性味相近，是很有醫(yī)藥價值的中藥材；化學(xué)成分方面，都含有芒果苷、異芒果苷、高芒果苷等成分。據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)報道，芒果葉性味酸、甘、涼，平，具有行氣疏滯，去痧積、清熱解毒、消腫止痛、退濕的功能，用于感冒發(fā)燒，咽喉腫痛、風(fēng)濕等癥，從芒果葉和扁桃葉中提取的芒果苷具有抗菌、抗病毒、祛痰、鎮(zhèn)咳等作用?！陡＝ㄖ嗅t(yī)藥》2001，32(2)刊登的“復(fù)方芒果葉的薄層層析及抗菌試驗(yàn)”提到，將芒果葉提取物進(jìn)行體外抗菌實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，芒果葉對金葡25023菌、金葡京耐菌、白葡球菌、奈氏球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、福氏桿菌、傷寒桿菌均有較強(qiáng)抗菌作用。廣西民族醫(yī)藥研究所余勝民、鐘鳴在《中國中醫(yī)藥科技》1999，6(3)發(fā)表的“芒果苷藥理研究進(jìn)展”綜述了芒果苷的一些藥用機(jī)理，指出了芒果苷(mangiferin)是一種四羥基吡酮的碳糖苷，屬雙苯吡酮類化合物，現(xiàn)代藥理和臨床研究證明，芒果苷具有以下多方面生理活性和藥理作用。1、對中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用，芒果苷具有明顯的中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮作用。50-100mg/kg劑量的芒果苷腹腔注射(i.p)可使所有受試動物出現(xiàn)動作震顫，豎毛，強(qiáng)迫性撕打和自主活動增加等癥狀。說明芒果苷可能是中腦邊緣系統(tǒng)D2受體的激動劑。2、對心血管系統(tǒng)的作用，1-2mg劑量的芒果苷對正常或功能低下的離體Ringer’s液留灌注蛙心均有短暫，確切的增強(qiáng)心肌收縮力的作用，凡該作用不被心得安所阻斷，認(rèn)為它可能是一種心臟直接刺激劑。3、保肝利膽作用，采用模似高原急性低氧造成大鼠肝損傷的方法，觀察芒果苷對肝臟的保護(hù)作用，在大鼠肝溶酶體體外溫孵實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，芒果苷有穩(wěn)定溶酶體膜的作用，且對溶酶體酸性磷酶活力有直接抑制作用。4、抗脂質(zhì)過氧化作用，芒果苷能快速徹底地清除[-dipheny]-2-picrylhydrazyl(DPPH)，并抑制大鼠肝臟微粒體中由煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯還原酶(NADPH)或非酶類因子抗壞血酸、Fenton’s提示芒果苷具有抗氧化活力，可能由于與它能專一清除類脂化合物過氧化反應(yīng)起動階段的自由基有關(guān)。5、抗病毒作用，芒果樹葉提取的芒果苷進(jìn)行抗I型單純皰疹病毒(HSV-I)作用的實(shí)驗(yàn)觀察。檢測其抗病毒藥效時，采用原代人胚肌皮單層細(xì)胞，病毒對照組與給藥組平行操作25-250ug/ml藥物直接或同時作用病毒以及先感染病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制。芒果苷抑制50％空斑形成有效濃度(ECso)為111.7ug/ml。藥物加入和去除試驗(yàn)結(jié)果提示芒果苷抗HSV-B作用的機(jī)制可能是抑制病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的晚期。6、免疫、抗炎、鎮(zhèn)痛作用，一定劑量芒果苷提高紅細(xì)胞補(bǔ)體受體(CRI)活性，可能與抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)有關(guān)。有人提出在應(yīng)用體外誘生抗體方法研究中藥免疫調(diào)節(jié)作用機(jī)理的實(shí)驗(yàn)中，證明芒果苷(0.1ug/ml)有免疫抑制作用而不影響細(xì)胞活力。曾有藥理實(shí)驗(yàn)證明芒果苷治療慢性支氣管炎有較好的療效，療程20d，有效率可達(dá)82.4％。另外，公開文獻(xiàn)也分別報道了芒果苷的治病作用，如“芒果苷對II型單純皰疹病毒體外復(fù)制的抑制作用”《中國藥理學(xué)報》1993，14(5)，“芒果苷對大鼠血液過氧化脂質(zhì)代謝的影響”《中國中醫(yī)藥科技》1999，6(2)，“芒果苷對肝癌大鼠血清上皮鈣粘蛋白和癌胚抗原以及單胺氧化酶的影響”《醫(yī)學(xué)綜述》2001，7(12)，“芒果苷對肝癌可溶性E-上皮鈣黏蛋白及癌胚抗原和單胺氧化酶的影響”《中華消化雜志》2001，21(8).“脂質(zhì)過氧化大鼠腦組織超微結(jié)構(gòu)改變及芒果苷對腦組織的保護(hù)作用”《廣西科學(xué)》2000，7(2)?！懊⒐諏Ω伟┘?xì)胞增殖的抑制和凋亡的誘導(dǎo)”《中華消化雜志》2002，22(6)，觀察芒果苷對人肝癌細(xì)胞株BEL-7404的毒性和誘導(dǎo)凋亡作用及對細(xì)胞周期的陰滯作用，探討芒果苷作為腫瘤化學(xué)預(yù)防藥物的可能性，用MTT法觀察芒果苷對人肝癌細(xì)胞株增殖的抑制作用。用光學(xué)顯微鏡觀察芒果苷對細(xì)胞的毒性作用。以流式細(xì)胞儀檢測芒果苷對細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用和對細(xì)胞周期的干預(yù)作用。結(jié)果表明，不同濃度的芒果苷在不同時間對肝癌細(xì)胞株均有毒性作用，并隨濃度升高和作用時間的延長而毒性作用增強(qiáng)，凋亡也隨之增加，芒果苷阻滯肝癌細(xì)胞周期于G2/M期，20μmol/L芒果苷作用24h后上述效果開始明顯。證明芒果苷對肝癌細(xì)胞株有明顯的毒性作用，能誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡和阻滯細(xì)胞周期于G2/M期具有潛在藥用價值。
從上述檢索到的文獻(xiàn)了解到，由于芒果苷對人體的一些疾病有較好的治療作用，所以芒果葉和扁桃葉已經(jīng)得到越來越多的應(yīng)用。本申請人廣西中醫(yī)學(xué)院制藥廠生產(chǎn)了芒果止咳片，含有芒果葉提取物、撲爾敏、魚腥草素鈉(人工合成品)，是中西藥復(fù)方制劑。具有宣肺化痰，止咳平喘的功效，主要用于咳嗽、氣喘、多痰等癥。有關(guān)芒果止咳片的研究在科技文獻(xiàn)中也發(fā)表過一些文章，如“芒果止咳片的藥效學(xué)研究(I)”，鄭作文、鄧家剛等，廣西中醫(yī)學(xué)院藥理教研室，《中醫(yī)藥學(xué)刊》.2002，20(3)，介紹芒果止咳片能明顯延長豚鼠Ach引喘的潛伏期和對抗Ach所致氣管平滑肌的收縮，對小鼠二氧化硫引咳能明顯延長咳嗽潛伏期，并能減少刺激貓喉上神經(jīng)引起的咳嗽粢九，能明顯增加小鼠氣管的酚紅排泌量，并有一定的抗炎癥滲出及平喘，止咳，化痰作用。“芒果止咳片治療風(fēng)熱犯肺型咳嗽的療效觀察”鄧家剛、鄭作文，廣西中醫(yī)學(xué)院，《遼寧中醫(yī)雜志》2000，27(9)，為觀察芒果止咳片對風(fēng)熱犯肺型咳嗽的臨床治療效果，用芒果止咳片治療風(fēng)熱犯肺咳嗽300例，總有效率93.3％，隨機(jī)設(shè)銀黃片對照組100例，總有效率91.0％，兩組療效比較無顯著性差異，結(jié)果表明，芒果止咳片用于治療風(fēng)熱犯肺型咳嗽療效確切。但目前有關(guān)從芒果葉和扁桃葉中提取芒果苷的公開文獻(xiàn)不多，而且基本是論述芒果苷用于抗腫瘤的藥理作用方面的文章，未提及芒果苷中包含的所有成分。
技術(shù)內(nèi)容本發(fā)明人經(jīng)過幾年的研究和試驗(yàn)，對從芒果葉或扁桃葉中提取芒果苷的各種方法及芒果苷治療一些疾病的機(jī)理進(jìn)行了深入的探索，特別是對芒果苷在止咳、化痰、平喘、抗炎的作用進(jìn)行了藥效學(xué)、藥理學(xué)的試驗(yàn)，取得了重要的成果。
本發(fā)明的技術(shù)方案包括芒果葉總苷的提取和芒果葉總苷在止咳、化痰、平喘、抗炎的應(yīng)用。所述芒果葉總苷是芒果葉和扁桃葉中具有止咳、化痰、平喘、抗炎作用的成分，在干葉中的含量達(dá)2％以上。芒果葉總苷包括芒果苷、異芒果苷、高芒果苷等幾種成分，芒果葉總苷中，以芒果苷的含量最高。芒果苷和異芒果苷是同分異構(gòu)體，高芒果苷是芒果苷的同核衍生物，結(jié)構(gòu)上，在苷元母核上多一個“-CH3”。藥理實(shí)驗(yàn)證明，這幾種苷均具有止咳、化痰、平喘、抗炎作用，而且，當(dāng)它們混合使用時，具有一定的協(xié)同增效作用，即作用強(qiáng)度比單獨(dú)使用的效果總和要好。
本發(fā)明的止咳中藥制劑包含有芒果葉總苷和輔料，其成分和重量百分含量如下(干物質(zhì)計)芒果葉總苷 0.05-100％輔料0-99.95％本發(fā)明所述的止咳中藥制劑，生產(chǎn)工藝采用慣常的、通用的制藥工藝完成，工藝包括從芒果葉或扁桃葉中提取芒果葉總苷、芒果葉總苷與輔料混合、壓制或調(diào)配成產(chǎn)品等幾個過程。
從芒果葉和扁桃葉中提取芒果葉總苷的方法包括芒果葉或扁桃葉的粉碎、乙醇回流提取、非極性溶劑萃取、脫色、過濾、結(jié)晶等工序。
所述的乙醇回流提取，用50-95％(體積濃度)以上的乙醇水溶液回流提取2～3次，每次加相當(dāng)于芒果葉(或扁桃葉)重量10倍的乙醇水溶液，每次回流1～1.5小時。
所述的非極性溶劑萃取，是用石油醚、苯、乙醚、溶劑汽油、乙酸乙脂、乙酸丁脂等非極性溶劑萃取除去葉綠素等脂溶性成分的過程。
所述的脫色，在溶液中加入活性碳、硅藻土等進(jìn)行，或者用大孔樹脂進(jìn)行脫色。
所述的結(jié)晶，是指去除溶液中的乙醇和大部分水后，冷卻，將芒果葉總苷等成分析出的過程。
采用上述提取方法得到的芒果葉總苷是一種具有止咳、化痰、平喘、抗炎作用的芒果苷及其同分異構(gòu)體形成的混合物，可以制成止咳中藥制劑，劑型采用口服藥物劑型，一般有片劑、顆粒劑、膠囊、口服液、口含片等，各種劑型所需的輔料采用符合國家或國際標(biāo)準(zhǔn)的起賦形、賦香、防腐、填充等作用的制劑，如制備口服制劑時，選用的輔料可以是淀粉、羧甲基纖維素、環(huán)糊精、蔗糖、硬脂酸鎂、聚乙二醇等常規(guī)填充劑，可采用藥劑學(xué)常規(guī)制備工藝；在制備注射制劑時，可以采用加入脂質(zhì)體、聚乙二醇、藥用酒精、去氧膽酸、膽固醇等常規(guī)填充劑，可采用藥劑學(xué)常規(guī)制備工藝。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步是1、提供了芒果葉總苷的提取方法，得到了芒果苷和異芒果苷、高芒果苷的混合物，治療效果比芒果苷單一作用的好。芒果苷60-80％，異芒果苷3-9％，高芒果苷0.5-1.8％2、芒果葉總苷是芒果葉和扁桃葉止咳、化痰、平喘、抗炎的有效成分。用芒果葉總苷生產(chǎn)止咳中藥，具有有效成分含量高，劑量小等特點(diǎn)。
3、芒果止咳片使用芒果葉提取物，本發(fā)明使用芒果葉或扁桃葉的有效部位。
4、芒果止咳片是中西藥復(fù)方制劑，本發(fā)明是純中藥制劑。
具體實(shí)施例方式
一、芒果葉總苷提取實(shí)施例一干芒果葉，切成碎片或加工成粗粉，以95％的乙醇回流提取2次，每次加相當(dāng)于芒果葉重量10倍的乙醇，每次回流1.5小時。合并提取液，回收乙醇，用熱水化開，用石油醚萃取除去葉綠素等脂溶性成分，過濾，濾渣即為芒果葉總苷。芒果葉總苷的含量達(dá)50％以上。
實(shí)施例二鮮芒果葉，以75％的乙醇水溶液回流提取3次，每次加相當(dāng)于芒果葉重量8倍的乙醇水溶液，每次回流1小時。合并提取液，回收乙醇，用乙酸丁脂萃取除去葉綠素等脂溶性成分，過濾，濾渣即為芒果葉總苷。芒果葉總苷的含量達(dá)50％以上。
實(shí)施例三干扁桃葉，以50％的乙醇水溶液回流提取3次，每次加相當(dāng)于扁桃葉重量10倍的乙醇水溶液，每次回流1.5小時。合并提取液，回收乙醇，用石油醚萃取除去葉綠素等脂溶性成分，過濾。濾渣再用50％的乙醇水溶液回流溶解，溶解液用活性碳脫色，過濾，濾液回收乙醇，去除大部分水，結(jié)晶析出的即為芒果葉總苷。芒果葉總苷的含量達(dá)70％以上。
實(shí)施例四實(shí)施實(shí)例一所得的芒果葉總苷，用50％的乙醇水溶液回流溶解，上大孔樹脂D301脫色，脫色液回收乙醇，去除大部分水，結(jié)晶析出的即為芒果葉總苷。芒果葉總苷的含量達(dá)70％以上。
二、止咳中藥制劑生產(chǎn)實(shí)例實(shí)施例一按提取實(shí)例一方法所得芒果葉總苷，加入2倍量的白糖細(xì)粉，用70％酒精濕潤，制成顆粒，分裝，即得芒果葉總苷顆粒劑。
實(shí)施例二按提取實(shí)例三方法所得芒果葉總苷，加入適量淀粉和滑石粉，用70％酒精濕潤，制成顆粒，用壓片機(jī)壓片，即得芒果葉總苷片。
實(shí)施例三按提取實(shí)例三方法所得芒果葉總苷，加入適量結(jié)晶山梨醇，制成口含片。
實(shí)施例四按提取實(shí)例二方法所得芒果葉總苷，加入適量羧甲基纖維素、環(huán)糊精，得到芒果葉總苷膠囊。
藥理藥效學(xué)及臨床試驗(yàn)情況一、藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明生產(chǎn)的片劑(芒果葉總苷片)，經(jīng)廣西中醫(yī)學(xué)院藥理教研室進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果表明，芒果葉總苷片口服給藥，12.6g生藥/kg和6.3g生藥/kg，可顯著延長小鼠氨水致咳的潛伏期，減少咳嗽次數(shù)，促進(jìn)氣管酚紅排泌量，顯著延長由0.4％的磷酸組織胺和2％氯化膽堿(1∶1)的混合引起豚鼠出現(xiàn)IV哮喘反應(yīng)的潛伏期，抑制巴豆油引起小鼠耳廓腫脹，提示芒果葉總昔片具有鎮(zhèn)咳、化痰、平喘、抗炎作用。
二、毒理實(shí)驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明生產(chǎn)的片劑(芒果葉總苷片)，經(jīng)廣西中醫(yī)學(xué)院藥理教研室進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)，結(jié)果表明，芒果葉總苷片口服給藥的LD50為426g生藥/kg體重，95％可信限為468-387g生藥/kg體重。結(jié)果提示，按正常日劑量(36g生藥)，不會出現(xiàn)毒性反應(yīng)。
三、臨床報告病例1陳某，女，28歲。自述2天前出現(xiàn)咳嗽，咯痰白、粘，伴咽痛口干，惡寒發(fā)熱；無氣喘、胸悶、心悸等。檢查體溫38.2℃，咽充血(+)，兩側(cè)扁桃體I°腫大，無膿性分泌物，心肺檢查無異常。舌質(zhì)紅，舌苔薄黃，脈浮數(shù)。中醫(yī)診斷咳嗽(風(fēng)熱犯肺證)。西醫(yī)診斷急性上呼吸道感染。給予芒果葉總苷片治療，每次3片，每日3次，連用7天。服用3天體溫下降至37.6℃，咳嗽、咽痛、口干減輕。至第7天，發(fā)熱消退，體溫36.7℃，咳嗽、咳痰、咽痛等癥消失。療效評定痊愈。
病例2 黃某，男，37歲。自述3天前出現(xiàn)咳嗽，咯黃色粘痰，量較多，伴口干，乏力，納差。檢查體溫37.2℃，兩肺可聞少許散在性干羅音，舌質(zhì)紅，舌苔薄黃，脈浮數(shù)。中醫(yī)診斷咳嗽(風(fēng)熱犯肺證)。西醫(yī)診斷急性支氣管炎。給予芒果葉總昔片治療，每次3片，每日3次，連用7天。服用3天后咳嗽、咯痰減輕，口干消失。至第7天，咳嗽、咯痰、乏力、納差等癥消失，兩側(cè)肺部聽診未發(fā)現(xiàn)異常。療效評定痊愈。
權(quán)利要求
1.一種芒果葉總苷止咳中藥制劑，其特征在于它包含有芒果葉總苷和輔料，其成分和重量百分含量如下芒果葉總苷0.05-100％輔料 0-99.95％所述的芒果葉總苷是指從漆樹科植物芒果Mangiferae L.或漆樹科植物扁桃Mangiferaepersiciformis C.Y.Wu et T.L.Ming的鮮葉或干葉中提取的，主要由芒果苷、異芒果苷及高芒果苷等組成的苷類混合物；所述的輔料是從國際或國家藥品監(jiān)督管理部門認(rèn)可的起賦形、賦香、防腐、填充等作用的藥用輔料中選用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芒果葉總苷止咳中藥制劑，生產(chǎn)工藝采用慣常的、通用的制藥工藝完成，工藝包括從芒果葉或扁桃葉中提取芒果葉總苷、芒果葉總苷與輔料混合、壓制或調(diào)配成產(chǎn)品等幾個過程。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芒果葉總苷止咳中藥制劑，其劑型為口服藥物劑型的片劑、顆粒劑、膠囊、口服液、口含片。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芒果葉總苷止咳中藥制劑，其特征在于從芒果葉和扁桃葉中提取芒果葉總苷的方法包括芒果葉或扁桃葉的粉碎、乙醇回流提取、非極性溶劑萃取、脫色、過濾、結(jié)晶等工序。
5.根據(jù)權(quán)利要求1和4所述的芒果葉總苷止咳中藥制劑，其特征在于所述的乙醇回流提取，是用50-95％(體積濃度)以上的乙醇水溶液回流提取2～3次，每次加相當(dāng)于芒果葉(或扁桃葉)重量10倍的乙醇水溶液，每次回流1～1.5小時。
6.根據(jù)權(quán)利要求1和4所述的芒果葉總苷止咳中藥制劑，其特征在于所述的非極性溶劑萃取，是用石油醚、苯、乙醚、溶劑汽油、乙酸乙脂、乙酸丁脂等非極性溶劑萃取除去葉綠素等脂溶性成分的過程。
7.根據(jù)權(quán)利要求1和4所述的芒果葉總苷止咳中藥制劑，其特征在于所述的脫色，在溶液中加入活性碳、硅藻土等進(jìn)行，或者用大孔樹脂進(jìn)行脫色。
8.根據(jù)權(quán)利要求1和4所述的芒果葉總苷止咳中藥制劑，其特征在于所述的結(jié)晶，是指去除溶液中的乙醇和大部分水后，冷卻，芒果葉總苷等成分析出的過程。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有止咳、化痰、平喘、抗炎作用的中藥制劑，特別是以芒果葉或扁桃葉為原料提取其有效成分作為止咳藥的中藥制劑及其生產(chǎn)方法，從芒果葉和扁桃葉中提取芒果葉總苷的方法包括芒果葉或扁桃葉的粉碎、乙醇回流提取、非極性溶劑萃取、脫色、過濾、結(jié)晶等工序，用芒果葉總苷生產(chǎn)止咳中藥，不添加或只添加適量的輔料，制備成止咳化痰作用的口服制劑，具有有效成分含量高，服用劑量小等特點(diǎn)。
文檔編號A61P11/00GK1488355SQ03125270
公開日2004年4月14日 申請日期2003年8月12日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月12日
發(fā)明者黃海濱, 岑家銘, 鄧家剛, 王乃平, 李學(xué)堅 申請人:廣西中醫(yī)學(xué)院制藥廠