專利名稱：用于治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂的孕烷類(lèi)固醇的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及與類(lèi)固醇有關(guān)和/或由類(lèi)固醇引發(fā)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)功能紊亂的治療、緩解和預(yù)防，特別涉及用于該目的的特定的類(lèi)固醇化合物和將它們用于生產(chǎn)醫(yī)藥品的應(yīng)用，以及治療方法。
有關(guān)申請(qǐng)本申請(qǐng)要求于2001年12月27日提交的SE 0104423-9的優(yōu)先權(quán)，其內(nèi)容引入本文作為參考。
背景技術(shù)：
已知為孕烷醇酮化合物的孕烯醇酮、孕酮、脫氧皮質(zhì)酮、可的松及皮質(zhì)醇的代謝物，以及睪酮、雄烯二酮及脫氫表雄酮的代謝物一直以來(lái)都是各種研究的對(duì)象，這至少在一定程度上說(shuō)明了它們?cè)诓溉閯?dòng)物的神經(jīng)學(xué)信號(hào)系統(tǒng)中所起的作用。
本發(fā)明涉及到的可引發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和功能紊亂的類(lèi)固醇都具有一個(gè)共同的特征，即都含有一個(gè)3α-羥基基團(tuán)，一個(gè)5α或5β孕烷類(lèi)固醇主體，和在17位或20位上的一個(gè)酮基或羥基基團(tuán)。
含有3α-羥基-5α/β-孕烷-20-酮/醇或3α-羥基-5α/β-雄烷-17-酮/醇組分的類(lèi)固醇已被證實(shí)是γ-氨基丁酸(A)受體(GABA-A)重要的特異增強(qiáng)劑。它們與GABA-A受體結(jié)合并通過(guò)增強(qiáng)GABA對(duì)GABA-A受體開(kāi)放頻率和開(kāi)放持續(xù)時(shí)間的效應(yīng)發(fā)揮作用。該作用與苯二氮類(lèi)和巴比妥鹽類(lèi)的相似。然而所述類(lèi)固醇化合物的結(jié)合位點(diǎn)與這兩類(lèi)化合物的不同。表1中給出所述類(lèi)固醇的例子和其ChemicalAbstracts Registry/Chicago Academy of Science(CAS)編號(hào)。
由于目前類(lèi)固醇的命名方法還不完全一致，因此本申請(qǐng)將通篇采用由國(guó)際理論和應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)(IUPAC)制定的命名法。
表1.孕烷醇酮組的命名
*沒(méi)有建立CAS編號(hào)上述中的一些類(lèi)固醇已被證實(shí)在高藥理學(xué)劑量下具有誘導(dǎo)麻醉的作用。它們還可被用作鎮(zhèn)癇藥或催眠藥使用。上述中的一些化合物在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中還被證實(shí)具有抗焦慮的作用。但是高濃度或高劑量對(duì)于實(shí)現(xiàn)上述這些作用是必需的。另外，它們表現(xiàn)為急性作用。
至于這些化合物的直接CNS作用，與苯二氮類(lèi)和巴比妥鹽類(lèi)的相似。然而，它們同樣也具有類(lèi)似于與苯二氮類(lèi)和巴比妥鹽類(lèi)通常相關(guān)的不良作用。內(nèi)源性3α-羥基-孕烷-20-酮-類(lèi)固醇或3α-羥基-雄烷-類(lèi)固醇的不良作用是由這些類(lèi)固醇引發(fā)的消極的中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用的基礎(chǔ)。由于3α-羥基-孕烷-類(lèi)固醇和3α-羥基-雄烷-類(lèi)固醇是內(nèi)源產(chǎn)生的并是其中一些為生命要素的類(lèi)固醇激素的代謝物，它們的產(chǎn)生是無(wú)法被輕易阻斷的。這些類(lèi)固醇在月經(jīng)周期的黃體期中的幾天到幾周的時(shí)間里大量生成，該過(guò)程發(fā)生于在妊娠和緊張的期間，卵子從成熟卵泡釋放之后。上述類(lèi)固醇也在腦部生成。
由3α-羥基-類(lèi)固醇引發(fā)的疾病由內(nèi)源性3α-羥基-5α類(lèi)固醇或3α-羥基-5β類(lèi)固醇對(duì)GABA-A受體的作用導(dǎo)致的功能紊亂被充分地描述和被人熟知。還已知3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇在其暴露后能夠誘導(dǎo)對(duì)其自身和其他相似物質(zhì)的耐受性，所述戒斷反應(yīng)發(fā)生在3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇斷除時(shí)?？傊?，現(xiàn)在已知3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇通過(guò)下述三個(gè)可能的作用機(jī)理引發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂a)直接作用，b)誘導(dǎo)耐受，和c)斷除效應(yīng)。這些機(jī)理將在下文作進(jìn)一步闡述。
a)直接作用已經(jīng)確認(rèn)3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇能直接產(chǎn)生對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的抑制作用。由3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇的直接作用導(dǎo)致的癥狀例如有鎮(zhèn)靜、疲倦、記憶障礙、學(xué)習(xí)障礙、運(yùn)動(dòng)功能障礙、笨拙、胃口增加和對(duì)食物的強(qiáng)烈欲望、情緒消極如緊張、易怒和抑郁，這些是經(jīng)前綜合征和癲癇惡化中的主要癥狀。這種直接作用可分為鎮(zhèn)靜和麻醉作用；運(yùn)動(dòng)功能障礙；對(duì)認(rèn)知功能、記憶和學(xué)習(xí)的影響；癲癇小發(fā)作惡化；經(jīng)前綜合征；情緒改變；引發(fā)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物焦慮；攝食過(guò)量和食欲增加；對(duì)食物的強(qiáng)烈欲望等。
b)耐受性持續(xù)和長(zhǎng)時(shí)間地與3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇接觸會(huì)導(dǎo)致GABA-A受體系統(tǒng)發(fā)生功能障礙。耐受性發(fā)展，并且所述耐受性是最終導(dǎo)致壓力敏感、注意力集中困難和沖動(dòng)失控與抑郁的一個(gè)過(guò)程中的初始階段。3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇的作用已被證實(shí)是增強(qiáng)藥物依賴性的因素。這一直以來(lái)都是大量研究的焦點(diǎn)。迄今為止下屬題目已成為主要的研究課題在長(zhǎng)期分泌大量3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇后減量調(diào)節(jié)和降低GABA功能；在經(jīng)前綜合征期間降低苯二氮和3α-羥基-5β類(lèi)固醇敏感性；和依賴性誘導(dǎo)。
c)戒斷反應(yīng)持續(xù)但較短時(shí)間地與3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇接觸會(huì)導(dǎo)致當(dāng)這種接觸終止時(shí)發(fā)生斷除效應(yīng)。上述現(xiàn)象發(fā)生在行經(jīng)期間當(dāng)中斷由卵巢黃體產(chǎn)生3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇時(shí)。這種斷除現(xiàn)象還發(fā)生于生產(chǎn)之后(產(chǎn)后)當(dāng)中斷由胎盤(pán)產(chǎn)生3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇后。上述相同的現(xiàn)象還被發(fā)現(xiàn)存在于當(dāng)緊張時(shí)期結(jié)束時(shí)。作為對(duì)壓力的反應(yīng)，腎上腺分泌3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇。當(dāng)這種分泌被中斷時(shí)，斷除癥狀可能發(fā)生。
受上述斷除/戒斷現(xiàn)象影響的情形的例子是局部性癲癇，此處患者的癲癇病灶在大腦皮層，惡化發(fā)生于在行經(jīng)期間的斷除時(shí)期。這種現(xiàn)象被稱為“月經(jīng)性癲癇”。其他的例子有與月經(jīng)相關(guān)的偏頭痛、與壓力有關(guān)的偏頭痛和產(chǎn)后情緒改變。戒斷反應(yīng)是耐受性早期發(fā)展的信號(hào)。
相似的癥狀和情形發(fā)生于用類(lèi)固醇激素作為口服避孕藥和婦女絕經(jīng)后激素替代治療的治療期間，類(lèi)固醇治療炎性疾病和攝取促蛋白合成/產(chǎn)生雄性征的類(lèi)固醇期間。該機(jī)理類(lèi)似于直接作用、耐受性產(chǎn)生和戒斷反應(yīng)。
現(xiàn)有技術(shù)Prince和Simmons(Neuropharmacology，vol.32，no.1，pp.59-63，1993)曾經(jīng)使用建立于雄性大鼠的整個(gè)腦的膜部分的模型。在整個(gè)腦的組織勻漿的亞部分里，作者使用了與苯二氮、3H-氟硝安定結(jié)合作為類(lèi)固醇作用和GABA-A受體構(gòu)象改變的模型。該實(shí)驗(yàn)被用作GABA-A受體立體變構(gòu)調(diào)節(jié)的指示。在GABA-刺激下氟硝安定(FNZ)結(jié)合的改變與氯離子(chloride)流量的改變之間的關(guān)系仍然還不確定，并且結(jié)合的改變不能作為通過(guò)GABA-受體的氯離子流量改變或GABA-A受體功能改變的證據(jù)。氯離子流量的改變是重要的結(jié)果。
所述核心問(wèn)題，即是否在FNZ-結(jié)合的改變和神經(jīng)元興奮性之間存在某種關(guān)系目前還不清楚，并且該結(jié)論無(wú)法由FNZ-結(jié)合的結(jié)果得出。FNZ-結(jié)合性質(zhì)的改變或不發(fā)生此結(jié)合性質(zhì)改變不意味著神經(jīng)活性或GABA-A介導(dǎo)的氯離子流量的改變與否。
眾所周知上述GABA-A受體包含幾個(gè)亞單位，所述亞單位可以通過(guò)多種方式被結(jié)合。已知某些結(jié)合缺乏類(lèi)固醇識(shí)別位點(diǎn)。還已知類(lèi)固醇對(duì)驚厥藥TBPS(t-butylbicyclo-phosphorothionate)結(jié)合的作用在大腦的不同區(qū)域是不一樣的。另外已知在雌性大鼠中TBPS的結(jié)合隨動(dòng)情周期有所變化，這表明作用的改變與卵巢的激素生成有關(guān)。當(dāng)然所述這些與動(dòng)情周期有關(guān)的改變?cè)谟米鱌rince和Simmons(見(jiàn)上)的研究中的雄性大鼠身上沒(méi)有發(fā)現(xiàn)。
U.S.5,232,917(Bolger等人)和U.S.5,939,545(Upasani等人)公開(kāi)了若干3α-羥基類(lèi)固醇。這些專利都涉及到GABA-A受體的對(duì)抗調(diào)節(jié)。換句話說(shuō)，上述專利集中在3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇的苯二氮樣作用。所有作為GABA-A受體調(diào)制劑的類(lèi)固醇具有相同的特征，即一個(gè)3α-羥基結(jié)構(gòu)。在這些文件中提及的3β-羥基類(lèi)固醇僅作為對(duì)照用以說(shuō)明3α-羥基-類(lèi)固醇是特殊的。只具有3β-羥基結(jié)構(gòu)的類(lèi)固醇不具有GABA-A受體調(diào)控作用。在所有顯示出GABA-A受體調(diào)控作用的例子中，該類(lèi)固醇均具有3α-羥基基團(tuán)。
WO99/45931(Bckstrm和Wang)公開(kāi)了一種特定類(lèi)固醇的拮抗作用，所述類(lèi)固醇命名為3β-羥基-5α-孕烷-20-酮，但在本申請(qǐng)中描述的其他3β-羥基-類(lèi)固醇和3β-硫酸基-孕烷類(lèi)固醇中無(wú)上述作用。
所述3β-羥基-5α-孕烷-20-酮對(duì)3α-羥基-5α/β-孕烷-20-酮的拮抗作用首次被Wang等人(Wang M.D.，Bckstrm T.和LandgrenS.(2000)The inhibitory effects of allopregnanolone andpregnanolone on the population spike，evoked in the rathippocampal CA1 stratum pyramidale in vitro，can be blockedselectively by epiallopregnanolone.Acta Physiol Scand169，333-341)公開(kāi)。在該文章中，描述了3β-羥基-5α-孕烷-20-酮對(duì)兩種3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇的劑量依賴型拮抗作用。
目前仍然需要尋找3α-羥基-孕烷-類(lèi)固醇作用的特異性阻斷劑，該化合物要求在生理學(xué)上是安全和適宜的，另外要求其適用于生理學(xué)上可接受的劑量。
因而本發(fā)明的一個(gè)目的在于識(shí)別上述特異性阻斷劑，并制造出有效的用于治療、緩解或預(yù)防與類(lèi)固醇有關(guān)和/或由類(lèi)固醇引發(fā)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂的新的藥物和方法。
通過(guò)理解說(shuō)明書(shū)、實(shí)施例和權(quán)利要求，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以清楚本發(fā)明的進(jìn)一步目的、其相關(guān)技術(shù)方案及其優(yōu)點(diǎn)。
發(fā)明概述本發(fā)明發(fā)現(xiàn)在3β位置擁有以羥基或硫酸基(sulphate)形式存在的氫供體的類(lèi)固醇化合物具有令人吃驚的作為3α-羥基-孕烷-類(lèi)固醇作用的高效能的阻斷劑的功能，因而其可作為預(yù)防和/或治療與類(lèi)固醇有關(guān)或由類(lèi)固醇引發(fā)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂的治療物質(zhì)應(yīng)用。
本發(fā)明提出了7種化合物作為用于預(yù)防和/或治療與類(lèi)固醇有關(guān)或由類(lèi)固醇引發(fā)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂和制造用于該用途的藥物的物質(zhì)，所述化合物為3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯(表2)。
本發(fā)明一方面提供了將上述化合物作為3α-羥基-孕烷-類(lèi)固醇作用的阻斷劑用于治療的應(yīng)用。另外，依據(jù)所附的權(quán)利要求，現(xiàn)在提出將這些物質(zhì)用于制造用以治療多種特定的與類(lèi)固醇有關(guān)或由類(lèi)固醇引發(fā)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂的藥物和用于治療的方法，所述權(quán)利要求引入本文作為參考。
附圖簡(jiǎn)述本發(fā)明將在后面的描述和例子中作更詳細(xì)地說(shuō)明，參見(jiàn)引入本說(shuō)明的表格和附圖。


圖1顯示隨GABA劑量增加，氯離子攝取量的平均(SEM)百分比變化。這些結(jié)果說(shuō)明所述氯離子攝取依賴于GABA，并且所用方法可行。
圖2顯示在10μM GABA存在條件下，隨3α-羥基-5α-孕烷-20-酮?jiǎng)┝?nM，X-軸)單獨(dú)增加，氯離子攝取量的平均(SEM)百分比變化。第二條線顯示在10μM GABA和30μM 3β，20β-二羥基-5α-孕烷，UC1011，(CAS No.516-53-0)存在條件下，隨3α-羥基-5α-孕烷-20-酮?jiǎng)┝?nM，X-軸)增加，氯離子攝取量的平均(SEM)百分比變化。該圖顯示由3α-羥基-5α-孕烷-20-酮引起的氯離子攝取量增加被30μM的3β，20β-二羥基-5α-孕烷，UC1011，(CASNo.516-53-0)所阻斷，(p＜0.001)。
圖3顯示一組大鼠在歷時(shí)6天的一系列試驗(yàn)過(guò)程中在莫里斯水迷宮里直到發(fā)現(xiàn)隱藏平臺(tái)的平均(SEM)潛伏期(Y-軸，秒)。每只大鼠每天進(jìn)行4次試驗(yàn)。對(duì)照大鼠和只接受3β，20β-二羥基-5α-孕烷，UC1011的大鼠在訓(xùn)練的第3天學(xué)會(huì)找到平臺(tái)并在被放于水中后直接游向平臺(tái)。接受3α-羥基-5α-孕烷-20-酮的大鼠在6天時(shí)間內(nèi)沒(méi)有明顯學(xué)會(huì)。當(dāng)3α-羥基-5α-孕烷-20-酮的作用被3β，20β-二羥基-5α-孕烷，UC1011阻斷后，它們開(kāi)始在訓(xùn)練的第4天明顯學(xué)會(huì)。
發(fā)明詳述在描述本發(fā)明以前，需要聲明由于本發(fā)明的范圍將只由所附權(quán)利要求和其相等物所限定，本文所用術(shù)語(yǔ)僅用于描述特別的實(shí)施方案，而不意在進(jìn)行限制。
需要特別說(shuō)明的是在本說(shuō)明書(shū)和所附權(quán)利要求中使用的單數(shù)形式“一”、“一個(gè)”和“該”均包括復(fù)數(shù)指代，除非本文另有明確規(guī)定。
在下列描述中，“與類(lèi)固醇有關(guān)的”和“由類(lèi)固醇引發(fā)的”，如用于“與類(lèi)固醇有關(guān)的功能紊亂”中的該術(shù)語(yǔ)，是指包含類(lèi)固醇作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的3個(gè)可能的機(jī)理a)直接作用，b)誘導(dǎo)耐受，和c)斷除效應(yīng)。所述功能紊亂的例子已在上文中給出，但這些例子是用于舉例說(shuō)明每種機(jī)理，而并不應(yīng)解釋為限制本發(fā)明。
術(shù)語(yǔ)“阻斷”用于定義一種阻止3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇作用于所述GABA-A受體的作用。需要說(shuō)明的是所述“阻斷”是一種完全不同于“調(diào)節(jié)”或“抑制”或類(lèi)似術(shù)語(yǔ)，這些術(shù)語(yǔ)暗示作用仍在發(fā)生，只是以較少的程度或較低的速率進(jìn)行。
術(shù)語(yǔ)“藥物組合物”以其廣義被應(yīng)用，其包括所有含有至少一種活性物質(zhì)和任選的載體、輔料和組分等的可藥用的組合物。術(shù)語(yǔ)“藥物組合物”還包括含有以活性物質(zhì)的衍生物和前體藥物形式存在的組合物，例如藥學(xué)可接受的鹽、硫酸酯和酯。所述制造不同給藥途徑的藥物組合物的技術(shù)為草藥化學(xué)領(lǐng)域中的專業(yè)人員所熟知。
術(shù)語(yǔ)“給藥”和“給藥方式”以及“給藥途徑”均以其廣義被應(yīng)用。所述本發(fā)明的藥物組合物可通過(guò)多種途徑給藥，所述給藥途徑主要依據(jù)局部、皮膚或全身哪個(gè)更適用于所治療的病癥。這些不同的給藥方式舉例說(shuō)明如局部(topical)給藥(例如在皮膚上給藥)、特定部位(local)給藥(包括眼部給藥和向各種黏膜給藥如陰道和直腸給藥)、口服或胃腸外給藥和包括上、下呼吸道在內(nèi)的肺部給藥。
制備上述組合物和制劑的方法是那些制藥和制劑領(lǐng)域中的技術(shù)人員所了解的，并且所述制備方法可適用于本發(fā)明中組合物的制劑。
術(shù)語(yǔ)“拮抗劑”是指一種阻礙另一物質(zhì)既激動(dòng)劑引發(fā)其作用的物質(zhì)。在本申請(qǐng)中術(shù)語(yǔ)拮抗劑和阻斷劑同時(shí)被使用。
本發(fā)明人令人吃驚地揭示在3β位具有氫供體的類(lèi)固醇在制藥學(xué)上適宜的和實(shí)際可應(yīng)用的劑量下可以在體外阻斷3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇的作用，因而阻斷了3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇的消極作用的發(fā)展。本文提出了3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇在中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂發(fā)展中的作用機(jī)理和3β-羥基-5α/β-孕烷或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烷類(lèi)固醇與3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇相互作用的作用機(jī)理。
表2.本發(fā)明中實(shí)驗(yàn)的3β-羥基-5α/β-孕烷或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇的目錄列表
*所述物質(zhì)來(lái)自Steraloids公司，USA，和Sigma化學(xué)公司本發(fā)明涉及所有在3β位具有氫供體特別是羥基或硫酸基的類(lèi)固醇，舉例說(shuō)明如表2中所述的3β-羥基-孕烷-類(lèi)固醇和3β-硫酸基-孕烷-類(lèi)固醇。本發(fā)明人已揭示這些類(lèi)固醇是拮抗劑并可以阻斷3α-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的作用。令人吃驚的是，同時(shí)用3α-羥基-孕烷-類(lèi)固醇和表2中提到的3β-羥基-孕烷-類(lèi)固醇和3β-硫酸基-孕烷-類(lèi)固醇處理，可抑制由3α-羥基-孕烷-類(lèi)固醇誘導(dǎo)的通過(guò)GABA-A受體的攝取量和氯離子流量。
本發(fā)明的一個(gè)益處是3β-羥基-和3β-硫酸基-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇，特別是3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯可有效阻斷和拮抗由3α-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇對(duì)GABA-A受體的調(diào)節(jié)作用。尤其有利的是上述阻斷作用是在藥理學(xué)和生理學(xué)適宜濃度的條件下得到的。
本發(fā)明人揭示3β-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇和3β-硫酸基-5α/β-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇，特別是3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯，鈉鹽可抑制3α-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇在GABA-A受體氯離子攝取的模型中的作用。所述GABA-A受體是一個(gè)氯離子通道，GABA-A受體通過(guò)改變通過(guò)該通道的氯離子流量來(lái)發(fā)揮作用。本領(lǐng)域眾所周知在GABA-A受體開(kāi)放和大量的氯離子流入細(xì)胞時(shí)腦部的神經(jīng)元活動(dòng)減少。還已知在氯離子流入的數(shù)量和GABA-A受體活性藥物的臨床效果之間存在某種關(guān)系。
苯二氮類(lèi)和巴比妥鹽類(lèi)通過(guò)上述機(jī)理實(shí)現(xiàn)他們的作用。但同時(shí)這也導(dǎo)致了這些藥物的有害效應(yīng)?；诒景l(fā)明的新的并令人吃驚的發(fā)現(xiàn)是，有可能通過(guò)給予藥學(xué)和生理學(xué)上可接受量的3β-羥基和3β-硫酸基-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇來(lái)阻斷3α-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇對(duì)所述氯離子攝取的作用。有關(guān)實(shí)驗(yàn)中所用到的GABA-A受體采集于大鼠的皮質(zhì)組織，所述皮質(zhì)組織是大腦中用于測(cè)量GABA-A受體作用的典型部位?？梢砸愿叨鹊目尚哦燃俣◤倪@個(gè)模型中得到的結(jié)果可以在更高等的哺乳動(dòng)物和人類(lèi)患者中被證實(shí)。
正象上面的論述，有許多與3α-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇有關(guān)的癥狀和疾病，所述的阻斷3α-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇作用將是一種治療討論中的疾病的方法。本發(fā)明人現(xiàn)在制造出了用于該阻斷作用的物質(zhì)和方法。
在Prince和Simmons(見(jiàn)上)所報(bào)道的實(shí)驗(yàn)工作中運(yùn)用了間接的配體結(jié)合分析。通過(guò)研究上述單獨(dú)的FNZ-結(jié)合，不能認(rèn)定相同的作用會(huì)在體內(nèi)神經(jīng)活性中被觀測(cè)到。Prince和Simmons在他們的論文中也沒(méi)有聲明這點(diǎn)。他們只是論述了有關(guān)類(lèi)固醇結(jié)合位點(diǎn)的推論以及這些位點(diǎn)是否相同。這不是新的論述，并且類(lèi)固醇幾個(gè)可能的結(jié)合位點(diǎn)在更早的文獻(xiàn)中就有說(shuō)明。他們得出的僅有的結(jié)論和應(yīng)用他們的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和模型得出的可能的結(jié)論是，類(lèi)固醇有差別地改變FNZ的結(jié)合并與FNZ-結(jié)合存在相互作用。從Prince和Simmons的結(jié)果中無(wú)法得出有關(guān)對(duì)神經(jīng)活性或臨床影響的作用的結(jié)論。
本發(fā)明人令人吃驚地揭示藥學(xué)上適宜的和可用的劑量的3β-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇和3β-硫酸基-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇，特別是3β，20β-二羥基-5α-孕烷、3β，20α-二羥基-5β-孕烷、3β-羥基-5β-孕烷-20-酮、3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮、3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮、3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯能夠阻斷3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇的作用，從而阻斷了3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇的消極作用的發(fā)展。本發(fā)明人不但確定了由3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇引起的功能紊亂的作用機(jī)理，而且確定了3β-羥基-5α/β-孕烷或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇與3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇之間的相互作用的作用機(jī)理。本領(lǐng)域已確證3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇通過(guò)3種可能的機(jī)理導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂，所述3種機(jī)理是a)直接作用，b)誘導(dǎo)耐受，和c)斷除效應(yīng)。
本發(fā)明還涉及在3β位含有氫供體的類(lèi)固醇的作用的潛在機(jī)理，所述類(lèi)固醇特別是指3β-羥基-5α/β-孕烷-20-酮-類(lèi)固醇和3β-硫酸基-5α/β孕烷或孕烯類(lèi)固醇，舉例說(shuō)明如3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯。本發(fā)明使得對(duì)共有這些特征的化合物、或模擬這些物質(zhì)功能的功能類(lèi)似物的識(shí)別和合成成為可能。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案是用于篩分、分離或合成如下備選藥物的方法，所述備選藥物是能夠阻斷3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇作用從而阻斷3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇的消極作用的發(fā)展的物質(zhì)，該方法包括將與上述舉例說(shuō)明的化合物的結(jié)構(gòu)或功能相似性作為在篩分或分離中的選擇標(biāo)準(zhǔn)，或作為確認(rèn)合成終產(chǎn)物的標(biāo)準(zhǔn)的步驟。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案包含應(yīng)用上述步驟鑒別的或合成的化合物。
這些物質(zhì)具有治療學(xué)的和作為生產(chǎn)治療藥物的成分的用處。含有3β-羥基-5α/β-孕烷-20-酮特征的物質(zhì)是對(duì)抗由3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇引起的作用，特別是GABA-A受體調(diào)節(jié)作用的有效的阻斷劑或拮抗劑。
就發(fā)明人所知，與先前公開(kāi)的發(fā)明例如Bolger等人，U.S.專利5,232,917和Upasani等人，U.S.專利5,939,545相比較，一個(gè)重要的事實(shí)是3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-類(lèi)固醇從來(lái)不曾被揭示是GABA-A受體的調(diào)節(jié)劑，既不是正性(增強(qiáng))調(diào)節(jié)劑也不是負(fù)性(抑制)調(diào)節(jié)劑。另外，3β-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇作為調(diào)節(jié)3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇的GABA-A受體的拮抗劑或阻斷劑的應(yīng)用從來(lái)沒(méi)有顯示被測(cè)試過(guò)。重要的是該發(fā)明沒(méi)有提出3β-羥基-5α/β-孕烷-20-酮-類(lèi)固醇或3β-硫酸基-5α/β-孕烷-20-酮類(lèi)固醇可作為GABA-A受體的調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明的一個(gè)重要特點(diǎn)是3β-羥基-5α/β-孕烷或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇具有作為拮抗劑或阻斷劑的用處，并且他們可阻止3α-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇的作用。
Bolger等人，U.S.專利5,232,917和Upasani等人，U.S.專利5,939,545既沒(méi)有在其專利中也沒(méi)有在它們相應(yīng)的科學(xué)文獻(xiàn)(LanN.C.，Gee K.W.，Bolger M.B.&Chen J.S.(1991)，Differentialresponses of expressed recombinant human gamma-aminobutyricacidA receptors to neurosteroids.Journal of Neurochemistry，57(5)1818-1821)中公開(kāi)過(guò)任何作為GABA-A受體調(diào)節(jié)劑的3β-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇。
因此，作為本發(fā)明的一般情況，本發(fā)明人提供了能阻斷3α-羥基-孕烷-類(lèi)固醇對(duì)人GABA-A受體作用的化學(xué)化合物，所述化合物在3β位具有氫供體，該氫供體以選自羥基和硫酸基的基團(tuán)形式存在。所述化合物優(yōu)選地選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯。
本發(fā)明的另一方面提供了一種藥物組合物，其含有能阻斷3α-羥基-孕烷-類(lèi)固醇對(duì)人GABA-A受體作用的化合物，所述化合物在3β位具有氫供體，該氫供體以選自羥基和硫酸基的基團(tuán)形式存在，所述化合物以藥學(xué)有效量給出，任選的與藥學(xué)可接受的載體混合。所述化合物優(yōu)選地選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯。優(yōu)選的上述化合物以適宜的和藥學(xué)可接受的鹽，最優(yōu)選的是鈉鹽的形式給出。
本發(fā)明的另一方面提供了一種治療和/或預(yù)防人類(lèi)患者的與類(lèi)固醇有關(guān)的CNS功能紊亂的一般方法，其中給予上述患者至少一種能阻斷3α-羥基-孕烷-類(lèi)固醇對(duì)人GABA-A受體作用的化合物。優(yōu)選的所述化合物在3β位具有氫供體，該氫供體以選自羥基和硫酸基的基團(tuán)形式存在，所述化合物最優(yōu)選地選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯。優(yōu)選的上述化合物以適宜的和藥學(xué)可接受的鹽，最優(yōu)選的是鈉鹽的形式應(yīng)用。
依據(jù)本發(fā)明，所述的至少一種化合物是通過(guò)下述給藥途徑中一種給藥?kù)o脈內(nèi)給藥、經(jīng)鼻給藥、經(jīng)直腸給藥、陰道內(nèi)給藥、經(jīng)皮給藥和口服給藥。依據(jù)一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，所述的至少一種類(lèi)固醇是通過(guò)靜脈內(nèi)給藥的。依據(jù)另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，所述的至少一種類(lèi)固醇是經(jīng)鼻給藥的。
經(jīng)鼻給藥特別是一種有希望的可選方案，因其具有簡(jiǎn)單和患者能夠自我給藥的優(yōu)點(diǎn)。自我給藥具有允許患者依據(jù)對(duì)自身病癥的主觀評(píng)價(jià)或依據(jù)治療醫(yī)師開(kāi)具的程序表調(diào)整藥物治療的劑量或頻度的優(yōu)點(diǎn)。術(shù)語(yǔ)“由治療醫(yī)師開(kāi)具的程序表”包括在未經(jīng)協(xié)助或通過(guò)問(wèn)卷、范圍或比例協(xié)助下，或者使用運(yùn)算法則或計(jì)算機(jī)程序情況下，患者對(duì)自身病癥作出主觀評(píng)價(jià)從而確定適宜的下一個(gè)劑量的可選方案。
使用配制成乳膏、凝膠和油膏的物質(zhì)給藥或以緩慢釋放的粘合性藥物貼劑的形式給藥的經(jīng)皮給藥是另一個(gè)有潛力的可選方案，其同樣適用于自我給藥。上面給出的自我給藥的優(yōu)點(diǎn)也適用于經(jīng)皮給藥，同時(shí)其增加的優(yōu)點(diǎn)是，如果希望或必要，經(jīng)皮給藥能夠方便的中止，如通過(guò)移除藥物貼劑實(shí)現(xiàn)。
在這些或其他的給藥途徑中，所述組合物的制劑可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員所常規(guī)使用和熟知的方法根據(jù)正常的藥理學(xué)程序進(jìn)行改造和調(diào)整，所述組合物的制劑包括適于所選給藥途徑的以一種化學(xué)形式存在的有效藥物，與適宜的佐劑和賦形劑。
常規(guī)使用的用于口服給藥的佐劑和賦形劑是例如填充劑或懸浮劑如二氧化鈦、乳糖酐、二氧化硅、膠態(tài)二氧化硅、甲基纖維素、硬脂酸鎂、微晶纖維素等。
常規(guī)使用的用于靜脈內(nèi)給藥的佐劑和賦形劑是例如無(wú)菌注射用水(WFI)、無(wú)菌緩沖液(例如將溶液緩沖至pH7.4)等。
常規(guī)使用的用于經(jīng)皮給藥的佐劑和賦形劑是例如凡士林、液體石蠟、甘油、水等。
所述劑量將根據(jù)給藥方式，要治療的具體病癥或期望的效果，患者的性別、年齡、體重和健康狀況，和其他可能的因素由治療醫(yī)師評(píng)估后作相應(yīng)的變化。根據(jù)本發(fā)明，當(dāng)所述的至少一種類(lèi)固醇靜脈內(nèi)給藥時(shí)，適宜的給藥區(qū)間是大約每公斤體重0.2至200mg。在動(dòng)物體內(nèi)的初步研究表明優(yōu)選的靜脈給藥區(qū)間是大約每公斤體重20至100mg。
其他給藥方式相應(yīng)的劑量區(qū)間可以容易地被本領(lǐng)域技術(shù)人員通過(guò)計(jì)算得出，并且如果必要可以經(jīng)過(guò)非創(chuàng)造性的動(dòng)物試驗(yàn)或臨床前或臨床研究加以驗(yàn)證。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案是治療與類(lèi)固醇有關(guān)或由類(lèi)固醇引發(fā)的CNS功能紊亂，特別是經(jīng)前綜合征的方法，其中通過(guò)給予至少一種本發(fā)明的物質(zhì)阻止了耐受性的發(fā)展，并阻止了GABA-A受體的減量調(diào)節(jié)。這種治療將保持GABA-A系統(tǒng)的敏感度并阻止黃體期中低敏感狀態(tài)的發(fā)展。在大鼠中已顯示GABA-A受體在長(zhǎng)期的黃體酮治療期間發(fā)生了變化。根據(jù)本發(fā)明的用3β-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇的治療用以阻止耐受性的發(fā)生，從而阻礙當(dāng)3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇斷除時(shí)發(fā)生斷除效應(yīng)。
耐受性的發(fā)展會(huì)降低內(nèi)源產(chǎn)生的GABA-A增強(qiáng)物質(zhì)如3α-羥基-5α-孕烷-20-酮或苯二氮類(lèi)的敏感度。當(dāng)快速撤藥時(shí)，如在月經(jīng)周期的黃體期末期，在斷除3α-羥基-5α-孕烷-類(lèi)固醇后發(fā)生反跳作用。在人類(lèi)中發(fā)現(xiàn)了這種情況，在類(lèi)固醇停止產(chǎn)生和斷除后不久，經(jīng)期中偏頭痛和癲癇發(fā)作增加。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案相應(yīng)的是通過(guò)給予至少一種基于本發(fā)明的物質(zhì)來(lái)治療或預(yù)防耐受性的發(fā)展和/或斷除癥狀的方法。
本發(fā)明另外還涉及一種用于治療和/或預(yù)防上述人類(lèi)患者中與類(lèi)固醇有關(guān)或由類(lèi)固醇引發(fā)的情緒障礙的方法，依據(jù)該方法給予上述患者至少一種3β-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇。所述類(lèi)固醇化合物優(yōu)選地選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯。所述化合物最優(yōu)選地以適宜的和藥學(xué)可接受的鹽，最優(yōu)選的是鈉鹽的形式應(yīng)用。
適宜的給藥方式是例如下述方式靜脈內(nèi)給藥、經(jīng)鼻給藥、經(jīng)直腸給藥、陰道內(nèi)給藥、經(jīng)皮給藥和口服給藥。
對(duì)于治療多種CNS功能紊亂和作為抗麻醉劑使用，有效化合物或化合物優(yōu)選地經(jīng)靜脈給藥。
根據(jù)本發(fā)明適宜的靜脈給藥劑量區(qū)間是每公斤體重大約0.2至大約200mg，優(yōu)選地是每公斤體重大約20至大約100mg。
如上所述，所述組合物的制劑可根據(jù)正常的藥理學(xué)程序進(jìn)行改造和調(diào)整。另外，所述劑量將根據(jù)給藥方式，要治療的具體病癥或期望的效果，患者的性別、年齡、體重和健康狀況，和其他可能的因素由治療醫(yī)師評(píng)估后作相應(yīng)的變化。
另外本發(fā)明還包括用于治療和/或預(yù)防人類(lèi)患者的與類(lèi)固醇有關(guān)或由類(lèi)固醇引發(fā)的CNS功能紊亂的方法，依據(jù)該方法給予上述患者藥學(xué)和生理學(xué)上可接受的劑量的-種或多種3β-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇(見(jiàn)表2)。所述類(lèi)固醇化合物優(yōu)選地選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯。所述化合物最優(yōu)選地以適宜的和藥學(xué)可接受的鹽，最優(yōu)選的是鈉鹽的形式應(yīng)用。
由3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇的直接作用導(dǎo)致的癥狀和病癥的例子有鎮(zhèn)靜、疲倦、記憶障礙、學(xué)習(xí)障礙、運(yùn)動(dòng)功能障礙、笨拙、胃口增加和對(duì)食物的強(qiáng)烈欲望、情緒消極如緊張、易怒和抑郁，這些是經(jīng)前綜合征和癲癇小發(fā)作惡化中的主要癥狀。
由長(zhǎng)時(shí)間(若干天)與3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇接觸后耐受性發(fā)展所導(dǎo)致的病癥和癥狀有壓力敏感、注意力集中困難、與壓力或月經(jīng)周期相關(guān)的注意力集中困難、睡眠障礙、疲倦、沖動(dòng)失控和抑郁。3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇還增腔藥物依賴性。依據(jù)本發(fā)明，通過(guò)給予上述患者至少一種3β-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇可以預(yù)防、緩解或治療這些病癥或癥狀。所述類(lèi)固醇化合物優(yōu)選地選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯。所述化合物最優(yōu)選地以適宜的和藥學(xué)可接受的鹽，最優(yōu)選的是鈉鹽的形式應(yīng)用。
持續(xù)但較短時(shí)間地與3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇接觸會(huì)導(dǎo)致當(dāng)這種接觸終止時(shí)發(fā)生斷除效應(yīng)。上述現(xiàn)象發(fā)生在行經(jīng)期間當(dāng)中斷由卵巢黃體產(chǎn)生3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇時(shí)。這種斷除現(xiàn)象還發(fā)生于生產(chǎn)之后(產(chǎn)后)當(dāng)中斷由胎盤(pán)產(chǎn)生3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇后。上述相同的現(xiàn)象還被發(fā)現(xiàn)存在于當(dāng)緊張時(shí)期結(jié)束并且在緊張期間由腎上腺分泌的3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇被中斷時(shí)。受上述斷除/戒斷現(xiàn)象影響的病癥的例子是局部性癲癇，此處患者的癲癇病灶在大腦皮層，惡化發(fā)生于在行經(jīng)期間的斷除時(shí)期。這種現(xiàn)象被稱為“月經(jīng)性癲癇”。其他的例子有與月經(jīng)相關(guān)的偏頭痛、與壓力有關(guān)的偏頭痛和產(chǎn)后情緒改變。戒斷反應(yīng)是耐受性早期發(fā)展的信號(hào)。
所述被認(rèn)為與類(lèi)固醇有關(guān)或由類(lèi)固醇引發(fā)的這類(lèi)病癥的例子包括有癲癇、月經(jīng)周期依賴性癲癇、抑郁、與壓力有關(guān)的抑郁、偏頭痛、疲倦和特別是與壓力有關(guān)的疲倦、經(jīng)前綜合征、經(jīng)前煩躁癥、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的情緒改變、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的記憶改變、與壓力有關(guān)的記憶改變、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的注意力集中困難、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的睡眠障礙和疲倦。有確鑿證據(jù)顯示肥胖和食欲增加以及一些平衡失衡形式也是與類(lèi)固醇有關(guān)或由類(lèi)固醇引發(fā)。因而本發(fā)明提供了治療、緩解或預(yù)防這些病癥的物質(zhì)和方法。
本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案針對(duì)折磨眾多女性的問(wèn)題提出一種治療和/或預(yù)防人類(lèi)患者絕經(jīng)后治療的副作用的方法，依據(jù)本方法給予上述患者至少一種3β-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇。所述類(lèi)固醇化合物優(yōu)選地選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯。所述化合物最優(yōu)選地以適宜的和藥學(xué)可接受的鹽，最優(yōu)選的是鈉鹽的形式應(yīng)用。
本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案提供了有關(guān)治療和/或預(yù)防人類(lèi)患者口服避孕藥的副作用的方法，在該治療中給予上述患者至少一種3β-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇。所述類(lèi)固醇化合物優(yōu)選地選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯。所述化合物最優(yōu)選地以適宜的和藥學(xué)可接受的鹽，最優(yōu)選的是鈉鹽的形式應(yīng)用。
在本發(fā)明中，優(yōu)選地將至少一種上面舉例說(shuō)明的3β-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇的有效組合物與口服避孕藥一起給藥于患者。經(jīng)鼻或經(jīng)皮給藥也是適宜的給藥方式。
本發(fā)明的一個(gè)特殊的實(shí)施方案提供了一種藥物組合物，其包括一種口服避孕藥和一種治療學(xué)適宜劑量的至少一種能阻斷3α-羥基-孕烷-類(lèi)固醇對(duì)人GABA-A受體作用的化學(xué)化合物，其中所述化合物在3β位具有氫供體，該氫供體以選自羥基和硫酸基的基團(tuán)形式存在。所述化合物優(yōu)選地選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯。所述化合物最優(yōu)選地以適宜的和藥學(xué)可接受的鹽，最優(yōu)選的是鈉鹽的形式應(yīng)用。
另外在上述實(shí)施方案的范圍中，所述能阻斷3α-羥基-孕烷-類(lèi)固醇對(duì)人GABA-A受體作用的化學(xué)化合物的劑量?jī)?yōu)選地調(diào)節(jié)至緊張期或經(jīng)期中的內(nèi)源性類(lèi)固醇的水平。依據(jù)本發(fā)明，能阻斷3α-羥基-孕烷-類(lèi)固醇對(duì)人GABA-A受體作用的化學(xué)化合物可包含于口服避孕藥中，這不但為了減輕或消除口服避孕藥的副作用，也為了減輕或消除內(nèi)源性類(lèi)固醇周期性改變引發(fā)的任何不期望的作用。
一般而言，本發(fā)明包括3β-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇，特別是3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯單獨(dú)或聯(lián)合用于制造治療或預(yù)防任何一種與3α-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇有關(guān)或由其引發(fā)的功能紊亂的藥物的應(yīng)用，所述功能紊亂特別包括癲癇、月經(jīng)周期依賴性癲癇、抑郁、與壓力有關(guān)的抑郁、偏頭痛、疲倦和特別是與壓力有關(guān)的疲倦、經(jīng)前綜合征、經(jīng)前煩躁癥、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的情緒改變、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的記憶改變、與壓力有關(guān)的記憶改變、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的注意力集中困難、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的睡眠障礙和疲倦。所述化合物優(yōu)選地以適宜的和藥學(xué)可接受的鹽，最優(yōu)選的是鈉鹽的形式應(yīng)用。
實(shí)施例本發(fā)明以體外試驗(yàn)為基礎(chǔ)進(jìn)行以確定3β-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇對(duì)3α-羥基-5α/β-孕烷-類(lèi)固醇的阻斷作用。本發(fā)明人已計(jì)劃馬上將所述體外試驗(yàn)的結(jié)果在體內(nèi)試驗(yàn)加以證實(shí)。一項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已顯示在活體試驗(yàn)動(dòng)物中存在所述令人吃驚的阻斷作用。
皮質(zhì)組織勻漿研究在這些研究中來(lái)自成年雄性大鼠的皮質(zhì)組織在緩沖液中均質(zhì)化。經(jīng)此處理后形成小囊泡的懸浮液，所述囊泡的表面具有GABA-A受體。當(dāng)放射性的氯離子加入到該懸浮液中時(shí)，一定數(shù)量的氯離子會(huì)進(jìn)入所述囊泡。該數(shù)量與GABA-A受體的開(kāi)放多少有關(guān)。開(kāi)放該受體的藥物將增加氯離子進(jìn)入囊泡的數(shù)量，該數(shù)量與所述藥物的劑量有關(guān)。相似的，關(guān)閉GABA-A受體的藥物將降低進(jìn)入囊泡的氯離子的數(shù)量。囊泡外的所述標(biāo)記的氯離子經(jīng)洗滌除去并與囊泡內(nèi)的氯離子分離。然后在流體閃爍器中測(cè)定囊泡內(nèi)經(jīng)放射性標(biāo)記的氯離子的數(shù)量并繪制曲線圖。
在每個(gè)試驗(yàn)中，用不斷增加GABA劑量的對(duì)照實(shí)驗(yàn)來(lái)確定組織樣品工作正常。圖1顯示了這些對(duì)照實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。通過(guò)加入遞增劑量的3α-羥基-5α-孕烷-20-酮作為第二對(duì)照來(lái)增強(qiáng)10μM GABA的作用。圖2顯示了這些對(duì)照實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。在圖2中顯示了一個(gè)阻斷類(lèi)固醇的例子?？梢宰⒁獾?α-羥基-5α-孕烷-20-酮的作用被阻斷并且進(jìn)入的氯離子的數(shù)量與使用10μM GABA本身時(shí)的數(shù)量相比無(wú)差別。
表3給出了3β-羥基-5α/β-孕烷或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇所顯示阻斷作用的概要。其中一種類(lèi)固醇，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮，UC1010，先前已在專利申請(qǐng)WO99/45931中公開(kāi)，其引入本文僅為了完整的目的。另一種類(lèi)固醇即3β-羥基-δ5-孕烯-20-酮，硫酸酯，鈉鹽(UC1018)具有對(duì)包括GABA-A受體在內(nèi)的其他CNS受體的另外的作用，因而其不適于作為用于人的藥物治療，其引入本文僅為了完整的目的。
表3顯示當(dāng)僅用已知的GABA-A激動(dòng)劑3α-羥基-5α-孕烷-20-酮試驗(yàn)時(shí)通過(guò)GABA-A受體的氯離子攝取量的結(jié)果。另外它還顯示了3β-羥基和3β-硫酸基-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇對(duì)由3α-羥基-5α-孕烷-20-酮引發(fā)的氯離子攝取產(chǎn)生改變的阻斷作用。以該情況下僅用10μMGABA而無(wú)3α-羥基-5α-孕烷-20-酮處理得到的攝取量為計(jì)算值100％，所述阻斷作用以與其相比百分比改變來(lái)表示。值得注意的是給予一定劑量的3α-羥基-5α-孕烷-20-酮，氯離子攝取量的平均增加量是167.7％，然而加入拮抗劑后的改變與100％值無(wú)顯著性差異。這顯示3β-羥基-5α/β-孕烷或3β-硫酸基-5α/δ5-孕烷/孕烯-類(lèi)固醇有效地阻斷了3α-羥基-5α-孕烷-20-酮的作用。
在所有試驗(yàn)中3α-羥基-5α-孕烷-20-酮以遞增的劑量給予，1＝0，2＝50，3＝100，4＝150，5＝200，6＝1000，7＝3000nM+10μM GABA+30μM的相互作用的類(lèi)固醇。H＝高，S＝顯著，NS＝不顯著。通過(guò)重復(fù)測(cè)定ANOVA隨后作lest顯著性差異檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)。
表3.被測(cè)試的類(lèi)固醇對(duì)3α-羥基-5α-孕烷-20-酮的阻斷作用，由測(cè)量通過(guò)GABA-A受體的氯離子攝取量的改變得到
動(dòng)物體內(nèi)研究已經(jīng)進(jìn)行了應(yīng)用莫里斯水迷宮模型的動(dòng)物研究。在莫里斯水迷宮模型中，可以觀察到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的學(xué)習(xí)能力。所述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，通常是大鼠，被置于裝有水的容器中，該容器在一個(gè)位置裝有平臺(tái)。所述平臺(tái)稍稍低于水面，大鼠必須游泳直至發(fā)現(xiàn)平臺(tái)。在接下來(lái)的試驗(yàn)期間，大鼠將通過(guò)觀察屋子墻壁上的記號(hào)學(xué)習(xí)平臺(tái)的位置。已知學(xué)習(xí)過(guò)程可受給予CNS抑制性3α-羥基-孕烷-類(lèi)固醇的消極影響。(JohanssonI.M.，Birzniece V.，Lindblad C.，Olsson T.和Bckstrm T.(2002)別孕烯醇酮抑制莫里斯水迷宮中的學(xué)習(xí)(Allopregnanolone inhibitslearning in the Morris water maze.)Brain Res 934，125-131)。
上述結(jié)果(圖3)顯示，通過(guò)給予本發(fā)明化合物可以消除或減輕這種消極作用。有關(guān)試驗(yàn)操作使用3α-羥基-孕烷-20-酮作為學(xué)習(xí)干擾劑(CAS no.516-54-1，表1)和3β，20β-二羥基-5α-孕烷，UC1011，(CAS 516-53-0，表2和3)作為阻斷劑。每日給大鼠(n＝46)注射(靜脈注射)3β，20β-二羥基-5α-孕烷，UC1011 20mg/kg(n＝14)，3α-羥基-5α-孕烷-20-酮2mg/kg(n＝14)，3α-羥基-5α-孕烷-20-酮+3β，20β-二羥基-5α-孕烷，UC1011 2:20mg/kg(n＝14)，或賦形劑(n＝4)。動(dòng)物每日進(jìn)行4次游泳試驗(yàn)，每次最長(zhǎng)游泳時(shí)間為120秒。大鼠在6天的3α-羥基-5α-孕烷-20-酮注射后開(kāi)始游泳8分鐘。通過(guò)攝像機(jī)監(jiān)測(cè)大鼠的行為并運(yùn)用方差分析(ANOVA)分析數(shù)據(jù)，隨后進(jìn)行此后的試驗(yàn)。
如之前所示，化合物3α-羥基-5α-孕烷-20-酮可抑制有關(guān)空間的學(xué)習(xí)。3α-羥基-5α-孕烷-20-酮組發(fā)現(xiàn)平臺(tái)的潛伏期在技能訓(xùn)練6天后大于80秒。注射了3β，20β-二羥基-5α-孕烷，UC1011+3α-羥基-5α-孕烷-20-酮混合物的大鼠與3α-羥基-5α-孕烷-20-酮組相比潛伏期較短(p＜0.05第4-6天)，顯示此組中的大鼠能夠?qū)W習(xí)。只接受3β，20β-二羥基-5α-孕烷，UC1011的組學(xué)習(xí)發(fā)現(xiàn)平臺(tái)與對(duì)照組(賦形劑)一樣快，并比3α-羥基-5α-孕烷-20-酮處理的大鼠快(p＜0.05第3-6天)。在上述4個(gè)組中速度無(wú)顯著性差異(圖3)。
雖然本發(fā)明已描述了有關(guān)的優(yōu)選實(shí)施方案，其構(gòu)成了本發(fā)明人目前已知的的最佳方案，應(yīng)該說(shuō)明的是對(duì)于本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所作的顯而易見(jiàn)的各種各樣的改變和修飾沒(méi)有超出本發(fā)明的范圍，而本發(fā)明的范圍列于本文所附的權(quán)利要求中。
權(quán)利要求
1.一種治療、緩解和/或預(yù)防人類(lèi)患者與類(lèi)固醇有關(guān)的CNS功能紊亂的方法，其特點(diǎn)為給予上述患者至少一種化合物，所述化合物選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所說(shuō)的至少一種化合物是以藥學(xué)可接受的衍生物形式給予。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所說(shuō)的藥學(xué)可接受的衍生物是所述化合物的鈉鹽。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所說(shuō)的至少一種化合物是通過(guò)下述給藥方式中的一種給予靜脈內(nèi)給藥、經(jīng)鼻給藥、經(jīng)直腸給藥、陰道內(nèi)給藥、經(jīng)皮給藥和口服給藥。
5.如權(quán)利要求4所述的方法，其中所說(shuō)的至少一種類(lèi)固醇靜脈內(nèi)給藥。
6.如權(quán)利要求4所述的方法，其中所說(shuō)的至少一種類(lèi)固醇是經(jīng)鼻給藥。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所說(shuō)的至少一種類(lèi)固醇是以介于每公斤體重大約0.2-200mg區(qū)間的劑量靜脈內(nèi)給藥。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所說(shuō)的至少一種類(lèi)固醇是以介于每公斤體重大約20-100mg區(qū)間的劑量靜脈內(nèi)給藥。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所說(shuō)的與類(lèi)固醇有關(guān)的CNS功能紊亂是與類(lèi)固醇有關(guān)的情緒障礙。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所說(shuō)的與類(lèi)固醇有關(guān)的CNS功能紊亂是人類(lèi)患者絕經(jīng)后激素治療的副作用。
11.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所說(shuō)的與類(lèi)固醇有關(guān)的CNS功能紊亂是人類(lèi)患者口服避孕藥的副作用。
12.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所說(shuō)的與類(lèi)固醇有關(guān)的CNS功能紊亂是人類(lèi)患者的與類(lèi)固醇有關(guān)的疲倦。
13.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所說(shuō)的與類(lèi)固醇有關(guān)的CNS功能紊亂是人類(lèi)患者的與類(lèi)固醇有關(guān)的記憶障礙。
14.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所說(shuō)的與類(lèi)固醇有關(guān)的CNS功能紊亂是下述與類(lèi)固醇有關(guān)的功能紊亂中的一種癲癇、月經(jīng)周期依賴性癲癇、抑郁、與壓力有關(guān)的抑郁、偏頭痛、疲倦和特別是與壓力有關(guān)的疲倦、經(jīng)前綜合征、經(jīng)前煩躁癥、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的情緒改變、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的記憶改變、與壓力有關(guān)的記憶改變、阿爾茨海默氏癡呆、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的注意力集中困難、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的睡眠障礙和疲倦，或它們的組合。
15.一種控制和/或終止人類(lèi)患者類(lèi)固醇麻醉的方法，其特點(diǎn)為使用選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯的至少一種化合物。
16.選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯的類(lèi)固醇用于生產(chǎn)藥物的應(yīng)用。
17.選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯的類(lèi)固醇用于生產(chǎn)治療與類(lèi)固醇有關(guān)的CNS功能紊亂的藥物的應(yīng)用。
18.選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯的類(lèi)固醇用于生產(chǎn)治療和/或預(yù)防與類(lèi)固醇有關(guān)的情緒障礙的藥物的應(yīng)用。
19.選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯的類(lèi)固醇用于生產(chǎn)治療和/或預(yù)防與類(lèi)固醇有關(guān)的絕經(jīng)后治療的副作用的藥物的應(yīng)用。
20.選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯的類(lèi)固醇用于生產(chǎn)治療和/或預(yù)防口服避孕藥的副作用的藥物的應(yīng)用。
21.選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯的類(lèi)固醇用于生產(chǎn)治療和/或預(yù)防下述任何一種與類(lèi)固醇有關(guān)的功能紊亂的藥物的應(yīng)用，所述功能紊亂包括癲癇、偏頭痛、抑郁、進(jìn)食障礙、認(rèn)知障礙、運(yùn)動(dòng)障礙、睡眠障礙、與壓力有關(guān)的功能障礙、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的功能紊亂、經(jīng)前綜合征、經(jīng)前煩躁癥；與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的功能紊亂鎮(zhèn)靜、疲倦、記憶障礙、學(xué)習(xí)障礙、注意力集中困難、運(yùn)動(dòng)功能障礙、笨拙、胃口增加和對(duì)食物的強(qiáng)烈欲望、情緒消極如緊張、易怒和抑郁、經(jīng)前綜合征、經(jīng)前癲癇小發(fā)作惡化、壓力敏感、注意力集中困難、沖動(dòng)失控和抑郁；物質(zhì)依賴、與月經(jīng)周期關(guān)聯(lián)的癲癇；與壓力有關(guān)的功能紊亂如與壓力有關(guān)的情緒改變、抑郁、偏頭痛、疲倦和特別是與壓力有關(guān)的疲倦，與壓力有關(guān)的記憶改變、鎮(zhèn)靜、記憶障礙、學(xué)習(xí)障礙、注意力集中困難、運(yùn)動(dòng)功能障礙、笨拙、胃口增加和對(duì)食物的強(qiáng)烈欲望、情緒消極如緊張、易怒和抑郁、癲癇小發(fā)作惡化、壓力敏感、注意力集中困難、沖動(dòng)失控、物質(zhì)依賴、與壓力有關(guān)的癲癇、與壓力有關(guān)的阿爾茨海默氏癡呆惡化、產(chǎn)后情緒改變或它們的組合。
22.選自3β，20β-二羥基-5α-孕烷，3β，20α-二羥基-5β-孕烷，3β-羥基-5β-孕烷-20-酮，3β，21-二羥基-5β-孕烷-20-酮，3β-羥基-5α-孕烷-11，20-二酮，3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-乙酸酯和3β-羥基-5α-孕烷-20-酮-硫酸酯的類(lèi)固醇用于生產(chǎn)預(yù)防用類(lèi)固醇激素作為口服避孕藥治療、絕經(jīng)后激素替代治療、炎性疾病的類(lèi)固醇治療期間和攝取促蛋白合成/產(chǎn)生雄性征的類(lèi)固醇期間產(chǎn)生的副作用的藥物的應(yīng)用。
23.一種用于篩分和識(shí)別備選藥物的方法，其特點(diǎn)為該方法包含依據(jù)阻斷3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇對(duì)GABA-A受體作用從而阻斷3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇消極作用的發(fā)展的能力來(lái)篩選物質(zhì)的步驟。
24.一種用于篩分和識(shí)別備選藥物的方法，其特點(diǎn)為該方法包含將與能阻斷3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇對(duì)GABA-A受體的作用從而阻斷3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇消極作用的發(fā)展的物質(zhì)的結(jié)構(gòu)或功能相似性作為選擇標(biāo)準(zhǔn)的步驟。
25.一種合成備選藥物的方法，其特點(diǎn)為將它們阻斷3α-羥基-5α/β-類(lèi)固醇對(duì)GABA-A受體的作用的能力作為確認(rèn)合成終產(chǎn)物的標(biāo)準(zhǔn)。
26.一種化合物，所述化合物依據(jù)權(quán)利要求23至25中任意一項(xiàng)所述的方法獲得。
全文摘要
在3β位以羥基或硫酸基的形式存在氫供體的類(lèi)固醇化合物作為3α－羥基－孕烷－類(lèi)固醇作用的有效的阻斷劑，因而具有作為用于預(yù)防和/或治療與類(lèi)固醇有關(guān)CNS功能紊亂的治療藥物的效用。公開(kāi)了以給予這些物質(zhì)為基礎(chǔ)的治療方法，并且提出所述物質(zhì)單獨(dú)或聯(lián)合用于制造用于治療許多特定的由類(lèi)固醇引發(fā)的CNS功能紊亂的藥物。
文檔編號(hào)A61P25/28GK1607954SQ02826275
公開(kāi)日2005年4月20日 申請(qǐng)日期2002年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2001年12月27日
發(fā)明者T·貝克斯特倫, P·倫格倫, 王明德, I·-M·約翰松 申請(qǐng)人:梅克芳股份公司