專利名稱：具有作為激酶抑制劑的活性的氨基吲唑衍生物、它們的制備方法和含有它們的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及具有作為激酶抑制劑的活性的氨基吲唑衍生物，更具體涉及3-氨基-吲唑衍生物，它們的制備方法，包含它們的藥物組合物和它們作為治療劑、特別是作為治療與蛋白激酶失調有關的疾病的治療劑的應用。
蛋白激酶(Pks)功能異常是多種疾病的標志。人類癌癥所涉及的大部分致癌基因和原癌基因編碼Pks。PKs活性增加還涉及多種非惡性疾病，如良性前列腺增生、家族性腺瘤病、息肉病、神經纖維瘤病、牛皮癬、與動脈粥樣硬化有關的血管平滑細胞增殖、肺纖維化、關節(jié)炎腎小球性腎炎和術后狹窄與再狹窄。
Pks還涉及炎癥和病毒與寄生蟲的增殖。PKs還在神經變性疾病的病因和形成中起主要作用。
關于PKs功能異?；蚴д{的一般性參考資料，例如參見CurrentOpinion in Chemical Biology 1999，3，459-465。
本發(fā)明的另一個目的是提供在治療中用作抗由蛋白激酶活性失調引起和/或與蛋白激酶活性失調有關的許多疾病的試劑的化合物。
本發(fā)明的另一目的是提供賦有多蛋白激酶抑制活性的化合物。
本發(fā)明者現已發(fā)現某些3-氨基吲唑衍生物、下文稱為吲唑衍生物或吲唑賦有多蛋白激酶抑制活性，因而用于與蛋白激酶失調有關的疾病的治療。
更為具體地，本發(fā)明的吲唑用于治療多種癌，包括但不限于癌癥如膀胱、乳房、結腸、腎、肝臟、肺(包括小細胞肺癌)、食道、膽汁-膀胱、卵巢、胰腺、胃、宮頸、甲狀腺、前列腺和皮膚癌(包括鱗狀細胞癌)；淋巴系造血腫瘤，包括白血病、急性淋巴細胞白血病、急性成淋巴細胞白血病、B-細胞淋巴瘤、T-細胞-淋巴瘤、Hodgkin淋巴瘤、非Hodgkin淋巴瘤、毛細胞淋巴瘤和Burkett淋巴瘤；骨髓系造血腫瘤，包括急性和慢性骨髓性白血病、骨髓增生異常綜合征和前髓細胞白血??；間充質源腫瘤，包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤；中樞和外周神經系統腫瘤，包括星形細胞瘤、成神經細胞瘤、膠質瘤和神經鞘瘤；其它腫瘤，包括黑素瘤、精原細胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、著色性干皮病、角質黃色瘤、甲狀腺濾泡癌和卡波西肉瘤。
由于PKs在細胞增殖調節(jié)中的關鍵作用，這些吲唑還用于治療多種細胞增殖疾病，例如良性前列腺增生、家族性腺瘤病、息肉病、神經纖維瘤病、牛皮癬、與動脈粥樣硬化有關的血管平滑細胞增殖、肺纖維化、關節(jié)炎腎小球性腎炎和術后狹窄與再狹窄。
cdk5涉及tau蛋白的磷酸化這一事實(J.Biochem.，117，741-749，1995)表明，本發(fā)明的化合物可以用于治療阿爾茨海默氏病。
本發(fā)明化合物作為細胞凋亡調節(jié)劑，還可以用于治療癌、病毒感染、預防HIV感染個體的AIDS發(fā)展、自身免疫疾病和神經變性疾病。
本發(fā)明的化合物可以用于抑制腫瘤血管生成和轉移。
本發(fā)明的化合物可以用作細胞周期蛋白依賴性激酶(cdk)抑制劑，還可以作為諸如以下的其它蛋白激酶的抑制劑不同同工型的蛋白激酶C、Met、PAK-4、PAK-5、ZC-1、STLK-2、DDR-2、Aurora1、Aurora2、BUb-1、PLK、Chk1、Chk2、HER2、rafl、MEK1、MAPK、EGF-R、PDGF-R、FGF-R、IGF-R、VEGF-R、PI3K、weel激酶、Src、Abl、Akt、ILK、MK-2、IKK-2、Cdc7、Nek，因而有效地治療與其它蛋白激酶有關的疾病。
許多吲唑和氨基吲唑在本領域中已知作為合成或化學中間產物、作為聚合物穩(wěn)定劑、作為治療劑，甚至作為蛋白激酶抑制劑。
例如，在Smithkline Co.的US 28939(US 3,133,081再發(fā)行)中公開了某些烷基氨基-吲唑賦有肌肉松馳劑和止痛活性；其中有3-甲基氨基-5-三氟甲基-吲唑和3-二乙基氨基-5-三氟甲基-吲唑。
在Bioorg.Med.Chem.Lett.(1998)；8(7)，715-720公開了具有3-氨基吲唑基團的環(huán)狀N，N′-脲衍生物作為HIV蛋白酶抑制劑。
在Bayer Co.的WO 99/32111中公開了二芳基-脲衍生物可在除癌之外的疾病的治療中用作p38激酶抑制劑，其中具體例舉的化合物為N-[4-[(吡啶基-4-基)氧]苯基]-N′-[6-氯-(吲唑-3-基)]-脲。
在Pfizer Ltd的WO 91/17162中公開了進一步被芳基部分取代，例如被吲哚基-氨基羰基-苯基的咪唑并吡啶衍生物作為一種血小板活化因子(PAF)拮抗劑。
在Agouron Pharmaceuticals Inc.的WO 01/02369中公開了進一步在3位被除氨基之外的基團取代的吲唑化合物或其衍生物具有蛋白激酶抑制活性。
在Hoechst的US 5,714,514中公開巰基-氰基丙烯?；被?或烷硫基-氰基丙烯酰基-氨基-雜環(huán)用于治療與細胞生長增加有關的疾病。
在Vertex Pharmaceuticals Inc的WO 99/65870公開1-?；被?3-(N-芳基磺酰基-N-烷氧基氨基)-2-羥基-丙烷衍生物作為HIV天冬氨?；鞍酌敢种苿?，其中所述芳基部分還包括吲唑基團。
某些其它特定的吲唑衍生物已知作為治療劑，具體而言，公開了3-[3-(嗎啉-4-基)丙酰基氨基]-吲唑、3-(N，N-二乙基氨基)-丙基氨基-5-甲氧基-吲唑、3-[(3-甲基)嗎啉-4-基]-丙基氨基-5-甲氧基-吲唑、3-(N，N-二乙基氨基)-丙基氨基-5-甲基-吲唑和3-[(3-甲基)嗎啉-4-基]-丙基氨基-5-甲基-吲唑具有止痛和抗炎活性[參見Asahi Chemical Industry的US 4,751,302和JP-A-60061569]；3-[(2-羥基苯基)羰基氨基]-吲唑被公開作為抗微生物劑[參見Pharmazie(1990)，45(6)，441-2]。在本領域中已知許多其它吲唑，主要公開作為化學中間產物或用于除治療之外的目的，例如聚合物穩(wěn)定劑、漂白劑、染料等。
其中有3-(乙氧基羰基氨基)-吲唑[參見Chemical Abstracts92(1980)215400]；3-乙?；被?吲唑和3-苯甲?；被?吲唑[參見J.Org.Chem.(1996)，61(24)，8397-8401]；3-丁?；被?吲唑、3-[(4-氯苯基)羰基氨基]-吲唑、3-[(4-甲基-苯基)羰基氨基]吲唑和3-[(3，3-二苯基)丙酰基氨基]吲唑[參見Acta Chim.Hung.(1990)，127(6)，795-802]；3-[(3，5-二甲基-異噁唑-4-基)羰基氨基]-吲唑[參見J.Heterocyl.Chem.(1974)，11(4)，623-6]；3-[(4-硝基苯基)羰基氨基]-吲唑和3-(苯基乙?；被?-吲唑[參見J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1(1982)，(3)，759-66]；3-[(2-氨基苯基)羰基氨基]-吲唑和3-[(2-硝基苯基)羰基氨基]-吲唑[雜環(huán)(1996)，43(11)，2385-2396]；3-[(4-氯-2-硝基苯基)羰基-氨基]-吲唑、3-[(2-氨基-4-氯苯基)羰基氨基]-吲唑、3-[(2-氨基-5-氯苯基)羰基氨基]-吲唑和3-[(3-氯-6-硝基苯基)羰基氨基]-吲唑[參見Arch.Pharm.(1999)，332(9)，317-320]；3-(乙?；被?-5-氨基-吲唑[參見Farbwerke Hoechst A.G.的US3,316,207]；3-二甲基氨基-5-三氟甲基-吲唑[參見Bayer A.G.的DE-A-2458965]；3-苯基氨基-6-甲基-吲唑、3-苯基氨基-、3-(4-氯)苯基氨基-、3-(4-甲基)苯基氨基-、3-(3-甲基)苯基氨基-和3-(4-氨基磺?；?苯基氨基-5-甲基-吲唑[參見ChemicalAbstracts 78(1973)136158]；3-[(1-羥基-2-甲基)-2-丙基]氨基-6，7-二甲氧基-吲唑[參見Ortho PharmaceuticalCo.的US 4,864,032]。
此外，在Asahi Chemical Industry Co的US 4,751,302中公開了3-苯二甲酰亞氨基-吲唑和4-氯-3-苯二甲酰亞氨基-吲唑作為制備具有止痛和抗炎活性的藥物的合成中間產物。
在Heisei的JP-A-08022109中公開磺?；被胚颍唧w為長鏈烷氧基苯基磺?；被?吲唑為一種青色染料形成化合物。
Vertex Pharmaceuticals Inc.還在如下大量的專利申請中公開了一大類用作蛋白激酶抑制劑的吡唑化合物WO02/62789、WO02/59112、WO02/59111、WO02/57259、WO02/50066、WO02/50065、WO02/22608、WO02/22607、WO02/22606、WO02/22605、WO02/22604、WO02/22603和WO02/22601。
因此，本發(fā)明提供一種用于治療由蛋白激酶活性改變導致的疾病和/或與蛋白激酶活性改變有關的疾病的方法，所述方法采用給需要所述方法的哺乳動物施用有效量的式(I)代表的氨基吲唑或其藥學上可接受的鹽
其中R選自-NHR′、-NR′R″、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHCONR′R″、-NHSO2R′或-NHCOOR′，其中R′和R″各自獨立地為選自以下的任選進一步被取代的基團直鏈或支鏈C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基或炔基、C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或6元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基；或者R為下式(II)的苯二甲酰亞氨基， 任何R1，如果存在的話，在吲唑環(huán)的5位或6位，并代表如以上關于R′或R″所述的任選進一步被取代的基團；m為0或1。
在上述方法的一個優(yōu)選的實施方案中，由蛋白激酶活性改變導致的疾病和/或與蛋白激酶活性改變有關的疾病選自癌、細胞增殖疾病、阿爾茨海默氏病、病毒感染、自身免疫疾病和神經變性疾病。
可以治療的具體的癌種類包括癌癥、鱗狀細胞癌、骨髓或淋巴系造血腫瘤、間充質源腫瘤、中樞和外周神經系統腫瘤、黑素瘤、精原細胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、著色性干皮病、角質黃色瘤、甲狀腺濾泡癌和卡波西肉瘤。
在上述的本發(fā)明的其它優(yōu)選的實施方案中，所述的細胞增殖疾病選自良性前列腺增生、家族性腺瘤病息肉病、神經纖維瘤病、牛皮癬、與動脈粥樣硬化有關的血管平滑細胞增殖、肺纖維化、關節(jié)炎腎小球性腎炎和術后狹窄與再狹窄。
此外，本發(fā)明的方法的目的還提供腫瘤血管生成和轉移抑制作用。
本發(fā)明還提供一種式(I)代表的氨基吲唑衍生物或其藥學上可接受的鹽 其中R選自-NHR′、-NR′R″、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHCONR′R″、-NHSO2R′或-NHCOOR′，其中R′和R″各自獨立地為選自以下的任選進一步被取代的基團直鏈或支鏈C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基或炔基、C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或6元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基；或者R為下式(II)的苯二甲酰亞氨基， 任何R1，如果存在的話，在吲唑環(huán)的5位或6位，并代表如以上關于R′或R″所述的任選進一步被取代的基團；m為0或1；附帶條件是
a)如果R為-NHCOR′而m為0，則R′不為甲基、正丙基、芐基、2，2-二苯基乙基、3，5-二甲基-異噁唑-4-基、2-(嗎啉-4-基)乙基或者任選被氯、羥基、甲基、硝基或氨基取代的苯基；b)如果吲唑在5位或6位被甲氧基取代，則R不為3-(N，N-二乙基氨基)丙基氨基、3-[(3-甲基)嗎啉-4-基]丙基氨基或1-羥基-2-甲基-2-丙基氨基；c)排除化合物3-苯二甲酰亞氨基-吲唑。
本發(fā)明目標式(I)的化合物可以具有不對稱碳原子，因而可以作為外消旋混合物或作為單獨的光學異構體存在。
因此，式(I)的化合物的代謝物和藥學上可接受的生物前體(或者稱為前藥)的所有可能的異構體和它們的混合物以及任何包括它們的治療方法也在本發(fā)明的范圍之內。
在本說明書中，除非另外指出，術語直鏈或支鏈C1-C6烷基意指諸如以下的基團甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基等等。
術語直鏈或支鏈C2-C6鏈烯基或炔基意指具有雙鍵或叁鍵的不飽和烴鏈，例如乙烯基、乙炔基、1-丙烯基、烯丙基、1-或2-丙炔基、1-、2-或3-丁烯基、1-、2-或3-丁炔基、戊烯基、戊炔基、己烯基、己炔基等等。
術語C3-C6環(huán)烷基意指諸如以下的基團環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。
術語芳基意指具有1-4個彼此稠合或通過單鍵連接的環(huán)部分的一、二或多碳環(huán)和雜環(huán)烴，其中至少一個碳環(huán)或雜環(huán)為芳環(huán)。
例如芳基的非限制性實例為苯基、茚滿基、聯苯基、α-或β-萘基、芴基、9，10-二氫蒽基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚基、咪唑基、咪唑并吡啶基、1，2-亞甲二氧基苯基、噻唑基、異噻唑基、吡咯基、吡咯基-苯基、呋喃基、苯基-呋喃基、苯并四氫呋喃基、噁唑基、異噁唑基、吡唑基、苯并吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、異二氫吲哚基、苯并咪唑基、四唑基、四唑基苯基、吡咯烷基-四唑基、異二氫吲哚基-苯基、喹啉基、異喹啉基、2，6-二苯基-吡啶基、喹喔啉基、吡嗪基、苯基-喹啉基、苯并呋咱基、1，2，3-三唑基、1-苯基-1，2，3-三唑基等等。
因此術語5或6元雜環(huán)基包括還稱為芳基的芳香雜環(huán)基團，它意指飽和或部分不飽和5或6元碳環(huán)，其中一個或多個碳原子被1-3個雜原子如氮、氧和硫取代。
任選苯稠合或進一步取代的5或6元雜環(huán)基的實例為1，3-二氧戊環(huán)、吡喃、吡咯烷、吡咯啉、咪唑烷、吡唑烷、吡唑啉、哌啶、哌嗪、嗎啉、四氫呋喃等等。
根據以上提供的R1、R′和R″的含義，任何以上的基團可以進一步任選在任何自由位置被一個或多個基團，如1-6個基團取代，該基團選自鹵素、硝基、氧代基團(＝O)、羧基、氰基、烷基、全氟代烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、氨基及其衍生物，例如烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、脲基、烷基脲基或芳基脲基；羰基氨基及其衍生物，例如甲?；被?、烷基羰基氨基、鏈烯基羰基氨基、芳基羰基氨基、烷氧基羰基氨基；羥基及其衍生物，例如烷氧基、芳氧基、烷基羰基氧、芳基羰基氧、環(huán)鏈烯氧基或亞烷基氨基氧基；羰基及其衍生物，例如烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、環(huán)烷氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基；硫化衍生物，例如烷硫基、芳硫基、烷基磺?；?、芳基磺?；?、烷基亞磺?；⒎蓟鶃喕酋；?、芳基磺酰氧基、氨基磺酰基、烷基氨基磺?；蚨榛被酋；?br> 如果合適的話，以上每一個基團依次可以進一步被一個或多個上述的基團取代。
在這些后面的基團中，除非本說明書另外特指，術語鹵素原子意指氟、氯、溴或碘原子。
術語全氟代烷基意指以上定義的直鏈或支鏈C1-C6烷基，其中多于一個氫原子被氟原子取代。
例如，全氟代烷基的實例為三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、1，2-二氟乙基、1，1，1，3，3，3-六氟丙基-2-基等等。
根據以上的全部，本領域技術人員清楚地看出任何名稱確定為復合名稱的基團，例如環(huán)烷基烷基、芳基烷基、雜環(huán)基烷基、烷氧基、烷硫基、芳氧基、芳基烷氧基、雜環(huán)氧基、雜環(huán)基烷氧基、烷基羰基氧等等應意指對它們來源的部分所做的常規(guī)解釋。例如，術語雜環(huán)基-烷基代表進一步被以上定義的雜環(huán)基取代的烷基。
式(I)的化合物的藥學上可接受的鹽是與諸如以下的無機或有機酸形成的酸加成鹽硝酸、鹽酸、氫溴酸、硫酸、高氯酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、乳酸、草酸、丙二酸、蘋果酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、苦杏仁酸、甲磺酸、羥乙磺酸和水楊酸，以及與諸如以下的無機或有機堿形成的鹽堿金屬或堿土金屬，特別是鈉、鉀、鈣或鎂氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽、無環(huán)或環(huán)胺，優(yōu)選甲基胺、乙基胺、二乙基胺、三乙基胺或哌啶。
根據以上的全部，本領域技術人員清楚地看出，在式(I)的化合物中，當m為0時，不存在-OR1基團，從而不存在通過氧原子與吲唑骨架連接的R1基團。因此，在這種情況下，根據以下報道的編號體系的5位或6位未被取代(或者氫取代)。
另一方面，當m為1時，在吲唑環(huán)的5位或6位中的任一位置存在一個-OR1基團(從而存在R1)。
第一類優(yōu)選的本發(fā)明的化合物由式(I)的化合物代表，其中R為基團-NHR′或-NR′R″，而R′、R″、R1和m如以上定義。
在此類中更優(yōu)選這樣的化合物其中m為1，而R1在吲唑環(huán)的5位或6位中的任一位置。
甚至更優(yōu)選這樣的化合物其中R1、R′和R″各自獨立地選自C2-C6鏈烯基，C3-C6炔基，芳基，芳基C1-C6烷基，具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或7元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基。
其它類優(yōu)選的本發(fā)明的化合物由式(I)的化合物代表，其中R為基團-NHCOR′，而R′、R1和m如以上定義。
在此類中更優(yōu)選這樣的化合物其中m為1，而R1在吲唑環(huán)的5位或6位中的任一位置。
甚至更優(yōu)選這樣的化合物其中R1和R′各自獨立地選自C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或7元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基。
其它類優(yōu)選的本發(fā)明的化合物由式(I)的化合物代表，其中R為基團-NHCONHR′或-NHCONR′R″，而R′、R″、R1和m如以上定義。
在此類中更優(yōu)選這樣的化合物其中m為1，而R1在吲唑環(huán)的5位或6位中的任一位置。
甚至更優(yōu)選這樣的化合物其中R1、R′和R″各自獨立地選自C1-C6烷基，C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或7元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基。
其它類優(yōu)選的本發(fā)明的化合物由式(I)的化合物代表，其中R為基團-NHSO2R′，而R′、R1和m如以上定義。
在此類中更優(yōu)選這樣的化合物其中m為1，而R1在吲唑環(huán)的5位或6位中的任一位置。
甚至更優(yōu)選這樣的化合物其中R1和R′各自獨立地選自C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或7元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基。
其它類優(yōu)選的本發(fā)明的化合物由式(I)的化合物代表，其中R為基團-NHCOOR′，而R′、R1和m如以上定義。
在此類中更優(yōu)選這樣的化合物其中m為1，而R1在吲唑環(huán)的5位或6位中的任一位置。
甚至更優(yōu)選這樣的化合物其中R1和′各自獨立地選自C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或7元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基。
其它類優(yōu)選的本發(fā)明的化合物由式(I)的化合物代表，其中R為式(II)的苯二甲酰亞氨基，而R1和m如以上定義。
在此類中更優(yōu)選這樣的化合物其中m為1，而R1在吲唑環(huán)的5位或6位中的任一位置。
甚至更優(yōu)選這樣的化合物其中R1選自C2-C6鏈烯基、C3-C6炔基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或7元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基。
任選為藥學上可接受的鹽的形式的式(I)的化合物的特定的實例在實驗部分報道。
如上述，本發(fā)明的另一個目的是一種用于制備式(I)的氨基吲唑衍生物的方法。
因此，式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽(其中R如以上定義，但不為式(II)的苯二甲酰亞氨基)可以通過包括以下步驟的方法獲得a)在酸性條件下使式(III)的2-氨基-芐腈衍生物與亞硝酸鈉在氯化亞錫存在下反應得到式(IV)的化合物
其中m如以上定義，且R_如果存在的話為甲基或芐基； b)使式(IV)的化合物與鄰苯二甲酸酐反應得到式(V)的化合物 c)使式(V)的化合物與適宜的醚裂解試劑反應得到對應的式(VI)的羥基衍生物 d)使式(VI)的化合物與適宜的甲硅烷化試劑(Riv)3SiZ反應得到式(VII)的化合物，其中各Riv相同或不同，為直鏈或支鏈C1-C4烷基，并且Z為鹵原子，
e)使式(VII)的化合物與適宜的可任選地擔載在適宜的聚合樹脂上的吲唑氮保護劑反應得到式(VIII)的化合物， 其中Q為上述的保護基或者代表載體樹脂；f)使式(VIII)的化合物與肼一水合物反應得到式(IX)的化合物， 并使式(IX)的化合物根據以下步驟g.1)或g.2)中的任一步驟進行反應；g.1)與適宜的式R′-Z(X)、R′-COZ(XI)、R′-NCO(XII)、R′-SO2Z(XIII)或R′OCOZ(XIV)的試劑反應，其中R′如以上定義，而Z代表鹵原子或適宜的離去基團，從而得到對應的式(XV)的化合物 其中R為基團-NHR′、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHSO2R′或-NHCOOR′，而且如果需要的話，使R為-NHR′或-NHCONHR′基團的化合物與下式的化合物反應，R″Z (XVI)其中R″和Z如以上定義，從而得到式(XV)的化合物，其中R為基團-NR′R″或-NHCONR′R″；g.2)與(XVII)的化合物在4-硝基苯基氯甲酸酯存在下反應R′R″NH (XVII)其中R′和R″如以上定義，從而得到對應的式(XV)的化合物，其中R為基團-NHCONR′R″；h)使任何以上式(XV)的化合物與四丁基氟化銨反應得到式(XVIII)的化合物
i)使式(XVIII)的化合物與下式的衍生物反應，R1-Z (XIX)其中R1如以上定義，并且Z為鹵原子、適宜的離去基團或羥基，從而得以式(XX)的化合物； j)將式(XX)的化合物脫保護，或者可選擇地將聚合樹脂裂解以得到目標式(I)的化合物，而且如果需要的話，將它轉化成另一種式(I)的化合物和/或其藥學上可接受的鹽。
根據以上的全部，本領域技術人員清楚看到如果根據以上方法制備的式(I)的化合物是作為一種異構體的混合物得到的話，則根據常規(guī)技術使它們成為式(I)的單一異構體的分離仍在本發(fā)明的范圍之內。
類似地，根據本技術中已知的方法使對應的鹽成為游離化合物(I)的轉化仍在本發(fā)明的范圍之內。
根據所述方法的步驟a)，將式(III)的化合物、優(yōu)選2-氨基-4-甲氧基-芐腈或2-氨基-5-芐氧基-芐腈與亞硝酸鈉反應。在氯化亞錫存在下和酸性條件如鹽酸或硫酸下將重氮鹽還原。
所述反應可以在水和適宜的溶劑如甲醇、乙醇等的混合物中，在大約0℃至大約10℃的溫度范圍內完成。
所述反應可以通過以下步驟進行將亞硝酸鈉加到在濃鹽酸中的式(III)化合物的溶液中，同時保持攪拌大約1小時至3小時的時間。
然后可以將所述的懸浮液轉移滴到在濃鹽酸中的氯化亞錫溶液中，并在大約0℃下冷卻，同時保持攪拌適宜的時間，例如在約4小時至大約6小時。
根據所述方法的步驟b)，式(IV)的化合物與鄰苯二甲酸酐根據常規(guī)方法進行反應以制備苯二甲酰亞氨基衍生物。所述反應可以在不同的溶劑中完成，包括氯仿、乙腈、二噁烷、四氫呋喃、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等等；優(yōu)選與乙腈反應。在這方面，將鄰苯二甲酸酐加到式(V)化合物的溶液中。然后將溫度變成適宜的值，例如大約70℃至大約100℃，優(yōu)選80℃。攪拌在大約1小時至大約4小時的適宜時間內完成。
根據所述方法的步驟c)，通過與適宜的醚裂解試劑如吡啶鎓鹽酸鹽、碘代三甲基硅烷或三溴化硼反應而將式(V)的化合物轉化成對應的羥基衍生物。所述反應可以在凈氯化吡啶鎓中完成，或者與其它試劑一起在二氯甲烷或氯仿中完成。優(yōu)選使用凈氯化吡啶鎓。
在這方面，將氯化吡啶鎓和式(V)的化合物的混合物帶入大約180℃至大約200℃的適宜溫度，同時在大約1小時至大約3小時的時間內完成攪拌。
根據所述方法的步驟d)，將式(VI)的化合物與甲硅烷基衍生物、優(yōu)選叔丁基-二甲基-甲硅烷基氯化物(TBDMSCl)反應，以得到對應的甲硅烷基醚衍生物。所述的反應可以在適宜的堿存在下完成，所述堿如1，5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯(DBN)，或者更優(yōu)選1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)。
在這方面，將叔丁基-二甲基-甲硅烷基氯化物(TBDMSCl)加到式(VI)的化合物的溶液。所述反應在不同的溶劑如二氯甲醇、乙腈、二甲基甲酰胺等中完成，溶劑優(yōu)選二氯甲烷。溫度范圍可以為大約20℃至大約40℃，同時保持攪拌大約1小時至大約4小時。
根據所述方法的步驟e)，將如此得到的式(VII)的吲唑衍生物在吲唑氮原子上進行保護，或者可選擇地擔載在適宜的聚合樹脂上。
所述的保護反應可以根據本領域中已知的常規(guī)方法完成，例如通過使用適宜的氮保護基團，例如叔丁氧基-羰基(BOC)基團。
在相同的位置，可選擇地，式(VII)的吲唑可以方便地粘附到惰性聚合物載體，例如2-氯-三苯甲基氯化物樹脂、三苯甲基氯化物樹脂、對硝基苯基碳酸酯Wang樹脂或溴-4-甲氧基苯基)甲基聚苯乙烯，它們在本領域中都是公知的。
顯然，此相同的選擇特別有利于在固相合成(SPS)條件下制備式(I)的化合物，所述條件一般在根據諸如以下所述的組合化學技術制備化合物庫時采用。
與樹脂的反應在存在稍微過量的適宜的堿，例如胺如二異丙基乙基胺(DIPEA)，三乙基胺(TEA)，1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)或2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氫化-1，3，2-二氮雜-磷雜苯(phosphorine)的情況下，在適宜的溶劑如二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等等中完成。
優(yōu)選反應在二氯甲烷中在大約20℃的溫度下完成。
反應可以通過以下步驟進行將堿和式(VII)的化合物加到樹脂懸浮液中，并在大約20℃的溫度下攪拌適宜的時間，例如至多24小時。
根據所述方法的步驟f)，用肼一水合物處理式(VIII)的衍生物以裂解苯二甲酰亞氨基。
反應優(yōu)選通過使用大大過量，例如至多10當量的肼水合物或一水合物，在存在適宜的溶劑如鹵代烴、低級醇及其混合物的情況下完成。
溶劑為二氯甲烷、乙醇及其混合物。
反應可以通過以下方法完成將肼加到式(VIII)的化合物的溶液，并在大約20℃至大約45℃的溫度下攪拌適宜的時間。優(yōu)選將反應混合物在大約40℃下保持攪拌大約16小時。
根據所述方法的步驟g.1)或g.2)中的任一步驟，根據已知的方法使式(IX)的氨基衍生物與適宜的式(X)-(XIV)的試劑反應，或者與式(XVII)的化合物反應。
典型地，式(IX)的化合物可以與式(X)的化合物反應得到對應的-NHR′衍生物，其中R′如以上定義；與式(XI)的化合物反應得到對應的-NHCOR′酰基衍生物；與式(XII)的化合物反應得到對應的-NHCONHR′脲基衍生物；與式(XIII)的化合物反應得到對應的-NHSO2R′衍生物；與式(XIV)的化合物反應得到對應的-NHCOOR′衍生物。
可選擇地，式(IX)的化合物可以與式R′R″NH(XVII)的化合物，在4-硝基苯基氯甲酸酯存在下反應得到對應的脲基-NHCONR′R″衍生物。
任何一個以上的反應根據在官能化氨基衍生物的制備中所用的常規(guī)方法，以對應的胺為原料完成。
優(yōu)選在式(X)的化合物中，Z代表適宜的離去基團，例如碘、溴或硼酸；在式(XI)、(XIII)或(XIV)的化合物中，Z代表鹵原子，甚至更優(yōu)選氯原子。
除了以上化合物以外，本領域技術清楚地看出如果需要的話，任何一種如此制備和其中的R代表基團-NHR′或-NHCONHR′的以上式(XV)的化合物可以進一步轉化成為對應的R分別為-NR′R″或-NHCONR′R″基團的衍生物。
而且這些反應根據常規(guī)方法，通過適宜的式(XV)的中間產物化合物和適宜的式(XVI)的衍生物反應而進行。
在這方面，將式(IX)的化合物溶于適宜的溶劑如二氯甲烷、二甲基甲酰胺、四氫呋喃、二噁烷等，并加入適宜的堿如三乙基胺、二異丙基乙基胺、碳酸鈉等等。然后加入通式(XI)、(XIII)或(XIV)的化合物，并將混合物在范圍為大約20℃至大約80℃的溫度下攪拌大約2小時至大約15小時的時間。當使用通式(XII)的異氰酸酯時，反應條件與以上相同，除了不需要堿。在所有這些反應中，可以任選使用適宜的催化劑如二甲基氨基吡啶。
當根據已知的方法使式(XII)的化合物與式(X)的化合物反應得到對應的官能化的式(XIV)的氨基衍生物時，可以適用基本上類似的方法。
例如，可以根據常規(guī)方法進行操作，使式(IX)的化合物可以與式(X)的衍生物(其中Z為鹵素，例如碘或溴，而R′為芳基烷基如芐基)反應。
另一方面，可以使式(IX)的化合物與式(X)的衍生物(其中Z為溴原子，而R′為芳基)在鈀催化劑，例如三(二亞芐基丙酮)二鈀，乙酸鈀或1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯鈀存在下，通過加入適宜的堿如叔丁醇鉀、碳酸銫等和鈀配基如2，2′-雙(二苯基膦基)-1，1′-聯萘基(binaphthyl)，三鄰甲苯基膦、三正丁基膦、三叔丁基膦等等而進行反應，以得到對應的式(XV)的衍生物。
在這方面，將式(IX)的化合物懸浮在適宜的無水溶劑如甲苯、N-甲基-2-吡咯烷酮、二甲氧基乙烷、二噁烷等等，并將式(X)的化合物、催化劑、堿和配基加到其中。然后使懸浮液變?yōu)榉秶鸀榇蠹s50℃至大約100℃的適宜的溫度，同時保持攪拌大約8小時至5小時。在惰性氣氛下完成反應。
根據所述方法的步驟h)，隨后使式(XV)的化合物與四丁基氟化銨反應得到對應的式(XVIII)的羥基衍生物。從而可以將化合物(XV)懸浮在無水溶劑如二噁烷、四氫呋喃等，并加入在適宜的溶劑中的四丁基氟化銨溶液。將溶液在范圍為大約20℃至大約50℃的溫度下攪拌大約2小時至大約16小時。
如此得到的式(XVIII)的產物可以進一步根據所述方法的步驟i)，與適宜的式(XIX)的衍生物進行反應。
更為具體地，與式(XIX)的化合物(其中Z為鹵原子如溴或氯或適宜的離去基團)的反應在堿如氫氧化鈉、氫化鈉、2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氫化-1，3，2-二氮雜-磷雜苯(phosphorine)或者更優(yōu)選的碳酸銫存在下完成，以得到對應的式(XX)的醚衍生物。
在這方面，將式(XVIII)的化合物懸浮在適宜的溶劑如二甲基乙酰胺、四氫呋喃、二噁烷或更優(yōu)選的二甲基甲酰胺中，并加入堿。
將混合物于大約20℃至大約80℃的溫度下攪拌大約5小時至大約36小時。
可選擇地，這些相同的式(XX)的化合物可以通過式(XVIII)的衍生物與式(XIX)的化合物(其中Z為羥基)在Mitsunobu操作條件下，例如在三苯基膦和偶氮二甲酸二異丙酯存在下反應而得到。
在這方面，將三苯基膦、偶氮二甲酸二異丙酯和通式(XIX)的化合物溶于適宜的溶劑如四氫呋喃、二噁烷等，并在適宜的堿如三乙基胺或二異丙基乙基胺存在下，將溶液轉到溶于適宜的溶劑如四氫呋喃，二噁烷等的式(XVIII)的化合物的混合物中。將混合物在范圍為0℃至20℃的溫度下攪拌在范圍為大約2小時至大約15小時的時間。
最后，根據所述方法的步驟j)，通過常規(guī)方法，在酸性條件下進行操作而在吲唑氮原子處將式(XX)的化合物脫保護。將式(XX)的化合物懸浮在適宜的溶劑如甲醇、乙醇等，并加入濃鹽酸溶液。將混合物在范圍為大約20℃至大約40℃、優(yōu)選大約20℃的溫度下攪拌大約5小時至大約15小時的適宜時間?？蛇x擇地，從載體樹脂上裂解此相同的式(XX)的中間體化合物。
樹脂裂解可以在三氟乙酸存在下完成以得到目標式(I)的化合物。將樹脂懸浮在處于二氯甲烷中的5-95％三氟乙酸溶液，并將混合物于大約20℃的溫度下攪拌大約5分鐘至大約3小時的時間。
根據以上的全部，本領域技術人員清楚地看到式(I)的化合物(其中R1和m如以上定義，而R為式(II)的苯二甲酰亞氨基)及其藥學上可接受的鹽可以根據類似的方法，通過使式(VIII)的化合物依照所述方法的步驟h)、i)和j)進行反應，以得到具有代替R基團的苯二甲酰亞氨基(II)的目標式(I)的衍生物。
優(yōu)選地，當制備式(I)的化合物(其中R為亞磺酰氨基(-NHSO2R′)基團)時，可以通過改變脫保護步驟的順序而方便地修改以上的合成途徑。
更為具體地，其中R為-NHSO2R′基團的式(I)的化合物可以優(yōu)選通過根據所述方法的步驟(e)所得的式(VIII)的中間體衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟(h)進行反應得到其中R為苯二甲酰亞氨基的式(XVIII)的化合物。
然后使如此得到的式(XVIII)的化合物與式(XIX)的衍生物根據所述方法的步驟(i)進行反應，以得到其中的R為苯二甲酰亞氨基的式(XX)的化合物。
然后使以上式(XX)的化合物與肼一水合物根據所述方法的步驟(f)進行反應，以得到其中的R為-NH2的式(XX)的化合物。
最后，接著使以上式(XX)的化合物與適宜的式(XIII)的衍生物根據所述方法的步驟(g.1)進行反應，以得到對應的其中的R代表所給出的-NHSO2R′基團的式(XX)的磺胺基衍生物，將此衍生物根據所述方法的步驟(j)進行脫保護或從樹脂上裂解。
當根據所述方法的任何變形制備式(I)的化合物而這些變形都意在本發(fā)明的范圍內時，可能引起不期望的副反應的兩種原料、試劑或其中間體中的任選的官能團需要根據常規(guī)的技術進行適宜地保護。
同樣，后者至游離的脫保護的化合物的轉化可以根據已知的方法完成。
式(I)的化合物的藥學上可接受的鹽或可選擇的來自它們的鹽的游離化合物都可以根據常規(guī)的方法得到。
式(III)的化合物是已知的，或者容易地根據已知的方法制備。例如，2-氨基-4-甲氧基-芐腈可以根據以Shionogi & Co名義申請的EP-A-257583所述進行操作而制備；2-氨基-5-芐氧基-芐腈可以如J.Heterocycl.Chem.(1972)，9(4)，759-73所述制備。
如果目前不能商購得到的話，所有式(X)、(XI)、(XII)、(XIII)、(XIV)、(XVI)、(XVII)和(XIX)的化合物是已知的，并容易地根據已知的方法制備。
同樣，任何包含甲硅烷基衍生物(Riv)3SiZ以及聚合樹脂的本發(fā)明方法的試劑可以商購得到或者容易地由可商購的來源制備。
如前述，本發(fā)明的式(I)的化合物方便地根據本領域中公知的組合化學技術，通過以連續(xù)的方式完成上述多種中間體之間的反應并在SPS條件下進行操作而制備。
所有優(yōu)選的本發(fā)明的化合物，可能合適的其藥學上可接受的鹽的形式，這里被方便地指代并定義為所述方法的產物，即作為可以通過給定的方法得到的式(I)的產物。
因此，這里可以通過以下步驟提供本發(fā)明的新的化合物及其藥學上可接受的鹽例如根據以上方法通過組合化學技術，首先使式(IXa)的化合物 與表I所述的每一種式(X)的化合物反應，以得到多種式(XVa)的化合物， 然后使每一種式(XVa)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，接著與每一種表II或III所述的式(XIX)的衍生物反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
還可以通過以下步驟提供本發(fā)明的新的化合物及其藥學上可接受的鹽例如根據以上方法通過組合化學技術，首先使式(IXb)的化合物 與表I所述的每一種式(X)的化合物反應，以得到多種式(XVa)的化合物，
然后使每一種式(XVb)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與表II或III所述的每一種式(XIX)的衍生物反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
而且可以通過以下步驟提供本發(fā)明的新的化合物及其藥學上可接受的鹽例如根據以上方法通過組合化學技術，首先使式(IXa)的化合物 與表IV所述的每一種式(XI)的化合物反應，以得到多種式(Xvc)的衍生物， 然后使每一種式(XVc)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與表II或III所述的每一種式(XIX)的衍生物反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
還可以通過以下步驟得到本發(fā)明的新的化合物及其藥學上可接受的鹽例如根據以上方法通過組合化學技術，首先使式(IXb)的化合物 與表IV所述的每一種式(XI)的化合物反應，以得到多種式(XVd)的化合物， 然后使每一種式(XVd)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與表II和III所述的每一種式(XIX)的衍生物進行反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
還可以通過以下步驟得到本發(fā)明的新的化合物及其藥學上可接受的鹽例如根據以上方法通過組合化學技術，首先使式(IXa)的化合物 與表V所述的每一種式(XII)的化合物反應，以得到多種式(XVe)的化合物，
然后使每一種式(XVe)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與表II和III所述的每一種式(XIX)的衍生物進行反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
還可以通過以下步驟得到本發(fā)明的新的化合物及其藥學上可接受的鹽例如根據以上方法通過組合化學技術，首先使式(IXb)的化合物 與表V所述的每一種式(XII)的化合物反應，以得到多種式(XVf)的化合物， 然后使每一種式(XVf)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與表II和III所述的每一種式(XIX)的衍生物進行反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
還可以通過以下步驟得到本發(fā)明的新的化合物及其藥學上可接受的鹽例如根據以上方法通過組合化學技術，首先使式(IXa)的化合物 與表VI所述的每一種式(XIII)的化合物反應，以得到多種式(XVg)的化合物， 然后使每一種式(XVg)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與表II和III所述的每一種式(XIX)的衍生物進行反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
還可以通過以下步驟得到本發(fā)明的新的化合物及其藥學上可接受的鹽例如根據以上方法通過組合化學技術，首先使式(IXb)的化合物 與表VI所述的每一種式(XIII)的化合物反應，以得到多種式(XVh)的化合物，
然后使每一種式(XVh)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與表II和III所述的每一種式(XIX)的衍生物進行反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
表I式R′-Z(X)的化合物
表II式R1-Z(XIX)的化合物，其中Z為溴
表III式R1-Z(XIX)的化合物，其中Z為羥基
表IV式R′COZ(XI)的化合物
表V式R′-NCO(XII)的化合物
表VI式R′-SO2Z(XIII)的化合物
因此，本發(fā)明的另一個目的是二種或更多種式(I)代表的氨基吲唑衍生物或其藥學上可接受的鹽的庫，
其中R選自-NHR′、-NR′R″、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHCONR′R″、-NHSO2R′或-NHCOOR′，其中R′和R″各自獨立地為選自以下的任選進一步被取代的基團直鏈或支鏈C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基或炔基、C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或6元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基；或者R為下式(II)的苯二甲酰亞氨基， 任何R1，如果存在的話，在吲唑環(huán)的5位或6位，并代表如以上關于R′或R″所述的任選進一步被取代的基團；m為0或1。
綜上所述，本領域技術人員清楚地看出一旦如此制備出例如由數千種式(I)的化合物組成的吲唑衍生物的庫，則該庫可以非常有利地用于針對給定的激酶進行篩選，如前面報道。
關于化合物庫及其作為篩選生物活性的工具的應用，參見J.Med.Chem.1999，42，2373-2382和Bioorg.Med.Chem.Lett.10(2000)，223-226。
藥理學式(I)的化合物具有作為蛋白激酶抑制劑的活性，因而例如用于限制腫瘤細胞增殖失調。
在治療中，它們可以用于治療不同的腫瘤，例如癌癥如乳腺癌、肺癌、膀胱癌、結腸癌、卵巢和子宮內膜腫瘤、肉瘤如軟組織和骨肉瘤以及血液惡性腫瘤如白血病。
此外，式(I)的化合物還用于治療其它細胞增殖疾病如牛皮癬、與動脈粥樣硬化有關的血管平滑細胞增殖和術后狹窄與再狹窄，以及治療阿爾茨海默氏病。
通過基于使用SPA技術(Amersham Pharmacia Biotech)的分析方法，測定推定的cdk/細胞周期蛋白抑制劑的抑制活性和所選擇的化合物的效力。
所述的分析是通過激酶將放射活性標記的磷酸酯部分轉入生物素底物。將所得的33P-標記的生物素產物與抗生物素蛋白鏈菌素包被的SPA珠結合(生物素容量130pmol/mg)，并在閃爍計數器中測定光發(fā)射。
Cdk2/細胞周期蛋白A活性的抑制分析激酶反應將在最終體積為30μL的緩沖液(TRIS HCl 10mM pH7.5、MgCl210mM、DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)中的4μM自制(inhouse)生物素化組蛋白H1(Sigma#H-5505)底物、10μM ATP(0.1microCi P33γ-ATP)、4.2ng細胞周期蛋白A/CDK2復合體、抑制劑加到96U底的每孔中。室溫下溫育30分鐘后，用含有1mg SPA珠的100μL PBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP終止反應。然后將110μL的體積轉入Optiplate。
進行20分鐘底物捕獲的溫育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在平板的頂部，并靜置4小時，然后在頂部計數器(Top-Count)中進行放射性計數。
IC50測定測定范圍為0.0015-10μM的不同濃度下的抑制劑。通過計算機程序GraphPad Prizm，使用四參數對數方程分析實驗數據y＝底部+(頂部-底部)/(1+10^((logIC50-X)*斜率))，其中x為抑制劑濃度的對數，y為應答；y起始于底部并以S形狀走至頂部。
Ki計算實驗方法反應在含有3.7nM酶、組蛋白和ATP(冷/標記的ATP的恒定比率為1/3000)的緩沖液(10mM Tris，pH7.5，10mM MgCl2，0.2mg/ml BSA，7.5mM DTT)中完成。用EDTA終止反應，并將底物捕獲在磷酸膜(來自Millipore的多篩網96孔平板)上。在進行充分地洗滌之后，在頂部計數器中對多篩網(Multi Screen)平板進行讀數。測定各ATP和組蛋白濃度的對照(時間零)。
實驗設計在不同的四種ATP、底物(組蛋白)和抑制劑濃度下測定反應速度。在各個ATP和底物Km值和抑制劑IC50值(0.3、1、3、9倍的Km或IC50值)附近設計80點濃度基底。在不存在抑制劑的情況下并在不同的ATP和底物濃度下的初始期間的實驗允許在關于Ki測定實驗的線性反應范圍內選擇單一的終點時間(10分)。
動力學參數估算通過同時非線性最小平方回歸，使用[Eq.1](ATP的競爭性抑制劑，隨機機理)，利用完全數據組(80點)估算動力學參數v=Vm·A·Bα·Ka·Kb+α·Ka·B+α·Kb·A+A·B+α·KaKi·I·(Kb+Bβ)---[Eq.1]]]>其中A＝[ATP]，B＝[底物]，I＝[抑制劑]，Vm＝最大速度，Ka、Kb、Ki分別為ATP、底物和抑制劑的解離常數。α和β分別是底物和ATP結合與底物和抑制劑結合之間的協同因子。
此外，所選擇的化合物的特征是ser/threo激酶的平板與細胞周期(Cdk2/細胞周期蛋白E、cdkl/細胞周期蛋白B1、cdk5/p25、cdk4/細胞周期蛋白D1)緊密相關，并對MAPK、PKA、EGFR、IGF1-R和Aurora-2具有特異性。
Cdk2/細胞周期蛋白E活性的抑制分析激酶反應將在最終體積為30μL的緩沖液(TRIS HCl 10mM pH7.5、MgCl210mM、DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)中的10μM自制(inhouse)生物素化組蛋白H1(Sigma#H-5505)底物、30μM ATP(0.3microCi P33γ-ATP)、4ng GST-細胞周期蛋白E/CDK2復合體、抑制劑加到96U底的每孔中。室溫下溫育60分鐘后，用含有1mg SPA珠的100μL PBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP終止反應。然后將110μL的體積轉入Optiplate。
進行20分鐘底物捕獲的溫育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在平板的頂部，并靜置4小時，然后在頂部計數器中進行放射性計數。
IC50測定參見上述。
Cdk1/細胞周期蛋白B1活性的抑制分析激酶反應將在最終體積為30μL的緩沖液(TRIS HCl 10mM pH7.5、MgCl210mM、DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)中的4μM自制(inhouse)生物素化組蛋白H1(Sigma#H-5505)底物、20μM ATP(0.2microCi P33γ-ATP)、3ng細胞周期蛋白B/CDK1復合體、抑制劑加到96U底的每孔中。室溫下溫育20分鐘后，用含有1mg SPA珠的100μLPBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP終止反應。然后將110μL的體積轉入Optiplate。
進行20分鐘底物捕獲的溫育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在Optiplate的頂部，并靜置4小時，然后在頂部計數器中進行放射性計數。
IC50測定參見上述。
cdk5/p25活性的抑制分析cdk5/p25活性的抑制分析根據以下方案進行。
激酶反應將在最終體積為30μL的緩沖液(TRIS HCl 10mM pH7.5、MgCl210mM、DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)中的10μM自制生物素化組蛋白H1(Sigma#H-5505)底物、30μM ATP(0.3 microCiP33γ-ATP)、15ng CDK5/p25復合體、抑制劑加到96U底的每孔中。室溫下溫育30分鐘后，用含有1mg SPA珠的100μL PBS+32mMEDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP終止反應。然后將110μL的體積轉入Optiplate。
進行20分鐘底物捕獲的溫育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在Optiplate的頂部，并靜置4小時，然后在頂部計數器中進行放射性計數。
IC50測定參見上述。
Cdk4/細胞周期蛋白D1活性的抑制分析激酶反應將在最終體積為50μL的緩沖液(TRIS HCl 10mM pH7.5、MgCl210mM、7.5mM DTT+0.2mg/ml BSA)中的0.4μM小鼠GST-Rb(769-921)(#sc-4112，來自Santa Cruz)底物、10μM ATP(0.5μCi P33γ-ATP)、100ng桿狀病毒表達的GST-cdk4/GST-細胞周期蛋白D1、適宜濃度的抑制劑加到96U底的每孔中。在37℃下溫育40分鐘后，用20μl EDTA 120mM終止反應。
捕獲將60μL從每孔轉至多篩網平板，以允許底物與磷酸纖維素過濾器結合。然后用150μl/孔不含Ca++/Mg++的PBS將平板洗滌3次，并用多篩網過濾系統過濾。
檢測在37℃下干燥過濾器，然后加入100μl/孔閃爍物，并通過在頂部計數器中進行放射性計數而檢測33P標記的Rb片斷。
IC50測定參見上述。
MAPK活性的抑制分析將在最終體積為30μL的緩沖液(TRIS HCl 10mM pH 7.5、MgCl210mM、DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)中的10μM自制生物素化MBP(Sigma#M-1891)底物、15μM ATP(0.15microCi P33γ-ATP)、30ngGST-MAPK(Upstate Biothecnology#14-173)、抑制劑加到96U底的每孔中。室溫下溫育30分鐘后，用含有1mg SPA珠的100μL PBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP終止反應。然后將110μL的體積轉入Optiplate。
進行20分鐘底物捕獲的溫育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在Optiplate的頂部，并靜置4小時，然后在頂部計數器中進行放射性計數。
IC50測定參見上述。
PKA活性的抑制分析激酶反應將在最終體積為30μL的緩沖液(TRIS HCl 10mM pH7.5、MgCl210mM、DTT 7.5mM+0.2mg/ml BSA)中的10μM自制生物素化組蛋白HI(Sigma # H-5505)底物、10μM ATP(0.2microMP33γ-ATP)、0.45U PKA(Sigma#2645)、抑制劑加到96U底的每孔中。室溫下溫育90分鐘后，用含有1mg SPA珠的100μL PBS+32mMEDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP終止反應。然后將110μL的體積轉入Optiplate。
進行20分鐘底物捕獲的溫育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在Optiplate的頂部，并靜置4小時，然后在頂部計數器中進行放射性計數。
IC50測定參見上述。
EGFR活性的抑制分析激酶反應將在最終體積為30μL的緩沖液(Hepes 50mM pH7.5、MgCl23mM、MnCl23mM、DTT1mM、NaVO33μM、+0.2mg/mlBSA)中的10μM自制生物素化MBP(Sigma#M-1891)底物、2μMATP(0.04 microCi P33γ-ATP)、36ng昆蟲細胞表達的GST-EGFR、抑制劑加到96U底的每孔中。室溫下溫育20分鐘后，用含有1mg SPA珠的100μL PBS+32mM EDTA+0.1％Triton X-100+500μM ATP終止反應。然后將110μL的體積轉入Optiplate。
進行20分鐘底物捕獲的溫育之后，加入100μl 5M CsCl使珠定位在Optiplate的頂部，并靜置4小時，然后在頂部計數器中進行放射性計數。
IC50測定參見上述。
IGF1-R活性抑制分析根據以下的方法進行IGF1-R活性的抑制分析。
激酶反應將在最終體積為30μL的緩沖液(Hepes 50mM pH 7.9、3mM MnCl23mM、1mM DTT、3μM NaVO3)中的10μM生物素化MBP(Sigma#M-1891)底物、0-20μM抑制劑、6μM ATP、1microCi33P-ATP和22.5ngGST-IGFI-R(在室溫下與冷的60μM ATP一起預溫育30分鐘)加到96U底平板的每孔中。室溫下溫育35分鐘后，通過加入含有32mM EDTA，500μM冷ATP、0.1％TritonX100和10mg/ml抗生物素蛋白鏈菌素包衣的SPA珠的100μL PBS緩沖液終止反應。
進行20分鐘溫育之后，取出110μl懸浮液，并轉入含有100μl的5M CsCl的96孔OPTIPLATE中。4小時后，在Packard頂部計數放射性讀取器中對平板進行2分鐘的讀數。
Aurora-2活性的抑制分析激酶反應將在最終體積為30μL的緩沖液(Hepes 50mM pH7.0、MgCl210mM、1mM DTT、0.2mg/ml BSA，3μM正釩酸鹽)中的8μM生物素化肽(4個重復的LRRWSLG)、10μM ATP(0.5μCi P33g-ATP、15ng Aurora2，抑制劑加到96U孔平板的每孔中。室溫下溫育30分鐘后，終止反應，并通過加入100μl珠懸浮液而捕獲生物素化肽。
層化將100μL CsCl25M加到每孔并靜置4小時，然后在頂部計數器中計算放射性。
IC50測定參見上述。
Cdc7/dbf4活性的抑制分析Cdc7/dbf4活性的抑制分析根據以下方案進行。
在用γ33-ATP示蹤的ATP存在下，用Cdc7/Dbf4復合體將生物素-MCM2底物反式磷酸化。然后用抗生物素蛋白鏈菌素包被的SPA珠捕獲磷酸化生物素-MCM2底物，并通過β計數評價磷酸化程度。
Cdc7/dbf4活性抑制分析在96孔平板中根據以下方案進行。
往平板的每孔中加入-10μl底物(生物素化MCM2、6μM最終濃度)-10μl酶(Cdc7/Dbf4、12.5nM最終濃度)-10μl受試化合物(在nM至μM范圍內12個增大的濃度，以產生劑量反應曲線)-然后使用10μl冷ATP(10μM最終濃度)和放射性ATP(與冷ATP的摩爾比為1/2500)的混合物以開始反應，允許所述反應在37℃下發(fā)生。
用含有15mM MgCl2、2mM DTT、3μM NaVO3、2mM甘油磷酸酯和0.2mg/ml BSA的50mM HEPES pH7.9中稀釋底物、酶和ATP。所述受試化合物的溶劑還包含10％DMSO。
溫育20分鐘后，通過往每孔加入包含50mM EDTA、1mM冷ATP、0.1％Triton X100和10mg/ml抗生物素蛋白鏈菌素包被的SPA珠的100μl PBS pH7.4。
室溫下溫育15分鐘以允許生物素化MCM2-抗生物素蛋白鏈菌素SPA珠發(fā)生相互作用之后，在96孔濾板(UnifilterRGF/BTM)中，使用Packard細胞收集器(Filtermate)捕獲珠，用蒸餾水洗滌，然后用頂部計數器(Packard)計數。
計數扣除空白，然后使用非線性回歸分析(Sigma Plot)分析實驗數據(每個點進行三重試驗)以確定IC50。
本發(fā)明的式(I)的化合物適于施用于哺乳動物如人，可以通過常規(guī)的途徑給藥，且劑量水平取決于患者的年齡、體重、癥狀和給藥途徑。
例如，適于式(I)的化合物口服的適宜的劑量可以是大約10至大約500mg前劑量，每天1-5次。
本發(fā)明的化合物可以多種劑型給藥，例如以片劑、膠囊、糖或薄膜包衣片、液體溶液或懸浮液的形式口服；以栓劑形式進行直腸給藥；腸胃外如肌內或靜脈內和/或陰道內和/或脊柱內注射或輸注。
此外，本發(fā)明的化合物可以作為單一試劑給藥，或者可選擇地與已知的抗癌治療聯合給藥，例如放射治療或化學治療方案結合細胞抑制試劑或細胞毒性試劑、抗生物素類試劑、烷基化試劑、抗代謝藥、激素藥、干擾素類型試劑、環(huán)氧酶抑制劑(如COX-2抑制劑)、金屬基質蛋白酶抑制劑、端粒酶抑制劑、酪氨酸激酶抑制劑、抗生長因子受體試劑、抗HER試劑、抗EGFR試劑、抗血管生成藥、法呢基轉移酶抑制劑、ras-raf信號轉導途徑抑制劑、細胞周期抑制劑，其它cdks抑制劑、微管蛋白結合試劑、拓撲異構酶I抑制劑、拓撲異構酶II抑制劑等等。
例如，本發(fā)明的化合物可以與一種或多種諸如以下的化學治療藥聯合給藥依西美坦、福美司坦、阿那曲唑、來曲唑、法屈唑、紫杉烷、紫杉烷衍生物、膠囊化紫杉烷、CPT-11、喜樹堿衍生物、蒽環(huán)苷類、例如多柔比星、伊達比星、表柔比星、依托泊苷、去甲長春花堿、長春花堿、卡鉑、順鉑、雌莫司汀、塞來昔布、它莫西芬、雷洛昔芬、Sugen SU-5416、Sugen SU-6668、賀賽汀等等，它們任選在其脂質體制劑中。
如果制成固定的劑量，則這些組合產物使用在上述劑量范圍內的本發(fā)明化合物和允許的劑量范圍內的其它藥學活性試劑。
當組合制劑不合適時，式(I)的化合物可以依次地與已知的抗癌藥使用。
本發(fā)明還包括含有式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽并結合藥學上可接受的賦形劑(可以是載體或稀釋劑)的藥物組合物。
含有本發(fā)明的化合物的藥物組合物通常根據常規(guī)的方法制備，并以藥學上適宜的形式給藥。
例如，固體口服劑型可以共同包含活性化合物和稀釋劑如乳糖、右旋糖、蔗糖(saccharose)、蔗二糖(sucrose)、纖維素、玉米淀粉或馬鈴薯淀粉；潤滑劑如二氧化硅、滑石、硬脂酸、硬脂酸鎂或鈣和/或聚乙二醇；粘合劑如淀粉、阿拉伯膠、明膠、甲基纖維素、羧基甲基纖維素或聚乙烯吡咯烷酮；解聚試劑如淀粉、海藻酸、海藻酸鹽或羥乙酸淀粉鈉；泡騰混合物；染料、甜味劑；潤濕劑如卵磷脂、聚山梨醇酯、月桂基硫酸酯；和用于藥物制劑的通常無毒和不具有藥理學活性的物質。該藥物制劑可以已知的方式制備，例如通過混合、制粒、制片、糖包衣或薄膜包衣工藝進行制備。
例如，用于口服的液體分散體可以是糖漿、乳液和懸浮液。
糖漿可以包含載體如蔗糖或含甘油和/或甘露糖醇和/或山梨醇的蔗糖。
懸浮液和乳液可以包含載體如天然樹膠、瓊脂、海藻酸鈉、果膠、甲基纖維素、羧基甲基纖維素或聚乙烯醇。
用于肌內注射的懸浮液或溶液可以共同包含活性化合物和藥學上可接受的載體如無菌水、橄欖油、油酸乙酯、二醇如丙二醇和可能需要的適量的鹽酸利多卡因。用于靜脈內注射或輸注的溶液可以包含載體如無菌水，或者優(yōu)選它們可以是無菌、含水、等滲鹽水溶液的形式，或者它們可以包含載體丙二醇。
栓劑可以共同包含活性化合物和藥學上可接受的載體如可可油、聚乙二醇、聚氧乙烯脫水山梨糖醇脂肪酸酯表面活性劑或卵磷脂。
因此，以下的實施例意在更好地例示本發(fā)明，而不是對其進行任何限定。
一般方法快速色譜法在硅膠(Merck grade 9395，60A)上完成。通過以下方法測定高壓液相色譜法保留時間(HPLCRT值)方法1儀器操作Waters 2790 HPLC系統，配備(996 Waters)PDA檢測器和Micromass mod.ZQ單一四極質譜儀，并配備電噴霧(ESI)離子源。
色譜條件RP18 Waters X Terra(4,6×50mm，3.5μm)柱；流動相A是5mM乙酸銨緩沖液(pH5.5，其中乙酸/乙腈95∶5)，而流動相B是H2O/乙腈(5∶95)。8分鐘內梯度從10至90％，保持90％B 2分鐘。在220nm和254nm下進行UV檢測。流速1ml/分。注射體積10μl。完全掃描，質量范圍為100-800amu。毛細管電壓為2.5KV；源溫度為120℃；錐體(Cone)為10V。
保留時間(HPLC r.t.)以分鐘為單位在220nm或254nm下得到。質量以m/z比得到。
方法2儀器操作Waters 2790 Alliance，配備恒溫自動進樣器；雙波長UV檢測器2487；光滑界面；轉移閥LabPro，質譜儀Waters ZQ單一四極，并具有ESI界面；Antek化學發(fā)光氮檢測器(CLND)8060。
色譜條件Zorbax SB C8(4.6×50mm；5μm)柱；流動相A是在乙腈中的0.01％甲酸，而流動相B是在甲醇中的0.01％甲酸。10分鐘內的梯度為0-95％B，保持95％2分鐘。UV檢測在220nm下進行，流速1ml/分。注射體積10μl。完全掃描，質量范圍為120-1000amu。毛細管電壓為2.8KV；源溫度為115℃；錐體為32V。
保留時間(HPLC r.t.)以分鐘為單位在220nm或254nm下得到。質量以m/z比得到。
方法3儀器操作HP1100 HPLC二元泵；Gilson 215自動進樣器，HP1100單波長UV檢測器，Sedex 75c蒸發(fā)光散射(ELS)檢測器(Sedere，France)；和PE/Sciex API-2000質譜儀色譜條件YMC ODS-AQ 4.6×50mm，5μm S5柱；其中HPLC流動相由在HPLC級水中的0.5％甲酸(A)和在HPLC級乙腈中的0.5％甲酸組成。對每分樣品用5μl注射完成如表所示的HPLC梯度。UV檢測在220nm下進行。
使用Turbo離子噴霧源，其中離子噴霧電壓為5kV，溫度為475℃，而小孔和環(huán)電壓分別為10V和250V。在160 to 800amu的Q1下掃描陽離子。
如果需要的話，使用配備996 Waters PDA檢測器和Micromassmod.ZMD單一四極質譜儀、電子噴霧電離、正模式的Waters制備HPLC 600，通過在Waters對稱C18(19×50mm，5μm)柱上進行制備HPLC而純化化合物。流動相A是水0.01％TFA，而流動相B是乙腈。8分鐘內的梯度為10-90％B，保持90％2分鐘。流速20ml/分。
在配備5mm雙共振探針[1H(15N-31P)ID_PFG Varian]并在400.45MHz下工作的Mercury VX 400上完成1H-NMR光譜測定。
如前述，本發(fā)明的多種式(I)的化合物已根據組合化學技術平行合成。
在這方面，已根據表IX至XVI的編碼系統結合HPLC保留時間(方法1-3)和質量，方便和明確地鑒定如此制備的某些化合物。
確定單一的特定的式(I)的化合物的每一代碼由單元A-M-B組成。
A代表任何取代基R1-[參見式(I)并通過氧原子與剩余的吲唑部分連接以得到在5位(A-M1-B)或6位(A-M2-B)被取代的吲唑衍生物；每一個A基團(取代基)表示在下表VII中。
B-NH-與其結合的吲唑部分的3位的-NH-基團一起代表式(I)的R基團；每一個B基團(取代基)表示在下表VIII中。
M指在5位或6位具有-O-基團并被基團A和B取代的二價3-氨基-吲唑部分的中心核。
具體而言，M可以根據下式進行M1或M2的變化，每一種確定在5位(M1)或6位(M2)被A-O-基團取代的化合物。
為了便于指示，表VII和VIII中的A或B基團已用合適的化學式識別，還指出與分子M的其余部分的結合點。
例如，表XI中的化合物A21-M1-B10(參見實施例11，登錄號429)代表在5位(通過氧原子)被基團A21取代或在3位(通過-NH-基團)被基團B10取代的吲唑M1；同樣地，表XII的化合物A10-M2-B70(參見實施例12，登錄號281)代表在6位(通過氧原子)被基團A10取代和在3位(通過-NH-基團)被基團B70取代的吲唑M2

表VII-A基團

表VII-B基團

實施例16-甲氧基-1H-吲唑-3-胺向在530ml濃HCl中的66.35g(0.448mol)2-氨基-4-甲氧基芐腈的冰冷的懸浮液中滴加在55ml水中的37.07g(0.537mol)亞硝酸鈉的溶液。1.5小時后，在5℃下將冷懸浮液滴加到預制的在530ml濃鹽酸(HCl)中的679.25g(3.58mol)氯化亞錫的溶液。3小時后，將冷懸浮液過濾，并用1.7升沸水將潮濕的固體處理30分鐘。通過布過濾器過濾使熱的混濁的溶液澄清。使溶液冰冷，并滴入0.8l升17％NaOH進行處理。濾出固體，并在真空和50℃下干燥得到67.2g產物，為淺褐色固體。產率＝91.9％。mp＝195-197℃分解。HPLC r.t.1.9[M+H]+＝164H1NMR(DMSO-d6)，診斷信號(ppm)3.74(s，3H)，5.17(寬峰s，2H)，6.5(dd，1H)，6.6(d，1H)，7.5(d，2H)，11.07(s，1H)。
實施例22-({6-甲氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮將20g(0.122mol)6-甲氧基-1H-吲唑-3-胺、20g(0.135mol)鄰苯二甲酸酐和140mg(1.22mmol)4-二甲基氨基吡啶在0.4升乙腈中回流2.5小時。將混合物冷卻至5℃，并過濾得到第一批產物(24.2g)。
在真空下濃縮母液并用70ml叔丁基甲基醚(MTBE)處理過濾得到第二批產物(5.8g)。
然后，得到總量為30.0g的黃色固體產物。產率＝83.6％。mp＝193-195℃HPLC r.t.4.7[M+H]+＝294[2M+H]+＝587[3M+H]+＝880H1NMR(DMSO-d6)，診斷信號(ppm)3.84(s，3H)，6.78(dd，1H)，6.96(d，1H)，7.55(dd，1H)，7.91-8.1(m，4H)，13.14(s，1H)。
實施例32-({6-羥基}-1H-吲唑-3-基)-1H-異吲哚-1.3(2H)-二酮將24.2g(82.5mmol)2-({6-甲氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和73.4g(0.635mol)吡啶鹽酸鹽的混合物于200℃下加熱4小時。將所得的褐色溶液冷卻至140℃，并緩慢地傾入良好攪拌的250ml 0.2 N HCl和350ml乙酸乙酯的混合物中。分離有機層，將水層鹽化(45g NaCl)，并用350ml乙酸乙酯萃取二次。用硫酸鈉干燥有機萃取物，并在真空下濃縮至小體積。濾出沉淀并干燥得到15.89g產物，為黃色固體。產率＝68.9％.mp＝265-270℃分解。
HPLC r.t.3.7[M+H]+＝280[2M+H]+＝559[3M+H]+＝838H1NMR(DMSO-d6)，診斷信號(ppm)6.65(dd，1H)，6.8(s，1H)，7.44(d，1H)，7.97(m，4H)，9.73(broad s，1H)12.86(s，1H)。
實施例42-(6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮向在150ml二氯甲烷中的15.03g(53.82mmmol)2-({6-羥基}-1H-吲唑-3-基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮的懸浮液加入在75ml二氯甲烷中的20.19g(0.134mol)TBDMS氯化物的溶液。室溫下滴加12.06ml(80.73mmol)1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯](DBU)處理所得的混合物，得到澄清的溶液。3小時后，將反應混合物傾入250ml 0.5NHCl。分離水層，并用120ml二氯甲烷萃取。用硫酸鈉干燥有機萃取物，并在真空下蒸發(fā)溶劑。在50ml乙酸乙酯中在50℃下攪拌濕的粗產物。
然后，在真空下蒸發(fā)大約一半的溶劑，并滴加100ml環(huán)己烷滴處理混合物。抽濾分離產物，為淺黃色固體(15.04g)。產率＝71.0％。MP＝207-209℃。
HPLC r.t.7.6[[M+H]+＝394[2M+H]+＝787H1NMR(DMSO-d6)，診斷信號(ppm)0.21(s，6H)，0.98(s，9H)，6.71(dd，1H)，6.91(d，1H)，7.54(d，1H)，7.93(m，2H)，8.1(m，2H)。
實施例55-芐氧基-1H-吲唑-3-胺向在500ml濃鹽酸中的63.27g(0.282mol)2-氨基-5-(芐氧基)芐腈的冰冷的懸浮液滴加在75ml水中的23.32g(0.338mol)亞硝酸鈉的溶液。2小時后，在2℃下將冷懸浮液滴加到預制的在380ml濃HCl中的509.25g(2.26mol)氯化亞錫的溶液。3小時后將冷懸浮液過濾，用1.8升沸水和300ml乙醇95°將濕固體處理30分鐘。通過布過濾器過濾使熱的混濁溶液澄清。將溶液濃縮除去乙醇，并在4℃下滴加0.35升35％NaOH進行處理。濾出固體，并在真空和50℃下干燥得到73.82g產物，為淺褐色固體。mp＝193-195℃HPLC r.t.4.7[M]+＝240[2M+H]+＝479H1NMR(DMSO-d6)，診斷信號(ppm)5.03(s，2H)，5.16(寬峰s，1H)，6.96(d，1H)，7.13(d，1H)，7.26(d，1H)，7.27-7.49(m，5H)。
實施例62-[5-(芐氧基)-1H-吲唑-3-基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮攪拌下用3升乙腈處理73.82g 5-芐氧基-1H-吲唑-3-胺。傾析溶液，并在攪拌下用0.5升甲醇和0.5升乙酸乙酯的混合物處理殘余物。濾出所得的固體(11.05g錫鹽)，并在真空下將溶液蒸發(fā)至干。將殘余物溶于前者溶液，并在真空下除去溶劑至最終體積為大約1升。向此溶液加入45.97g(0.31mol)鄰苯二甲酸酐和345mg(2.82mmol)4-二甲基氨基吡啶。將混合物回流2小時，然后在真空下濃縮得到第一批產物(70.11g)。將母液濃縮至干，并用30ml乙酸乙酯和100ml叔丁基甲基醚(MTBE)處理殘余物過濾得到第二批產物(9.75g)。然后得到總共79.86g產物，為黃色固體。產率＝76.6％，經過兩步。mp＝190-192℃，HPLC r.t.6.5min.[M+H]+＝370[2M+H]+＝739H1NMR(DMSO-d6)，診斷信號(ppm)5(s，2H)，7.14(d，1H)，7.3-7.47(m，5H)，7.52(d，2H)，8，(m，4H)，13.27(s，1H)。
實施例72-(5-羥基-1H-吲唑-3-基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮將46.14g(0.125mol)2-[5-(芐氧基)-1H-吲唑-3-基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和143.35g(1.24mol)吡啶鹽酸鹽的混合物于180℃下加熱1.5小時。將所得的褐色溶液冷卻至120℃，并緩慢地傾入良好攪拌的800ml 0.5 N HCl的混合物。濾出沉淀并干燥得到32.26g產物，為黃色固體。產率＝92.4％。
mp≥270℃HPLC r.t.3.2[M+H]+＝280[2M+H]+＝559]H1NMR(DMSO-d6)，診斷信號(ppm)6.8(s，1H)，6.98(d，1H)，7.42(d，1H)，8(m，4H)，9.2(s，1H)13.12(s，1H)。
實施例82-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-]異吲哚-1，3-二酮向在320ml二氯甲烷中的32.26g(0.115mol)2-(5-羥基-1H-吲唑-3-基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮的懸浮液加入在150ml二氯甲烷中的43.54g(0.288mol)TBDMS氯化物的溶液。在室溫下滴加35.5ml(0.23mol)1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)處理所得的混合物，得到澄清的溶液。3小時后，將反應混合物傾入300ml 0.1N的鹽酸溶液。分離水層，并用200ml二氯甲烷萃取。用硫酸鈉干燥有機萃取物，并在真空下蒸發(fā)溶劑。通過硅膠快速色譜法純化粗產物，用二氯甲烷-環(huán)己烷-乙酸乙酯(4∶4∶2)洗脫。得到36.03g產物，為白色固體。產率＝79.2％。mp＝225-228℃。HPLC r.t.8.3[M+H]+＝394[2M+H]+＝787H1NMR(DMSO-d6)，診斷信號(ppm)0.15(s，6H)，0.93(s，9H)，6.98(dd，1H)，7.07[(S，1H)，7.49(d，1H)，7.96(m，4H)，13.25(s，1H)。
實施例9N-(6-羥基-1H-吲唑-3-基)苯甲酰胺將500mg Novabiochem三苯甲基樹脂(標明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)懸浮在二氯甲烷，并加入374mg 2-[6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367μL 2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氫化-1，3，2-二氮雜磷雜苯(1.3mmol)。將懸浮液攪拌16小時，然后將樹脂過濾，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗滌，并再次用二氯甲烷洗滌。然后在真空下干燥樹脂。
通過裂解裝載的產物來檢查樹脂的特性和裝填步驟的產率將40mg樹脂懸浮在1ml二氯甲烷中，并加入150μl三氟乙酸。2小時后，排干樹脂，并用1ml二氯甲烷洗滌二次；干燥收集的溶液，并回收13.8mg標題化合物。計算裝填量0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
將得自第一步的樹脂(500mg，約0.425mmol)懸浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物中，并加入500μl肼一水合物。將懸浮液加熱至45℃。繼續(xù)加熱并攪拌過夜，然后將混合物冷卻至室溫。過濾樹脂，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗滌，并再次用甲醇洗滌，然后在真空下干燥。
通過裂解檢查樹脂的特性。如上述進行反應。
裂解產物6-{[叔丁基](二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-胺；HPLC r.t.方法15.99[M+H]+＝264；[M-H]-＝262將得自第二步的樹脂樣品(100mg，0.08mmol)懸浮在2.5ml二氯甲烷；并加入N，N′-二異丙基乙基胺(131μl，約10eq)和苯甲酰氯(30μl，約3eq)。保持在室溫下攪拌20小時，將樹脂過濾，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗滌，并再次用二氯甲烷洗滌，然后在真空下干燥。
通過裂解產裝填的產物檢查樹脂的特征。如前述進行反應。
裂解產物N-(6-{[叔丁基](二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)苯甲酰胺HPLC r.t.方法17.47[M+H]+＝368[M-H]-＝366將得自前面步驟的樹脂(100mg，0.08mmol)懸浮在3ml無水四氫呋喃，并加入120μl在四氫呋喃(約1.5eq)中的1M四丁基氟化銨的溶液。將懸浮液攪拌過夜，然后過濾樹脂，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌。
將100mg樹脂懸浮在3ml二氯甲烷，并加入450μl三氟乙酸。2小時后，排出樹脂，并用1ml二氯甲烷洗滌二次，將收集的溶液干燥，并回收標題化合物。
N-(6-羥基-1H-吲唑-3-基)苯甲酰胺HPLC方法1 r.t.3.5[M+H]+＝253.99[M-H]-＝252。
通過與實施例9類似的方式進行，將2-[(6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮擔載于樹脂，然后根據所述的合成路線，合成以下的產物。
N-(5-羥基-吲唑-3-基)-苯甲酰胺HPLC方法1 r.t.3.08[M+H]+＝253.992-(4-叔丁基苯氧基)-N-(5-羥基-2H-吲唑-3-基)乙酰胺HPLC方法1 r.t.5.38[M+H]+＝340.2N-(5-羥基-2H-吲唑-3-基)-2-(4-甲氧基苯基)乙酰胺HPLC方法1r.t.3.35[M+H]+＝298.1N-(6-羥基-2H-吲唑-3-基)-3-苯基丙酰胺HPLC方法1 r.t.3.94[M+H]+＝282.1N-(6-羥基-2H-吲唑-3-基)]環(huán)丙烷甲酰胺HPLC方法1 r.t.2.36[M+H]+＝218.1以相的方式進行(實施例9)，平行地合成7個產物，并如前述的表IX編碼；報道了相關的HPLC保留時間和實測值[M+H]+。
表IX
實施例10正丁基-N′-(6-羥基-1H-吲唑-3-基)脲將500mg Novabiochem三苯甲基樹脂(標明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)懸浮在二氯甲烷，并加入374mg2-[6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367μl 2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氫化-1，3，2-二氮雜磷雜苯(1.3mmol)。將懸浮液攪拌16小時，然后過濾樹脂，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗滌，并再次用二氯甲烷洗滌。然后在真空下干燥樹脂。
通過裂解裝填產物來檢查樹脂的特性和裝填步驟的產率將40mg樹脂懸浮在1ml二氯甲烷并加入150μl三氟乙酸。2小時后，排出樹脂，并用1ml二氯甲烷洗滌二次，干燥收集的溶液，并回收13.8mg標題化合物。計算裝填量0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
將得自第一步的樹脂(500mg，約0.425mmol)懸浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物，并加入500μL肼一水合物。將懸浮液加熱至45℃。繼續(xù)加熱和攪拌過夜，然后將混合物冷卻至室溫。將樹脂過濾，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗滌，并再次用甲醇洗滌。
通過裂解檢查樹脂的特性。如上述進行反應。
裂解產物6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-胺]HPLC r.t.方法15.99[M+H]+＝264；[M-H]-＝262將得自第二步的樹脂樣品(100mg，0.08mmol)懸浮在2ml二甲基甲酰胺；加入異氰酸正丁酯(28μl，約5eq)。將懸浮液加熱至50℃。保持攪拌和加熱60小時，然后將懸浮液冷卻至室溫。將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌，然后在真空下干燥。
然后將100mg樹脂懸浮在3ml二氯甲烷，并加入450μl三氟乙酸。2小時后排出樹脂，并用1ml二氯甲烷洗滌；將收集的溶液干燥，并回收標題化合物。
1-丁基-3-(6-羥基-1H-吲唑-3-基)-脲HPLC方法1 r.t.3.87[M+H]+＝249[[M-H]-＝247。
通過類似于實施例10的方式進行，將2-(6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和[2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮擔載在樹脂上，然后根據所述的合成路線，合成以下的產物。
1-丁基-3-(5-羥基-1H-吲唑-3-基)-脲HPLC方法1 r.t.3.65[M+H]+＝249[[M-H]-＝247N-芐基-N′-(5-羥基-2H-吲唑-3-基)]脲HPLC方法1 r.t.4[M+H]+＝283.1N-(5-羥基-2H-吲唑-3-基)-N′-異丙基脲HPLC方法1 r.t.2.92[M+H]+＝235.1N-(6-羥基-2H-吲唑-3-基)-N′-苯基脲HPLC方法1 r.t.4.4[M+H]+＝269.1通過相同的方式進行(實施例10)，平行地合成13種產物，它們如前述的表X編碼；報道了相關的HPLC保留時間和實測[M+H]+。
表X
實施例11N-(6-芐氧基-1H-吲唑-3-基)-苯甲酰胺將500mg Novabiochem三苯甲基樹脂(標明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)懸浮在二氯甲烷，并加入374mg 2-[6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367μl 2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氫化-1，3，2-二氮雜磷雜苯](1.3mmol)。將懸浮液攪拌16小時，然后將樹脂過濾，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗滌，并再次用二氯甲烷洗滌。在真空下干燥樹脂。
通過裂解裝填產物檢查樹脂的特性和裝填步驟的產率將40mg樹脂懸浮在1ml二氯甲烷，并加入150μl三氟乙酸。2小時后，排出樹脂，并用1ml二氯甲烷洗滌二次；將收集的溶液干燥，并回收13.8mg標題化合物。計算裝填量0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
將得自第一步的樹脂(500mg，約0.425mmol)懸浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物，并加入500μl肼一水合物。將懸浮液加熱至45℃。繼續(xù)加熱和攪拌過夜，然后將混合物冷卻至室溫。將樹脂過濾，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗滌，并再次用甲醇洗滌，然后在真空下干燥。
通過裂解檢查樹脂的特性。如上述進行反應。
6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-胺HPLC r.t.方法15.99[M+H]+＝264[M-H]-＝262將得自第二步的樹脂樣品(100mg，0.08mmol)懸浮在2.5ml二氯甲烷；加入N，N′-二異丙基乙基胺(131μl，約10eq)和苯甲酰氯[(30μl，約3eq)。室溫下保持攪拌20小時，然后將樹脂過濾，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗滌，并再次用二氯甲烷洗滌，然后在真空下干燥。
通過裂解裝填產物檢查樹脂的特性。如前述進行反應。
N-(6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)苯甲酰胺HPLC方法1 r.t.7.47[M+H]+＝368[M-H]-＝366將得自第三步的樹脂(100mg，0.08mmol)懸浮在3ml無水四氫呋喃，并加入120μl在四氫呋喃(約1.5eq)中的1M四丁基氟化銨的溶液。將懸浮液攪拌過夜，然后將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌。
通過裂解裝填產物檢查樹脂的特性。如前述進行反應。
N-(6-羥基-1H-吲唑-3-基)苯甲酰胺HPLC方法1 r.t.3.5[M+H]+＝253.99[M-H]-＝252。
將得自第四步的樹脂(100mg，0.08mmol)懸浮在3ml 1-甲基-2-吡咯烷酮中，然后加入43μl 2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氫化-1，3，2-二氮雜磷雜苯(約1.5eq)和57μl芐基溴(約6eq)。將懸浮液攪拌16小時。將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌。
將100mg無水樹脂懸浮在3ml二氯甲烷，并加入450μl三氟乙酸。
2小時后，排出樹脂，并用3ml二氯甲烷洗滌二次；干燥收集的溶液，并回收目標標題化合物。
N-(6-芐氧基-1H-吲唑-3-基)-苯甲酰胺HPLC r.t.方法16.17[M+H]+＝344。
通過類似于實施例11的方法進行，將2-(6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和[2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮擔載在樹脂上，然后根據所述的合成路線，合成以下的產物。
N-(5-芐氧基-1H-吲唑-3-基)-苯甲酰胺HPLC r.t.6.05[M+H]+＝344；2-({3-[(3-苯基丙?；?氨基]-1H-吲唑-5-基}氧基)]丁酸甲酯HPLC方法2 r.t.8.2[M+H]+＝382.1；N-{5-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧基]-1H-吲唑-3-基}環(huán)丙烷甲酰胺HPLC方法2 r.t.7.19[M+H]+＝377.2；2-({3-[(環(huán)丙基羰基)氨基]-1H-吲唑-5-基}氧基)丁酸甲酯HPLC方法2 r.t.7.05[M+H]+＝318.12-[(3-[(4-甲氧基苯基)乙?；鵠氨基}-1H-吲唑-5-基)氧基]丁酸甲酯HPLC方法2 r.t.7.78[M+H]+＝398.2N-{6-[(2-甲基芐基)氧基]-1H-吲唑-3-基}環(huán)丙烷甲酰胺HPLC方法2 r.t.8.38[M+H]+＝322.1；N-{6-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧基]-1H-吲唑-3-基}環(huán)丙烷甲酰胺HPLC方法2 r.t.7.41[M+H]+＝377.2；2-({3-[(環(huán)丙基羰基)氨基]-1H-吲唑-6-基}氧基)丁酸甲酯HPLC方法1 r.t.4.31[M+H]+＝318.1；2-({3-[(3-氯苯甲酰基)氨基]-1H-吲唑-6-基}氧基)丁酸甲酯HPLC方法1 r.t.6.02[M+H]+＝388.1通過相同的方式進行(實施例11)，平行地合成806種產物，并如上述的表XI編碼；報道了相關的HPLC方法和保留時間以及實測值[M+H]+。
表XI
實施例121-(6-芐氧基-1H-吲唑-3-基)-3-丁基-脲將500mg Novabiochem三苯甲基樹脂(標明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)懸浮在二氯甲烷，并加入374mg 2-[6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367μl 2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氫化-1，3，2-二氮雜磷雜苯(1.3mmol)。將懸浮液攪拌16小時，然后將樹脂過濾，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗滌，并再次用二氯甲烷洗滌。然后在真空下干燥樹脂。
通過裂解裝填的產物來檢查樹脂的特性和裝填步驟的產率將40mg樹脂懸浮在1ml二氯甲烷并加入150μl三氟乙酸。2小時后，排出樹脂，并用1ml二氯甲烷洗滌二次，干燥收集的溶液，并回收13.8mg標題化合物。計算裝填量0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
將得自第一步的樹脂(300mg，約0.25mmol)懸浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物，并加入400μl肼一水合物。將懸浮液加熱至45℃。繼續(xù)加熱和攪拌過夜，然后將混合物冷卻至室溫。將樹脂過濾，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗滌，并再次用甲醇洗滌，然后在真空下干燥。
通過裂解檢查樹脂的特性。如上述進行反應。
裂解化合物6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]-氧基}-1H-吲唑-3-胺HPLC r.t.方法15.99[M+H]+＝264；[M-[H]-＝262將得自第二步的樹脂樣品(100mg，0.08mmol)懸浮在2ml二甲基甲酰胺；加入異氰酸正丁酯(28μl，約5eq)。將懸浮液加熱至50℃。保持攪拌和加熱60小時，然后將懸浮液冷卻至室溫。將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌，然后在真空下干燥。
將得自第三步的樹脂(100mg，0.08mmol)懸浮在3ml無水四氫呋喃，并加入120μl在四氫呋喃(約1.5eq)中的1M四丁基氟化銨的溶液。將懸浮液攪拌過夜，然后將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌。
裂解化合物1-丁基-3-(6-羥基-1H-吲唑-3-基)-]脲；HPLC方法1 r.t.3.87[M+H]+＝249[M-H]-＝247.
將得自第四步的樹脂(100mg，0.08mmol)懸浮在3ml 1-甲基-2-吡咯烷酮中，然后加入43μl 2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氫化-1，3，2-二氮雜磷雜苯(約1.5eq)和57μl芐基溴(約6eq)。將懸浮液攪拌16小時。將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌。
將100mg無水樹脂懸浮在3ml二氯甲烷并加入450μl三氟乙酸。2小時后，排出樹脂，并用3ml二氯甲烷洗滌二次；干燥收集的溶液；回收標題化合物1-(6-芐氧基-1H-吲唑-3-基)-3-丁基-脲HPLC方法3 r.t.2.3[M+H]+＝339.3通過類似于實施例12的方式進行，將2-[(6-{叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮擔載在樹脂上，然后根據所述的合成路線合成以下產物。
1-(5-芐氧基-1H-吲唑-3-基)-3-丁基-脲HPLC]方法3 r.t.2.25[M+H]+＝339.32-({3-[(苯胺基羰基)氨基]-1H-吲唑-5-基}氧基)丁酸甲酯HPLC r.t.方法15.88[M+H]+＝369.12-[(3-{[(芐基氨基)羰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧基]丁酸甲酯HPLC r.t.方法28.19[M+H]+＝383.2N-異丙基-N′-{5-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧基]-1H-吲唑-3-基}脲HPLC r.t.方法27.84[M+H]+＝394.22-[(3-{[(異丙基氨基)羰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧基]-N-苯基丙酰胺HPLCr.t.方法27.76[M+H]+＝382.22-[(3-{[(異丙基氨基)羰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧基]丁酸甲酯HPLC r.t.方法27.65[M+H]+＝335.2N-異丙基-N′-{6-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧基]-1H-吲唑-3-基}脲HPLC r.t.方法27.89[[M+H]+＝]394.2通過相同的方式(實施例12)進行，平行地合成506種產物，并如前述的表XII編碼，報道了相關的HPLC保留時間和實測值[M+H]+]。
表XII
實施例133-甲基-N-{5-[(3-甲基芐基)氧基]-1H-吲唑-3-基}苯磺胺將500mg Novabiochem三苯甲基樹脂(標明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)懸浮在二氯甲烷和374mg 2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)，并加入367μl2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氫化-1，3，2-二氮雜磷雜苯(1.3mmol)。將懸浮液攪拌16小時，然后將樹脂過濾，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗滌，并再次用二氯甲烷洗滌。然后在真空下干燥樹脂。
通過裂解裝填的產物來檢查樹脂的特性和裝填步驟的產率將40mg樹脂懸浮在1ml二氯甲烷，并加入150μl三氟乙酸。2小時后，排出樹脂，并用1ml二氯甲烷洗滌二次；將收集的溶液干燥，并回收13.8mg標題化合物。計算裝填0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
將得自第一步的樹脂(500mg，約0.42mmol)懸浮在3ml無水四氫呋喃，并加入630μl在四氫呋喃(約1.5eq)中的1M四丁基氟化銨的溶液。將懸浮液攪拌過夜，然后將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌。
通過裂解檢查樹脂的特性。如上述進行反應。
2-[6-羥基-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮HPLC r.t.方法13.9[M+H]+＝280。
將得自第二步的樹脂的樣品(100mg，約0.08mmol)懸浮在3ml 1-甲基-2-吡咯烷酮中，然后加入43μl 2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氫化-1，3，2-二氮雜磷雜苯(約1.5eq)和65μl 3-甲基芐基溴(約6eq)。將懸浮液攪拌16小時。將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌。
將得自第三步的樹脂(100mg，約0.08mmol)懸浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物，并加入100μl肼一水合物。將懸浮液加熱至45℃。繼續(xù)加熱和攪拌過夜，然后將混合物冷卻至室溫。將樹脂過濾，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗滌，并再次用甲醇洗滌，然后在真空下干燥。
將得自第四步的樹脂(100mg，約0.08mmol)懸浮在2.5ml二氯甲烷，并加入90mg間甲苯磺酰氯(約6eq)，加入200μl N，N′-二異丙基乙基胺(約15eq)和催化量的4-二甲基氨基吡啶。將懸浮液攪拌過夜。將樹脂過濾，并用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺和甲醇和二氯甲烷洗滌。然后在真空下干燥。
將得自第5步的樹脂懸浮在3ml無水四氫呋喃，并加入120μl在四氫呋喃(約1.5eq)中的1M四丁基氟化銨的溶液。將懸浮液攪拌過夜，然后將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌。
將100mg無水樹脂懸浮在3ml二氯甲烷，并加入450μl三氟乙酸。2小時后，排出樹脂，并用3ml二氯甲烷洗滌二次，將收集的溶液干燥，回收標題化合物。
3-甲基-N-{5-[(3-甲基芐基)氧基]-1H-吲唑-3-基}苯磺胺HPLC方法2r.t.8.79[M+H]+＝408.1通過類似的方式(實施例13)操作，制備以下表XIII的化合物。
表XIII
實施例144-異丙基-N-{6-[(3-甲基芐基)氧基]-1H-吲唑-3-基}苯磺胺將500mg of Novabiochem三苯甲基樹脂(標明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)懸浮在二氯甲烷，并加入374mg 2-[6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367μl2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氫化-1，3，2-二氮雜磷雜苯](1.3mmol)。將懸浮液攪拌16小時，然后將樹脂過濾，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗滌，并再次用二氯甲烷洗滌。然后在真空下干燥樹脂。
通過裂解裝填的產物來檢查樹脂的特性和裝填步驟的產率將40mg樹脂懸浮在1ml二氯甲烷并加入150μl三氟乙酸。2小時后，排出樹脂，并用1ml二氯甲烷洗滌二次；將收集的溶液干燥，并回收13.8mg標題化合物。計算裝填量0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
將得自第一步的樹脂(500mg，約0.42mmol)懸浮在3ml無水四氫呋喃，并加入630μl在四氫呋喃(約1.5eq)中的1M四丁基氟化銨的溶液。將懸浮液攪拌過夜，然后將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌，然后在真空下干燥。
通過裂解檢查樹脂的特性。如上述進行反應。
2-[6-羥基-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮HPLC r.t.方法13.9[M+H]+＝280。
將得自第二步的樹脂的樣品(100mg，約0.08mmol)懸浮在1.5ml無水四氫呋喃。在圓底燒瓶中，將209mg三苯基膦(0.8mmol，約10eq)溶于2ml無水四氫呋喃，然后在0℃下加入157μl偶氮二甲酸二異丙酯(0.8mmol，約10eq)，并在0℃下緩慢地加入145μl 3-甲基芐基醇(1.2mmol，約15eq)]。將溶液振蕩2小時，然后將其轉移到樹脂的懸浮液中。
將懸浮液攪拌過夜，然后將樹脂過濾上，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌。
重復所述過程二次。
將得自第三步的樹脂(100mg，約0.08mmol)懸浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物，并加入100μl肼一水合物。將懸浮液加熱到45℃。繼續(xù)加熱和攪拌過夜，然后將混合物冷卻至室溫。將樹脂過濾，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗滌，并再次用甲醇洗滌，然后在真空下干燥。
將得自第四步的樹脂(100mg，約0.08mmol)懸浮在2.5ml二氯甲烷，并加入111mg 4-叔丁基苯磺酰氯(約6eq，200μl N，N′-二異丙基乙基胺(約15eq)和催化量的4-二甲基氨基吡啶。將懸浮液攪拌過夜。將樹脂過濾，并用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺和甲醇以及二氯甲烷洗滌。然后在真空下干燥。
將得自第五步的樹脂懸浮在3ml無水四氫呋喃，并加入120μl在四氫呋喃(約1.5eq)中的1M四丁基氟化銨的溶液。將懸浮液攪拌過夜，然后將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌。
將100mg無水樹脂懸浮在3ml二氯甲烷并加入450μl三氟乙酸。2小時后，排出樹脂，并用3ml二氯甲烷洗滌二次；將收集的溶液干燥，回收標題化合物。
4-異丙基-N-{6-[(3-甲基芐基)氧基]-1H-吲唑-3-基}苯磺胺HPLC]方法3r.t.2.69，[M+H]+＝436.2通過類似的方式(實施例14)制備以下表XIV的化合物。
表XIV
實施例153-苯基-N-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基l丙酰胺將500mg of Novabiochem三苯甲基樹脂(標明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)懸浮在二氯甲烷，并加入374mg 2-[6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367[PL]of 2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氫化-1，3，2-二氮雜磷雜苯(1.3mmol)。將懸浮液攪拌16小時，然后將樹脂過濾，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗滌，并再次用二氯甲烷洗滌。然后在真空下干燥樹脂。
通過裂解裝填的產物來檢查樹脂的特性和裝填步驟的產率將40mg樹脂懸浮在1ml二氯甲烷，并加入150μl三氟乙酸。2小時后排出樹脂，并用1ml二氯甲烷洗滌二次，將收集的溶液干燥，并回收13.8mg標題化合物。計算裝填量0.85mmol/g，HPLC r.t.方法17.64[M+H]+＝394。
將得自第一步的樹脂(500mg，約0.425mmol)懸浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物，并加入500μl肼一水合物。將懸浮液加熱至45℃。繼續(xù)加熱和攪拌過夜，然后將混合物冷卻至室溫。將樹脂過濾，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗滌，并再次用甲醇洗滌，然后在真空下干燥。
通過裂解檢查樹脂的特性。如上述進行反應。
6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-胺]HPLC r.t.方法15.99[M+H]+＝264[[M-H]-＝262將得自第二步的樹脂的樣品(100mg，0.08mmol)懸浮在2.5ml二氯甲烷；加入N，N′-二異丙基乙基胺(131μl，約10eq)和氫化肉桂酰氯(35μl，0.24mmol，約3eq)。室溫下保持攪拌20小時，然后將樹脂過濾，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗滌，并再次用二氯甲烷洗滌，然后在真空下干燥。
將得自第三步的樹脂(100mg，約0.08mmol)懸浮在3ml無水四氫呋喃，并加入120μl在四氫呋喃(約1.5eq)中的1M四丁基氟化銨的溶液。將懸浮液攪拌過夜，然后將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌，然后在真空下干燥。
將得自第四步的樹脂(100mg，約0.08mmol)懸浮在1ml無水四氫呋喃。在圓底燒瓶中，將209mg三苯基膦(0.8mmol，約10eq)溶于2ml無水四氫呋喃，然后在0℃下緩慢地加入157μl偶氮二甲酸二異丙酯(0.8mmol，約10eq)]和147μl 1-(2-羥基乙基)吡咯烷(1.2mmol，約15eq)。將溶液振蕩2小時，然后轉移至樹脂的懸浮液。
將懸浮液攪拌過夜，然后將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌。
重復所述過程二次。
將100mg無水樹脂懸浮在3ml二氯甲烷，并加入450μl三氟乙酸。2小時后，排出樹脂，并用3ml二氯甲烷洗滌二次；將收集的溶液干燥，并回收所要的標題化合物。
3-苯基-N-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]丙酰胺HPLCr.t.方法12.99[M+H]+＝379.2通過與實施例15類似的方式進行，將2-(6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和[2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮擔載在樹脂上，然后根據所述的合成路線，合成以下的產物。
2-(4-叔丁基苯氧基)-N-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]乙酰胺HPLC方法2r.t.6.65[M+H]+＝437.22-(4-甲氧基苯基)-N-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]乙酰胺HPLC方法2r.t.4.56[M+H]+＝395.2通過與實施例15相同的方式進行，平行地合成表XV的195種產物。
表XV
實施例16N-(5-{[5-(芐氧基)戊基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-N′-異丙基脲將500mg of Novabiochem三苯甲基樹脂(標明取代量1.27mmol/g，0.64mmol)懸浮在二氯甲烷，并加入374mg 2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮(0.9mmol)和367μl2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基全氫化-1，3，2-二氮雜磷雜苯(1.3mmol)。將懸浮液攪拌16小時，然后將樹脂過濾，用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇洗滌，并再次用二氯甲烷洗滌。然后在真空下將樹脂干燥。
通過裂解裝填的產物來檢查樹脂的特性和裝填步驟的產率將40mg樹脂懸浮在1ml二氯甲烷，并加入150μl三氟乙酸。2小時后，排出樹脂，并用1ml二氯甲烷洗滌二次；將收集的溶液干燥，并回收13.8mg標題化化合物。計算裝填量0.85mmol/g，HPLCr.t.方法17.64[M+H]+＝394。
將得自第一步的樹脂(500mg，約0.425mmol)懸浮在5ml二氯甲烷和甲醇1∶1的混合物中，并加入500μl肼一水合物。將懸浮液加熱至45℃。繼續(xù)加熱并攪拌過夜，然后將混合物冷卻至室溫。過濾樹脂，用甲醇和水1∶1的混合物、甲醇、二甲基甲酰胺洗滌，并再次用甲醇洗滌，然后在真空下干燥。
通過裂解檢查樹脂的特性。如上述進行反應。
6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-胺；HPLCr.t.方法15.99[M+H]+＝264；[M-H]-＝262將得自第二步的樹脂樣品(100mg，0.08mmol)懸浮在2ml二甲基甲酰胺；并加入異氰酸異丙酯(39μl，0.4mmol，約5eq)。將懸浮液加熱至50℃。保持攪拌和加熱60小時，然后將懸浮液冷卻至室溫。將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌，然后在真空下干燥。
將得自第三步的樹脂(100mg，約0.08mmol)懸浮在3ml無水四氫呋喃，并加入120μl在四氫呋喃(約1.5eq)中的1M四丁基氟化銨的溶液。將懸浮液攪拌過夜，然后將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌，然后在真空下干燥。
將得自第四步的樹脂(100mg，約0.08mmol)懸浮在1ml無水四氫呋喃。在圓底燒瓶中，將209mg三苯基膦(0.8mmol，約10eq)溶于2ml無水四氫呋喃，然后在0℃下緩慢地加入157μl偶氮二甲酸二異丙酯(0.8mmol，約10eq)和230μl 5-芐氧基-1-戊醇(1.2mmol，約15eq)。將溶液振蕩2小時，然后轉移至樹脂的懸浮液。
將懸浮液干燥過夜，然后將樹脂過濾，并用二氯甲烷、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌。
重復所述過程二次。
將100mg無水樹脂懸浮在3ml二氯甲烷，并加入450μl三氟乙酸。2小時后，排出樹脂，并用3ml二氯甲烷洗滌二次；將收集的溶液干燥，并回收所需的標題化合物。
N-(5-{[5-(芐氧基)戊基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-N′-異丙基脲HPLC方法1r.t.6.75[M+H]+＝411.2通過與實施例16類似的方式進行，將2-[(6-{[叔丁基](二甲基)甲硅烷基]氧基}-1H-吲唑-3-基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和2-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮擔載在樹脂上，然后根據所述的合成路線合成以下產物。
N-[5-(丁-3-炔基氧基)-1H-吲唑-3-基]-N′-異丙基脲HPLC方法1r.t.4.77[M+H]+＝287.1N-芐基-N′-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]脲HPLC方法1r.t.3.28[M+H]+＝380.2N-異丙基-N′-{5-[2-(4-甲基-1，3-噻唑-5-基)乙氧基]-1H-吲唑-3-基}脲HPLC方法2r.t.8.02[M+H]+＝360.1通過與實施例16相同的方式，平行地合成表XVI中的95種產物。
表XVI
權利要求
1.一種用于治療由蛋白激酶活性改變導致的疾病和/或與蛋白激酶活性改變有關的疾病的方法，所述方法包括給需要所述方法的哺乳動物施用有效量的式(I)代表的氨基吲唑衍生物或其藥學上可接受的鹽 其中R選自-NHR′、-NR′R″、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHCONR′R″、-NHSO2R′或-NHCOOR′，其中R′和R″各自獨立地為選自以下的任選進一步被取代的基團直鏈或支鏈C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基或炔基、C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或6元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基；或者R為下式(II)的苯二甲酰亞氨基， 任何R1，如果存在的話，在吲唑環(huán)的5位或6位，并代表如以上關于R′或R″所述的任選進一步被取代的基團；m為0或1。
2.權利要求1的方法，其中所述的由蛋白激酶活性改變導致的疾病和/或與蛋白激酶活性改變有關的疾病是選自以下的細胞增殖疾病癌、阿爾茨海默氏病、病毒感染、自身免疫疾病和神經變性疾病。
3.權利要求2的方法，其中所述的癌選自癌癥、鱗狀細胞癌、淋巴或骨髓系統造血腫瘤、間充質源腫瘤、中樞和外周神經系統腫瘤、黑素瘤、精原細胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、著色性干皮病、角質黃色瘤、甲狀腺濾泡癌和卡波西肉瘤。
4.權利要求1的方法，其中所述的細胞增殖疾病選自良性前列腺增生、家族性腺瘤病、息肉病、神經纖維瘤病、牛皮癬、與動脈粥樣硬化有關的血管平滑細胞增殖、肺纖維化、關節(jié)炎腎小球性腎炎和術后狹窄與再狹窄。
5.權利要求1的方法，所述方法提供腫瘤血管生成和轉移抑制作用。
6.權利要求1的方法，所述方法還包括使需要所述方法的哺乳動物接受與至少一種細胞抑制藥物或細胞毒性藥物聯合的放射治療或化學治療方案。
7.權利要求1的方法，其中需要所述方法的哺乳動物是人。
8.一種抑制蛋白激酶活性的方法，所述方法包括使該激酶與有效量的如權利要求1定義的式(I)的化合物接觸。
9.一種式(I)代表的氨基吲唑衍生物或其藥學上可接受的鹽 其中R選自-NHR′、-NR′R″、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHCONR′R″、-NHSO2R′或-NHCOOR′，其中R′和R″各自獨立地為選自以下的任選進一步被取代的基團直鏈或支鏈C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基或炔基、C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或6元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基；或者R為下式(II)的苯二甲酰亞氨基， 任何R1，如果存在的話，在吲唑環(huán)的5位或6位，并代表如以上關于R′或R″所述的任選進一步被取代的基團；m為0或1；附帶條件是a)如果R為-NHCOR′而m為0，則R′不為甲基、正丙基、芐基、2，2-二苯基乙基、3，5-二甲基-異噁唑-4-基、2-(嗎啉-4-基)乙基或者任選被氯、羥基、甲基、硝基或氨基取代的苯基；b)如果吲唑在5位或6位被甲氧基取代，則R不為3-(N，N-二乙基氨基)丙基氨基、3-[(3-甲基)嗎啉-4-基]丙基氨基或1-羥基-2-甲基-2-丙基氨基；c)排除化合物3-苯二甲酰亞氨基-吲唑。
10.根據權利要求9的式(I)的化合物，其中R為基團-NHR′或-NR′R″，并且R′、R″、R1和m如權利要求9定義。
11.根據權利要求10的式(I)的化合物，其中m為1，而且R1、R′和R″各自獨立地選自C2-C6鏈烯基、C3-C6炔基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或7元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基。
12.根據權利要求9的式(I)的化合物，其中R為基團-NHCOR′，并且R′、R1和m如權利要求9定義。
13.根據權利要求12的式(I)的化合物，其中m為1，而且R1和R′各自獨立地選自C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或7元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基。
14.根據權利要求9的式(I)的化合物，其中R為基團-NHCONHR′或-NHCONR′R″，并且R′、R″、R1和m如權利要求9定義。
15.根據權利要求14的式(I)的化合物，其中m為1，而且R1、R′和R″各自獨立地選自C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或7元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基。
16.根據權利要求9的式(I)的化合物，其中R為基團-NHSO2R′，而且R′、R1和m如權利要求9定義。
17.根據權利要求16的式(I)的化合物，其中m為1，而且R1和R′各自獨立地選自C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或7元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基。
18.根據權利要求9的式(I)的化合物，其中R為基團-NHCOOR′，而且R′、R1和m如權利要求9定義。
19.根據權利要求18的式(I)的化合物，其中m為1，而且R1和R′各自獨立地選自C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或7元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基。
20.根據權利要求9的式(I)的化合物，其中R為式(II)的苯二甲酰亞氨基，并且R1和m如權利要求9定義。
21.根據權利要求20的式(I)的化合物，其中m為1，而且R1選自C2-C6鏈烯基、C3-C6炔基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或7元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基。
22.如權利要求9定義的式(I)的化合物，所述化合物任選為藥學上可接受的鹽的形式，選自1)2-({3-[(苯胺基羰基)氨基]-1H-吲唑-5-基}氧)丁酸甲酯；2)N-芐基-N′-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]脲；3)2-[(3-{[(芐基氨基)羰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧]丁酸甲酯；4)N-異丙基-N′-{5-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧]-1H-吲唑-3-基}脲；5)2-[(3-{[(異丙基氨基)羰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧]-N-苯基丙酰胺；6)2-[(3-{[(異丙基氨基)羰基]氨基}-1H-吲唑-5-基)氧]丁酸甲酯；7)N-異丙基-N′-{5-[2-(4-甲基-1，3-噻唑-5-基)乙氧基]-1H-吲唑-3-基}脲；8)N-[5-(丁-3-炔基氧)-1H-吲唑-3-基]-N′-異丙基脲；9)2-({3-[(3-苯基丙酰基)氨基]-1H-吲唑-5-基}氧)]丁酸甲酯；10)N-{5-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧]-1H-吲唑-3-基}環(huán)丙烷甲酰胺；11)2-({3-[(環(huán)丙基羰基)氨基]-1H-吲唑-5-基}氧)]丁酸甲酯；12)2-(4-叔丁基苯氧基)-N-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]乙酰胺；13)2-(4-甲氧基苯基)-N-[5-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)-1H-吲唑-3-基]乙酰胺；14)2-[(3-{[(4-甲氧基苯基)乙?；鵠氨基}-1H-吲唑-5-基)氧]丁酸甲酯；15)N-異丙基-N′-{6-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧]-1H-吲唑-3-基}脲；16)N-{6-[(2-甲基芐基)氧]-1H-吲唑-3-基}環(huán)丙烷甲酰胺；17)N-{6-[(2-氧代-1-苯基吡咯烷-3-基)氧]-1H-吲唑-3-基}環(huán)丙烷甲酰胺；18)2-({3-[(環(huán)丙基羰基)氨基]-1H-吲唑-6-基}氧)丁酸甲酯；19)2-(3-[(3-氯苯甲?；?氨基]-1H-吲唑-6-基}氧)丁酸甲酯；20)N-芐基-N′-(5-羥基-2H-吲唑-3-基)脲；21)N-(5-羥基-2H-吲唑-3-基)-N′-異丙基脲；22)2-(4-叔丁基苯氧基)-N-(5-羥基-2H-吲唑-3-基)乙酰胺；23)N-(5-羥基-2H-吲唑-3-基)-2-(4-甲氧基苯基)乙酰胺；24)N-(6-羥基-2H-吲唑-3-基)-N′-苯基脲；25)N-(6-羥基-2H-吲唑-3-基)-3-苯基丙酰胺；26)N-(6-羥基-2H-吲唑-3-基)環(huán)丙烷甲酰胺。
23.一種用于制備如權利要求9定義的式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽的方法，其中R如權利要求9定義，但不為式(II)的苯二甲酰亞氨基，所述方法包括a)在酸性條件下使式(III)的2-氨基-芐腈衍生物 其中m如權利要求9定義，且R_如果存在的話為甲基或芐基；與亞硝酸鈉在氯化亞錫存在下反應得到式(IV)的化合物 b)使式(IV)的化合物與鄰苯二甲酸酐反應得到式(V)的化合物 c)使式(V)的化合物與適宜的醚裂解試劑反應得到對應的式(VI)的羥基衍生物 d)使式(VI)的化合物與適宜的甲硅烷化試劑(Riv)3SiZ反應得到式(VII)的化合物，其中各Riv相同或不同，為直鏈或支鏈C1-C4烷基，并且Z為鹵原子， e)使式(VII)的化合物與適宜的吲唑氮保護劑反應或可選擇擔載在適宜的聚合樹脂上，得到式(VIII)的化合物， 其中Q為以上的保護基或者代表載體樹脂；f)使式(VIII)的化合物與肼一水合物反應得到式(IX)的化合物， 并使式(IX)的化合物根據以下步驟g.1)或g.2)中的任一步驟進行反應；g.1)與適宜的式R′-Z(X)、R′-COZ(XI)、R′-NCO(XII)、R′-SO2Z(XIII)或R′OCOZ(XIV)的試劑反應，其中R′如權利要求9定義，并且Z代表鹵原子或適宜的離去基團，從而得到對應的式(XV)的化合物 其中R為基團-NHR′、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHSO2R′或-NHCOOR′，而且如果需要的話，使R為-NHR′或-NHCONHR′基團的化合物與下式的化合物反應，R″Z(XVI)其中R″如權利要求9定義，而Z如以上定義，從而得到式(XV)的化合物，其中R為基團-NR′R″或-NHCONR′R″；g.2)與式(XVII)的化合物R′R″NH (XVII)其中R′和R″如以上定義，在4-硝基苯基氯甲酸酯存在下反應從而得到對應的式(XV)的化合物，其中R為基團-NHCONR′R″；h)使任何以上式(XV)的化合物與四丁基氟化銨反應得到式(XVIII)的化合物 i)使式(XVIII)的化合物與下式的衍生物反應，R1-Z (XIX)其中R1如權利要求9定義，并且Z為鹵原子、適宜的離去基團或羥基，從而得到式(XX)的化合物； j)將式(XX)的化合物脫保護，或者可選擇地將聚合樹脂裂解以得到目標式(I)的化合物，而且如果需要的話，將它轉化成另一種式(I)的化合物和/或其藥學上可接受的鹽。
24.權利要求23的方法，其中式(III)的化合物為2-氨基-4-甲氧基-芐腈或2-氨基-5-芐氧基-芐腈。
25.權利要求23的方法，其中步驟a)在鹽酸存在下完成。
26.權利要求23的方法，其中在步驟d)中，甲硅烷化試劑為叔丁基-二甲基-甲硅烷基氯化物。
27.權利要求23的方法，其中在步驟e)中，式(VII)的吲唑衍生物擔載在氯-三苯甲基氯化物聚合樹脂上。
28.一種用于制備如權利要求9定義并且其中的R為式(II)的苯二甲酰亞氨基的式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽的方法，所述方法包括使如權利要求23定義的式(VIII)的化合物根據權利要求23的方法中的步驟h)、i)和j)進行反應。
29.如權利要求9定義的式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽，它例如可以通過組合化學技術，根據以上權利要求23的方法，通過以下步驟得到首先使式(IXa)的化合物與每一種如表I所述的式(X)的化合物反應得到多數式(XVa)的化合物， 然后使各種式(XVa)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與每一種如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
30.如權利要求9定義的式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽，它例如可以通過組合的化學技術，根據權利要求23的方法，通過以下步驟得到首先使式(IXb)的化合物與每一種如表I所述的式(X)的化合物反應得到多數式(XVa)的化合物， 然后使各種式(XVb)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與每一種如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
31.如權利要求9定義的式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽，它例如可以通過組合的化學技術，根據權利要求23的方法，通過以下步驟得到首先使式(IXa)的化合物與每一種如表IV所述的式(XI)的化合物反應得到多數式(XVc)的化合物， 然后使每一種式(XVc)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與每一種如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
32.如權利要求9定義的式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽，它例如可以通過組合的化學技術，根據權利要求23的方法，通過以下步驟得到首先使式(IXb)的化合物與每一種如表IV所述的式(XI)的化合物反應得到多數式(XVd)的化合物， 然后使每一種式(XVd)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與每一種如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
33.如權利要求9定義的式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽，它例如可以通過組合的化學技術，根據權利要求23的方法，通過以下步驟得到首先使式(IXa)的化合物與每一種如表V所述的式(XII)的化合物反應得到多數式(XVe)的化合物， 然后使每一種式(XVe)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與每一種如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
34.如權利要求9定義的式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽，它例如可以通過組合的化學技術，根據權利要求23的方法，通過以下步驟得到首先使式(IXb)的化合物與每一種如表V所述的式(XII)的化合物反應得到多數式(XVf)的化合物， 然后使每一種式(XVf)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與每一種如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
35.如權利要求9定義的式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽，它例如可以通過組合的化學技術，根據權利要求23的方法，通過以下步驟得到首先使式(IXa)的化合物與每一種如表VI所述的式(XIII)的化合物反應得到多數式(XVg)的化合物， 然后使每一種式(XVg)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與每一種如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
36.如權利要求9定義的式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽，它例如可以通過組合的化學技術，根據權利要求23的方法，通過以下步驟得到首先使式(IXb)的化合物與每一種如表VI所述的式(XIII)的化合物反應得到多數式(XVh)的化合物， 然后使每一種式(XVh)的衍生物與四丁基氟化銨根據所述方法的步驟h)進行反應，隨后與每一種如表II或III所述的式(XIX)的衍生物反應，接著根據所述方法的步驟j)進行操作。
37.二種或多種式(I)代表的氨基吲唑衍生物或其藥學上可接受的鹽的庫， 其中R選自-NHR′、-NR′R″、-NHCOR′、-NHCONHR′、-NHCONR′R″、-NHSO2R′或-NHCOOR′，其中R′和R″各自獨立地為選自以下的任選進一步被取代的基團直鏈或支鏈C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基或炔基、C3-C6環(huán)烷基或環(huán)烷基C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C6烷基、具有1-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或6元雜環(huán)基或雜環(huán)基C1-C6烷基；或者R為下式(II)的苯二甲酰亞氨基， 任何R1，如果存在的話，在吲唑環(huán)的5位或6位，并代表如以上關于R′或R″所述的任選進一步被取代的基團；m為0或1。
38.一種特定的式(I)的化合物，所述化合物任選為藥學上可接受的鹽的形式，如表IX-XVI之任一表所定義。
39.一種包含有效量的如權利要求9定義的式(I)的氨基吲唑和至少一種藥學上可接受的賦形劑、載體或稀釋劑的藥物組合物。
40.根據權利要求39的藥物組合物，所述組合物還包含一種或多種化學治療劑作為組合制劑以同時、單獨或連續(xù)地用于抗癌治療。
41.一種包含權利要求9的化合物或如權利要求39定義的其藥物組合物和一種或多種化學治療劑的產品或試劑盒，其作為一種組合制劑以同時、單獨或連續(xù)地用于抗癌治療。
42.如權利要求9定義的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽用作藥物。
43.如權利要求9定義的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽用于制備治療由蛋白激酶活性改變導致的疾病和/或與蛋白激酶活性改變有關的疾病的藥物的用途。
44.根據權利要求43的用于治療腫瘤的用途。
全文摘要
公開了化合物3－氨基吲唑衍生物或其藥學上可接受的鹽，并一起公開了包含它們的藥物組合物；這些化合物或組合物用于治療由蛋白激酶活性改變導致的疾病和/或與蛋白激酶活性改變有關的疾病，例如癌、細胞增殖疾病、阿爾茨海默氏病、病毒感染、自身免疫疾病和神經變性疾病。
文檔編號A61K31/42GK1556702SQ02818598
公開日2004年12月22日 申請日期2002年9月19日 優(yōu)先權日2001年9月26日
發(fā)明者R·阿米茨, M·迪阿尼羅, K·瑪蒂納, B·薩羅姆, A·伍爾佩蒂, ⒛崧, R 阿米茨, 倌, 宓, 弈 申請人:法瑪西雅意大利公司