專利名稱：淫羊藿總黃酮的提取方法及其提取物所制成的產(chǎn)品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從淫羊藿中提取淫羊藿總黃酮的方法，以及用該方法產(chǎn)生的提取物制成的產(chǎn)品。
背景技術(shù)：
骨質(zhì)疏松癥是一種在中、老年人群常見而多發(fā)的病癥。這種病癥的特征是人體全身性骨量減少和骨組織微細(xì)結(jié)構(gòu)破壞，結(jié)果導(dǎo)致骨脆性增加和骨折危險(xiǎn)性的增高。
從傳統(tǒng)的中藥學(xué)得知，淫羊藿具有“補(bǔ)腎壯陽、強(qiáng)筋骨”之功能，而且中醫(yī)學(xué)認(rèn)為“腎主骨，腎藏精、生髓、養(yǎng)骨”，通過增強(qiáng)“腎”的功能就能促進(jìn)骨的生長(zhǎng)發(fā)育，維持骨的成分及結(jié)構(gòu)正常。但是根據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)的籠統(tǒng)指示，本領(lǐng)域的技術(shù)人員未能得知淫羊藿中的哪種或哪幾種成份具有強(qiáng)“腎”的功效；另外不同種屬的淫羊藿經(jīng)不同的煎煮處理提取出來的提取物的構(gòu)成也不盡相同，從而會(huì)導(dǎo)致淫羊藿藥效的不穩(wěn)定性。因此在本領(lǐng)域中一直期待一種能從淫羊藿中提取的有效成份的方法，以及用該提取物制備的治療骨質(zhì)疏松癥的產(chǎn)品。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種從淫羊藿中提取淫羊藿總黃酮的方法；本發(fā)明的另一目的在于提供用上述方法得到的提取物具有較穩(wěn)定的成份，并用此提取物生產(chǎn)的產(chǎn)品具有穩(wěn)定的治療骨質(zhì)疏松癥的功能。
本發(fā)明的自淫羊藿中提取淫羊藿總黃酮的方法具有以下的工藝步驟1)將淫羊藿在熱水中煎煮，得到水煎液；2)使所述水煎液通過大孔吸附樹脂；3)用濃度成一定梯度的不同乙醇溶液洗脫大孔樹脂上的吸附物；4)收集洗脫流出物，使該流出物濃縮至干。
本發(fā)明上述的提取淫羊藿總黃酮的方法采用藥典規(guī)定種屬的淫羊藿，而本發(fā)明的方法優(yōu)選用朝鮮淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)、箭葉淫羊藿(Epimedium sagittatum Maxim)或柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim)。
本發(fā)明所述的提取淫羊藿總黃酮的方法所采用的用于洗脫吸附物的乙醇濃度梯度為10％，30％，50％和80％。
按本發(fā)明方法提取淫羊藿總黃酮提取物含有40～80％的淫羊藿總黃酮，其中淫羊藿甙的含量≥12％。其余物質(zhì)目前尚不完全清楚，但可以確定的是，(1)它們是黃酮甙類物質(zhì)；(2)它們對(duì)于治療骨質(zhì)疏松癥至少?zèng)]有不利的作用。
本發(fā)明的治療骨質(zhì)疏松癥的產(chǎn)品含有按上述方法提取的淫羊藿總黃酮提取物；上述的治療骨質(zhì)疏松癥的產(chǎn)品含有20～30％(重量)的用本方法提取的淫羊藿總黃酮提取物；上述的治療骨質(zhì)疏松癥的產(chǎn)品中還含有4～8％(重量)的大豆異黃酮；上述的治療骨質(zhì)疏松癥的產(chǎn)品中還含有65～75％(重量)的有機(jī)鈣，所述的有機(jī)鈣優(yōu)選天門冬氨酸鈣、葡萄糖酸鈣或乳酸鈣。
下面通過實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明具體實(shí)施方式
實(shí)施例11)取朝鮮淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)(HPLC測(cè)定其中淫羊藿甙含量≥1％)150Kg，用2×1500Kg的水于80～100℃煎煮兩次，收集合并煎煮液并使其通過大孔樹脂(山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司提供)吸附；用水洗該吸附柱，然后依次用濃度為10％、30％、50％的乙醇溶液將吸附物洗脫；收集流出物，使其濃縮、干燥后得淫羊藿總黃酮。其中含有68.5％(重量)的總黃酮；2)制備口服片劑取上述淫羊藿總黃酮提取物8kg、大豆異黃酮2kg、天門冬氨酸鈣20kg及常規(guī)輔料10kg混合經(jīng)制粒、烘干、壓片或灌裝膠囊制成口服制劑。
3)本發(fā)明產(chǎn)品具有良好的安全性，小鼠急性經(jīng)口LD50大于20g/kg，屬無毒級(jí)物質(zhì)。
4)功能試驗(yàn)方法①模型制備隨機(jī)取雌性大鼠50只，以30mg/kg體重的劑量腹腔注射1％戊巴比妥鈉溶液，麻醉后切除雙側(cè)卵巢，術(shù)后肌肉注射2萬單位的青霉素，連續(xù)注射3天。
②假手術(shù)組的處理隨機(jī)取雌性大鼠10只，麻醉方式同上，但打開腹腔后切除0.5g左右的脂肪，保留雙側(cè)卵巢。
③本發(fā)明的人體口服推薦劑量為每日1.6g/60kg，本實(shí)驗(yàn)按推薦劑量的5倍、10倍、30倍給藥，即設(shè)計(jì)日用藥量為0.13g、0.27g、0.80g/kg體重的低、中、高三個(gè)劑量組。制成模型的取所余的10只大鼠為模型對(duì)照組，各組均單籠飼養(yǎng)。取實(shí)施例2中的混合樣品0.13g、0.27g、0.80g，分別加入10ml去離子水，每日以10ml/kg體重的劑量給上述三個(gè)試驗(yàn)組的大鼠灌胃，陽性對(duì)照組經(jīng)口給予1.0mg/kg.BW的阿侖膦酸鈉；對(duì)照模型組和假手術(shù)組的大鼠僅以去離子水灌胃。整個(gè)實(shí)驗(yàn)持續(xù)26周，然后用頸椎脫臼處死大鼠，測(cè)量大鼠股骨中點(diǎn)及股骨干骺端骨密度，然后解剖大鼠，剝離左側(cè)股骨，測(cè)量股骨的長(zhǎng)度，將股骨烤干至恒重，稱量骨干重。依據(jù)國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定骨鈣含量。結(jié)果見表1表1 樣品對(duì)大鼠股骨的長(zhǎng)度、重量、骨密度及骨鈣的影響動(dòng)物 股骨長(zhǎng)度 股骨重量 股骨干骺端 股骨中點(diǎn) 骨鈣含量組別(只) (cm) (g)骨密度 骨密度 (mg/g)(g/cm3)(g/cm3)假手術(shù)組103.31±0.27a0.64±0.058a0.236±0.025a0.223±0.005a270.6±36.4a模型對(duì)照組 103.33±0.28a0.56±0.067b0.191±0.027b0.185±0.017b181.9±55.7c陽性對(duì)照組 103.31±0.22a0.63±0.062a0.229±0.027a0.217±0.028a238.3±38.8ab低劑量組103.34±0.26a0.61±0.092ab0.203±0.014ab0.201±0.034ab224.3±37.9bc中劑量組103.39±0.31a0.64±0.061a0.224±0.036a0.213±0.027a255.1±31.5ab高劑量組103.36±0.25a0.65±0.056a0.230±0.028a0.219±0.021a274.2±27.7a注同一縱行，上標(biāo)數(shù)字不同，表示組間差異有顯著性，P＜0.05(經(jīng)方差分析)。
由上表可見，各組大鼠的股骨長(zhǎng)度均無顯著差異；假手術(shù)組大鼠股骨的重量、股骨干骺端骨密度、股骨中點(diǎn)骨密度及骨鈣含量均顯著高于模型對(duì)照組；陽性對(duì)照組及樣品高、中劑量組股骨重量、股骨干骺端骨密度、股骨中點(diǎn)骨密度及骨鈣含量顯著高于模型對(duì)照組。由此可見，本發(fā)明的產(chǎn)品具有良好的改善大鼠骨質(zhì)疏松作用。
本發(fā)明的提取方法可以將淫羊藿總黃酮從淫羊藿中提取出來，并用它制成治療骨質(zhì)疏松癥的產(chǎn)品。由于該產(chǎn)品含有含量固定的用于治療骨質(zhì)疏松的有效組份，因而療效穩(wěn)定可靠，而且所述產(chǎn)品只需較小的劑量即能達(dá)到理想的療效，所以該產(chǎn)品還有便于服用的優(yōu)點(diǎn)。
權(quán)利要求
1.從淫羊藿中提取淫羊藿總黃酮提取物的方法，其步驟為1)將淫羊藿用熱水煎煮，得到水煎液；2)使所述水煎液通過大孔吸附樹脂；3)用濃度成一定梯度的不同乙醇溶液洗脫大孔樹脂上的吸附物；4)收集洗脫液，使洗脫流出物濃縮至干。
2.權(quán)利要求書1所述的提取物淫羊藿總黃酮提取物的方法，其中所述的淫羊藿選自箭葉淫羊藿(Epimedium sagittatum Maxim)，朝鮮淫羊藿(Epimedium koreanumNakai)或柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim)。
3.權(quán)利要求書1的從淫羊藿提取淫羊藿總黃酮提取物的方法，其中用于梯度洗脫步驟的乙醇溶液的濃度分別為10％、30％、50％和80％。
4.治療骨質(zhì)疏松癥的產(chǎn)品，其特征在于該產(chǎn)品含有按權(quán)利要求1-3的方法提取的淫羊藿總黃酮提取物，其中總黃酮含量為40-80％(用HPLC方法測(cè)定)。
5.權(quán)利要求4的治療骨質(zhì)疏松癥的產(chǎn)品，其特征在于所述淫羊藿總黃酮提取物的含量為20-30％(重量)。
6.權(quán)利要求5的治療骨質(zhì)疏松癥的產(chǎn)品，其特征在于所述產(chǎn)品還含有4-8％(重量)的大豆異黃酮。
7.權(quán)利要求4的治療骨質(zhì)疏松癥的產(chǎn)品，其特征在于所述產(chǎn)品還含有65-75％(重量)的有機(jī)鈣。
8.權(quán)利要求4的治療骨質(zhì)疏松癥的產(chǎn)品，其特征在于所述產(chǎn)品4-8％的大豆異黃酮和65-75％(重量)的有機(jī)鈣，以及余量的常規(guī)輔料。
9.權(quán)利要求7或8的治療骨質(zhì)疏松癥的產(chǎn)品，其中所述的有機(jī)鈣為天門冬氨酸鈣、葡萄糖酸鈣或乳酸鈣。
10.本發(fā)明產(chǎn)品可作為保健食品或藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及淫羊藿總黃酮的提取方法，并涉及用該方法獲得的提取物制成的有益于防治骨質(zhì)疏松癥的制品。淫羊藿經(jīng)煎煮，使水煎液通過大孔樹脂，用不同濃度的乙醇溶液洗脫及濃縮等步驟得到淫羊藿總黃酮提取物，其中總黃酮含量為40－80％(用HPLC方法測(cè)定)。用該提取物制備的具有防治骨質(zhì)疏松功能的產(chǎn)品最好含有(％重量)20－30％的所述提取物、4－8％的大豆異黃酮及65－75％的有機(jī)鈣。
文檔編號(hào)A61P19/00GK1488638SQ0213736
公開日2004年4月14日 申請(qǐng)日期2002年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2002年10月10日
發(fā)明者秦繼紅 申請(qǐng)人:上海海天醫(yī)藥科技開發(fā)有限公司