專利名稱：一種用于抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬中藥制劑技術(shù)領(lǐng)域。具體涉及一種用于抗骨質(zhì)疏松的中藥的有效組分及其制劑。
背景技術(shù)：
淫羊藿總黃酮粉是從中藥淫羊藿中提取德有效部位。中藥淫羊藿有以下幾個(gè)品種小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicomumMaxim.、箭葉淫羊藿Epimedium sagittatum(Sieb.et Zucc)Maxim.、柔毛淫羊藿Epimedium pubescens MaXim.、巫山淫羊藿Epimediumwushanense T.S.Ying、或朝鮮淫羊藿Epimedium koreanum Nakai。中藥淫羊藿的藥用部位為干燥地上部分，并除去粗梗及雜質(zhì)。
朝鮮淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)，又名東北淫羊藿(《全國中草藥匯編》)。其藥用部位化學(xué)成分以黃酮居多，已有的化學(xué)成分研究表明它含有淫羊藿苷及淫羊藿苷A，淫羊藿定A、B、C，淫羊藿定A，、B1，槲皮素、脫水淫羊藿素-3-鼠李糖苷，朝鮮淫羊藿苷(epimedokoreanoside)I、II。
淫羊藿苷，為黃酮甙類成分，分子中C3、C7位上的羥基與糖結(jié)合形成甙，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下
從以上結(jié)構(gòu)可知淫羊藿苷應(yīng)具有黃酮類化合物特征地紫外吸收，
從以上結(jié)構(gòu)可知淫羊藿苷應(yīng)具有黃酮類化合物特征的紫外吸收，紫外掃描證實(shí)淫羊藿苷在270nm左右具有較強(qiáng)的吸收，故以高效液相進(jìn)行含量測定時(shí)，選擇270nm為測定波長。
目前未見用中藥淫羊藿制備的抗骨質(zhì)疏松藥劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是研制一種用于抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑。
本發(fā)明提供了一種含中藥淫羊藿的用于抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑仙靈骨康片，該制劑是由淫羊藿提取的有效成份與藥用輔料組成的。
(一)本發(fā)明的用于抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑藥效學(xué)研究如下
中藥淫羊藿提取的有效組分(下文簡稱為9412)的藥效學(xué)研究1.9412對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥的影響—預(yù)防作用
實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察9412對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥預(yù)防作用。1.1.材料1.1.1.供試品
名稱9412
提供單位上海醫(yī)藥工業(yè)研究院
批號(hào)20001017
劑型浸膏
用量1ml/100g大鼠
給藥途徑po
劑量4、12、36mg/kg，po×281.1.2.陽性對(duì)照藥
羥乙基膦酸鈉
上海醫(yī)藥工業(yè)研究院化學(xué)事業(yè)部提供，批號(hào)991010，口服50mg/kg，po×28。1.1.3.其它
維甲酸
上海第六制藥廠生產(chǎn)，黃色結(jié)晶粉末，口服，作為造成大鼠骨質(zhì)疏松癥模型用，口服劑量1ml/100g大鼠，用0.5％CMC配成混懸液，70mg/kg劑量，po×14。
骨密度測定儀
DPX-L型雙能X線骨密度儀，美國LunAR公司生產(chǎn)，上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院提供。
試劑盒鈣試劑盒，衛(wèi)生部上海生物制品研究所。
磷試劑盒，上海捷門生物技術(shù)公司。
馬福爐上海浦東躍欣科學(xué)儀器廠。
722S分光光度計(jì)上?？茖W(xué)精密儀器有限公司。1.2.動(dòng)物
來源、種屬、品系、合格證
大鼠，SD系，中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
合格證中科動(dòng)管會(huì)第005號(hào)。
體重110～130g
性別雌雄均有
每組動(dòng)物數(shù)10只
實(shí)驗(yàn)室溫度24～26℃，相對(duì)濕度60～70％。1.3.試驗(yàn)方法1.3.1.建立維甲酸誘導(dǎo)大鼠骨質(zhì)疏松癥模型
大鼠隨機(jī)分為6組，正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、9412低、中、高劑量組、陽性對(duì)照組，除正常對(duì)照組外，各組大鼠均口服維甲酸70mg/kg，服用量1ml/100g大鼠，每天1次，連續(xù)14天，同時(shí)每天各組大鼠依次口服以下樣品，正常對(duì)照組、維甲酸模型組為相應(yīng)溶劑10ml/kg、9412低劑量組4mg/kg、中劑量組12mg/kg、高劑量組36mg/kg、陽性藥羥乙基膦酸鈉50mg/kg，服用量均為1ml/100g大鼠，每天1次，連續(xù)28天，其間每周稱體重1次，以體重調(diào)整給藥用量。1.3.2.觀察指標(biāo)
給藥結(jié)束，斷頭處死動(dòng)物，取血分離血清，按試劑盒方法測S-Ca、S-P含量，取大鼠雙側(cè)股骨，剝凈肉及其它組織，其中一側(cè)股骨在雙能X線骨密度儀上作大鼠股骨掃描，測出骨密度(g/cm2)，稱骨重(W)，測骨長(L)，骨直徑(D)，計(jì)算骨表觀線密度(W/L)、表觀面密度(W/L·D)，然后110℃烘干一小時(shí)，再置于馬福爐內(nèi)200、400、600、800℃各灰化2小時(shí)，灰化結(jié)束冷卻后，稱灰重(Wash·g)，用6NHCl提取后測骨灰Ca、骨灰P含量，以100g骨灰含Ca或P的克數(shù)表示。
另一側(cè)股骨頭用3％HNO3脫鈣后作石蠟切片，HE染色，顯微鏡下測骨小梁寬度。
以上結(jié)果均以給藥組與模型組比較，模型組與正常對(duì)照組比較。1.4.結(jié)果1.4.1.體重
實(shí)驗(yàn)當(dāng)天及第1周內(nèi)各組動(dòng)物體重?zé)o明顯差異(P＞0.05)，給藥后2、4周維甲酸模型組體重比正常對(duì)照組體重減輕(P＜0.01、P＜0.05)，但用藥后各組動(dòng)物體重均明顯增加，其中低劑量組(4mg/kg)有體重增加但無統(tǒng)計(jì)意義，而9412中、高劑量組(12mg/kg、36mg/kg)及羥乙基膦酸鈉組大鼠第2、4周的體重均比模型組增加(P＜0.05)，各劑量組相互比較無明顯差異。
表1 9412對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥預(yù)防作用的體重變化
x±SD
ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01與正常對(duì)照組比較
*P＜0.05，**P＜0.01與模型對(duì)照組比較1.4.2.大鼠股骨骨密度及SCa、SP的變化
表2結(jié)果顯示模型組大鼠股骨骨密度比正常對(duì)照組低(P＜0.01)，血清Ca含量也較模型組低(P＜0.05)，血清磷含量變化不大，但用藥組大鼠股骨密度都比模型組增加(P＜0.05、P＜0.01)，血清鈣及磷的含量均較模型組升高，但9412中、高劑量組無明顯差異。陽性藥羥乙基膦酸鈉的大鼠股骨骨密度及血清鈣血清磷含量也比模型組有明顯的差異(P＜0.05、P＜0.01)。
表2 9412對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥預(yù)防作用時(shí)的股骨骨密度、
SCa、Sp的變化 x±SD
ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01與正常對(duì)照組比較
*P＜0.05，**P＜0.01與模型對(duì)照組比較1.4.3. 9412對(duì)維甲酸誘導(dǎo)大鼠骨質(zhì)疏松癥預(yù)防作用骨指數(shù)的影響
與對(duì)照組比較，模型組的W、L、d、W/L、W/Ld均明顯下降，相對(duì)于模型組9412中、高劑量組及羥乙基膦酸鈉組的W、W/Ld均明顯提高。
表3. 9412對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥預(yù)防作用骨指數(shù)的影響
x±SD
ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01與正常對(duì)照組比較
*P＜0.05，**P＜0.01與模型對(duì)照組比較1.4.4.對(duì)股骨灰分、骨Ca及骨P的影響
與對(duì)照組比較，模型組的骨灰重及灰分中骨Ca及骨P含量均降低，但用藥后9412中、高劑量組及羥乙基膦酸鈉組骨灰重、骨Ca、骨P含量均相對(duì)增加。
表4 9412對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥預(yù)防作用時(shí)的股骨灰分、骨
Ca及骨Pi含量的影響 x±SD
ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01與正常對(duì)照組比較
*P＜0.05，**P＜0.01與模型對(duì)照組比較2. 9412對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥的影響—治療作用
實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察9412對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥的治療作用。2.1.材料2.1.1.供試品
名稱9412
提供單位上海醫(yī)藥工業(yè)研究院
批號(hào)20001017
劑型浸膏
用量1ml/100g大鼠
給藥途徑po
劑量4、12、36mg/kg，po×142.1.2.陽性對(duì)照藥羥乙基膦酸鈉上海醫(yī)藥工業(yè)研究院化學(xué)事業(yè)部提供，批號(hào)991010，口服50mg/kg，po×14。2.1.3其它維甲酸上海第六制藥廠生產(chǎn)，黃色結(jié)晶粉末，口服，作為造成大鼠骨質(zhì)疏松癥模型用，服用量1ml/100g大鼠，用0.5％CMC配成混懸液，70mg/g劑量，po×14。骨密度測定儀DPX-L型雙能X線骨密度儀，美國LunAR公司生產(chǎn)，上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院提供。試劑盒鈣試劑盒，衛(wèi)生部上海生物制品研究所。
磷試劑盒，上海捷門生物技術(shù)公司。
馬福爐上海浦東躍欣科學(xué)儀器廠。
722S分光光度計(jì)上?？茖W(xué)精密儀器有限公司。2.2.動(dòng)物
來源、種屬、品系、合格證
大鼠，SD系，中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
合格證中科動(dòng)管會(huì)第005號(hào)。
體重110～130g
性別雌雄均有
每組動(dòng)物數(shù)10只
實(shí)驗(yàn)室溫度24～26℃，相對(duì)濕度60～70％。2.3.試驗(yàn)方法2.3.1.建立維甲酸誘導(dǎo)大鼠骨質(zhì)疏松癥模型
大鼠隨機(jī)分為6組，正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、9412低、中、高劑量組、陽性藥對(duì)照組，除正常對(duì)照組外，各組大鼠均口服維甲酸70mg/kg，服用量1ml/100g大鼠，每天1次，連續(xù)14天，結(jié)束后各用藥組按各劑量組給藥口服每天1次，連續(xù)28天，正常對(duì)照組及模型組給予相應(yīng)溶劑，服用量均為1ml/100g體重，其間根據(jù)體重調(diào)整給藥量。2.3.2.觀察指標(biāo)
給藥結(jié)束，斷頭處死動(dòng)物，取血分離血清，按試劑盒方法測S-Ca、S-P含量，取大鼠雙側(cè)股骨，剝凈肉及其它組織，其中一側(cè)股骨在雙能X線骨密度儀上作大鼠股骨掃描，測出骨密度(g/cm2)，稱股骨重(W)，測骨長(L)，骨直徑(D)，計(jì)算骨表觀線密度(W/L)、表觀面密度(W/L.d)，然后110℃烘干一小時(shí)，再置于馬福爐內(nèi)200、400、600、800℃各灰化2小時(shí)，灰化結(jié)束冷卻后，稱灰重(Wash..g)，用6N HCl提取后測骨灰Ca、骨灰P含量，以100g骨灰含Ca或P的克數(shù)表示。
另一側(cè)股骨頭用3％HNO3脫鈣后作石蠟切片，HE染色，顯微鏡下測骨小梁寬度。
以上結(jié)果均以給藥組與模型組比較，模型組與正常對(duì)照組比較。2.4.結(jié)果2.4.1.體重
表5顯示給予維甲酸后，各組動(dòng)物體重比正常對(duì)照組體重均明顯下降，但給9412后，給藥組體重開始恢復(fù)，維甲酸模型組也開始恢復(fù)。2.4.2.大鼠股骨骨密度及SCa、SP的變化
表5 9412對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥治療作用的體重變化
x±SD
表6結(jié)果顯示模型組大鼠股骨骨密度比正常對(duì)照組低(P＜0.01)，SCa含量也較模型組(P＜0.01)，而SP無明顯變化，用藥后9412各劑量組的大鼠股骨密度與模型組比較，有明顯的提高股骨密度及SCa的作用，以9412 12mg/kg組作用最明顯，羥乙基膦酸鈉也有提高大鼠股骨密度及SCa的作用，但各組的SP含量模型組、用藥組均與正常對(duì)照組無明顯差異。
表6 9412對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥治療作用時(shí)股骨骨密度及
SCa、SP的變化 x±SD
ΔΔP＜0.01與正常對(duì)照組比較
*P＜0.05，**P＜0.01與模型對(duì)照組比較2.4.3. 9412對(duì)維甲酸誘導(dǎo)大鼠骨質(zhì)疏松癥治療作用骨指數(shù)的影響
與對(duì)照組比較，模型組的骨質(zhì)疏松癥的W、L、d、W/L、W/Ld均有明顯下降，相對(duì)于模型組9412的高劑量組及羥乙基膦酸鈉組W/Ld明顯提高(P＜0.01)。
表7. 9412對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥治療作用骨指數(shù)的影響
x±SD
ΔΔP＜0.01與正常對(duì)照組比較
**P＜0.01與模型對(duì)照組比較2.4.4.對(duì)股骨灰分、骨Ca及骨P的影響
與對(duì)照組相比，模型組的骨灰重及灰分中骨Ca、骨P含量均降低，但用藥后9412中、高劑量組及羥乙基膦酸鈉組骨灰重、骨Ca、骨P含量均相對(duì)增加。
表8 9412對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥預(yù)防作用時(shí)的股骨灰分、骨
Ca及骨Pi含量的影響 x±SD
ΔΔP＜0.01與正常對(duì)照組比較
*P＜0.05，**P＜0.01與模型對(duì)照組比較3. 9412對(duì)去勢大鼠抗骨質(zhì)疏松癥的治療作用
實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察9412對(duì)去勢大鼠骨質(zhì)疏松癥的療效。3.1.材料3.1.1.供試品
名稱9412
提供單位上海醫(yī)藥工業(yè)研究院
批號(hào)20001017
劑型浸膏
用量1ml/100g大鼠
給藥途徑po
劑量4、12、36mg/kg，po×903.1.2.陽性對(duì)照藥
羥乙基膦酸鈉
上海醫(yī)藥工業(yè)研究院化學(xué)事業(yè)部提供，批號(hào)991010，口服50mg/kg，po×90。3.1.3.其它
骨密度測定儀
DPX-L型雙能X線骨密度儀，美國LunAR公司生產(chǎn)，上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院提供。
試劑盒鈣試劑盒，衛(wèi)生部上海生物制品研究所。
磷試劑盒，上海捷門生物技術(shù)公司。
馬福爐上海浦東躍欣科學(xué)儀器廠。
722S分光光度計(jì)上?？茖W(xué)精密儀器有限公司。3.2.動(dòng)物
來源、種屬、品系、合格證
大鼠，SD系，中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
合格證中科動(dòng)管會(huì)第005號(hào)。
體重雌性110～130g，雄性130～150g
每組動(dòng)物數(shù)10只
實(shí)驗(yàn)室溫度24～26℃，相對(duì)濕度60～70％。3.3.試驗(yàn)方法3.3.1.建立去勢大鼠骨質(zhì)疏松癥模型
雌雄大鼠以3％戊巴比妥鈉麻醉，常規(guī)消毒，在無菌條件下摘除雙側(cè)睪丸或卵巢，隨即縫合切口，假手術(shù)組僅作腹部手術(shù)消毒切開后再縫合(不切除睪丸及卵巢)，將大鼠隨機(jī)分組，每組10～12只，手術(shù)一周后分組，按各用藥組給藥，每日1次，連續(xù)90天，模型組給予相應(yīng)溶劑，服用量均為1ml/100g體重，其間根據(jù)體重調(diào)整給藥量。3.3.2.觀察指標(biāo)
給藥結(jié)束，斷頭處死動(dòng)物，取血分離血清，按試劑盒方法測S-Ca、S-P含量，取大鼠雙側(cè)股骨，剝凈肉及其它組織，其中一側(cè)股骨在雙能X線骨密度儀上作股骨掃描，測出骨密度(g/cm2)，稱股骨重(W)，測骨長(L)，骨直徑(d)，計(jì)算骨表觀線密度(W/L)、表觀面密度(W/L·d)，然后110℃烘干一小時(shí)，再置于馬福爐內(nèi)200、400、600、800℃各灰化2小時(shí)，灰化結(jié)束冷卻稱灰重(Wash)，用6N HNO3提取后，測骨灰Ca、骨灰P含量，以100g骨灰含Ca2+或Pi的克數(shù)表示。
另一側(cè)股骨頭用3％HNO3脫鈣后作石蠟切片，HE染色，顯微鏡下測骨小梁寬度。
以上結(jié)果均以給藥組與模型組比較，模型組與正常對(duì)照組比較。3.4.結(jié)果3.4.1.體重
各組動(dòng)物之間無明顯差異。
表9 9412對(duì)去勢大鼠體重變化(天)
x±SD (g)
3.4.2.大鼠股骨骨密度及SCa、SP的變化
表9結(jié)果顯示模型組大鼠股骨骨密度比正常對(duì)照組低(P＜0.01)，9412中、高劑量組及羥乙基膦酸鈉都比模型組有顯著的升高(P＜0.05)，模型組的血清Ca、血清P均比正常對(duì)照組低，用藥后血清Ca比模型組提高，但無統(tǒng)計(jì)意義，血清P變化不大，羥乙基膦酸鈉血清Ca比模型組升高P＜0.05)，血清Pi變化不大。
表10 9412對(duì)去勢大鼠股骨骨密度、骨小梁的影響
x±SD
ΔΔP＜0.01與正常對(duì)照組比較
*P＜0.05，**P＜0.01與模型對(duì)照組比較
3.4.3. 9412對(duì)去勢大鼠骨指數(shù)的影響
與對(duì)照組比較，模型組的W、L、d、W/L、W/Ld均有明顯的下降，相對(duì)于模型組9412的各組劑量均能增加大鼠股骨重量(P＜0.05、P＜0.01)，以中劑量組最明顯，中劑量組及羥乙基膦酸鈉組W/L、W/Ld均比模型組有明顯差異。
表11. 9412對(duì)去勢大鼠血清鈣、血清磷的變化
x±SD
ΔΔP＜0.01與正常對(duì)照組比較
表12. 9412對(duì)去勢大鼠骨指數(shù)的影響
x±SD
ΔΔP＜0.01與正常對(duì)照組比較
*P＜0.05，**P＜0.01與模型對(duì)照組比較
3.4.4.對(duì)股骨骨灰分、骨Ca及骨P的影響
與對(duì)照組相比，模型組的骨灰重及骨灰分中Ca、骨Pi含量均降低，但用藥后，股骨骨灰重、骨Ca、P含量比模型組有不同程度的提高(P＜0.05)。
表13 9412對(duì)去勢大鼠股骨骨灰、骨礦Ca、P含量的影響
x±SD
ΔP＜0.05與正常對(duì)照組比較
*P＜0.05，**P＜0.01與模型對(duì)照組比較
4. 9412對(duì)大鼠成骨細(xì)胞原代培養(yǎng)的影響
實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察9412對(duì)大鼠成骨細(xì)胞原代細(xì)胞生長的影響。
4.1.材料
4.1.1.供試品
名稱9412
提供單位上海醫(yī)藥工業(yè)研究院
批號(hào)20001017
劑型浸膏，試驗(yàn)對(duì)以PBS溶解后無菌過濾
4.1.2.其它試劑
培養(yǎng)基DMEM，Difco產(chǎn)品
小牛血清杭州四季青生物工程材料有限公司
膠原酶上海醫(yī)藥工業(yè)研究院生物化學(xué)事業(yè)部
胰酶Difco產(chǎn)品
培養(yǎng)基DMEM+10％小牛血清
消化液PBS+EDTA(4mM)+0.1％膠原酶+0.05％胰酶組成
3H-TdR上海原子核研究所1mci/ml
PBSPH 7.2，0.5M
4.2.動(dòng)物
來源、種屬、品系、合格證
大鼠，SD系(新生24小時(shí)大鼠)中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供
合格證中科動(dòng)管會(huì)第005號(hào)
4.3.方法
無菌條件下取出生24小時(shí)內(nèi)的SD新生鼠10只的顱骨，去除骨膜及周圍軟組織，用剪刀剪成小塊，用消化液37℃消化20分鐘，消化過程中不斷振搖，消化結(jié)束離心，傾去上清液，收集消化后的殘余組織及細(xì)胞放于細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，加DMEM(含10％小牛血清)37℃，5％CO2中培養(yǎng)10天后，棄去上清液，貼壁細(xì)胞以胰酶消化成單個(gè)細(xì)胞，離心，收集，計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度為5×105個(gè)/ml，在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上，每孔加入100μl細(xì)胞，不同稀釋濃度的9412待試樣品100μl(樣品濃度為1、0.1、0.01、0.001μg/ml)，對(duì)照管以培養(yǎng)基代替，復(fù)設(shè)三復(fù)管，培養(yǎng)48小時(shí)后加入0.5μci/孔3H-TdR繼續(xù)培養(yǎng)8小時(shí)，再用0.5％胰酶消化后用多頭細(xì)胞儀收集細(xì)胞，液閃儀上測定CPM值，結(jié)果以樣品與空白對(duì)照管比較。4.4.結(jié)果
結(jié)果見表，1μg/ml濃度的樣品組對(duì)新生鼠顱骨細(xì)胞的摻入率較對(duì)照組低，其余各組均有不同程度的促進(jìn)成骨細(xì)胞的生長，其中以0.01μg/ml 9412樣品摻入數(shù)最高。
表14 9412對(duì)新生大鼠成骨細(xì)胞原代細(xì)胞生長的影響
x±SD
**P＜0.01與對(duì)照組比較5.結(jié)論
9412系中藥淫羊藿中提取的活性組分，主要為黃酮，一系列試驗(yàn)表明具有60％黃酮含量的9412具有抗骨質(zhì)疏松癥的作用。
①對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥預(yù)防作用試驗(yàn)中，9412不論低、中、高劑量組均能提高大鼠股骨骨密度(P＜0.05，P＜0.01)，增加股骨及骨灰重量，股骨骨灰鈣及磷的含量。
②對(duì)維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松癥治療作用試驗(yàn)中，9412低、中、高劑量組能提高大鼠股骨骨密度(P＜0.05，P＜0.01)，并以中劑量組較為明顯(P＜0.01)，中、高劑量組能增加股骨骨灰重及骨鈣骨磷的含量，低劑量作用不明顯。
③9412對(duì)去勢大鼠造成骨質(zhì)疏松癥后，有中、高劑量組能提高大鼠股骨骨密度(P＜0.05)，低劑量組不明顯。血清鈣、磷含量影響，但能不同程度的提高大鼠股骨重量及骨灰中鈣、磷含量并以中劑量組較好。
④對(duì)去勢大鼠能增加大鼠股骨頭骨小梁的寬度和長度，也說明9412對(duì)去勢大鼠的骨質(zhì)疏松有一定的治療作用。
⑤9412對(duì)新生鼠成骨細(xì)胞有一定的促進(jìn)生長的作用，以0.01μg/ml的促進(jìn)作用最明顯。
(二)本發(fā)明的用于抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑(仙靈骨康片)的急性毒性試驗(yàn)1.試驗(yàn)?zāi)康?br> 觀察9412對(duì)昆明種小鼠口服給藥后，動(dòng)物產(chǎn)生的毒性反應(yīng)。2.受試樣品
名稱9412浸膏
提供單位上海醫(yī)藥工業(yè)研究院
批號(hào)20001017
含量每1g浸膏相當(dāng)于g生藥
藥液配制0.5％CMC+吐溫80助溶配成混懸液3.動(dòng)物來源、種屬、品系、合格證
小鼠，昆明種，上海醫(yī)藥工業(yè)研究院動(dòng)物房供應(yīng)。
合格證滬動(dòng)合證字第107號(hào)。
體重20±1g
性別雌雄各半
動(dòng)物數(shù)每組20只，雌雄各半
實(shí)驗(yàn)室溫度25±1℃，相對(duì)濕度65±10％。
飼以標(biāo)準(zhǔn)全價(jià)營養(yǎng)顆粒飼料，自由攝食飲水。4.試驗(yàn)方法
劑量
預(yù)試中9412 20％溶液，每鼠口服0.5ml，動(dòng)物未見死亡，現(xiàn)增加為一日二次口服給藥。
藥液濃度
配成20％濃度，每1ml含0.2g浸膏，每鼠口服0.5ml/20g體重，一日二次。
給藥途徑口服
方法
小鼠口服20％9412混懸劑，每鼠0.5ml，一日二次，觀察給藥后即時(shí)反應(yīng)，記錄二周內(nèi)小鼠體重變化，觀察期結(jié)束處死動(dòng)物，肉眼觀察動(dòng)物的組織病理變化。5.結(jié)果
動(dòng)物二周內(nèi)體重變化見表。
動(dòng)物給藥后無任何不良癥狀，活動(dòng)飲食如常。觀察期結(jié)束，尸檢動(dòng)物，也未見有肉眼可見的病理組織異常。6.結(jié)論
小鼠口服9412最大耐受量為10g/kg以上。
表15 小鼠口服9412最大耐受量試驗(yàn)的體重變化
x±SD
(三)仙靈骨康片對(duì)大鼠的長期毒性試驗(yàn)如下
本實(shí)驗(yàn)采用SD大鼠，每組30只，雌雄各半，分為36、120、480mg/kg/d三個(gè)給藥組和對(duì)照組，連續(xù)口服灌胃仙靈骨康片六個(gè)月，停藥觀察期為2周。
SD大鼠口服仙靈骨康片六個(gè)月長期毒性試驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)一般癥狀，如體重增長、攝食量與對(duì)照組相比無明顯影響。其他如動(dòng)物的活力、精神狀態(tài)、糞便等未見與藥物有關(guān)的明顯毒性反應(yīng)。
給藥三個(gè)月時(shí)發(fā)現(xiàn)雄性大鼠三個(gè)劑量組的WBC與對(duì)照組相比稍低，給藥六個(gè)月時(shí)發(fā)現(xiàn)雄性大鼠高劑量組的WBC與RBC與對(duì)照組相比稍低，雌性大鼠低、高劑量組的RBC與對(duì)照組相比稍低。停藥二周時(shí)發(fā)現(xiàn)雄性大鼠中劑量組的RBC與對(duì)照組相比稍低。
給藥三個(gè)月時(shí)發(fā)現(xiàn)雄性大鼠中劑量組的BUN較對(duì)照組高，雌性大鼠低、中劑量組的ALP與對(duì)照組相比稍高。給藥六個(gè)月時(shí)發(fā)現(xiàn)雌性大鼠中劑量組的BUN較對(duì)照組稍高。停藥二周時(shí)發(fā)現(xiàn)雌性大鼠高劑量組的BUN較對(duì)照組高。以上這些指標(biāo)的變化均在正常范圍內(nèi)。
病理組織學(xué)等檢查均未見與給藥有關(guān)的明顯毒性反應(yīng)，部分指標(biāo)的變化均在正常范圍內(nèi)。
SD大鼠連續(xù)經(jīng)口灌胃給予仙靈骨康片六個(gè)月，其無毒性劑量為480mg/kg/d(相當(dāng)于藥效劑量的40倍)。
(四)仙靈骨康片對(duì)Beagle狗的長期毒性試驗(yàn)如下
Beagle狗仙靈骨康片九個(gè)月長期毒性試驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)一般癥狀(動(dòng)物的活動(dòng)、體重、精神狀態(tài)、糞便等)、血液學(xué)、血清生化、尿常規(guī)、系統(tǒng)尸檢、組織學(xué)檢查及臟器系數(shù)等檢查均未見與藥物有關(guān)的明顯毒性反應(yīng)。
給藥九個(gè)月后停藥2周也未見與藥物有關(guān)的明顯毒性反應(yīng)。
Beagle狗連續(xù)口服仙靈骨康片9個(gè)月，其無毒性劑量為480mg/kg/d(相當(dāng)于藥效劑量的40倍)。
經(jīng)上述研究結(jié)果如下
1.對(duì)維甲酸70mg/kg.d，連續(xù)14天造成大鼠骨質(zhì)疏松癥，并同時(shí)三級(jí)給予淫羊藿總黃酮4mg/kg、12mg/kg和36mg/kg，羧乙基磷酸鈉50mg/kg作陽性對(duì)照組，并在維甲酸停藥后再繼續(xù)給藥14天(共給藥28天)。以動(dòng)物體重、骨密度、骨重、骨長、骨直徑，計(jì)算骨表觀線密度、表觀面密度、骨灰重、骨鈣、骨磷，以及骨切片測骨小梁寬，血清鈣、磷的含量等指標(biāo)作為判定的根據(jù)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)用藥組各指標(biāo)均有明顯改善，尤以中、高劑量組明顯，其療效至少不低于50mg/kg羧乙基磷酸鈉組。
2.對(duì)維甲酸所致大鼠骨質(zhì)疏松癥的影響——治療作用的研究
維甲酸70mg/kg.d，連續(xù)14天，造成大鼠骨質(zhì)疏松，在停藥后，分三級(jí)給予淫羊藿總黃酮4mg/kg、12mg/kg和36mg/kg，羧乙基磷酸鈉50mg/kg作陽性對(duì)照，連續(xù)給藥28天。
3.對(duì)去勢大鼠抗骨質(zhì)疏松作用
大鼠去勢術(shù)后一周給藥，分組情況同上，連續(xù)給藥90天，測定指標(biāo)同上。
結(jié)果顯示，中、高劑量組均有明顯的抗骨質(zhì)疏松癥療效。
一般藥理研究
一般藥理研究表明10、30、100mg/kg，口服對(duì)狗的血壓、呼吸及心電圖均未產(chǎn)生明顯影響。50、150、500mg/kg口服對(duì)小鼠神經(jīng)和行為未見明顯變化。
急性毒性研究
小鼠LD50＞10g/kg。
長期毒性研究
大鼠長期毒性試驗(yàn)三個(gè)劑量組36、120和480mg/kg，連續(xù)給藥6個(gè)月，停藥二周，結(jié)果未見明顯毒性。
Beagle mg/kg狗長期毒性試驗(yàn)三個(gè)劑量組36、120和480mg/kg，連續(xù)給藥9個(gè)月，停藥二周，結(jié)果未見明顯毒性。
故大鼠和狗的長期毒性試驗(yàn)表明480mg/kg是其無毒性劑量。
本發(fā)明的另一目的是提供了上述用于抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑(仙靈骨康片)的制備工藝。
該工藝包括下列步驟
(1)制備淫羊藿干浸膏
取淫羊藿藥材，以水煎煮提取二次，每次用水量均為藥材的20倍量，第一次煎煮2小時(shí)，第二次煎煮1.5小時(shí)，過濾，合并濾液并冷卻至室溫，上大孔吸附樹脂(每公斤藥材用已處理好的水狀態(tài)下的樹脂1升)，上樣結(jié)束后，先以去離子水洗脫，換以15％乙醇洗脫，再換以30％乙醇洗脫，而后以40％乙醇洗脫，最后以50％乙醇進(jìn)行洗脫，此時(shí)起監(jiān)測洗脫液的乙醇濃度，當(dāng)醇濃度達(dá)45％時(shí)起，開始收集洗脫液至結(jié)束，將該部分洗脫液減壓濃縮至干，即得。
原料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案
處方淫羊藿
制法
將淫羊藿葉子，每次加20倍量水提取二次，第一次煎煮2小時(shí)，第二次煎煮1.5小時(shí)，過濾，合并濾液并冷卻至室溫，上大孔吸附樹脂，以不同濃度的乙醇洗脫，收集相應(yīng)流份的洗脫液，減壓濃縮至干得浸膏粉。
性狀本品為棕褐色粉末。
鑒別取浸膏粉0.01g，加甲醇至10ml，超聲提取20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液。另取淫羊藿苷對(duì)照品，加甲醇溶解，配制成每ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯-正丁醇-甲酸-水(10∶1∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)；噴以三氯化鋁試液后，再置紫外燈(365nm)下檢視，顯相同的橙紅色熒光斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的各項(xiàng)規(guī)定。
總黃酮含量測定
照分光光度法(中國藥典2000版一部附錄VA)測定。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取淫羊藿苷對(duì)照品適量，以60％甲醇制成每1ml含淫羊藿苷10μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備
精密稱取浸膏粉約16mg，置于10ml容量瓶中，加約9ml50％甲醇超聲提取20分鐘后，加50％甲醇至刻度，搖勻，精密吸取0.5ml，定容于50ml的容量瓶中，搖勻，即得。
測定法
分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液，以50％甲醇為空白，在270nm波長處照分光光度法測定，即得。
本品以淫羊藿苷為對(duì)照品計(jì)算總黃酮的含量不得少于60％。
淫羊藿苷含量測定
照高效液相色譜法(中國藥典2000版一部附錄VID)測定。
色譜條件
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相為乙腈∶水(30∶70)；流速為1.0ml/min；柱溫為30℃檢測波長為270nm。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。
對(duì)照品溶液的制備
精密稱取淫羊藿苷對(duì)照品適量，以50％甲醇制成每1ml含淫羊藿苷0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備
精密稱取浸膏粉約7.5mg，置于50ml容量瓶中，加約45ml 50％甲醇超聲提取20分鐘后，加50％甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法
分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品以淫羊藿苷為對(duì)照品計(jì)算淫羊藿苷的含量不得少于20％。
功能與主治補(bǔ)腎陽強(qiáng)筋骨用于抗骨質(zhì)疏松。
貯藏密閉，置陰涼干燥處保存。
(2)制備制劑
處方
制劑處方
浸膏粉 100g
淀粉 40g
乳糖 30g
微晶纖維素 30g
7％淀粉漿適量
硬脂酸鎂 1％
薄膜包衣處方
胃溶型薄膜包衣預(yù)混劑 12g
50％乙醇 適量
以上劑量按工藝制成1000片。
制備方法
按處方比例稱取浸膏粉、淀粉、乳糖、微晶纖維素，分別過80目篩，混勻，再過40目篩三次。將上述混合粉用7％淀粉漿制軟材，過24目篩粒，50℃干燥2小時(shí)。干燥顆粒過30目篩整粒，加入處方量硬脂酸鎂，混勻，壓片，包衣，晾片，即得。
本品系由淫羊藿提取物制成的片劑。
性狀本品包衣片為棕紅色片劑，素片為棕褐色片劑。
鑒別
取本品5片，研細(xì)，稱取0.02g，加甲醇至10ml，超聲提取20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液。另取淫羊藿苷對(duì)照品，加甲醇溶解，配制成每ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯-正丁醇-甲酸-水(10∶1∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)；噴以三氯化鋁試液后，再置紫外燈(365nm)下檢視，顯相同的橙紅色熒光斑點(diǎn)。
檢查
應(yīng)符合中國藥典2000版一部片劑(附錄ID)項(xiàng)下的各項(xiàng)規(guī)定。
總黃酮含量測定
照分光光度法(中國藥典2000版一部附錄VA)測定。
對(duì)照品溶液的制備見原料。
供試品溶液的制備
取本品10片，研細(xì)混勻后，精密稱取樣品約32mg，置于10ml容量瓶中，加約9ml50％甲醇超聲提取20分鐘后，加50％甲醇至刻度，搖勻，精密吸取0.5ml，定容于50ml的容量瓶中，搖勻，即得。
測定法見原料。
本品每片含以淫羊藿苷為對(duì)照品計(jì)算總黃酮的量，不得少于60mg。
淫羊藿苷含量測定
照高效液相色譜法(中國藥典2000版一部附錄VID)測定。
色譜條件見原料。
對(duì)照品溶液的制備見原料。
供試品溶液的制備
取本品10片，研細(xì)混勻后，精密稱取樣品約15mg，置于50ml容量瓶中，加約45ml 50％甲醇超聲提取20分鐘后，加50％甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法見原料。
本品每片含以淫羊藿苷為對(duì)照品計(jì)算淫羊藿苷的含量不得少于20mg。
功能與主治補(bǔ)腎陽強(qiáng)筋骨，用于抗骨質(zhì)疏松。
用法與用量口服，每日3次，每次1片
規(guī)格100mg/片
貯藏密閉，置陰涼干燥處保存。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
取淫羊藿凈藥材100kg，以水煎煮提取2次，每次用水量約為藥材的20倍量。第一次煎煮2小時(shí)，第二次煎煮1.5小時(shí)，過濾。合并濾液并冷卻至室溫。上大孔樹脂，上樣結(jié)束后先以去離子水洗脫，換以15％乙醇洗脫，再換以30％乙醇洗脫，再后以40％乙醇洗脫，最后以50％乙醇洗脫，此時(shí)起監(jiān)測洗脫液的乙醇濃度，當(dāng)醇濃度達(dá)45％時(shí)起，開始收集洗脫液至結(jié)束，將該部分洗脫液減壓濃縮至干。
檢測得浸膏量1.21kg，總黃酮含量71.8％，淫羊藿苷含量25.8％。實(shí)施例2
取淫羊藿凈藥材100kg，經(jīng)上述工藝處理后，獲浸膏量1.28kg，總黃酮量73.6％，淫羊藿苷含量27.5％。實(shí)施例3取淫羊藿凈藥材100kg，經(jīng)上述工藝處理后獲浸膏量1.19kg，總黃酮含量69.2％，淫羊藿苷含量24.4％。
權(quán)利要求
1.一種用于抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑，其特征在于該制劑是由淫羊藿提取的有效成份與藥用輔料組成的。
2.一種如權(quán)利要求1所述的用于抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑的制備工藝，其特征在于該工藝包括下列步驟
(1)制備淫羊藿干浸膏
取淫羊藿藥材，以水煎煮提取二次，每次用水量均為藥材的20倍量，第一次煎煮2小時(shí)，第二次煎煮1.5小時(shí)，過濾，合并濾液并冷卻至室溫，上大孔吸附樹脂，每公斤藥材用已處理好的水狀態(tài)下的樹脂1升，上樣結(jié)束后，先以去離子水洗脫，換以15％乙醇洗脫，再換以30％乙醇洗脫，而后以40％乙醇洗脫，最后以50％乙醇進(jìn)行洗脫，此時(shí)起監(jiān)測洗脫液的乙醇濃度，當(dāng)醇濃度達(dá)45％時(shí)起，開始收集洗脫液至結(jié)束，將該部分洗脫液減壓濃縮至干，即得；
原料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案
處方淫羊藿
制法
將淫羊藿葉子，每次加20倍量水提取二次，第一次煎煮2小時(shí)，第二次煎煮1.5小時(shí)，過濾，合并濾液并冷卻至室溫，上大孔吸附樹脂，以不同濃度的乙醇洗脫，收集相應(yīng)流份的洗脫液，減壓濃縮至干得浸膏粉；
性狀本品為棕褐色粉末；
鑒別取浸膏粉0.01g，加甲醇至10ml，超聲提取20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液，另取淫羊藿苷對(duì)照品，加甲醇溶解，配制成每ml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，中國藥典2000版一部附錄VIB。吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以10∶1∶1∶1的醋酸乙酯-正丁醇-甲酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)；噴以三氯化鋁試液后，再置365nm紫外燈下檢視，顯相同的橙紅色熒光斑點(diǎn)；
檢查應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的各項(xiàng)規(guī)定；
總黃酮含量測定
照分光光度法測定，中國藥典2000版一部附錄VA；
對(duì)照品溶液的制備
精密稱取淫羊藿苷對(duì)照品適量，以50％甲醇制成每1ml含淫羊藿苷10μg的溶液，即得；
供試品溶液的制備
精密稱取浸膏粉約16mg，置于10ml容量瓶中，加約9ml 50％甲醇超聲提取20分鐘后，加50％甲醇至刻度，搖勻，精密吸取0.5ml，定容于50ml的容量瓶中，搖勻，即得；
測定法
分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液，以50％甲醇為空白，在270nm波長處照分光光度法測定，即得；
本品以淫羊藿苷為對(duì)照品計(jì)算總黃酮的含量不得少于60％；
淫羊藿苷含量測定
照高效液相色譜法測定，中國藥典2000版一部附錄VID；
色譜條件
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相為乙腈水，30∶70；流速為1.0ml/min；柱溫為30℃檢測波長為270nm，理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500；
對(duì)照品溶液的制備
精密稱取淫羊藿苷對(duì)照品適量，以50％甲醇制成每1ml含淫羊藿苷0.1mg的溶液，即得；
供試品溶液的制備
精密稱取浸膏粉約7.5mg，置于50ml容量瓶中，加約45ml 50％甲醇超聲提取20分鐘后，加50％甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；
測定法
分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得；
本品以淫羊藿苷為對(duì)照品計(jì)算淫羊藿苷的含量不得少于20％；
功能與主治用于抗骨質(zhì)疏松；
貯藏密閉，置陰涼干燥處保存；
(2)制備制劑
處方
制劑處方
浸膏粉 100g
淀粉40g
乳糖30g
微晶纖維素 30g
7％淀粉漿 適量
硬脂酸鎂1％
薄膜包衣處方
胃溶型薄膜包衣預(yù)混劑 12g
50％乙醇 適量
以上劑量按工藝制成1000片；
制備方法
按處方比例稱取浸膏粉、淀粉、乳糖、微晶纖維素，分別過80目篩，混勻，再過40目篩三次，將上述混合粉用7％淀粉漿制軟材，過24目篩粒，50℃干燥2小時(shí)，干燥顆粒過30目篩整粒，加入處方量硬脂酸鎂，混勻，壓片，包衣，晾片，即得；
本品系由淫羊藿提取物制成的片劑；
性狀本品包衣片為棕紅色片劑，素片為棕褐色片劑；
鑒別
取本品5片，研細(xì)，稱取0.02g，加甲醇至10ml，超聲提取20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液，另取淫羊藿苷對(duì)照品，加甲醇溶解，配制成每ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，中國藥典2000版一部附錄VIB，吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以10∶1∶1∶1的醋酸乙酯-正丁醇-甲酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)；噴以三氯化鋁試液后，再置365nm紫外燈下檢視，顯相同的橙紅色熒光斑點(diǎn)；
檢查
應(yīng)符合中國藥典2000版一部片劑，附錄ID，項(xiàng)下的各項(xiàng)規(guī)定；
總黃酮含量測定
照分光光度法測定，中國藥典2000版一部附錄VIB；
對(duì)照品溶液的制備見原料；
供試品溶液的制備
取本品10片，研細(xì)混勻后，精密稱取樣品約32mg，置于10ml容量瓶中，加約9ml50％甲醇超聲提取20分鐘后，加50％甲醇至刻度，搖勻，精密吸取0.5ml，定容于50ml的容量瓶中，搖勻，即得；
測定法見原料；
本品每片含以淫羊藿苷為對(duì)照品計(jì)算總黃酮的量，不得少于60mg；
淫羊藿苷含量測定
照高效液相色譜法測定，中國藥典2000版一部附錄VID；
色譜條件見原料；
對(duì)照品溶液的制備見原料；
供試品溶液的制備
取本品10片，研細(xì)混勻后，精密稱取樣品約15mg，置于50ml容量瓶中，加約45ml50％甲醇超聲提取20分鐘后，加50％甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；
測定法見原料；
本品每片含以淫羊藿苷為對(duì)照品計(jì)算淫羊藿苷的含量不得少于20mg；
功能與主治用于抗骨質(zhì)疏松；
用法與用量口服，每日3次，每次1片；
規(guī)格100mg/片；
貯藏密閉，置陰涼干燥處保存。
全文摘要
本發(fā)明屬中藥制劑技術(shù)領(lǐng)域。具體涉及一種用于抗骨質(zhì)疏松的中藥的有效組分及其制劑。本發(fā)明的中藥制劑是由中藥淫羊藿提取的有效成分與藥用輔料組成的。本發(fā)明的制劑經(jīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物證實(shí)對(duì)骨質(zhì)疏松癥有預(yù)防及治療作用,能提高股骨骨密度及骨鈣、骨磷的含量,改善股骨指數(shù)。本發(fā)明提供了制備方法。
文檔編號(hào)A61K36/00GK1387888SQ02112108
公開日2003年1月1日 申請(qǐng)日期2002年6月18日 優(yōu)先權(quán)日2002年6月18日
發(fā)明者劉全海, 王明民, 羅思齊, 戴靜芝, 蔣毅 申請(qǐng)人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院