專利名稱：包含利巴韋林與抗氧化劑的hcv聯(lián)合治療的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及利用抗氧化劑制備改善利巴韋林-相關(guān)溶血的藥劑，該溶血與用利巴韋林治療易感病毒感染有關(guān)。
具有易感病毒感染特別是慢性丙型肝炎病毒感染的患者的治療包括給予所述患者治療學上有效量的α-干擾素和利巴韋林的聯(lián)合治療，其療程足以降低HCV-RNA，同時給予治療學上有效量的抗氧化劑，其療程足以改善利巴韋林-相關(guān)溶血。
慢性丙型肝炎病毒感染是一種對生活質(zhì)量有顯著影響的特別隱襲和緩慢進展的病毒性疾病。它最終能導致肝硬化、失代償性肝病和/或肝細胞性肝癌。
Reichard等(The Lancet 1998；351；83-87)公開了用α-2b干擾素和利巴韋林聯(lián)合治療慢性丙型肝炎患者。T.Poynard等(The Lancet，1998，352卷，10月31，第1426-1432頁)公開了治療慢性丙型肝炎患者(他們未用干擾素或利巴韋林治療過)，每天用3 MIU的α-2b干擾素TIW加上1000-1200mg的利巴韋林治療48周，在治療24周后有43％的患者產(chǎn)生了持久的病毒學反應。還參見J.G.McHutchinson等(N.Engl.J.Med.，1998，3391485-1492)、G.L.Davis等(N.Engl.J.Med.，1998，3391493-1499)公開了治療慢性丙型肝炎患者(他們用干擾素治療后復發(fā))，每天用3 MIU的α-2b干擾素TIW加上100-1200mg的利巴韋林治療48周，產(chǎn)生了比單用干擾素治療要高的持久的病毒學反應發(fā)生率。
然而，由于伴隨的利巴韋林的副作用如利巴韋林-相關(guān)溶血(通過減低的血紅蛋白濃度測得)，這一聯(lián)合治療法并不總是有效。McHutchinson等和Poynard等均報導了大部分完成所述聯(lián)合治療的患者在聯(lián)合治療的第4周達到他們的最低血紅蛋白濃度，在這一時間所述血紅蛋白濃度或是穩(wěn)定或是增加的。McHutchinson等報導利巴韋林劑量減至600mg/日，患者血紅蛋白濃度在10g/dl以下，而患者血紅蛋白濃度在8.5g/dl以下時則停止用利巴韋林治療。
必須提供一種改良的聯(lián)合治療法用于治療易感病毒感染特別是慢性丙型肝炎患者，以改善整個聯(lián)合治療期間尤其是首個4到12周內(nèi)的利巴韋林-相關(guān)溶血，從而在比以前可能的更多病人中產(chǎn)生持久的病毒學反應。
發(fā)明概述本發(fā)明提供利用抗氧化劑制備改善利巴韋林-相關(guān)溶血的藥物，該溶血與用利巴韋林治療易感病毒感染有關(guān)。
本發(fā)明提供利用抗氧化劑制備改善利巴韋林-相關(guān)溶血的藥物，該溶血與用α-干擾素和利巴韋林的聯(lián)合療法治療慢性HCV感染有關(guān)。
本發(fā)明提供治療易感病毒感染，特別是丙型肝炎病毒感染的方法，它包括給予所述患者治療學上有效量的利巴韋林，其療程足以降低病毒-RNA，同時聯(lián)合給予治療學上有效量的抗氧化劑，其療程足以改善利巴韋林-相關(guān)的溶血。
本發(fā)明提供治療慢性HCV感染患者的方法，它包括給予所述患者治療學上有效量的α-干擾素和利巴韋林的聯(lián)合治療，其療程足以降低HCV-RNA，同時聯(lián)合給予治療學上有效量的抗氧化劑，其療程足以改善利巴韋林-相關(guān)的溶血。
本發(fā)明提供治療慢性HCV感染患者的方法，它包括給予所述患者至少約24周的首個療程的治療學上有效量的α-干擾素和利巴韋林的聯(lián)合治療，其足以降低可測得的HCV-RNA，同時聯(lián)合給予治療學上有效量的抗氧化劑，其足以改善利巴韋林-相關(guān)溶血。在優(yōu)選的實施方案中，將所述治療學上有效量的α-干擾素和利巴韋林的聯(lián)合治療在約24周的首個療程中給予HCV基因型2或3的患者，或者在約48周的首個療程中給予HCV基因型1的患者。
本發(fā)明還提供治療慢性HCV感染患者的方法，它包括(a)給予所述患者首個療程的治療學上有效量的α-干擾素和利巴韋林的聯(lián)合治療，其足以降低可測得的HCV-RNA，同時聯(lián)合給予治療學上有效量的抗氧化劑，其足以改善利巴韋林-相關(guān)的溶血，以及(b)在首個療程結(jié)束后隨之給予至少約24周的第二療程的大約600-1600mg/日的利巴韋林和抗氧化劑。在另一優(yōu)選的實施方案中，在至少約24周(更優(yōu)選至少約48周)的首個療程中，給予所述治療學上有效量的α-干擾素和利巴韋林的聯(lián)合治療。
優(yōu)選的α-干擾素是α-2a-干擾素或α-2b-干擾素；更優(yōu)選使用α-2b-干擾素。
在優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明涉及治療慢性丙型肝炎感染患者以消除可測得的HCV-RNA的方法，該方法包括(a)在首個24周的療程中，給予所述患者治療學上有效量抗氧化劑，其足以改善利巴韋林-相關(guān)溶血，同時按照以下方案聯(lián)合給予約800-1200mg/日的利巴韋林和治療學上有效量的α-2b-干擾素每日約10 MIU的α-2b-干擾素，持續(xù)2周；然后每日5 MIU的α-干擾素，持續(xù)6周；隨后以每日3 MIU的α-干擾素，持續(xù)16周；然后(c)在24周的第二療程中，每日給予800-1200mg的利巴韋林和3 MIU TIW的α-干擾素，并聯(lián)合給予足以改善利巴韋林-相關(guān)溶血的治療學上有效量的抗氧化劑。
優(yōu)選的抗氧化劑是維生素E的衍生物，包括但不限于d-α-生育酚及其酯例如，水溶性的d-α-生育酚聚乙二醇酯如水可分散的維生素E d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(“維生素E-TPGS”)以及維生素E-TPGS和至少一種具有在40℃時能完全熔化的熔點的甘油脂肪酸酯的組合物的應用(二者均公開于美國專利5,234,695并可自Eastman Kodak Co.，Rochester，NY購買)。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供治療易感病毒感染特別是丙型肝炎病毒感染的方法和藥用組合物。
本文使用的術(shù)語“易感病毒感染”意指由廣范圍的RNA和DNA病毒引起的病毒感染，包括但不限于病毒家族，如包括黃病毒(flaviruses)的黃病毒(flavirus)屬、庫寧病毒是其成員的鼠疫病毒(pestivirus)、和丙型肝炎病毒是其成員的肝炎病毒(hepavirus)、以及西尼羅病毒(West Nile virus)是其成員的蟲媒病毒、正粘病毒、副粘病毒、沙粒病毒、本揚病毒、皰疹病毒、腺病毒、痘病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒。
典型合適的“易感病毒感染”包括流感A和B病毒感染、副流感病毒感染、呼吸道合胞體病毒(“RSV”)感染如RSV細支氣管炎和RSV肺炎，特別是嬰幼兒的RSV感染以及先前存在心肺疾病的患者的RSV肺炎、麻疹病毒感染、拉沙熱病毒感染、朝鮮出血熱感染、乙型肝炎病毒(HBV)感染、克里米亞-剛果出血熱和HCV感染以及HIV-1感染、腦炎感染如由西尼羅病毒或庫寧病毒引起的感染或圣路易斯腦炎感染以及在免疫應答削弱的患者中發(fā)現(xiàn)的病毒感染。其它的易感病毒感染公開于USP 4,211,771第2欄第21行到第3欄第37行；劑量和給藥方案以及制劑公開于第3欄第4行到第9欄第5行；也可參見加拿大專利第1,261,265號。Sidwell，R.W.等公開了用利巴韋林進行的體內(nèi)抗病毒實驗(Pharmacol.Ther.，1979，第6卷第123-146頁)，該實驗總體上證實了在體外所見的利巴韋林的廣譜抗病毒的活性以及其有效性完全依賴于感染的部位、治療方式、動物的年齡和所用病毒的量。第127頁的表4和表5列出了體內(nèi)應用利巴韋林顯著抑制了RNA和DNA病毒的感染。
在一優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供了一種治療丙型肝炎感染患者的改良方法，該方法使所述患者連續(xù)使用如由FDA批準的治療學上有效量的α-2b干擾素和利巴韋林的聯(lián)合治療以及在臨床進展下的其它α-干擾素和利巴韋林的治療，如聚乙二醇化α-2a或2b干擾素和利巴韋林或如下文所述。在一試行研究中，12例首次接受治療的慢性丙型肝炎患者接受抗氧化劑維生素C(1000mg/日)和維生素E(800IU/日)的非處方藥制劑并結(jié)合FDA批準的聯(lián)合治療(1000/1200mg的利巴韋林，每日以兩個分開的劑量(如果體重＜75Kg則用1000mg)和α-2b干擾素、3MIU SC TIW)，能夠連續(xù)進行4個月的研究而不減少所述利巴韋林的劑量。對一組14例的相匹配的慢性丙型肝炎復發(fā)患者的對照組，每日以兩個分開的劑量接受1000mg的利巴韋林和α-2b干擾素、3MIU SC TIW。在治療前和在第2、4、8和12周末測定血紅蛋白水平(“HgB”)。首次治療的和復發(fā)患者分別測得每分升14.5±1.7和15.2±1.2克(“g/dl”)的HgB基線值。首次治療的患者在第2、4、8和12周末分別測得0.9、1.7、2.3和2.7g/dl的血紅蛋白下降。在復發(fā)患者(對照)中測得2.0、3.0、3.0和3.1g/dl的血紅蛋白下降。在相同的試行研究中，與病史對照和所述復發(fā)患者相比，依照本發(fā)明抗氧化劑結(jié)合聯(lián)合治療的使用在所述聯(lián)合治療的首個12周內(nèi)顯著降低了利巴韋林有關(guān)的溶血性貧血的嚴重度。值得注意的是沒有接受抗氧化劑的患者須要減少所述利巴韋林的劑量。而三例所述對照患者需要利巴韋林劑量的減少。
依照優(yōu)選實施方案治療的患者在所述48周治療期結(jié)束時應沒有可測得的HCV-RNA，而且在所述48周治療期結(jié)束后至少24周應沒有可測得的HCV-RNA。
治療慢性丙型肝炎感染患者的本方法允許給予足以基本降低可測得的HCV-RNA血清水平的治療學上有效量的利巴韋林和α-干擾素的組合，優(yōu)選比初始HCV-RNA血清水平至少降低10的2次方，即至少降低102，并且更優(yōu)選消除可測得的HCV-RNA血清水平，即將它們降低至少于100復制體/mL，而同時改善利巴韋林-相關(guān)溶血。
本文使用的術(shù)語“抗氧化劑”意指延遲或抑制由給予利巴韋林而促發(fā)的或與之有關(guān)的溶血的物質(zhì)。
本文使用的術(shù)語“治療學上有效量的抗氧化劑”意指抗氧化劑的量在大約1至大約250倍、優(yōu)選大約1至大約200倍、更優(yōu)選10至大約100倍、最優(yōu)選10至大約50倍范圍內(nèi)的用于本發(fā)明方法中的抗氧化劑的推薦日膳食許可量(“RDA”)(即如果沒有報告抗氧化劑的RDA，則是推薦的日用量)。用于本發(fā)明方法中的抗氧化劑將正常地給予，只要所述利巴韋林作為聯(lián)合治療的部分給予，誘導劑量和利巴韋林單一治療給予患有易感病毒感染尤其是丙型肝炎感染的患者。
本文使用的術(shù)語“相關(guān)”與應用利巴韋林單一治療或α-干擾素和利巴韋林以及抗氧化劑的聯(lián)合治療有關(guān)，意指所述抗氧化劑在所述聯(lián)合治療應用前、同時或應用后給予。所述抗氧化劑可以口服、胃腸外(如IM、IP、SC或IV)或局部(如通過栓劑)給予。優(yōu)選口服或胃腸外(如皮下)給予。更優(yōu)選口服給予。通常，所述抗氧化劑是以單個或分開的劑量與利巴韋林同時給予，該利巴韋林可以單個劑量或分開的劑量每日二次給予。
通常，合適的抗氧化劑包括維生素A、維生素E、維生素C、水非薊素(silybum marianum)、輔酶Q10、BHA、BHT、N-乙酰半胱氨酸、硒、panavir、番茄紅素或它們的混合物。
維生素A描述于Merck索引第11版#9918(和4919)第1576-77頁。所述RDA是在大約250國際單位(“IU”)/日至大約2500 IU/日的范圍內(nèi)；對于新生兒和嬰兒則優(yōu)選大約2500 IU/日。
本文使用的術(shù)語“維生素E”包括所有形式的生育酚，包括但不限于四種類型生育酚(α-、β-、γ-和δ-生育酚)的天然存在的和合成的同系物以及四種類型的tocotrienols，包括它們的酯，如α-醋酸生育酚或α-琥珀酸生育酚以及右旋(“d”)、左旋(“l(fā)”)光學異構(gòu)體或d和l異構(gòu)體的混合物。所述d光學異構(gòu)體比l異構(gòu)體活性大并優(yōu)選應用維生素E的光學異構(gòu)體。本發(fā)明中使用的維生素E有效量在1到250倍的范圍內(nèi)，優(yōu)選推薦每日飲食需要量(“RDDA”)的每天3到10個α生育酚相當量的1到100倍；即每天3-10mg d-α生育酚。1mg的d-α生育酚的活性等于1個相當量的α生育酚。由于1mg的d-α生育酚相當于1.49個國際單位(IU)的維生素E，因此大約4.5到15個國際單位的維生素E即為所述RDDA。已測定了下述維生素E衍生物的活性1個國際單位的維生素E相當于1mg的dl-α醋酸生育酚，1mg的d-α醋酸生育酚具有1.36個國際單位的維生素E的效能，1mg的d-α生育酚具有1.49個國際單位的維生素E的效能，而1mg的d-α琥珀酸生育酚具有1.21個國際單位的維生素E的效能；參見Goodman和Gilman’s治療學的藥理學基礎(The Pharmacological Basis ofTherapeutics)，第九版，1996年，McGraw-Hill，第1549和1585-1590頁。
合適的維生素E衍生物包括d-α生育酚(按照推薦每日需要量可自Roche，Nutley，N.J.購得，成人每天10-30mg，等于每天200個國際單位的維生素E)、維生素E的酯類如維生素E醋酸酯和維生素E琥珀酸酯(α-醋酸生育酚和α-琥珀酸生育酚)以及水溶性維生素E的衍生物。優(yōu)選應用水溶性維生素E的衍生物。
水溶性維生素E的衍生物包括藥學上可接受的維生素E的鹽類如維生素E磷酸鹽、以及水溶性生育酚聚乙二醇酯例如在美國專利2,680,749號、3,914,430號和5,234,695號中公開的那些；優(yōu)選水溶性生育酚聚乙二醇酯。
更優(yōu)選使用d-α生育酚聚乙二醇酯例如在水中可分散的維生素E d-α生育酚聚乙二醇酯1000琥珀酸酯(“維生素E-TPGS”)以及使用維生素E-TPGS與至少一種具有40℃的完全熔點的甘油的脂肪酸酯的組合物的應用(二者均公開于美國專利5,234,695中并可自Eastman Kodak Co.，Rochester，NY購得)。
維生素E衍生物，例如水溶性維生素E衍生物如維生素E-TPGS的有效量是在大約200IU至20000IU維生素E/日，優(yōu)選大約1000IU至大約5000IU維生素E/日，更優(yōu)選大約1200IU至大約2200IU維生素E/日的范圍內(nèi)，以單個或分開的劑量給予。Dimitrov，NV，等在AmJ Clin Nutr(USA)1996年9月第64卷3期329-335頁中報導了將400IU(269mg)、800IU(537mg)和1200IU(807mg)的維生素E-TPGS以單個口服劑量給予健康志愿者導致血漿α生育酚濃度輕度升高。Sokool，RJ，等在Gastroenterology(USA)1993年6月第104卷6期1727-1735頁中報導了20-25 IU/Kg/日劑量的維生素E-TPGS似乎是安全的并且對治療慢性兒童膽汁郁積有效。兒科維生素E-TPGS的RDA是在15-25 IU/Kg/日的范圍內(nèi)。
維生素C(L-抗壞血酸和D-抗壞血酸)作為非處方藥物易于獲得。還參見Merck索引第11版#855第130-131頁。維生素C的RDA是在大約100至大約200mg/日的范圍內(nèi)，但是已有報導使用高達25g/日或甚至40g/日的劑量。
水飛薊素(silymarin)，乳薊中的活性成分，可從德國Magdaus AG以LEGALON商品名獲得。水飛薊的RDA是140mg/日，膠囊口服。
輔酶-Q10是由人體生產(chǎn)的一種維生素樣物質(zhì)，也在器官食物(organ meats)中發(fā)現(xiàn)。輔酶-Q10的RDA是大約300至400mg/日。
BHA(叔丁對甲氧酚)(Merck索引第11版1547號)和BHT(丁化羥基甲苯)(Merck索引第11版1548號238頁)可從Milwaukee(WI 53233)的Aldrich化學有限公司獲得。
乙酰半胱氨酸(N-乙酰基-L-半胱氨酸，“NAC”)在體內(nèi)發(fā)現(xiàn)。也參見Merck索引第11版82號14頁。NAC的RDA是在大約300mg/日至600mg/日的范圍內(nèi)。
硒可從Milwaukee(WI 53233)的Aldrich化學有限公司獲得。硒的RDA是200至600微克/日。
Panavia(4，4’-亞異丙基二硫酚雙-2，6-二-叔丁基酚)可自VyrexCorporation，LaJolla，CA 92037(USA)購得。對于HIV患者，Panavia的RDA是200mg到800mg/日，口服；在I/II期臨床試驗中較高劑量可穩(wěn)定或輕微穩(wěn)定CD4的水平。參見PharmaProjects，J5A部分。
番茄紅素發(fā)現(xiàn)于番茄中；參見NY TIMES，1999年4月13日，科學時代部分第F12頁。番茄紅素的RDA在5到15mg/日的范圍內(nèi)。
優(yōu)選的抗氧化劑是水溶性d-α生育酚聚乙二醇酯，如在水中可分散的維生素E d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(“維生素E-TPGS”)以及維生素E-TPGS與至少一種具有40℃的完全熔點的甘油脂肪酸酯的組合物的應用(二者均公開于美國專利5,234,695中并可自Eastman Kodak Co.，Rochester，NY購得)。
適合于口服、非胃腸道和局部給藥并用于本發(fā)明中的抗氧化劑的藥用組合物可包含賦形劑，以及在抗氧化劑的非處方藥制劑中發(fā)現(xiàn)的其它成分。也可應用公開于美國專利5,234,695中的維生素E-TPGS與至少一種具有40℃的完全熔點的甘油脂肪酸酯的組合物。也可參見公開于J Pharm Pharmacol(GB)(1995年2月，第47卷第2期，第138-142頁)中的Trolox和Trolox C的組合物。
利巴韋林的體外抑制濃度公開于Goodman和Gilman的“治療學的藥理學基礎”第9版(1996)，McGraw Hill，NY，第1214-1215頁。所述利巴韋林產(chǎn)品信息公開了在1999年醫(yī)師參考手冊(PhysiciansDesk Reference) 1382-1384頁中給出的使用18小時的20mg/mL劑量的利巴韋林氣霧劑。
Sidwell，R.W.等在Pharmacol.Ther 1979年第6卷123-146頁的2.2節(jié)126-130頁中還公開了利巴韋林劑量和劑量方案。Fernandes，H.等在Eur.J.Epidemiol.1986年第2卷1期1-14頁的4-9頁中公開了用于口服、胃腸外的劑量和劑量方案以及在各種臨床前和臨床研究中利巴韋林的氣霧劑給藥。
本文使用的“丙型肝炎感染患者”意指任何丙型肝炎患者(包括小兒患者)以及包括首次治療的丙型肝炎感染患者和曾經(jīng)治療過的丙型肝炎感染患者以及這樣的小兒患者、首次治療的和曾經(jīng)治療過的慢性丙型肝炎感染患者。
這些慢性丙型肝炎患者包括包含1型的多個HCV基因型感染的患者以及特別是HCV基因型2和/或3感染的患者。
本文使用的術(shù)語“兒科患者”意指17歲以下的患者，并且通常包括從出生到16歲的那些患者。
本文使用的術(shù)語“首次治療的丙型肝炎感染患者”意指從來沒有用利巴韋林或任何干擾素(包括但不限于α-干擾素)或聚乙二醇化α-干擾素治療過的丙型肝炎患者。
本文使用的術(shù)語“曾經(jīng)治療過的丙型肝炎感染患者”意指已經(jīng)用利巴韋林或任何干擾素(包括但不限于α-干擾素)或聚乙二醇化α-干擾素治療過的丙型肝炎患者，包括復發(fā)者和無應答者。
本文使用的術(shù)語“慢性丙型肝炎感染患者”意指任何慢性丙型肝炎患者，并且包括“首次治療的和曾經(jīng)治療過的慢性丙型肝炎感染患者”，包括但不限于復發(fā)者和無應答者。
本文使用的術(shù)語“復發(fā)者”意指曾經(jīng)治療過的丙型肝炎患者，他們在以前單獨用干擾素或與利巴韋林聯(lián)合治療的初期反應以后又復發(fā)。
本文使用的術(shù)語“無應答者”意指曾經(jīng)治療過的丙型肝炎患者，他們對以前任何單獨用干擾素或與利巴韋林聯(lián)合的治療無應答。
本文使用的術(shù)語“α-干擾素”意指抑制病毒復制和細胞增殖以及調(diào)控免疫反應的高度類似的種特異性蛋白質(zhì)家族。典型合適的α-干擾素包括但不限于重組α-2b干擾素(如可從Schering公司，Kenilworth，N.J.獲得的Intron-A干擾素)、重組α-2a干擾素(如可從Hoffmann-LaRoche，Nutley，N.J.獲得的Roferon干擾素)、重組α-2c干擾素(如可從Boehringer Ingelheim制藥有限公司，Ridgefield，CT.獲得的Beroforα2干擾素)、α-nl干擾素(一種純化的天然α-干擾素的混合物，如可從日本的Sumitomo獲得的Sumiferon或是從英國倫敦的Glaxo-Wellcome公司獲得的Wellferon α-nl干擾素(INS))、或共有序列α-干擾素(如在美國專利號4,897,471和4,695,623(特別是其7、8或9實施例)中描述的那些干擾素以及可從Amgen公司，Newbury Park，CA獲得的特定產(chǎn)品)、或α-n3干擾素(一種由Interferon Sciences制造的天然α-干擾素的混合物，并且可從Purdue Frederick公司，Norwalk，CT.在Alferon商品名下獲得)或者可從德國的Frauenhoffer研究所或可從南韓的Green Cross獲得的重組α-干擾素。優(yōu)選使用α-2a或α-2b干擾素。由于在所有干擾素中α-2b干擾素是在全球最廣泛批準的用于治療慢性丙型肝炎感染，所以它是最優(yōu)選的。α-2b干擾素的生產(chǎn)描述于美國專利號4,530,901。
本文使用的術(shù)語“聚乙二醇化α-干擾素”意指聚乙二醇修飾的α-干擾素(優(yōu)選α-2a和α-2b干擾素)的軛合物(conjugates)。優(yōu)選的聚乙二醇-α-2b干擾素軛合物是PEG12000-α-2b干擾素。本文使用的短語“12,000分子量聚乙二醇軛合的α-干擾素”和“PEG12000-IFNα”意指如按照國際專利申請?zhí)朩O 95/13090的方法制備并且在α-2a或α-2b干擾素氨基基團與具有12000平均分子量的聚乙二醇之間含有尿烷鍵的軛合物。
優(yōu)選的PEG12000-α-2b干擾素是通過將PEG聚合物與IFN α-2b分子中賴氨酸殘基的ε氨基基團連接而制成的。通過尿烷鍵將單個PEG12000分子軛合到IFN α-2b分子上的游離氨基基團上。該軛合物的特征在于連接的PEG12000的分子量。將所述PEG12000-IFN α-2b軛合物配制成注射用的凍干粉末。IFN α與PEG軛合的目的是通過顯著延長其血漿半衰期而改善所述蛋白質(zhì)的給藥，并因此提供了延長的IFNα活性。
其它α-干擾素軛合物能通過將α-干擾素偶聯(lián)到水溶性聚合物而制成。此類聚合物的非限制性目錄包括其它聚亞烷基氧化物均聚物如聚乙二醇、聚氧乙烯多元醇、它們的共聚物和它們的嵌段共聚物。作為可替代以聚亞烷基氧化物為基礎的聚合物的選擇，可使用有效的非抗原性物質(zhì)如右旋糖酐、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酰胺、聚乙烯醇、碳水化合物為基礎的聚合物等等。這種α-干擾素多聚體軛合物描述于美國專利號4,766,106、美國專利號4,917,888、歐洲專利申請?zhí)? 236 987、歐洲專利申請?zhí)?510 356、0 593 868和0 809 996(聚乙二醇化α-2a干擾素)以及國際專利公開號WO 95/13090中。
適合于胃腸外給藥的聚乙二醇化α-干擾素的藥用組合物可用合適的緩沖液如Tris-HCl、醋酸鹽或磷酸鹽(如磷酸氫二鈉/磷酸二氫鈉)緩沖液和藥學上可接受的賦形劑(如蔗糖)、載體(如人血漿白蛋白)、毒性物質(zhì)(如NaCl)、防腐劑(如乙基汞硫代水楊酸鈉、甲酚或芐醇(benylalcohol))和表面活性劑(如吐溫或聚山梨醇酯)在無菌水中配制成注射劑。所述聚乙二醇化α-干擾素可以凍干粉末在2℃-8℃冷藏下儲存。當在2℃-8℃儲存并且在重新溶解的24小時內(nèi)使用時，所述重新組成的水性溶液是穩(wěn)定的。參見例如美國專利號4,492,537、5,762,923和5,766,582。所述重新組成的水性溶液也可儲存在預先充入的、多個劑量的注射器中，就象用于如胰島素藥物給藥的注射器那樣。典型合適的注射器包括由附于筆形注射器(如可從Novo Nordisk獲得的NOVOLET Novo Pen)的預先充入的小瓶，以及允許使用者方便地自我注射的預先充入的筆形注射器組成的系統(tǒng)。其它注射器系統(tǒng)包括由在分離的室間含有稀釋劑和凍干聚乙二醇化α-干擾素的玻璃藥筒組成的筆形注射器。
以下給出了給予治療學上有效量的α-干擾素和利巴韋林的聯(lián)合治療的優(yōu)選實施方案。
作為聯(lián)合治療的一部分而給予的所述α-干擾素優(yōu)選選自α-2a干擾素、α-2b干擾素、共有序列干擾素、純化的α-干擾素產(chǎn)品或聚乙二醇化α-干擾素。更優(yōu)選，所述α-干擾素選自α-2a干擾素、α-2b干擾素或純化的α-干擾素產(chǎn)品，并且給予α-干擾素的量為每周2百萬到1千萬IU，每周一次、每周三次(TIW)、隔日一次(QOD)或每日一次。在一優(yōu)選實施方案中，給予的α-干擾素是α-2b干擾素，并且給予α-干擾素的量是3百萬IU TIW。
或者，作為聯(lián)合治療的一部分而給予的所述α-干擾素是共有序列干擾素，并且給予α-干擾素的量是每周1-20微克，每周一次、每周二次(BIW)、TIW、QOD或每日一次。在另一實施方案中，給予的所述α-干擾素是聚乙二醇化α-2b干擾素，并且給予α-干擾素的量是每周0.5-2.0微克，每周一次、BIW、TIW、QOD或每日一次?；蛘撸o予的所述α-干擾素是聚乙二醇化α-2a干擾素，并且給予α-干擾素的量是每周20-250微克/公斤，每周一次、TIW、QOD或每日一次。
當作為聯(lián)合治療的一部分而給予的所述聚乙二醇化α-干擾素是聚乙二醇化α-2b干擾素時，按照本發(fā)明在治療期間(包括在第一和第二療程中)給予的聚乙二醇化α-2b干擾素的治療學上有效量是每周給予大約0.1-9.0微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素，以單個劑量或分開的劑量給予，優(yōu)選每周一次(QW)或每周二次(BIW)，優(yōu)選每周一次(QW)給予大約0.1-9.0微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素或每周二次(BIW)給予大約0.05-4.5微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素，或者每周給予大約0.5-3.0微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素，優(yōu)選每周一次(QW)給予大約0.5-3.0微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素或每周二次給予大約0.25-1.5微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素，或者每周給予大約0.75-1.5微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素，最優(yōu)選每周一次給予大約0.75-1.5微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素或每周二次給予大約0.375-0.75微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素。
當作為聯(lián)合治療的一部分而給予兒科患者的聚乙二醇化α-干擾素是聚乙二醇化α-2b干擾素時，按照本發(fā)明在治療期間(包括在第一和第二療程中)給予的聚乙二醇化α-2b干擾素的治療學上有效量是每周給予大約0.1-9.0微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素，以單個劑量或分開的劑量給予，優(yōu)選每周一次(QW)或每周二次(BIW)，更優(yōu)選每周一次(QW)給予大約0.1-9.0微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素，或每周給予大約0.05-4.5微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素，以單個劑量或分開的劑量給予，優(yōu)選每周一次(QW)或每周二次(BIW)，更優(yōu)選每周一次給予大約0.05-4.5微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素，或者優(yōu)選以單個或分開的劑量給予大約0.75-3.0微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素，優(yōu)選每周一次(QW)或每周二次(BIW)，更優(yōu)選每周一次給予大約0.75-3.0微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素或每周二次給予大約0.375-1.5微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素，最優(yōu)選每周一次給予大約2.25-2.6微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素或每周二次(BIW)給予大約1.1-1.3微克/公斤的聚乙二醇化α-2b干擾素。
當作為聯(lián)合治療的一部分而給予的聚乙二醇化α-干擾素是聚乙二醇化α-2a干擾素時，按照本發(fā)明在治療期間(包括在第一和第二療程中)給予的聚乙二醇化α-2a干擾素的治療學上有效量是每周一次(“QW”)給予大約50-500微克，優(yōu)選大約180-250微克QW，或者所述有效量是每周二次給予大約50-250微克，優(yōu)選大約90-125微克，每周二次。
當作為聯(lián)合治療的一部分而給予兒科患者的聚乙二醇化α-干擾素是聚乙二醇化α-2a干擾素時，按照本發(fā)明在治療期間(包括在第一療程中)給予的聚乙二醇化α-2a干擾素的治療學上有效量是每周一次(“QW”)給予大約50-500微克，優(yōu)選大約300-375微克(QW)，或者給予兒科患者的聚乙二醇化α-2a干擾素的治療學上有效量是每周二次給予大約50-250微克，優(yōu)選每周一次大約150-190微克。
利巴韋林作為聯(lián)合治療的一部分與聚乙二醇化α-干擾素聯(lián)合(即是，在給予聚乙二醇化α-干擾素之前、之后或同時)給予患者。在所述患者接受利巴韋林劑量的同一時期優(yōu)選給予所述聚乙二醇化α-干擾素劑量。與聚乙二醇化α-干擾素同時給予的利巴韋林的量是每日大約400-1600mg，優(yōu)選大約600-1200mg/日或大約800-1200mg/日，最優(yōu)選大約1000-1200mg/Kg/日。在兒科患者接受利巴韋林劑量的同一時期也優(yōu)選給予所述患者聚乙二醇化α-干擾素劑量。與聚乙二醇化α-干擾素同時給予兒科患者的利巴韋林的量是每日每公斤大約8-15mg，優(yōu)選每日每公斤大約8、12或15mg，以分開的劑量給予。
以下給出了在第一和第二療程中與利巴韋林一起聯(lián)合給予誘導劑量α-干擾素的優(yōu)選實施方案。
在第一療程中給予利巴韋林的量是每日400-1600mg，優(yōu)選600-1200mg/日或大約800-1200mg/日，最優(yōu)選大約1000-1200mg/Kg/日。在第二療程中給予利巴韋林的量是每日大約800-1200mg，優(yōu)選每日大約1000-1200mg。
當給予的α-干擾素是選自α-2a干擾素、α-2b干擾素或純化的α-干擾素產(chǎn)品時，在第一療程中給予的α-干擾素的治療學上有效的誘導劑量是每日10 MIU持續(xù)2周，隨后每日5 MIU持續(xù)6周，然后每日3 MIU持續(xù)16周，并且在第二療程中給予的α-干擾素的治療學上有效量是3 MIU TIW持續(xù)24周。
當給予的α-干擾素是α-2b干擾素時，在第一療程中給予的α-2b干擾素的治療學上有效的誘導劑量是每日10 MIU持續(xù)2周，隨后每日5 MIU持續(xù)6周，然后每日3 MIU持續(xù)16周，并且在第二療程中給予的α-2b干擾素的量是3 MIU TIW持續(xù)24周。
當給予的α-干擾素是共有序列干擾素時，在24周的第一療程中給予的共有序列干擾素的量是每日15-20微克持續(xù)2周，隨后每日9-15微克持續(xù)22周，并且在第二療程中給予的共有序列干擾素的量是9微克TIW持續(xù)24周。
在本發(fā)明的優(yōu)選實施方案中，所述α-干擾素是α-2a或-2b干擾素；更優(yōu)選使用α-2b干擾素。
第一和第二療程總計約40-50周，優(yōu)選48周。
患有慢性丙型肝炎感染的人可以表現(xiàn)出下列一種或多種征象或癥狀(a)升高的ALT，(b)抗HCV抗體試驗陽性，(c)通過HCV-RNA試驗陽性證明HCV的存在，(d)慢性肝病的臨床特征，(e)肝細胞損害。
為了實施本發(fā)明，將α-干擾素和利巴韋林或誘導劑量的α-干擾素和利巴韋林的聯(lián)合治療給予表現(xiàn)有上述一種或多種征象或癥狀的患者，其劑量足以消除或至少減輕一種或多種征象或癥狀。將治療學上有效量的抗氧化劑與聯(lián)合治療或誘導劑量結(jié)合給予以改善利巴韋林-相關(guān)溶血。
將利巴韋林與α-干擾素聯(lián)合給予患者，即，在患者接受本發(fā)明的利巴韋林衍生物劑量的同時給予α-干擾素劑量。當口服給藥時絕大部分α-干擾素制劑均是無效的，所以優(yōu)選給予α-干擾素的方法是胃腸外給藥，優(yōu)選皮下、靜脈或肌肉注射。利巴韋林可以膠囊或片劑形式與α-干擾素胃腸外給藥結(jié)合口服給藥。當然，兩種藥物的其它給藥形式，如果有效均可考慮，例如通過鼻噴霧劑、透皮、通過栓劑、通過持續(xù)釋放劑型等。任何形式的給藥均可采用，只要能給予合適的劑量而不破壞活性成分。
適用于胃腸外給藥的α-干擾素的藥用組合物可用合適的緩沖液如Tris-HCl、醋酸鹽或磷酸鹽(如磷酸氫二鈉/磷酸二氫鈉)緩沖液和藥學上可接受的賦形劑(如蔗糖)、載體(如人血漿白蛋白)、毒性物質(zhì)(如NaCl)、防腐劑(如乙基汞硫代水楊酸鈉、甲酚或benylalcohol)和表面活性劑(如吐溫或聚山梨醇酯)在無菌水中配制成注射劑。所述α-干擾素可以作為凍干粉末在2℃-8℃冷藏下儲存。當在2℃-8℃儲存并且在重新溶解的24小時內(nèi)使用時，所述重新組成的水性溶液是穩(wěn)定的。參見例如美國專利號4,492,537、5,762,923和5,766,582。
本發(fā)明上下文中的術(shù)語“不可測得的HCV-RNA”意指通過定量的、多環(huán)逆轉(zhuǎn)錄酶PCR方法測定時，每毫升患者血清中有少于100個HCV-RNA的復制體。在本發(fā)明中優(yōu)選通過以下描述的方法測定HCV-RNA。本文優(yōu)選該方法為HCV-RNA/qPCR。
本發(fā)明上下文中的術(shù)語“基本上降低的可測得的HCV-RNA血清水平”意指與初始HCV-RNA血清水平相比，所述HCV-RNA血清水平降低至少10的一次方，優(yōu)選降低10的二次方，最優(yōu)選降低10的三次方。
采用guaninidiun硫氰酸鹽-苯酚-氯仿mister，隨后通過乙醇-醋酸銨沉淀從患者血清中提取RNA。離心沉淀的RNA，所獲得的顆粒物質(zhì)在Centrivap控制臺(Labconco，Kansas City，Mo.)中干燥。然后將干燥的顆粒物質(zhì)再懸浮于30微升的Rnasin(Promega Corp.，Madison，WI)、二硫蘇糖醇(dithiothritol)和焦碳酸二乙酯處理的水混合物中。將樣本保持在-20℃或-20℃以下(優(yōu)選-70℃以下)直到RNA逆轉(zhuǎn)錄(RT)和PCR。
為了在所述RT反應中將整個RNA序列轉(zhuǎn)變化cDNA中，使用隨機的六脫氧核糖核苷酸(Pharmacia Biotech，Piscataway，NJ)作為第一鏈cDNA合成的引物。將兩份等試樣的3微升的再懸浮樣品加入到3微升的100ng/μl隨機引物中并在70℃變性，然后使用M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶(USB，Cleveland，OH)在含有5mM MgCl2的標準緩沖液中于40℃逆轉(zhuǎn)錄一小時。最終RT反應容積是26μl。緊隨所述逆轉(zhuǎn)錄之后立即開始PCR。
應用熱穩(wěn)定的Taq多聚酶進行改良形式的PCR方法以擴增cDNA。將PCR混合液75μl加入到整個RT反應體積(26μl)中，使總體積為101μl，氯化鎂的終濃度為1.5mM。然后將每份101μl的樣品分成50.5μl，并在上面放入礦物油層以防止蒸發(fā)。
所述PCR循環(huán)包括分別在55℃退火90秒，在74℃延伸90秒以及在94℃變性90秒。將熱循環(huán)樣品經(jīng)受最終74℃的延伸10分鐘。應用了四個不同的循環(huán)組。按雙份裝填樣品，并在RT之后將這些樣品分裝，一份樣品可分裝成四個管。四管中的每一管均給予一個不同的循環(huán)編號，在定量的步驟中提高敏感性和準確性。通過已知RNA拷貝數(shù)標準(包括每組合的60管)的令人滿意的擴增來評估所述熱循環(huán)的效率。用于擴增的兩個引物系列均來自HCV基因組的5′未翻譯區(qū)域。這些引物組均為高度保守的，且經(jīng)檢測均為已知的HCV亞型。引物組1上游5′-GTG GTC TGC GGA ACC GGT GAG T-3′，下游5′-TGC ACG GTC TAC GAG ACC TC-3′，該引物產(chǎn)生一個190堿基(bp)的產(chǎn)物。引物組2上游5′-CTG TGA GGA ACT ACT GTC TTC-3′，下游5′-CCC TAT CAG GCA GTA CCA CAA-3′，該引物產(chǎn)生一個256 bp的產(chǎn)物。
然后將擴增的cDNA在3％瓊脂糖凝膠中電泳并轉(zhuǎn)移到尼龍膜上。用非放射活性的地高辛-標記的DNA探針通過DNA印跡和免疫染色法測定靶DNA。應用自動化儀器進行PCR熱循環(huán)、瓊脂糖凝膠電泳、真空轉(zhuǎn)移DNA印跡法、雜交以及免疫印染等所述步驟。每一張膜含有已知拷貝數(shù)的系列稀釋的標準品，將該標準品用于繪制樣品帶的定量檢測的標準曲線。由精密稀釋的從轉(zhuǎn)錄克隆中獲得的HCV-RNA制備原始的標準曲線。對轉(zhuǎn)錄物進行放射活性摻入法研究、凝膠電泳和OD 260檢測以測定其具有預期的長度。在RNA轉(zhuǎn)錄物定量的克隆標準產(chǎn)生后，產(chǎn)生了可更好地代表HCV的異質(zhì)性的“綜合的(pooled)”標準。人們可能遭遇自然感染。這些混合物(pools)就是通過合并已知感染的個體的大量血清或血漿而制備的。用PCR對所述血清/血漿混合物相對于克隆轉(zhuǎn)錄物進行校準，并用已知的PCR-陰性液體稀釋。最后，對照cDNA Quantiplex核酸檢測系統(tǒng)(Chiron Inc.，Emeryville，CA)檢測所述混合物中的較高拷貝數(shù)的樣品。將這些“雙重定量”的混合物等分并于-70℃保存。每個實驗中用每毫升5,000,000、1,000,000、500,000、100,000、10,000和1000個拷貝數(shù)的稀釋度。
當所述標準曲線幾乎是直線時，實驗每間隔一段時間即測定并用自動掃描儀/光密度儀將每張DNA印跡印染的膜掃描到電腦中。然后將產(chǎn)生的電子影像用于測定帶的面積和帶的平均密度。將所有讀數(shù)都標準化為綜合的帶密度并與標準曲線比較以獲得每條帶的病毒拷貝數(shù)的數(shù)字化的值。
本發(fā)明上下文中使用的術(shù)語“持續(xù)病毒學反應”意指按照本發(fā)明治療的患者在聯(lián)合療法治療結(jié)束后至少24周沒有可測得的HCV-RNA。優(yōu)選持續(xù)病毒學反應的時期為治療結(jié)束后至少一年或更長。
治療期間和治療后的跟蹤，可使用生物化學(ALT)、病毒學(HCV-RNA)、血液學(至少包括以下的血紅蛋白(HgB)、紅細胞壓積(HCT)、RBC、WBC分類和血小板計數(shù)水平)以及組織學(肝組織活檢)檢查來評估對實驗治療的反應的性質(zhì)和持續(xù)時間。初始效能變量將是完全反應，該反應定義為在治療結(jié)束后24周時測到的降低的血清HCV-RNA/qPCR(＜100拷貝/mL)。此外，也將測定與基線值相比所述血紅蛋白水平的降低。另外，通過Knodell組織學活性指數(shù)(HAI)測得的肝臟炎癥的減輕、治療后肝組織活檢的改善以及ALT的正?；矊⒆鳛榈诙壭艿慕K點(Endpoints)而被檢測。所述實驗治療的安全性將通過監(jiān)測選擇的實驗室參數(shù)以及通過記錄和評價任何不良反應的發(fā)生來評估。
效能所述初始效能目標將是治療1組和2組關(guān)于所述持續(xù)病毒學反應率的比較，將該反應率定義為在治療結(jié)束后24周時測定的(可測到的)血清HCV-RNA/qPCR丟失(降低)到不可測到的水平或到＜100拷貝/mL的水平。用邏輯回歸法也可檢測隨后的第二級效能終點。
第二級效能終點●在跟蹤的24周時ALT正常化的患者的比例；●活組織檢查有改善的患者的比例(分類I+II+III聯(lián)合評分)；●從所述活組織檢查評分的基線的改變(分類I+II+III聯(lián)合評分)；●以HCV-RNA/qPCR為基礎的在治療終點時的反應率；●在治療終點時ALT正?；幕颊叩谋壤?；●以HCV-RNA/qPCR為基礎的在跟蹤的24周時的反應率。
病毒學進入狀態(tài)和從進入改變由中心實驗室進行血清HCV-RNA/qPCR試驗和HCV基因型測試。在基線需要陽性HCV-RNA檢測結(jié)果；僅HCV-RNA陽性的患者有資格參加。重復檢測應安排在4、12、24周，并且如果所述患者是在48周治療組則在36和48周重復檢測。所有患者在跟蹤的12和24周應安排有重復檢測。
按照以下定義評估反應病毒學應答者如果在給予的時間點HCV-RNA/qPCR是陰性(＜100拷貝/mL)，則在該時間點將患者分類為應答者。持續(xù)病毒學應答者如果在跟蹤的24周患者是應答者，則將所述患者分類為持續(xù)應答者。
注意沒有達到這些標準的患者，包括在獲得需要的HCV-RNA/qPCR評估以前中止的患者，將被分類為非應答者。完全應答者 通過Knodell HAI炎癥評分以HCV-RNA/qPCR和肝組織學改變這二者為基礎作為評估。如果在跟蹤的24周時，他/她是持續(xù)病毒學應答者并且有正常的ALT，則將該患者分類為對治療完全的應答者。
肝組織學在患者加入前六個月內(nèi)以及在跟蹤的24周時對所有患者進行肝組織學活檢。所述組織學活檢的評估由專一病理學家使用Knodell組織學活性評分進行。中心病理學家不知道有關(guān)患者的身份、治療組和獲得的與治療有關(guān)的組織學活檢的時間(治療前或治療后)。通過比較在基線處觀察到的和在跟蹤24周時呈現(xiàn)的炎癥活性來評估研究治療的效果。
在所述研究開始前測定患者的體重和他們的基線疾病特征(HCV基因型、血紅蛋白水平和初始病毒負載)。有待于HCV-RNA/qPCR測試的患者的血清樣本應進行HCV基因型檢測。
這種包括所述疾病的所有方面的功效的增強將導致●可測得的HCV-RNA的持續(xù)根除；●肝臟炎癥的改善；●較低的血紅蛋白下降；●ALT正?；?；●HQL的改善。
臨床研究設計設計這一治療方案以證實維生素E在上文討論的所述試驗研究中顯示的功效，它在治療慢性丙型肝炎患者時改善與Rebetron(IntronA+利巴韋林)有關(guān)的溶血。
以下雙盲治療方案(arms)將隨機地分配給在分解(sunder)這一方案的所選擇的中心的患者A.Rebetron(Intron A 3MU TIW-利巴韋林1000-12000mg，每日以分開的劑量口服)加上1000IU維生素E，BID。
B.Rebetron(Intron A 3MU TIW+利巴韋林1000-12000mg，每日以分開的劑量口服)加上1000IU維生素E加安慰劑。
C.Rebetron(Intron A 3MU TIW+利巴韋林1000-12000mg，每日以分開的劑量口服)僅加上匹配的安慰劑。
患者體重必須≥75kg，他們將接受1200mg/日的利巴韋林。
如果患者6個月不能清除病毒將中止治療。
總共90例患者參加(每組30例患者)。
目標這一治療方案的主要目標是證實維生素E能減輕使用利巴韋林所發(fā)生的溶血，(與對照組相比減少血紅蛋白從基線的下降)。
第二目標是確定是否有利于降低巴韋林劑量減少的需要、中斷治療的患者的減少以及生活質(zhì)量的改善。
研究概要所述方案是標準劑量的Rebetron(Intron A 3 mu TIW+利巴韋林1000-12000mg/日)加上1000IU維生素E或2000IU維生素E或安慰劑的雙盲隨機研究。繪制系列的血紅蛋白水平、HCV RNA水平和利巴韋林水平。也將使用其它溶血標記和生活方式質(zhì)量(活力和抑郁程度)來測定結(jié)果。在調(diào)查者位置仍保持盲目時，在12和24周將進行中期分析。
研究人群成年男性和女性代償期慢性丙型肝炎患者，他們以前沒有接受過干擾素治療。符合以下進入標準的患者將被選入。進入標準所述患者必須符合以下進入標準成年男性或女性，年齡18到70歲。
PCR檢測血清丙型肝炎病毒陽性。
在進入這一方案之前肝組織活檢病理報告證實病史診斷與慢性肝炎一致。
有以下實驗室參數(shù)的代償期肝病進入隨訪血紅蛋白值＞11g/dL(女性)或＞12g/dL(男性)WBC＞3,000/mm3中性粒細胞計數(shù)1,500/mm3血小板＞70,000/mm3凝血酶原時間與對照相比＜2秒延長，或相等的INR比率膽紅素在正常上限的20％以內(nèi)白蛋白＞3.5g/dL血清肌酐＜1.4mg/dL非糖尿病患者禁食血糖＜115mg/dL糖尿病患者血紅蛋白A＜8.5％(不論是藥物以及/或是飲食控制)甲狀腺刺激激素(TSH)在正常范圍內(nèi)抗核抗體(ANA)＜1.160。
在此前的一年內(nèi)，獲得的α胎蛋白(AFP)值在正常范圍內(nèi)。對于高出正常值上限但＜50ng/ml的結(jié)果病人來說，需要符合下述兩項在進入之前3個月內(nèi)獲得的α胎蛋白值＜ng/ml以及在進入之前3個月內(nèi)獲得的超聲波為肝細胞癌征象陰性。排除標準如果下述條件的任何一項發(fā)生，則將病人從進入的方案中排除對α干擾素或利巴韋林過敏。
除了慢性C型肝炎以外的任何其它慢性肝病的病因。
血紅蛋白性疾病(如地中海貧血)或任何其它溶血性貧血的病因。
進行性肝病跡象如腹水既往史或現(xiàn)病史、靜脈曲張性出血或自發(fā)性腦病。
任何已知的能干擾患者參加所述方案的以前存在的疾病包括需要治療的CNS創(chuàng)傷或活動性癲癇發(fā)作疾病、控制不良的糖尿病、嚴重的肺病、免疫學藥物治療的疾病、痛風、或在所述研究過程期間任何需要或可能需要長期全身給予類固醇的疾病。
對緊張試驗(對于有冠狀動脈疾病風險或病史的患者需要)有缺血證據(jù)的患者、有(心肌)缺血的ECG證據(jù)、心律失常、心臟衰竭、冠狀動脈外科手術(shù)、未控制的高血壓、12個月內(nèi)的心絞痛或心肌梗塞的患者。
臨床上顯著視網(wǎng)膜異常的患者。
濫用藥物，如酒精(80g/日)、靜脈使用毒品和吸毒。如果所述患者有濫用藥物史，可考慮進入所述方案，該患者必須戒除濫用藥物至少1年。在過去的一年中接受美沙酮的患者也須排除。
必須與患者商討有關(guān)戒除酒精消費的需要。對于所述方案，酒精消費＞20g/日的患者是不符合條件的。
同時使用核苷類似物、金剛烷胺/金剛乙胺和蛋白酶抑制劑將被排除在外。
有器官移植病史的患者排除。
排除以前存在精神疾病、尤其是重度抑郁、或嚴重精神疾病病史、如嚴重精神病、自殺思想和/或自殺企圖。
研究藥物治療利巴韋林供給以標準包裝的Rebetron提供給研究藥物治療。通過患者的藥房、直接由辦公室分配或通過Schering’s Commitment提供利巴韋林來從事該計劃。利巴韋林膠囊必須在15-25℃(59-77°F)室溫儲存。利巴韋林的給予利巴韋林將通過口服途徑每日二次(BID)以600-1200mg/日的劑量給予。800mg以上劑量的利巴韋林將以進入隨訪的患者體重為基礎，如下表中所指出
表利巴韋林劑量 患者體重 總的日劑治療方案 總數(shù)膠囊/劑量 量 (每粒200mg)＜75kg 1000mg 400mg/600mg 上午2粒膠囊分開的劑量，BID，下午3粒膠囊≥75kg 1200mg 600mg/600上午3粒膠囊mg分開的劑量，BID下午3粒膠囊所有利巴韋林劑量均以BID方案給予。如果發(fā)生副反應則需要減少劑量，總的日劑量也應調(diào)整。Intron A的供給所述患者以合適的濃度獲得Intron A，以便提供3 MU TIW的劑量。這可以從患者的藥房、直接由辦公室分配或通過ScheringCorporation’s Commitment獲得來從事該計劃。Intron A的給予Intron A通過皮下途徑給予。其它信息參見Intron A包裝內(nèi)插頁的說明。維生素E/安慰劑的供給和給予維生素E(得自R.P.Scherer Corp，St Petersburg，F(xiàn)LA)以500 IU的維生素E濃度的膠囊形式供給。所述膠囊包裝于普通瓶中。適宜地，匹配的安慰劑膠囊也以普通瓶供給。這些可直接由Schering-Plough公司供給。依照所述研究組，膠囊以1個月的供應量包裝(維生素E/維生素E、維生素E/安慰劑或安慰劑/安慰劑)。每位患者在每日的基礎上上午服用2粒膠囊和下午服用2粒膠囊，具體如下所述研究組(維生素E/維生素E)-上午2粒500IU維生素E的膠囊和下午2粒維生素E膠囊；所述研究組(維生素E/安慰劑)-上午2粒500 IU維生素E膠囊和下午2粒安慰劑膠囊；以及所述研究組(安慰劑/安慰劑)-上午2粒安慰劑膠囊和下午2粒安慰劑膠囊PM。
療程Intron A和利巴韋林二者的療程最長可達48周。
我們期望與既往史對照相比，按照本發(fā)明的臨床研究設計的抗氧化劑與所述聯(lián)合治療的結(jié)合使用將顯著降低所述聯(lián)合治療的第一個12周內(nèi)的利巴韋林-相關(guān)溶血性貧血的嚴重程度，并且在所述聯(lián)合治療全部時期繼續(xù)維持較低的利巴韋林-相關(guān)的溶血性貧血水平。
權(quán)利要求
1.抗氧化劑對于制備用于改善利巴韋林治療易感病毒性感染所伴隨的利巴韋林-相關(guān)溶血的藥物的用途。
2.抗氧化劑對于制備用于改善α-干擾素和利巴韋林聯(lián)合治療慢性HCV感染所伴隨的利巴韋林-相關(guān)溶血的藥物的用途。
3.權(quán)利要求2的用途，其中所述α-干擾素是α-2a干擾素、α-2b干擾素、聚乙二醇化α-2a干擾素、聚乙二醇化α-2b干擾素、共有序列干擾素或純化的α-干擾素產(chǎn)品。
4.前述權(quán)利要求任一項的用途，其中所述抗氧化劑是維生素A、維生素E、維生素C、輔酶-Q10、BHA、BHT、N-乙酰半胱氨酸、硒、panavir、水飛薊、番茄紅素或它們的混合物。
5.前述權(quán)利要求任一項的用途，其中所述抗氧化劑是水溶性維生素E衍生物。
6.前述權(quán)利要求任一項的用途，其中所述抗氧化劑是α-生育酚酯，優(yōu)選a，d-α-生育酚酯。
7.前述權(quán)利要求任一項的用途，其中所述抗氧化劑是α-生育酚聚乙二醇酯，優(yōu)選α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯。
8.前述權(quán)利要求任一項的用途，其中所述治療包含足以降低可測得的病毒RNA的治療學上有效量的利巴韋林。
9.前述權(quán)利要求任一項的用途，其中所述治療包含足以降低可測得的HCV-RNA的包含α-干擾素和利巴韋林的治療有效量的聯(lián)合治療。
10.前述權(quán)利要求任一項的用途，其中所述治療包括包含3MIUTIW的α-2b干擾素和約600mg-約1600mg/日口服的利巴韋林的聯(lián)合治療，所述聯(lián)合治療在第一個療程至少給藥約24周，優(yōu)選至少約48周。
11.前述權(quán)利要求任一項的用途，其中所述治療包括包含約0.5-約1.5μg/kg/日QW的聚乙二醇化α-2b干擾素和大約600mg-約1600mg/日的利巴韋林的聯(lián)合治療，所述聯(lián)合治療在第一個療程至少給藥約24周，優(yōu)選至少約48周。
12.權(quán)利要求9、10或11的用途，其中所述治療還包含在第一療程結(jié)束后的至少約24周的第二療程中與所述抗氧化劑聯(lián)合給予約600mg-約1600mg/日的利巴韋林。
13.前述權(quán)利要求任一項的用途，其中所述治療還包括誘導劑量的α-2b干擾素和利巴韋林或誘導治療劑量的聚乙二醇化α-2a或2b干擾素和利巴韋林，二者任選其一在所述第一療程之前給予。
14.前述權(quán)利要求任一項的用途，其中所述治療包括(a)在第一個24周的療程中，給予所述患者足以改善利巴韋林-相關(guān)溶血的治療學上有效量的抗氧化劑，同時按照以下方案給予約800-1200mg/日的利巴韋林和治療學上有效量的α-2b-干擾素聯(lián)合治療每日約10MIU的α-2b-干擾素持續(xù)2周，然后每日5MIU的α-干擾素持續(xù)6周，隨后以每日3 MIU的α-干擾素持續(xù)16周，接著(c)在24周的第二療程中，每日給予約800-約1200mg的利巴韋林和3 MIU TIW的α-干擾素，并聯(lián)合給予足以改善利巴韋林-相關(guān)溶血的治療學上有效量的抗氧化劑。
全文摘要
公開了通過給予所述患者治療學上有效量的α－干擾素和利巴韋林聯(lián)合治療,其治療時間足以降低HCV－RNA,同時聯(lián)合給予治療學上有效量的抗氧化劑,其治療時間足以改善利巴韋林－相關(guān)的溶血,治療易感病毒感染尤其是慢性丙型肝炎感染患者的方法。
文檔編號A61P39/06GK1355708SQ00808831
公開日2002年6月26日 申請日期2000年4月18日 優(yōu)先權(quán)日1999年4月19日
發(fā)明者C·A·布拉斯, P·W·格呂, E·皮肯 申請人:先靈公司