專利名稱：咪唑[1,5－a]吡啶并[3,2－e]吡嗪酮作為藥物的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及具有式1結(jié)構(gòu)的咪唑[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮作為活性組分用于治療勃起機能障礙(陽痿)的應用、其制備方法及其包含這些化合物的藥物制劑。 本發(fā)明進一步涉及具有式1結(jié)構(gòu)的咪唑[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮作為活性組分用于治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關的血管疾病的應用及其包含這些化合物的藥物制劑。
大約10％的男性患有勃起機能障礙。在40-70歲年齡的男性尤其受此影響，受影響的人數(shù)大約為52％。在全世界，有幾百萬男性患有該疾病(僅在德國就有大約7.5百萬)，大多數(shù)病例有器質(zhì)性原因，極少數(shù)人是心理上的原因。勃起機能障礙是老年人，特別是患有其它慢性疾病如高血壓、動脈粥樣硬化和糖尿病的老年人普遍存在的問題。
盡管各種活性成分都能夠引起勃起，但它們僅僅在直接注入陰莖(陰莖海綿體內(nèi)，i.c.)或滴入尿道(尿道內(nèi))發(fā)揮作用。這種藥物治療形式已經(jīng)應用10多年了并且包括i.c.注射血管活性物質(zhì)如罌粟堿、酚芐明、酚妥拉明、百里胺和前列腺素E1(PGE1)。然而，i.c.給予這些物質(zhì)通常伴發(fā)嚴重的副作用如陰莖異常勃起、疼痛或陰莖纖維化。PGE1可通過尿道內(nèi)給予，硝酸甘油和長壓定可透皮給予(在陰莖上)。然而，這可在男性及其伴侶之間引起副作用。
另一種藥物治療是通過植入假體進行外科介入治療。這種治療形式很少有病人接受，因為已經(jīng)預期到以后的并發(fā)癥(感染、血液流動障礙)。
勃起機能障礙治療的突破是由輝瑞在美國和歐洲投入的sildenafil(Viagra)開始。Sildenafil是一種口服有效的磷酸二酯酶5(PDE5)抑制劑，它不直接引起勃起，但增強陰莖在性刺激下釋放的一氧化氮(NO)的作用。如同其第二信使cGMP一樣，在海綿體(勃起組織)內(nèi)，NO的作用是血管擴張，結(jié)果可使更多的血液流入，引起勃起。
磷酸二酯酶(PDE)是一族異構(gòu)酶，迄今為止，可能已經(jīng)分派出10種不同的異構(gòu)酶。PDE酶通過水解斷裂產(chǎn)生在大量細胞中作為第二信使的3’，5’-一磷酸環(huán)鳥苷(cGMP)和3’，5’-一磷酸環(huán)腺苷(cAMP)。磷酸二酯酶5(PDE5)是cGMP-特異性的并且在人海綿體組織中占優(yōu)勢。抑制人海綿體組織中的PDE5，導致由NO誘導的的細胞內(nèi)cGMP水平增加。這引起海綿體平滑肌松弛并因此引起勃起。
PDE5抑制劑因此適用于作為勃起機能障礙適應征的治療劑。與此有關，尤其需要新的、可用作活性組分口服給予的PDE5抑制劑。
咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮作為活性組分治療勃起機能障礙還是完全未知的。
心血管疾病是全世界最常見的死亡原因之一。在WHO成員國，1998年所有死亡者中有30.9％歸因于心血管疾病并且其中13.7％獨自地歸因于冠心病(世界健康報告1999)。然而，心血管疾病不僅僅影響老年人；相反地，從30歲開始，該病的發(fā)生率有所增加。它們不僅削弱病人的生活質(zhì)量而且由于直接和間接的費用問題，其治療具有巨大的經(jīng)濟意義。除遺傳因素外，心血管疾病的發(fā)病機理是多方面的，特別是不適當?shù)娘嬍澈头逝帧E用酒精和尼古丁以及缺乏體育鍛煉。
冠心病是一種常見的病理狀態(tài)，它包括心絞痛和心肌梗塞。心絞痛是由冠狀動脈粥樣硬化引起的多因素病理狀態(tài)。限制血流的冠狀動脈狹窄導致心肌灌注不足，表現(xiàn)形式有穩(wěn)定型或不穩(wěn)定型心絞痛、無癥狀心肌局部缺血、局部缺血性心力衰竭、心病性心律失常或急性心肌梗塞。心肌梗塞是由血栓(血凝塊)阻斷冠狀動脈引起的。所述血栓通常滯留在冠狀血管的狹窄處。位于該狹窄處后的心肌區(qū)不再得到血液供給。根據(jù)梗塞的位置，受影響的區(qū)域可大可小?；局委煱ㄏ阎奈ｋU因素和通過使用乙酰水楊酸或噻氯匹定，采取醫(yī)學方法抑制血小板聚集。用血管擴張劑如硝酸酯、β-受體阻滯劑或鈣通道阻滯劑治療心絞痛發(fā)作，盡管這些可能具有不需要的作用如低血壓、血液重分配(竊流現(xiàn)象)或心臟抑制的副作用。能夠明確地找出冠狀動脈狹窄部位的病人可進行搭橋手術(指標冠心病/心絞痛。Guideline019/001 of 22 June 1998 of the Deutsche Gesellschaft furKardiologie-Herz-und Kreislaufforschung in derArbeitsgemeinschaft der Wissenschaftlichen MedizinischenFachgesellschaften)。
另一重要的疾病是心力衰竭。各種因素導致心臟的泵出量不再足以確保身體中血液和氧的供給。心臟衰竭的三種形式是右心衰、左心衰和全心心衰。在右心衰中，右心室不再能夠?qū)⑺枰康难罕萌敕窝h(huán)。然而，因為血液繼續(xù)從體循環(huán)到達右心，因為左心室繼續(xù)不間斷地工作，血液尾隨回到腹部、肝并甚至回到腿部。左心衰是當左室不再提供必需的輸出量時所使用的術語。在該情況下，血液充塞在肺中。
在全心心衰的情況下，通常在右心衰或左心衰發(fā)生前，兩個心室都受到影響。
心臟機能不全的治療總是首先集中在基本疾病，例如心病性心律失常(和其它心臟病)或高血壓的治療上。另外，通常使用增強心臟功能或減輕心臟負擔(根據(jù)心臟機能不全的原因)的藥物和去水藥物(利尿劑、體積減少)進行治療。通常認定強心甙(例如地高辛、g-毒毛旋花苷)“節(jié)省”心臟的活動，并且這些藥物可長期服用。磷酸二酯酶3(PDE3)抑制劑增加心肌中一磷酸環(huán)腺苷(cAMP)的濃度，因此通過各種cAMP依賴性蛋白激酶增加收縮力。在各種臨床研究中已經(jīng)顯示，PDE3抑制劑(氨力農(nóng)、米力農(nóng))清楚地是收縮力增強劑，但連續(xù)使用有降低生命預期價值的趨勢。因此，該物質(zhì)僅可用于急性期(持續(xù)時間為使用2-3周)治療。也可以使用β-腎上腺受體激動劑如多巴胺和多巴丁胺，它們具有直接的增強心肌收縮力作用，但僅適用于急性心衰的治療。
通過使用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACE抑制劑，例如卡托普利、依那普利)或血管緊張素受體拮抗劑(例如losartan)、選擇性α1-腎上腺受體阻滯劑(例如哌唑嗪)或有機硝酸酯降低后負荷。
僅僅在絕對必要的情況下進行心臟移植。這是當所有其它方法都已經(jīng)失敗時的最后選項。盡管移植，包括其它器官移植，目前已經(jīng)成為一條治療途徑，但心臟移植并非沒有問題。
當肺動脈壓上升至25mmHg以上時出現(xiàn)肺動脈高血壓。這導致發(fā)生肺心病(右心室擴大)。原發(fā)性高血壓的原因是不清楚的。遺傳因素或與藥物相關的原因是可能的。原發(fā)性肺動脈高血壓尤其傾向于30來歲的婦女。繼發(fā)性肺動脈高血壓是由毛細管循環(huán)受損引起的并且可能具有各種原因。由于在阻塞性肺氣腫、氣喘危象、肺纖維化或栓塞時肺動脈狹窄，因此發(fā)生前毛細血管充血。其治療包括降低肺動脈壓并因此減輕右心室負擔。迄今為止可獲得的物質(zhì)僅僅是那些具有非選擇性血管擴張作用的物質(zhì)(ACE抑制劑、Ca通道阻滯劑、二氫吡啶類)或者僅僅在試驗中使用(吸入一氧化氮(NO)，依前列醇(PGI2)或prostacycline、腺苷和PGE1，Medical and Surgical Treatment ofAdvanced Pulmonary Hypertension by Kenneth W. Presberg，Division of pulmonary and Critical Care Medicine，MedicalCollege of Wisconsin，Thoracic Medical and SurgicalManagement，Volume III，Number 2 1996).
磷酸二酯酶(PDE)是一族異構(gòu)酶，迄今為止，可能已經(jīng)分派出10種不同的異構(gòu)酶。PDE酶通過水解斷裂產(chǎn)生在大量細胞中作為第二信使的3’，5’-一磷酸環(huán)鳥苷(cGMP)和3’，5’-一磷酸環(huán)腺苷(cAMP)。磷酸二酯酶3(PDE3)是cAMP-特異性的，而磷酸二酯酶5(PDE5)是cGMP-特異性的。
正如已經(jīng)描述過的，在已知的磷酸二酯酶抑制劑中，迄今為止只有幾個選擇性PDE3抑制劑發(fā)現(xiàn)具有有限的治療心衰作用。
本發(fā)明涉及具有式1結(jié)構(gòu)的咪唑[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮作為活性組分在治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關的血管疾病中的應用，它同時并且較強地抑制PDE3和PDE5。抑制心肌中的PDE3導致以一種已知的的方式增加心臟的收縮力(正性肌力作用)。抑制PDE5導致血管特別是動脈血管擴張并因此，例如減少冠狀血管或肺動脈的血管阻力。
先前還沒有公開過并且首次由本發(fā)明式1化合物在技術上實現(xiàn)了同時利用兩種作用原理，即通過一種和相同的活性組分引起動脈血管擴張，從而獲得對心臟的正性肌力作用和降血壓作用。
作為PDE3和PDE5的雙重抑制劑，咪唑[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮還是完全未知的。
歐洲專利0 400 583涉及具有下列通式的咪唑喹喔啉 其中A代表7或8位的氮原子或CH，B和D代表氮原子或CH或者取代的碳原子，并且其它基團R、R1、R2代表氫或各種有機的取代基。這些化合物具有血管擴張作用。
除各種咪唑并[1，2-a]喹喔啉酮之外，D.D.Davey等人(J.Med.Chem.34(1991)，2671-2677)也已經(jīng)描述了具有下式結(jié)構(gòu)的2-咪唑[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮 其中一方面R1代表氫并且R2代表C2H5，另一方面R1代表2-甲基咪唑并且R2代表CH3。兩個化合物的特性都是作為具有正性肌力作用的PDE3抑制劑。
專利申請W0 93/20077涉及具有下式結(jié)構(gòu)的咪唑并喹喔啉酮 其中A代表環(huán)中具有2個或3個氮原子的5-元雜環(huán)，R1可以是NO2或CF3并且X代表具有不超過4個鏈成員的各種鏈，其中一些包含氮。
這些化合物作為具有治療精神病作用和抗局部缺血作用的谷氨酸鹽受體拮抗劑描述。
DE專利195 10 965中要求了具有下式結(jié)構(gòu)的吡啶并[3，2-e]-吡嗪酮。 這些也包括咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮。然而，其中僅僅當A代表N-R3(R3＝H，C1-6烷基)時，R1是氫。描述了所要求物質(zhì)的抗哮喘性和抗過敏性。
本發(fā)明描述本發(fā)明涉及具有式1結(jié)構(gòu)的咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]-吡嗪酮 其中A代表O或NH，R1、R2和R3可以相同或不同并且代表氫，和-C1-8烷基，其為直鏈的或支鏈的、未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NHC1-6-烷基，-N(C1-6-烷基)2，-NHC6-14-芳基，-N(C6-14-芳基)2，-N(C1-6-烷基)(C6-14-芳基)，-NO2，-CN，-COOH，-COOC1-5-烷基，-(C＝O)C1-5-烷基，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-O-C6-14-芳基，-S-C1-6-烷基，-S-C6-14-芳基，-OSO2C1-6-烷基，-OSO2C6-14-芳基，具有3-14個環(huán)上成員的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的碳環(huán)，具有5-15個環(huán)成員和1-6個雜原子、優(yōu)選N、O和S的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的雜環(huán)取代一次或多次的，-C2-8鏈烯基，其為單-或多不飽和的、直鏈的或支鏈的、未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NHC1-6-烷基，-N(C1-6-烷基)2，-NHC6-14-芳基，-N(C6-14-芳基)2，-N(C1-6-烷基)(C6-14-芳基)，-NO2，-CN，-COOH，-COOC1-5-烷基，-(C＝O)C1-5-烷基，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-C6-14-芳基，-S-C1-6-烷基，-S-C6-14-芳基，-OSO2C1-6-烷基，-OSO2C6-14-芳基，具有3-14個環(huán)成員的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的碳環(huán)，具有5-15個環(huán)成員和1-6個雜原子、優(yōu)選N、O和S的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的雜環(huán)取代一次或多次的，-C2-8炔基，其為單-或多不飽和的、直鏈的或支鏈的、未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NHC1-6-烷基，-N(C1-6-烷基)2，-NHC6-14-芳基，-N(C6-14-芳基)2，-N(C1-6-烷基)(C6-14-芳基)，-NO2，-CN，-COOH，-COOC1-5-烷基，-(C＝O)C1-5-烷基，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-O-C6-14-芳基，-S-C1-6-烷基，-S-C6-14-芳基，-OSO2C1-6-烷基，-OSO2C6-14-芳基，具有3-14個環(huán)成員的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的碳環(huán)，具有5-15個環(huán)成員和1-6個雜原子、優(yōu)選N、O和S的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的雜環(huán)取代一次或多次的，-具有3-14個環(huán)成員的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的碳環(huán)，其是未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NHC1-6-烷基，-N(C1-6-烷基)2，-NHC6-14-芳基，-N(C6-14-芳基)2，-N(C1-6-烷基)(C6-14-芳基)，-NO2，-CN，-COOH，-COOC1-5-烷基，-(C＝O)C1-5-烷基，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-O-C6-14-芳基，-S-C1-6-烷基，-S-C6-14-芳基，-OSO2C1-6-烷基，-OSO2C6-14-芳基取代一次或多次的，-具有5-15個環(huán)成員和1-66個雜原子、優(yōu)選N、O和S的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的雜環(huán)，其是未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NHC1-6-烷基，-N(C1-6-烷基)2，-NHC6-14-芳基，-N(C6-14-芳基)2，-N(C1-6-烷基)(C6-14-芳基)，-NO2，-CN，-COOH，-COOC1-5-烷基，-(C＝O)C1-5-烷基，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-O-C6-14-芳基，-S-C1-6-烷基，-S-C6-14-芳基，-OSO2C1-6-烷基，-OSO2C6-14-芳基取代一次或多次的。
本發(fā)明的基本組成部分是，式1化合物在9位具有氮原子并且含有A＝O或NH片段A，它是作為本發(fā)明治療勃起機能障礙治療劑基本結(jié)構(gòu)的前提。
本發(fā)明A＝O的式1化合物是新的。本發(fā)明A＝NH的式1化合物可從專利DE 195 10 965中獲知，所述專利文獻在現(xiàn)有技術中已經(jīng)作為參考引用過。
本發(fā)明也涉及生理上可耐受的式1化合物的鹽，它可通過用無機或有機酸中和堿或通過用無機或有機堿中和酸或通過將叔胺季銨化得到季銨鹽獲得。
在式1化合物具有一個不對稱碳原子的情況下，本發(fā)明涉及D型、L型和D，L混合物，在具有一個以上不對稱碳原子情況下，本發(fā)明涉及非對映異構(gòu)體形式。
本發(fā)明進一步涉及制備本發(fā)明式1化合物的方法。
按照本發(fā)明，具有上述A、R1、R2和R3含義的通式1化合物可通過下述方法制備將具有相同A、R1、R2和R3含義的式2的3-氨基吡啶與氰酸鹽在有機溶劑中在酸存在下反應， 隨后，將用該方法制備的具有相同A、R1、R2和R3含義的式3的脲在有機溶劑中加熱，以環(huán)化成本發(fā)明的式1化合物， 制備式3脲的變化方法包括使用堿金屬氰酸鹽，它是本發(fā)明制備方法特別優(yōu)選的。
制備式3脲的變化方法包括在質(zhì)子溶劑、特別優(yōu)選在乙酸中反應，它是本發(fā)明制備方法優(yōu)選的。
制備式3脲的變化方法包括在無機酸、特別優(yōu)選是在與所使用溶劑可混合的濃無機酸，例如在濃鹽酸存在下反應，它是本發(fā)明制備方法優(yōu)選的。
環(huán)化式3脲的變化方法包括使用沸點＞80℃的溶劑、特別優(yōu)選是沸點＞100℃的溶劑，它是形成本發(fā)明式1化合物的本發(fā)明制備方法優(yōu)選的。
環(huán)化式3脲的變化方法包括在＞80℃的反應溫度下，特別優(yōu)選在＞100℃的反應溫度下進行反應，它是形成本發(fā)明式1化合物的本發(fā)明制備方法優(yōu)選的。
本發(fā)明化合物的特別有利之處是它們可作為新的勃起機能障礙適應征治療劑通過口服給予。
本發(fā)明的進一步組成部分是，實施例中所描述的本發(fā)明化合物的溶液特別優(yōu)選地用于口服給予。
在性交前口服給予5-200mg化合物代表優(yōu)選的治療方案。所述化合物也可以作為溶液劑通過非腸道、口服、頰(buccally)或舌下使用。
本發(fā)明的組成部分還包括，除了常規(guī)生理上可耐受的載體和/或稀釋劑或助劑外還包含一種或多種本發(fā)明式1化合物的藥物產(chǎn)品及其這些藥物產(chǎn)品的制備方法。
本發(fā)明式1化合物和包含本發(fā)明式1化合物的藥物可單獨和彼此結(jié)合使用。
本發(fā)明的進一步組成是本發(fā)明化合物可在獸醫(yī)中用作治療劑來預防和治療雄性動物勃起機能障礙。選擇化合物的劑量、給藥方案和藥物制劑應考慮物種差異和獸醫(yī)醫(yī)囑的要求。
本發(fā)明進一步涉及具有式1結(jié)構(gòu)的咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮及其作為治療劑在治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關的血管疾病中的應用。 其中A代表O或NH，R1和R2可相同或不同并且可代表氫，和-C1-5烷基，其為直鏈的或支鏈的、未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NO2，-CN，-COOH，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-S-C1-6-烷基取代一次或多次的，并且R3代表氫，和-C1-5烷基，其為直鏈的或支鏈的、未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NO2，-CN，-COOH，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-S-C1-6-烷基或苯基取代一次或多次的。
本發(fā)明的基本組成部分是，式1化合物在9位具有氮原子并且包含A＝O或NH的片段A，它是作為本發(fā)明治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關血管疾病治療劑基本結(jié)構(gòu)的前提。
關于所述本發(fā)明式1化合物作為治療劑在治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關血管疾病的應用，本發(fā)明也涉及這些化合物生理上可耐受的鹽，它們可通過用無機或有機酸中和堿或通過用無機或有機堿中和酸或通過將叔胺季銨化得到季銨鹽獲得。
關于所述本發(fā)明式1化合物作為治療劑在治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關血管疾病的應用，在式1化合物具有一個不對稱碳原子的情況下，本發(fā)明涉及D型、L型和D，L混合物，而在具有一個以上不對稱碳原子情況下，本發(fā)明涉及非對映異構(gòu)體形式。
關于所述本發(fā)明式1化合物作為治療劑在治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關血管疾病的應用，本發(fā)明化合物可通過系統(tǒng)給藥方式，例如通過靜脈內(nèi)、肌內(nèi)和皮下，和口服給藥方式給予?？诜o予本發(fā)明化合物是特別優(yōu)選的。
本發(fā)明的進一步組成部分是，在作為治療劑治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關血管疾病的應用中，實施例中所描述的本發(fā)明化合物的溶液特別優(yōu)選地用于口服給予。
所述化合物也可以以溶液形式通過非腸道、頰或舌下使用。
本發(fā)明的組成部分還包括，除了常規(guī)生理上可耐受的載體和/或稀釋劑或助劑外還包含一種或多種本發(fā)明式1化合物的藥物產(chǎn)品及其這些藥物產(chǎn)品的制備方法。
所述本發(fā)明式1化合物和包含所述本發(fā)明式1化合物的藥物可單獨和彼此結(jié)合使用。
所述本發(fā)明式1化合物在體外同時并且比較強抑制PDE3和PDE5。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，所述本發(fā)明式1化合物在體內(nèi)引起心臟收縮力增強(正性肌力作用)并同時引起血管、特別是動脈血管擴張。
本發(fā)明的組成部分是，所述本發(fā)明化合物的雙重作用原理使得抑制發(fā)生血壓嚴重改變和與氧不足有關心律失常的危險成為可能。
本發(fā)明的一個方面是，本發(fā)明式1化合物尤其可用于治療急性期心衰、冠心病和肺心病。
將該脲在100ml DMF中煮沸回流4小時。通過隨后用冰冷卻該反應溶液，產(chǎn)物結(jié)晶出來。分離，用DMF洗滌并在80℃下干燥。
收率14g(理論值的51％)熔點294-295℃大量其它式1化合物可通過使用實施例中所指出方法的適當變化制備，其中，下列化合物通過舉例方式列出


用于化合物1口服給藥的溶液的制備將化合物1例如以10-50mg/ml的比例溶解在1N鹽酸中。進一步用蒸餾水稀釋，以1∶9的比例加入10％(體積比)聚乙二醇660-12-羥基硬脂酸酯(SolutolHS15)，得到澄清的溶液，它包含1-5mg/ml的化合物1并且用作可飲用的或可注射的溶液劑。本發(fā)明化合物在治療勃起機能障礙中的生物學作用本發(fā)明化合物是磷酸二酯酶5的強抑制劑。例如，其治療能力在體外通過增強NO對鼠成纖維細胞中細胞內(nèi)cGMP水平的作用和松弛人海綿體得到證明。磷酸二酯酶5抑制作用PDE5的活性在從人血小板獲得的酶制劑中得到證明。將人血用枸櫞酸抗凝。在室溫下，在700×g離心20分鐘使得上清液中富含血小板的的血漿與紅細胞和白細胞分離。將血小板通過超聲溶解并用于PDE5測定中。磷酸二酯酶的活性可通過進行一些修改的Thompson等人所描述的方法(Thompson，W.J.；Appleman，M.M.，環(huán)核苷酸磷酸二酯酶的測定和多分子形式酶的拆分.Adv.Cycl.Nucl.Res.1979，10，69-92)測定。
反應混合物包含50mM Tris-HCl(pH 7.4)、5mM MgCl2、各種濃度的抑制劑、酶制劑和測定各異構(gòu)酶PDE5所必需的其它組分(見下)。通過加入底物，即0.5μm[3H[-cGMP(大約6000CPM/測定)開始反應。最終體積為100ml。
將試驗物質(zhì)在DMSO中配制成儲備液。DMSO在反應混合物中的濃度為1％v/v。該DMSO濃度對PDE5活性沒有影響。通過加入底物開始反應后，將試樣在37℃下培養(yǎng)30分鐘。通過將試管在110℃下加熱2分鐘終止反應。將試樣在冰中再保留10分鐘。加入30μl5’-核苷酸酶(1mg/ml，從衲脊響尾蛇毒液的懸浮液中獲得)，然后在37℃下培養(yǎng)10分鐘。將試樣儲存在冰上，各加入400μl Dowex-水-乙醇(1+1+1)混合物并且在充分攪拌后，將它們在冰上再培養(yǎng)15分鐘。將反應容器在3000×g下離心20分鐘。將200μl等份試樣的上清液直接轉(zhuǎn)移到閃爍器中。加入3ml閃爍劑后，將試樣在β-計數(shù)器上測定。當測定PDE5時，在100μM IBMX存在下測定各種情況下的非特異性酶活性并從測定值減去。
對于本發(fā)明化合物來說，其測定的抑制磷酸二酯酶5的IC50值在10-9-10-5M范圍。
例如，對于所選擇實施例來說，其測定的IC50值如下

誘導成纖維細胞(鼠)產(chǎn)生NO鼠胎兒的肺成纖維細胞(RFL-6)代表適宜的、研究NO對細胞內(nèi)cGMP水平的作用受哪些因素影響的介質(zhì)(Ishii等人，1991)。該基本原理可應用于海綿體中的血管平滑肌。
本發(fā)明化合物以濃度依賴方式提高由NO供體S-亞硝基-N-乙?；?D，L-青霉胺誘導的細胞內(nèi)cGMP水平增加。
因此，例如，化合物1在0.010μmol/1濃度下引起cGMP水平的顯著升高。因此，化合物1的活性是使用非特異性PDE抑制劑3-異丁基-1-甲基黃嘌呤(IBMX)獲得的活性的10,000倍。人海綿體的體外松馳作用將在器官浴中的條狀人海綿體預先用去甲腎上腺素收縮。測定試驗化合物的松馳作用，以濃度的函數(shù)表示。
本發(fā)明化合物具有松馳作用，它依賴于濃度、依賴于預先用去甲腎上腺素收縮的條狀海綿體。因此，例如，對于化合物1來說，其測定的EC50為0.35μmol/l。本發(fā)明化合物在治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關的血管疾病中的生物學作用本發(fā)明式1化合物是磷酸二酯酶3和磷酸二酯酶5的雙重抑制劑。例如，其治療能在體外通過增強NO對鼠成纖維細胞中細胞內(nèi)cGMP水平的作用得到證明。磷酸二酯酶3抑制作用PDE 3的活性在從人血小板獲得的酶制劑中得到證明。將人血用枸櫞酸抗凝。在室溫下，在700×g離心20分鐘使得上清液中富含血小板的的血漿與紅細胞和白細胞分離。將血小板通過超聲溶解并用于PDE3測定中。磷酸二酯酶的活性可通過進行一些修改的Thompson等人所描述的方法(Thompson，W.J.；Appleman，M.M.，環(huán)核苷酸磷酸二酯酶的測定和多分子形式酶的拆分.Adv.Cycl.Nucl.Res.1979，10，69-92)測定。
反應混合物包含50mM Tris-HCl(pH 7.4)、5mM MgCl2、各種濃度的抑制劑、酶制劑和測定各異構(gòu)酶PDE3所必需的其它組分(見下)。通過加入底物，即0.5μm[3H]-cAMP(大約6000CPM/測定)開始反應。最終體積為100ml。
將試驗物質(zhì)在DMSO中配制成儲備液。DMSO在反應混合物中的濃度為1％v/v。該DMSO濃度對PDE3活性沒有影響。通過加入底物開始反應后，將試樣在37℃下培養(yǎng)30分鐘。通過將試管在110℃下加熱2分鐘終止反應。將試樣在冰中再保留10分鐘。加入30μl 5’-核苷酸酶(1mg/ml，從衲脊響尾蛇毒液的懸浮液中獲得)，然后在37℃下培養(yǎng)10分鐘。將試樣儲存在冰上，各加入400μl Dowex-水-乙醇(1+1+1)混合物并且在充分攪拌后，將它們在冰上再培養(yǎng)15分鐘。將反應容器在3000×g下離心20分鐘。將200μl等份試樣的上清液直接轉(zhuǎn)移到閃爍器中。加入3ml閃爍劑后，將試樣在β-計數(shù)器上測定。當測定PDE3時，在100μM IBMX存在下測定各種情況下的非特異性酶活性并從測定值減去。
對于本發(fā)明化合物來說，其測定的抑制磷酸二酯酶3的IC50值在10-9-10-5M范圍內(nèi)。
例如，對于所選擇實施例來說，其測定的IC50值如下

磷酸二酯酶5抑制作用PDE5的活性在從人血小板獲得的酶制劑中得到證明。將人血用枸櫞酸抗凝。在室溫下，在700×g離心20分鐘使得上清液中富含血小板的的血漿與紅細胞和白細胞分離。將血小板通過超聲溶解并用于PDE5測定中。磷酸二酯酶的活性可通過進行一些修改的Thompson等人所描述的方法(Thompson，W.J.；Appleman，M.M.，環(huán)核苷酸磷酸二酯酶的測定和多分子形式酶的拆分.Adv.Cycl.Nucl.Res.1979，10，69-92)測定。
反應混合物包含50mM Tris-HCl(pH 7.4)、5mM MgCl2、各種濃度的抑制劑、酶制劑和測定各異構(gòu)酶PDE5所必需的其它組分(見下)。通過加入底物，即0.5μM[3H]-cGMP(大約6000CPM/測定)開始反應。最終體積為100ml。
將試驗物質(zhì)在DMSO中配制成儲備液。DMSO在反應混合物中的濃度為1％v/v。該DMSO濃度對PDE5活性沒有影響。通過加入底物開始反應后，將試樣在37℃下培養(yǎng)30分鐘。通過將試管在110℃下加熱2分鐘終止反應。將試樣在冰中再保留10分鐘。加入30μl 5’-核苷酸酶(1mg/ml，從衲脊響尾蛇毒液的懸浮液中獲得)，然后在37℃下培養(yǎng)10分鐘。將試樣儲存在冰上，各加入400μl Dowex-水-乙醇(1+1+1)混合物并且在充分攪拌后，將它們在冰上再培養(yǎng)15分鐘。將反應容器在3000×g下離心20分鐘。將200μl等份試樣的上清液直接轉(zhuǎn)移到閃爍器中。加入3ml閃爍劑后，將試樣在β-計數(shù)器上測定。當測定PDE5時，在100μM IBMX存在下測定各種情況下的非特異性酶活性并從測定值減去。
對于本發(fā)明化合物來說，其測定的抑制磷酸二酯酶5的IC50值在10-9-10-5M范圍內(nèi)。例如，對于所選擇實施例來說，其測定的IC50值如下

誘導成纖維細胞(鼠)產(chǎn)生NO鼠胎兒的肺成纖維細胞(RFL-6)代表適宜的、研究NO對細胞內(nèi)cGMP水平的作用受哪些因素影響的介質(zhì)(Ishii等人，1991)。該基本原理可應用于海綿體中的血管平滑肌。
發(fā)明化合物以濃度-依賴方式提高由NO供體S-亞硝基-N-乙?；?D，L-青霉胺誘導的細胞內(nèi)cGMP水平增加。
因此，例如，化合物1在0.010μmol/l濃度下引起cGMP水平的顯著升高。因此，化合物1的活性是使用非特異性PDE抑制劑3-異丁基-1-甲基黃嘌呤(IBMX)獲得的活性的10,000倍。麻醉狀態(tài)下長耳短腿小獵犬的循環(huán)分析4只體重為9.0-15.0kg的長耳短腿小獵犬用于該研究中。將動物靜脈內(nèi)給予80mg/kg cloralose和400mg/kg烏拉坦進行麻醉。給狗插管，但不通過人工方法換氣。
然后將臂動脈準備好用于記錄外周血壓。通過右頸動脈引入末端微尖的導管用于記錄左室收縮壓/舒張壓。通過熱稀釋法測定心輸出量。為此，通過股靜脈引入Swan-Ganz導管。固定導管，這樣可在其尖端測定肺動脈的血壓。注射3.0ml生理鹽水(溫度4.0℃)并通過主動脈干中的溫度的變化測定心輸出量。
通過四肢記錄表面ECG。該ECG參數(shù)自動進行評估。
計算機輔助系統(tǒng)獲得并計算所有的血壓。
例如，在這些研究中可能顯示，以劑量依賴方式胃內(nèi)給予0.25-3.0mg/kg的劑量范圍的本發(fā)明化合物1后，心臟的收縮力增加(左室血壓升高4倍)，心輸出量增加2倍。盡管心臟工作量大大增加，但動脈血壓僅在初期略有上升，并且壓力幅度增加。高劑量略降低收縮壓。
盡管化合物1引起心輸出量巨大的和長期的增加，但未觀察到與氧不足有關的心律失?；蚱谕馐湛s，這證明化合物1具有強冠狀動脈擴張作用。
權(quán)利要求
1.具有式1結(jié)構(gòu)的咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]-吡嗪酮 其中A代表O，R1、R2和R3可以相同或不同并且可代表氫，和-C1-8烷基，其為直鏈的或支鏈的、未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NHC1-6-烷基，-N(C1-6-烷基)2，-NHC6-14-芳基，-N(C6-14-芳基)2，-N(C1-6-烷基)(C6-14-芳基)，-NO2，-CN，-COOH，-COOC1-5-烷基，-(C＝O)C1-5-烷基，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-O-C6-14-芳基，-S-C1-6-烷基，-S-C6-14-芳基，-OSO2C1-6-烷基，-OSO2C6-14-芳基，具有3-14個環(huán)成員的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的碳環(huán)，具有5-15個環(huán)成員和1-6個雜原子、優(yōu)選N、O和S的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的雜環(huán)取代一次或多次的，-C2-8鏈烯基，其為單-或多不飽和的、直鏈的或支鏈的、未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NHC1-6-烷基，-N(C1-6-烷基)2，-NHC6-14-芳基，-N(C6-14-芳基)2，-N(C1-6-烷基)(C6-14-芳基)，-NO2，-CN，-COOH，-COOC1-5-烷基，-(C＝O)C1-5-烷基，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-O-C6-14-芳基，-S-C1-6-烷基，-S-C6-14-芳基，-OSO2C1-6-烷基，-OSO2C6-14-芳基，具有3-14個環(huán)成員的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的碳環(huán)，具有5-15個環(huán)成員和1-6個雜原子、優(yōu)選N、O和S的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的雜環(huán)取代一次或多次的，-C2-8炔基，其為單-或多不飽和的、直鏈的或支鏈的、未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NHC1-6-烷基，-N(C1-6-烷基)2，-NHC6-14-芳基，-N(C6-14-芳基)2，-N(C1-6-烷基)(C6-14-芳基)，-NO2，-CN，-COOH，-COOC1-5-烷基，-(C＝O)C1-5-烷基，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-O-C6-14-芳基，-S-C1-6-烷基，-S-C6-14-芳基，-OSO2C1-6-烷基，-OSO2C6-14-芳基，具有3-14個環(huán)成員的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的碳環(huán)，具有5-15個環(huán)成員和1-6個雜原子、優(yōu)選N、O和S的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的雜環(huán)取代一次或多次的，-具有3-14個環(huán)成員的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的碳環(huán)，其是未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NHC1-6-烷基，-N(C1-6-烷基)2，-NHC6-14-芳基，-N(C6-14-芳基)2，-N(C1-6-烷基)(C6-14-芳基)，-NO2，-CN，-COOH，-COOC1-5-烷基，-(C＝O)C1-5-烷基，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-O-C6-14-芳基，-S-C1-6-烷基，-S-C6-14-芳基，-OSO2C1-6-烷基，-OSO2C6-14-芳基取代一次或多次的，-具有5-15個環(huán)成員和1-6個雜原子、優(yōu)選N、O和S的單-，二-或三環(huán)飽和的或者單-或多不飽和的雜環(huán)，其是未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NHC1-6-烷基，-N(C1-6-烷基)2，-NHC6-14-芳基，-N(C6-14-芳基)2，-N(C1-6-烷基)(C6-14-芳基)，-NO2，-CN，-COOH，-COOC1-5-烷基，-(C＝O)C1-5-烷基，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-O-C6-14-芳基，-S-C1-6-烷基，-S-C6-14-芳基，-OSO2C1-6-烷基，-OSO2C6-14-芳基取代一次或多次的。
2.權(quán)利要求1的式1化合物的生理上可耐受的鹽，其特征在于它可通過用無機或有機酸中和堿或通過用無機或有機堿中和酸或通過將叔胺季銨化得到季銨鹽獲得。
3.權(quán)利要求1和2的式1化合物，在具有一個不對稱性碳原子的情況下，以D型、L型和D，L混合物形式存在，在具有一個以上不對稱碳原子情況下，以非對映異構(gòu)體形式存在。
4.權(quán)利要求1-3的式1化合物，尤其是下列化合物中的一種8-甲氧基-3-甲基-1-丙基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；8-甲氧基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；8-甲氧基-3-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；8-甲氧基-1-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；8-甲氧基-1-丙基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；1-乙基-8-羥基-3-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；1-乙基-8-甲氧基-3-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；1-乙基-8-(3-羥丙基)-3-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；1-乙基-3-甲基-8-(2-氧代丙基)咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；1-乙基-3-甲基-8-(2-吡啶基甲基)咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；8-甲氧基-1-苯基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；8-甲氧基-3-苯基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮。
5.制備權(quán)利要求1-4的式1化合物和其中A代表NH，R1、R2、R3可以是相同的或不同的并且也具有權(quán)利要求1所描述的含義的其它式1化合物的方法，其特征在于，將具有相同A、R1、R2和R3含義的式2的3-氨基吡啶在有機溶劑中，在酸存在下與氰酸鹽反應， 隨后，將由此產(chǎn)生的具有相同A、R1、R2和R3含義的通式3的脲在有機溶劑中加熱， 因此環(huán)化生成本發(fā)明的式1化合物。
6.通過權(quán)利要求5的方法制備式1化合物，特別優(yōu)選使用堿金屬氰酸鹽來獲得式3的中間體。
7.通過權(quán)利要求5和6的方法制備式1化合物，特別優(yōu)選使用質(zhì)子溶劑來獲得式3的中間體。
8.通過權(quán)利要求5-7的方法制備式1化合物，特別優(yōu)選在無機酸存在下獲得式3的中間體。
9.通過權(quán)利要求8的方法制備式1化合物，特別優(yōu)選在與權(quán)利要求7所使用的質(zhì)子溶劑可混合的濃無機酸存在下獲得式3的中間體。
10.通過權(quán)利要求5-9的方法制備式1化合物，特別優(yōu)選使用沸點＞80℃的溶劑環(huán)化式3的脲。
11.通過權(quán)利要求10的方法制備式1化合物，尤其優(yōu)選使用沸點＞100℃的溶劑環(huán)化式3的脲。
12.通過權(quán)利要求5-11的方法制備式1化合物，特別優(yōu)選使用＞80℃的反應溫度環(huán)化式3的脲。
13.通過權(quán)利要求12的方法制備式1化合物，尤其特別優(yōu)選使用＞100℃的反應溫度環(huán)化式3的脲。
14.權(quán)利要求1-4的式1化合物和其中A代表NH，R1、R2、R3可以是相同的或不同的并且具有權(quán)利要求1所描述的含義的其它式1化合物作為治療劑用于制備治療勃起機能障礙(陽痿)的藥物的應用。
15.藥物產(chǎn)品，包含一種或多種權(quán)利要求1-4的化合物和其中A代表NH，R1、R2、R3可以是相同的或不同的并且也具有權(quán)利要求1所描述的含義的其它式1化合物以及常規(guī)生理上可耐受的載體和/或稀釋劑或助劑。
16.制備權(quán)利要求15的藥物產(chǎn)品的方法，其特征在于，將權(quán)利要求1-4的化合物和其中A代表NH，R1、R2、R3可以是相同的或不同的并且也具有權(quán)利要求1所描述的含義的其它式1化合物與常規(guī)可藥用載體和/或稀釋劑或其它助劑一起加工成藥物制劑或轉(zhuǎn)化為可在治療中使用的形式。
17.權(quán)利要求1-4的通式1化合物和其中A代表NH，R1、R2、R3可以是相同的或不同的并且也具有權(quán)利要求1所描述的含義的其它式1化合物和/或權(quán)利要求15和16的藥物制劑單獨或彼此結(jié)合或與載體和/或稀釋劑或其它助劑結(jié)合的應用。
18.權(quán)利要求1-4的化合物和其中A代表NH，R1、R2、R3可以是相同的或不同的并且也具有權(quán)利要求1所描述的含義的其它式1化合物作為治療劑用于制備權(quán)利要求14的治療勃起機能障礙(陽痿)、特別優(yōu)選通過口服、非腸道、頰或舌下給予的藥物產(chǎn)品的應用。
19.權(quán)利要求1-4的化合物和其中A代表NH，R1、R2、R3可以是相同的或不同的并且也具有權(quán)利要求1所描述的含義的其它式1化合物作為用于預防和治療雄性哺乳動物勃起機能障礙的獸醫(yī)用治療劑的應用。
20.具有式1結(jié)構(gòu)的咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]-吡嗪酮作為治療劑活性組分用于制備治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關疾病的藥物的應用， 其中A代表O或NH，R1和R2可以相同或不同并且可代表氫，和-C1-5烷基，其為直鏈的或支鏈的、未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NO2，-CN，-COOH，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-S-C1-6-烷基取代一次或多次的，并且R3代表氫，和-C1-5烷基，其為直鏈的或支鏈的、未取代的或由-OH，-SH，-NH2，-NO2，-CN，-COOH，-F，-Cl，-Br，-I，-O-C1-6-烷基，-S-C1-6-烷基或苯基取代一次或多次。
21.權(quán)利要求20的式1化合物的生理上可耐受的鹽作為治療活性組分用于制備治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關疾病的藥物的應用，所述鹽的特征在于通過用無機或有機酸中和堿或通過用無機或有機堿中和酸或通過將叔胺季銨化得到季銨鹽來獲得。
22.在權(quán)利要求20和21的式1化合物具有一個手性碳原子的情況下，以這些化合物的D型、L型和D、L混合物并且在權(quán)利要求20和21的式1化合物具有多個手性碳原子的情況下，以這些化合物的非對映異構(gòu)體形式及其混合物作為治療活性組分用于制備治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關疾病的藥物的應用。
23.權(quán)利要求20-22的式1化合物中，尤其使用下列化合物中的一種8-甲氧基-3-甲基-1-丙基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；8-甲氧基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；8-甲氧基-3-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；8-甲氧基-1-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；8-甲氧基-1-丙基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；1-乙基-8-羥基-3-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；1-乙基-8-甲氧基-3-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；8-芐基氨基-1-乙基-3-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮；1-乙基-8-(3-羥丙基)-3-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮。
24.權(quán)利要求20-23的式1化合物作為治療活性組分用于制備治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關疾病的藥物的應用，其特征在于，這些化合物具有雙重抑制作用，同時并且較強地抑制磷酸二酯酶3和磷酸二酯酶5，它通過一種和相同的活性組分引起動脈血管擴張，從而獲得對心臟的正性肌力作用和降血壓作用。
25.藥物，包含一種或多種權(quán)利要求20-23的化合物和常規(guī)生理上可耐受的載體和/或稀釋劑或助劑。
26.制備權(quán)利要求25的藥物的方法，其特征在于將一種或多種權(quán)利要求20-23的化合物與常規(guī)藥物載體和/或稀釋劑或其它助劑一起加工成藥物制劑或可在治療中使用的形式。
27.權(quán)利要求20-23的通式1化合物和/或權(quán)利要求25和26的藥物制劑單獨或彼此結(jié)合或與載體和/或稀釋劑或其它助劑結(jié)合的應用。
28.權(quán)利要求20-23的化合物作為治療活性組分用于制備治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關疾病的、特別優(yōu)選通過口服、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、非腸道、頰或舌下給予的藥物的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有式1結(jié)構(gòu)的咪唑[1,5－a]吡啶并[3,2－e]吡嗪酮作為磷酸二酯酶5抑制劑用于治療勃起機能障礙(陽痿)的應用。本發(fā)明還涉及具有式1結(jié)構(gòu)的咪唑[1,5－a]吡啶并[3,2－e]吡嗪酮作為磷酸二酯酶3和磷酸二酯酶5的雙重抑制劑用于治療心衰、肺動脈高血壓和與低灌注有關的血管疾病的應用。本發(fā)明還涉及所述化合物的制備方法。
文檔編號A61P9/08GK1344268SQ00805307
公開日2002年4月10日 申請日期2000年1月14日 優(yōu)先權(quán)日1999年1月20日
發(fā)明者N·赫夫根, S·斯?jié)蓚愐? M·德根哈德, U·埃格爾蘭德 申請人:德雷斯頓藥品工廠有限公司