專利名稱：通過吸入法送遞聯(lián)苯胺前列腺素的方法
背景技術：
已知聯(lián)苯胺前列腺素可用于治療許多疾病。美國專利No.5,153,222描述了優(yōu)選的聯(lián)苯胺前列腺素在治療肺動脈高壓癥(包括原發(fā)性和繼發(fā)性肺動脈高壓癥)的用途。具體說，該專利討論了化合物9-脫氧-2′，9-α-亞甲基-3-噁-4，5，6-三去甲-3，7-(1’，3’-間亞苯基)-13，14-二氫-前列腺素F1(也稱為UT-15)的用途。 但該專利沒有特別提出通過吸入法給予這種聯(lián)苯胺前列腺素或吸入法送遞它們所產生的令人驚奇的好處。
美國專利No.4,306,075描述了一大類碳環(huán)(carbacyclin)模擬物，包括聯(lián)苯胺(benzidene)前列腺素，其能產生各種藥理反應如抑制血小板凝聚、減少胃液分泌和支氣管擴張，指出該化合物可用作抗血栓形成藥、抗高血壓藥、抗?jié)兯幒涂瓜?。該專利提及吸入法給藥。該專利具體在實施例33中公開了化合物UT-15。但該專利僅提供了與這些化合物使用相關的有限生物學數(shù)據。在實施例31的第59欄，該專利公開了與實施例33的化合物(UT-15)結構類似的一種化合物，但不是同一個化合物。實施例31公開了(第59欄，第41-45行)“以1mg/kg劑量口服給予大鼠化合物[sic]9-脫氧-2′，9α-亞甲基-3-噁-4，5，6-三去甲-3，7-(1’，3’-間亞苯基)-PGF1甲酯，降低血壓44mmHg。52分鐘后，血壓依舊下降14mm”。
所有血液經肺循環(huán)順序通過肺，補充氧氣，然后經體循環(huán)再將氧氣分送到身體的其他部分。這兩種循環(huán)的流量在正常情況下是相同的，但肺循環(huán)所產生的阻力通常比體循環(huán)產生的小得多。當肺血流阻力增加時，該循環(huán)中的壓力大于任何血流。這稱為肺動脈高壓癥。通常，肺動脈高壓癥是通過觀察到壓力超過居住在同一高度和從事類似活動的大多數(shù)人所適合的正常范圍而確定的。
肺動脈高壓癥最常見的表現(xiàn)是阻力明顯增加(可解釋的)，如由肺栓塞導致的血流梗塞、心瓣膜或心肌處理通過肺以后血液的機能失調、對肺換氣不足和低充氧的反射性反應而導致的肺血管管徑變細、或血管容量和基本血流的不相配(如先天性異?；蚴中g切除肺組織導致的血流分流)。這種肺動脈高壓癥稱為繼發(fā)性高血壓癥。
但還存在一些肺動脈高壓癥病例，其阻力增加的原因尚不能得到解釋。將它們稱為原發(fā)性肺動脈高壓癥(PPH)，系通過排除導致繼發(fā)性肺動脈高壓癥后而作出的診斷。除了各種病因可能性外，原發(fā)性肺動脈高壓癥往往包括一種公認的疾病。雖然可發(fā)生在小孩和50歲以上的患者，但約65％是女性而年輕人最?；荚摬?。從診斷之日計算的預期壽命短暫，約為3-5年，雖然偶爾有自發(fā)性緩解和較長存活的報道，這應根據診斷方法來預測。然而通常由于昏厥和右心衰竭的進程不可改變，死亡常常相當突然。
肺動脈高壓癥指肺動脈壓(PAP)升高超過正常水平的相關疾病。對人而言，一般平均PAP約為12-15mm Hg。另一方面肺動脈高壓癥的標志是有時PAP比正常水平高至少5-10mm Hg。已報道過高于正常水平50-100mm Hg的PAP讀數(shù)。當PAP明顯增加時，血漿將從毛細管溢出進入肺間質和肺泡。肺中液體堆積(肺水腫)，可造成肺功能的相關降低，有時是致死性的。
肺動脈高壓癥可以是急性的或慢性的。急性肺動脈高壓癥是一種可逆的現(xiàn)象通常歸因于肺血管平滑肌的收縮，這可能由疾病如缺氧(如高原病)、酸中毒、炎癥或肺栓塞引發(fā)。慢性肺動脈高壓癥的特征是肺脈管系統(tǒng)的主要結構變化，導致肺血管橫截面面積減少。這可能是由例如慢性缺氧、血栓栓塞、或未知的原因(自發(fā)性或原發(fā)性肺動脈高壓)所致。
肺動脈高壓癥影響到幾種威脅生命的臨床疾病，如成人呼吸窘迫綜合癥(“ARDS)和新生兒持久性肺動脈高壓癥(“PPHN”)。Zapol等人，“急性呼吸衰竭”，第241-273頁，Marcel Dekker，New York(1985)；Peckham，J.Ped.931005(1978)。PPHN(一種主要影響足月嬰兒的疾病)的特征是肺血管阻力增加、肺動脈高壓、以及通過未閉合的動脈導管和新生兒心臟卵圓孔血流從右到左的分流。死亡率范圍為12-50％。Fox，Pediatrics 59205(1977)；Dworetz，Pediatrics 841(1989)。肺動脈高壓癥也可能導致潛在的致死性心臟病，稱為“肺心病”或肺原性心臟病。Fishman，“肺病和紊亂”，第二版，McGraw-Hill，New York(1998)。
已知可通過腸胃外給予某些前列腺素內過氧化物如前列環(huán)素(也稱為flolan)來治療肺動脈高壓，這是美國專利No.4,883,812的目的。已通過吸入法給予前列環(huán)素，用來治療肺動脈高壓癥?！奥樽韺W”，第82卷，no.6，第1315-1317頁。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及用吸入法給予需要治療的哺乳動物治療有效量的聯(lián)苯胺前列腺素。更具體說，本發(fā)明涉及一種治療肺動脈高壓癥的方法，通過用吸入法給予需要這種治療的哺乳動物治療有效量的聯(lián)苯胺前列腺素。
與腸胃外給予聯(lián)苯胺前列腺素相比，吸入聯(lián)苯胺前列腺素提供了意想不到的優(yōu)異效果。
附圖簡述

圖1用U44069靜脈內誘導的肺血管阻力(cmH2O*分鐘/升)隨時間(分鐘)的變化圖。
圖2A-2C顯示以氣溶膠給予高劑量UT15對綿羊血液動力學變化的影響。具體說，圖2A-2C分別顯示了將氣溶膠化的UT15給予綿羊(已用U44069靜脈內誘導的)對體動脈壓(PSA或PSYS)的影響；對肺動脈壓(PPA)的影響；和對肺血管阻力(PVR)的影響。
圖3顯示了基線條件下靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對心率的劑量反應性影響。
圖4顯示了基線條件下靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對體動脈壓的劑量反應性影響。
圖5顯示了基線條件下靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對中心靜脈壓的劑量反應性影響。
圖6顯示了基線條件下靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對肺動脈壓的劑量反應性影響。
圖7顯示了基線條件下靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對左心房壓的劑量反應性影響。
圖8顯示了基線條件下靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對心排血量的劑量反應性影響。
圖9顯示了基線條件下靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對肺血管阻力的劑量反應性影響。
圖10顯示了在靜脈內灌注U44069的過程中靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對心率的劑量反應性影響。
圖11顯示了在靜脈內灌注U44069的過程中靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對中心靜脈壓的劑量反應性影響。
圖12顯示了在靜脈內灌注U44069的過程中靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對體動脈壓的劑量反應性影響。
圖13顯示了在靜脈內灌注U44069的過程中靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對肺血管壓的劑量反應性影響。
圖14顯示了在靜脈內灌注U44069的過程中靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對左心房壓的劑量反應性影響。
圖15顯示了在靜脈內灌注U44069的過程中靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對心排血量的劑量反應性影響。
圖16顯示了在靜脈內灌注U44069的過程中靜脈內灌注UT15和氣溶膠UT15對肺血管阻力的劑量反應性影響。
圖17顯示了基線條件下靜脈內灌注和氣溶膠UT15對肺血管驅動壓(PPA-PLA)的劑量反應性影響。
圖16顯示了在靜脈內灌注U44069的過程中靜脈內灌注和氣溶膠UT15對肺血管驅動壓(PPA-PLA)的劑量反應性影響。
發(fā)明詳述除非特別指出，所有“一”表示至少一個。
本發(fā)明的一個實施例涉及用吸入法將聯(lián)苯胺前列腺素或其藥學上可接受的鹽或酯送遞到需要其的哺乳動物的方法。
以下是一類可按本發(fā)明的吸入法送遞的優(yōu)選聯(lián)苯胺前列腺素或其生理可接受的鹽或酸性衍生物 其中a是1-3的整數(shù)；X和Y可以是相同的或不同的，選自-O-和-CH2-；R是-(CH2)5-R1-，其中R1是氫和甲基，或R是環(huán)己基，或R是-CH(CH3)CH2C≡CCH3；點線表示一個可任選的雙鍵。
最優(yōu)選的聯(lián)苯胺前列腺素是UT-15，即9-脫氧-2′，9-α-亞甲基-3-噁-4，5，6-三去甲-3，7-(1’，3’-間亞苯基)-13，14-二氫-前列腺素F1。
本文的“吸入法”送遞指將活性成分或活性成分的混合物送遞過呼吸道，即讓需要該活性成分的哺乳動物通過哺乳動物氣道(如鼻或嘴)吸入此活性成分。
用于本發(fā)明吸入法送遞的氣溶膠化、霧化和/或噴霧化的活性成分，包括只含有聯(lián)苯胺前列腺素(如UT-15)或與其他下述活性成分混合的液體制劑。UT-15可用作游離酸或藥學上可接受的鹽或酯或其他酸性衍生物。另外，可以使用含有UT-15的緩釋制劑，包括UT-15的PEG化的形式和/或蛋白質偶聯(lián)形式。
本文使用的術語“酸性衍生物”指C1-4烷基酯和酰胺，包括其中氮被一個或二個C1-4烷基取代的酰胺。
本發(fā)明還包括UT-15的生物前體或“前體藥物”，即在體內能轉化成UT-15或其藥理活性衍生物的化合物。
本發(fā)明另一方面涉及UT-15或其藥學上可接受的鹽或酸性衍生物，在制備治療周圍血管病藥物中的用途。
本發(fā)明還涉及可用于制備本發(fā)明藥理活性化合物的UT-15的生理上不能接受的鹽。UT-15的生理上可接受的鹽包括由堿衍生的鹽。
堿性鹽包括銨鹽、堿金屬鹽(如鈉鹽和鉀鹽)、堿土金屬鹽(如鈣鹽和鎂鹽)、有機堿鹽(如二環(huán)己基胺和N-甲基-D-葡糖胺)、與氨基酸(精氨酸和賴氨酸)的鹽。
通過與低級鹵代烷(如甲基、乙基、丙基和丁基氯、溴和碘)、與硫酸二烷酯、與長鏈鹵素(如癸基、十二烷基、肉豆蔻基和硬酯酰氯、溴和碘)、和與芳烷基鹵(如芐基和苯乙基溴)反應，可形成季銨鹽。
任選地，在本發(fā)明的氣溶膠化、霧化或氣霧化制劑中還可包括一種或多種藥學上可接受的載體或賦形劑。
用噴霧器吸入法給藥的優(yōu)選溶液包括UT-15的無菌溶液，其包括UT-15、檸檬酸鈉、檸檬酸、氫氧化鈉、氯化鈉和間甲酚。通過將0.125克UT-15、1.25克含水檸檬酸鈉、0.125克無水檸檬酸、0.05克氫氧化鈉和約250ml注射用水混合，可制備更優(yōu)選的溶液。
較佳地，使用噴霧器、吸氣器、霧化器或氣溶膠器，從含有活性成分的溶液或液體形成微滴。較佳地微滴的直徑小于10微米。一優(yōu)選的噴霧器是AM-601氣溶膠給藥送遞系統(tǒng)(MEDICATOR AEROSOL DELIVERY SYSTEMTM)(由Healthline Medical，Baldwin Park，CA制造的一種噴霧器)。
另外，根據本發(fā)明，還可吸入固態(tài)制劑(通常為粉末形式)。在這種情況中，顆粒直徑宜小于10微米，更佳地小于5微米。
本發(fā)明還涉及將聯(lián)苯胺前列腺素和/或其鹽或酯通過吸入送遞，其中吸入法送遞適用于治療特定的疾病。聯(lián)苯胺前列腺素(包括UT-15和其鹽或酯)已顯示出可用于許多用途。例如，UT-15已表現(xiàn)出對血小板有強的抗凝聚作用，從而可特別用作哺乳動物的抗血栓形成藥物。UT-15的其他已知用途包括治療周圍血管疾病(可參見共同申請No.09/190,450，本文將其全部納入作為參考)。在用本發(fā)明的吸入聯(lián)苯胺前列腺素來治療周圍血管疾病時，吸入的劑量(應考慮到一些活性成分被呼出，沒有被吸收入血流)應充足到送遞相當于每天輸入25μg到250mg的劑量；通常為0.25μg到2.5mg，較佳地為7μg到285μg(每天每千克體重)。例如，每天每千克體重0.5μg到1.5mg的靜脈內劑量，可方便地以0.5ng到1.0μg每千克體重每分鐘的輸液量給予。優(yōu)選的劑量為10ng/kg/分鐘。
按本發(fā)明用吸入法給予聯(lián)苯胺前列腺素(包括UT-15和其鹽或酯)以減少和控制胃液的過量分泌，從而減少或避免了腸胃潰瘍的形成，并加速腸胃道中已存在的潰瘍和病損的痊愈。另外，用本發(fā)明的吸入法給予的聯(lián)苯胺前列腺素也可治療充血性心力衰竭，減少與肺移植相關的炎癥和/或肺動脈高壓。
聯(lián)苯胺前列腺素(包括UT-15和其鹽或酯)還表現(xiàn)出對血管的舒張作用，并因此具有抗高血壓的特殊用途，可治療哺乳動物(包括人)的高血壓。通過給予含有聯(lián)苯胺前列腺素(包括UT-15)的藥物組合物可實現(xiàn)抗高血壓藥(或低血壓藥)的用途。
用本發(fā)明的聯(lián)苯胺前列腺素(包括UT-15)吸入法可治療任何需要降低血壓、抑制血小板聚合、減少血小板粘附特性、和/或治療或預防哺乳動物(包括人)血栓的形成。例如，它們可用于治療和預防心肌梗塞和治療周圍血管病，治療和預防手術后的血栓形成、促進手術后血管移植的開放，和治療動脈硬化并發(fā)癥和動脈粥樣硬化、脂血癥引起的凝血缺陷等疾病和其他臨床疾病(潛在的病因與脂類失平衡或高脂質血相關)。另外聯(lián)苯胺前列腺素(包括UT-15和其鹽或酯)還可用于促進哺乳動物(包括人)的傷口愈合。
聯(lián)苯胺前列腺素(包括UT-15和其鹽或酯)可作為血液、血液制品、血液代用品和其他液體的添加劑，用于人工體外循環(huán)和分離的身體部分(如肢和器官，無論是連接于原身體的、分離的和被保藏的或為移植而準備的、或連接于一新的身體上的)的灌注。在這些循環(huán)和灌注期間，聚合的血小板趨于封阻血管和循環(huán)裝置部分。存在UT-15就可避免這種封阻。出于此目的，通過吸入法引入UT-15或其鹽或酯，直到其在循環(huán)血液、供體動物血液或被灌注身體部分的血液中達到某種水平或這些等價物中的兩個或全部達到穩(wěn)定狀態(tài)劑量，即0.001微克到10微克/升循環(huán)液體。另一實施例是UT-15在試驗用動物(如貓、狗、兔、猴子和大鼠)的用途，目的是開發(fā)器官和肢體移植的新方法和技術。
對本發(fā)明而言，通過吸入法將“治療有效量”的聯(lián)苯胺前列腺素送遞給需要其的患者?！爸委熡行Я俊敝笇Υ委熁蝾A防的疾病有治療作用的劑量。例如，“抗高血壓有效量”指其作用能將肺動脈高壓尤其是肺動脈壓(PAP)降到正常水平(相對于高血壓水平)或維持在正常水平的量。認為對于特定治療目的有效的精確劑量當然取決于待治療的患者的自身循環(huán)情況和患者醫(yī)生所希望的效果程度?？刹捎玫味▉泶_定合適的劑量。
本發(fā)明用于獸醫(yī)和人藥物使用的這類制劑包括活性成分、聯(lián)苯胺前列腺素或其鹽或酯，和一種或多種藥學上可接受的載體和任選地其他治療成分。載體必須是可“接受”，即與制劑的其他成分是相容的，且對接受者無害。
另外，制劑可方便的以單位劑量形式，且可用制藥領域熟知的任何方法制備。所有方法包括將活性成分與載體結合的步驟，載體是一種或多種藥學上可接受的附屬成分。
本發(fā)明還涉及吸入聯(lián)苯胺前列腺素來治療肺動脈高壓癥的方法?！胺蝿用}高壓癥”指急性或慢性高血壓癥，包括原發(fā)性肺動脈高壓癥和繼發(fā)性肺動脈高壓癥，該病與肺動脈血壓超過正常水平相關。
通過測定與肺動脈高壓癥相關的血液動力學，可評估聯(lián)苯胺前列腺素(如UT-15)治療肺動脈高壓癥的效果。具體說，可用肺動脈壓(PPA)、左心房壓(PLA)、中心靜脈壓(PCV)、體動脈壓(PSYS)、心率(HR)和心排血量(CO)的測定，來確定吸入或腸胃外送遞聯(lián)苯胺前列腺素的效果。
雖然可直接測定肺動脈壓，且其通常用于肺動脈高壓癥的定量，但如公式1所示PPA受另3個變量CO、PLA和PVR的影響PPA＝(CO*PVR)+PLA (1)可從公式1看出，PLA的增加(如左心衰竭、二尖瓣狹窄、二尖瓣回流)、CO的增加(如低紅細胞壓積、周圍血管擴張、右心房到左心房分流等)、和PVR的增加(市血管表面積減少、肺血管半徑減少、肺血管梗塞等)可升高PPA。
另一方面，不能直接測得PVR，必須由以下公式2計算PVR＝(PPA-PLA)/CO (2)PVR是肺動脈高壓癥(PAH)的較好指數(shù)，因為如果用于治療PAH的干預僅影響到PVR且對CO和PLA沒有作用或作用極小的話，這些干預是最佳的。
用血流計脈動顯示通過測定25次心跳所需的時間(秒)，確定了心率；由以下公式算得每分鐘心跳(BPM)BPM＝(25心跳/t25)*60秒可用購得的轉導器，如配有VALIDYNE CD19A Carrier Dmod.Amplifiers(Northridge，CA)的Model 1290A HEWLETT PACKARDTM轉導器(Andover，MA)監(jiān)測所有壓力?？捎肨ransonic System T101 Ultrasonic Bloodflow Meter(Ithaca，NY)測定心排血量?？稍贏STROMED MT-9500 Stripchart Recorder(WestWarwick，RI)上記錄壓力和血流信號，用Easy Data Acquistion軟件(Nashville，TN)在個人電腦上進行數(shù)字化記錄。
如肺血管阻力增加所示，相對于化學誘導的減弱的肺動脈高壓，已發(fā)現(xiàn)氣溶膠化的UT-15具有更大的藥效和效力。另外，與血管內給予UT-15相比，噴霧給予UT-15具有更強的效力，因為通過氣溶膠送遞的UT-15的實際量僅是由血管內送遞的劑量的一部分(10-50％)。雖然氣溶膠UT-15藥效和效力較強的機理未知，但可以假設通過靜脈內灌注UT-15的“第一遍”吸收低可能至少是部分原因。第一遍吸收低使大部分藥物進入外周循環(huán)(包括冠狀循環(huán))，增加心率和心排血量。
在化學誘導的肺動脈高壓期間，與血管內輸入UT-15相比，氣溶膠化的UT-15沒有明顯的外周作用(如對心率或心排血量)。這對那些接近右心衰竭和周圍血管擴張將加劇右心負擔的患者而言是特別有利的。另一方面，如果由于右心衰竭使心排血量受損，則氣溶膠化的前列腺素將減少PVR，增加心排血量同時降低右心的負擔。
以下提供的實施例用以說明本發(fā)明，應對本發(fā)明不構成任何限制。
實施例實施例1動物模型按如下步驟，將1.25克檸檬酸鈉(含水)、0.125檸檬酸(無水)、0.05克氫氧化鈉(NF/BP)、0.125克UT-15和約250ml注射用水混合，制備可吸入的溶液。
1.測量約210ml水，加到帶有磁性攪拌棒的滅菌硅化玻璃燒杯中。
2.加入檸檬酸鈉?；旌现敝寥芙?。
3.將檸檬酸加到步驟2的溶液中?；旌现敝寥芙?。
4.測量12.5ml水，加到無菌塑料管中。加入氫氧化鈉?；旌现敝寥芙?。
5.在步驟4的溶液中加入UT-15。手工混合直至溶解。
6.將步驟5的溶液加到步驟3的溶液中，混合。
7.用鹽酸和/或氫氧化鈉溶液將pH調節(jié)至7.3。
8.用無菌微型過濾器將得到的最后溶液過濾到另一無菌燒杯中，然后以5ml等份將溶液分裝到無菌帶塞的血試管中。
9.一式兩份各溶液裝盒，置于-4℃ Celsius冷凍器中。
10.如上所述，制備安慰劑溶液(但不加UT-15)，將其量調至50ml。
在UT-15原液或安慰劑溶液中加入無菌鹽水稀釋至所需量制備工作液(取決于所需的劑量、綿羊的體重、和氣溶膠化持續(xù)的時間)。然后將此溶液加到噴霧器(體積不超過5ml)至所用的全量。
對于35kg的綿羊，UT-15的劑量為250ng/kg*分鐘(30分鐘)，如下計算250×35×30＝262，500ng UT-15或262.5微克UT-15。噴霧速率為每分鐘0.28ml，則含有262.5微克UT-15需要8.4ml溶液。但需要有一定量的溶液“殘留”(殘留在噴霧器中的體積)。所以制備了9ml溶液含有總量為281.25微克的UT-15(或0.5625ml原液)。
測量0.5625ml UT-15，加到8.4375ml無菌鹽水中。此溶液可準確噴霧30分鐘。
選擇綿羊作為這些試驗的動物模型出于若干原因。首先是因為綿羊溫順。它們可以在試驗籠子里安靜的站著，而不需要使用鎮(zhèn)靜劑(鎮(zhèn)靜劑可能使試驗結果復雜化)。第二，綿羊足夠大可以直接測定CO、PPA、PLA、PCV和PSYS。而且綿羊也大到足以通過氣管造口術直接將氣溶膠化的物質送遞到肺，從而防止藥物的吞咽并因此消除了UT-15給藥可能的其他路徑。第三，綿羊能承受大量儀器，僅有極少不適或沒有不適。第四，作為肺動脈高壓癥動物模型，綿羊已使用許多年，因此有大量的歷史資料可用于結果比較。
選擇用于誘導肺動脈高壓的試劑是PGH2模擬物U44069(9，11-二脫氧，9α，11α-環(huán)氧亞甲基前列腺素F2α)。使用U44069的原因，是因為其具有極強的肺血管收縮性，且它的特性與內源性形成的血栓素A2非常相似，且可將其滴定來誘導肺血管收縮性到所需程度。在使用前即刻將U44069與無菌普通鹽水混合，用鋁箔包裹此溶液以避光。將U44069的濃度調節(jié)至灌輸?shù)骄d羊的最小流速為每分鐘0.8ml。如此進行是因為更濃的U44069必須以極低的流速灌輸，且由于滾動泵的輸液特性往往造成U44069“脈沖”。U44069脈沖會導致血管收縮“峰”，從而誘導不穩(wěn)定狀態(tài)。
手術過程將6只一歲綿羊(3只雄性，3只雌性；21-37kg)饑餓18-24小時，然后用短效巴比妥酸鹽(硫噴妥)作初始麻醉進行綿羊插管術。然后用氟烷氣體麻醉(1.5-2.5％)進行手術。通過右側開胸術，將Transonic(超聲)血流探針置于肺主動脈周圍，硅膠導管置于肺主動脈和左心房。約7天后，再麻醉綿羊，在左頸動脈插入導管，在左頸靜脈插入Corids Introducer Sheath，并切開氣管。在試驗前讓綿羊恢復3-5天。在進行基線測定(最少30分鐘)后，用這些綿羊來測定肺動脈壓(PPA)、左心房壓(PLA)、中心靜脈壓(PCV)、體動脈壓(PSYS)、心率(HR)和心排血量(CO)。
實施例2長時間U44069靜脈內灌輸對肺血管阻力的作用在4只綿羊中，測定到U44069有維持PVR穩(wěn)態(tài)增加的能力。在基線30分鐘后，以每千克體重每分鐘1微克的速率灌注U44069，180分鐘。如圖1所示，由靜脈內注入U44069誘導的PVR的增加很穩(wěn)定，超過3小時。(在本文的圖中，所示的所有數(shù)據都是平均值±SEM。“*”表示與相應的靜脈內灌注UT-15的送遞速率有明顯差異。“#”表示與相應的基線值有明顯差異?！?amp;amp;”表示與相應的U44069值有明顯差異。)還用多重配對t-檢驗進行了統(tǒng)計分析，其不像One-way ANOVA/Dunnett檢驗那樣嚴格。具體說，圖1顯示靜脈內灌注U44069使PVR達到穩(wěn)態(tài)增加30分鐘，且該穩(wěn)態(tài)增加至少持續(xù)180分鐘。在這180分鐘灌注期間，U44069還使其他變量相對于它們的基線值有明顯的改變(沒有顯示數(shù)據)PPA增加、HR減少、CO減少。PSYS增加超過其基線值，但除U44069灌注過程的120、150和180分鐘外，差異沒有達到統(tǒng)計學差異水平。在U44069灌注過程中PCV也增加，但僅在30和60分鐘時的增加有顯著性。在所觀察的任一時間點PLA都沒有明顯變化。
由于所有的U44069時間值與基線值不同，而配對t檢驗未測試到彼此的差異，這強烈表明在U44069灌注過程中的任何時間點都沒有差異。這些數(shù)據表明UT-15引起的PVR改變是因為UT-15的作用，且未因血管收縮反應的減弱而復雜化。
實施例3以高劑量給予的氣溶膠UT-15對基線血液動力學的作用在載體/鹽水氣溶膠化(0.28mg/分鐘)過程中監(jiān)測30分鐘組成基線測定?；€測定后，用UT-15原液(500ng/ml)替換氣溶膠送遞系統(tǒng)中的載體/鹽水溶液，以0.28ml/分鐘氣溶膠化90分鐘。
圖2僅顯示了高劑量氣溶膠化UT-15(每千克每分鐘3800-5700ng)90分鐘后，觀察到的統(tǒng)計學變化的變量。PSYS減少了7.5％，PPA減少了約18％，和PVR減少了約19％(相對于它們各自的基線值)。
這些數(shù)據非常重要，因為這將表明與靜脈內灌注UT-15不同，可以高劑量給予氣溶膠化的UT-50而對肺以外的器官沒有明顯影響(即心率、心排血量)。在這些試驗中噴霧送遞的UT-15約是圖16所示的最小有效測試劑量(每kg每分鐘250ng)的15-27倍左右。
實施例4對照靜脈內(給予)UT-15和對照氣溶膠化的UT-15對基線血液動力學的劑量反應作用進行兩個分開的試驗來確定靜脈內灌注UT-15對基線血液動力學和氣溶膠化的UT-15對基線血液動力學的劑量反應作用。對灌注試驗流程而言，建立基線后30分鐘，以3種速率(每kg每分鐘250、500和1000ng)靜脈內灌注UT-15。在三只綿羊中，將這些灌注速度各持續(xù)30分鐘，在另三只綿羊中灌輸各持續(xù)60分鐘。
氣溶膠化UT-15流程包括建立30分鐘基線，然后通過切開的氣管以每kg體重每分鐘250、500和1000微克的速度給予氣溶膠化的UT-15，氣溶膠化的速率為0.28ml/分鐘。再次將三只綿羊噴霧灌注30分鐘，另3只綿羊噴霧灌注60分鐘。
在30分鐘和60分鐘之間以3種速度給予UT-15的送遞中沒有發(fā)現(xiàn)差異。圖3顯示了靜脈內灌注和噴霧UT-15對心率的劑量性反應。在以每kg每分鐘250、500和1000ng速度靜脈內給予UT-15的過程中，心率明顯增加。而噴霧UT-15對心率沒有影響。以3種速率通過噴霧和靜脈內灌注UT-15之間存在明顯差異。
圖4顯示了以所用的任一給藥速率，噴霧和靜脈內給予UT-15對PSYS都沒有明顯作用。
圖5顯示了UT-15對PCV的影響。相對于其基線值，任何劑量都不存在統(tǒng)計學差異，且以各劑量靜脈內和噴霧給予UT-15間也不存在統(tǒng)計學差異。如圖6所示對于PPA也觀察到相同的作用，雖然當UT-15氣溶膠化時，PPA一般有減低的趨勢。
令人感興趣的是，無論靜脈內或噴霧給予UT-15都不能引起PLA從它們各自的基線值發(fā)生顯著變化(雖然在噴霧給藥時平均值有所增加，而靜脈內給藥時有所減少)，但在以各種送遞速率噴霧和靜脈內給予UT-15之間存在明顯的差異。見圖7。
圖8顯示了對CO的作用以任一送遞速率，相對于各基線值沒有觀察到明顯的變化，且兩種給藥模式間也沒有觀察到明顯的變化。
圖9顯示了噴霧和靜脈內灌注UT-15對肺循環(huán)(PVR)的總體作用。在所有3種送遞速率，靜脈內UT-15對PVR沒有明顯作用，而氣溶膠化的UT-15導致其明顯減少。
以每kg每分鐘250、500和1000ng速率噴霧UT-15引起的PVR減少，是由于PLA的小量增加和PPA的小量減少造成的。雖然這些變量與各基線值的差異并不顯著，但聯(lián)合起來(即PPA減去PLA，用于公式2)就非常明顯，如圖17所示。靜脈內灌注UT-15對PVR沒有影響，但對心率有明顯作用。用嚴格的雙途徑(two-way)ANOVA和Student-Newman-Keuls檢驗對這些數(shù)據進行統(tǒng)計分析，可得到可信的統(tǒng)計學差異。
實施例5收縮的靜脈內和氣溶膠化UT-15的劑量反應進行了兩個分開的試驗以測定靜脈內灌注UT-15和噴霧UT-15在U44069誘導的肺動脈高壓中的劑量反應作用。建立基線后30分鐘，以每kg每分鐘1ng的速率靜脈內灌注U44069。靜脈內給予UT-15并讓綿羊達到穩(wěn)態(tài)30-60分鐘后，靜脈內給予UT-15的劑量反應與實施例4中的類似。噴霧給予UT-15并讓綿羊達到穩(wěn)態(tài)30-60分鐘后，靜脈內給予UT-15的劑量反應與實施例4中的類似。在各試驗方案中，將UT-15給予3只綿羊30分鐘，另3只綿羊60分鐘。
以三種給藥速率在30分鐘和60分鐘UT-15送遞之間未發(fā)現(xiàn)差異。圖10顯示了U44069對心率的作用和在U44069灌注過程中UT-15隨后的對心率的劑量-反應作用。靜脈內給予UT-15導致心率增加超過在U44069條件下的值，而噴霧UT-15對心率沒有影響。具體說，對靜脈內給予UT-15，相對于基線心率僅在每kg每分鐘1000ng的送遞速率時有明顯差異，而以每kg每分鐘500和1000ng速率靜脈內送遞UT-15，與U44069的值有統(tǒng)計學差異。每kg每分鐘500和1000ng噴霧送遞速率與它們相應的靜脈內灌輸送遞速率不同。
圖11顯示了中心靜脈壓的數(shù)據。對于靜脈內給予UT-15觀察到中心靜脈壓的某些差異，即以每kg每分鐘500和1000ng送遞速率時，其數(shù)值與U44069的值有差異。僅在每kg每分鐘500ng時噴霧送遞的值與相應的靜脈內UT-15灌輸值有差異。
對這些系列試驗，體動脈壓不存在統(tǒng)計學差異(圖12)。圖13顯示了肺動脈壓反應。U44069明顯增加了PPA(相對于基線)，所有3種藥物送遞氣溶膠化的UT-15速率都明顯高于靜脈內送遞。事實上，以每kg每分鐘500和1000ng速率噴霧UT-15，PPA回到正常水平。
U44069不明顯改變左心房壓。但以所有3種送遞速率靜脈內灌輸UT-15將導致其明顯降低(自U44069值)，且與每kg每分鐘500和1000ng速率的基線值不同。所有3種噴霧送遞速率都增加超過基線，而每kg每分鐘250和500ng時增加超過了U44069值。如圖14所示，所有三種噴霧送遞速率的影響與靜脈內灌注送遞速率的都不同。
從這兩種模式UT-15給藥的最明顯作用是對心排血量和“肺變量”的影響。如圖15所示，U44069導致心排血量自基線下降。噴霧UT-15對心排血量沒有影響。靜脈內給予UT-15導致心排血量的劑量反應性增加，在每kg每分鐘500和100ng時明顯。在每kg每分鐘1000ng時，氣溶膠UT-15給藥與靜脈內灌注UT-15之間存在明顯差異。
圖16顯示靜脈內和噴霧送遞UT-15在U44069過程中對肺血管阻力的總體效應。其顯示了雖然肺血管阻力因靜脈內灌注和噴霧UT-15而明顯減弱，但噴霧UT-15的作用更強。具體說，U44069導致PVR明顯增加，其在每kg每分鐘500和1000ng速率靜脈內灌注UT-15時明顯減弱。噴霧UT-15導致PVR降低，故而三種送遞速率相對于基線PVR均沒有明顯差異。令人感興趣的是，靜脈內和噴霧送遞UT-15開始減弱PVR增加的時間非常類似(4-5分鐘)，而對噴霧UT-15反應結束時間比靜脈內送遞UT-15的要長得多(43分鐘與12分鐘)。
圖18顯示了雖然靜脈內送遞UT-15使PPA自UT44069值明顯下降，但這種下降與PLA的下降相稱。所以肺血管驅動壓(PPA-PLA)沒有變化。
本發(fā)明已詳細地并參考本發(fā)明的優(yōu)選實施例進行了描述，本領域技術人員可以理解對本發(fā)明的各種改變和改進都屬于本發(fā)明的精神和范圍。
本文所引用的參考文獻本文將其分別全部納入作為參考。
權利要求
1.一種將治療有效量的聯(lián)苯胺前列腺素送遞給需要它的哺乳動物的方法，其特征在于，所述的方法包括通過吸入法給予所述的哺乳動物一種制劑，該制劑提供治療有效量的聯(lián)苯胺前列腺素。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的聯(lián)苯胺前列腺素以氣溶膠形式吸入。
3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述的聯(lián)苯胺前列腺素是UT-15。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述的氣溶膠形式包括直徑小于10微米的微滴，所述的微滴包含有在藥學上可接受的適當液體載體中的UT-15。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的哺乳動物是人。
6.一種治療哺乳動物肺動脈高壓癥的方法，其特征在于，所述的方法包括通過吸入法給予哺乳動物有效量的UT-15或其藥學上可接受的鹽或酯。
7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述的UT-15以氣溶膠形式吸入。
8.如權利要求7所述的方法，其特征在于，所述的氣溶膠形式包括直徑小于10微米的微滴，所述的微滴包含有在藥學上可接受的適當液體載體中的UT-15。
9.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述的UT-15以含有直徑小于10微米顆粒的粉末吸入。
10.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的制劑包括緩釋形式的聯(lián)苯胺前列腺素。
11.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述的UT-15是緩釋形式。
全文摘要
公開了一種通過吸入法將聯(lián)苯胺前列腺素送遞給患者的方法。與腸胃外給予患有誘導的肺動脈高壓的綿羊UT－15相比,當用吸入法給予稱為UT－15的聯(lián)苯胺前列腺素時具有出人意料的優(yōu)異效果。
文檔編號A61K9/00GK1379665SQ00805108
公開日2002年11月13日 申請日期2000年3月17日 優(yōu)先權日1999年3月18日
發(fā)明者G·克盧捷, J·格羅, M·韋德, R·E·帕克, J·E·勞埃德 申請人:聯(lián)合治療學有限公司