專(zhuān)利名稱(chēng)：香菇多糖凍干粉針劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑抗腫瘤藥物香菇多糖凍干制劑及其制備方法。
香菇中含蛋白質(zhì)、雜多糖和香菇多糖等多種成分。香菇多糖(Lentinan)是日本學(xué)者千原吳郎從香菇子實(shí)體中提取、分離、純化的一種多糖，其一級(jí)結(jié)構(gòu)是β-(1-3)葡萄糖為主鏈，β-(1-6)葡萄糖為側(cè)鏈的葡聚糖。香菇多糖是一種生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑，對(duì)多種腫瘤有強(qiáng)的抑制作用，對(duì)化學(xué)誘癌劑病毒誘癌劑有預(yù)防效果，特別是對(duì)于手術(shù)后微轉(zhuǎn)移有效，同時(shí)給藥劑量小，副作用小，使用安全。1985年日本厚生省批準(zhǔn)香菇多糖作為抗腫瘤新藥上市。我國(guó)1988年開(kāi)始進(jìn)口日本味之素的香菇多糖，并用于臨床。日本進(jìn)口的香菇多糖凍干劑的配方為香菇多糖、右旋糖酐和甘露醇。右旋糖酐為發(fā)酵產(chǎn)物，作為藥用臨床上已發(fā)現(xiàn)其有過(guò)敏性休克導(dǎo)致死亡的案例多起。
本發(fā)明的目的是提供一種不含會(huì)產(chǎn)生不良反應(yīng)的成份的凍干制劑，該制劑成本低，療效與日本進(jìn)口的一樣。
本發(fā)明的目的是提供一種制備不含會(huì)產(chǎn)生不良反應(yīng)的成份的凍干制劑的制備方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案是一種抗腫瘤的香菇多糖凍干劑，其特征在于是以下述重量配比藥物為原料香菇多糖0.50～1.40份，一種凍干賦形劑50～140份，優(yōu)選的藥物配比是香菇多糖0.95～1.20份，一種凍干賦形劑100份；所述凍干賦形劑可以是甘露醇、葡萄糖、蔗糖或乳糖，優(yōu)選的凍干賦形劑是甘露醇。
本發(fā)明的技術(shù)方案還包括一種抗腫瘤的香菇多糖凍干劑的制備方法。
本發(fā)明的香菇多糖的提取、分離、純化方法系參考Nature 1965，222，687-8。
本發(fā)明香菇多糖凍干粉針劑的制備方法，其特征在于取香菇多糖0.50～1.40份，用堿液溶解，加酸液中和，再與一種凍干賦形劑50～140份混合，分裝入瓶，凍干后，封口。優(yōu)選的藥物配比是取香菇多糖0.95～1.20份，用堿液溶解，加酸液中和，再與一種凍干賦形劑100份混合，分裝入瓶，凍干后，封口。
所述抗腫瘤的香菇多糖凍干粉針劑，其特征在于凍干賦形劑可以是甘露醇、葡萄糖、蔗糖或乳糖。較好的凍干賦形劑是甘露醇。
所述凍干劑的制備方法，其特征在于堿液為0.5～1.0摩爾濃度的氫氧化鈉。中和用的酸液為0.5～1.0摩爾濃度的鹽酸，中和至PH為6.0～8.0。
香菇多糖與凍干賦形劑混勻后，過(guò)濾，除菌，測(cè)含量，灌裝于安瓿或西林瓶中，凍干，封口或壓蓋，檢漏或軋蓋，貼標(biāo)簽。全部在符合GMP車(chē)間進(jìn)行。
香菇多糖凍干粉針劑手術(shù)前使用或化療前使用，1mg/次，每周兩次；或2m/次，每周一次。用時(shí)溶于250mg生理鹽水或葡萄糖液中，靜脈滴注。治療癌性胸腹水患者，腔內(nèi)注射4～8mg/次。具體病例應(yīng)遵醫(yī)囑。
本發(fā)明的香菇多糖凍干劑療效確切，制劑穩(wěn)定，由于不含可能引起過(guò)敏的右旋糖酐，所以臨床使用更安全。而且，由于注射用香菇多糖凍干粉針劑不含右旋糖酐，所用含量測(cè)定方法無(wú)需先進(jìn)行特殊裝置的柱層析分離去右旋糖酐，可以直接采用蒽酮硫酸法，使含量檢測(cè)更準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便。
1．本發(fā)明產(chǎn)品的分子量、分子式、化學(xué)結(jié)構(gòu)式(1)分子量測(cè)定經(jīng)高效凝膠滲透色譜，采用普適校正曲線方法測(cè)定分子量大多在50～70萬(wàn)。
(2)分子式經(jīng)微量元素分析結(jié)果表明，分子式為(C5H10O5)n(3)化學(xué)結(jié)構(gòu)式經(jīng)化學(xué)反應(yīng)結(jié)合光譜分析法，香菇多糖的一級(jí)結(jié)構(gòu)如下
2．制劑穩(wěn)定性考察結(jié)果與結(jié)論本發(fā)明產(chǎn)品經(jīng)高(40℃、60℃、80℃)、高濕(RH92.5％、RH75％、25℃)及光照(4000Lx)等影響因素試驗(yàn)后，外觀性狀、澄明度、PH值、含量及無(wú)菌檢查均符合要求。
本發(fā)明產(chǎn)品加速試驗(yàn)(40℃ RH75％)3個(gè)月的考察結(jié)果，外觀性狀、澄明度、PH值、含量、雜質(zhì)及無(wú)菌檢查均符合要求。
本發(fā)明產(chǎn)品在室溫留樣考察1、3、5、12、18、24個(gè)月，經(jīng)定期取樣檢查各項(xiàng)項(xiàng)目均符合要求。故本品有效期可定為兩年。
3．臨床試驗(yàn)(1)Ⅱ期臨床試驗(yàn)臨床試驗(yàn)由國(guó)家指定醫(yī)療單位采取雙盲、隨機(jī)方法進(jìn)行二期臨床試驗(yàn)，對(duì)各類(lèi)癌癥患者240例采用聯(lián)合化療加安慰劑(凍干粉針劑)作為對(duì)照組以及聯(lián)合化療加香菇多糖作為試驗(yàn)組的試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)組108例，CR+PR 67例，總有效率62％，對(duì)照組104例，CR+PR 44例，總有效率43.2％，兩者相比，P值＜0.01，其中胃癌試驗(yàn)組總有效率56.6％，對(duì)照組19.4％，P值＜0.01，非小細(xì)胞肺癌試驗(yàn)組總有效率33.3％，對(duì)照組11.5％，P值＜0.05。試驗(yàn)組治療前后淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，NK細(xì)胞活性和T4/T8比值均顯著高于對(duì)照治療前后的變化，P＜0.01。初步試用香菇多糖治療癌性胸腹水的有效率(13/17)76.5％的結(jié)果近似。
(2)Ⅲ期臨床試驗(yàn)在中華醫(yī)學(xué)會(huì)組織領(lǐng)導(dǎo)下，由中山醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院作為負(fù)責(zé)單位，全國(guó)40余家醫(yī)院參加了三期臨床，進(jìn)一步考察了香菇多糖臨床療效及不良反應(yīng)，完成可評(píng)價(jià)指標(biāo)病列1106例，包括全身用藥1047例和胸腹水59病例。
①并用化療試驗(yàn)組(565例)總有效率41.1％，對(duì)照組(301例)25.2％，兩組有顯著性差異(P＜0.01)，其中胃癌、NSCLC(非小細(xì)胞肺癌)的總有效率試驗(yàn)明顯高于對(duì)照組(P＜0.01)。NSCLC的化療增效作用在此之前未見(jiàn)臨床報(bào)道日本昧之素公司同類(lèi)產(chǎn)品有此作用(參見(jiàn)查新報(bào)告)。
②胸腹水共59例，總有效率52.5％。
③本試驗(yàn)同時(shí)觀察了患者細(xì)胞免疫功能的變化，結(jié)果顯示試驗(yàn)三項(xiàng)指標(biāo)
④活動(dòng)狀態(tài)(PS)全組1647例，并用化療試驗(yàn)組(565例)治療后28.5％病人PS有改善(治療后比治療前有顯著性差異P＜0.01)，而對(duì)照組僅6.6％的病人有改善(治療后比治療前無(wú)差異P＞0.05)，試驗(yàn)組與對(duì)照組比較有顯著差異(P＜0.01)。
⑤減輕化、放療毒副反應(yīng)并用化療、術(shù)后并用化療血WBC.P下降發(fā)生率，試驗(yàn)組明顯低于對(duì)照組(P＜0.01)，胃腸毒性、肝功能損害試驗(yàn)組亦低于對(duì)照組(P＜0.01)，惡心嘔吐的發(fā)生率試驗(yàn)組明顯低于對(duì)照組(P＜0.01)。在此之前未見(jiàn)臨床報(bào)道日本味之素公司同類(lèi)產(chǎn)品有此作用。
⑥不良反應(yīng)在所有全身應(yīng)用香菇多糖的1121例病人中有2例出現(xiàn)顏面潮紅，1例胸悶，共計(jì)3例，占0.27％，減慢滴注速度或停藥后短期內(nèi)恢復(fù)。日本香菇多糖Lentinan Ⅱ、Ⅲ期臨床試驗(yàn)計(jì)469例，不良反應(yīng)發(fā)生32例，占6.8％。
實(shí)施例1取注射用香菇多糖原料1.15克(純度98％)，加30ml 1M的氫氧化鈉溶液，讓其自然溶脹，攪拌溶解，加少量注射用水稀釋?zhuān)瑪噭?，?M鹽酸中和，至pH6.8～7.0，加市售20％甘露醇注射液600毫升(連云港東風(fēng)制藥廠生產(chǎn))，攪拌均勻，再加注射用水至2000毫升，除菌過(guò)濾，測(cè)含量，分裝，2ml/瓶，進(jìn)行冷凍干燥，出箱，封口，檢漏，貼標(biāo)簽。使用劑量靜脈滴注1mg/次，每周二次；腔內(nèi)注射4mg或8mg/次。使用方法用2ml注射用水振搖溶解，加入250ml生理鹽水或5％葡萄糖注射液中，靜脈滴注；腔內(nèi)注射用20ml生理鹽水溶解4mg或8mg香菇多糖，直接注入患者胸腔或腹腔。
實(shí)施例2取注射用香菇多糖5.5克，在攪拌下分次溶于0.8M氫氧化鈉溶液300毫升，使其完全溶解，然后慢慢加入0.8M鹽酸中和，調(diào)pH至7.0～7.2。取市售注射用甘露醇500克，加適量注射用水加熱溶解，加0.1％W/V注射用活性炭于85℃加熱15分鐘，冷卻至60℃時(shí)用3號(hào)砂芯濾棒過(guò)濾，濾液中加入香菇多糖溶液，補(bǔ)充注射用水至20000毫升，然后用濾膜進(jìn)行除菌過(guò)濾，測(cè)含量，灌封于安瓿中，每瓶2毫升至凍干箱中進(jìn)行凍干，出箱后封口，檢漏，貼標(biāo)簽即得。液，補(bǔ)充注射用水至20000毫升，然后用濾膜進(jìn)行除菌過(guò)濾，測(cè)含量，灌封于安瓿中，每瓶2毫升至凍干箱中進(jìn)行凍干，出箱后封口，檢漏，貼標(biāo)簽即得。
含量測(cè)定采用經(jīng)典的蒽酮硫酸法。
權(quán)利要求
1．一種抗腫瘤的香菇多糖凍干粉針劑，其特征在于以下述重量配比藥物為原料香菇多糖0.50～1.40份，一種凍干賦形劑50～140份。
2．根據(jù)權(quán)利要求1所述抗腫瘤的香菇多糖凍干粉針劑，其特征在于以下述重量配比藥物為原料香菇多糖0.95～1.20份，一種凍干賦形劑100份
3．根據(jù)權(quán)利要求1所述抗腫瘤的香菇多糖凍干粉針劑，其特征在于凍干賦形劑可以是甘露醇、葡萄糖、蔗糖或乳糖。
4．根據(jù)權(quán)利要求1所述抗腫瘤的香菇多糖凍干粉針劑，其特征在于凍干賦形劑可以是甘露醇。
5．一種抗腫瘤的香菇多糖凍干粉針劑的制備方法，其特征在于取香菇多糖0.50～1.40份，用堿液溶解，加酸液中和，再與一種凍干賦形劑50～140份混合，分裝入瓶，凍干后，封口。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述抗腫瘤的香菇多糖凍干粉針劑，其特征在于取香菇多糖0.95～1.20份，用堿液溶解，加酸液中和，再與一種凍干賦形劑100份混合，分裝入瓶，凍干后，封口。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述抗腫瘤的香菇多糖凍干粉針劑，其特征在于凍干賦形劑可以是甘露醇、葡萄糖、蔗糖或乳糖。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述抗腫瘤的香菇多糖凍干粉針劑的制備方法，其特征在于凍干賦形劑是甘露醇。
9.根據(jù)權(quán)利要求5的要求所述香菇多糖凍干粉針劑的制備方法，其特征在于堿液為0.5～1.0摩爾濃度的氫氧化鈉，酸液為0.5～1.0摩爾濃度的鹽酸。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述香菇多糖凍干粉針劑的制備方法，其特征在于用酸液中和至PH為6.0～8.0。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了抗腫瘤藥物香菇多糖凍干粉針劑的配方及其可工業(yè)化的制備方法,配方中省去了使患者可能產(chǎn)生過(guò)敏的右旋糖酐。
文檔編號(hào)A61K31/716GK1288729SQ0011240
公開(kāi)日2001年3月28日 申請(qǐng)日期2000年7月19日 優(yōu)先權(quán)日2000年7月19日
發(fā)明者程培元, 翁靜, 方貽功, 程光 申請(qǐng)人:南京振中生物工程有限公司