一種茶多酚抗氧化肽飲料的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食品保健領(lǐng)域，涉及酶法制備抗氧化肽飲料，特別涉及的是一種茶多酚抗氧化肽飲料的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]生物體內(nèi)的新陳代謝和各種氧化還原酶促反應(yīng)會(huì)促使不斷產(chǎn)生各種自由基。一般情況下，生物體內(nèi)在不斷產(chǎn)生自由基的同時(shí)也有內(nèi)源的抗氧化劑去清除它們以維持機(jī)體的動(dòng)態(tài)平衡，但一旦自由基過量，就會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷，從而影響機(jī)體健康，導(dǎo)致許多疾病的產(chǎn)生。抗氧化肽作為生物活性肽的一種，具有抑制脂質(zhì)過氧化和清除自由基、維持機(jī)體自由基平衡和提高機(jī)體抗衰老、抗疾病功能。適當(dāng)攝入具有抗氧化活性的物質(zhì)可以降低體內(nèi)自由基水平，防止脂質(zhì)過氧化，幫助機(jī)體抵御疾病。
[0003]茶多酚，又名抗氧靈、維多酚，是茶葉中所含的一類多羥基類化合物，主要化學(xué)成分為兒茶素類(黃烷醇類)、黃酮及黃酮醇類、花青素類、酚酸及縮酚酸類、聚合酚類等化合物的復(fù)合體。茶多酚是從茶葉中提取的全天然抗氧化食品，具有抗氧化能力強(qiáng)，無毒副作用，無異味等特點(diǎn)。茶多酚具有抗癌、抗突變、抗菌抗病毒、抗輻射、降壓降血脂、防治齲齒、消臭、抗衰老和減肥等功能，因而在醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、日用化工和食品工業(yè)上都得到了廣泛的應(yīng)用。
[0004]目前，利用酶法酶解蛋白制備抗氧化肽的報(bào)道已有很多。CN104610446A中公開了一種酶解馬面魚皮膠原蛋白制備抗氧化肽的方法，該方法采用雙酶分步水解技術(shù)與超濾、凝膠柱層析技術(shù)聯(lián)用。專利CN103320489A中公開了一種松籽蛋白源抗氧化肽的制備方法，它是通過將提取的松籽蛋白用液體堿性蛋白酶進(jìn)行水解，并進(jìn)行超濾濃縮、真空干燥從而得到抗氧化肽。專利CN103571902B中公開了一種從鮰魚魚皮中提取膠原蛋白，并用酶法進(jìn)行水解制備抗氧化肽的方法。目前的研究多集中在抗氧化肽的制備方法。
[0005]近年來，對(duì)于茶多酚的研究多集中在茶飲料的行業(yè)。專利CN103098923A中就公布了一種速溶茶飲料的制備方法;專利CN10558804A公布了茶飲料的制作方法;在其他方面的應(yīng)用有:專利CN103918795A公布了一種茶多酚益生菌羊奶片的制備方法;CN101444502A公布了高純度茶多酚口含片的制備方法。但是將茶多酚應(yīng)用在抗氧化肽方面還未有見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于提供一種不僅能夠發(fā)揮茶多酚對(duì)身體的有益作用，而且也能進(jìn)一步增強(qiáng)飲料抗氧化性的茶多酚抗氧化肽飲料的制備方法。
[0007]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一種茶多酚抗氧化肽飲料的制備方法，
[0008]I)將羊奶粉與蒸餾水配成復(fù)原乳，離心去除復(fù)原乳中的脂肪制得脫脂乳；
[0009]2)向脫脂乳中滴加鹽酸并磁力攪拌，直到pH值達(dá)為4.6，使酪蛋白沉淀下來，經(jīng)離心棄去上清液，將沉淀進(jìn)行冷凍干燥得酪蛋白干粉；
[0010]3)將酪蛋白干粉制成質(zhì)量濃度為2 %?5 %的酪蛋白溶液，放入恒溫水浴鍋中，加熱至45°C?60°C，滴加NaOH溶液調(diào)節(jié)酪蛋白溶液pH為6.5?8.0;
[0011]4)向酪蛋白溶液中加入酪蛋白溶液質(zhì)量2 %?5%的Alcalase酶和木瓜蛋白酶的混合物，反應(yīng)過程中滴加NaOH溶液保持pH不變，水解結(jié)束后，滅酶、離心，棄沉淀取上清液得酶解液；
[0012]5)向酶解液中添加酶解液質(zhì)量0.6 %?1.0 %的β_環(huán)狀糊精，在室溫下攪拌進(jìn)行脫苦處理，然后加入酶解液質(zhì)量6 %?10 %的白砂糖、0.5 %?0.8 %的檸檬酸與蘋果酸的混合酸、0.2 %?0.35 %的瓜爾豆膠、黃原膠和CMC-Na的復(fù)合穩(wěn)定劑以及0.02 %?0.03 %的茶多酚進(jìn)行飲料復(fù)配;最后，進(jìn)行滅菌即得到茶多酚抗氧化肽飲料。
[0013]所述步驟I)的羊奶粉與蒸餾水按1:6-10的質(zhì)量比配成復(fù)原乳。
[OOM] 所述步驟I)的離心采用6500rmp離心15min去除脂肪制得脫脂乳。
[0015]所述步驟2)脫脂乳的溫度為45°C，鹽酸的濃度為lmol/L，磁力攪拌強(qiáng)度為1200rpm，離心米用 8000rmp 離心 15min。
[0016]所述步驟3) NaOH溶液的濃度為Imo I/L。
[0017]所述步驟4)Alcalase酶和木瓜蛋白酶的質(zhì)量比為1:1-3或1-2:1，滴加的NaOH溶液為0.lmol/L，水解時(shí)間為60min?150min，滅酶采用95°C水浴滅酶101]1；[11，離心采用8000；?^)離心15min。
[0018]所述的混合酸中檸檬酸與蘋果酸按2:1的質(zhì)量比混合。
[0019]所述的復(fù)合穩(wěn)定劑中瓜爾豆膠、黃原膠和CMC-Na按1:3:3的質(zhì)量比混合。
[0020]所述步驟5)的滅菌在85°C進(jìn)行15min。
[0021]所述的茶多酚采用下述方法制備:取1g的綠茶，用沸水浸泡過濾出茶汁，調(diào)節(jié)溶液的pH至5.0?6.5，然后加入10?16g CaCl2和AlCl3混合的復(fù)合型沉淀劑，其中CaCl2與AlCl3按1:1-3或1-2:1的質(zhì)量比混合，將得到的沉淀加入到質(zhì)量濃度為40%的硫酸溶液中至沉淀完全溶解得混合溶液，然后，再加入混合溶液質(zhì)量20 %?80 %的乙醇溶液，在55°C?75°C、超聲功率在200W?380W下提取30?90min，將得到的沉淀經(jīng)冷凍干燥制得茶多酚。
[0022]按本發(fā)明的制備方法得到的茶多酚抗氧化肽飲料可以降低體內(nèi)自由基水平，幫助機(jī)體抵御疾病。同時(shí)，食物和藥物的抗氧化性相比，可以長期食用，對(duì)于預(yù)防和治療如心血管、糖尿病、癌癥和衰老等慢性病有很好的幫助。將茶多酚添加到抗氧化肽的飲料中，不僅是其具有淡淡的茶香，而且茶多酚本身也具有抗氧化性，因此進(jìn)一步提升了飲料的抗氧化功能。而且，使得增加了飲料的具有抗癌、抗輻射、降壓降血脂和減肥等保健功能。
【具體實(shí)施方式】
[0023]實(shí)施例1:
[0024]I)將羊奶粉與蒸餾水按1:8的質(zhì)量比配成復(fù)原乳，采用6500rmp離心15min去除復(fù)原乳中的脂肪制得脫脂乳；
[0025]2)向45°C的脫脂乳中滴加lmol/L的鹽酸并采用1200rpm的磁力攪拌，直到pH值達(dá)為4.6，使酪蛋白沉淀下來，采用8000rmp離心15min棄去上清液，將沉淀進(jìn)行冷凍干燥得酪蛋白干粉；
[0026]3)將酪蛋白干粉制成的質(zhì)量濃度為2%的酪蛋白溶液，放入恒溫水浴鍋中，加熱至45°C，滴加lmol/L的NaOH溶液調(diào)節(jié)酪蛋白溶液pH為6.5;
[0027]4)向酪蛋白溶液中加入酪蛋白溶液質(zhì)量2%的Alcalase酶和木瓜蛋白酶的混合物，反應(yīng)過程中滴加0.lmol/L的NaOH溶液保持pH不變，水解60min后，采用95°C水浴滅酶10min，8000rmp離心15min，棄沉淀取上清液得酶解液；用紫外分光光度計(jì)測(cè)得DPPH自由基清除能力為54.82%;
[0028]所述的Alcalase酶和木瓜蛋白酶的質(zhì)量比為1:1 ；
[0029]5)向酶解液中添加酶解液質(zhì)量0.6 %的β_環(huán)狀糊精，在室溫下攪拌進(jìn)行脫苦處理，然后加入酶解液質(zhì)量6%的白砂糖、0.5%的按2:1的質(zhì)量比混合的檸檬酸與蘋果酸的混合酸、0.2%的按1:3:3的質(zhì)量比混合的瓜爾豆膠、黃原膠和CMC-Na的復(fù)合穩(wěn)定劑以及0.02%的茶多酚進(jìn)行飲料復(fù)配;最后，在85°C進(jìn)行15min滅菌即得到茶多酚抗氧化肽飲料。將經(jīng)過殺菌的抗氧化肽飲料在4°C條件下進(jìn)行保藏。飲料呈淡黃色，有淡淡的茶香味，口感較好，此時(shí)測(cè)得的抗氧化性為57.23%。
[0030]實(shí)施例2:
[0031]I)將羊奶粉與蒸餾水按1:6的質(zhì)量比配成復(fù)原乳，采用6500^^離心1511^11去除復(fù)原乳中的脂肪制得脫脂乳；
[0032]2)向45°C的脫脂乳中滴加lmol/L的鹽酸并采用1200rpm的磁力攪拌，直到pH值達(dá)為4.6，使酪蛋白沉淀下來，采用8000rmp離心15min棄去上清液，將沉淀進(jìn)行冷凍干燥得酪蛋白干粉；
[0033 ] 3)將酪蛋白干粉制成的質(zhì)量濃度為3 %的酪蛋白溶液，放入恒溫水浴鍋中，加熱至50°C，滴加lmol/L的NaOH溶液調(diào)節(jié)酪蛋白溶液pH為7.0;
[0034]4)向酪蛋白溶液中加入酪蛋白溶液質(zhì)量3 %的Alcalase酶和木瓜蛋白酶的混合物，反應(yīng)過程中滴加0.lmol/L的NaOH溶液保持pH不變，水解90min后，采用95°C水浴滅酶10min，8000rmp離心15min，棄沉淀取上清液得酶解液；用紫外分光光度計(jì)測(cè)得DPPH自由基清除能力為61.69 %。
[0035]所述的Alcalase酶和木瓜蛋白酶的質(zhì)量比為1:2;
[0036]5)向酶解液中添加酶解液質(zhì)量0.8 %的β_環(huán)狀糊精，在室溫下攪拌進(jìn)行脫苦處理，然后加入酶解液質(zhì)量8%的白砂糖、0.6%的按2:1的質(zhì)量比混合的檸檬酸與蘋果酸的混合酸、0.2 5 %的按1: 3: 3的質(zhì)量比混合的瓜爾豆膠、黃原膠和C M C - N a的復(fù)合穩(wěn)定劑以及
0.025%的茶多酚進(jìn)行飲料復(fù)配;最后，在85°C進(jìn)行15min滅菌即得到茶多酚抗氧化肽飲料。將經(jīng)過殺菌的抗氧化肽飲料在4°C條件下進(jìn)行保藏。飲料呈淡黃色，有淡淡的茶香味，口感較好，此時(shí)測(cè)得的抗氧化性為63.51 %。
[0037]本實(shí)施例的茶多酚采用下述方法制備:取1g的綠茶，用沸水浸泡過濾出茶汁，調(diào)節(jié)溶液的pH至5.0，然后加入1g CaCl2和AlCl3混合的復(fù)合型沉淀劑，其中CaCl2與AlCl3按1:1的質(zhì)量比混合，將得到的沉淀加入到質(zhì)量濃度為40%的硫酸溶液中至沉淀完全溶解得混合溶液，然后，再加入混合溶液質(zhì)量20 %的乙醇溶液，在55°C、超聲功率在200W下提取30min，將得到的沉淀經(jīng)冷凍干燥制得茶多酚。
[0038]實(shí)施例3:
[0039]I)將羊奶粉與蒸餾水按1:10的質(zhì)量比配成復(fù)原乳，采用6500^^離心151^11去除復(fù)原乳中的脂肪制得脫脂乳；
[0040]2)向45°C的脫脂乳中滴加lmol/L的鹽酸并采用1200rpm的磁力攪拌，直到pH值達(dá)為4.6，使酪蛋白沉淀下來，采用8000rmp離心15min棄去上清液，將沉淀進(jìn)行冷凍干燥得酪蛋白干粉；
[0041 ] 3)將酪蛋白干粉制成的質(zhì)量濃度為3 %的酪蛋