專(zhuān)利名稱(chēng)：雙歧桿菌制劑及其液固結(jié)合發(fā)酵工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于新型的抗衰保健食品一雙歧桿菌制劑及其液一同結(jié)合發(fā)酵工藝，屬于應(yīng)用微生物和保健食品科技領(lǐng)域。
近幾年以來(lái)，在國(guó)內(nèi)外醫(yī)藥界，衰老生物學(xué)界和微生物技術(shù)領(lǐng)域中，人體益生菌的研制工藝有較迅速發(fā)展。由于益生菌作為一種微生態(tài)制劑(Micro-ecological Preparation)是指提自健康嬰兒腸道菌群的益生菌制品，食用后可調(diào)整人體腸道菌群的微生態(tài)平衡，并產(chǎn)生可抑制有害微生物繁殖的有機(jī)酸，從而減緩“大腸中毒”；它可保護(hù)體內(nèi)蛋白質(zhì)和各種酶系的生物活性，并刺激免疫活性產(chǎn)生；它可清除人體代謝過(guò)程中產(chǎn)生的自由基，可重現(xiàn)中老年人機(jī)體年輕時(shí)的表觀微生物環(huán)境，起到延緩衰老，防治疾病的作用；此外，由于它含有多種氨基酸，維生素和人體必需的微量元素，因此可補(bǔ)充人體營(yíng)養(yǎng)，增進(jìn)健康。正因如此，國(guó)內(nèi)外近年來(lái)研制生產(chǎn)的含不同益生菌的抗老保健食品頗受人們特別是中老年人的青睞。
但目前市場(chǎng)上常見(jiàn)的國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)的益生菌制品中存在以下不足①營(yíng)養(yǎng)成分局限性很大；②現(xiàn)有益生菌制劑的生產(chǎn)工藝均為液體發(fā)酵(深層發(fā)酵)；生產(chǎn)工藝復(fù)雜設(shè)備昂貴投資大，產(chǎn)品價(jià)格高，不易普及推廣；③現(xiàn)有同類(lèi)產(chǎn)品均為液體制劑，益生菌易衰老死亡，因此產(chǎn)品中活菌比例較低，產(chǎn)品不易保存。
本發(fā)明的目的在于革新發(fā)酵工藝，降低生產(chǎn)成本，提高雙歧桿菌細(xì)胞總數(shù)，延長(zhǎng)雙歧桿菌的存活時(shí)間，從而充分發(fā)揮其抗衰老保健的作用。
本發(fā)明核心內(nèi)容是以持選的益生菌一雙歧桿菌(Bifidoac-terium sp.)為菌種，運(yùn)用液一同結(jié)合的發(fā)酵工藝進(jìn)行培養(yǎng)發(fā)酵，并在發(fā)酵產(chǎn)物中適量加入賴(lài)氨酸，蛋氨酸，谷氨酸，生物素和B族維生素配制而成。
本發(fā)明具體實(shí)施步驟為1，菌種培養(yǎng)以特選的雙歧桿菌(Bifidoacterium sp.)為菌種，在液態(tài)為主的環(huán)境下，進(jìn)行三級(jí)培養(yǎng)。
①斜面培養(yǎng)斜面采用牛肉膏，蛋白胨，蔗糖，NaCl和水組成常規(guī)培養(yǎng)基，PH7.0～7.2。經(jīng)滅菌接種后，在30℃下培養(yǎng)24小時(shí)。
②三角瓶培養(yǎng)三角瓶培養(yǎng)采用麩皮加水煮30分鐘過(guò)濾，濾液加入適量的蛋白胨，牛肉膏，蔗糖，食鹽為培養(yǎng)基，PH7～7.2，分裝入三角瓶，經(jīng)滅菌，接種后在室溫下(25～30℃)培養(yǎng)36小時(shí)左右，定時(shí)搖動(dòng)(每小時(shí)一次)，當(dāng)細(xì)胞數(shù)達(dá)到130×10個(gè)/克時(shí)終止培養(yǎng)。
③擴(kuò)大培養(yǎng)擴(kuò)大培養(yǎng)仍采用三角瓶培養(yǎng)所用培養(yǎng)液，經(jīng)滅菌后放入已消毒的單缸洗衣機(jī)內(nèi)，接入三角瓶培養(yǎng)的菌種液，室溫下培養(yǎng)(室內(nèi)用紫外燈和甲醛加高錳酸鉀做滅菌處理)，一小時(shí)開(kāi)啟洗衣機(jī)45分鐘，停機(jī)15分鐘，待細(xì)胞數(shù)達(dá)135×10個(gè)/克時(shí)，終止培養(yǎng)，備用。
2，同體發(fā)酵①發(fā)酵原料配制發(fā)酵原料分液態(tài)培養(yǎng)料和同體培養(yǎng)料兩種。
A，液態(tài)培養(yǎng)料取打漿土豆和麩皮約占總量3～5％，加水煮25分鐘，再加入蛋白胨(占總量0.5～0.8％)，生肉膏(0.2～0.4％)，蔗糖(3～7％)和食鹽(0.02～0.04％)溶解而成，調(diào)PH7～7.2。
B，同態(tài)培養(yǎng)料用精玉米粉(45～50％)，精大米粉(12～15％)，脫脂大豆粉(15～20％)，全脂乳粉(25～30％)以及食用酵母膏(0.2～0.3％)混合而成。
②發(fā)酵同體培養(yǎng)料和液態(tài)培養(yǎng)料按1∶0.4的比例和料，高壓滅菌一小時(shí)，冷卻至40℃以下，備用。
將經(jīng)三級(jí)培養(yǎng)的雙歧桿菌，接種到經(jīng)滅菌、冷卻的發(fā)酵原料中，進(jìn)行同體發(fā)酵。將接種后的發(fā)酵原料攤放在無(wú)菌潔凈的帶蓋搪瓷盤(pán)中，平均每盤(pán)350克左右，在室溫下發(fā)酵24～36小時(shí)，然后干燥粉碎，備用。
3，產(chǎn)品配制及成型將雙歧桿菌發(fā)酵產(chǎn)物加入適量賴(lài)氨酸(0.02～0.2％)，谷氨酸(0.04～0.2％)，蛋氨酸(0.05～0.15％)，生物素(0.0001％)和醫(yī)用B族維生素(VB1，VB2，VB3，VB5，VB6，VB7等占0.002％)調(diào)質(zhì)而成產(chǎn)品混合料。把產(chǎn)品混合料經(jīng)粉碎后壓制成糖衣片劑或裝膠囊，再經(jīng)包裝成產(chǎn)品入庫(kù)。
本產(chǎn)品的工藝流程為在液態(tài)為主環(huán)境下進(jìn)行三級(jí)菌種培養(yǎng)，然后進(jìn)行配制液態(tài)和同態(tài)培養(yǎng)料，再進(jìn)行和料，經(jīng)過(guò)接三級(jí)菌種后，進(jìn)行同體發(fā)酵，發(fā)酵后真空干燥，再進(jìn)行產(chǎn)品調(diào)質(zhì)，經(jīng)質(zhì)檢，粉碎，成型后包裝入庫(kù)。
本發(fā)明主要技術(shù)指標(biāo)去掉糖衣后，內(nèi)為黃棕色粉末，或團(tuán)粒，具有益生菌同態(tài)制劑的特殊氣味，無(wú)異味，略甜，適口性好，無(wú)異物。
理化及微生物指標(biāo)為蛋白質(zhì)≥19％；水分≤7％，灰分≤4％，砷≤0.2Mg/Kg，鉛≤0.1Mg/Kg，益生菌總數(shù)(出廠時(shí))≥100×10個(gè)/克；大腸菌群菌≤25個(gè)/克，霉菌總數(shù)≤90個(gè)/克，黃曲霉素符合規(guī)定，致病菌不得檢出。
本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)由于采用液一同體相結(jié)合的發(fā)酵工藝，而具有投資少，工藝簡(jiǎn)便，產(chǎn)品和成本價(jià)格低廉，便于推廣應(yīng)用等優(yōu)點(diǎn)。產(chǎn)品有豐富的氨基酸，微生素和人體必需的微量元素，并有較強(qiáng)的生物活性。與液體發(fā)酵工藝生產(chǎn)的類(lèi)似產(chǎn)品相比，其營(yíng)養(yǎng)成分齊全，保質(zhì)期長(zhǎng)，抗病，免疫和延緩衰老的效果明顯。
權(quán)利要求
1，一種雙歧桿菌制劑是指以一定配比的動(dòng)植物蛋白粉(膏)，碳水化合物，食用氨基酸，醫(yī)用B族維生素，生物活性物質(zhì)，蔗糖和食鹽等為原料，運(yùn)用液同結(jié)合生產(chǎn)工藝，對(duì)特選的益生菌雙歧桿菌進(jìn)行培養(yǎng)發(fā)酵并經(jīng)調(diào)質(zhì)而成產(chǎn)品。
2，按照權(quán)利要求1所述的雙歧桿菌制劑其專(zhuān)門(mén)生產(chǎn)的液一固體相結(jié)合的發(fā)酵工藝，其特征是對(duì)特選的雙歧桿菌在液態(tài)(包括乳狀)為主的環(huán)境下進(jìn)行一，二，三級(jí)菌種培養(yǎng)，然后轉(zhuǎn)入液態(tài)培養(yǎng)料與固態(tài)培養(yǎng)料混合而成的發(fā)酵原料中進(jìn)行同體發(fā)酵。
3，按照權(quán)利要求2所述的雙歧桿菌制劑其專(zhuān)門(mén)生產(chǎn)的液一固體相結(jié)合的發(fā)酵工藝，其特征是所說(shuō)的對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行調(diào)質(zhì)是指將發(fā)酵產(chǎn)物加入占總量0.02～0.2％的賴(lài)氨酸，0.04～0.2％的谷氨酸，0.05～0.15％的蛋氨酸，0.002％的醫(yī)用B族維生素和0.0001％的生物素。
4，按照權(quán)利要求2所述的雙歧桿菌制劑其專(zhuān)門(mén)生產(chǎn)的液一固體相結(jié)合的發(fā)酵工藝，其特征是所說(shuō)的用于同體發(fā)酵的液態(tài)培養(yǎng)料是指取打漿土豆和麩皮約占總量3～6％，加水煮25分鐘，再加入蛋白胨(占總量0.5～0.8％)，生肉膏(占總量0.2～0.4％)，蔗糖(占3～7％)和食鹽(占0.02～0.04％)溶解而成，調(diào)PH值7～7.2。
5，按照權(quán)利要求2所述的雙歧桿菌制劑其專(zhuān)門(mén)生產(chǎn)的液一固體相結(jié)合的發(fā)酵工藝，其特征是所說(shuō)的用于固體發(fā)酵的固體培養(yǎng)料是指用精玉米粉(占總量45～50％)，精大米粉(占12～15％)，脫脂大豆粉(占15～20％)，全脂乳粉(占25～30％)以及食用酵母膏(占0.2～0.3％)混合而成，同體培養(yǎng)料與液態(tài)培養(yǎng)料的比例為1∶0.4。
全文摘要
一種新型的抗衰保健食品雙歧桿菌制劑及其液-固結(jié)合發(fā)酵工藝是指以一定配比的動(dòng)植物蛋白粉(膏)，碳水化合物，食用氨基酸，醫(yī)用B族維生素，生物活性物質(zhì)，蔗糖和食鹽等原料，運(yùn)用液-固結(jié)合生產(chǎn)工藝，對(duì)特選的益生菌雙歧桿菌進(jìn)行培養(yǎng)發(fā)酵及其產(chǎn)品。本發(fā)明除具有國(guó)內(nèi)外液體工藝生產(chǎn)的益生菌食品的抗衰保健，提高機(jī)體免疫力特點(diǎn)外，其優(yōu)點(diǎn)在于設(shè)備投資少，操作簡(jiǎn)便，成本較低；產(chǎn)品所含益生菌總數(shù)在100億/克以上，是國(guó)內(nèi)外同類(lèi)品的100倍以上，成分豐富，保健功能齊全，抗病，免疫和延緩衰老的效果明顯。
文檔編號(hào)C12N1/20GK1144270SQ95104660
公開(kāi)日1997年3月5日 申請(qǐng)日期1995年5月31日 優(yōu)先權(quán)日1995年5月31日
發(fā)明者王厚德 申請(qǐng)人:李盛學(xué), 向建華