專利名稱:新型復(fù)合酶飼料添加劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種采用微生物工程技術(shù)，利用農(nóng)作物秸稈、殼皮、餅等副產(chǎn)物，以多株菌生產(chǎn)高蛋白飼料和畜禽飼料添加劑，使廢物得到了有效的利用，變廢為寶，原料來源取之不盡，用之不竭，提高了詞料投入產(chǎn)出比，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。該技術(shù)由于含有大量的活性酶和促長因子，提高了動物新陳代謝功能，使之產(chǎn)生對動物機(jī)體互相協(xié)同及綜合平衡作用，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)在動物腸道中快速降解，促進(jìn)動物對飼料營養(yǎng)成份的吸收和轉(zhuǎn)化，以達(dá)到促進(jìn)動物增長和節(jié)約飼料的目的。該技術(shù)主要應(yīng)用于豬、雞、牛、羊等動物飼料促長劑和生物高蛋白詞料。本發(fā)明生產(chǎn)方法及工藝易掌握，投資小，成本低，適宜個體、中小企業(yè)和鄉(xiāng)鎮(zhèn)投資建廠。
技術(shù)背景
新型微生物飼料添加劑是一種具有促進(jìn)動物消化吸收、提高飼料利用率、減少動物疾病的飼料添加劑，是應(yīng)用現(xiàn)代生物工程技術(shù)生產(chǎn)的一種具有生物活性的特殊蛋白質(zhì)。是國家"八五"科技攻關(guān)和863支持的項(xiàng)目，同時也是農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)支持的科技項(xiàng)目。
我國是世界上第一生豬飼養(yǎng)大國，擁有世界上單胃動物最大生產(chǎn)量，使用酶制劑潛力很大。在生產(chǎn)中添加酶制劑輔助和促進(jìn)飼料的消化吸收時，特別對仔豬生長發(fā)育顯得十分重要。因?yàn)樽胸i體內(nèi)酶的活性和消化吸收能力不如成年豬；另外，早期斷奶后，攝取營養(yǎng)的形式由易消化的母乳轉(zhuǎn)為較復(fù)雜的以谷物為主的日糧，在短時間內(nèi)仔豬消化道難以完全適應(yīng)這種變化，易引起消化不良和腹瀉。如在日糧中添加配制劑，是提高斷奶仔豬飼料利用率的一個新途徑。
預(yù)計未來10年內(nèi)，隨著科技水平不斷提高,生產(chǎn)成本的下降，新型微生物飼料添加劑的產(chǎn)銷量必然大幅度提高。飼用酶制劑在生產(chǎn)中的普遍應(yīng)用雖然還面臨著許多問題,但隨著生物技術(shù)特別是基因工程技術(shù)和生產(chǎn)技術(shù)的提高，都將逐一解決。隨著人們生活水平的提高及環(huán)境意識的增強(qiáng),飼用酶制劑以其不產(chǎn)生殘留、無抗藥性、不污染環(huán)境等優(yōu)勢將會進(jìn)一步被推廣應(yīng)用。
現(xiàn)有技術(shù)中有多篇專利文件公開了種種高效生物蛋白酶復(fù)合動物促長劑系列產(chǎn)品，其中最接近的對比文獻(xiàn)為公開號CN1338511A公開了利用硫色曲霉等制作微生物飼料添加劑，其缺點(diǎn)是 一是菌 種未列入農(nóng)業(yè)部公布的飼料添加劑目錄中；二是工藝設(shè)計過于簡單。
公開號CN1175361A公開了利用生物酶制作微生物飼料添加劑，其缺點(diǎn)是工藝制作公 開不完全，在生產(chǎn)和制造中很難實(shí)現(xiàn)。
公開號1435114A公開了利用多種生物酶制作微生物詞料添加劑，其缺點(diǎn)是 一是生物 菌種的名稱和編號以及工藝沒有完全公開，無法制作生物菌劑；二是實(shí)例不具體。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)工藝設(shè)計和配方不足，提供一種采用制作微生物復(fù)合酶 與微量元素、維生素、礦物質(zhì)、氨基酸等以及載體復(fù)配生產(chǎn)畜禽飼料添加劑的方法，采用制 作多菌生物復(fù)合酶與合理的微量元素、維生素、礦物質(zhì)、氨基酸等復(fù)配，使之產(chǎn)生對動物機(jī) 體互相協(xié)同及綜合平衡作用，通過生物多菌復(fù)合酶與其它物質(zhì)的作用，充分利用飼料的利用 率，提高動物對飼料的吸收及其轉(zhuǎn)化，以達(dá)到促進(jìn)動物增長和節(jié)約飼料的目的。
本技術(shù)發(fā)明中應(yīng)用了以下幾個生物菌種和有機(jī)物、微量元素，其中，生物菌種是從中國 微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心購進(jìn)并經(jīng)復(fù)活、誘變、分離、純化后，選取高活
性菌株做為生產(chǎn)菌種；無機(jī)原料以及微量元素，需從市場購買；有機(jī)物農(nóng)作物副產(chǎn)物需從有 關(guān)部門收取或收購，經(jīng)發(fā)酵和烘干處理。
本技術(shù)發(fā)明的微生物高蛋白復(fù)合動物促長劑系列產(chǎn)品及其生產(chǎn)方法，包括以下幾個步
驟
1.菌種及菌劑的制作-
1)黑曲酶AS3. 316果膠酶的制作與培養(yǎng)
(1 )斜面薪中制作
①培養(yǎng)基制作
培養(yǎng)基蔗糖30.0g，硝酸鈉3.0g，硫酸鎂0.5g，氯化鉀0.5g，硫酸亞鐵0.01g，磷酸氫二鉀 l.Og，瓊脂15.0g，蒸餾水1000mL。放置電爐上溶解，待瓊脂溶解后，裝入試管，每管裝量 一般為管的五分之一處。裝管后管口塞上棉塞,用報紙包好，放入滅菌鍋中，12rC滅菌30min。 滅菌后，拔掉電源，待壓力回到O時將放氣閥直立，打開滅菌鍋，將培養(yǎng)基拿出擺成斜面， 斜面長度為管的1/3處，等斜面凝固后開始接種。② 接種
第一，將接種室及接種工具用紫外線滅菌20 30min，關(guān)掉滅菌燈5 10min后再進(jìn)行接種。 第二，用右手小指、無名指和手掌拔下棉塞并夾緊，棉塞下部應(yīng)露在手外，勿放桌上， 以免污染；
第三，將試管口迅速在火焰上微燒一周，使試管口上可能沾染的少量雜菌或帶菌塵埃得 以燒死；
第四，將灼燒過的接種環(huán)伸入菌種管內(nèi)，先將接種環(huán)接觸一下沒有長菌的培養(yǎng)基部分， 使其冷卻，以免燙死菌體。然后用接種環(huán)輕輕挑取黑曲霉孢子數(shù)環(huán)接入盛有10mL無菌水及 玻璃珠的三角瓶中，振蕩，使孢子充分散開。
第五，在酒精燈火焰旁迅速打開一空白斜面，用微量移液器將孢子懸液均勻接種到固體 斜面上。
第六，灼燒試管口，并在火旁將棉塞塞上，塞棉塞時，不要將試管去迎棉塞，以免試管 在移動時污染雜菌；
③ 培養(yǎng)
將接種好的試管斜面放入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度為30°C左右，培養(yǎng)時間為48~72左右， 待培養(yǎng)基表面長出并布滿黃褐色孢子為正常,其它顏色為感染雜菌則應(yīng)淘汰。 (2) 二級菌種培養(yǎng)
① 培養(yǎng)基制作
豆餅粉15g，麥麩55g,果渣29g，硫酸銨0.7g，磷酸氫二鉀0.3g， pH值6-6.5，加水至 用手緊握指縫有水而不滴下來為宜(料水比為1 : l左右)，裝入罐頭瓶，12rC滅菌30min。
② 接種
首先將接種室及接種工具用紫外線滅菌20 30min，關(guān)掉滅菌燈5~10min后再進(jìn)行操作。 接種時先將手和接種工具用酒精消毒，將灼燒過的接種環(huán)伸入菌種管內(nèi)，先將接種環(huán)接觸一 下沒有長菌的培養(yǎng)基部分，使其冷卻，以免燙死菌體。用接種環(huán)輕輕挑取黑曲霉孢子數(shù)環(huán)接 入盛有l(wèi)OmL無菌水及玻璃珠的三角瓶中，振蕩，使孢子充分散開。然后將孢子懸液接種到 罐頭瓶固體培養(yǎng)基中。
③ 培養(yǎng)將接種好的罐頭瓶放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30。C左右，培養(yǎng)時間為48小時左右，待培養(yǎng)基中長出并布滿黃褐色孢子為正常，其它顏色為感染雜菌則應(yīng)淘汰。(3)三級菌酶發(fā)酵
① 培養(yǎng)基制作
豆餅粉15g，麥麩55g，果渣29g,硫酸銨0.7g，磷酸氫二鉀0.3g, pH值6-6.5，加水至用手緊握指縫有水而不滴下來為宜(料水比為1 : l左右)，裝入滅菌袋，121。C滅菌30min。
② 接種
首先將接種室及接種工具用紫外線滅菌20 30min，關(guān)掉滅菌燈5~10min后再進(jìn)行操作。接種時先將手和接種工具用酒精消毒，把二級菌種倒入培養(yǎng)料中攪拌均勻，接種量濕菌種為3%,干菌種為1.5% ;
③ 菌酶發(fā)酵
把接好的三級菌劑放入恒溫培養(yǎng)箱或發(fā)酵機(jī)或淺層在25°C~30°C的無菌室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為24-36小時左右，直到培養(yǎng)料長出并布滿白色菌絲為成品，如長出有其它顏色為雜菌。 成品處理
將發(fā)酵成品平鋪，置于鼓風(fēng)干燥箱中3(TC低溫干燥，干燥后粉碎，裝入密封袋，放入3-5度空間保藏。
2)黑曲酶AS3. 350蛋白酶的制作與培養(yǎng)(1)斜面菌種培養(yǎng)
① 培養(yǎng)基
蔗糖30.0g，硝酸鈉3.0g,硫酸鎂0.5g,氯化鉀0.5g，硫酸亞鐵0.01g，磷酸氫二鉀l.Og，瓊脂15.0g,蒸餾水1000mL。放置電爐上溶解，待瓊脂溶解后，裝入試管，每管裝量一般為管的五分之一處。裝管后管口塞上棉塞，用報紙包好，放入滅菌鍋中，12rC滅菌30min。滅菌后，拔掉電源，待壓力回到0時將放氣閥直立，打開滅菌鍋，將培養(yǎng)基拿出擺成斜面，斜面長度為管的1/3處，等斜面凝固后開始接種。
② 接種
第一，將接種室及接種工具用紫外線滅菌20 30min,關(guān)掉滅菌燈5~10min后再進(jìn)行接種。第二，用右手小指、無名指和手掌拔下棉塞并 緊，棉塞下部應(yīng)露在手外，勿放桌上，以免污染；
第三，將試管口迅速在火焰上微燒一周，使試管口上可能沾染的少量雜菌或帶菌塵埃得以燒死；
第四，將灼燒過的接種環(huán)伸入菌種管內(nèi)，先將接種環(huán)接觸一下沒有長菌的培養(yǎng)基部分，使其冷卻，以免燙死菌體。然后用接種環(huán)輕輕挑取泡盛曲霉孢子數(shù)環(huán)接入盛有10mL無菌水及玻璃珠的三角瓶中，振蕩，使孢子充分散開。
第五，在酒精燈火焰旁迅速打開一空白斜面，用微量移液器將孢子懸液均勻接種到固體斜面上。
第六，灼燒試管口，并在火旁將棉塞塞上，塞棉塞時，不要將試管去迎棉塞，以免試管在移動時污染雜菌；③培養(yǎng)
將接種好的試管斜面放入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度為30。C左右，培養(yǎng)時間為48-72小時左右，待培養(yǎng)基表面長出并布滿黃褐色孢子為正常,其它顏色為感染雜菌則應(yīng)淘汰。(2) 二級菌種培養(yǎng)
① 培養(yǎng)基制作
豆餅粉15g,麥麩55g,蛋白粉或玉米粉29g,硫酸銨0.7g，磷酸氫二鉀0.3g， pH值6-6.5，加水至用手緊握指縫有水而不滴下來為宜(料水比為1 : l左右)，裝入罐頭瓶，121'C滅菌30min。
② 接種
首先將接種室及接種工具用紫外線滅菌20~30min，關(guān)掉滅菌燈5~10min后再進(jìn)行操作。接種時先將手和接種工具用酒精消毒，將灼燒過的接種環(huán)伸入菌種管內(nèi)，先將接種環(huán)接觸一下沒有長菌的培養(yǎng)基部分，使其冷卻，以免燙死菌體。用接種環(huán)輕輕挑取黑曲霉孢子數(shù)環(huán)接入盛有l(wèi)OmL無菌水及玻璃珠的三角瓶中，振蕩，使孢子充分散開。然后將孢子懸液接種到罐頭瓶固體培養(yǎng)基中。
③ 培養(yǎng)
將接種好的罐頭瓶放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30。C左右，培養(yǎng)時間為48小時左右，待培養(yǎng)基中長出并布滿褐色孢子為正常,其它顏色為感染雜菌則應(yīng)淘汰。(3)三級菌酶發(fā)酵
① 培養(yǎng)基制作
豆餅粉15g，麥麩55g，玉米粉29g，硫酸銨0.7g，磷酸氫二鉀0.3g， pH值6-6.5，加水至用手緊握指縫有水而不滴下來為宜(料水比為1 : 1左右)，裝入滅菌袋，121'C滅菌30min。
② 接種
首先將接種室及接種工具用紫外線滅菌20 30min，關(guān)掉滅菌燈5 10min后再進(jìn)行操作。接種時先將手和接種工具用酒精消毒，把二級菌中倒入培養(yǎng)料中攪拌均勻，接種量濕菌種為3%，干菌種為1.5% ;
③ 菌酶發(fā)酵
把接好的三級菌劑放入恒溫培養(yǎng)箱或發(fā)酵機(jī)或淺層在25°C~30°C的無菌室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為24-36小時左右，直到培養(yǎng)料長出并布滿白色菌絲為成品，如長出有其它顏色為雜菌。
④ 成品處理
將發(fā)酵成品平鋪，置于鼓風(fēng)干燥箱中3(TC低溫干燥，干燥后粉碎，裝入密封袋，放入3-5度空間保藏。
3)黑曲霉ACCC30785 (植酸酶)制作(1)斜面菌種培養(yǎng)
① 培養(yǎng)基制作
5°Be度麥芽汁30mL，葡萄糖lg，碳酸鈉O.lg，硫酸鎂0.02g，氯化鉀0.03g，硫酸鐵O.OOlg,磷酸氫二鉀O.lg，瓊脂2g，蒸餾水100mL, pH值5-6，放置電爐上溶解，待瓊脂溶解后，分別裝入試管，每管裝量一般為管的五分之一處。裝管后管口塞上棉塞，用報紙包好，放入滅菌鍋中，12rC滅菌30min。滅菌后，拔掉電源，待壓力回到0時將放氣閥直立，打開滅菌鍋，將培養(yǎng)基拿出擺成斜面，斜面長度為管的l/3處，等斜面凝固后開始接種；
② 接種
第一，將接種室及接種工具用紫外線滅菌20 30min，關(guān)掉滅菌燈5 10rnin后再進(jìn)行接種。第二，用右手小指、無名指和手掌拔下棉塞并夾緊，棉塞下部應(yīng)露在手外，勿放桌上，以免污染；
第三，將試管口迅速在火焰上微燒一周，使試管口上可能沾染的少量雜菌或帶菌塵埃得以燒死；
第四，將灼燒過的接種環(huán)伸入菌種管內(nèi)，先將接種環(huán)接觸一下沒有長菌的培養(yǎng)基部分，使其冷卻，以免燙死菌體。然后用接種環(huán)輕輕挑取黑曲霉孢子數(shù)環(huán)接入盛有10mL無菌水及玻璃珠的三角瓶中，振蕩，使孢子充分散開。
第五，在酒精燈火焰旁迅速打開一空白斜面，用微量移液器將孢子懸液均勻接種到固體斜面上。
第六，灼燒試管口，并在火旁將棉塞塞上，塞棉塞時，不要將試管去迎棉塞，以免試管在移動時污染雜菌；③培養(yǎng)
將接種好的試管斜面放入恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度為30°C左右，培養(yǎng)時間為48-72小時左右，待培養(yǎng)基表面長出并布滿黑色孢子為正常,其它顏色為感染雜菌則應(yīng)淘汰。
(2) 二級菌種培養(yǎng)
① 培養(yǎng)基制作
豆餅粉15g，麥麩55g,蛋白粉或玉米粉29g，硫酸銨0.7g，磷酸氫二鉀0.3g， pH值6-6.5，加水至用手緊握指縫有水而不滴下來為宜(料水比為l:l左右)，裝入罐頭瓶，12rc滅菌30min。
② 接種
首先將接種室及接種工具用紫外線滅菌20 30min，關(guān)掉滅菌燈5~10min后再進(jìn)行操作。接種時先將手和接種工具用酒精消毒，將灼燒過的接種環(huán)伸入菌種管內(nèi)，先將接種環(huán)接觸一下沒有長菌的培養(yǎng)基部分，使其冷卻，以免燙死菌體。用接種環(huán)輕輕挑取黑曲霉孢子數(shù)環(huán)接入盛有l(wèi)OmL無菌水及玻璃珠的三角瓶中，振蕩，使孢子充分散開。然后將孢子懸液接種到罐頭瓶固體培養(yǎng)基中。
③ 培養(yǎng)
將接種好的罐頭瓶放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30。C左右，培養(yǎng)時間為48小時左右，待培養(yǎng)基表面長出并布滿黑色孢子為正常，其它顏色為感染雜菌則應(yīng)淘汰。
(3) 三級菌酶發(fā)酵①培養(yǎng)基制作豆餅粉15g，麥麩55g，玉米粉29g，硫酸銨0.7g，磷酸氫二鉀0.3g， pH值6-6.5，加水至用手緊握指縫有水而不滴下來為宜(料水比為1 : 1左右)，裝入滅菌袋，12rC滅菌30min。
② 接種
首先將接種室及接種工具用紫外線滅菌20 30min，關(guān)掉滅菌燈5 10min后再進(jìn)行操作。接種時先將手和接種工具用酒精消毒，把二級菌中倒入培養(yǎng)料中攪拌均勻,接種量濕菌種為3%，干菌種為1.5% ;
③ 菌酶發(fā)酵
把接好的三級菌劑放入恒溫培養(yǎng)箱或發(fā)酵機(jī)或淺層在25。C 30。C的無菌室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為24-36小時左右，直到培養(yǎng)料長出并布滿白色菌絲為成品，如長出有其它顏色為雜菌。 成品處理
將發(fā)酵成品平鋪，置于鼓風(fēng)干燥箱中3(TC低溫干燥，干燥后粉碎，裝入密封袋，放入3-5度空間保藏。
2. 酶制劑配比為
果膠酶蛋白酶植酸酶比為1:3:3
3. 生物高蛋白發(fā)酵飼料制作
1) 發(fā)酵劑配方(質(zhì)量份)
(1)蛋白酶20 (2)果膠酶20， (3)高活性酵母25， 4.發(fā)酵粉20, (5)紅糖13.5， (6)光合細(xì)菌l，微量元素0.5，以上原料混合后作為發(fā)酵劑。
2) ttK素配方(質(zhì)量份)
①Z^化錳8， (gm化鈷7， (D^^M鐵10，彌麟13， 化鉀20，⑥五氧fc釩5， IB酸5， dm化鎂10， @ 二氫鉀10, ( 隨二鉀10
3) 光合細(xì)菌制作與培養(yǎng)
培養(yǎng)基配方為磷酸氫二鉀0.6克，磷酸二氫鉀0.5克，硫酸鎂0.2克，氯化鈉2.0克，酵母膏O. l克，碳酸氫鈉5.0克、70%的酒精1-2毫升，用900毫升水溶解，用磷酸調(diào)ph值7左右，在加入100毫升菌液搖晃均勻。放入透明度比較好的瓶內(nèi)，用40瓦電燈進(jìn)行對稱照射，距離為10-20厘米，溫度控制在30。C，經(jīng)三天培養(yǎng)即可成功。
4) 高活性酵母曲培養(yǎng)(1) 曲種可選用市售酵母
(2) 酵母曲培養(yǎng)
①培養(yǎng)基(質(zhì)量份)
麩皮80，玉米粉4.5，草粉15，氯化鈉0.5，以上原料加水按1:0.8-1.2的比例攪拌均勻，以手抓成團(tuán)松手自然散開為宜。爾后，把培養(yǎng)料裝入塑料^罐頭瓶中放置高壓鍋1.5kg/cm2滅菌30射中，在滅菌的同時，應(yīng)取0.5%的鹽水同時滅 無菌鹽水，備用。滅菌完判每物料取出，涼至40。C左右時開始接種。
離種與培養(yǎng)
首先把曲種用2%紅糖水(40魅右)活化3小時，爾后接Ai咅養(yǎng)料中混合均勻，方MH角瓶中或盤子鵬子上發(fā)酵，培養(yǎng)時間控帶底36小時左右，長出棕白色菌絲或結(jié)餅即為成品。5)高蛋白飼料發(fā)酵物配方(質(zhì)量份)
(1)草粉92 (最好是花生藤、紅薯秧、槐樹葉、玉米秸上部，粉碎過20-30目)，(2)玉米面l-2， (3)麩皮1-3.5， (4)尿素或硫酸銨0.2-0. 5， (5)氯化鈉0. 1-0. 3， (6)光合菌0.5-1， (7)發(fā)酵劑O. 5-1;6)制作步驟
① 首先把發(fā)酵劑按量(發(fā)酵物的1%)放入0.5%紅糖水中(水應(yīng)為無菌水或沸水)，發(fā)酵劑與紅糖水的比為1:6，攪拌均勻后在30。C左右室溫下進(jìn)行活化2個小時，而后加入發(fā)酵物中充分?jǐn)嚢杈鶆?，PH值約6-7。
② 發(fā)酵方法
將混合好的發(fā)酵物置入大缸或塑料袋或水泥池中壓死封閉14天左右或室溫30°C左右7天。
③ 按發(fā)酵物與水的比例為1:1.2混合均勻、加入發(fā)酵物中攪拌均勻，水份含量以手抓成團(tuán)不滴水為宜。將混合好的發(fā)酵物置入大缸或塑料袋或水泥池中壓死封閉7天左右或室溫30°C左右5天。
4.動物生物酶復(fù)合促長劑配方(質(zhì)量份).-
(1) 復(fù)合多維素(克) 4-一-18
(2) 硫酸亞鐵(克) 1----16(3)硫酸錳(克)0. 5—8
(4)硫酸銅(克)4-----18
(5)硫酸鋅(克)2——13
(6)碘化鉀(毫克)5——20
(7)氯化鈷(毫克)10-—80
(8)亞硒酸鈉(毫克)5-----20
(9)磷酸氫鈣(克)50——300
(10)腐植酸鈉(克)10——40
(11)硼酸(克)0. 1— -4
(12)生物復(fù)合酶(克)500—800
(13)輕質(zhì)碳酸鈣(克)100—300
(14)鉬(克)0.1——2
(15)蛋氨酸(克)30-120
(16)賴氨酸(克)30—120
(17)氯化膽堿(克)30—-160
(18)貝殼粉(克)50-—200
;.生物發(fā)酵高蛋白詞料配方(質(zhì)量份)
(1)生物蛋白飼料15—-45
(2)玉 米20-—35
(3)高 粱10—-25
(4)大 麥10—-15
(5)麩 皮10- —16
(6)豆 餅10-—16
(7)魚 粉1---4
(8)1-一6
(9)棉子餅2—-6
(10)骨 粉0. 3—一3
17(11) 貝殼粉 1-一2
(12) 食
鹽 0. 1---0.6
(13) 微量元素鄉(xiāng)輸j 0.3—-1.4
(14) 土霉素 0.01-—0.066.具體實(shí)施例
實(shí)例1.中豬飼料添加劑配方(1000質(zhì)量份)飼料中按1%加入
(1) 復(fù)合多維素(克) 16
(2) 硫酸亞鐵(克) 8
(3) 硫酸錳(克) 2
(4) 硫酸銅(克) 12
(5) 硫酸鋅(克) 8
(6) 碘化鉀(毫克) 25
(7) 氯化鈷(毫克) 100
(8) 亞硒酸鈉(毫克) 20
(9) 磷酸氫鈣(克) 350
(10) 硼酸(克) 1
(11) 生物復(fù)合酶(克) 300
(12) 輕質(zhì)碳酸鈣(克) 47
(13) 鉬(克) 3
(14) 賴氨酸(克) 50
(15) 貝殼粉(克) 203實(shí)例2.肉中雞詞料添加劑配方(1000質(zhì)量份)飼料中按1%加入
(1) 復(fù)合多維素(克) 14
(2) 硫酸亞鐵(克) 14
(3) 硫酸錳(克) 10
(4) 硫酸銅(克) 4
(5) 硫酸鋅(克) 126)碘化鉀(毫克)78
7)亞硒酸鈉(毫克)31
8)碳酸氫鈣(克)248
9)腐植酸鈉(克)2
10)生物復(fù)合酶(克)400
11)鉬(克)3
12)蛋氨酸(克)100
13)氯化膽堿(克)100
14)氯化鈉(克)3
15)貝殼粉(克)加到1000克
例3.育肥牛飼料添加劑配方(1000質(zhì)量份)飼料中按1%加入1)復(fù)合多維素(克)4
2)硫酸亞鐵(克)10
3)硫酸錳(克)5
4)硫酸銅(克)3
5)硫酸鋅(克)9
6)碘化鉀(毫克)62
7)氯化鈷(毫克)105
8)亞硒酸鈉(毫克)54
9)磷酸氫鈣(克)320
10)生物復(fù)合酶(克)450
11)氫質(zhì)碳酸鈣(克)加到1000克
'例4.育肥羊添加劑配方(1000質(zhì)量份)飼料中按1%加入1)復(fù)合多維素(克)2
2)硫酸亞鐵(克)10
3)硫酸錳(克)5
4)硫酸銅(克)2(5) 硫酸鋅(克) 12
(6) 碘化鉀(毫克) 62
(7) 氯化鈷(毫克) 105
(8) 亞硒酸鈉(毫克) 54
(9) 磷酸氫鈣(克) 310
(10) 生物復(fù)合酶(克) 400
(11) 氫質(zhì)碳酸鈣(克) 加到1000克實(shí)例5.生物發(fā)酵高蛋白詞料配方(100質(zhì)量份)
(1) 生物蛋白飼料 32
(2) 玉
米 36
(5) 麩
皮 10
(6) 豆
餅 15
(7) 魚
粉 1.7
(8) 綱^MS靴 2
(10) 骨
粉 1
(11) 貝殼粉 1
(12) 食
鹽 0.3
(13) 微量元素働躋[J 17.操作工藝與步驟
l)原料的預(yù)處理
(1) 硫酸亞鐵、硫酸銅、硫酸錳、硫酸鋅因含水份在加工中會有很大的困難，因此須先進(jìn)行處理，主要以干燥處理為主，可采用強(qiáng)制干燥，在條件及設(shè)備較差的情況下，可用日光晾曬，粉碎過100目
(2) 碘化鉀、氯化鈷的預(yù)處理-
采用吸收劑平衡法，將碘化鉀和氯化鈷原料分別準(zhǔn)確的稱量，然后各以1:15-1:20的比例溶解于水中，再分別按照1:100的比例噴在石粉等吸收劑上進(jìn)行混合，而后進(jìn)行干燥、粉碎過200目；(3)亞硒酸鈉的預(yù)處理
一般采用將含50%以上的亞硒酸鈉加入81°C的熱水中，經(jīng)過5min溶解后制成10kg水溶液(即lkg原料溶解于10kg水中然后再噴灑在攪拌機(jī)內(nèi)的糠粉上，糠粉過200目以1:100的比例噴在糠粉上，混合烘干后過200目)，混合均勻制成稀釋劑，再與其它原料混合成為硒的預(yù)混合料；
2) 載體和稀釋劑的選擇
載體一般選擇石粉、氫質(zhì)碳酸鈣、沸石粉、淀粉、麥麩、玉米粉等，以3-鄉(xiāng)的比例逐級擴(kuò)大；
3) 原料的粒度
微量元素一般要求通過80-400目，即粒度在0. 17-0. 05mm以下，鐵、鋅、錳、銅、鎂等微量元素的粉碎粒度應(yīng)全部通過80目(0.3mm)鈷、碘、硒等級微量成分粉碎至200目(0.076mm)以下，為了達(dá)到很細(xì)的粒度，需要使用特別磨進(jìn)行細(xì)磨，如碘、鉀、硒用球磨機(jī)細(xì)磨才能達(dá)到所需求的粒度，氯化鈷、銅、鐵、錳、鋅要使用微米極磨細(xì)至幾個微米才能保證適宜的粒度，達(dá)到最佳的混合均勻度；
4) 操作
(1) 一次擴(kuò)大稀釋
① 先將碘化鉀、氯化鈷、亞硒酸鈉用磷酸氫鈣或碳酸氫鈣為載體以3倍的比例擴(kuò)大稀釋，先加入1%載體量的油脂，混合5分鐘然后加入以上微量元素，混合攪拌20分鐘后取出，再進(jìn)行二次稀釋；
② 將鐵、鋅、銅、錳等微量元素用磷酸氫鈣或碳酸鈣或玉米粉為載體以3倍的比例擴(kuò)大稀釋，先將載體加入混合機(jī)中，加入載體量1%的油脂，混合5分鐘然后加入以上微量元素，混合20分鐘后取出，再進(jìn)行二次稀釋；
③ 將其它生長劑、多維素等用碳酸鈣或玉米粉為載體以3倍左右的比例混合稀釋，先將載體加入混合機(jī)中，加入載體量1%的油脂，混合5分鐘，然后加入生長劑等混合20分鐘取出，再進(jìn)行二次擴(kuò)大稀釋；
(2) 二次擴(kuò)大稀釋
將以上一次預(yù)混劑用麥麩、玉米面為載體以3倍左右的比例進(jìn)行稀釋擴(kuò)大，復(fù)合酶也采取二次稀釋擴(kuò)大。
(3)三次擴(kuò)大稀釋與混合將全部二次混合的預(yù)混劑合并稱重，載體以麥麩、玉米面或魚粉加入足量，然后加入1%的油脂，混合5分鐘，然后將全部二次稀釋劑加入混合劑攪拌混合20分鐘，即為動物促長劑。
5)高蛋白發(fā)酵詞料制作
① 首先把發(fā)酵劑按量(發(fā)酵物的1%)放入0.5%紅糖水中(水應(yīng)為無菌水或沸水)，發(fā)酵劑與紅糖水的比為1:6，攪拌均勻后在30。C左右室溫下進(jìn)行活化2個小時，而后加入發(fā)酵物中充分?jǐn)嚢杈鶆颉H值約6-7;
② 發(fā)酵方法
按發(fā)酵物與水的比例為1:1.2混合均勻、加入發(fā)酵物中攪拌均勻，水份含量以手抓成團(tuán)不滴水為宜，將混合好的發(fā)酵物置入大缸或塑料袋或水泥池中壓死封閉7天左右或室溫30°C左右5天
權(quán)利要求
1.一種新型復(fù)合酶飼料添加劑的制備方法，包括生物菌酶和發(fā)酵菌種及菌劑的發(fā)酵制作、畜禽添加劑的配方、生物高蛋白發(fā)酵飼料制作和配方
其中，微生物菌種菌號為
1)黑曲酶AS3.316
2)黑曲酶AS3.350
3)黑曲霉ACCC30785(植酸酶)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求
1所述的一種新型復(fù)合酶飼料添加劑的制備方法，其特征在于畜禽添加劑的配方-(1) 復(fù)合多維素(克) 4--一18(2) 硫酸亞鐵(克) 1-一-16(3) 硫酸錳(克) 0.5—8(4) 硫酸銅(克) 4-----18(5) 硫酸鋅(克) 2——13(6) 碘化鉀(毫克) 5----20(7) 氯化鈷(毫克) 10—-80(8) 亞硒酸鈉(毫克) 5-----20(9) 磷酸氫鈣(克) 50-—-300(10) 腐植酸鈉(克) 10——40(11) 硼酸(克) 0. 1-—4(12) 生物復(fù)合酶(克) 500—800(13) 輕質(zhì)碳酸鈣(克) 100--300(14) 鉬(克) 0. 1——2(15) 蛋氨酸(克) 30-120(16) 賴氨酸(克) 30—120(17) 氯化膽堿(克) 30—-160(18) 貝殼粉(克) 50-—200 。
3.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的其特征在于生物發(fā)酵高蛋白飼料的配方(1)生物蛋白飼料15---45(2)玉米20-—35(3)高粱10---25(4)大麥10—-15(5)麩皮10—-16(6)豆餅10—-16(7)魚粉1—-4(8) 7鵬^^靴1-一6(9)棉子餅2—-6(10)骨粉0. 3—-3(11)貝殼粉1-一2(12)食鹽0. 1-一0. 6(13)微量元素働t^ij0. 3—-1.4(14) 土霉素0.01——0.06
4. 根據(jù)權(quán)利要求
1所述的一種新型復(fù)合酶飼料添加劑的制備方法，其特征在于生物發(fā)酵高蛋白飼料的工藝1) 首先把發(fā)酵劑按量(發(fā)酵物的1%)放入0.5%紅糖水中(水應(yīng)為無菌水)，發(fā)酵劑與紅糖水的比為1:6，攪拌均勻后在30。C左右室溫下進(jìn)行活化2個小時，而后加入發(fā)酵物中充分?jǐn)嚢杈鶆颍瑀a值約6-7;2) 發(fā)酵方法將混合好的發(fā)酵物置入大缸或塑料袋或水泥池中壓死封閉14天左右或室溫30°C左右7天；3) 按發(fā)酵物與水的比例為1:1.2混合均勻、加入發(fā)酵物中攪拌均勻，水份含量以手抓成團(tuán)不滴水為宜，將混合好的發(fā)酵物置入大缸或塑料袋或水泥池中壓死封閉7天左右或室溫30°C左右5天。
5. 根據(jù)權(quán)利要求
1所述的一種新型復(fù)合酶飼料添加劑的制備方法，其特征在于生物復(fù)合酶的制作l)斜面菌種制作(1)斜面菌種培養(yǎng)基制作斜面菌種培養(yǎng)基5。Be度麥芽汁或馬鈴薯去皮去芽，稱20克切細(xì)放入100ml水中，用微火煮開后15，即可用,紗布過濾，取汁為100ml，如水分不足再加些開7K補(bǔ)足，另外稱W^Hlg，瓊脂2g，,隹素0.5g (辨隹素為將^ill00目)或蛋白胨lg，牛肉膏0.3g， Nacl0,5g，瓊脂2g，蒸餾水100ml，測PH働5W左右，力口Ail脂2g，方燈電爐上溶解，待瓊腺溶解后，分別^A試管，每管裝量一般為管的四分之一處，裝管后管口塞上棉塞，每10支一捆用防水紙包好，放入高壓鍋1.05kg/crf滅菌30分鐘，滅菌后，鵬電源，待壓力回到O時將放氣閥和安全閥直立打開滅菌鍋，將i歸基拿出擺脫斜面，斜面被為管的l/3處，等斜面凝固后開始接沐(2) 接沐接種前，對^^種用具及接種翻紫外線燈滅菌20 30^H11，，滅菌燈后過5 10倂中左右在酒精燈下按無菌要鄉(xiāng)行操作，操作步驟如下第一，用右手/」4旨、無名指和手掌拔下棉塞^e資，^S下部^IKE種卜，勿放^i:,以免污染;第二,將 口^51在火焰上 —周，使i^t口上可能沾染的少S^菌或帶菌塵衡尋以燒死；第三,將灼艦的接種環(huán)伸入菌種管內(nèi)，先將環(huán)gM—下沒有長菌的培養(yǎng)基部分，使勢令卻，以免燙自體，然后用環(huán)輕輕取菌dH午，并^S種環(huán)慢SM^t中抽出；第四,在火旁iKI^^種環(huán)伸進(jìn)另一空白斜面，^!斗面培養(yǎng)基上輕極ij線，將菌l^種于其上，劃線時由底部劃起，劃 密的波 驗(yàn)狀，注意勿將培養(yǎng)基劃破，也不要使菌ftt&污管壁；第五灼 管口，并在火旁將棉塞塞上，塞棉塞時，不要將試管去迎棉塞，以免試管在移動時污染雜衝第六,接種完畢，接種環(huán)上的余菌必須徹lS^死后才l^t行下一^f'擬中(3) 培條接種完判各體菌種包手LfimA恒溫箱內(nèi)i歸，M為28。032。C左右，培養(yǎng)時間為48-72小時左右，待培養(yǎng)基長出黃械醐鵬絶為正常,其它鵬為驗(yàn)雜衝2) Z^菌劑培養(yǎng)(1) 培養(yǎng)基制作-稱豆餅粉60，魏35， 3E^面5， NH4CI0.5， CaCIO.3, Na2HP040. 2,加7jC至用手緊握指縫有zK而不M來為宜，然后^A塑料^^罐頭瓶中皿高壓鍋1.05kg/crf滅菌30^l中，在滅菌的同時，應(yīng)取0.5%的&*同時滅 無菌^7夂，備用，滅菌完,物料取出，晾涼至40。C左右時開始接種；(2) 接沐首先 種^接種工具用紫外線滅菌20~30，，，滅菌燈5 10併中后再進(jìn)行操作，接種時先4好和接種工具用酒精消毒，然后取出無菌a/K倒入試管內(nèi)半管，用大拇 雜住試管口搖晃幾下，<， 分混合，悟^@#料中 均勻，接種量為1充斜面菌種可接250^右；(3) 培養(yǎng)把接好的
菌種MA恒溫箱:t錄28°C~32°C g^溫在20°C~30°C之間的無菌室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)時 間為48-72小時左右，憩鵬養(yǎng)料表面長出長出黃fe^^lfe^fe為正常,其它顏色為 雜衝 3)HM,咅謂乍 (1)培養(yǎng)基制作豆餅粉60，魏34,玉米面5， N恥I 0.5， CaCI 0.3， Na2HP04 0. 2,加水至用手緊握指縫有水而 不滴下來為宜，然后駄塑料滅罐細(xì)中方爐高壓鍋1.05kg/cm2滅菌30溯，在滅菌的同時，應(yīng)取 0.5%的鹽水同時滅 無菌鹽水，備用，滅菌完判各物料取出，晾涼至40。C左右時開始接種，接種量 濕薪中為3%，干菌種為1.5%;(2) 接沐首先鵬中敘接種工具用紫外駄菌20 30她雜滅菌燈5 10溯后再進(jìn)行操作，接種時 先解和接種工具用酒精消毒，把二級菌布胸A^養(yǎng)料中微均勻,接種影顯菌種為3%,干菌種為1. 5%;(3) 培養(yǎng)把接好的H^菌劑^A恒溫箱^;麟滅 媳在20°C~30°C之間的無菌室內(nèi)培養(yǎng)，i咅養(yǎng)時間為48 小時左右，培養(yǎng)料表面長出白色菌^W黃械離fe^tfeffi子結(jié)餅為成品，其它鵬為感染雜菌。
6.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的一種新型復(fù)合酶詞料添加劑的制備方法，其特征在于生物高 蛋白發(fā)酵飼料制作1)發(fā)酵劑配方(質(zhì)量份)(1)纖維素酶30， (2)果膠酶和丹寧酶20， (3)高活性酵母15， 4.發(fā)酵粉20, (5) 紅糖14.5， (6)微量元素0.5，以上原料混合后作為發(fā)酵劑 2)高蛋白飼料發(fā)酵物配方(質(zhì)量份)(1)草粉92 (最好是花生藤、紅薯秧、槐樹葉、玉米秸上部，粉碎過20-30目)，(2)玉米 面2， (3)麩皮3.5， (4)尿素或硫酸銨0.5， (5)氯化鈉0.3， (6)光合菌1, (7)發(fā)酵劑1: 3)制作步驟① 首先把發(fā)酵劑按量(發(fā)酵物的1%)放入0.5%紅糖水中(水應(yīng)為無菌水或沸水)，發(fā)酵 劑與紅糖水的比為1: 6，攪拌均勻后在30°C左右室溫下進(jìn)行活化2個小時，而后加入發(fā)酵 物中充分?jǐn)嚢杈鶆?，PH值約6-7;② 發(fā)酵方法按發(fā)酵物與水的比例為1: 1.2混合均勻、加入發(fā)酵物中攪拌均勻，水份含量以手抓成 團(tuán)不滴水為宜，將混合好的發(fā)酵物置入大缸或塑料袋或水泥池中壓死封閉7天左右或室溫 30°C左右5天。
7.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的一種新型復(fù)合酶飼料添加劑的制備方法，其特征在于操作工藝 與步驟l)原料的預(yù)處理(1) 硫酸亞鐵、硫酸銅、硫酸錳、硫酸鋅因含水份在加工中會有很大的困難，因此須先進(jìn)行處理，主要以干燥處理為主，可采用強(qiáng)制干燥，在條件及設(shè)備較差的情況下，可用日光晾曬，粉碎過100目；(2) 碘化鉀、氯化鈷的預(yù)處理采用吸收劑平衡法，將碘化鉀和氯化鈷原料分別準(zhǔn)確的稱量，然后各以1:15-1:20的比例溶解于水中，再分別按照1:100的比例噴在石粉等吸收劑上進(jìn)行混合，而后進(jìn)行干燥、粉碎過200目;(3)亞硒酸鈉的預(yù)處理一般采用將含50%以上的亞硒酸鈉加入81°C的熱水中，經(jīng)過5min溶解后制成10kg水溶液(即lkg原料溶解于10kg水中然后再噴灑在攪拌機(jī)內(nèi)的糠粉上，糠粉過200目以1:100的比例噴在糠粉上，混合烘干后過200目)，混合均勻制成稀釋劑，再與其它原料混合成為硒的預(yù)混合料2) 載體和稀釋劑的選擇載體一般選擇石粉、氫質(zhì)碳酸鈣、沸石粉、淀粉、麥麩、玉米粉等，以3-鄉(xiāng)的比例逐級擴(kuò)大；3) 原料的粒度微量元素一般要求通過80-400目，即粒度在O. 17-0.05mm以下，鐵、鋅、錳、銅、鎂等微量元素的粉碎粒度應(yīng)全部通過80目(0.3mm)鈷、碘、硒等級微量成分粉碎至200目(0.076mm)以下，為了達(dá)到很細(xì)的粒度，需要使用特別磨進(jìn)行細(xì)磨，如碘、鉀、硒用球磨機(jī)細(xì)磨才能達(dá)到所需求的粒度，氯化鈷、銅、鐵、錳、鋅要使用微米極磨細(xì)至幾個微米才能保證適宜的粒度，達(dá)到最佳的混合均勻度；4)操作(l)一次擴(kuò)大稀釋① 先將碘化鉀、氯化鈷、亞硒酸鈉用磷酸氫鈣或碳酸氫鈣為載體以3倍的比例擴(kuò)大稀釋，先加入1%載體量的油脂，混合5分鐘然后加入以上微量元素，混合攪拌20分鐘后取出，再進(jìn)行二次稀釋；② 將鐵、鋅、銅、錳等微量元素用磷酸氫鈣或碳酸鈣或玉米粉為載體以3倍的比例擴(kuò)大稀釋，先將載體加入混合機(jī)中，加入載體量1%的油脂，混合5分鐘然后加入以上微量元素，混合20分鐘后取出，再進(jìn)行二次稀釋；③ 將其它生長劑、多維素等用碳酸鈣或玉米粉為載體以3倍左右的比例混合稀釋，先將載體加入混合機(jī)中，加入載體量1%的油脂，混合5分鐘，然后加入生長劑等混合20分鐘取出，再進(jìn)行二次擴(kuò)大稀釋 (2)二次擴(kuò)大稀釋將以上一次預(yù)混劑用麥麩、玉米面為載體以3倍左右的比例進(jìn)行稀釋擴(kuò)大，復(fù)合酶也采 取二次稀釋擴(kuò)大(3)三次擴(kuò)大稀釋與混合將全部二次混合的預(yù)混劑合并稱重，載體以麥麩、玉米面或魚粉加入足量，然后加入1% 的油脂，混合5分鐘，然后將全部二次稀釋劑加入混合劑攪拌混合20分鐘，即為動物促長
專利摘要
本發(fā)明涉及一種采用微生物工程技術(shù)，利用農(nóng)作物秸稈、殼皮、餅等副產(chǎn)物，以多株菌生產(chǎn)高蛋白飼料和動物促長劑，使廢物得到了有效的利用，變廢為寶，原料來源取之不盡，用之不竭，提高了飼料投入產(chǎn)出比，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。該技術(shù)由于含有大量的活性酶和促長因子，提高了動物新陳代謝功能，使之產(chǎn)生對動物機(jī)體互相協(xié)同及綜合平衡作用，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)在動物腸道中快速降解，促進(jìn)動物對飼料營養(yǎng)成份的吸收和轉(zhuǎn)化，以達(dá)到促進(jìn)動物增長和節(jié)約飼料的目的。該技術(shù)主要應(yīng)用于豬、雞、牛、羊等動物飼料促長劑和生物高蛋白飼料。本發(fā)明生產(chǎn)方法及工藝易掌握，投資小，成本低，適宜個體、中小企業(yè)和鄉(xiāng)鎮(zhèn)投資建廠。
文檔編號A23K1/175GKCN101669583SQ200910181132
公開日2010年3月17日 申請日期2009年10月12日
發(fā)明者健 李, 李春龍, 趙文濤, 魏立新 申請人:北京中國科學(xué)院老專家技術(shù)中心;北京中瑞華泰應(yīng)用技術(shù)研究院導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan