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一種工程化發(fā)酵生物質(zhì)飼料的工藝的制作方法

文檔序號:12021626閱讀:395來源:國知局
本發(fā)明涉及一種飼料的生產(chǎn)工藝,具體涉及一種工程化發(fā)酵生物質(zhì)飼料的工藝。
背景技術(shù)
:生物質(zhì)飼料是指以動(dòng)物性、植物性或微生物性原料作為飼料,一般而言飼料的消化率決定了飼料用途的廣泛性,對一般動(dòng)物言,飼料的消化率大小為動(dòng)物性>微生物性>植物性飼料;然而藉由微生物發(fā)酵可以增加動(dòng)物對動(dòng)物性及植物性飼料的消化率。目前由于我國的畜牧業(yè)有了長足的發(fā)展,對飼料的要求日益增加。隨著世界性魚粉、乳清粉、肉骨粉、玉米、豆粕、麩皮、小麥等飼料原料價(jià)格增長過快,其中近十幾年突出表現(xiàn)在魚粉、乳清粉、玉米、豆粕的價(jià)格上漲了20%以上,快速上漲的飼料成本制約了養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。如何高效的利用畜禽下角料、血粉及蝦蟹殼粉等動(dòng)物性飼料,開發(fā)植物性小分子蛋白及纖維糖化飼料,是解決飼料原料緊缺問題的新途徑。目前常見的技術(shù)為傳統(tǒng)的厭氧固態(tài)發(fā)酵工藝,如cn201410319938.x-一種制備飼喂牛和豬的白酒糟飼料的方法-其采取將白酒糟、糙米和菌種混合均勻,然后袋裝密封或窖貯,厭氧發(fā)酵28天以上;上述專利在實(shí)際應(yīng)用中存在的問題主要為:其一,發(fā)酵28天,發(fā)酵時(shí)間長且占用資金。其二,袋裝密封或窖貯,需要人工打開取料及密封不佳時(shí),氧氣進(jìn)入常常導(dǎo)致霉?fàn)€?,F(xiàn)有改進(jìn)技術(shù)為厭氧固態(tài)發(fā)酵加入好氧固態(tài)發(fā)酵的工藝,如cn201310359106.6-一種二次接種分段固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆粕的方法,其采取先接種好氧固態(tài)發(fā)酵,再接種厭氧固態(tài)發(fā)酵整個(gè)發(fā)酵過程接近7~15天;上述專利在實(shí)際應(yīng)用中存在的問題主要為:其一,發(fā)酵7~15天,發(fā)酵時(shí)間仍太長。其二,一樣使用袋裝密封或窖貯,耗費(fèi)人工及霉?fàn)€問題無解。目前縮短發(fā)酵時(shí)間的技術(shù)為加入酶制劑至工藝中,如cn200710116422.5-羽毛制品及其加工工藝和用途,其采用活化的h菌發(fā)酵鮮血羽毛,經(jīng)酶解,水解處理,再與復(fù)合微生物厭氧發(fā)酵,制得成品;上述專利在實(shí)際應(yīng)用中存在的問題主要為:雖然利用酶制劑縮短發(fā)酵時(shí)間,但是發(fā)酵后的產(chǎn)品需經(jīng)干燥粉碎及添加酶制劑的成本高。目前較成熟的生物質(zhì)飼料工藝流程為:經(jīng)過預(yù)處理、酶解、發(fā)酵三步完成,但其中物理化學(xué)法預(yù)處理的過程中產(chǎn)生毒性物質(zhì)(如處理秸稈會(huì)產(chǎn)生乙酸、糠醛、苯酚等)嚴(yán)重抑制發(fā)酵,不利于縮短發(fā)酵時(shí)間,如cn200910066018.0-富含小肽和多酶菌體的蛋白飼料及制備方法,其采用高壓蒸汽汽爆,瞬間釋放汽爆鍋內(nèi)的混合飼料,后將混合飼料送入固態(tài)發(fā)酵倉降溫接菌發(fā)酵72小時(shí)裝袋,制得成品。上述專利在實(shí)際應(yīng)用中存在的問題主要為:其一,氣壓升至1~2mpa,溫度升至140~200℃,保壓4~6min,相對非常消耗能源;其二,有利用微生物產(chǎn)生酶縮短發(fā)酵時(shí)間,發(fā)酵仍需3天;其三,固態(tài)發(fā)酵后的產(chǎn)品需經(jīng)干燥粉碎及高壓蒸汽汽爆消耗能源的成本高。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是:目前生物質(zhì)飼料的發(fā)酵時(shí)間較長的問題,目的在于提供一種工程化發(fā)酵生物質(zhì)飼料的工藝,本發(fā)明結(jié)合固態(tài)好氧發(fā)酵及液態(tài)厭氧發(fā)酵,并在復(fù)合菌群的協(xié)同共生下,達(dá)到菌酶同步降解的目的,在降低成本的同時(shí)縮短發(fā)酵時(shí)間。本發(fā)明通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):一種工程化發(fā)酵生物質(zhì)飼料的工藝,包括:(1)對生物質(zhì)原料進(jìn)行預(yù)處理,獲得水份含量為20%~30%的粉料;(2)采用破壞分子間氫鍵和結(jié)晶態(tài)結(jié)構(gòu)的物理方法對粉料進(jìn)行處理制成半成品a;(3)將半成品a和復(fù)合菌種a組成的混合料加入固態(tài)發(fā)酵裝置中進(jìn)行固態(tài)好氧發(fā)酵,當(dāng)固態(tài)好氧發(fā)酵的基質(zhì)中活菌數(shù)大于109個(gè)/克后,出料得到半成品b;(4)將半成品b、復(fù)合菌種b和滅菌水加入液態(tài)發(fā)酵裝置中,進(jìn)行液態(tài)厭氧發(fā)酵,當(dāng)液態(tài)厭氧發(fā)酵的基質(zhì)中活菌數(shù)大于109個(gè)/毫升且ph在4.0~5.0之間后,全部出料得到生物質(zhì)發(fā)酵飼料。本發(fā)明采用適用于液態(tài)厭氧發(fā)酵的復(fù)合菌種b,結(jié)合適用于固態(tài)好氧發(fā)酵的復(fù)合菌種a及其酶活力,在液態(tài)發(fā)酵裝置中藉由復(fù)合菌種b調(diào)降ph及復(fù)合菌種a及其酶活力加強(qiáng)體外酶解作用,以達(dá)到菌酶同步降解的目的,縮短了發(fā)酵時(shí)間,使整體發(fā)酵時(shí)間只需36~60小時(shí)即可完成,達(dá)到最大工程化促進(jìn)生物質(zhì)飼料的消化率提升。同時(shí),由于傳統(tǒng)生物質(zhì)發(fā)酵飼料基本是濕料,必須烘干才可與其他干飼料混合成全價(jià)料,本發(fā)明產(chǎn)出可直接液態(tài)飼喂的發(fā)酵飼料,對所有生物質(zhì)原料皆可發(fā)酵,故可以做發(fā)酵的全價(jià)飼料而省略了干燥的流程。并且本發(fā)明制成的生物質(zhì)發(fā)酵飼料其適口性及消化率皆有所提高,是一種降低飼料成本,提高養(yǎng)殖效益、兼顧環(huán)境友好和低能耗的工程化發(fā)酵飼料工藝。進(jìn)一步,所述步驟(3)中固態(tài)好氧發(fā)酵的條件為:培養(yǎng)溫度25~39℃;當(dāng)溫度超過38℃時(shí)進(jìn)行攪拌;所述步驟(4)中液態(tài)厭氧發(fā)酵的條件為:培養(yǎng)溫度25~39℃,連續(xù)攪拌。優(yōu)選地,所述混合料中復(fù)合菌種a的加入量為半成品a重量百分比的5~10%;所述復(fù)合菌種b的加入量為半成品b總重量的5~20%。所述復(fù)合菌種a通過篩選后制成,復(fù)合菌種a的篩選方法為:挑選適合生物質(zhì)原料的多種菌種,分別經(jīng)過含3~5%半成品a的瓊脂平板和混合共生發(fā)酵測試后,再通過試管培養(yǎng)、搖床培養(yǎng)、一級菌種罐、二級菌種罐的液態(tài)深層發(fā)酵測試后獲得的活菌數(shù)大于109個(gè)/毫升的菌液;培養(yǎng)溫度為28~37℃,培養(yǎng)時(shí)間為24~72h;所述復(fù)合菌種b通過篩選后制成,復(fù)合菌種b的篩選方法為:挑選適合生物質(zhì)原料的多種菌種,分別經(jīng)過含3~5%半成品a的瓊脂平板和混合共生發(fā)酵測試后,再通過厭氧馴化產(chǎn)業(yè)化培養(yǎng)測試后獲得的活菌數(shù)大于109個(gè)/毫升的菌液。為了達(dá)到最佳地篩選效果,所述混合共生發(fā)酵測試以及菌種罐液態(tài)深層發(fā)酵測試的培養(yǎng)基由以下重量的物質(zhì)構(gòu)成:3~5%半成品a,糖蜜或紅糖1.5~2.5%,麩皮或豆粕1.0~3.0%,磷酸二氫鉀120~200ppm,硫酸鎂10~12.5ppm,硫酸錳3~10ppm,硫酸鋅3~10ppm,氯化鈷1.5~5ppm,余量為水,并將初始ph值調(diào)至6.5~7.0;所述瓊脂平板通過在混合共生發(fā)酵測試以及菌種罐液態(tài)深層發(fā)酵測試的培養(yǎng)基中加入1.5~2.5%的瓊脂粉后,再經(jīng)過滅菌、倒平板、冷卻制成。當(dāng)所述生物質(zhì)原料為稻稈時(shí),復(fù)合菌種a包括:凝結(jié)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌納豆亞種、米曲霉、纖維二糖乳桿菌、產(chǎn)阮假絲酵母菌;所述復(fù)合菌種b包括:短小芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、兩歧雙歧桿菌、沼澤紅假單胞菌。通過上述篩選方法制成的復(fù)合菌種a中凝結(jié)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌納豆亞種、米曲霉的菌數(shù)或孢子量大于2×109個(gè)/毫升,纖維二糖乳桿菌、產(chǎn)阮假絲酵母菌的量大于2×108個(gè)/毫升;所述復(fù)合菌種b中短小芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌的菌數(shù)量大于2×109個(gè)/毫升,兩歧雙歧桿菌、沼澤紅假單胞菌的菌數(shù)含量大于2×108個(gè)/毫升。進(jìn)一步,所述步驟(4)內(nèi)半成品b中加入復(fù)合菌種b和滅菌水后的固液比為1:2.5~3.5。進(jìn)一步,所述步驟(1)中的物理方法為超聲波、空化、微波法中的一種或多種。本發(fā)明不使用高能耗物理化學(xué)法,如:高壓蒸汽爆破、二氧化碳爆破法、氨纖維爆破法,也不采用高污染化學(xué)法,如:稀酸處理、堿處理、高溫?zé)崴幚?、氧化處理。本發(fā)明中生物質(zhì)原料的預(yù)處理方法采取機(jī)械粉碎法和物理法,物理法為超聲波、空化、微波法中的一種或多種,上述物理法能通過能量的產(chǎn)生,破壞分子間氫鍵和結(jié)晶態(tài)結(jié)構(gòu),降低大分子物質(zhì)的聚合度,提高發(fā)酵速率。因而,本發(fā)明能有效兼顧環(huán)境友好和低能耗原則。為了減少發(fā)酵時(shí)間,最大化的降低成本,所述步驟(3)中半成品b的出料量為固態(tài)好氧發(fā)酵總量的10%~80%,半成品b出料后再向固態(tài)發(fā)酵裝置中補(bǔ)充加入混合料繼續(xù)進(jìn)行固態(tài)好氧發(fā)酵。補(bǔ)充加入的混合料的總量與半成品b的出料量相同;補(bǔ)充加入混合料后每24小時(shí)進(jìn)行一次半成品b的出料,每2~4個(gè)月清空固態(tài)發(fā)酵裝置。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比,具有如下的優(yōu)點(diǎn)和有益效果:1、本發(fā)明在復(fù)合菌群的協(xié)同共生下,采用固態(tài)好氧發(fā)酵后進(jìn)行液態(tài)厭氧發(fā)酵的方法,達(dá)到了菌酶同步降解的目的,在降低生產(chǎn)成本的同時(shí)極大地縮短了發(fā)酵時(shí)間,可以將發(fā)酵時(shí)間縮短到36~60小時(shí),極大地提高了工業(yè)化生產(chǎn)效率;2、本發(fā)明生產(chǎn)的成品為可直接液態(tài)飼喂的發(fā)酵飼料,因而可省略干燥流程,進(jìn)一步縮短工業(yè)生產(chǎn)周期,并且節(jié)約了干燥成本,并且生產(chǎn)出的生物質(zhì)發(fā)酵飼料其適口性及消化率皆有所提高,效果十分顯著;3、本發(fā)明具有降低飼料成本,提高養(yǎng)殖效益、兼顧環(huán)境友好和低能耗等優(yōu)點(diǎn)。具體實(shí)施方式為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白,下面結(jié)合實(shí)施例,對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明,本發(fā)明的示意性實(shí)施方式及其說明僅用于解釋本發(fā)明,并不作為對本發(fā)明的限定。實(shí)施例1一種工程化發(fā)酵生物質(zhì)飼料的工藝,稻稈水分為12.2%,將稻稈經(jīng)由粉碎機(jī)粉碎至粒度過0.08mm篩網(wǎng)獲得,送入混合攪拌機(jī);按重量百分比噴霧加入9.8%滅過菌的清水,使稻稈粉料的水分達(dá)到20%以上;將加濕稻稈粉料送入隧道式微波爐,進(jìn)行微波處理,其頻率為2600mhz,功率為1000w,處理時(shí)間為60秒處理,處理后為半成品a;將半成品a送入固態(tài)發(fā)酵罐并接入復(fù)合菌種a,復(fù)合菌種a的量為加入半成品a重量百分比的5%,控制培養(yǎng)溫度25~39℃,固態(tài)發(fā)酵罐每天攪拌8次,固態(tài)好氧發(fā)酵15天后的活菌數(shù)大于109個(gè)/克后,出料獲得半成品b,該半成品b的酶活性進(jìn)行檢測,檢測結(jié)果如表1所示。表1、稻稈半成品b酶活性檢測表上述表1中的數(shù)據(jù)均是采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差的表達(dá)方式,其中每種測試的數(shù)量設(shè)置為n,n≥3。半成品b出料量為固態(tài)發(fā)酵總量的10%;出料后重新加入固態(tài)發(fā)酵裝置的半成品a及復(fù)合菌種a的總量等于半成品b出料量,再次進(jìn)入下一批次固態(tài)發(fā)酵,之后每24小時(shí)出一批次,每三個(gè)月清空固態(tài)發(fā)酵裝置重來一次;入半成品b料前液態(tài)攪拌罐已有少量清水,將半成品b輸送至液態(tài)攪拌罐;并同時(shí)補(bǔ)充為半成品b總重量20%的復(fù)合菌種b至液態(tài)攪拌罐;加料及加菌需同時(shí)攪拌;液態(tài)攪拌罐配置有定量秤重裝置控制加入滅過菌的清水調(diào)整液態(tài)攪拌罐內(nèi)的固液比1:2.5,加清水同時(shí)攪拌;進(jìn)行液態(tài)厭氧發(fā)酵,控制培養(yǎng)溫度25~39℃及連續(xù)攪拌36小時(shí),液態(tài)厭氧發(fā)酵液體的ph在4.0~5.0之間,復(fù)合活菌總數(shù)大于109個(gè)/毫升后,全部出料為稻稈發(fā)酵飼料,該稻稈發(fā)酵飼料已是可液態(tài)方式飼喂的飼料。由于稻稈發(fā)酵飼料是液態(tài),因而必須凍干后才易于檢驗(yàn),本實(shí)施例調(diào)整水分?jǐn)?shù)據(jù)與稻草粉一致后對稻稈發(fā)酵飼料進(jìn)行檢測,檢測結(jié)果如下表2。表2、稻稈發(fā)酵飼料凍干粉末與稻草粉成分分析對照表通過上述表2可知,本發(fā)明中粗蛋白質(zhì)的含量增加了30%,粗脂肪、無氮浸出物和粗灰分均有增加,粗纖維的含量有極大降低。本實(shí)施例中上述復(fù)合菌種a及復(fù)合菌種b都是通過篩選的已知市面上可購得的菌種,其復(fù)合菌種a組成為凝結(jié)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌納豆亞種、米曲霉的菌數(shù)或孢子量大于2×109個(gè)/毫升,纖維二糖乳桿菌、產(chǎn)阮假絲酵母菌的量大于2×108個(gè)/毫升,復(fù)合菌種b組成為短小芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌的菌數(shù)量大于2×109個(gè)/毫升,兩歧雙歧桿菌、沼澤紅假單胞菌的菌數(shù)含量大于2×108個(gè)/毫升。上述復(fù)合菌種a及復(fù)合菌種b的篩選方法如下:挑選適合稻稈的不同菌種,稻稈主要成分為纖維素及木聚糖,因此挑選可生產(chǎn)外切型纖維素分解酶、內(nèi)切型纖維素分解酶、β-葡萄糖苷酶、植酸分解酶及聚木糖分解酶等菌種群。菌種群使用含半成品a的瓊脂平板的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。該瓊脂平板的培養(yǎng)基的組成為:5%半成品a,紅糖2.5%,豆粕3.0%,2.5%的瓊脂粉,磷酸二氫鉀200ppm,硫酸鎂12.5ppm,硫酸錳10ppm,硫酸鋅10ppm,氯化鈷5ppm,余量為水,并將初始ph值調(diào)至6.5~7.0,經(jīng)滅菌、倒平板、冷卻后制成。平板檢測培養(yǎng)3天,培養(yǎng)溫度30℃,檢測各菌種在含稻稈的5%半成品a瓊脂平板培養(yǎng)基上生長的菌落大小,檢測結(jié)果如下表3所示:表3菌種菌落大小(mm)米曲霉6.4±1.2凝結(jié)芽孢桿菌5.6±1.8枯草芽孢桿菌納豆亞種3.4±0.9產(chǎn)阮假絲酵母菌4.7±0.5短小芽孢桿菌3.2±0.2纖維二糖乳桿菌nd嗜酸乳桿菌nd兩歧雙歧桿菌nd沼澤紅假單胞菌nd表3中的nd表示可生長但遲緩,維持最原先接種時(shí)2mm菌落大小,該表3中數(shù)據(jù)的表達(dá)方式采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差,其中每種菌種檢測的次數(shù)為n,n≥3。菌種群以5%半成品a,紅糖2.5%,豆粕3.0%,磷酸二氫鉀200ppm,硫酸鎂12.5ppm,硫酸錳10ppm,硫酸鋅10ppm,氯化鈷5ppm,余量為水,并將初始ph值調(diào)至6.5~7.0的培養(yǎng)基進(jìn)行混合共生發(fā)酵測試,混合共生發(fā)酵測試的培養(yǎng)時(shí)間為24小時(shí),培養(yǎng)溫度37℃。菌種群在進(jìn)行混合共生發(fā)酵測試同時(shí)進(jìn)行菌種罐液態(tài)深層發(fā)酵測試。菌種罐液態(tài)深層發(fā)酵測試的過程為:通過一般實(shí)驗(yàn)室級培養(yǎng)基進(jìn)行試管培養(yǎng)、搖床培養(yǎng),然后接種一級菌種罐培養(yǎng)測試,再按10%接入二級菌種罐中進(jìn)行發(fā)酵測試。其中,一級菌種罐培養(yǎng)測試與二級菌種罐培育所采用的培養(yǎng)基與進(jìn)行混合共生發(fā)酵測試的培養(yǎng)基相同。發(fā)酵測試的培養(yǎng)時(shí)間為24小時(shí),培養(yǎng)溫度37℃。通過混合共生發(fā)酵測試以及液態(tài)深層發(fā)酵測試挑選出有最快發(fā)酵速度且總活菌數(shù)達(dá)到大于109個(gè)/毫升的配比組合,該配比組合即為本實(shí)施例中的復(fù)合菌種a。本實(shí)施例方式挑選出的復(fù)合菌種a中每毫升外切型纖維素分解酶活性1.62±0.05u、內(nèi)切型纖維素分解酶活性9.18±0.61u、β-葡萄糖苷酶活性3.10±0.29u、植酸分解酶活性7.65±0.52u、聚木糖分解酶活性44.35±1.30u。菌種群在進(jìn)行混合共生發(fā)酵測試同時(shí)進(jìn)行液體厭氧馴化培養(yǎng)測試,液體厭氧馴化培養(yǎng)測試的檢測時(shí)間為72小時(shí),培養(yǎng)溫度為28℃;挑選出有最快發(fā)酵速度,且總活菌數(shù)達(dá)到大于109個(gè)/毫升,液體的ph快速降低在4.0~5.0之間的配比組合,該配比組合即為本實(shí)施例中的復(fù)合菌種b;復(fù)合菌種b挑選原則主要為配合消化復(fù)合菌種a所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物,減少復(fù)合菌種a生成酶的產(chǎn)物反饋抑制作用,加速整體反應(yīng)朝向降解一方進(jìn)行。本發(fā)明采用本實(shí)施例的稻稈發(fā)酵飼料液態(tài)飼喂生豬,飼喂方式以及結(jié)果如下:2015年11月-2016年4月,用于臺灣省屏東縣卑南鄉(xiāng)養(yǎng)豬場,該豬場采用液態(tài)飼喂系統(tǒng)養(yǎng)豬,飼養(yǎng)種類三元肉豬;飼養(yǎng)頭數(shù)359頭;所飼養(yǎng)的豬從平均體重>30kg開始,對照組采用常規(guī)豬飼料進(jìn)行飼養(yǎng),實(shí)驗(yàn)組以等量干物質(zhì)的稻稈發(fā)酵飼料取代常規(guī)豬飼料中10%糧食進(jìn)行飼養(yǎng)。對照組生豬飼料配比如表4所示,稻稈發(fā)酵飼料生豬飼料配比如表5所示。表4成分高床(31-60公斤)中豬(61-90公斤)大豬(91-120公斤)玉米641661671麩皮5090140豆粕280224168鹽份554.5豆油(油)000磷酸氫鈣11109石粉766賴氨酸210蛋氨酸10.50蘇氨酸110維生素10.50.5微量元素111總量100010001000總能量326032603260粗蛋白18.0416.0314.01水243723742311發(fā)酵菌液63126189表5成分高床(31-60公斤)中豬(61-90公斤)大豬(91-120公斤)發(fā)酵稻稈50100150玉米651664671麩皮000豆粕280224168鹽份543豆油(油)000磷酸氫鈣500石粉888賴氨酸000蛋氨酸000蘇氨酸000維生素0.500微量元素0.500總量100010001000總能量3284.773239.123172.03粗蛋白18.7316.1113.82水243723742311發(fā)酵菌液63126189表4中的發(fā)酵菌液等量外加至液態(tài)喂飼桶槽,且不經(jīng)發(fā)酵。表5中的發(fā)酵菌液為全部加至發(fā)酵稻稈后的總量,發(fā)酵稻稈為折算干基10%水分的量。稻稈發(fā)酵飼料生豬飼養(yǎng)效果:平均81~83天從30kg長至100kg,消耗飼料折算原料176~178kg(干基10%水含量),豬料:肉的質(zhì)量比<2.55:1,而對照組中的豬料:肉的質(zhì)量比=2.75:1。并且,本實(shí)施例中豬的育肥生長中減少額外補(bǔ)充磷飼料、維生素及微量礦鹽,經(jīng)濟(jì)效益十分顯著。通過本實(shí)施例的檢測數(shù)據(jù)可知:經(jīng)由菌種誘導(dǎo)馴化培養(yǎng),被選用于接種稻稈進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵以降解纖維質(zhì)、酶生產(chǎn),在液態(tài)厭氧發(fā)酵時(shí)利用固態(tài)發(fā)酵時(shí)生成酶對稻稈粉進(jìn)行持續(xù)降解,加上批次連續(xù)生產(chǎn)可提升發(fā)酵速度、可溶性磷含量、粗蛋白質(zhì)含量、酶生產(chǎn)及飼料體外消化分解率。利用本發(fā)明工藝接種多功能微生物于稻稈粉中進(jìn)行固態(tài)及液態(tài)協(xié)同發(fā)酵轉(zhuǎn)換為單胃動(dòng)物能量替代飼料是可行方式,且配合復(fù)合菌株篩選接種技術(shù),值得農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)及永續(xù)經(jīng)營之推廣。實(shí)施例2本實(shí)施例中的生物質(zhì)原料采用豆粕,本實(shí)施例中該生物質(zhì)發(fā)酵飼料的制備方法如下:豆粕水分為10%,將豆粕經(jīng)由粉碎機(jī)粉碎至過2.5mm篩網(wǎng),送入混合攪拌機(jī);按重量百分比加入18.6%滅過菌的清水,使豆粕粉料的水分達(dá)到25%;將加濕豆粕粉料送入超聲波隧道,進(jìn)行超聲波處理,采用頻率為50khz,聲強(qiáng)為8000w/m2,處理時(shí)間為120秒,處理后為半成品a;將半成品a送入固態(tài)發(fā)酵罐并接入復(fù)合菌種a,復(fù)合菌種a的量為加入半成品a重量百分比的10%,控制培養(yǎng)溫度25~39℃,固態(tài)發(fā)酵罐每天攪拌2次,固態(tài)好氧發(fā)酵5天后的總活菌數(shù)大于109個(gè)/克后,出料獲得半成品b,該半成品b的酶活性進(jìn)行檢測,檢測結(jié)果如表6所示。表6、豆粕半成品b酶活性檢測表上述表6中的數(shù)據(jù)均是采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差的表達(dá)方式,其中每種測試的數(shù)量設(shè)置為n,n≥3。半成品b出料量為固態(tài)發(fā)酵總量的80%;出料后重新加入固態(tài)發(fā)酵裝置的半成品a及復(fù)合菌種a的總量等于半成品b出料量,再次進(jìn)入下一批次固態(tài)發(fā)酵,之后每24小時(shí)出一批次,每三個(gè)月清空固態(tài)發(fā)酵裝置重來一次;入半成品b料前液態(tài)攪拌罐已有少量清水,將半成品b輸送至液態(tài)攪拌罐;并同時(shí)補(bǔ)充為半成品b總重量5%的復(fù)合菌種b至液態(tài)攪拌罐;加料及加菌需同時(shí)攪拌;液態(tài)攪拌罐配置有定量秤重裝置控制加入滅過菌的清水調(diào)整液態(tài)攪拌罐內(nèi)的固液比1:3.5,加清水同時(shí)攪拌;進(jìn)行液態(tài)厭氧發(fā)酵,控制培養(yǎng)溫度25~39℃及連續(xù)攪拌12小時(shí),液態(tài)厭氧發(fā)酵液體的ph在4.0~5.0之間,復(fù)合活菌數(shù)大于109個(gè)/毫升后,全部出料為豆粕發(fā)酵飼料,該豆粕發(fā)酵飼料已是可液態(tài)方式飼喂的飼料。由于豆粕發(fā)酵飼料是液態(tài),因而必須凍干后才易于檢驗(yàn),本實(shí)施例調(diào)整水分?jǐn)?shù)據(jù)與豆粕粉一致后對豆粕發(fā)酵飼料進(jìn)行檢測,檢測結(jié)果如下表7。表7、豆粕發(fā)酵飼料凍干粉末與豆粕粉成分分析對照表通過上述表2可知,本發(fā)明中粗蛋白質(zhì)的含量增加了15%,粗脂肪、粗灰分有增加,粗纖維、無氮浸出物的含量有極大降低,降低有25%以上。本實(shí)施例中上述復(fù)合菌種a及復(fù)合菌種b都是通過篩選的已知市面上可購得菌種,其復(fù)合菌種a的組成為凝結(jié)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌納豆亞種的菌數(shù)量分別大于4×109個(gè)/毫升,產(chǎn)阮假絲酵母菌大于4×108個(gè)/毫升,復(fù)合菌種b組成為啤酒酵母菌、植物乳桿菌、兩歧雙歧桿菌、屎腸球菌的菌數(shù)量分別大于4×109個(gè)/毫升。本實(shí)施例中復(fù)合菌種a及復(fù)合菌種b的篩選方法為:挑選適合豆粕的不同菌種,豆粕主要成分為蛋白質(zhì)、木聚糖、β-葡聚糖、甘露聚糖、半乳聚糖等非纖維多糖及少量的纖維素,因此挑選可生產(chǎn)蛋白質(zhì)分解酶、內(nèi)切型纖維素分解酶、植酸分解酶、聚木糖分解酶及聚甘露糖酶等菌種群。復(fù)合菌種a及復(fù)合菌種b使用含半成品a的瓊脂平板的培養(yǎng)基進(jìn)行瓊脂平板培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)溫度30℃。瓊脂平板的組成為:3%半成品a,糖蜜1.5%,麩皮1.0%,1.5%的瓊脂粉,磷酸二氫鉀120ppm,硫酸鎂10ppm,硫酸錳3ppm,硫酸鋅3ppm,氯化鈷1.5ppm,余量為水,并將初始ph值調(diào)至6.5~7.0,經(jīng)滅菌、倒平板、冷卻后制成。平板檢測培養(yǎng)3天后,檢測各菌種在含豆粕的3%半成品a瓊脂平板培養(yǎng)基上生長的菌落大小,檢測結(jié)果如下表8所示:表8菌種菌落大小(mm)凝結(jié)芽孢桿菌6.8±0.2枯草芽孢桿菌(納豆亞種)3.9±0.5產(chǎn)阮假絲酵母菌4.9±0.8啤酒酵母菌2.2±0.6兩歧雙歧桿菌nd植物乳桿菌nd屎腸球菌nd表8中的nd表示可生長但遲緩,維持最原先接種時(shí)2mm菌落大小,該表3中數(shù)據(jù)的表達(dá)方式采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差,其中每種菌種檢測的次數(shù)為n,n≥3。復(fù)合菌種a及復(fù)合菌種b再以3%半成品a,糖蜜1.5%,麩皮1.0%,磷酸二氫鉀120ppm,硫酸鎂10ppm,硫酸錳3ppm,硫酸鋅3ppm,氯化鈷1.5ppm,余量為水,并將初始ph值調(diào)至6.5~7.0的培養(yǎng)基進(jìn)行混合共生發(fā)酵測試,混合共生發(fā)酵測試的培養(yǎng)溫度為37℃,培養(yǎng)時(shí)間為24h。菌種群在進(jìn)行混合共生發(fā)酵測試同時(shí)進(jìn)行菌種罐液態(tài)深層發(fā)酵測試。菌種罐液態(tài)深層發(fā)酵測試過程為:通過一般實(shí)驗(yàn)室級培養(yǎng)基進(jìn)行試管培養(yǎng)、搖床培養(yǎng),然后接種一級菌種罐培養(yǎng)測試,再按5%接入二級菌種罐進(jìn)行發(fā)酵測試,其中,一級菌種罐培養(yǎng)測試與二級菌種罐培育所采用的培養(yǎng)基與進(jìn)行混合共生發(fā)酵測試的培養(yǎng)基相同。發(fā)酵測試的培養(yǎng)時(shí)間為24小時(shí),培養(yǎng)溫度37℃。通過混合共生發(fā)酵測試以及液態(tài)深層發(fā)酵測試挑選出有最快發(fā)酵速度且總活菌數(shù)達(dá)到大于109個(gè)/毫升的配比組合,該配比組合即為本實(shí)施例中的復(fù)合菌種a。本實(shí)施例方式挑選出的復(fù)合菌種a中每毫升中性蛋白分解酶活性51.72±0.45u、內(nèi)切型纖維素分解酶活性8.22±0.27u、植酸分解酶活性4.12±0.92u、聚木糖分解酶活性24.05±5.66u、聚甘露糖分解酶活性28.43±0.99u。菌種群在進(jìn)行混合共生發(fā)酵測試同時(shí)進(jìn)行液體厭氧馴化培養(yǎng)測試,液體厭氧馴化培養(yǎng)測試的檢測時(shí)間為72小時(shí),培養(yǎng)溫度為28℃;測試挑選出有最快發(fā)酵速度,且總活菌數(shù)達(dá)到大于109個(gè)/毫升,液體的ph快速降低在4.0~5.0之間的配比組合,該配比組合即為本實(shí)施例中的復(fù)合菌種b,測試復(fù)合菌種b中相關(guān)非淀粉多糖及胰蛋白酶抑制因子的去除率、相關(guān)抗?fàn)I養(yǎng)因子,檢測結(jié)果如下表9所示。表9分析項(xiàng)目檢測數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)分析項(xiàng)目檢測數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)寡糖0.38%<1%黃豆抗原蛋白0.5以log2表示力價(jià)<1凝集素0.08ppm<1ppm尿素酶0.004mg/g氮<0.1mg/g氮β-大豆球蛋白0.2ppm<1ppm抗胰蛋白酶0.6mg/g<1mg/g蛋白大豆球蛋白1.1ppm<2ppm皂化物無檢出無檢出以上表9中的數(shù)據(jù)均以水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)參考,不同動(dòng)物及階段可以適度放寬標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明采用本實(shí)施例的發(fā)酵豆粕飼料液態(tài)飼喂生豬,飼喂方式以及結(jié)果如下:2015年11月-2016年2月,用于臺灣省屏東縣卑南鄉(xiāng)養(yǎng)豬場,該豬場采用液態(tài)飼喂系統(tǒng)養(yǎng)豬,飼養(yǎng)種類三元肉豬;飼養(yǎng)頭數(shù)180頭;所飼養(yǎng)的豬從平均體重>30kg開始,對照組采用常規(guī)豬飼料進(jìn)行飼養(yǎng),實(shí)驗(yàn)組以等量干物質(zhì)的豆粕發(fā)酵飼料取代常規(guī)豬飼料中10%糧食進(jìn)行飼養(yǎng)。對照組生豬飼料配比如表10所示,豆粕發(fā)酵飼料生豬飼料配比如表11所示。表10成分高床(31-60公斤)中豬(61-90公斤)大豬(91-120公斤)玉米641661671麩皮5090140豆粕280224168鹽份554.5豆油(油)000磷酸氫鈣11109石粉766賴氨酸210蛋氨酸10.50蘇氨酸110維生素10.50.5微量元素111總量100010001000總能量326032603260粗蛋白18.0416.0314.01水3176.63241.33306.0發(fā)酵菌液323.4258.7194.0表11成分高床(31-60公斤)中豬(61-90公斤)大豬(91-120公斤)玉米651661671麩皮4090140豆粕(發(fā)酵)280224168鹽份554.5豆油(油)000磷酸氫鈣11109石粉766賴氨酸210蛋氨酸10.50蘇氫酸110維生素10.50.5微量元素111總量100010001000總能量3321.203306.843292.49粗蛋白18.0516.0414.08水3176.63241.283305.96發(fā)酵菌液323.4258.72194.04表10中的發(fā)酵菌液等量外加至液態(tài)喂飼桶槽中,且不經(jīng)發(fā)酵。表11中的發(fā)酵菌液為全部加至發(fā)酵豆粕后的總量,發(fā)酵豆粕為折算干基10%水分的量。豆粕發(fā)酵飼料生豬飼養(yǎng)效果:平均75天從30kg長至100kg,消耗飼料折算原料170kg(干基10%水含量),豬料∶肉的質(zhì)量比<2.4∶1,而對照組中的豬料∶肉的質(zhì)量比=2.75:1。并且,本實(shí)施例中豬的育肥生長快速,精肉比低,節(jié)約糧食,經(jīng)濟(jì)效益十分顯著。通過本實(shí)施例的檢測數(shù)據(jù)可知:經(jīng)由菌種誘導(dǎo)馴化培養(yǎng),被選用于接種豆粕進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵以降解非淀粉多糖、蛋白酶生產(chǎn),加上液態(tài)厭氧發(fā)酵利用固態(tài)生成酶的持續(xù)降解豆粕,綜合批次連續(xù)生產(chǎn)可提升發(fā)酵速度、可溶性短肽含量、粗蛋白質(zhì)含量、酶生產(chǎn)及飼料體外消化分解率。因此利用本發(fā)明工藝接種多功能微生物于脫殼大豆粕粉中進(jìn)行固態(tài)及液態(tài)協(xié)同發(fā)酵轉(zhuǎn)換為易于幼齡及水產(chǎn)動(dòng)物吸收的蛋白飼料是可行方式,且相關(guān)粗蛋白質(zhì)含量高達(dá)60%,完全可以取代傳統(tǒng)使用高蛋白魚粉及乳清粉進(jìn)行動(dòng)物飼喂,配合復(fù)合菌株篩選接種技術(shù),減少飼料投入、從源頭減量、進(jìn)一步符合低碳養(yǎng)殖需求,值得農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)及永續(xù)經(jīng)營之推廣。實(shí)施例3本實(shí)施例與實(shí)施例1的區(qū)別在于,本實(shí)施例中將稻稈換作酒糟,由于酒糟和稻稈均為纖維質(zhì)物質(zhì),因而采用實(shí)施例1中纖維質(zhì)發(fā)酵類似工藝即可。其菌種挑選增加酸性纖維素酶、硅酸鹽類降解菌種即可。實(shí)施例4本實(shí)施例與實(shí)施例2的區(qū)別在于,本實(shí)施例中將豆粕換作羽毛粉即可,由于豆粕和羽毛粉均為高蛋白質(zhì)含量的物質(zhì),因而采用實(shí)施例2中的蛋白質(zhì)發(fā)酵類似工藝即可。其菌種挑選增加角蛋白、含硫蛋白酶降解菌種即可。以上所述的具體實(shí)施方式,對本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和有益效果進(jìn)行了進(jìn)一步詳細(xì)說明,所應(yīng)理解的是,以上所述僅為本發(fā)明的具體實(shí)施方式而已,并不用于限定本發(fā)明的保護(hù)范圍,凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi),所做的任何修改、等同替換、改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁12
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