本發(fā)明涉及一種乳酸菌豬用復(fù)合預(yù)混料及其制備方法，屬于飼料技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
隨著人民物質(zhì)生活水平的提高，對動物蛋白質(zhì)的需求量越來越大．從而促進(jìn)了養(yǎng)殖業(yè)和飼料工業(yè)的迅速發(fā)展。據(jù)各方面研究預(yù)測，我國到21世紀(jì)30年代。人口將由13億增加到16億，糧食總產(chǎn)量由5億噸增長到7．2億噸。其實際用于飼料量將由2．0億噸增長到3．6億噸。，到2030年，按16億人口人均日消費動物性蛋白質(zhì)25g計算，屆時，全同至少約需消費1460萬噸飼用蛋白質(zhì)，其中尤其是賴氨酸、蛋氨酸等限制性氨基酸缺口更大。
近年來，隨著許多國家限制和禁止使用抗生素以及飼料資源的日趨緊張，尋找高效、生態(tài)健康型飼料成為當(dāng)務(wù)之急。乳酸菌是應(yīng)用最早、最廣泛的益生菌，是一類可利用碳水化合物發(fā)酵產(chǎn)生大量乳酸的細(xì)菌總稱，且被廣泛應(yīng)用于乳制品等發(fā)酵食品和醫(yī)藥保健制品中。隨著乳酸菌自身優(yōu)良特性被不斷深入了解，其在飼料領(lǐng)域的應(yīng)用也具有巨大潛力。乳酸菌作為替代抗生素的新型飼料發(fā)酵劑，具有益生菌的效用，如維持動物胃腸道菌群平衡、提高機(jī)體免疫水平、促進(jìn)動物生長和改善環(huán)境，且具有無殘留、不產(chǎn)生耐藥性和無毒害作用等優(yōu)點，進(jìn)而確保人類健康與生態(tài)環(huán)境的安全，同時，乳酸菌發(fā)酵飼料作為功能性飼料，其還具有氣味香、適口性好、飼喂簡單方便、消化率高、功效穩(wěn)定等優(yōu)勢，具有良好的生產(chǎn)和應(yīng)用價值。
乳酸菌應(yīng)用于畜牧生產(chǎn)中已有多年，目前多數(shù)的產(chǎn)品為液體培養(yǎng)物，效果單一，達(dá)不到大量添加活菌劑于飼料的目的。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種乳酸菌豬用復(fù)合預(yù)混料及其制備方法，在原料中添加由特殊工藝制得的乳酸菌凍干粉，不僅可以改善腸道功能，減少氨氣排放，還可以有驅(qū)蟲作用，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，提高機(jī)體應(yīng)激性，改善豬肉嫩度，使熟肉的剪切力降低。
一種乳酸菌豬用復(fù)合預(yù)混料，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：維生素20-30份、葉酸2-4份、泛酸鈣9-11份、煙酸5-6份、無機(jī)礦物質(zhì)7-9份、磷酸氫鈣2-4份、氯化鈉10-14份、賴氨酸15-20份、乳酸菌凍干粉15-20份、植酸酶7-9份、載體40-50份。
制備方法為：將所有原料混合均勻，即得。
所述的乳酸菌凍干粉的制備方法為：
（1）將植物乳桿菌進(jìn)行菌種活化至三級種，培養(yǎng)基為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)基，培養(yǎng)方法為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)法；
（2）用發(fā)酵罐將活化好的植物乳桿菌進(jìn)行發(fā)酵，每罐裝發(fā)酵液20-30l，每1000ml發(fā)酵液組成為：蛋白胨15g，酵母膏15g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀4g，吐溫8010g，番茄汁100ml，攪勻后加入15ml中草藥提取物，混合均勻后調(diào)ph至7.0，用水定容至1000ml，于121℃滅菌15min，冷至35℃，進(jìn)行接種發(fā)酵；
（3）將活化好的植物乳桿菌按其發(fā)酵液總體積的10-20%體積接種量進(jìn)行不通氣發(fā)酵，罐壓用氦氣和氧氣的混合氣體維持，混合氣體中氦氣的體積比為1-3%；
（4）發(fā)酵參數(shù)：罐壓0.01-0.10mpa、攪拌速度20-40r/min、溫度37℃、ph5.5-6.5，發(fā)酵時間為15-20小時；
（5）發(fā)酵結(jié)束離心收集菌液，除去上清液得乳酸菌菌泥，將菌泥置于50-60℃的含磁場作用的恒溫水浴中，磁場強(qiáng)度為0.4-0.6tb，同時用60w的紅外燈泡垂直照射，處理30-40min，得到預(yù)處理后的菌泥；
（6）把預(yù)處理后的菌泥按菌泥總質(zhì)量的重量百分比加入：10-12%甘露醇、10-12%葡聚糖、5-8%賴氨酸、5-8%球蛋白、2-3%明膠、0.5-1.5%茶多酚、0.5-1.5%植酸，混合均勻，得到菌泥混合物；
（7）把菌泥混合物放入真空凍干機(jī)中凍干，先在-10℃條件下凍干20-30min，再在-50℃條件下凍干1-2h，最后在-80℃條件下凍干2-3h，凍干后研磨過篩得到乳酸菌凍干粉。
其中，中草藥提取物由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：紫蘇14-16份、香櫞9-11份、萊菔子9-11份、昆布5-6份。
其中，中草藥提取物的制備方法為：
（1）取紫蘇和昆布分別粉碎，混合，用95%乙醇-丙酮混合液50-60℃浸提80-90min，料液比為1g:10-12ml，95%乙醇和丙酮的體積比為10:3-5，過濾，得到濾液ⅰ；
（2）取香櫞粉碎，用60%乙醇70-80℃回流提取30-40min，料液比為1g:14-16ml，過濾，得到濾液ⅱ；
（3）把濾液ⅱ用相等體積的氯仿進(jìn)行萃取，分離得到水層；
（4）把萊菔子粉碎，加入至濾液ⅰ中超聲提取20-30min，過濾，得濾液ⅲ；
（5）把（3）步驟得到的水層和濾液?；旌希x心分離，取上清液，即為中草藥提取物。
所述的維生素由等質(zhì)量的維生素a、維生素d3、維生素e、維生素k3、維生素b1、維生素b2、維生素b6組成。
所述的無機(jī)礦物質(zhì)由等質(zhì)量的硫酸銅、硫酸亞鐵、硫酸錳、硫酸鋅、碘化鉀、氯化鈷組成。
所述的載體由等質(zhì)量的玉米粉、稻殼粉、膨潤土、沸石組成。
本發(fā)明制得的復(fù)合預(yù)混料在日糧中的添加量為5%。
植物乳桿菌可以在北京北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)研究院購買。
本發(fā)明的優(yōu)點在于：
原料中添加多種微量元素、氨基酸及精選飼料酶，同時還添加乳酸菌凍干粉，乳酸菌凍干粉在培養(yǎng)過程中采用添加中藥提取物的培養(yǎng)基，通入少量稀有氣體，得到的菌泥經(jīng)過磁場和紅外光的預(yù)處理，添加特定的保護(hù)劑，采用階段降溫的凍干工藝，聯(lián)合作用，制得的復(fù)合預(yù)混料不僅可以改善腸道功能，減少氨氣排放，還可以有驅(qū)蟲作用，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，提高機(jī)體應(yīng)激性，改善豬肉嫩度，使熟肉的剪切力降低。
具體實施例：
實施例1：
一種乳酸菌豬用復(fù)合預(yù)混料，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：維生素20份、葉酸2份、泛酸鈣9份、煙酸5份、無機(jī)礦物質(zhì)7份、磷酸氫鈣2份、氯化鈉10份、賴氨酸15份、乳酸菌凍干粉15份、植酸酶7份、載體40份。
制備方法為：將所有原料混合均勻，即得。
所述的乳酸菌凍干粉的制備方法為：
（1）將植物乳桿菌進(jìn)行菌種活化至三級種，培養(yǎng)基為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)基，培養(yǎng)方法為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)法；
（2）用發(fā)酵罐將活化好的植物乳桿菌進(jìn)行發(fā)酵，每罐裝發(fā)酵液20l，每1000ml發(fā)酵液組成為：蛋白胨15g，酵母膏15g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀4g，吐溫8010g，番茄汁100ml，攪勻后加入15ml中草藥提取物，混合均勻后調(diào)ph至7.0，用水定容至1000ml，于121℃滅菌15min，冷至35℃，進(jìn)行接種發(fā)酵；
（3）將活化好的植物乳桿菌按其發(fā)酵液總體積的10%體積接種量進(jìn)行不通氣發(fā)酵，罐壓用氦氣和氧氣的混合氣體維持，混合氣體中氦氣的體積比為1%；
（4）發(fā)酵參數(shù)：罐壓0.01mpa、攪拌速度20r/min、溫度37℃、ph5.5，發(fā)酵時間為15小時；
（5）發(fā)酵結(jié)束離心收集菌液，除去上清液得乳酸菌菌泥，將菌泥置于50℃的含磁場作用的恒溫水浴中，磁場強(qiáng)度為0.4tb，同時用60w的紅外燈泡垂直照射，處理30min，得到預(yù)處理后的菌泥；
（6）把預(yù)處理后的菌泥按菌泥總質(zhì)量的重量百分比加入：10%甘露醇、10%葡聚糖、5%賴氨酸、5%球蛋白、2%明膠、0.5%茶多酚、0.5%植酸，混合均勻，得到菌泥混合物；
（7）把菌泥混合物放入真空凍干機(jī)中凍干，先在-10℃條件下凍干20min，再在-50℃條件下凍干1h，最后在-80℃條件下凍干2h，凍干后研磨過篩得到乳酸菌凍干粉。
其中，中草藥提取物由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：紫蘇14份、香櫞9份、萊菔子9份、昆布5份。
其中，中草藥提取物的制備方法為：
（1）取紫蘇和昆布分別粉碎，混合，用95%乙醇-丙酮混合液50℃浸提80min，料液比為1g:10ml，95%乙醇和丙酮的體積比為10:3，過濾，得到濾液??；
（2）取香櫞粉碎，用60%乙醇70℃回流提取30min，料液比為1g:14ml，過濾，得到濾液ⅱ；
（3）把濾液ⅱ用相等體積的氯仿進(jìn)行萃取，分離得到水層；
（4）把萊菔子粉碎，加入至濾液ⅰ中超聲提取20min，過濾，得濾液ⅲ；
（5）把（3）步驟得到的水層和濾液ⅲ混合，離心分離，取上清液，即為中草藥提取物。
所述的維生素由等質(zhì)量的維生素a、維生素d3、維生素e、維生素k3、維生素b1、維生素b2、維生素b6組成。
所述的無機(jī)礦物質(zhì)由等質(zhì)量的硫酸銅、硫酸亞鐵、硫酸錳、硫酸鋅、碘化鉀、氯化鈷中組成。
所述的載體由等質(zhì)量的玉米粉、稻殼粉、膨潤土、沸石組成。
實施例2：
一種乳酸菌豬用復(fù)合預(yù)混料，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：維生素25份、葉酸3份、泛酸鈣10份、煙酸5.5份、無機(jī)礦物質(zhì)8份、磷酸氫鈣3份、氯化鈉12份、賴氨酸18份、乳酸菌凍干粉18份、植酸酶8份、載體45份。
制備方法為：將所有原料混合均勻，即得。
所述的乳酸菌凍干粉的制備方法為：
（1）將植物乳桿菌進(jìn)行菌種活化至三級種，培養(yǎng)基為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)基，培養(yǎng)方法為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)法；
（2）用發(fā)酵罐將活化好的植物乳桿菌進(jìn)行發(fā)酵，每罐裝發(fā)酵液25l，每1000ml發(fā)酵液組成為：蛋白胨15g，酵母膏15g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀4g，吐溫8010g，番茄汁100ml，攪勻后加入15ml中草藥提取物，混合均勻后調(diào)ph至7.0，用水定容至1000ml，于121℃滅菌15min，冷至35℃，進(jìn)行接種發(fā)酵；
（3）將活化好的植物乳桿菌按其發(fā)酵液總體積的15%體積接種量進(jìn)行不通氣發(fā)酵，罐壓用氦氣和氧氣的混合氣體維持，混合氣體中氦氣的體積比為2%；
（4）發(fā)酵參數(shù)：罐壓0.05mpa、攪拌速度30r/min、溫度37℃、ph6，發(fā)酵時間為18小時；
（5）發(fā)酵結(jié)束離心收集菌液，除去上清液得乳酸菌菌泥，將菌泥置于55℃的含磁場作用的恒溫水浴中，磁場強(qiáng)度為0.5tb，同時用60w的紅外燈泡垂直照射，處理35min，得到預(yù)處理后的菌泥；
（6）把預(yù)處理后的菌泥按菌泥總質(zhì)量的重量百分比加入：11%甘露醇、11%葡聚糖、6%賴氨酸、6%球蛋白、2.5%明膠、1%茶多酚、1%植酸，混合均勻，得到菌泥混合物；
（7）把菌泥混合物放入真空凍干機(jī)中凍干，先在-10℃條件下凍干25min，再在-50℃條件下凍干1.5h，最后在-80℃條件下凍干2.5h，凍干后研磨過篩得到乳酸菌凍干粉。
其中，中草藥提取物由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：紫蘇15份、香櫞10份、萊菔子10份、昆布5.5份。
其中，中草藥提取物的制備方法為：
（1）取紫蘇和昆布分別粉碎，混合，用95%乙醇-丙酮混合液55℃浸提85min，料液比為1g:11ml，95%乙醇和丙酮的體積比為10:4，過濾，得到濾液??；
（2）取香櫞粉碎，用60%乙醇75℃回流提取35min，料液比為1g:15ml，過濾，得到濾液ⅱ；
（3）把濾液ⅱ用相等體積的氯仿進(jìn)行萃取，分離得到水層；
（4）把萊菔子粉碎，加入至濾液ⅰ中超聲提取25min，過濾，得濾液ⅲ；
（5）把（3）步驟得到的水層和濾液?；旌希x心分離，取上清液，即為中草藥提取物。
所述的維生素由等質(zhì)量的維生素a、維生素d3、維生素e、維生素k3、維生素b1、維生素b2、維生素b6組成。
所述的無機(jī)礦物質(zhì)由等質(zhì)量的硫酸銅、硫酸亞鐵、硫酸錳、硫酸鋅、碘化鉀、氯化鈷中組成。
所述的載體由等質(zhì)量的玉米粉、稻殼粉、膨潤土、沸石組成。
實施例3：
一種乳酸菌豬用復(fù)合預(yù)混料，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：維生素20份、葉酸4份、泛酸鈣9份、煙酸6份、無機(jī)礦物質(zhì)7份、磷酸氫鈣4份、氯化鈉10份、賴氨酸20份、乳酸菌凍干粉15份、植酸酶9份、載體40份。
制備方法為：將所有原料混合均勻，即得。
所述的乳酸菌凍干粉的制備方法為：
（1）將植物乳桿菌進(jìn)行菌種活化至三級種，培養(yǎng)基為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)基，培養(yǎng)方法為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)法；
（2）用發(fā)酵罐將活化好的植物乳桿菌進(jìn)行發(fā)酵，每罐裝發(fā)酵液20l，每1000ml發(fā)酵液組成為：蛋白胨15g，酵母膏15g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀4g，吐溫8010g，番茄汁100ml，攪勻后加入15ml中草藥提取物，混合均勻后調(diào)ph至7.0，用水定容至1000ml，于121℃滅菌15min，冷至35℃，進(jìn)行接種發(fā)酵；
（3）將活化好的植物乳桿菌按其發(fā)酵液總體積的20%體積接種量進(jìn)行不通氣發(fā)酵，罐壓用氦氣和氧氣的混合氣體維持，混合氣體中氦氣的體積比為1%；
（4）發(fā)酵參數(shù)：罐壓0.01mpa、攪拌速度40r/min、溫度37℃、ph5.5，發(fā)酵時間為20小時；
（5）發(fā)酵結(jié)束離心收集菌液，除去上清液得乳酸菌菌泥，將菌泥置于50℃的含磁場作用的恒溫水浴中，磁場強(qiáng)度為0.6tb，同時用60w的紅外燈泡垂直照射，處理30min，得到預(yù)處理后的菌泥；
（6）把預(yù)處理后的菌泥按菌泥總質(zhì)量的重量百分比加入：10%甘露醇、12%葡聚糖、5%賴氨酸、8%球蛋白、2%明膠、1.5%茶多酚、0.5%植酸，混合均勻，得到菌泥混合物；
（7）把菌泥混合物放入真空凍干機(jī)中凍干，先在-10℃條件下凍干20min，再在-50℃條件下凍干2h，最后在-80℃條件下凍干2h，凍干后研磨過篩得到乳酸菌凍干粉。
其中，中草藥提取物由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：紫蘇14份、香櫞11份、萊菔子9份、昆布6份。
其中，中草藥提取物的制備方法為：
（1）取紫蘇和昆布分別粉碎，混合，用95%乙醇-丙酮混合液50℃浸提90min，料液比為1g:10ml，95%乙醇和丙酮的體積比為10:5，過濾，得到濾液ⅰ；
（2）取香櫞粉碎，用60%乙醇70℃回流提取40min，料液比為1g:14ml，過濾，得到濾液ⅱ；
（3）把濾液ⅱ用相等體積的氯仿進(jìn)行萃取，分離得到水層；
（4）把萊菔子粉碎，加入至濾液ⅰ中超聲提取30min，過濾，得濾液ⅲ；
（5）把（3）步驟得到的水層和濾液?；旌希x心分離，取上清液，即為中草藥提取物。
所述的維生素由等質(zhì)量的維生素a、維生素d3、維生素e、維生素k3、維生素b1、維生素b2、維生素b6組成。
所述的無機(jī)礦物質(zhì)由等質(zhì)量的硫酸銅、硫酸亞鐵、硫酸錳、硫酸鋅、碘化鉀、氯化鈷中組成。
所述的載體由等質(zhì)量的玉米粉、稻殼粉、膨潤土、沸石組成。
實施例4：
一種乳酸菌豬用復(fù)合預(yù)混料，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：維生素30份、葉酸4份、泛酸鈣11份、煙酸6份、無機(jī)礦物質(zhì)9份、磷酸氫鈣4份、氯化鈉14份、賴氨酸20份、乳酸菌凍干粉20份、植酸酶9份、載體50份。
制備方法為：將所有原料混合均勻，即得。
所述的乳酸菌凍干粉的制備方法為：
（1）將植物乳桿菌進(jìn)行菌種活化至三級種，培養(yǎng)基為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)基，培養(yǎng)方法為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)法；
（2）用發(fā)酵罐將活化好的植物乳桿菌進(jìn)行發(fā)酵，每罐裝發(fā)酵液30l，每1000ml發(fā)酵液組成為：蛋白胨15g，酵母膏15g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀4g，吐溫8010g，番茄汁100ml，攪勻后加入15ml中草藥提取物，混合均勻后調(diào)ph至7.0，用水定容至1000ml，于121℃滅菌15min，冷至35℃，進(jìn)行接種發(fā)酵；
（3）將活化好的植物乳桿菌按其發(fā)酵液總體積的20%體積接種量進(jìn)行不通氣發(fā)酵，罐壓用氦氣和氧氣的混合氣體維持，混合氣體中氦氣的體積比為3%；
（4）發(fā)酵參數(shù)：罐壓0.10mpa、攪拌速度40r/min、溫度37℃、ph6.5，發(fā)酵時間為20小時；
（5）發(fā)酵結(jié)束離心收集菌液，除去上清液得乳酸菌菌泥，將菌泥置于60℃的含磁場作用的恒溫水浴中，磁場強(qiáng)度為0.6tb，同時用60w的紅外燈泡垂直照射，處理40min，得到預(yù)處理后的菌泥；
（6）把預(yù)處理后的菌泥按菌泥總質(zhì)量的重量百分比加入：12%甘露醇、12%葡聚糖、8%賴氨酸、8%球蛋白、3%明膠、1.5%茶多酚、1.5%植酸，混合均勻，得到菌泥混合物；
（7）把菌泥混合物放入真空凍干機(jī)中凍干，先在-10℃條件下凍干30min，再在-50℃條件下凍干2h，最后在-80℃條件下凍干3h，凍干后研磨過篩得到乳酸菌凍干粉。
其中，中草藥提取物由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：紫蘇16份、香櫞11份、萊菔子11份、昆布6份。
其中，中草藥提取物的制備方法為：
（1）取紫蘇和昆布分別粉碎，混合，用95%乙醇-丙酮混合液60℃浸提90min，料液比為1g:12ml，95%乙醇和丙酮的體積比為10:5，過濾，得到濾液?。?/p>
（2）取香櫞粉碎，用60%乙醇80℃回流提取40min，料液比為1g:16ml，過濾，得到濾液ⅱ；
（3）把濾液ⅱ用相等體積的氯仿進(jìn)行萃取，分離得到水層；
（4）把萊菔子粉碎，加入至濾液ⅰ中超聲提取30min，過濾，得濾液ⅲ；
（5）把（3）步驟得到的水層和濾液?；旌?，離心分離，取上清液，即為中草藥提取物。
所述的維生素由等質(zhì)量的維生素a、維生素d3、維生素e、維生素k3、維生素b1、維生素b2、維生素b6組成。
所述的無機(jī)礦物質(zhì)由等質(zhì)量的硫酸銅、硫酸亞鐵、硫酸錳、硫酸鋅、碘化鉀、氯化鈷中組成。
所述的載體由等質(zhì)量的玉米粉、稻殼粉、膨潤土、沸石組成。
對比例1：
一種乳酸菌豬用復(fù)合預(yù)混料，由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：維生素40份、葉酸1份、泛酸鈣15份、煙酸3份、無機(jī)礦物質(zhì)10份、磷酸氫鈣1份、氯化鈉6份、賴氨酸10份、乳酸菌凍干粉25份、植酸酶5份、載體35份。
其余同實施例1。
對比例2：
一種乳酸菌豬用復(fù)合預(yù)混料，
其中，中草藥提取物由下列質(zhì)量份數(shù)的原料制成：香櫞10份、萊菔子10份、昆布5.5份。
其中，中草藥提取物的制備方法為：
（1）昆布分別粉碎，混合，用95%乙醇-丙酮混合液55℃浸提85min，料液比為1g:11ml，95%乙醇和丙酮的體積比為10:4，過濾，得到濾液ⅰ；
（2）取香櫞粉碎，用60%乙醇75℃回流提取35min，料液比為1g:15ml，過濾，得到濾液ⅱ；
（3）把濾液ⅱ用相等體積的氯仿進(jìn)行萃取，分離得到水層；
（4）把萊菔子粉碎，加入至濾液ⅰ中超聲提取25min，過濾，得濾液ⅲ；
（5）把（3）步驟得到的水層和濾液ⅲ混合，離心分離，取上清液，即為中草藥提取物。
其余同實施例2。
對比例3：
一種乳酸菌豬用復(fù)合預(yù)混料，
所述的乳酸菌凍干粉的制備方法為：
（1）將植物乳桿菌進(jìn)行菌種活化至三級種，培養(yǎng)基為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)基，培養(yǎng)方法為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)法；
（2）用發(fā)酵罐將活化好的植物乳桿菌進(jìn)行發(fā)酵，每罐裝發(fā)酵液25l，每1000ml發(fā)酵液組成為：蛋白胨15g，酵母膏15g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀4g，吐溫8010g，番茄汁100ml，攪勻后加入15ml中草藥提取物，混合均勻后調(diào)ph至7.0，用水定容至1000ml，于121℃滅菌15min，冷至35℃，進(jìn)行接種發(fā)酵；
（3）將活化好的植物乳桿菌按其發(fā)酵液總體積的15%體積接種量進(jìn)行不通氣發(fā)酵，罐壓用氦氣和氧氣的混合氣體維持，混合氣體中氦氣的體積比為2%；
（4）發(fā)酵參數(shù)：罐壓0.05mpa、攪拌速度30r/min、溫度37℃、ph6，發(fā)酵時間為18小時；
（5）發(fā)酵結(jié)束離心收集菌液，除去上清液得乳酸菌菌泥，按菌泥總質(zhì)量的重量百分比加入：11%甘露醇、11%葡聚糖、6%賴氨酸、6%球蛋白、2.5%明膠、1%茶多酚、1%植酸，混合均勻，得到菌泥混合物；
（6）把菌泥混合物放入真空凍干機(jī)中凍干，先在-10℃條件下凍干25min，再在-50℃條件下凍干1.5h，最后在-80℃條件下凍干2.5h，凍干后研磨過篩得到乳酸菌凍干粉。
其余同實施例2。
對比例4：
一種乳酸菌豬用復(fù)合預(yù)混料，
所述的乳酸菌凍干粉的制備方法為：
（1）將植物乳桿菌進(jìn)行菌種活化至三級種，培養(yǎng)基為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)基，培養(yǎng)方法為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)法；
（2）用發(fā)酵罐將活化好的植物乳桿菌進(jìn)行發(fā)酵，每罐裝發(fā)酵液30l，每1000ml發(fā)酵液組成為：蛋白胨15g，酵母膏15g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀4g，吐溫8010g，番茄汁100ml，攪勻后加入15ml中草藥提取物，混合均勻后調(diào)ph至7.0，用水定容至1000ml，于121℃滅菌15min，冷至35℃，進(jìn)行接種發(fā)酵；
（3）將活化好的植物乳桿菌按其發(fā)酵液總體積的20%體積接種量進(jìn)行不通氣發(fā)酵，罐壓用氦氣和氧氣的混合氣體維持，混合氣體中氦氣的體積比為3%；
（4）發(fā)酵參數(shù)：罐壓0.10mpa、攪拌速度40r/min、溫度37℃、ph6.5，發(fā)酵時間為20小時；
（5）發(fā)酵結(jié)束離心收集菌液，除去上清液得乳酸菌菌泥，將菌泥置于60℃的含磁場作用的恒溫水浴中，磁場強(qiáng)度為0.6tb，同時用60w的紅外燈泡垂直照射，處理40min，得到預(yù)處理后的菌泥；
（6）把預(yù)處理后的菌泥按菌泥總質(zhì)量的重量百分比加入：12%甘露醇、12%葡聚糖、8%賴氨酸、8%球蛋白、3%明膠，混合均勻，得到菌泥混合物；
（7）把菌泥混合物放入真空凍干機(jī)中凍干，先在-10℃條件下凍干30min，再在-50℃條件下凍干2h，最后在-80℃條件下凍干3h，凍干后研磨過篩得到乳酸菌凍干粉。
其余同實施例4。
對比例5：
一種乳酸菌豬用復(fù)合預(yù)混料，
所述的乳酸菌凍干粉的制備方法為：
（1）將植物乳桿菌進(jìn)行菌種活化至三級種，培養(yǎng)基為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)基，培養(yǎng)方法為常規(guī)乳酸菌培養(yǎng)法；
（2）用發(fā)酵罐將活化好的植物乳桿菌進(jìn)行發(fā)酵，每罐裝發(fā)酵液30l，每1000ml發(fā)酵液組成為：蛋白胨15g，酵母膏15g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀4g，吐溫8010g，番茄汁100ml，攪勻后加入15ml中草藥提取物，混合均勻后調(diào)ph至7.0，用水定容至1000ml，于121℃滅菌15min，冷至35℃，進(jìn)行接種發(fā)酵；
（3）將活化好的植物乳桿菌按其發(fā)酵液總體積的20%體積接種量進(jìn)行不通氣發(fā)酵，罐壓用氦氣和氧氣的混合氣體維持，混合氣體中氦氣的體積比為3%；
（4）發(fā)酵參數(shù)：罐壓0.10mpa、攪拌速度40r/min、溫度37℃、ph6.5，發(fā)酵時間為20小時；
（5）發(fā)酵結(jié)束離心收集菌液，除去上清液得乳酸菌菌泥，將菌泥置于60℃的含磁場作用的恒溫水浴中，磁場強(qiáng)度為0.6tb，同時用60w的紅外燈泡垂直照射，處理40min，得到預(yù)處理后的菌泥；
（6）把預(yù)處理后的菌泥按菌泥總質(zhì)量的重量百分比加入：12%甘露醇、12%葡聚糖、8%賴氨酸、8%球蛋白、3%明膠、1.5%茶多酚、1.5%植酸，混合均勻，得到菌泥混合物；
（7）把菌泥混合物放入真空凍干機(jī)中凍干，在-80℃條件下凍干4h，凍干后研磨過篩得到乳酸菌凍干粉。
其余同實施例4。
試驗例1：糞尿中含磷、氮量及熟肉剪切力實驗
選擇江西派尼生物科技有限公司下屬養(yǎng)殖場平均體重約55kg的杜長大健康豬600頭，隨機(jī)分成10組，每組6個重復(fù),每個重復(fù)10頭，公母各半，其中包括一個空白對照組和9個試驗組?？瞻讓φ战M豬日糧中不添加任何酶制劑；其余7個試驗組豬日糧中分別添加了實施例1-4和對比例1-5制得的復(fù)合預(yù)混料；生豬自由采食和飲水，按常規(guī)進(jìn)行免疫及驅(qū)蟲，試驗期為20天。在試驗開始后每天采集各組豬的糞尿混合物,風(fēng)干后測定其含磷量和含氮量,計算平均值和糞尿中含磷量（含氮量）降低率，結(jié)果分別見表1、表2。
第20天時每組隨機(jī)選取8頭試驗豬，共計80頭進(jìn)行屠宰，宰后立即于右胴體第6～12肋處取背最長肌，室溫（25℃）下散熱2h，然后迅速移至4℃冰箱內(nèi)保存。保存72小時后取2塊3cm厚的背最長肌，分別置于蒸煮袋中（與水隔絕），肉樣中心插入溫度計，放入75℃水浴鍋中加熱約30min，待肉樣中心溫度達(dá)到70℃時，持續(xù)10min，取出；冷卻至室溫，每塊背最長肌沿肌纖維方向鉆取6塊直徑×長度=1.27cm×2.5cm肉樣；所取肉樣于4℃冰箱中過夜，于第2天，以嫩度計沿肌纖維垂直方向測定剪切力，并計算平均值，結(jié)果見表3。
其中：糞尿中含磷（氮）量降低率（%）=[1－試驗組糞尿中含磷（氮）量平均值／空白對照組糞尿中含磷（氮）量平均值]×100%
剪切力值降低率（%）=[1－試驗組剪切力值／空白對照組剪切力值]×100%
從表1、2可知，本發(fā)明制得的復(fù)合預(yù)混料（實施例1-4）可以明顯降低健康豬糞尿中的含磷量和含氮量，效果優(yōu)于對比例1（原料配比不同）、對比例2（乳酸菌發(fā)酵液中中草藥提取液不同）、對比例3（乳酸菌凍干前未進(jìn)行預(yù)處理）、對比例4（凍干采用保護(hù)劑不同）和對比例5（直接降溫凍干），尤其是以實施例2的效果最優(yōu)，可見本發(fā)明原料的配比、乳酸菌培養(yǎng)基、乳酸菌凍干的預(yù)處理、凍干采用保護(hù)劑及凍干的降溫工藝均對制得的復(fù)合預(yù)混料的降低磷、氮量的排放有影響，因此本發(fā)明采用了一定的原料配比、選用特定的乳酸菌培養(yǎng)基、乳酸菌凍干前的預(yù)處理工藝、凍干的保護(hù)劑及凍干的降溫工藝，制得的復(fù)合預(yù)混料可以明顯降低健康豬糞尿中的含磷量和含氮量，降低磷、氨排放。
從表3可知，本發(fā)明制得的復(fù)合預(yù)混料（實施例1-4）可以明顯降低熟肉剪切力，效果優(yōu)于對比例1（原料配比不同）、對比例2（乳酸菌發(fā)酵液中中草藥提取液不同）、對比例3（乳酸菌凍干前未進(jìn)行預(yù)處理）、對比例4（凍干采用保護(hù)劑不同）和對比例5（直接降溫凍干），尤其是以實施例2的效果最優(yōu)，可見本發(fā)明原料的配比、乳酸菌培養(yǎng)基、乳酸菌凍干的預(yù)處理、凍干采用保護(hù)劑及凍干的降溫工藝均對制得的復(fù)合預(yù)混料對熟肉的剪切力有影響，因此本發(fā)明采用了一定的原料配比、選用特定的乳酸菌培養(yǎng)基、乳酸菌凍干前的預(yù)處理工藝、凍干的保護(hù)劑及凍干的降溫工藝，制得的復(fù)合預(yù)混料可以明顯降低熟肉剪切力，改善豬肉的嫩度。
試驗例2：抗應(yīng)激動物實驗
（1）對小鼠負(fù)重游泳的影響
小鼠100只，18-22g，雌雄各半，隨機(jī)分為實施例1-4組、對比例1-5組、對照組共10組，每組各10只。實施例1-3組和對比例1-3組分別按各組制得的產(chǎn)品0.5g/kg灌胃，對照組按0.5g/kg蒸餾水灌胃。每日給藥1次，連續(xù)7d。于末次給藥30min后，按小鼠體重的10％增加負(fù)荷，即將負(fù)重物束于小鼠尾根部。然后將小鼠單個放入水溫為25±1℃、水深20cm的水槽中。小鼠頭部沉入水巾10s不能浮出水面者即為體力耗竭，記錄小鼠游泳時間。
（2）對小鼠耐缺氧的影響
小鼠100只，18-22g，雌雄各半，隨機(jī)分為實施例1-4組、對比例1-5組、對照組共10組，每組各10只。實施例1-3組和對比例1-3組分別按各組制得的產(chǎn)品0.5g/kg灌胃，對照組按0.5g/kg蒸餾水灌胃。每日給藥1次，連續(xù)7d。于末次給藥30min后，將小鼠放人盛有10g鈉石灰的廣口瓶內(nèi)(每瓶只放1只小鼠)，用凡士林涂抹瓶口蓋嚴(yán)，使之不漏氣。以呼吸停止為死亡判斷指標(biāo)，記錄小鼠存活時間。
（3）對小鼠耐高溫的影響
小鼠100只，18-22g，雌雄各半，隨機(jī)分為實施例1-4組、對比例1-5組、對照組共10組，每組各10只。實施例1-3組和對比例1-3組分別按各組制得的產(chǎn)品0.5g/kg灌胃，對照組按0.5g/kg蒸餾水灌胃。每日給藥1次，連續(xù)7d。于末次給藥30min后，將小鼠單個放人45℃的恒溫箱內(nèi)。觀察小鼠，以呼吸停止為死亡判斷指標(biāo)，記錄小鼠存活時間。試驗數(shù)據(jù)采用spss13.0分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果如表4所示。
試驗從抗疲勞、耐缺氧、耐高溫3個方面研究了本發(fā)明對動物機(jī)體抗應(yīng)激反應(yīng)能力的影響。從表4數(shù)據(jù)可以看出，本發(fā)明實施例1-4可以明顯提高小鼠的負(fù)重游泳時間、缺氧存活時間和高溫存活時間，而且優(yōu)于對比例1（原料配比不同）、對比例2（乳酸菌發(fā)酵液中中草藥提取液不同）、對比例3（乳酸菌凍干前未進(jìn)行預(yù)處理）、對比例4（凍干采用保護(hù)劑不同）和對比例5（直接降溫凍干），尤其是以實施例2的效果最優(yōu)，可見本發(fā)明原料的配比、乳酸菌培養(yǎng)基、乳酸菌凍干的預(yù)處理、凍干采用保護(hù)劑及凍干的降溫工藝均對制得的復(fù)合預(yù)混料的抗應(yīng)激性有影響，因此本發(fā)明采用了一定的原料配比、選用特定的乳酸菌培養(yǎng)基、乳酸菌凍干前的預(yù)處理工藝、凍干的保護(hù)劑及凍干的降溫工藝，制得的復(fù)合預(yù)混料具有較強(qiáng)的抗疲勞、耐缺氧、耐高溫等抗應(yīng)激的作用，可使處于應(yīng)激狀態(tài)下的機(jī)體體力增強(qiáng)，耐疲勞能力增強(qiáng)，耗氧降低，耐高溫環(huán)境，對機(jī)體重要器官起保護(hù)作用。
試驗例3：驅(qū)蟲實驗
試驗前對豬只進(jìn)行糞便檢查，選擇每克糞便中含蟲卵數(shù)（epg，單位：個/g）大于200的體重為53.6±2.8kg的200頭豬為本試驗用豬，將其隨機(jī)分為10組,其中9個試驗組，1個對照組，每組20頭，公母各半。9個試驗組豬日糧中分別添加了實施例1-4和對比例1-5制得的復(fù)合預(yù)混料，對照組不添加復(fù)合預(yù)混料，其他同試驗組。驅(qū)蟲前（第0天)和投藥后第7天對各豬只直腸采糞，記錄各組epg平均值。投藥后第15天分別用沉淀和漂浮集卵法查找蟲卵，以此作為驅(qū)蟲后的指標(biāo)。注意觀察投藥后豬只的臨床反應(yīng),并觀察其飲食、精神、排尿、排糞等情況。結(jié)果由表5、6所示。
蟲卵減少率=[（驅(qū)蟲前epg－驅(qū)蟲后epg）/驅(qū)蟲前epg]×100%
蟲卵轉(zhuǎn)陰率=[蟲卵轉(zhuǎn)陰動物數(shù)/試驗動物數(shù)]×100%
本次試驗發(fā)現(xiàn)寄生蟲有蛔蟲、肺線蟲、食道口線蟲、鞭蟲、姜片吸蟲、棘頭蟲和豬小袋纖毛蟲等。從表5、6可知，投藥第7天檢查蟲卵本發(fā)明制得的復(fù)合預(yù)混料（實施例1-4）可以明顯降低蟲卵的數(shù)量，且每組中各豬只的飲食正常、精神狀態(tài)良好、排尿和排糞情況正常，未見任何毒副反應(yīng)，效果優(yōu)于對比例1（原料配比不同）、對比例2（乳酸菌發(fā)酵液中中草藥提取液不同）、對比例3（乳酸菌凍干前未進(jìn)行預(yù)處理）、對比例4（凍干采用保護(hù)劑不同）和對比例5（直接降溫凍干），尤其是以實施例2的效果最優(yōu)，可見本發(fā)明原料的配比、乳酸菌培養(yǎng)基、乳酸菌凍干的預(yù)處理、凍干采用保護(hù)劑及凍干的降溫工藝均對制得的復(fù)合預(yù)混料的驅(qū)蟲效果有影響，因此本發(fā)明采用了一定的原料配比、選用特定的乳酸菌培養(yǎng)基、乳酸菌凍干前的預(yù)處理工藝、凍干的保護(hù)劑及凍干的降溫工藝，制得的復(fù)合預(yù)混料可以明顯降低豬只糞便中的蟲卵，有明顯的驅(qū)蟲效果。