本發(fā)明涉及一種飼料添加劑，特別涉及一種具有獨特功效的含有活性益生菌的飼料添加劑及其制備方法和用途。本發(fā)明屬于飼料研究
技術領域：
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背景技術：
：目前，人們高度重視食品安全，世界上許多國家紛紛禁止在飼料中使用抗生素，有關專家提出，要想從根本上保證食品安全，只有從食物鏈的角度綜臺考慮，才能獲得徹底解決。因此，人們開始紛紛尋求其它的替代品和替代技術，人們大量使用有機的酸化劑來替代抗生素促進劑，并對其寄以厚望，酸化劑雖然有一定效果，但使用效果受限?！懊褚允碁樘臁?，食品是人類健康和生存不可缺少的物質。近幾年來，隨著人們對安全、衛(wèi)生、健康、生態(tài)、環(huán)保等問題的日益關注和綠色意識的不斷增強，綠色觀念已深入人心，一股追求無污染、無殘留、安全、衛(wèi)生、健康的“綠色食品熱風靡全球。在我國許多地方，綠色食品的開發(fā)與生產也日見升溫，倍受重視。如今，在很大程度上說，“綠色”已成為安全、衛(wèi)生、健康食品的象征。據(jù)專家預測，今后，綠色食品將成為人們消費的主流畜禽是食品大家族中的重要成員，是人類動物蛋白質的主要來源。無論是從滿足人們消費需求或是從提高經濟效益和市場競爭能力來看，發(fā)展綠色食品既是客觀需要，也是現(xiàn)實選擇。要發(fā)展綠色畜禽產品，就要重點抓好藥物殘留控制，那么就必須從人類食物鏈的源頭一“飼料”抓起，努力降低殘留和污染。目前，我國畜禽產品總量已經供大于求，國內市場已相對飽和，市場競爭激烈，特別是國際市場，對畜禽產品內在質量的要求十分嚴格，要求的重點是藥物殘留和細菌污染，已經形成了難以逾越的技術性貿易壁壘，也已成為我國畜禽產品進人國際市場的主要障礙。在國際貿易中，我國出口的畜禽產品因殘留超標、污染嚴重而被退貨，銷毀的案例屢見不鮮?，F(xiàn)在，取得綠色食品認證已經成為產品進入國際市場的通行證，許多國家宣布，非綠色產品或非綠色標志產品的進口將受到數(shù)量和價格的嚴格限制，而綠色食品在國際市場上，供不應求。可以預料，在未來的5～10年內，全世界的主要國家將全面禁止藥物作為飼料添加劑。在國內市場，我國畜禽產品將面臨國外優(yōu)質畜禽產品大量涌入的激烈競爭，使我國畜禽產品的市場更加狹小；另一方面，在國際市場，我國畜禽產品將面臨安全、衛(wèi)生、健康、生態(tài)，環(huán)保等方面的嚴格要求.使我國畜禽產品進入國際市場更加困難，而國內市場面臨競爭，國際市場壁壘重重，這種雙重挑戰(zhàn)無疑是嚴峻的，也是難回避的。我們必須正視這種現(xiàn)實，大力發(fā)展綠色飼料，生產綠色畜禽產品，增強市場競爭能力，才能與之抗衡，減少沖擊，穩(wěn)定國內市場擴大國際市場，避免被動。因此，盡快發(fā)展符合我國國情的生物飼料(綠色飼料)已勢在必行。生物飼料技術是適應人類食品生產需要的第四代飼料技術；生物飼料即發(fā)酵飼料是近年來出現(xiàn)的一個新概念，以往有學者把生物飼料定義為利用生物的新陳代謝和繁殖的菌體來生產的飼料，這實際上是單細胞蛋白飼料的概念，并不能準確反映當今生物飼料的真正含義。結合國內外的現(xiàn)實情況，生物飼料即指利用某些特殊的有益功能微生物與飼料(不含藥物)及輔料混和發(fā)酵經干燥或制粒等特殊工藝加工而成的含活性益生菌的安全、無污染、無藥物殘留的優(yōu)質飼料。它是生物技術化的一種新型飼料，是適應人類食品生產需要的第四代飼料技術。目前國內微生物飼料添加劑存在的問題有；1.發(fā)酵設備落后在某種意義上說生產發(fā)酵的條件都不規(guī)范，這樣一批復一批地生產，從而使產品安全性存在隱患。發(fā)酵技術綜合水平較差，發(fā)酵產品雜菌較多，因而將此種添加劑用于飼料時，動物腹瀉率較大，致使產品達不到預期功效。2.菌種來源復雜針對性不強，一種產品應用于多種動物，不科學。3.菌種失活問題由于各種微生物菌種組合、篩選、培育方向和方法的不同，生產水平、針對使用動物種類以及發(fā)酵加工、儲存條件等因素差異，微生物發(fā)酵生產和應用效果差異較大，質量難以保證。部分發(fā)酵產品中的有益菌在培養(yǎng)、干燥、分裝、保存、加工等生產過程中死亡，降低了微生物的活性。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種安全、無污染、無藥物殘留的含活性益生菌的飼料添加劑，將本發(fā)明的飼料添加劑添加到飼料中可防治動物發(fā)生細菌性腹瀉和消化不良性腹瀉，提高動物機體免疫力和抗應激能力，增強動物消化率和飼料轉化率，促進動物生長，改善肉品質風味，可大幅度減少或免除抗生素等藥物使用，提高動物的成活率，降低生產成本，減少對環(huán)境的污染。為了達到上述目的，本發(fā)明采用了以下技術手段：本發(fā)明的一種含有活性益生菌的飼料添加劑，其是將嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌、保加利亞乳桿菌、嬰兒雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、啤酒酵母、紅酵母以及產朊假絲酵母的菌液按照體積比為1-3:1-3:1-3:1-2:0-2:0-2:1-3:1-3:1-3:1-3:1-3:0-2混合后得到菌液的混合物，然后將菌液的混合物與輔料以及水混合裝池進行固體發(fā)酵，經低溫干燥、粉碎后，與低聚糖復配后得到，其中，所述的固體發(fā)酵是指在37℃發(fā)酵72-96小時。在本發(fā)明中，優(yōu)選的，所述的輔料包括豆粕、棉粕、菜粕、玉米、小麥以及麩皮，所述的低聚糖為低聚異麥芽糖。在本發(fā)明的一個具體實施例中，優(yōu)選的，是將嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌、保加利亞乳桿菌、嬰兒雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、啤酒酵母、紅酵母以及產朊假絲酵母的菌液按照體積比為3:3:2:1:2:2:1:1:1:1:1:0混合。在本發(fā)明的一個具體實施例中，優(yōu)選的，是將嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌、保加利亞乳桿菌、嬰兒雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、啤酒酵母、紅酵母以及產朊假絲酵母的菌液按照體積比為2:2:2:1:1:1:2:2:2:1:1:0混合。在本發(fā)明的一個具體實施例中，優(yōu)選的，是將嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌、保加利亞乳桿菌、嬰兒雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、啤酒酵母、紅酵母以及產朊假絲酵母的菌液按照體積比為1:1:1:1:0:0:3:3:3:2:3:2混合。在本發(fā)明中，優(yōu)選的，嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌、保加利亞乳桿菌、嬰兒雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、啤酒酵母、紅酵母或產朊假絲酵母的菌液中菌體濃度為5-50億/ml。在本發(fā)明中，優(yōu)選的，每10L菌液的混合物中，加入0.5-1.4噸的輔料進行固體發(fā)酵，所加入的水與菌液混合物的體積比為35-45：1。進一步的，本發(fā)明還提出了一種制備所述的含有活性益生菌的飼料添加劑的方法，包括以下步驟：(1)按照體積比為1-3:1-3:1-3:1-2:0-2:0-2:1-3:1-3:1-3:1-3:1-3:0-2，將嗜酸乳桿菌菌液、植物乳桿菌菌液、干酪乳桿菌菌液、保加利亞乳桿菌菌液、嬰兒雙歧桿菌菌液、青春雙歧桿菌菌液、地衣芽孢桿菌菌液、枯草芽孢桿菌菌液、釀酒酵母菌菌液、啤酒酵母菌菌液、紅酵母菌液混合后，加40℃水以及輔料混勻裝入發(fā)酵池，37℃下發(fā)酵72-96小時出池；(2)烘干發(fā)酵出池后將發(fā)酵料用滾筒式烘干機進行第一次55℃烘干，將滾筒式烘干機烘干后的發(fā)酵料在50℃氣流中二次干燥；(3)粉碎烘干好的發(fā)酵料用粉碎機粉碎成100目；(4)復配用混合機將粉碎好的發(fā)酵料和低聚糖混合即成為成品；(5)包裝塑料袋真空包裝后加牛皮紙外包裝，每袋20公斤。在本發(fā)明中，優(yōu)選的，所述的一種制備含有活性益生菌的飼料添加劑的方法，包括以下步驟：(1)按照體積比為3:3:2:1:2:2:1:1:1:1:1:0，將30升嗜酸乳桿菌菌液、30升植物乳桿菌菌液、20升干酪乳桿菌菌液、10升保加利亞乳桿菌菌液、20升嬰兒雙歧桿菌菌液、20升青春雙歧桿菌菌液、10升地衣芽孢桿菌菌液、10升枯草芽孢桿菌菌液、10升釀酒酵母菌液、10升啤酒酵母菌液、10升紅酵母菌液混合后，加40℃水7920升與18噸豆粕混勻裝入發(fā)酵池底部，厚度為35-45公分；按照體積比為2:2:2:1:1:1:2:2:2:1:1:0，將20升嗜酸乳桿菌菌液、20升植物乳桿菌菌液、20升干酪乳桿菌菌液、10升保加利亞乳桿菌菌液、10升嬰兒雙歧桿菌菌液、10升青春雙歧桿菌菌液、20升地衣芽孢桿菌菌液、20升枯草芽孢桿菌菌液、20升釀酒酵母菌液、10升啤酒酵母菌液、10升紅酵母菌液混合后，加40℃水6120升與14噸豆粕混勻裝入發(fā)酵池中部，厚度為25-35公分；按照體積比為1:1:1:1:0:0:3:3:3:2:3:2，將10升嗜酸乳桿菌菌液、10升植物乳桿菌菌液、10升干酪乳桿菌菌液、10升保加利亞乳桿菌菌液、30升地衣芽孢桿菌菌液、30升枯草芽孢桿菌菌液、30升釀酒酵母菌液、20升啤酒酵母菌液、30升紅酵母菌液、20升產朊假絲酵母菌液混合后，加40℃水7880升與18噸輔豆粕混勻裝入發(fā)酵池上部，厚度為35-45公分；(2)將步驟(1)得到的混合發(fā)酵料在37℃下發(fā)酵72-96小時出池；(3)烘干發(fā)酵出池后將發(fā)酵料用滾筒式烘干機進行第一次55℃烘干，將滾筒式烘干機烘干后的發(fā)酵料在50℃氣流中二次干燥；(4)粉碎烘干好的發(fā)酵料用粉碎機粉碎成100目；(5)復配用混合機將粉碎好的發(fā)酵料與其重量1％(w/w)的低聚異麥芽糖混合即成為成品；(6)包裝塑料袋真空包裝后加牛皮紙外包裝，每袋20公斤。更進一步的，本發(fā)明還提出了以上任一項所述的飼料添加劑在制備動物飼料中的應用。本發(fā)明針對飼料添加劑的穩(wěn)定性和功效采取不同菌種發(fā)酵劑量比例和分層發(fā)酵方法，使用的各類菌種是經過有針對性馴化的優(yōu)良菌株，利用多菌種、多溫相、多重發(fā)酵技術和對應用動物的不同，科學的配比使其功效更加穩(wěn)定可靠。本發(fā)明的產品富含大量的生物活性物質(免疫因子，有機酸、抑菌物質、促生長物質)、多種消化酶類、生物活性小肽和游離氨基酸以及多種益生活菌。將本發(fā)明的飼料添加劑添加到飼料中可防治細菌性腹瀉和消化不良性腹瀉，提高動物機體免疫力和抗應激能力，增強動物消化率和飼料轉化率，促進動物生長，改善肉品質風味，可大幅度減少或免除抗生素等藥物使用，提高動物的成活率，降低生產成本，減少對環(huán)境的污染。這一產品的推廣應用，將大大降低飼料工業(yè)對魚粉等動物性蛋白飼料的依賴性，推動飼料工業(yè)的技術進步，同時產生巨大社會效益和經濟效益。具體實施方式下面結合具體實施例來進一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點和特點將會隨著描述而更為清楚。但這些實施例僅是范例性的，并不對本發(fā)明的范圍構成任何限制。本領域技術人員應該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對本發(fā)明技術方案的細節(jié)和形式進行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護范圍內。實施例1本發(fā)明的一種含有活性益生菌的飼料添加劑的制備1、菌種及其來源嗜酸乳桿菌(CICC22150)、植物乳桿菌(CICC21794)、干酪乳桿菌(CICC23488)、保加利亞乳桿菌(CICC20089)、嬰兒雙歧桿菌(CICC21716)、青春雙歧桿菌(CICC6176)、地衣芽孢桿菌(CICC20083)、枯草芽孢桿菌(CICC20029)、釀酒酵母(CICC1251)、啤酒酵母(CICC31105)、紅酵母(CICC31192)以及產朊假絲酵母(CICC1422)均購買自中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心(ChinaCenterofIndustrialCultureCollection,CICC)。2、發(fā)酵菌種種子液的制備嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌、保加利亞乳桿菌分別接種于菌種MRS平板培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)48小時。嬰兒雙歧桿菌、青春雙歧桿菌分別接種于改良GAM培養(yǎng)基上37℃厭氧培養(yǎng)48小時。地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌分別接種于芽孢桿菌培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)24小時。釀酒酵母、啤酒酵母、紅酵母、產朊假絲酵母分別接種于麥芽汁培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基或YPD培養(yǎng)基28℃培養(yǎng)36小時。3、培養(yǎng)基配方和制作方法3.1乳桿菌培養(yǎng)基(MRS平板培養(yǎng)基)：酪蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母浸膏(或粉劑)5.0g，葡萄糖2.0g，磷酸氫二鉀5.0g，檸檬酸三氨2.0g，乙酸鈉5.0g，硫酸鎂5.0g，硫酸錳0.5g，吐溫-801.0g，pH控制在6.0以下(乙酸調)，加蒸餾水至1000ml，8磅20分鐘滅菌。3.2雙岐桿菌培養(yǎng)基(改良GAM培養(yǎng)基)：大豆胨3.0g，酵母粉5.0g，牛肉膏5.0g，胰蛋白胨5.0g，胰酶水解酪蛋白5.0g，肝浸液100ml，葡萄糖3.0g，氯化鈉3.0g，可溶性淀粉3.0g，硫代乙醇酸鈉0.15g，瓊脂15.0g，加蒸餾水至900ml，將各成分混合加熱溶解，吐溫-801.0g，鹽溶液10ml，維生素混合溶液10ml，西紅柿汁100ml，冷卻后校正pH為7.2，10磅15分鐘高壓滅菌。其中，雙岐桿菌培養(yǎng)基特殊成分配制方法為：鹽溶液；K2HPO42g，ZnSO4·7H2O5g，MgCl2·6H2O5g，CaCl21.5g，F(xiàn)eCl30.5g，加蒸餾水至100ml，10磅滅菌20分鐘。維生素混合溶液；維生素B1100mg，維生素B2100mg，維生素B6100mg，生物素1mg，泛酸鈉10mg，加蒸餾水至100ml，過濾滅菌。肝浸液制法：牛肝1000g(除包膜及膽管絞碎)，加水2000ml，充分振蕩，放冷庫過夜，50～60℃水浴2小時，然后水浴煮沸，過濾(10層紗布)取上清，15磅滅菌20分鐘。西紅柿汁：西紅柿1000g切碎，加水1000ml，煮沸水浴3小時，過濾取上清8磅滅菌20分鐘。3.3芽孢桿菌培養(yǎng)基：牛肉膏3g/L或酵母浸粉5g/L，酪素10g/L，NaCl4-5g/L，先將酪素用少量2％氫氧化鈉潤濕，玻棒攪動，再加適量的蒸餾水，在沸水浴中加熱攪拌至完全溶解(10-15min)，補足1000mL蒸餾水，加入其他成分，調PH7.2—7.4分裝滅菌。3.4麥芽汁培養(yǎng)基：麥芽汁150mL瓊脂3gpH自然(約6.4)，121℃滅菌30min。配制方法為：：(1)、取大麥或小麥若干，用水洗凈，浸水6—12小時，至15℃陰暗處發(fā)芽，上面蓋紗布一塊，每日早、中、晚淋水一次，麥根伸長至麥粒的兩倍時，即停止發(fā)芽，攤開曬干或烘干，貯存?zhèn)溆谩?2)、將干麥芽磨碎，一份麥芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小時，糖化程度可用碘滴定之。加水約20mL，調勻至生泡沫時為止，然后倒在糖化液中攪拌煮沸后再過濾。(3)、將糖化液用4—6層紗布過濾，濾液如混濁不清，可用雞蛋白澄清，方法是將一個雞蛋白加水約20mL，調勻至生泡沫時為止，然后倒在糖化液中攪拌煮沸后再過濾。(4)、將濾液稀釋到5—6波美度，pH約6.4，加入2％瓊脂即成。121℃滅菌30min。3.5豆芽汁葡萄糟培養(yǎng)基：黃豆芽10g，葡萄糖5g，瓊脂1.5-2g，水100ml，自然pH，配制方法為：稱新鮮黃豆芽10g，置于燒杯中，再加入100m1水，小火煮沸30min，用紗布過濾，補足失水，即制成10％豆芽汁，配制時，按每100m110％豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2g瓊脂，繼續(xù)加熱融化，補足失水，100Pa滅菌20min。3.6酵母浸出粉胨葡萄糖培養(yǎng)基(YPD)：1％酵母膏，2％蛋白胨，2％葡萄糖，加入2％瓊脂粉，配制方法：溶解10g酵母膏，20g蛋白胨于900ml水中，如制平板加入20g瓊脂粉，高壓121℃滅菌20min。4、菌種接種液體發(fā)酵罐嗜酸乳桿菌種子培養(yǎng)液按1:10接種于發(fā)酵種子罐培養(yǎng)20小時后進入二級發(fā)酵罐發(fā)酵20小時在注入三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)20小時后收集菌夜注入儲罐。植物乳桿菌種子培養(yǎng)液按1:20接種于發(fā)酵種子罐培養(yǎng)20小時后進入二級發(fā)酵罐發(fā)酵20小時在注入三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)20小時后收集菌夜注入儲罐。干酪乳桿菌種子培養(yǎng)液按1:50接種于發(fā)酵種子罐培養(yǎng)20小時后進入二級發(fā)酵罐發(fā)酵20小時在注入三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)20小時后收集菌夜注入儲罐。保加利亞乳桿菌種子培養(yǎng)液按1:50接種于發(fā)酵種子罐培養(yǎng)20小時后進入二級發(fā)酵罐發(fā)酵20小時在注入三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)20小時后收集菌夜注入儲罐。嬰兒雙歧桿菌種子培養(yǎng)液按1:10接種于發(fā)酵種子罐培養(yǎng)20小時后進入二級發(fā)酵罐發(fā)酵20小時在注入三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)20小時后收集菌夜注入儲罐。青春雙歧桿種子培養(yǎng)液按1:10接種于發(fā)酵種子罐培養(yǎng)20小時后進入二級發(fā)酵罐發(fā)酵20小時在注入三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)20小時后收集菌夜注入儲罐。地衣芽孢桿菌種子培養(yǎng)液按1:10接種于發(fā)酵種子罐培養(yǎng)12小時后進入二級發(fā)酵罐發(fā)酵12小時在注入三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)16小時后收集菌夜注入儲罐。枯草芽孢桿菌菌種子培養(yǎng)液按1:10接種于發(fā)酵種子罐培養(yǎng)12小時后進入二級發(fā)酵罐發(fā)酵12小時在注入三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)16小時后收集菌夜注入儲罐。釀酒酵母種子培養(yǎng)液按1:10接種于發(fā)酵種子罐培養(yǎng)14小時后進入二級發(fā)酵罐發(fā)酵14小時在注入三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)18小時后收集菌夜注入儲罐。啤酒酵母種子培養(yǎng)液按1:10接種于發(fā)酵種子罐培養(yǎng)14小時后進入二級發(fā)酵罐發(fā)酵14小時在注入三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)18小時后收集菌夜注入儲罐。紅酵母種子培養(yǎng)液按1:10接種于發(fā)酵種子罐培養(yǎng)14小時后進入二級發(fā)酵罐發(fā)酵14小時在注入三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)18小時后收集菌夜注入儲罐。產朊假絲酵母種子培養(yǎng)液按1:10接種于發(fā)酵種子罐培養(yǎng)14小時后進入二級發(fā)酵罐發(fā)酵14小時在注入三級發(fā)酵罐中培養(yǎng)18小時后收集菌夜注入儲罐。5、固體發(fā)酵(1)按照體積比為3:3:2:1:2:2:1:1:1:1:1:0，將30升嗜酸乳桿菌菌液(40億/ml)、30升植物乳桿菌菌液(20億/ml)、20升干酪乳桿菌菌液(10億/ml)、10升保加利亞乳桿菌菌液(10億/ml)、20升嬰兒雙歧桿菌菌液(30億/ml)、20升青春雙歧桿菌菌液(30億/ml)、10升地衣芽孢桿菌菌液(5億/ml)、10升枯草芽孢桿菌菌液(10億/ml)、10升釀酒酵母菌液(20億/ml)、10升啤酒酵母菌液(20億/ml)、10升紅酵母菌液(20億/ml)混合后，加40℃水7920升與18噸豆粕混勻裝入發(fā)酵池，發(fā)酵72-96小時出池；(2)烘干發(fā)酵出池后將發(fā)酵料用滾筒式烘干機進行第一次55℃烘干，將滾筒式烘干機烘干后的發(fā)酵料在50℃氣流中二次干燥；(3)粉碎烘干好的發(fā)酵料用粉碎機粉碎成100目；(4)復配用混合機將粉碎好的發(fā)酵料與其重量1％(w/w)的低聚異麥芽糖混合即成為成品。(5)包裝塑料袋真空包裝后加牛皮紙外包裝，每袋20公斤。6、發(fā)酵效果測試按照上述方法共進行了13次重復試驗，分別對每次試驗后得到的成品中的水分、小肽、乳酸、揮發(fā)性鹽基總氮(totalvolatilebasicnitrogen，TVBN)以及蛋白質的含量進行了測定，結果如下表1所示。表1編號水分％小肽％乳酸％TVBNmg/100g蛋白％19.122.433.6726.7249.7427.532.344.3224.1248.1036.092.953.3221.9749.7847.432.743.5626.7649.5557.163.124.2429.0648.2767.202.743.6736.7049.9477.052.753.8528.6448.2287.813.294.2845.2850.0798.393.014.4632.3649.56107.272.583.7828.9650.79117.522.973.6418.6950.98126.572.514.0817.3250.38139.553.143.8816.4448.74均值7.592.813.9027.1649.55AVEDEV0.690.250.295.860.75實施例2本發(fā)明的一種含有活性益生菌的飼料添加劑的制備1、菌液的制備同實施例1.2、固體發(fā)酵(1)按照體積比為2:2:2:1:1:1:2:2:2:1:1:0，將20升嗜酸乳桿菌菌液(40億/ml)、20升植物乳桿菌菌液(20億/ml)、20升干酪乳桿菌菌液(10億/ml)、10升保加利亞乳桿菌菌液(10億/ml)、10升嬰兒雙歧桿菌菌液(30億/ml)、10升青春雙歧桿菌菌液(30億/ml)、20升地衣芽孢桿菌菌液(5億/ml)、20升枯草芽孢桿菌菌液(10億/ml)、20升釀酒酵母菌液(20億/ml)、10升啤酒酵母菌液(20億/ml)、10升紅酵母菌液(20億/ml)混合后，加40℃水6120升與14噸豆粕混勻裝入發(fā)酵池，發(fā)酵72-96小時出池；(2)烘干發(fā)酵出池后將發(fā)酵料用滾筒式烘干機進行第一次55℃烘干，將滾筒式烘干機烘干后的發(fā)酵料在50℃氣流中二次干燥；(3)粉碎烘干好的發(fā)酵料用粉碎機粉碎成100目；(4)復配用混合機將粉碎好的發(fā)酵料與其重量1％(w/w)的低聚異麥芽糖混合即成為成品。(5)包裝塑料袋真空包裝后加牛皮紙外包裝，每袋20公斤。3、發(fā)酵效果測試按照上述方法共進行了13次重復試驗，分別對每次試驗后得到的成品中的水分、小肽、乳酸、揮發(fā)性鹽基總氮(totalvolatilebasicnitrogen，TVBN)以及蛋白質的含量進行了測定，結果如下表2所示。表2實施例3本發(fā)明的一種含有活性益生菌的飼料添加劑的制備1、菌液的制備同實施例1.2、固體發(fā)酵(1)按照體積比為1:1:1:1:0:0:3:3:3:2:3:2，將10升嗜酸乳桿菌菌液(40億/ml)、10升植物乳桿菌菌液(20億/ml)、10升干酪乳桿菌菌液(10億/ml)、10升保加利亞乳桿菌菌液(10億/ml)、30升地衣芽孢桿菌菌液(5億/ml)、30升枯草芽孢桿菌菌液(10億/ml)、30升釀酒酵母菌液(20億/ml)、20升啤酒酵母菌液(20億/ml)、30升紅酵母菌液(20億/ml)、20升產朊假絲酵母菌液(20億/ml)混合后，加40℃水7880升與18噸輔豆粕混勻裝入發(fā)酵池，37℃發(fā)酵72-96小時出池；(2)烘干發(fā)酵出池后將發(fā)酵料用滾筒式烘干機進行第一次55℃烘干，將滾筒式烘干機烘干后的發(fā)酵料在50℃氣流中二次干燥；(3)粉碎烘干好的發(fā)酵料用粉碎機粉碎成100目；(4)復配用混合機將粉碎好的發(fā)酵料與其重量1％(w/w)的低聚異麥芽糖混合即成為成品。(5)包裝塑料袋真空包裝后加牛皮紙外包裝，每袋20公斤。3、發(fā)酵效果測試按照上述方法共進行了13次重復試驗，分別對每次試驗后得到的成品中的水分、小肽、乳酸、揮發(fā)性鹽基總氮(totalvolatilebasicnitrogen，TVBN)以及蛋白質的含量進行了測定，結果如下表3所示。表3編號水分％小肽％乳酸％TVBNmg/100g蛋白％110.023.882.8346.9251.8228.783.993.0137.0452.1938.644.012.6341.8952.0847.934.422.2445.8151.6558.564.462.5739.0751.3267.982.982.2245.7050.8777.653.122.1739.7051.3888.764.292.7746.8751.1498.324.072.5441.4952.76107.814.182.5538.2851.64117.763.872.4347.3653.78128.463.792.8743.6353.26139.554.322.7946.9252.18均值8.483.952.5943.1352.01AVEDEV0.530.330.213.280.05實施例4本發(fā)明的一種含有活性益生菌的飼料添加劑的制備1、菌液的制備同實施例1.2、固體發(fā)酵(混合發(fā)酵)(1)按照體積比為3:3:2:1:2:2:1:1:1:1:1:0，將30升嗜酸乳桿菌菌液(40億/ml)、30升植物乳桿菌菌液(20億/ml)、20升干酪乳桿菌菌液(10億/ml)、10升保加利亞乳桿菌菌液(10億/ml)、20升嬰兒雙歧桿菌菌液(30億/ml)、20升青春雙歧桿菌菌液(30億/ml)、10升地衣芽孢桿菌菌液(5億/ml)、10升枯草芽孢桿菌菌液(10億/ml)、10升釀酒酵母菌液(20億/ml)、10升啤酒酵母菌液(20億/ml)、10升紅酵母菌液(20億/ml)混合后，加40℃水7920升與18噸豆粕混勻裝入發(fā)酵池底部，厚度為40公分左右；按照體積比為2:2:2:1:1:1:2:2:2:1:1:0，將20升嗜酸乳桿菌菌液(40億/ml)、20升植物乳桿菌菌液(20億/ml)、20升干酪乳桿菌菌液(10億/ml)、10升保加利亞乳桿菌菌液(10億/ml)、10升嬰兒雙歧桿菌菌液(30億/ml)、10升青春雙歧桿菌菌液(30億/ml)、20升地衣芽孢桿菌菌液(5億/ml)、20升枯草芽孢桿菌菌液(10億/ml)、20升釀酒酵母菌液(20億/ml)、10升啤酒酵母菌液(20億/ml)、10升紅酵母菌液(20億/ml)混合后，加40℃水6120升與14噸豆粕混勻裝入發(fā)酵池中部，厚度為30公分左右；按照體積比為1:1:1:1:0:0:3:3:3:2:3:2，將10升嗜酸乳桿菌菌液(40億/ml)、10升植物乳桿菌菌液(20億/ml)、10升干酪乳桿菌菌液(10億/ml)、10升保加利亞乳桿菌菌液(10億/ml)、30升地衣芽孢桿菌菌液(5億/ml)、30升枯草芽孢桿菌菌液(10億/ml)、30升釀酒酵母菌液(20億/ml)、20升啤酒酵母菌液(20億/ml)、30升紅酵母菌液(20億/ml)、20升產朊假絲酵母菌液(20億/ml)混合后，加40℃水7880升與18噸輔豆粕混勻裝入發(fā)酵池上部，厚度為40公分左右；(2)將步驟(1)得到的混合發(fā)酵料發(fā)酵72-96小時出池；(3)烘干發(fā)酵出池后將發(fā)酵料用滾筒式烘干機進行第一次55℃烘干，將滾筒式烘干機烘干后的發(fā)酵料在50℃氣流中二次干燥；(4)粉碎烘干好的發(fā)酵料用粉碎機粉碎成100目；(5)復配用混合機將粉碎好的發(fā)酵料與其重量1％(w/w)的低聚異麥芽糖混合即成為成品。(6)包裝塑料袋真空包裝后加牛皮紙外包裝，每袋20公斤。3、發(fā)酵效果測試按照上述方法共進行了13次重復試驗，分別對每次試驗后得到的成品中的水分、小肽、乳酸、揮發(fā)性鹽基總氮(totalvolatilebasicnitrogen，TVBN)以及蛋白質的含量進行了測定，結果如下表4所示。表4對比實施例1-4的發(fā)酵結果，通過本實施例所發(fā)酵出的產品效果比較理想，小肽含量為3.5±0.26，乳酸含量為3.34±0.24，TVBN37.81±3.75，以豆粕為輔料發(fā)酵后蛋白含量為50.54±0.04比較恒定，這幾種主要指標滿足了添加劑的標準。實施例5本發(fā)明的飼料添加劑(按照實施例4的方法制備)對斷奶仔豬生長性能的影響1、方法試驗選用23日齡斷奶的健康仔豬120頭，隨機分為試驗組和對照組，每組6重復，每個重復組10頭仔豬。1個重復1欄飼養(yǎng)。試驗期間對照組有3頭仔豬病死，對照組飼喂常規(guī)的斷奶仔豬料，試驗組飼喂含有5％本發(fā)明的飼料添加劑的常規(guī)斷奶仔豬料。體質量，試驗開始時測定每頭仔豬體質量(斷奶重)，以后每14天測定體質量，直至第42天，最后在試驗結束時第50天測定體質量。耗料量每14天及試驗結束時以欄重復為單位測定采食量。料肉比，根據(jù)耗料量和體增重計算料肉比。2、結果各組仔豬試驗開始時斷奶重及試驗不同階段體質量見表1。從表1可以看出，使用本發(fā)明的飼料添加劑14天后，仔豬的增重有提高的趨勢(P＝0.32)，說明本發(fā)明的飼料添加劑有促增重效果但不明顯。本發(fā)明的飼料添加劑飼喂28后，試驗組仔豬體質量比對照組高1.57kg，差異顯著(P＝0.035)。隨著本發(fā)明的飼料添加劑使用時間的延長，它的促生長效果越來越明顯。使用42天后，試驗組仔豬體質量比對照組高2.3kg，而試驗結束時50天，使用本發(fā)明的飼料添加劑的試驗組仔豬比對照組高3.09kg，差異接近極顯著(P＝0.013)。耗料量每欄仔豬耗料量見表2，在試驗的各個階段，使用本發(fā)明的飼料添加劑的試驗組仔豬采食量均高于對照組。在試驗初期0-14天和0-28天，因為使用時間比較短，本發(fā)明的飼料添加劑的促進采食作用沒有得到充分發(fā)揮，所以2組之間的差異在統(tǒng)計上并不顯著，但是隨著試驗時間的延長，本發(fā)明的飼料添加劑的促進采食效果越來越明顯，0～42天和0～50天，2組仔豬采食量差異為9.5和12.4kg，差異顯著。飼料轉化率，耗料/增重，仔豬的飼料轉化效率以耗料/增重比表示，結果如表3所示，28天后采用本發(fā)明的飼料添加劑的試驗組仔豬表現(xiàn)出比較低的耗料/增重比(P＝0.068)，比對照組低0.1。表1試驗不同階段仔豬的體質量kg/頭表2試驗期間仔豬的耗料量kg/每欄表3試驗期間仔豬的飼料轉化率(耗料/增重)組別0～14天0～28天0～42天0～50天對照組1.39±0.031.37±0.041.54±0.031.52±0.04試驗組1.38±0.041.27±0.031.47±0.031.49±0.04P值0.9360.0680.0910.445差異0.010.10.070.03綜上結果表明，本發(fā)明的飼料添加劑富含許多小肽，能直接被動物吸收，幼畜使用后動物發(fā)生過敏反應的概率大大降低。利用多菌種、多溫相、多重發(fā)酵技術發(fā)酵生產的綠色本發(fā)明的飼料添加劑添生物加劑在飼料中應用后，可明顯抑制動物消化道疾病的發(fā)生；提高動物機體免疫力，促進動物生長，改善肉品質風味；同時可大幅度減少或免除抗生素等藥物使用；提高動物的成活率；減少對環(huán)境的污染。這一產品的推廣應用，將大大降低飼料工業(yè)對魚粉等動物蛋白飼料的依賴性，推動飼料工業(yè)的技術進步，同時產生巨大社會效益和經濟效益。實施例6本發(fā)明的飼料添加劑(按照實施例4的方法制備)在防治斷奶仔豬生腹瀉、黃、白痢中的應用1、方法將245頭斷奶仔豬隨機分為兩組：實驗組含仔豬121頭，對照組含仔豬124頭，實驗組仔豬喂食添加5％本發(fā)明的飼料添加劑的飼料，對照組的仔豬僅喂食與實驗組相同的飼料(不含本發(fā)明的飼料添加劑)，飼喂14天，28天，42天觀察記錄仔豬生長情況。2、結果飼喂14天，實驗組仔豬發(fā)生腹瀉的有3頭，腹瀉率為2.48％，對照組仔豬發(fā)生腹瀉的有14頭，腹瀉率11.29％。飼喂添加5％本發(fā)明的飼料添加劑的飼料的實驗組仔豬表現(xiàn)為食欲良好，腹瀉率比對照組下降8.81％。飼喂28天，實驗組仔豬發(fā)生腹瀉的有6頭，腹瀉率為4.96％，對照組仔豬發(fā)生腹瀉的有12頭，腹瀉率9.67％。飼喂添加5％本發(fā)明的飼料添加劑的飼料的實驗組仔豬表現(xiàn)為食欲良好，腹瀉率比對照組下降4.72％。飼喂50天，實驗組仔豬發(fā)生腹瀉的有4頭，腹瀉率為3.31％，對照組仔豬發(fā)生腹瀉的有18頭腹瀉率14.52％。飼喂添加5％本發(fā)明的飼料添加劑的飼料的實驗組仔豬表現(xiàn)為食欲良好，腹瀉率比對照組下降11.21％。飼喂50天，實驗組仔豬死亡3頭，死亡率為2.48％，對照組仔豬死亡9頭，死亡率為7.26％。結論；無論對仔豬腹瀉的防治還是降低死亡率，飼喂添加5％本發(fā)明的飼料添加劑的飼料的實驗組均優(yōu)于對照組。實施例7飼喂5％本發(fā)明的飼料添加劑(按照實施例4的方法制備)與飼喂酸化劑對斷奶仔豬生長性能的研究1、方法試驗選擇28日齡發(fā)育正常的，健康的斷奶仔豬96頭。根據(jù)胎次、性別、體重隨機分成2組，每組3個重復，每個重復16頭。A組為添加0.2％復合酸化劑日糧組；B組日食量添加5％本發(fā)明的飼料添加劑。試驗期為30天，觀察酸化劑及飼喂5％本發(fā)明的飼料添加劑組對斷奶仔豬生長性能的影響。飼養(yǎng)管理斷奶仔豬自由采食和飲水，每天觀察記錄氣溫、仔豬采食和下痢情況。在試驗期間，按豬場原計劃的免疫、保健程序進行；出現(xiàn)仔豬死亡要記錄死亡日期，并在試驗結果中需除去相應的平均初始重及平均耗料量；試驗開始當天和結束第2天早上對每頭豬空腹稱重，并做好記錄。測定指標及計算公式平均日采食量、平均日增重、料重比、增重飼料成本和腹瀉率。腹瀉率計算公式為：腹瀉率(％)＝(腹瀉頭數(shù)/試驗總頭數(shù))×100％。2、結果比較與分析頭均日采食量：根據(jù)試驗數(shù)據(jù)對比，飼喂5％本發(fā)明的飼料添加劑的試驗組提高9.8％，飼喂酸化劑組提高2.68％。表明，飼喂5％本發(fā)明的飼料添加劑的試驗組在提高斷奶仔豬采食量方面比飼喂酸化劑組具有更好的作用，該次試驗提高比例達到7％左右。日增重：據(jù)試驗結果對比，飼喂5％本發(fā)明的飼料添加劑的試驗組比飼喂酸化劑組的日增重提高了8.94％。在提高采食量和日增重2個方面呈正相關。料重比：據(jù)試驗結果對比，飼喂5％本發(fā)明的飼料添加劑的試驗組比飼喂酸化劑組的料重比降低5.26％。腹瀉率：據(jù)試驗結果對比，飼喂5％本發(fā)明的飼料添加劑的試驗組比飼喂酸化劑組的腹瀉率降低65.3％。結果表明：斷奶仔豬日糧添加0.2％的復合酸化劑對仔豬的日增重和飼料效率有一定提高；降低仔豬腹瀉率有一定效果；而飼喂5％本發(fā)明的飼料添加劑組對仔豬日增重、飼料轉化率和降低仔豬腹瀉率有顯著效果。早期斷奶仔豬消化系統(tǒng)發(fā)育尚未成熟，當日糧從母乳轉為飼料時，其胃腸內酸液分泌不足，達不到正常的酸度水平(pH值為2﹒0～3﹒5)，而大量未被消化的蛋白質充滿消化道而過度發(fā)酵，導致仔豬下痢。本發(fā)明的飼料添加劑能夠降低乳仔豬胃腸道pH值，提高消化酶活性和日糧消化率。采用添加5％本發(fā)明的飼料添加劑的飼料飼喂仔豬可調控豬體胃腸道微生物菌群平衡，本發(fā)明的飼料添加劑中的乳酸桿菌等有益菌能夠使胃腸道pH降低，抑制有害菌繁殖，減少營養(yǎng)物質的消耗和細菌毒素的產生，同時能夠促進有益菌的增殖，抑制或殺滅有害菌群，減少乳仔豬下痢，提高仔豬日增重、采食量以及飼料利用率。本發(fā)明的飼料添加劑中的酵母菌及代謝產物作用刺激動物口腔味蕾細胞使唾液分泌增加，從而增加食欲，提高動物采食量，起到調味劑的作用。結論：從該次試驗結果來看，在斷奶仔豬日糧中添加飼喂5％本發(fā)明的飼料添加劑組和飼喂酸化劑組對其生產性能可產生不同的影響，因酸化劑的酸化作用不能延伸到小腸和大腸，進一步降低后腸道的pH值，所以效果不如本發(fā)明的飼料添加劑，本發(fā)明的飼料添加劑的功效對仔豬的日增重和采食量，緩解仔豬斷奶應激、發(fā)揮仔豬生長潛能具有重要意義。當前第1頁1 2 3