本發(fā)明屬于獸藥領(lǐng)域，具體涉及一種畜禽用復(fù)方中獸藥微粉發(fā)酵方法，尤其是一種用于畜禽扶正祛邪、增強(qiáng)免疫的復(fù)方中獸藥微粉發(fā)酵方法。

背景技術(shù)：

近兩年來，食品安全與獸藥抗生素的濫用間接性地掛上了關(guān)系，“無抗養(yǎng)殖”是目前較為流行的做法，其中中獸藥作為“無抗養(yǎng)殖”的替用品之一而受到了廣泛的關(guān)注。在中獸藥的應(yīng)用發(fā)展方面，我國具有較豐富的資源，目前在畜禽養(yǎng)殖方面，中獸藥主要?jiǎng)┬蜑樯⒖诜夯蛱崛∥锏确绞?，其中普通的散劑工藝簡單、活性成分不易被畜禽吸收?yīng)用，口服液和提取物可通過飲水給藥，是工藝研究方面的一大發(fā)展，但是成本過高、成分不齊全，在應(yīng)用方面存在一定的局限性。微粉發(fā)酵技術(shù)作為現(xiàn)代中藥炮制新技術(shù)之一，通過微粉直接發(fā)酵，可以提高藥材的利用率、生物利用度和藥物功效，對當(dāng)前畜禽養(yǎng)殖過程中獸藥的應(yīng)用具有較為重要的意義，在替代抗生素類藥物方面也起到了較好的作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

一種用于中獸藥微粉固體發(fā)酵的飼料添加劑，按重量份數(shù)，包括以下組分：

優(yōu)選的，包括以下組分：

其中，黃芪主要成分包括黃酮類、皂甙類、多糖等成分，具有增強(qiáng)特異性和非特異性免疫功能，具有補(bǔ)氣固表，利尿托毒，排膿，斂瘡生肌的功效。板藍(lán)根具有清熱解毒、抗菌抗病毒、提高免疫等功效。淫羊藿有雄激素樣作用；能提高機(jī)體免疫功能；能擴(kuò)張周血管，改善微循環(huán)，增加血流量，增加冠脈流量；有鎮(zhèn)咳、祛痰、抗缺氧、鎮(zhèn)靜、抗驚厥作用；對脊髓灰質(zhì)炎病毒及多種腸道病毒有抑制作用；谷芽含蛋白質(zhì)、脂肪油、淀粉、淀粉酶、麥芽糖、腺嘌呤、膽堿和天冬氨酸、γ-氨基丁酸等18種氨基酸，具有消食化積、健脾開胃的功效；牡蠣具有平肝息風(fēng)藥、養(yǎng)陰藥；沙棗葉具有清熱解毒、助心陽、通血脈的功效。黃芪、板藍(lán)根、淫羊藿、谷芽、牡蠣、沙棗葉組方具有增強(qiáng)免疫、扶正祛邪的功效。水蘇糖是天然存在的一種四糖，是一種可以顯著促進(jìn)雙歧桿菌等有益菌增殖的功能性低聚糖。

優(yōu)選的，所述復(fù)合酶選自淀粉酶、纖維素酶、果膠酶、植酸酶、氯化溶菌酶中的至少一種。

所述芽孢桿菌選自草分枝桿菌、酵母菌、蘇云金芽孢桿菌、丁酸芽孢桿菌中的至少一種。

本發(fā)明采用以上技術(shù)方案，其優(yōu)點(diǎn)在于，采用固態(tài)發(fā)酵技術(shù)，將傳統(tǒng)中藥炮制技術(shù)與現(xiàn)代生物技術(shù)有機(jī)結(jié)合起來，能提高中獸藥的利用率，又能提高中獸藥的生物利用度、有效作用，同時(shí)在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的有益菌群能夠較好地調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)腸道內(nèi)環(huán)境，從而保證畜禽自身健康成長。

本發(fā)明還提供了一種制備用于中獸藥固體發(fā)酵飼料添加劑的方法，其特征在于，包括以下幾個(gè)步驟：

步驟A:將芽孢桿菌放在培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，然后進(jìn)行純化培養(yǎng)，得到相應(yīng)的菌液。

步驟B:所述黃芪、板藍(lán)根、淫羊藿、谷芽、牡蠣、沙棗葉分別粉碎成300目以上的微粉后，放入固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)，再將復(fù)合酶、芽孢桿菌、水蘇糖按所述比例混合均勻后撒在微粉表面，密閉，發(fā)酵。

優(yōu)選的，發(fā)酵采取厭氧發(fā)酵的方式，連續(xù)發(fā)酵時(shí)間為24-45小時(shí)，PH＝3.5-4.6。

優(yōu)選的，所述芽孢桿菌中，草分枝桿菌液的制備方法為：將營養(yǎng)瓊脂粉、牛肉膏、胰蛋白胨和氯化鈉加入蒸餾水中，混合并溶解均勻，調(diào)節(jié)PH值至7.0-7.2，在121℃下蒸汽滅菌15-30分鐘，即得草分枝桿菌液。

優(yōu)選的，所述芽孢桿菌中，酵母菌液的制備方法為：將蛋白胨、酵母浸膏粉和無水葡萄糖加入蒸餾水中，混合并溶解均勻，調(diào)節(jié)PH值至7.0，在121℃下蒸汽滅菌15-30分鐘，即得酵母菌菌液。

優(yōu)選的，所述芽孢桿菌中，蘇云金芽孢桿菌液的制備方法為：將蛋白胨、酵母浸膏粉、瓊脂粉、氯化鈉和無水葡萄糖加入蒸餾水中，混合并溶解均勻，調(diào)節(jié)PH值至7.0-7.2，在121℃下蒸汽滅菌15-30分鐘，即得蘇云金芽孢桿菌液。

優(yōu)選的，所述芽孢桿菌中，丁酸芽孢桿菌液的制備方法為：將蛋白胨、酵母浸膏粉、瓊脂粉、氯化鈉和無水葡萄糖加入蒸餾水中，混合并溶解均勻，調(diào)節(jié)PH值至7.0-7.2，在121℃下蒸汽滅菌15-30分鐘，即得丁酸芽孢桿菌液。

草分枝桿菌培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂粉6g，牛肉膏2g，胰蛋白胨3g，氯化鈉7g，蒸餾水1L，調(diào)節(jié)PH值至7.0-7.2，于121℃，即100Kpa下蒸汽滅菌15-30分鐘。

丁酸芽孢桿菌培養(yǎng)基：蛋白胨15g，營養(yǎng)瓊脂6g，酵母浸膏粉5g，枸櫞酸鈉1g，氯化鈉5g，蒸餾水1L，調(diào)節(jié)PH值至6.9-7.3，于121℃，即100Kpa下蒸汽滅菌15-30分鐘。

酵母菌培養(yǎng)基：蛋白胨100g，酵母浸膏粉50g，無水葡萄糖200g，蒸餾水1L，調(diào)節(jié)PH值至7.0，121℃，即：100Kpa下蒸汽滅菌15分鐘。

蘇云金芽孢桿菌培養(yǎng)基：蛋白胨400g，酵母浸膏粉25g，瓊脂粉30g，氯化鈉50g，無水葡萄糖40g，蒸餾水1L，調(diào)節(jié)PH值至7.0-7.2，121℃高壓滅菌15-30分鐘。

優(yōu)選的，在進(jìn)行發(fā)酵前，將黃芪、板藍(lán)根、淫羊藿等藥材進(jìn)行挑揀、清洗后，晾干，粉碎成300目篩以上微粉，備用，并將所述發(fā)酵罐的清洗、消毒、干燥。

本發(fā)明具有如下有益效果：

1、本發(fā)明的復(fù)方中獸藥微粉固態(tài)發(fā)酵方法簡單易行，較容易實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。

2、本發(fā)明發(fā)酵產(chǎn)物包括藥渣和發(fā)酵液，可添加至飼料或飲水中，無底物剩余造成浪費(fèi)或污染。

3、本發(fā)明的發(fā)酵產(chǎn)物穩(wěn)定性好，有特殊的香味，適口性較好。

4、本發(fā)明采用的藥材直接固體發(fā)酵方法，極大地提高了藥材的利用率、生物利用度，降低了產(chǎn)品生產(chǎn)成本。

具體實(shí)施方式

下面對本發(fā)明的較優(yōu)的實(shí)施例作進(jìn)一步的詳細(xì)說明：

實(shí)施例1

將黃芪、板藍(lán)根、淫羊藿、谷芽、牡蠣和沙棗葉挑揀清洗后，晾干。

將發(fā)酵罐清洗干凈后，進(jìn)行消毒、干燥。

將草分枝桿菌菌種接種到培養(yǎng)基后，在37℃條件下放置于回旋搖床上進(jìn)行振蕩培養(yǎng)2天，得到菌液，待用。

配方，按重量：黃芪80份，板藍(lán)根80份，淫羊藿80份，谷芽40份，牡蠣40份，沙棗葉40份，纖維素酶60份，草分枝桿菌菌液30份，水蘇糖40份。

使所述復(fù)方中獸藥微粉放入固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)，將纖維素酶、草分枝桿菌菌液和水蘇糖按所述比例混合均勻后撒在微粉表面，密閉，采取厭氧發(fā)酵的方式，連續(xù)發(fā)酵42小時(shí)，當(dāng)PH值為3.8時(shí)，即為發(fā)酵終點(diǎn)。

草分枝桿菌培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂粉6g，牛肉膏2g，胰蛋白胨3g，氯化鈉7g，蒸餾水1L，調(diào)節(jié)PH值至7.0-7.2，于121℃，即100Kpa下蒸汽滅菌15分鐘。

實(shí)施例2

將黃芪、板藍(lán)根、淫羊藿、谷芽、牡蠣和沙棗葉挑揀清洗后，晾干。

將發(fā)酵罐清洗干凈后，進(jìn)行消毒、干燥。

將蘇云金芽孢桿菌菌種接種到培養(yǎng)基后，在37℃條件下放置于回旋搖床上進(jìn)行振蕩培養(yǎng)24小時(shí)，得到菌液，待用。

配方，按重量：黃芪100份，板藍(lán)根80份，淫羊藿80份，谷芽100份，牡蠣60份，沙棗葉60份，果膠酶60份，蘇云金芽孢桿菌菌液30份，水蘇糖60份。

使所述復(fù)方中獸藥微粉放入固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)，將果膠酶、蘇云金芽孢桿菌菌液和水蘇糖按所述比例混合均勻后撒在微粉表面，密閉，采取厭氧發(fā)酵的方式，連續(xù)發(fā)酵42小時(shí)，當(dāng)PH值為3.8時(shí)，即為發(fā)酵終點(diǎn)。

蘇云金芽孢桿菌培養(yǎng)基：蛋白胨400g，酵母浸膏粉25g，瓊脂粉30g，氯化鈉50g，無水葡萄糖40g，蒸餾水1L，調(diào)節(jié)PH值至7.0-7.2，高壓滅菌。

實(shí)施例3

將黃芪、板藍(lán)根、淫羊藿、谷芽、牡蠣和沙棗葉挑揀清洗后，晾干。

將發(fā)酵罐清洗干凈后，進(jìn)行消毒、干燥。

將酵母菌菌種接種到培養(yǎng)基后，在37℃條件下放置于回旋搖床上進(jìn)行振蕩培養(yǎng)36小時(shí)，得到菌液，待用。

配方，按重量：黃芪120份，板藍(lán)根120份，淫羊藿100份，谷芽70份，牡蠣70份，沙棗葉60份，氯化溶菌酶80份，酵母菌菌液50份，水蘇糖50份。

酵母菌培養(yǎng)基：蛋白胨100g，酵母浸膏粉50g，無水葡萄糖200g，蒸餾水1L，調(diào)節(jié)PH值至7.0，121℃，即：100Kpa下蒸汽滅菌15分鐘。

將所述復(fù)方中獸藥微粉放入固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)，將氯化溶菌酶、酵母菌菌液和水蘇糖按所述比例混合均勻后撒在微粉表面，密閉，采取厭氧發(fā)酵的方式，連續(xù)發(fā)酵42小時(shí)，當(dāng)PH值為3.8時(shí)，即為發(fā)酵終點(diǎn)。

實(shí)施例4

1.供試動(dòng)物：小雞100只，分成5組，每組20只，

2.試驗(yàn)期為14天，其中第1組空白對照組，第2、3、4組為試驗(yàn)組，第5組為藥物對照組。

第1組：空白對照組，不添加任何藥物。

第2組：實(shí)施例1樣品，按照5g/kg飼料添加，連用5天。

第3組：實(shí)施例2樣品，按照5g/kg飼料添加，連用5天。

第4組：實(shí)施例3樣品，按照5g/kg飼料添加，連用5天。

第5組：添加復(fù)方中獸藥(市面上購買，主要成分為黃芪、山楂、麥芽等)，按照5g/kg飼料添加，連用5天。

3.測定指標(biāo)：增重情況、料肉比、傳染性法氏囊疫苗抗體水平。

4.結(jié)果如表1所示

表1

從表1可知，使用發(fā)酵黃芪和板藍(lán)根飼喂雞只，增重效果明顯，對抗體水平也有一定的促進(jìn)作用。

以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實(shí)施方式對本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說明。對于本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。