本發(fā)明屬于飼料生產(chǎn)技術領域，具體涉及一種生物發(fā)酵飼料的制備方法。

背景技術：

為了大力發(fā)展畜牧業(yè)，滿足反芻動物增肉增奶等營養(yǎng)上的需求，就必然要加大糧食的飼喂，以保證蛋白質(zhì)的供應，這就導致了我國飼料糧食的大量進口和外匯的大量消耗。

近年來，我國大力推廣氨化飼料來解決飼料糧食短缺的問題，這種氨化飼料不僅成本高、耗能高，并且存在與農(nóng)業(yè)爭肥、污染環(huán)境的問題，甚至有些方法還會對牲畜有毒副作用。

水果殘渣作飼料是目前比較新興的一種方式。我國是果樹起源最早、水果種類最為豐富的國家之一，也是世界上水果生產(chǎn)大國，總產(chǎn)量位居世界第一。果業(yè)的迅速發(fā)展和產(chǎn)量的大幅增長對加工業(yè)提出了迫切要求。

蘋果渣是蘋果加工后的下腳料，主要由果皮、果核和殘余果肉組成，約占鮮果質(zhì)量的25％。我國蘋果加工每年排出蘋果渣約100萬噸，目前，除少量蘋果渣被用作飼料外，絕大部分被遺棄。蘋果渣含水量高(70％～82％)，含有大量可溶性營養(yǎng)物質(zhì)，為微生物滋生提供了有利條件，故拋棄的果渣會在短時間內(nèi)腐爛，變酸變臭，造成了環(huán)境的極大污染和資源的極大浪費。蘋果渣中含有可溶性糖、維生素、礦物質(zhì)及纖維素等豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，是良好的飼料資源。因此利用蘋果渣生產(chǎn)飼料是一條廢物利用的良好途徑。而采用微生物菌種發(fā)酵蘋果渣飼料具有操作方便、對環(huán)境無污染等優(yōu)勢，然而目前對于綜合解決飼料發(fā)酵過程中抑制腐敗菌、防治二次發(fā)酵，有效控制有機酸和降解木質(zhì)素，降低成本，便于使用等方面仍然存在問題。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術中的缺陷，提供一種充分解決飼料發(fā)酵過程中抑制腐敗菌問題，防止二次發(fā)酵，從而改善飼料品質(zhì)，降低成本，無污染的蘋果渣生物發(fā)酵飼料的制備方法。

為實現(xiàn)上述目的所采取的技術方案為：

一種生物發(fā)酵飼料的制備方法，其特征在于其工藝步驟為：首先將青霉和根霉接種到以蘋果渣為主要原料的固體發(fā)酵培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，然后再將酵母菌和乳酸菌接入到上述已發(fā)酵的青霉和根霉混合麩曲中，待發(fā)酵完成后烘干、粉碎即可；

所述以蘋果渣為主要原料的固體發(fā)酵培養(yǎng)基組成為：蘋果渣50～60%，麩皮20～25%，大豆粉20～25%，其中還含有KH₂PO₄ 0.04～0.06%， (NH₄)₂SO₄ 0.3～0. 5%，葡萄糖1.0～2.0%，氯化鈉0.1～0.3%。

所述青霉、根霉、酵母菌和乳酸菌在接種發(fā)酵前先培養(yǎng)成種子液。

所述青霉和根霉的接種量20～30%。

所述以蘋果渣為主要原料的固體發(fā)酵培養(yǎng)基含水量45～50%。

所述青霉和根霉混合麩曲經(jīng)過擴培后再接入酵母菌和乳酸菌。

所述青霉和根霉混合麩曲具體培養(yǎng)方式為：先將青霉和根霉接種到以蘋果渣為主要原料的固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，攪拌均勻后，置30～35℃恒溫培養(yǎng)3～4d，并每隔1～2d進行翻料；培養(yǎng)三天后，再按25～30%接入到含水分為45～50%的以蘋果渣為主要原料的固體發(fā)酵培養(yǎng)基進行擴培，并每隔1～2d定期翻料，繼續(xù)培養(yǎng)3～4d即可。

所述酵母菌接種量為25～30%，乳酸菌接種量為5～10%。

所述酵母菌和乳酸菌的發(fā)酵條件為：將酵母菌和乳酸菌接入到根霉和青霉混合麩曲中，充分攪拌均勻后，于28～30℃發(fā)酵5～6d即可。

所述烘干是指將培養(yǎng)的固體發(fā)酵產(chǎn)物，在自然條件下或40～50℃烘干至水分為10～13%。

青霉菌和根霉菌在生長繁殖過程中會代謝產(chǎn)生有利于其他微生物生長所需的還原糖，此外還可降解一些不利于動物消化吸收的木質(zhì)素；酵母菌因其含有大量的蛋白質(zhì)在生物發(fā)酵飼料領域應用較多；乳酸菌經(jīng)發(fā)酵后會有一種獨特的香味，且其自身是一種益生菌，可幫助反芻動物對物質(zhì)的消化，因此，本發(fā)明將上述四種菌進行組合發(fā)酵來發(fā)酵生產(chǎn)蘋果渣生物發(fā)酵飼料，與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明通過混合微生物發(fā)酵菌劑的發(fā)酵作用改善飼料的品質(zhì)，采用特定組合的復合微生物菌劑后，提高了飼料的可溶性還原糖和粗蛋白，降低了飼料的粗纖維和木質(zhì)素，獲得的生物發(fā)酵飼料適口性好，具有酵母和乳酸發(fā)酵的芳香味。

具體實施方式

下面用實例予以說明本發(fā)明，應該理解的是，實例是用于說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的限制。本發(fā)明的范圍與核心內(nèi)容依據(jù)權利要求書加以確定。

本發(fā)明選用如下微生物菌種：斜臥青霉菌（Penicillium decumbens）、熱帶假絲酵母（Candida tropicalis）、根霉菌（Rhizopus）、德氏乳酸菌(lactobacillus delbrueckii)。

下述實施例中各微生物菌種的種子液的制備工藝如下：

a）馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)斜臥青霉菌、熱帶假絲酵母和根霉菌，于30～35℃培養(yǎng)24～48h，MRS瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)德氏乳酸菌，于28～30℃培養(yǎng)24～48h。

b）液體種子和一級液體培養(yǎng)基 : 大豆糖蜜 12%，蛋白胨2.0 %，KH₂PO₄ 0.06%, (NH4)₂SO₄ 0. 5%，氯化鈉0.45%，pH值 4.8～5.2, 按 50ml 每 500ml 三角瓶的量分裝，115 ℃ 滅菌 30 min，一級種子液接種量為2～3cm²，在30～35℃條件下，震蕩培養(yǎng)20～24h。

c）二級種子液培養(yǎng)：大豆糖蜜12%，蛋白胨2.0 %，KH₂PO₄ 0.06%, (NH₄)₂SO₄ 0. 5%，氯化鈉0.45%，pH值 4.8～5.2，115℃ 滅菌 30 min，種子液接種量為15%，在30～35℃條件下，攪拌培養(yǎng)20～24h。

d）擴大培養(yǎng)：大豆糖蜜 12%，蛋白胨2.0 %，KH₂PO₄ 0.06%，(NH₄)₂SO₄ 0. 5%，氯化鈉0.45%，pH值 4.8～5.2， 115℃滅菌 30 min，種子液接種量為15%，在30～35℃條件下，攪拌培養(yǎng)20～24h。

實施例1

將蘋果渣50%、麩皮25%、大豆粉25%的質(zhì)量比混合配制成以蘋果渣為主要原料的固體培養(yǎng)基，另添加KH₂PO₄ 0.04%， (NH₄)₂SO₄ 0.3%，葡萄糖1%，氯化鈉0.1%，經(jīng)蒸餾除菌冷卻后，將已培養(yǎng)好的青霉和根霉種子液分別按照20%的接種量在無菌條件下接入到經(jīng)蒸餾冷卻的上述固體發(fā)酵底物（固體培養(yǎng)基）中，攪拌均勻后，置30～35℃恒溫培養(yǎng)3～4d，并每隔1～2d進行翻料；培養(yǎng)3～4d后，再按25%的接種量接入到含水分為45%的以蘋果渣為主要原料的固體培養(yǎng)基（配料同上）進行擴培，并每隔1～2d定期翻料，繼續(xù)培養(yǎng)3～4d。

培養(yǎng)結束后，將已培養(yǎng)好的的酵母菌和乳酸菌分別按照25%和5%的接種量接入到上述已擴大培養(yǎng)的青霉和根霉混合麩曲中，充分攪拌均勻后，于28～30℃發(fā)酵5～6d。發(fā)酵結束后，將發(fā)酵產(chǎn)物于自然條件下或40～50℃烘干至水分為10～13%，即可得成品。

實施例2

將蘋果渣52.5%、麩皮23.75%、大豆粉23.75%的質(zhì)量比混合配制成以蘋果渣為主要原料的固體培養(yǎng)基，另添加KH₂PO₄ 0.045%， (NH₄)₂SO₄ 0.35%，葡萄糖1.25%，氯化鈉0.15%，經(jīng)蒸餾除菌冷卻后，將已培養(yǎng)好的青霉和根霉種子液分別按照22.5%的接種量在無菌條件下接入到上述經(jīng)蒸餾冷卻的固體發(fā)酵底物（固體培養(yǎng)基）中，攪拌均勻后，置30～35℃恒溫培養(yǎng)3～4d，并每隔1～2d進行翻料；培養(yǎng)3～4d后，再按26.25%的接種量接入到含水分為46.25%的以蘋果渣為主要原料的固體培養(yǎng)基（配料同上）進行擴培，并每隔1～2d定期翻料，繼續(xù)培養(yǎng)3～4d。

培養(yǎng)結束后，將已培養(yǎng)的酵母菌和乳酸菌分別按照26.25%和6.25%的接種量接入到上述已擴大培養(yǎng)的青霉和根霉混合麩曲中，充分攪拌均勻后，于28～30℃發(fā)酵5～6d。發(fā)酵結束后，將發(fā)酵產(chǎn)物于自然條件下或40～50℃烘干至水分為10～13%，即可得成品。

實施例3

將蘋果渣55%、麩皮22.5%、大豆粉22.5%混合配制成以蘋果渣為主要原料的固體培養(yǎng)基，另添加KH₂PO₄ 0.05%， (NH₄)₂SO₄ 0.4%，葡萄糖1.5%，氯化鈉0.2%，經(jīng)蒸餾除菌冷卻后，將已培養(yǎng)好的青霉和根霉種子液分別按照25%的接種量在無菌條件下接入到經(jīng)蒸餾冷卻的固體發(fā)酵底物（固體培養(yǎng)基）中，攪拌均勻后，置30～35℃恒溫培養(yǎng)3～4d，并每隔1～2d進行翻料；培養(yǎng)3～4d后，再按27.5%的接種量接入到含水分為47.5%的以蘋果渣為主要原料的固體培養(yǎng)基（配料同上）進行擴培，并每隔1～2d定期翻料，繼續(xù)培養(yǎng)3～4d。

培養(yǎng)結束后，將已培養(yǎng)的酵母菌和乳酸菌分別按照27.5%和7.5%的接種量接入到已擴大培養(yǎng)的麩曲中，充分攪拌均勻后，于28～30℃發(fā)酵5～6d。發(fā)酵結束后，將發(fā)酵產(chǎn)物于自然條件下或40～50℃烘干至水分為10～13%，即可得成品。

實施例4

將蘋果渣57.5%、麩皮21.25%、大豆粉21.25%混合配制成以蘋果渣為主要原料的固體培養(yǎng)基，另添加KH₂PO₄ 0.055%， (NH₄)₂SO₄ 0.45%，葡萄糖1.75%，氯化鈉0.25%，經(jīng)蒸餾除菌冷卻后，將已培養(yǎng)好的青霉和根霉種子液分別按照27.5%的接種量在無菌條件下接入到經(jīng)蒸餾冷卻的固體發(fā)酵底物（固體培養(yǎng)基）中，攪拌均勻后，置30～35℃恒溫培養(yǎng)3～4d，并每隔1～2d進行翻料；培養(yǎng)3～4d后，再按28.75%的接種量接入到含水分為48.75%的以蘋果渣為主要原料的固體培養(yǎng)基（配料同上）進行擴培，并每隔1～2d定期翻料，繼續(xù)培養(yǎng)3～4d。

培養(yǎng)結束后，將已培養(yǎng)的酵母菌和乳酸菌分別按照28.75%和8.75%的接種量接入到已擴大培養(yǎng)的青霉和根霉混合麩曲中，充分攪拌均勻后，于28～30℃發(fā)酵5～6d。發(fā)酵結束后，將發(fā)酵產(chǎn)物于自然條件下或40～50℃烘干至水分為10～13%，即可得成品的接種量。

實施例5

將蘋果渣60%、麩皮20%、大豆粉20%混合配制成以蘋果渣為主要原料的固體培養(yǎng)基，另添加KH₂PO₄ 0.06%， (NH₄)₂SO₄ 0.5%，葡萄糖2%，氯化鈉0.3%，經(jīng)蒸餾除菌冷卻后，將已培養(yǎng)好的青霉和根霉種子液分別按照30%的接種量在無菌條件下接入到經(jīng)蒸餾冷卻的固體發(fā)酵底物（固體培養(yǎng)基）中，攪拌均勻后，置30～35℃恒溫培養(yǎng)3～4d，并每隔1～2d進行翻料；培養(yǎng)3～4d后，再按30%的接種量接入到含水分為50%的以蘋果渣為主要原料的固體培養(yǎng)基（配料同上）進行擴培，并每隔1～2d定期翻料，繼續(xù)培養(yǎng)3～4d。

培養(yǎng)結束后，將已培養(yǎng)的酵母菌和乳酸菌分別按照30%和10%的接種量接入到已擴大培養(yǎng)的麩曲中，充分攪拌均勻后，于28～30℃發(fā)酵5～6d。發(fā)酵結束后，將發(fā)酵產(chǎn)物于自然條件下或40～50℃烘干至水分為10～13%，即可得成品的接種量。