本發(fā)明涉及乳制品加工領(lǐng)域。更具體地，涉及一種通過添加乳過氧化氫酶以達(dá)到抑制細(xì)菌總數(shù)繁殖、延長(zhǎng)貨架期的液態(tài)乳制品制備方法。
背景技術(shù)：
牛奶是母牛產(chǎn)犢后從乳腺分泌出來(lái)的一種白色或稍帶微黃色的不透明的膠體性液體，是人們?nèi)粘Ｉ钪薪?jīng)常食用的一種食品?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)證實(shí)牛奶含有多種對(duì)優(yōu)生有益的功能因子，牛奶中所含的維生素A是胎兒發(fā)育和兒童生長(zhǎng)的要素之一，有助于妊娠良好、胎盤免受損害、早期發(fā)育正常。牛奶中所含的維生素B2能幫助妊娠期婦女有效補(bǔ)充維生素，避免胎兒骨骼畸形。牛奶中所含的葉酸，能預(yù)防胎兒神經(jīng)管發(fā)育畸形和腦脊柱裂，避免神經(jīng)管畸形兒、無(wú)腦畸形兒和腦脊柱裂畸形兒出生。不僅如此，牛奶含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪、乳糖、維生素及鈣、鐵、鈉等礦物質(zhì)，被認(rèn)為是迄今為止所發(fā)現(xiàn)的一種比較理想的營(yíng)養(yǎng)均衡食品。此外，牛奶還有預(yù)防高血壓的功能。盡管高血壓是中老年人的一種常見疾病。但研究表明，這種疾病可以從胎兒在母親肚子里的時(shí)候開始預(yù)防，嬰兒的母親如果在她懷孕的最后3個(gè)月內(nèi)，堅(jiān)持每天喝一定量的牛奶，就能降低孩子的血壓，如果兒童期血壓超過正常標(biāo)準(zhǔn)，成年后往往會(huì)發(fā)展成為高血壓，而讓他們每天喝一杯牛奶，就可以使收縮壓降低。因此，人們把牛奶稱為高血壓的天敵。
目前，市場(chǎng)上售賣的液態(tài)乳制品除酸奶及乳飲料外，從熱處理工藝形式上，主要可以分為巴氏殺菌及超高溫殺菌兩種。研究表明，隨著液態(tài)乳制品殺菌處理強(qiáng)度的提升，產(chǎn)品中有效的功能成分被破壞比例也隨之提高，產(chǎn)品營(yíng)養(yǎng)性降低。但較低強(qiáng)度的殺菌工藝處理，對(duì)于產(chǎn)品中的微生物致死率又并不理想，直接導(dǎo)致產(chǎn)品貨架期的縮短以及出現(xiàn)質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)概率的提高。
因此，需要提供一種簡(jiǎn)便易操作并且安全性好的延長(zhǎng)貨架期的液態(tài)乳制品制備方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種通過添加乳過氧化氫酶延長(zhǎng)貨架期的液 態(tài)乳制品制備方法。將乳過氧化氫酶添加到液態(tài)乳制品中，使產(chǎn)品中過氧化氫、硫氰酸鹽的硫氰酸根被氧化，其產(chǎn)生的化合物可以抑制牛奶中的微生物生長(zhǎng)，延長(zhǎng)產(chǎn)品保質(zhì)期；進(jìn)一步，上述化學(xué)反應(yīng)的發(fā)生還能改善液態(tài)乳制品產(chǎn)品自身的感官風(fēng)味。
本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種按照本發(fā)明的方法生產(chǎn)得到的含有乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品。采用巴氏殺菌方法結(jié)合外加乳過氧化氫酶制備得到的該液態(tài)乳制品的貨架期的延長(zhǎng)效果更明顯，同時(shí)可以降低產(chǎn)品儲(chǔ)存、物流及銷售環(huán)節(jié)的存放溫度要求，并提升產(chǎn)品的穩(wěn)定性。
研究表明，乳過氧化氫酶是鮮奶中天然存在的一種酶，在牛的整個(gè)泌乳期，乳過氧化氫酶的濃度一直恒定為30mg/L，乳過氧化氫酶與牛奶自身帶有的過氧化氫、硫氰酸鹽進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，氧化硫氰酸根，其產(chǎn)生的化合物可以抑制牛奶中的微生物生長(zhǎng)，并殺死一些革蘭氏陰性菌。
但是，現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)于乳氧化氫酶在過氧化氫、硫氰酸鹽存在情況下的抑菌作用的研究?jī)H限于原乳中。目前，還沒有將乳過氧化氫酶添加至液態(tài)乳制品中以達(dá)到抑制細(xì)菌總數(shù)繁殖、延長(zhǎng)產(chǎn)品貨架期的相關(guān)研究。本申請(qǐng)人研究發(fā)現(xiàn)，雖然原乳中的乳過氧化氫酶的含量能夠達(dá)到30mg/L，但是，在將原乳生產(chǎn)成液態(tài)乳制品的過程中，需要經(jīng)過巴氏滅菌或超高溫滅菌等一系列的處理過程，這些處理過程會(huì)對(duì)原乳中存在的酶造成破壞甚至產(chǎn)生不可逆的影響，同時(shí)也會(huì)對(duì)原乳中的乳過氧化氫酶、過氧化氫以及硫氰酸鹽三者體系的平衡造成破壞，從而導(dǎo)致處理后的原乳中所殘余的乳過氧化氫酶并不能真正起到抑菌的作用。
為了解決上述問題，本申請(qǐng)人通過研究發(fā)現(xiàn)，通過在殺菌處理后的液態(tài)奶制品中外加適量的天然乳過氧化氫酶，來(lái)促使外加的乳過氧化氫酶與奶制品中存在的過氧化氫以及硫氰酸鹽進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，氧化硫氰酸根，產(chǎn)生抑制細(xì)菌繁殖的化合物，能夠達(dá)到良好的抑菌效果，從而延長(zhǎng)產(chǎn)品貨架期的目的。
為達(dá)到上述第一個(gè)目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：
一種通過添加乳過氧化氫酶延長(zhǎng)貨架期的液態(tài)乳制品制備方法，所述方法包括原料奶經(jīng)殺菌處理并冷卻后，通過無(wú)菌在線添加系統(tǒng)添加乳過氧化氫酶的步驟，以制備含有乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品；所述乳過氧化氫酶的添加量為1.5g/t-1.8g/t；所述乳過氧化氫酶添加前經(jīng)過電磁輻射滅菌處理。
優(yōu)選地，所述乳過氧化氫酶的添加量為1.6g/t-1.75g/t。
在此方法中，最佳乳過氧化氫酶添加量的確定，是保證其產(chǎn)生抑菌效果 的關(guān)鍵。對(duì)此，本申請(qǐng)人進(jìn)行了大量的研究，該研究結(jié)果如附圖1所示。本申請(qǐng)人研究發(fā)現(xiàn)，外加乳過氧化氫酶1.5g/t-1.8g/t可以完全分解牛奶中過氧化氫及硫氰酸鹽。目前，乳過氧化氫酶分解過氧化氫及硫氰酸鹽的反應(yīng)機(jī)制還沒得到完全的確認(rèn)，無(wú)法通過分子方程式計(jì)算的方法確定最佳的乳過氧化氫酶添加量。一般牛乳中的過氧化氫及硫氰酸鹽的含量分別為30mg/L及2.90～34.85mg/L，申請(qǐng)人分別通過試劑盒法及分光光度計(jì)法對(duì)添加過乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品進(jìn)行檢測(cè)。研究表明，添加1.5g/t-1.8g/t乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品中，過氧化氫及硫氰酸鹽含量均<0.1mg/L，基本達(dá)到完全分解的效果；當(dāng)乳過氧化氫添加量在<1.5g/t范圍內(nèi)，過氧化氫及硫氰酸鹽含量均在0.1mg/L以上，沒有達(dá)到完全分解的效果；當(dāng)乳過氧化氫添加量在1.8-2.2g/t范圍內(nèi)，過氧化氫及硫氰酸鹽含量也均<0.1mg/L，但考慮產(chǎn)品成本等原因，不適合將該數(shù)值作為乳過氧化氫的最佳添加量；當(dāng)乳過氧化氫添加量在2.2g/t以上時(shí)，過氧化氫及硫氰酸鹽殘留含量又出現(xiàn)明顯反彈，效果較<1.5g/t添加量類似，分解效果較差。故綜合實(shí)驗(yàn)結(jié)論，添加1.5-1.8g/t的乳過氧化氫酶入液態(tài)乳制品產(chǎn)品中效果最佳，可以達(dá)到產(chǎn)生抑制產(chǎn)品微生物繁殖的效果。
優(yōu)選地，所述電磁輻射滅菌處理是將乳過氧化氫酶在距離紫外光源25～60cm范圍內(nèi)，采用波長(zhǎng)范圍為250～270nm的紫外線照射20～30min。
優(yōu)選地，所述乳過氧化氫酶添加前先經(jīng)過固定化處理，再進(jìn)行電磁輻射滅菌處理。
優(yōu)選地，所述固定化處理包括如下步驟：
1)將乳過氧化氫酶液與220～350目的酸性氧化鋁混合均勻，冰浴攪拌，離心得到沉淀物；
2)將沉淀物分散于蒸餾水中形成懸浮液，將懸浮液與海藻酸鈉水溶液混合并攪拌均勻得到混合液；
3)將混合液滴入CaCl2溶液中，混合液滴在CaCl2溶液中成形并析出，收集成形顆粒，室溫下真空干燥，即得到固定化的乳過氧化氫酶。
優(yōu)選地，所述固定化處理步驟1)中，每克酸性氧化鋁中混入720～780國(guó)際單位的25-40mg/ml的乳過氧化氫酶液；步驟2)中，每克沉淀物分散于6.05～6.86毫升的蒸餾水中形成懸浮液，懸浮液與海藻酸鈉水溶液混合的體積比為1：1.5-3，海藻酸鈉水溶液的質(zhì)量濃度為8％～9％；步驟3)中，CaCl2溶液的質(zhì)量濃度為25～30％，所述固定化的乳過氧化氫酶中乳過氧化氫酶的負(fù)載量為1-1.5wt％。
進(jìn)一步地，為了保證整個(gè)制備過程的無(wú)菌添加，使得外加的乳過氧化氫酶不會(huì)引入新的細(xì)菌，同時(shí)考慮保證乳過氧化氫酶的活性，本發(fā)明通過采取酶固定化技術(shù)，將對(duì)環(huán)境較為敏感的乳過氧化物酶進(jìn)行包埋處理，得到最佳的包埋處理?xiàng)l件，同時(shí)對(duì)固定化的乳過氧化氫酶進(jìn)行電磁輻射滅菌處理，添加至液態(tài)乳制品中，使得添加固定化后的乳過氧化氫酶在保證自身潔凈度的前提下，最大效果的在產(chǎn)品中與牛乳自帶的過氧化氫、硫氰酸鹽進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，以抑制產(chǎn)品中殘留微生物繁殖，達(dá)到延長(zhǎng)產(chǎn)品貨架期的目的。
本申請(qǐng)人對(duì)乳過氧化氫酶的固定化最佳條件進(jìn)行了相關(guān)研究，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用220～350目酸性氧化鋁按每克氧化鋁混入720～780國(guó)際單位的比例與乳過氧化氫酶液混合均勻，并在冰浴中攪拌20分鐘，然后離心(1000轉(zhuǎn)/分鐘，2℃，15分鐘)。將沉淀物以蒸餾水按每克沉淀物加6.05～6.86毫升的比例攪拌分散成懸浮液。將懸浮液與同體積的8％～9％海藻酸鈉混合并攪拌均勻。將混合液滴入25～30％CaCl2溶液中緩慢攪動(dòng)成型，將成形顆粒濾出蒸餾水洗滌，并在室溫下真空干燥48小時(shí)后置于干燥器40℃貯存，所得固定化乳過氧化氫酶穩(wěn)定性最高。
本申請(qǐng)人還對(duì)固定化后的乳過氧化氫酶的電磁輻射滅菌處理?xiàng)l件進(jìn)行研究，試驗(yàn)結(jié)果表明，采用波長(zhǎng)范圍是250～270nm的紫外線在25～60cm有效距離內(nèi)，照射時(shí)間20～30分鐘可以有效的對(duì)固定化的乳過氧化氫酶表面存在的微生物進(jìn)行殺滅。
申請(qǐng)人在研究中還發(fā)現(xiàn)，所述固定化的乳過氧化氫酶的添加，還能改善液態(tài)乳制品產(chǎn)品的感官風(fēng)味，去除牛乳中不良的滋味，使牛奶中本身中良好的奶香味釋放更加突出，更好的迎合消費(fèi)者口味需求。
優(yōu)選地，原料奶經(jīng)殺菌處理并冷卻至2-4℃范圍內(nèi)，再進(jìn)行乳過氧化氫酶的添加。
優(yōu)選地，所述原料奶為符合我國(guó)生鮮牛乳收購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)的鮮奶或還原乳，所述鮮奶或還原乳為全脂牛奶、部分脫脂的低脂牛奶或全部脫脂的牛奶。
優(yōu)選地，原料奶的殺菌處理工藝包括巴氏殺菌處理、超高溫滅菌處理、低溫長(zhǎng)時(shí)滅菌處理或者陶瓷膜微濾除菌處理。
更優(yōu)選地，所述巴氏殺菌處理是指在72-76℃，或80-85℃下滅菌10-15s；所述超高溫滅菌處理是指在132℃以上受熱較短時(shí)間滅菌；所述低溫長(zhǎng)時(shí)滅菌處理是指在63-65℃下滅菌20-35min；所述陶瓷膜微濾除菌處理是指采用0.8-1.4微米孔徑陶瓷膜去除原料奶中的細(xì)菌及芽孢。
優(yōu)選地，所述乳過氧化氫酶為天然乳過氧化氫酶，提取自天然牛奶中。
在本發(fā)明的某一具體實(shí)施方案中，所述添加乳過氧化物酶的液態(tài)乳制品的制備方法主要包括如下步驟：
一、乳過氧化氫酶的固定化
1、以720～780國(guó)際單位的過氧化氫酶液混入每克經(jīng)220～350目酸性氧化鋁中，并在冰浴中攪拌20分鐘，然后離心(1000轉(zhuǎn)/分鐘，2℃，15分鐘)。
2、將沉淀物以蒸餾水按每克沉淀物加6.05～6.86毫升的比例攪拌分散成懸浮液。將懸浮液與同體積的8％～9％海藻酸鈉混合并攪拌均勻。
3、將混合液滴入25～30％CaCl2溶液中緩慢攪動(dòng)成型，將成形顆粒濾出蒸餾水洗滌，并在室溫下真空干燥48小時(shí)后置于干燥器40℃貯存?zhèn)溆谩?/p>
二、固定化的乳過氧化氫酶電磁滅菌
將固定化后的乳過氧化氫酶在波長(zhǎng)范圍是250～270nm的紫外燈下進(jìn)行輻射殺菌，固定化后的乳過氧化氫酶在距離紫外燈25～60cm范圍內(nèi)，照射時(shí)間為20～30分鐘。
三、添加乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品的制備
1、將檢驗(yàn)合格的原奶經(jīng)過凈乳機(jī)靜乳，去除原奶中的雜質(zhì)。
2、根據(jù)終產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，靜乳后的原奶選用降膜蒸發(fā)器進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。
3、將標(biāo)準(zhǔn)化后的原奶升溫至55-75℃，進(jìn)行脫氣。
4、脫氣后的物料在160-180bar條件下進(jìn)行均質(zhì)。
5、均質(zhì)后的物料經(jīng)過63℃、30min、72-74℃、15s或82-55℃、15s條件下進(jìn)行巴氏殺菌，要求物料出口溫度在2-4℃范圍內(nèi)
6、在線無(wú)菌添加處理后的乳過氧化氫酶至殺菌冷卻后的巴氏奶物料中。
7、將物料冷卻至2-4℃進(jìn)行儲(chǔ)存，得到含有乳過氧化物酶的液態(tài)乳制品。
本發(fā)明中，對(duì)物料在55～65℃、160-180bar下進(jìn)行均質(zhì)，可以使其穩(wěn)定性更好。均質(zhì)后的料液在63℃、30min、72-74℃、15s或82-55℃、15s條件下進(jìn)行殺菌，可以保證一定的滅菌效率。
根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施案，本發(fā)明中通過無(wú)菌在線添加系統(tǒng)將固定化及經(jīng)過滅菌處理的乳過氧化物酶添加至殺菌后冷卻的物料中。
本發(fā)明中，各原料均可商購(gòu)獲得，各原料性能指標(biāo)符合相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。
本發(fā)明中對(duì)產(chǎn)品的包裝形式?jīng)]有特定要求，可以采用目前市場(chǎng)上常見的低溫液態(tài)乳的包裝形式。例如，本發(fā)明可以采用屋頂盒包裝，或者采用PET、 HDPE、BOPP等塑瓶包裝。
本發(fā)明的生產(chǎn)工藝中所用的設(shè)備均可采用本領(lǐng)域中的公知設(shè)備和相關(guān)技術(shù)，在此不再對(duì)具體的生產(chǎn)設(shè)備和灌裝工藝進(jìn)行贅述。
本發(fā)明還提供了按照本發(fā)明的方法制備得到的含有乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品。本發(fā)明的液態(tài)乳制品，風(fēng)味純正，穩(wěn)定性良好。具體地，采用巴氏殺菌方法結(jié)合外加乳過氧化氫酶制備得到的該液態(tài)乳制品產(chǎn)品，其貨架期的延長(zhǎng)效果更明顯。含有乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品，各項(xiàng)指標(biāo)均符合國(guó)家巴氏殺菌乳相關(guān)法規(guī)規(guī)定，可在低溫(2-6攝氏度)冷藏條件下保存8-10天不出現(xiàn)變質(zhì)、脂肪上浮等現(xiàn)象。
本發(fā)明的有益效果如下：
綜上所述，本發(fā)明通過在液態(tài)乳制品中添加天然乳過氧化氫酶，提高了液態(tài)乳制品自身抑制微生物繁殖的防御體系，所含有的天然乳過氧化氫酶是天然牛奶提取活性成分，對(duì)人體安全、無(wú)副作用，且添加物無(wú)法規(guī)風(fēng)險(xiǎn)。本發(fā)明通過恰當(dāng)?shù)墓に囀侄?，使得到的液態(tài)乳制品不僅具有營(yíng)養(yǎng)的效果，還具有獨(dú)特的風(fēng)味及口感，并具有良好的穩(wěn)定性。并且，本發(fā)明中添加特定量的天然乳過氧化氫酶，還能在一定程度上改善液態(tài)乳制品的風(fēng)味。同時(shí)，對(duì)于本發(fā)明制備的液態(tài)乳制品，對(duì)于產(chǎn)品儲(chǔ)存、物流及銷售中端溫度要求有所下降，降低了因各環(huán)節(jié)因溫度控制不佳造成的產(chǎn)品變質(zhì)風(fēng)險(xiǎn)。本發(fā)明的含有天然乳過氧化物酶的液態(tài)乳制品，是符合現(xiàn)代人需要的健康奶制品，具有廣闊的應(yīng)用前景。
附圖說(shuō)明
下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。
圖1示出本發(fā)明方法制備得到的液態(tài)乳制品中外加的乳過氧化氫酶的添加量與硫氰酸鹽含量的關(guān)系曲線圖。
具體實(shí)施方式
為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明，下面結(jié)合優(yōu)選實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說(shuō)明。附圖中相似的部件以相同的附圖標(biāo)記進(jìn)行表示。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，下面所具體描述的內(nèi)容是說(shuō)明性的而非限制性的，不應(yīng)以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
本發(fā)明中，除特別注明外，所述比例和含量均為重量比例和含量。
實(shí)施例1
含有天然乳過氧化氫酶的巴氏殺菌液態(tài)乳制品制作方法
一、乳過氧化氫酶的固定化
1、每克280目酸性氧化鋁中混入760國(guó)際單位的過氧化氫酶液，并在冰浴中攪拌20分鐘，然后離心(1000轉(zhuǎn)/分鐘，2℃，15分鐘)。
2、將沉淀物以蒸餾水按每克沉淀物加6.56毫升的比例攪拌分散成懸浮液。將懸浮液與同體積的8.5％海藻酸鈉混合并攪拌均勻。
3、將混合液滴入28％CaCl2溶液中緩慢攪動(dòng)成型，將成形顆粒濾出蒸餾水洗滌，并在室溫下真空干燥48小時(shí)后置于干燥器40℃貯存?zhèn)溆?。所得固定化的乳過氧化氫酶中酶的負(fù)載量為1.5wt％。
二、固定化的乳過氧化氫酶電磁滅菌
將固定化后的乳過氧化氫酶在波長(zhǎng)范圍是260nm的紫外燈下進(jìn)行輻射殺菌，固定化后的乳過氧化氫酶在距離紫外燈30cm范圍內(nèi)，照射時(shí)間為25分鐘。
三、添加乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品制備
1、將檢驗(yàn)合格的原奶經(jīng)過凈乳機(jī)靜乳，去除原奶中的雜質(zhì)。
2、根據(jù)終產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，靜乳后的原奶選用降膜蒸發(fā)器進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。
3、將標(biāo)準(zhǔn)化后的原奶升溫至65℃，進(jìn)行脫氣。
4、脫氣后的物料在170bar條件下進(jìn)行均質(zhì)。
5、均質(zhì)后的物料經(jīng)過72-74℃、15s或82-85℃、15s條件下進(jìn)行巴氏殺菌，要求物料出口溫度冷卻在在2-4℃范圍內(nèi)。
6、在線無(wú)菌添加處理后的乳過氧化氫酶至殺菌冷卻后的液態(tài)乳制品物料中，所述固定化后的乳過氧化氫酶的添加量為120g/t。
7、將物料冷卻至2-4℃進(jìn)行儲(chǔ)存，得到含有乳過氧化物酶的液態(tài)乳制品。
實(shí)施例2
含有天然乳過氧化氫酶的低溫長(zhǎng)時(shí)滅菌液態(tài)乳制品制作方法
一、乳過氧化氫酶的固定化
1、每克350目酸性氧化鋁中混入780國(guó)際單位的過氧化氫酶液，并在冰浴中攪拌20分鐘，然后離心(1000轉(zhuǎn)/分鐘，2℃，15分鐘)。
2、將沉淀物以蒸餾水按每克沉淀物加6.86毫升的比例攪拌分散成懸浮 液。將懸浮液與同體積的9％海藻酸鈉混合并攪拌均勻。
3、將混合液滴入30％CaCl2溶液中緩慢攪動(dòng)成型，將成形顆粒濾出蒸餾水洗滌，并在室溫下真空干燥48小時(shí)后置于干燥器40℃貯存?zhèn)溆?。所得固定化的乳過氧化氫酶中酶的負(fù)載量為1.5wt％。
二、固定化的乳過氧化氫酶電磁滅菌
將固定化后的乳過氧化氫酶在波長(zhǎng)范圍是270nm的紫外燈下進(jìn)行輻射殺菌，固定化后的乳過氧化氫酶在距離紫外燈60cm范圍內(nèi)，照射時(shí)間為30分鐘。
三、添加乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品制備
1、將檢驗(yàn)合格的原奶經(jīng)過凈乳機(jī)靜乳，去除原奶中的雜質(zhì)。
2、根據(jù)終產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，靜乳后的原奶選用降膜蒸發(fā)器進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。
3、將標(biāo)準(zhǔn)化后的原奶升溫至75℃，進(jìn)行脫氣。
4、脫氣后的物料在180bar條件下進(jìn)行均質(zhì)。
5、均質(zhì)后的物料經(jīng)過63℃、30min條件下進(jìn)行低溫長(zhǎng)時(shí)巴氏殺菌，要求物料出口溫度在2-4℃范圍內(nèi)。
6、在線無(wú)菌添加處理后的乳過氧化氫酶至殺菌冷卻后的液態(tài)乳制品物料中。所述固定化后的乳過氧化氫酶的添加量為100g/t。
7、將物料冷卻至2-4℃進(jìn)行儲(chǔ)存，得到含有乳過氧化物酶的液態(tài)乳制品。
實(shí)施例3
含有天然乳過氧化氫酶的陶瓷膜微濾除菌液態(tài)乳制品制作方法
一、乳過氧化氫酶的固定化
1、每克220～350目酸性氧化鋁中混入720國(guó)際單位的過氧化氫酶液，并在冰浴中攪拌20分鐘，然后離心(1000轉(zhuǎn)/分鐘，2℃，15分鐘)。
2、將沉淀物以蒸餾水按每克沉淀物加6.05毫升的比例攪拌分散成懸浮液。將懸浮液與同體積的8％海藻酸鈉混合并攪拌均勻。
3、將混合液滴入25％CaCl2溶液中緩慢攪動(dòng)成型，將成形顆粒濾出蒸餾水洗滌，并在室溫下真空干燥48小時(shí)后置于干燥器40℃貯存?zhèn)溆?。所得固定化的乳過氧化氫酶中酶的負(fù)載量為1.3wt％。
二、固定化的乳過氧化氫酶電磁滅菌
將固定化后的乳過氧化氫酶在波長(zhǎng)范圍是250nm的紫外燈下進(jìn)行輻射殺菌，固定化后的乳過氧化氫酶在距離紫外燈25cm范圍內(nèi)，照射時(shí)間為20分 鐘。
三、添加乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品制備
1、將檢驗(yàn)合格的原奶經(jīng)過凈乳機(jī)靜乳，去除原奶中的雜質(zhì)。
2、根據(jù)終產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，靜乳后的原奶選用降膜蒸發(fā)器進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。
3、將標(biāo)準(zhǔn)化后的原奶升溫至55℃，進(jìn)行脫氣。
4、將標(biāo)準(zhǔn)化后的原奶進(jìn)行脫脂分離，要求脫脂奶中稀奶油含量小于0.06％。
5、將脫脂奶在55℃條件下采用1.0微米孔徑的陶瓷膜進(jìn)行陶瓷膜微濾除菌。
6、分離出的稀奶油在125攝氏度、4秒條件下滅菌。
7、滅菌后的稀奶油及陶瓷膜微濾除菌后的脫脂奶在線混合，并在160bar條件下進(jìn)行均質(zhì)。
8、均質(zhì)后的物料經(jīng)過72℃、15s條件下進(jìn)行巴氏殺菌，要求物料出口溫度在2-4℃范圍內(nèi)。
6、在線無(wú)菌添加處理后的乳過氧化氫酶至殺菌冷卻后的液態(tài)乳制品物料中。所述固定化后的乳過氧化氫酶的添加量為118g/t。
7、將物料冷卻至2-4℃進(jìn)行儲(chǔ)存，得到含有乳過氧化物酶的液態(tài)乳制品。
實(shí)施例4
含有天然乳過氧化氫酶的超高溫滅菌液態(tài)乳制品制作方法
一、乳過氧化氫酶的固定化
1、每克220～350目酸性氧化鋁中混入720國(guó)際單位的過氧化氫酶液，并在冰浴中攪拌20分鐘，然后離心(1000轉(zhuǎn)/分鐘，2℃，15分鐘)。
2、將沉淀物以蒸餾水按每克沉淀物加6.05毫升的比例攪拌分散成懸浮液。將懸浮液與同體積的8％海藻酸鈉混合并攪拌均勻。
3、將混合液滴入25％CaCl2溶液中緩慢攪動(dòng)成型，將成形顆粒濾出蒸餾水洗滌，并在室溫下真空干燥48小時(shí)后置于干燥器40℃貯存?zhèn)溆?。所得固定化的乳過氧化氫酶中酶的負(fù)載量為1.4wt％。
二、固定化的乳過氧化氫酶電磁滅菌
將固定化后的乳過氧化氫酶在波長(zhǎng)范圍是250nm的紫外燈下進(jìn)行輻射殺菌，固定化后的乳過氧化氫酶在距離紫外燈25cm范圍內(nèi)，照射時(shí)間為20分鐘。
三、添加乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品制備
1、將檢驗(yàn)合格的原奶經(jīng)過凈乳機(jī)靜乳，去除原奶中的雜質(zhì)。
2、根據(jù)終產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，靜乳后的原奶選用降膜蒸發(fā)器進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。
3、將標(biāo)準(zhǔn)化的物料在180bar條件下進(jìn)行均質(zhì)。
4、均質(zhì)后的物料經(jīng)過137℃、4s條件下進(jìn)行超高溫殺滅菌，要求物料出口溫度在2-4℃范圍內(nèi)。
6、在線無(wú)菌添加處理后的乳過氧化氫酶至殺菌冷卻后的液態(tài)乳制品物料中。所述固定化后的乳過氧化氫酶的添加量為114g/t。
7、將物料冷卻至2-4℃進(jìn)行儲(chǔ)存，得到含有乳過氧化物酶的液態(tài)乳制品。
對(duì)比例1
本對(duì)比例中，未添加天然乳過氧化氫酶，而是直接以原料奶為原料進(jìn)行加工，其他工藝條件同實(shí)施例1，制備得到作為對(duì)比樣1的液態(tài)乳制品。
對(duì)比例2
本對(duì)比例中，添加了固定化的乳過氧化氫酶，但固定化后的乳過氧化氫酶未經(jīng)過電磁輻射滅菌。其他工藝條件同實(shí)施例1，制備得到作為對(duì)比樣2的液態(tài)乳制品。
對(duì)比例3
本對(duì)比例中，添加了未經(jīng)固定化的乳過氧化氫酶，未經(jīng)固定化的乳過氧化氫酶添加前經(jīng)過了電磁輻射滅菌。其他工藝條件同實(shí)施例1，制備得到作為對(duì)比樣3的液態(tài)乳制品。
含有天然乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品感官品評(píng)驗(yàn)證
對(duì)本發(fā)明實(shí)施例1至實(shí)施例4及對(duì)比例1、2和3生產(chǎn)得到的產(chǎn)品進(jìn)行口感和風(fēng)味的盲測(cè)實(shí)驗(yàn)。主要感官檢查項(xiàng)目：組織狀態(tài)、色澤、口感、風(fēng)味等。感官和風(fēng)味評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)如表1。參加實(shí)驗(yàn)人數(shù)共30人，統(tǒng)計(jì)總分，計(jì)算平均分；平均分?jǐn)?shù)越高，代表效果越好；并對(duì)產(chǎn)品的整體喜好程度給出意見，統(tǒng)計(jì)對(duì)每個(gè)單品的喜好人數(shù)；統(tǒng)計(jì)結(jié)果記錄于表1。
表1含有天然乳過氧化物酶的液態(tài)乳制品的口感和風(fēng)味評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)
評(píng)價(jià)結(jié)果記錄于表2：
表2實(shí)施例及對(duì)比例的評(píng)分結(jié)果
通過此感官評(píng)價(jià)表可知，本發(fā)明的加入經(jīng)過電磁輻射滅菌的天然乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品與對(duì)比樣相比，口感和風(fēng)味分值較高。說(shuō)明此種液態(tài)乳制品深受歡迎，有廣闊的應(yīng)用前景。對(duì)比例1未加入天然過氧化氫酶，產(chǎn)品風(fēng)味較實(shí)施例1-4存在顯著的差距。
含有天然乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品在貯藏期內(nèi)的穩(wěn)定性
為了檢測(cè)添加天然乳過氧化氫酶對(duì)液態(tài)乳制品的穩(wěn)定性是否有影響，發(fā)明人對(duì)實(shí)施例1～4及對(duì)比例1、2、3得到的產(chǎn)品貯藏期內(nèi)的產(chǎn)品的穩(wěn)定性進(jìn)行了觀察，結(jié)果見表3：
表3產(chǎn)品在貯藏期內(nèi)的穩(wěn)定性
根據(jù)表3可知，本發(fā)明的加入經(jīng)過電磁輻射滅菌的固定化的天然乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品與對(duì)比例的樣品相比，產(chǎn)品穩(wěn)定性明顯得到改善，所得到的產(chǎn)品在貯藏期內(nèi)具有較好的穩(wěn)定性，適合商業(yè)生產(chǎn)。對(duì)比例1中，未加入天然乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品，由于產(chǎn)品在貨架期內(nèi)微生物的繁殖，對(duì)產(chǎn)品品質(zhì)存在明顯負(fù)面影響，產(chǎn)品貨架期7天內(nèi)出現(xiàn)穩(wěn)定體系破壞現(xiàn)象。對(duì)比例2中，加入未經(jīng)過電磁輻射滅菌的天然乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品，在產(chǎn)品體系中存在一定的抑制微生物生長(zhǎng)的作用，但由于加入固定化的天然乳過氧化氫酶未經(jīng)過電磁輻射滅菌，原料自身存在一定微生物污染，使得產(chǎn)品貨架期穩(wěn)定性差于實(shí)施例，但對(duì)比對(duì)比例1，仍具有一定優(yōu)勢(shì)。對(duì)比例3中，加入未經(jīng)固化但經(jīng)過輻射滅菌的乳過氧化氫酶的產(chǎn)品，對(duì)比例3中雖然乳過氧化氫酶未經(jīng)固定化處理，但其經(jīng)過電磁輻射殺菌，潔凈度較高，估與實(shí)施例較類似。
含有天然乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品貨架期微生物變化情況
對(duì)本發(fā)明實(shí)施例1至實(shí)施例4及對(duì)比例1、2、3中液態(tài)乳制品貨架期(6℃儲(chǔ)存)細(xì)菌總數(shù)進(jìn)行測(cè)定，考察本發(fā)明的液態(tài)乳制品是否具有延長(zhǎng)產(chǎn)品貨架期的效果。
表4含有天然乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品貨架期微生物變化情況
由表4可以看出，添加經(jīng)過電磁輻射殺菌的乳過氧化氫酶的實(shí)施例1-3液態(tài)乳制品產(chǎn)品，貨架期內(nèi)微生物繁殖速度明顯較未添加乳過氧化氫酶的對(duì)比例1要減弱，貨架期第10天，產(chǎn)品細(xì)菌總數(shù)情況仍符合巴氏奶國(guó)標(biāo) <50000cfu/ml的法規(guī)要求，尤其是實(shí)施例4由于采取超高溫滅菌工藝，產(chǎn)品接近商業(yè)無(wú)菌，故細(xì)菌總數(shù)為0，說(shuō)明添加了本發(fā)明處理的乳過氧化氫酶有效的抑制了產(chǎn)品貨架期內(nèi)的微生物滋長(zhǎng)。表4中，對(duì)比例2由于所添加的乳過氧化氫酶沒有經(jīng)過電磁殺菌處理，自身微生物潔凈度較弱，存在污染源風(fēng)險(xiǎn)，故添加至液態(tài)乳制品產(chǎn)品中，雖與牛奶自身帶有的過氧化氫、硫氰酸鹽進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，氧化硫氰酸根，一定情況下抑制了牛奶中的微生物生長(zhǎng)，但抑制效果沒有實(shí)施例1-3顯著。對(duì)比例3雖經(jīng)過電磁殺菌，自身潔凈度較高，但其未經(jīng)過酶固定化處理，估其延長(zhǎng)產(chǎn)品貨架期效果較弱。
含有天然乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品不同儲(chǔ)存溫度貨架期微生物情況
對(duì)本發(fā)明實(shí)施例1至實(shí)施例4及對(duì)比例1、2、3中液態(tài)乳制品不同溫度儲(chǔ)存下，產(chǎn)品貨架期(第七天、第十天)細(xì)菌總數(shù)進(jìn)行測(cè)定，考察本發(fā)明的液態(tài)乳制品對(duì)貨架期儲(chǔ)存溫度的要求情況。
表5含有天然乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品不同儲(chǔ)存溫度下貨架期微生物情況
由表5可以看出，儲(chǔ)存溫度對(duì)產(chǎn)品貨架期內(nèi)微生物繁殖的影響，經(jīng)過添加電磁輻射殺菌的乳過氧化氫酶的實(shí)施例1-4液態(tài)乳制品沒有對(duì)比例1、2和3敏感。實(shí)施例1-4在4℃、6℃、10℃儲(chǔ)存溫度下，貨架期都至少能夠達(dá)到10天，且各階段產(chǎn)品微生物狀況相差范圍較小。而對(duì)比例1雖然在三個(gè)溫度儲(chǔ)存梯度下貨架期都在7天以內(nèi)，但產(chǎn)品在第7天所處微生物狀況明顯不同，不同儲(chǔ)存溫度下，產(chǎn)品細(xì)菌總數(shù)呈現(xiàn)顯著性差異，說(shuō)明添加經(jīng)過添加電磁輻射殺菌的乳過氧化氫酶的液態(tài)乳制品產(chǎn)品對(duì)貨架期儲(chǔ)存溫度要求較正常巴氏 奶產(chǎn)品相對(duì)降低，在產(chǎn)品儲(chǔ)存、運(yùn)輸及售賣環(huán)節(jié)可以有效降低運(yùn)行成本及產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)比例2由于添加乳過氧化氫酶潔凈度較差，故對(duì)貨架期造成一定不良影響；對(duì)比例3由于乳過氧化氫酶未經(jīng)過固定化處理，酶活性較低，估也直接影響產(chǎn)品貨架期效果。
顯然，本發(fā)明的上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說(shuō)明本發(fā)明所作的舉例，而并非是對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式的限定，對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在上述說(shuō)明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)，這里無(wú)法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉，凡是屬于本發(fā)明的技術(shù)方案所引伸出的顯而易見的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之列。