一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法。其特征在于：在37℃恒溫下，先對(duì)胎盤子面的臍動(dòng)靜脈進(jìn)行插管，并注入37℃的溶有肝素鈉的生理鹽水，再將此臍動(dòng)靜脈干所輻射區(qū)的胎盤小葉取下；在母體面將導(dǎo)管插入絨毛間隙，將插管完畢的胎盤小葉用無菌漏斗置于恒溫水浴箱中，并固定漏斗，樣品固定后即在母體面及胎兒面分別加注灌流液。本發(fā)明的模型建立方法所需設(shè)備簡(jiǎn)單、操作可控性好、穩(wěn)定性佳，最大程度還原了胎盤屏障體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)過程。
【專利說明】一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)療模型【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法。

【背景技術(shù)】
[0002]胎盤由胎兒部分的葉狀絨毛膜和羊膜以及母體部分的底蛻膜共同構(gòu)成。胎盤是母體循環(huán)和胎兒循環(huán)的分隔，讓胎兒處于一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定且不易受外界環(huán)境影響的狀態(tài)，故又稱之為胎盤屏障。胎盤屏障能進(jìn)行母胎間的物質(zhì)交換，在為胎兒提供養(yǎng)分的同時(shí)排出胎兒的代謝產(chǎn)物。因此對(duì)胎盤屏障透過性的研究，不僅能了解外界因素對(duì)胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)發(fā)育的影響，還能對(duì)研究一些妊娠期特有疾病的發(fā)生發(fā)展過程有一定的指導(dǎo)意義。
[0003]由于動(dòng)物種屬間胎盤形態(tài)學(xué)和功能的差異使得動(dòng)物實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)論缺乏可信度，而進(jìn)行人體實(shí)驗(yàn)又受到醫(yī)學(xué)倫理學(xué)的限制，所以對(duì)人胎盤透過性的研究主要集中在建立人胎盤屏障的體外模型上。人類胎盤體外循環(huán)灌注模型是將剛分娩出的胎盤進(jìn)行小葉分離、灌注，建立母體面和胎兒面的雙向循環(huán)，在體外模擬人體胎盤屏障，為原來無法在妊娠期婦女體內(nèi)完成的胎盤透過性研究提供了一種可行的途徑。
[0004]如文獻(xiàn)“人類胎盤體外循環(huán)灌注模型的建立”(《中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志》，2013年12月第27卷第6期)，公開了一種人類胎盤體外循環(huán)灌注模型。通過在體外模擬子宮環(huán)境，以安替比林為參照物，選用自然分娩或剖宮產(chǎn)剛娩出的健康、完整、足月的人類胎盤，在其胎兒面選擇供應(yīng)同一胎盤小葉的一對(duì)臍動(dòng)靜脈，穿刺插管后建立單個(gè)胎盤小葉的胎兒循環(huán)。該文獻(xiàn)中所報(bào)道的方法將胎盤予以冷凍保存，以致在循環(huán)建立時(shí)，因胎盤子面細(xì)小血管中有大量血栓形成而大大降低模型建立的成功率；同時(shí)，胎盤被冷凍后，其細(xì)胞活性會(huì)受到不同程度的影響，直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。此外，胎盤的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能并非單純的簡(jiǎn)單擴(kuò)散，還需維持內(nèi)皮細(xì)胞的生物活性，但在該文獻(xiàn)所公開的灌注液配比中，并沒有加入維持細(xì)胞活性的物質(zhì)，使得實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性存疑。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法。本發(fā)明的模型建立方法所需設(shè)備簡(jiǎn)單、操作可控性好、穩(wěn)定性佳，最大程度還原了胎盤屏障體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)過程。
[0006]為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案:
一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，其特征在于:在37°C恒溫下，先對(duì)胎盤子面的臍動(dòng)靜脈進(jìn)行插管，并注入37°C的溶有肝素鈉的生理鹽水后，再將此臍動(dòng)靜脈干所輻射區(qū)的胎盤小葉取下；在母體面將導(dǎo)管插入絨毛間隙，將插管完畢的胎盤小葉用無菌漏斗置于恒溫水浴箱中，并固定漏斗，樣品固定后即在母體面及胎兒面分別加注灌流液。
[0007]本發(fā)明的建模方法有以下優(yōu)點(diǎn):(1)可以避免在建立胎盤循環(huán)時(shí)，由于胎盤子面血管內(nèi)形成過多的血栓而導(dǎo)致模型失敗；(2)在灌流過程中母面的灌注壓力來自于兩方面，第一即為蠕動(dòng)泵給予的灌注壓力，第二為循環(huán)池中灌流液體給予的壓力，將胎盤小葉取下，而非保留胎盤小葉于胎盤中，可以大大縮減循環(huán)池中的液體量，有效降低循環(huán)建立所需要的灌流液的量，大大縮減灌流所需成本。
[0008]注入37°C的溶有肝素鈉的生理鹽水的主要作用是抗凝，避免血管內(nèi)血栓形成而導(dǎo)致模型失敗，37 °C是體內(nèi)各項(xiàng)生化反應(yīng)的最適溫度。
[0009]所述取下的胎盤小葉大小為4飛cm，在該小葉最邊緣血管外留f 2cm寬的邊緣，以防止灌流時(shí)液體從側(cè)邊漏出。
[0010]本發(fā)明所述的灌流液為KRB干粉(Krebs-Ringer bicarbonate buffer,克雷布斯-林格氏重碳酸鹽干粉)配液，輔料為葡萄糖、右旋糖酐T40和肝素鈉。
[0011]胎盤屏障的轉(zhuǎn)運(yùn)功能并不僅僅依靠物質(zhì)的簡(jiǎn)單擴(kuò)散，還需保持細(xì)胞的生物活性，本發(fā)明的灌流液中加入維持細(xì)胞活性的右旋糖酐T40，能更真實(shí)的反應(yīng)出體內(nèi)胎盤屏障的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)過程。
[0012]優(yōu)選地，所述的灌流液中，右旋糖酐T40在胎兒面的濃度為30g/L，母體面的濃度為8.4g/L，能最大程度保持細(xì)胞活性。
[0013]優(yōu)選地，灌流液的pH值為7.3^7.5，配制后于37 °C水浴箱預(yù)熱，并在灌流過程中保持此溫度。
[0014]所述的母體面灌流液中充入含95%氧氣和5% 二氧化碳的混合氣體。正常情況下人體內(nèi)動(dòng)脈血的血氧飽和度不低于90%，適宜的氧飽和度可以保證胎盤屏障細(xì)胞的活性，真實(shí)地模擬體內(nèi)環(huán)境。
[0015]所述的胎兒面灌流液中充入含95%氮?dú)夂?% 二氧化碳的混合氣體。在體內(nèi)胎兒面處于封閉的羊膜腔內(nèi)，與外界不相通，除通過胎盤屏障簡(jiǎn)單擴(kuò)散來的氧氣外，沒有其他獲得氧氣的途徑，此處充入惰性氣體氮?dú)庖彩菫榱苏鎸?shí)地模擬體內(nèi)環(huán)境。
[0016]本發(fā)明采用蠕動(dòng)泵調(diào)節(jié)灌流速度為:母體面速度為8?15 ml/min，灌流壓力為70?140 mmHg ;胎兒面速度為3?12 ml/min,灌流壓力為50?120 mmHg。
[0017]母體面中灌流導(dǎo)管插入的是絨毛間隙，胎兒面中灌流導(dǎo)管插入的是同一胎盤小葉中一對(duì)臍動(dòng)靜脈，所以母體面的實(shí)際灌流面積大于胎兒面，這就要求母體面的灌流壓力大于胎兒面，從而保證最終胎盤屏障兩側(cè)的實(shí)際灌流壓強(qiáng)是一致的。
[0018]本發(fā)明的有益效果在于:
1、本發(fā)明的建模方法不需要對(duì)胎盤冷凍保存，避免了在建立胎盤循環(huán)時(shí)低溫對(duì)細(xì)胞活性的影響，以及由于胎盤子面血管內(nèi)形成過多的血栓而導(dǎo)致模型失??；將胎盤小葉取下，而非保留胎盤小葉于胎盤中，可以大大縮減循環(huán)池中的液體量，有效降低循環(huán)建立所需要的灌流液的量，大大縮減灌流所需成本。
[0019]2、本發(fā)明的灌流液中加入維持細(xì)胞活性的右旋糖酐T40，有效地保持了細(xì)胞的生物活性，能更真實(shí)的反應(yīng)出體內(nèi)胎盤屏障的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)過程。
[0020]3、本發(fā)明在母體面灌流液中充入含95%氧氣和5% 二氧化碳的混合氣體，由于正常情況下人體內(nèi)動(dòng)脈血的血氧飽和度不低于90%，適宜的氧飽和度可以保證胎盤屏障細(xì)胞的活性；同時(shí)，在胎兒面灌流液中充入含95%氮?dú)夂?%二氧化碳的混合氣體，由于體內(nèi)胎兒面處于封閉的羊膜腔內(nèi)，與外界不相通，除通過胎盤屏障簡(jiǎn)單擴(kuò)散來的氧氣外，沒有其他獲得氧氣的途徑,此處充如惰性氣體氮?dú)庖彩菫榱苏鎸?shí)地模擬體內(nèi)環(huán)境。
[0021]4、本發(fā)明的建模方法得到的灌流模型實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性更強(qiáng)，漏液率<3ml/h，表明與現(xiàn)有技術(shù)相比，模型子面血管內(nèi)血栓形成較更少，模型在保持子母兩面壓力差上更具優(yōu)勢(shì)；安替比林胎兒面和母體面的濃度比值，即安替比林透過率>0.75，說明本模型的實(shí)際灌流面積更大，較現(xiàn)有技術(shù)的模型更能反映真實(shí)的體內(nèi)物質(zhì)交換過程。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0022]圖1表示的是實(shí)施例10中安替比林透過胎盤屏障的濃度-時(shí)間圖。
[0023]圖中標(biāo)記為:縱坐標(biāo)為安替比林的濃度，橫坐標(biāo)為時(shí)間；F1為樣本I的胎兒面，F(xiàn)2為樣本2的胎兒面，Ml為樣本I的母體面，M2為樣本2的母體面。

【具體實(shí)施方式】
[0024]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容作進(jìn)一步詳細(xì)的描述。
[0025]實(shí)施例1
一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，在37°C恒溫下，先對(duì)胎盤子面的臍動(dòng)靜脈進(jìn)行插管，并注入37°C的溶有肝素鈉的生理鹽水，再將此臍動(dòng)靜脈干所輻射區(qū)的胎盤小葉取下；在母體面將導(dǎo)管插入絨毛間隙，將插管完畢的胎盤小葉用無菌漏斗置于恒溫水浴箱中，并固定漏斗，樣品固定后即在母體面及胎兒面分別加注灌流液。
[0026]實(shí)施例2
一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，在37°C恒溫下，先對(duì)胎盤子面的臍動(dòng)靜脈進(jìn)行插管，并注入37°C的溶有肝素鈉的生理鹽水，再將此臍動(dòng)靜脈干所輻射區(qū)的胎盤小葉取下；在母體面將導(dǎo)管插入絨毛間隙，將插管完畢的胎盤小葉用無菌漏斗置于恒溫水浴箱中，并固定漏斗，樣品固定后即在母體面及胎兒面分別加注灌流液。
[0027]所述取下的胎盤小葉大小為4cm，在該小葉最邊緣血管外留Icm寬的邊緣。
[0028]實(shí)施例3
一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，在37°C恒溫下，先對(duì)胎盤子面的臍動(dòng)靜脈進(jìn)行插管，并注入37°C的溶有肝素鈉的生理鹽水，再將此臍動(dòng)靜脈干所輻射區(qū)的胎盤小葉取下；在母體面將導(dǎo)管插入絨毛間隙，將插管完畢的胎盤小葉用無菌漏斗置于恒溫水浴箱中，并固定漏斗，樣品固定后即在母體面及胎兒面分別加注灌流液。
[0029]所述取下的胎盤小葉大小為6 cm，在該小葉最邊緣血管外留2cm寬的邊緣。
[0030]所述的灌流液為KRB干粉配液，輔料為葡萄糖、右旋糖酐T40和肝素鈉。
[0031]實(shí)施例4
一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，在37°C恒溫下，先對(duì)胎盤子面的臍動(dòng)靜脈進(jìn)行插管，并注入37°C的溶有肝素鈉的生理鹽水，再將此臍動(dòng)靜脈干所輻射區(qū)的胎盤小葉取下；在母體面將導(dǎo)管插入絨毛間隙，將插管完畢的胎盤小葉用無菌漏斗置于恒溫水浴箱中，并固定漏斗，樣品固定后即在母體面及胎兒面分別加注灌流液。
[0032]所述取下的胎盤小葉大小為5cm，在該小葉最邊緣血管外留1.2cm寬的邊緣。
[0033]所述的灌流液為KRB干粉配液，輔料為葡萄糖、右旋糖酐T40和肝素鈉。
[0034]所述的灌流液中，右旋糖酐T40在胎兒面的濃度為30g/L，母體面的濃度為8.4g/L0
[0035]實(shí)施例5
一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，在37°C恒溫下，先對(duì)胎盤子面的臍動(dòng)靜脈進(jìn)行插管，并注入37°C的溶有肝素鈉的生理鹽水，再將此臍動(dòng)靜脈干所輻射區(qū)的胎盤小葉取下；在母體面將導(dǎo)管插入絨毛間隙，將插管完畢的胎盤小葉用無菌漏斗置于恒溫水浴箱中，并固定漏斗，樣品固定后即在母體面及胎兒面分別加注灌流液。
[0036]所述取下的胎盤小葉大小為4.5 cm，在該小葉最邊緣血管外留1.5cm寬的邊緣。
[0037]所述的灌流液為KRB干粉配液，輔料為葡萄糖、右旋糖酐T40和肝素鈉。
[0038]所述的灌流液中，右旋糖酐T40在胎兒面的濃度為30g/L，母體面的濃度為8.4g/L0
[0039]灌流液的pH值為7.3，配制后于37 °C水浴箱預(yù)熱，并在灌流過程中保持此溫度。
[0040]實(shí)施例6
一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，在37°C恒溫下，先對(duì)胎盤子面的臍動(dòng)靜脈進(jìn)行插管，并注入37°C的溶有肝素鈉的生理鹽水，再將此臍動(dòng)靜脈干所輻射區(qū)的胎盤小葉取下；在母體面將導(dǎo)管插入絨毛間隙，將插管完畢的胎盤小葉用無菌漏斗置于恒溫水浴箱中，并固定漏斗，樣品固定后即在母體面及胎兒面分別加注灌流液。
[0041]所述取下的胎盤小葉大小為4cm，在該小葉最邊緣血管外留Icm寬的邊緣。
[0042]所述的灌流液為KRB干粉配液，輔料為葡萄糖、右旋糖酐T40和肝素鈉。
[0043]所述的灌流液中，右旋糖酐T40在胎兒面的濃度為30g/L，母體面的濃度為8.4g/L0
[0044]所述的灌流液中含葡萄糖lg/L，肝素鈉20 IU/mL。
[0045]灌流液的pH值為7.5，配制后于37 °C水浴箱預(yù)熱，并在灌流過程中保持此溫度。
[0046]所述的母體面灌流液中充入含95%氧氣和5% 二氧化碳的混合氣體。
[0047]所述的胎兒面灌流液中充入含95%氮?dú)夂?% 二氧化碳的混合氣體。
[0048]實(shí)施例7
一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，在37°C恒溫下，先對(duì)胎盤子面的臍動(dòng)靜脈進(jìn)行插管，并注入37°C的溶有肝素鈉的生理鹽水，再將此臍動(dòng)靜脈干所輻射區(qū)的胎盤小葉取下；在母體面將導(dǎo)管插入絨毛間隙，將插管完畢的胎盤小葉用無菌漏斗置于恒溫水浴箱中，并固定漏斗，樣品固定后即在母體面及胎兒面分別加注灌流液。
[0049]所述取下的胎盤小葉大小為4.6cm，在該小葉最邊緣血管外留1.2cm寬的邊緣。
[0050]所述的灌流液為KRB干粉配液，輔料為葡萄糖、右旋糖酐T40和肝素鈉。
[0051]所述的灌流液中含葡萄糖2 g/L，肝素鈉20 IU/mL。
[0052]所述的灌流液中，右旋糖酐T40在胎兒面的濃度為30g/L，母體面的濃度為8.4g/L0
[0053]灌流液的pH值為7.4，配制后于37 °C水浴箱預(yù)熱，并在灌流過程中保持此溫度。
[0054]所述的母體面灌流液中充入含95%氧氣和5% 二氧化碳的混合氣體。
[0055]所述的胎兒面灌流液中充入含95%氮?dú)夂?% 二氧化碳的混合氣體。
采用蠕動(dòng)泵調(diào)節(jié)灌流速度為:母體面速度為8 ml/min，灌流壓力為70mmHg ;胎兒面速度為3ml/min,灌流壓力為50mmHg。
[0056]實(shí)施例8 一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，在37°C恒溫下，先對(duì)胎盤子面的臍動(dòng)靜脈進(jìn)行插管，并注入37°C的溶有肝素鈉的生理鹽水，再將此臍動(dòng)靜脈干所輻射區(qū)的胎盤小葉取下；在母體面將導(dǎo)管插入絨毛間隙，將插管完畢的胎盤小葉用無菌漏斗置于恒溫水浴箱中，并固定漏斗，樣品固定后即在母體面及胎兒面分別加注灌流液。
[0057]所述取下的胎盤小葉大小為6 cm，在該小葉最邊緣血管外留2cm寬的邊緣。
[0058]所述的灌流液為KRB干粉配液，輔料為葡萄糖、右旋糖酐T40和肝素鈉。
[0059]所述的灌流液中含葡萄糖1.2 g/L，肝素鈉20 IU/mL。
[0060]所述的灌流液中，右旋糖酐T40在胎兒面的濃度為30g/L，母體面的濃度為8.4g/L0
[0061]灌流液的pH值為7.35，配制后于37 °C水浴箱預(yù)熱，并在灌流過程中保持此溫度。
[0062]所述的母體面灌流液中充入含95%氧氣和5% 二氧化碳的混合氣體。
[0063]所述的胎兒面灌流液中充入含95%氮?dú)夂?% 二氧化碳的混合氣體。
采用蠕動(dòng)泵調(diào)節(jié)灌流速度為:母體面速度為15 ml/min，灌流壓力為140 mmHg ;胎兒面速度為12 ml/min,灌流壓力為120 mmHg。
[0064]實(shí)施例9
一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，在37°C恒溫下，先對(duì)胎盤子面的臍動(dòng)靜脈進(jìn)行插管，并注入37°C的溶有肝素鈉的生理鹽水，再將此臍動(dòng)靜脈干所輻射區(qū)的胎盤小葉取下；在母體面將導(dǎo)管插入絨毛間隙，將插管完畢的胎盤小葉用無菌漏斗置于恒溫水浴箱中，并固定漏斗，樣品固定后即在母體面及胎兒面分別加注灌流液。
[0065]所述取下的胎盤小葉大小為5cm，在該小葉最邊緣血管外留1.6cm寬的邊緣。
[0066]所述的灌流液為KRB干粉配液，輔料為葡萄糖、右旋糖酐T40和肝素鈉。
[0067]所述的灌流液中含葡萄糖1.5 g/L，肝素鈉20 IU/mL。
[0068]所述的灌流液中，右旋糖酐T40在胎兒面的濃度為30g/L，母體面的濃度為8.4g/L0
[0069]灌流液的pH值為7.45，配制后于37 °C水浴箱預(yù)熱，并在灌流過程中保持此溫度。
[0070]所述的母體面灌流液中充入含95%氧氣和5% 二氧化碳的混合氣體。
[0071]所述的胎兒面灌流液中充入含95%氮?dú)夂?% 二氧化碳的混合氣體。
采用蠕動(dòng)泵調(diào)節(jié)灌流速度為:母體面速度為10 ml/min，灌流壓力為120mmHg ;胎兒面速度為6 ml/min,灌流壓力為80 mmHg。
[0072]實(shí)施例10
安替比林透過性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
樣本I和樣本2均選取正常妊娠產(chǎn)婦分娩后廢棄的胎盤。
檢測(cè)指標(biāo)為安替比林胎兒面和母體面的濃度比值(fetal/maternal concentrat1nrat1, F/M)，在母面加入安替比林灌流2.5 h之后，計(jì)算F/M值。
[0073]圖1是安替比林透過胎盤屏障的濃度-時(shí)間圖。結(jié)果顯示在任一時(shí)間點(diǎn)測(cè)定安替比林的透過率，即F/M值均> 0.75。
[0074]對(duì)比文獻(xiàn)“人類胎盤體外循環(huán)灌注模型的建立”(《中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志》，2013年12月第27卷第6期)中的安替比林透過胎盤屏障的濃度_時(shí)間圖，其安替比林透過率最高值僅為0.4。
[0075]由此說明，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本模型具有更高的安替比林透過率，有效的物質(zhì)交換面積更大，對(duì)真實(shí)體內(nèi)情況的反應(yīng)情況更佳。同時(shí)，兩樣本的線基本重合，說明該模型的重復(fù)性很好，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠。
【權(quán)利要求】
1.一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，其特征在于:在37°c恒溫下，先對(duì)胎盤子面的臍動(dòng)靜脈進(jìn)行插管，并注入37°C的溶有肝素鈉的生理鹽水，再將此臍動(dòng)靜脈干所輻射區(qū)的胎盤小葉取下；在母體面將導(dǎo)管插入絨毛間隙，將插管完畢的胎盤小葉用無菌漏斗置于恒溫水浴箱中，并固定漏斗，樣品固定后即在母體面及胎兒面分別加注灌流液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，其特征在于:所述取下的胎盤小葉大小為4飛cm，在該小葉最邊緣血管外留f 2cm寬的邊緣。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，其特征在于:所述的灌流液為KRB干粉配液，輔料為葡萄糖、右旋糖酐T40和肝素鈉。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，其特征在于:所述的灌流液中，右旋糖酐T40在胎兒面的濃度為30g/L，母體面的濃度為8.4g/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，其特征在于:灌流液的PH值為7.3^7.5，配制后于37 °C水浴箱預(yù)熱，并在灌流過程中保持此溫度。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，其特征在于:所述的母體面灌流液中充入含95%氧氣和5% 二氧化碳的混合氣體。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，其特征在于:所述的胎兒面灌流液中充入含95%氮?dú)夂?% 二氧化碳的混合氣體。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人體外胎盤小葉灌流模型的建立方法，其特征在于:采用蠕動(dòng)泵調(diào)節(jié)灌流速度為:母體面速度為8?15 ml/min，灌流壓力為7(Tl40 mmHg ;胎兒面速度為3?12 ml/min,灌流壓力為50?120 mmHg。
【文檔編號(hào)】C12N5/073GK104357378SQ201410618671
【公開日】2015年2月18日 申請(qǐng)日期:2014年11月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月6日
【發(fā)明者】周容, 龔云輝, 王濤, 劉希婧, 羅林麗, 孔維奇 申請(qǐng)人:四川大學(xué)華西第二醫(yī)院