一株桑黃菌株及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一株桑黃菌株及其應(yīng)用。該桑黃菌株栽培相對簡單，管理相對容易，出芝相對高產(chǎn)、可進(jìn)行大面積大棚栽培。該菌株于2014年3月07日在中國普通微生物菌種保藏管理中心保藏，編號為CGMCCNo.8854。本發(fā)明的桑黃菌株采用人工袋栽工藝經(jīng)大量的培養(yǎng)實(shí)踐證明，可實(shí)現(xiàn)真正桑黃的人工培養(yǎng)，并且單個子實(shí)體大小可以根據(jù)開口大小人為控制，桑黃人工袋栽，把野生稀缺資源、再生漫長的資源，人工短期再生。
CGMCC No. 8854
2014.03.07
【專利說明】一株桑黃菌株及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一株桑黃菌株及其應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 桑黃，中藥名，見《中藥大辭典》。分類上屬于真菌界（Fungi)、擔(dān)子菌門 (Basigiomycota)、刺革菌目（Hymenochaxtales)刺革菌目（Hymenochaxtaceae)，是硬質(zhì)的 多孔菌，為中、日、韓等地著名的藥用真菌?，F(xiàn)代研究證實(shí)桑黃能夠提高人體的免疫力，減輕 抗癌劑的副作用，所以可用來輔助腫瘤病人的放療和化療，另外，桑黃對女性月經(jīng)不調(diào)等婦 科疾病也有療效。現(xiàn)有的藥用桑黃多為野生，這是由于真正的桑黃人工栽培方法出菇較難， 人工培育生長情況不好，產(chǎn)率低，而且有效成分并不高。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明提供一種栽培相對簡單，管理相對容易，出芝相對高產(chǎn)、可進(jìn)行大面積大棚 栽培的桑黃菌株。
[0004] 本發(fā)明還提供所述的桑黃菌株在制備保健食品中的應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：
[0006] 一株桑黃菌株桑都1號，該菌株于2014年3月07日在中國普通微生物菌種保藏 管理中心保藏，編號為CGMCC No. 8854。本發(fā)明的桑黃菌種可作為母種栽培生產(chǎn)桑黃子實(shí) 體，得到的產(chǎn)品有效成分含量高，水分含量低，個頭比其他菌種得到的子實(shí)體較大。
[0007] 本發(fā)明的桑黃菌 Inonotus sanghuang Sheng H. Wu, T. Hatt. &Y. C. Dai 來自浙江省 淳安千島湖桑都食用菌專業(yè)合作社，是從千島湖桑樹上寄生的野生桑黃子實(shí)體中經(jīng)組織分 離、傳代復(fù)壯獲得。該菌屬擔(dān)子菌門（Basidiomycota)、刺革菌目（Hymenochaetales)、刺革 菌科（Hymenochaetaceae) 〇
[0008] 生物學(xué)特征為：桑黃菌絲生長最適溫度為28°C，最適pH值為6. 5,母種生長最適培 養(yǎng)基為PDA培養(yǎng)基，菌絲最適生長袋料培養(yǎng)基是桑樹木屑培養(yǎng)基。以該菌體接種于桑樹木 屑培養(yǎng)基中栽培所得子實(shí)體形態(tài)為菌蓋扇形、貝殼形、馬蹄形，上表面無瘤狀凸起和裂紋， 菌蓋呈金黃色或棕黃色。其它生理生化特征為：水分不得過10. 0% ;總灰分不得過6% ;水 溶性浸出物含量不得少于15% ;多糖以無水葡萄糖（C6H12O6)計(jì)，不得少于2. 50%。該菌株 于2014年3月07日在中國普通微生物菌種保藏管理中心保藏，編號為CGMCC No. 8854。地 址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學(xué)院微生物研究所郵編100101。本發(fā)明保藏 提供的生物材料為桑都1號，分類命名為：桑黃Inonotus sanghuang。
[0009] -種所述的桑黃菌株的培養(yǎng)方法，該方法包括如下步驟：
[0010] (1)將權(quán)利要求1所述的桑黃菌株作為桑黃母種接種到原種培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得桑 黃原種；將桑黃原種接種到栽培種培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得桑黃栽培種；原種培養(yǎng)基和栽培種培 養(yǎng)基主要是由桑枝木屑、麥皮、玉米粉和石膏粉混合而成；
[0011] (2)將桑黃栽培種接種到菌棒中進(jìn)行出芝培養(yǎng)；
[0012] 菌棒的制備：菌棒的組成同原種培養(yǎng)基，將桑枝木屑進(jìn)行全面噴水預(yù)濕，濕度控 制在60% -70%，充分預(yù)濕后加入麥皮、玉米粉和石膏粉進(jìn)行拌料，混合均勻后裝塑料袋， 袋體直徑為15_17cm，長度< 35cm，得到用于培養(yǎng)桑黃的菌棒；菌棒經(jīng)滅菌后采用桑黃栽 培種進(jìn)行接種；接種后的菌棒放入培養(yǎng)室內(nèi)避光培養(yǎng)，溫度控制在20-30°C，濕度控制在 40-50%，培養(yǎng)2個月以上；
[0013] (3)出芝管理：
[0014] 當(dāng)桑黃菌棒開始轉(zhuǎn)色變成黃色或者棕黃色時，移入大棚栽培，進(jìn)行散射光培養(yǎng)，大 棚溫度控制在15_32°C，濕度控制在80-90% ;培養(yǎng)10天以上，待菌棒完全轉(zhuǎn)色成黃色或者 棕黃色之后，將菌棒逐個進(jìn)行封口切除工作，然后照原樣直立放回土內(nèi)；繼續(xù)培養(yǎng)待菌棒 封口切口處的菌絲重新長滿菌棒袋口，進(jìn)行菌棒開口工作；首先，將菌棒封口朝下放置，每 個菌棒外壁面開口 3-4個，然后埋入土中，埋入深度3-4厘米；大棚每天通風(fēng)2-3次，每次 30-40分鐘；培養(yǎng)60-90天后得到桑黃子實(shí)體。
[0015] 一種所述的桑黃菌株在制備保健食品中的應(yīng)用。本發(fā)明的桑黃菌種可作為母種栽 培生產(chǎn)桑黃子實(shí)體，得到的產(chǎn)品有效成分含量高，水分含量低，個頭比其他菌種得到的子實(shí) 體較大。在制備保健食品方面，可以制成口服液，食品等等，功效顯著。
[0016] 本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明的桑黃菌株采用人工袋栽工藝經(jīng)大量的培養(yǎng)實(shí)踐證 明，可實(shí)現(xiàn)真正桑黃的人工培養(yǎng)，并且單個子實(shí)體大小可以根據(jù)開口大小人為控制，桑黃人 工袋栽，把野生稀缺資源、再生漫長的資源，人工短期再生。而且人工袋栽子實(shí)體成分含量 跟野生桑黃成分含量相當(dāng)。目前的培養(yǎng)規(guī)模約為35畝、25萬袋，長成桑黃成扇形、馬蹄形， 子實(shí)層（子實(shí)體腹面）具有孔狀結(jié)構(gòu)、表面呈金黃色或棕黃色，老時變?yōu)辄S棕色。菌肉黃色、 棕色或具光澤的木色，在菌蓋表面附近顏色較深。子實(shí)層為有光澤的木色至深棕色，常分為 兩層或多層。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0017] 圖1是多糖含量分析的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線；
[0018] 圖2是12種不同來源桑黃的多糖的含量；
[0019] 圖3是水浸出物分析的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；
[0020] 圖4是各種來源桑黃的氨基酸含量圖；
[0021] 圖5是本發(fā)明的菌棒處理過程的示意圖。

【具體實(shí)施方式】
[0022] 下面通過具體實(shí)施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的具體說明。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā) 明的實(shí)施并不局限于下面的實(shí)施例，對本發(fā)明所做的任何形式上的變通和/或改變都將落 入本發(fā)明保護(hù)范圍。
[0023] 在本發(fā)明中，若非特指，所有的份、百分比均為重量單位，所有的設(shè)備和原料等均 可從市場購得或是本行業(yè)常用的。
[0024] 實(shí)施例1 :
[0025] a、菌種的制作：
[0026] (1)、桑黃菌種按使用目的可以分為生產(chǎn)用菌種和保藏用菌種；按生產(chǎn)繁殖程序可 分為母種（可稱試管種、一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）3個級別。
[0027] (2)、母種是指通過孢子分離、組織分離并經(jīng)過純化、培養(yǎng)獲得的桑黃菌絲純培養(yǎng)。 容器為試管，故又稱為試管種或一級種。它既適于用試管斜面移植，再次擴(kuò)大繁殖，供生產(chǎn) 上使用，又適于純種保藏。
[0028] 采用本發(fā)明的桑黃菌株桑都1號作為母種進(jìn)行培養(yǎng)，母種培養(yǎng)基配方（PDA培養(yǎng) 基）：馬鈴薯200克，蔗糖20克，瓊脂20克，水1000毫升。
[0029] (3)、原種是由母種擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌種，本發(fā)明的桑黃原種為固體原種。容器多 為無色的750毫升小口徑的菌種瓶或者聚乙烯塑料袋。此菌種必須要嚴(yán)格檢查，無雜菌污 染的純菌種方可用于生產(chǎn)。
[0030] 菌種培養(yǎng)基各原料組分的重量百分比為：麥皮10%，玉米粉10% (粒度 0. 1-0. 5mm)，石膏粉1 %，余量為桑枝木屑（粒度0. 5-1. Ocm)。
[0031] (4)、栽培種是由原種擴(kuò)大繁殖而成的菌種。培養(yǎng)基和容器與原種相同。
[0032] b、菌棒的制備：
[0033] 菌棒的組成同原種培養(yǎng)基，將桑枝木屑進(jìn)行全面噴水預(yù)濕，濕度控制在 60%-70%;次日加入麥皮10%，玉米粉10% (粒度0.1-0. 5mm)，石膏粉1%，進(jìn)行拌料。培 養(yǎng)基混合均勻后裝聚乙烯袋（袋體直徑為15-17cm，長度< 35cm)，得到用于培養(yǎng)桑黃的菌 棒。
[0034] c、菌棒滅菌：
[0035] 菌棒進(jìn)行高壓或常壓滅菌，高壓滅菌時壓力為3-5個大氣壓，溫度120°C，滅菌時 間為6-8小時；常壓滅菌時壓力為1個大氣壓，溫度KKTC，滅菌時間為24-36小時；滅菌后 冷卻18小時以上至室溫。
[0036] d、接種：
[0037] (1)、在接種開始前，要對接種箱進(jìn)行清洗，然后把氣霧消毒劑按照每立方米8克 的點(diǎn)燃消毒。
[0038] (2)、將滅菌冷卻后的菌棒、桑黃栽培種放置在已消毒過的接種箱內(nèi)，接種箱內(nèi)用 菌用氣霧消毒劑8g進(jìn)行消毒，半小時左右，氣霧消失后進(jìn)行接種。
[0039] (3)、接種人員準(zhǔn)備接種前，雙手用清潔的水洗凈，伸入接種箱內(nèi)，用70% -75%的 酒精棉擦洗雙手，然后把醫(yī)用不銹鋼鑷子進(jìn)行酒精消毒滅菌。完畢后打開栽培種、菌棒袋 口，用鑷子取栽培種直徑3-4cm，厚度0. 5-lcm放入菌棒袋口，用手捏緊菌棒袋口，將栽培種 往菌棒袋中按結(jié)實(shí)，然后套上套環(huán)及套環(huán)蓋封口，逐個接種。
[0040] (4)、接種后的菌棒放入培養(yǎng)室內(nèi)避光培養(yǎng)，溫度控制在20-30°C，濕度控制在 40-50%，培養(yǎng) 60-90 天。
[0041] e、出芝管理：
[0042] (1)、當(dāng)接種了桑黃的菌棒開始轉(zhuǎn)色變成黃色或者棕黃色時，移入大棚栽培，進(jìn)行 散射光培養(yǎng)。在移入前對大棚內(nèi)放置菌棒處進(jìn)行松土，松土深度IOcm以上，松土后用石灰 水進(jìn)行消毒。在擺放時，應(yīng)把菌棒直立擺放，菌棒的封口朝上放置，間距在IOcmX 10cm。大 棚溫度控制在15-32 °C，濕度控制在80-90%。
[0043] (2)、培養(yǎng)10天左右，待菌棒完全轉(zhuǎn)色成黃色或者棕黃色之后，將菌棒逐個進(jìn)行封 口切除工作，然后原樣直立放回土上。即切除封口之后切除封口的部位朝上，見圖5。
[0044] (3)、繼續(xù)培養(yǎng)4天后，待菌棒切口處的菌絲重新長滿菌棒袋口，進(jìn)行菌棒開口工 作。首先，將菌棒切口朝下，每個菌棒開口 4個，將菌棒的柱面分成四邊，在相對的兩邊各開 1個口，開口距地面6厘米，見圖5。另外相對兩邊在距地面12厘米處開口，使4個開口呈 品字型交錯。開口要求：對菌棒外塑料袋向上開弧形口，使子實(shí)體長成后成形美觀。然后， 將菌棒直立，菌棒切口處埋入土中，埋入深度3-4厘米。
[0045] (4)、大棚必須每天通風(fēng)2-3次，每次30-40分鐘。培養(yǎng)60天以上得到桑黃子實(shí)體。
[0046] 根據(jù)本發(fā)明方法得到的桑黃子實(shí)體出現(xiàn)在桑黃培養(yǎng)口處，收貨時橫切面呈弧形 口，成型美觀。單個子實(shí)體的重量較大。長6-12厘米，厚3-6厘米，單個子實(shí)體重15克-50 克。
[0047] 桑黃子實(shí)體的栽培結(jié)果：鮮品子實(shí)體顏色金黃色，干品子實(shí)體顏色棕黃色，子實(shí)體 無柄，形狀呈扇形，少許呈馬蹄形，每袋可產(chǎn)桑黃子實(shí)體干品15_30g。
[0048] 采收時，隨機(jī)取3個子實(shí)體進(jìn)行測量：
[0049] 子實(shí)體鮮品長為12cm，寬6cm，厚3cm，重量為30g。
[0050] 子實(shí)體鮮品長為9cm，寬5cm，厚2. 6cm，重量為24g。
[0051] 子實(shí)體鮮品長為6cm，寬3. 5cm，厚2cm，重量為15g。
[0052] 實(shí)施例2 :
[0053] 具體方法同實(shí)施例2,不同之處在于，采用的原種培養(yǎng)基和栽培種培養(yǎng)基的各原料 組分的重量百分比為：麥皮12%，玉米粉12%，石骨粉1%，余量為桑枝木屑。
[0054] 本發(fā)明的人工袋栽工藝經(jīng)大量的培養(yǎng)實(shí)踐證明，可實(shí)現(xiàn)真正桑黃的人工培養(yǎng)，并 且單個子實(shí)體大小可以根據(jù)開口大小人為控制，桑黃人工袋栽，把野生稀缺資源、再生漫長 的資源，人工短期再生。而且人工袋栽子實(shí)體成分含量跟野生桑黃成分含量相當(dāng)。目前的 培養(yǎng)規(guī)模約為35畝、25萬袋，長成桑黃成扇形、馬蹄形，子實(shí)層（子實(shí)體腹面）具有孔狀結(jié) 構(gòu)、表面呈金黃色或棕黃色，老時變?yōu)辄S棕色。菌肉黃色、棕色或具光澤的木色，在菌蓋表面 附近顏色較深。子實(shí)層為有光澤的木色至深棕色，常分為兩層或多層。
[0055] 不同來源的桑黃有效成分分析
[0056] 以下實(shí)驗(yàn)采用的是本發(fā)明栽培得到的桑黃子實(shí)體（簡稱為桑都1號），其他品種的 桑黃均購自市場，其中，金寨桑黃購自安徽省金寨縣紹新食藥用菌研究所，桑都2-4號為本 發(fā)明人從千島湖桑樹上采集。
[0057] -、水分分析
[0058] 樣品預(yù)處理測定用的供試品，一般先破碎過80目篩。
[0059] 水分測定法取供試品2?5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過 5mm ;疏松供試品不超過IOmm ;精密稱定，打開瓶蓋在100?105°C干燥5小時，將瓶蓋蓋好， 移置干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定，再在上述溫度干燥1小時，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次 稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量，計(jì)算供試品中含水量（％)。結(jié)果如表1所 /Jn 〇
[0060] 表1五種不同來源桑黃中水分含量表
[0061]
[0062]

【權(quán)利要求】
1. 一株桑黃菌株桑都1號，該菌株于2014年3月07日在中國普通微生物菌種保藏管 理中心保藏，編號為CGMCC No. 8854。
2. -種權(quán)利要求1所述的桑黃菌株的培養(yǎng)方法，該方法包括如下步驟： (1) 將權(quán)利要求1所述的桑黃菌株作為桑黃母種接種到原種培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得桑黃原 種；將桑黃原種接種到栽培種培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得桑黃栽培種；原種培養(yǎng)基和栽培種培養(yǎng)基 主要是由桑枝木屑、麥皮、玉米粉和石膏粉混合而成； (2) 將桑黃栽培種接種到菌棒中進(jìn)行出芝培養(yǎng)； 菌棒的制備：菌棒的組成同原種培養(yǎng)基，將桑枝木屑進(jìn)行全面噴水預(yù)濕，濕度控制在 60%-70%，充分預(yù)濕后加入麥皮、玉米粉和石膏粉進(jìn)行拌料，混合均勻后裝塑料袋，袋體直徑 為15-17cm，長度< 35cm，得到用于培養(yǎng)桑黃的菌棒；菌棒經(jīng)滅菌后采用桑黃栽培種進(jìn)行接 種；接種后的菌棒放入培養(yǎng)室內(nèi)避光培養(yǎng)，溫度控制在20_30°C，濕度控制在40-50%，培養(yǎng)2 個月以上； (3) 出芝管理： 當(dāng)桑黃菌棒開始轉(zhuǎn)色變成黃色或者棕黃色時，移入大棚栽培，進(jìn)行散射光培養(yǎng)，大棚溫 度控制在15-32°C，濕度控制在80-90% ;培養(yǎng)10天以上，待菌棒完全轉(zhuǎn)色成黃色或者棕黃色 之后，將菌棒逐個進(jìn)行封口切除工作，然后照原樣直立放回土內(nèi)； 繼續(xù)培養(yǎng)待菌棒封口切口處的菌絲重新長滿菌棒袋口，進(jìn)行菌棒開口工作；首先，將菌 棒封口朝下放置，每個菌棒外壁面開口 3-4個，然后埋入土中，埋入深度3-4厘米；大棚每天 通風(fēng)2-3次，每次30-40分鐘；培養(yǎng)60-90天后得到桑黃子實(shí)體。
3. -種權(quán)利要求1所述的桑黃菌株在制備保健食品中的應(yīng)用。
【文檔編號】A23L1/29GK104285669SQ201410477690
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年9月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月18日
【發(fā)明者】王建功, 蔡為明, 金群力, 魯浙安, 余建妹, 潘飛云, 王建立, 方錦棋, 童云山, 宋德富 申請人:淳安千島湖桑都食用菌專業(yè)合作社