一種檢測scn11a基因2423位堿基突變的試劑盒的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種變異的SCN11A基因，即人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛致病基因SCN11A，其特征在于該變異的SCN11A基因的第673位堿基由野生型的C變異為T；或該變異的SCN11A基因的第2423位堿基由野生型的C變異為G。本發(fā)明還提供了一種檢測來源于人體生物樣本中是否存在所述基因的突變方法及檢測試劑盒。本發(fā)明提供的變異的人類SCN11A基因可用于制備人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛基因診斷芯片，變異的人類SCN11A基因所編碼的蛋白質(zhì)可作為治療人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛的藥物靶點。
【專利說明】-種檢測SCN11A基因2423位堿基突變的試劑盒
[0001] 本申請是201310070553X號專利申請的分案申請。原申請?zhí)枮?01310070553X ; 原申請日為2013年3月6日；原發(fā)明名稱為人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛致病基因及其編碼蛋 白。

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002] 本發(fā)明涉及一種人體變異的基因，即人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛致病基因 SCN11A。 本發(fā)明還涉及這種變異基因及其編碼的蛋白在檢測和作為治療人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛 疾病的藥物靶點中的作用和意義。

【背景技術(shù)】
[0003] 疼痛是在人體受到各種傷害性刺激時所產(chǎn)生的感覺，是存在于人體內(nèi)部的警戒與 保護系統(tǒng)，它能引起機體產(chǎn)生被動性防御反應(yīng)以躲避傷害刺激，對機體具有保護作用。但 是過度的傷害性刺激不但會引起強烈的疼痛感覺而且還會導(dǎo)致機體生理功能的紊亂，甚 至休克。人類疼痛分為急性疼痛和慢性疼痛，急性痛是人體免受傷害，是組織損傷的生理性 預(yù)警信號。然而慢性疼痛是一種病理狀態(tài)，依據(jù)疼痛病理機制，慢性疼痛可分為傷害性或炎 癥性疼痛（對疼痛刺激的適當反應(yīng)）和神經(jīng)性疼痛（由神經(jīng)系統(tǒng)損害誘發(fā)的不適當反應(yīng)）。 1994國際疼痛研究會將神經(jīng)性疼痛（neurogenic pain)定義為"周圍或中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā) 性或繼發(fā)性損害或功能障礙或短暫紊亂引起的疼痛"。神經(jīng)性疼痛一直是困擾醫(yī)學界的難 題，發(fā)病機理不是十分清楚。周圍神經(jīng)性痛常涉及小直徑神經(jīng)纖維的信號傳遞，目前發(fā)現(xiàn)三 種鈉離子通道蛋白NavL 7、NavL 8和NavL 9在周圍神經(jīng)中大量表達，2004年中國醫(yī)學科 學院北京協(xié)和醫(yī)學院沈巖院士等研究人員從遺傳上將NavL 7鈉離子通道蛋白獲得性功能 突變與人類疼痛關(guān)聯(lián)起來，隨后世界其他研究小組發(fā)現(xiàn)30%的小直徑神經(jīng)纖維痛的患者是 由該蛋白獲得性功能突變所造成的。2012年10月31號美國耶魯大學醫(yī)學院Waxman所領(lǐng) 導(dǎo)的研究團隊，在104例先天性神經(jīng)痛患者中發(fā)現(xiàn)7個NavL 8鈉離子通道蛋白的獲得性功 能突變，占6. 7%。然而還有許多疼痛患者的致病原因不清楚。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的任務(wù)是提供一種變異的SCNllA基因及其編碼的蛋白質(zhì)。
[0005] 本發(fā)明的另一個任務(wù)是提供檢測人類SCNllA基因突變的方法及試劑盒。
[0006] 本發(fā)明的又一個任務(wù)是提供這種變異的SCNllA基因在制備人類周圍神經(jīng)發(fā)作性 疼痛基因診斷芯片中的應(yīng)用。
[0007] 實現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案是：
[0008] 本發(fā)明提供的變異的SCNllA基因是：
[0009] (1)該變異的SCNllA基因的第673位堿基由野生型的C變異為T，其核苷酸序列 為 SEQ ID NO :3 所示；
[0010] (2)該變異的SCNllA基因的第2423位堿基由野生型的C變異為G，其核苷酸序列 為 SEQ ID NO :5 所示。
[0011] 其所編碼的蛋白質(zhì)的氨基酸序列分別為SEQ ID N0:4和6所示（p.R225C、 P.A808G)。該蛋白質(zhì)可作為治療人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛的藥物靶點。本發(fā)明提供的變異 的人類SCNllA基因可用于制備人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛基因診斷芯片。
[0012] 本發(fā)明提供的檢測人類SCNllA基因突變的試劑盒，含有以下21對引物中的一對 或幾對或全部：

【權(quán)利要求】
1. 一種體外檢測SCNllA基因第2423位堿基突變的試劑盒，含有以下引物物： F:5' ATCCCATTCTGCTTTACCCT3' R:5, CCGCCGTGAGCAAAGGAAC3,。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，還含有Taq酶、PCR反應(yīng)緩沖液、dNTP、 限制性內(nèi)切酶Bcn I和/或Hind III。
【文檔編號】C12Q1/68GK104313126SQ201410354483
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2013年3月6日 優(yōu)先權(quán)日:2013年3月6日
【發(fā)明者】劉靜宇, 張學, 姚鏡 申請人:華中科技大學