利用螺旋藻泥制備高活性小肽的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開的是利用螺旋藻泥制備高活性小肽的方法。傳統(tǒng)的螺旋藻加工方法取得的螺旋藻得到的蛋白是粗蛋白。本發(fā)明按照料水重量比是1：6-10的比例于螺旋藻泥中加入水，使螺旋藻泥均勻分散于水中，得到螺旋藻泥混懸液；NaOH溶液調(diào)節(jié)螺旋藻泥混懸液的pH值是7.5-8.5，加入活性是10-150萬u/g生物酶，使得酶底比達到600-700u/g，調(diào)整螺旋藻泥混懸液的酶解溫度是45-70℃，酶解3-10小時，得到螺旋藻酶解液，煮沸滅酶活10min，迅速冷卻，6000r/min離心10min，得到螺旋藻小肽酶解液，噴霧干燥后得到螺旋藻小分子活性肽。本發(fā)明所制備的螺旋藻活性小肽更容易被機體吸收，酶解產(chǎn)物與血漿蛋白相比有一定的優(yōu)勢，具有成為高檔蛋白飼料原料替代血漿蛋白的潛力。
【專利說明】利用螺旋藻泥制備高活性小肽的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及的是利用螺旋藻泥制備高活性小肽的方法，屬生物【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]螺旋藻又稱藍細菌，是一種絲狀多細胞螺旋體的原核藻類生物，屬于藍藻門顫藻科。螺旋藻具有很高的營養(yǎng)價值，其蛋白質(zhì)含量高達60%~70%，是目前已知食物中最高的，而且含有豐富的氨基酸、維生素、脂肪、類胡蘿卜素、多糖以及礦物質(zhì)，是人類理想的食物及藥物資源。大量的研究表明，螺旋藻具有抗病毒、抑癌癥、抗氧化、抗輻射、降血脂、增強免疫力等功能。因此，螺旋藻具有廣闊的開發(fā)前景。生物活性肽是由氨基酸組成的具有生物活性的肽類化合物，一般是以植物或動物蛋白為原料，利用化學(xué)方法將蛋白質(zhì)水解而制成。小分子的活性肽不僅能夠提供機體生長發(fā)育所需的營養(yǎng)物質(zhì)，而且具有增強免疫力、降血栓、抑制細菌、降血壓、抗氧化等功能。與游離氨基酸和蛋白質(zhì)相比，小分子的活性肽能夠更好、更快地被機體吸收。因此，越來越多的研究者開始關(guān)注生物活性肽，小肽的制備、分離、純化、提取及其所具有的生物活性已經(jīng)成為研究的熱點，并且取得不少的成果。
[0003]高蛋白含量的生物活性小肽作為一種新型的飼料添加劑日益受到人們的關(guān)注。螺旋藻含有豐富的蛋白質(zhì)，是極佳的蛋白質(zhì)來源，目前以螺旋藻泥為蛋白原料生產(chǎn)高活性小肽的研究鮮有報道，傳統(tǒng)的螺旋藻加工方法就是采集螺旋藻泥后，通過干燥把水份去掉，這樣取得的螺旋藻得到的蛋白是粗蛋白，與小分子活性肽有著很大的區(qū)別，這些區(qū)別表現(xiàn)在小分子活性肽比蛋白質(zhì)有更好的吸收率、更好的生物利用度及生理活性。因此，利用螺旋藻泥制備小分子活性肽是非常有意義的，本發(fā)明提供了以螺旋藻泥為主要原料進行酶解制備高活性小肽的生產(chǎn)方法，用本發(fā)明方法能制備出高質(zhì)量的小分子活性肽。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種利用螺旋藻泥制備高活性小肽的方法，用生物酶將螺旋藻泥進行酶解，得到酶解產(chǎn)物小分子活性肽，克服傳統(tǒng)螺旋藻泥加工方式所存在的不足，使得螺旋藻的加工產(chǎn)物具有更高的吸收率理好的生物利用度。
[0005]上述發(fā)明目的通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)，利用螺旋藻泥制備高活性小肽的方法，包括下述具體步驟:
(1)稱取一定量的螺旋藻泥，按照料水重量比是1:6-10的比例于螺旋藻泥中加入水，使螺旋藻泥均勻分散于水中，得到螺旋藻泥混懸液備用；
(2)用lmol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)螺旋藻泥混懸液的酸堿度，使pH值是7.5-8.5，加入活性是10-150萬u/g生物酶，所加的酶用量使得酶底比達到600-700u/g，調(diào)整螺旋藻泥混懸液的酶解溫度是45-70°C，酶解3-10小時，得到螺旋藻酶解液備用；
(3)螺旋藻酶解液煮沸滅酶活10min,迅速冷卻，6000r/min離心10min,得到螺旋藻小肽酶解液，噴霧干燥后得到螺旋藻小分子活性肽；
上述方法的步驟(2)的優(yōu)選方法是:用lmol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)螺旋藻泥混懸液的酸堿度，使pH值是8.5，加入活性是10-150萬u/g生物酶，所加的酶用量使得酶底比達到700u/g，調(diào)整螺旋藻泥混懸液的酶解溫度是55°C，酶解3小時，得到螺旋藻酶解液備用；
所述生物酶指的是:堿性蛋白酶、植物蛋白水解復(fù)合酶或菠蘿蛋白酶。
[0006]采取上述措施的本發(fā)明，對制備條件進行了深入的研究，基于所選制備條件的本發(fā)明制備的螺旋藻活性肽的水解度(DH)為11.82%，三氯乙酸-可溶性氮指數(shù)(TCA-SNI)為55.13%。利用高效凝膠過濾色譜法對酶解產(chǎn)物進行分子量的測定，結(jié)果顯示:分子量小于1000 Da的寡肽占66.6%,小肽分子量分布主要集中在260 Da附近,約2個氨基酸殘基，含量為39.57%。將噴霧干燥后的酶解產(chǎn)物與血漿蛋白進行對比，酶解產(chǎn)物(上清)的粗蛋白含量為64.89%，小肽含量為35.67% ;血漿蛋白的粗蛋白含量為75.84%，小肽含量為1.15% ；酶解產(chǎn)物總磷含量為1.64%，是血漿蛋白的11倍；鈣含量為0.20%，鐵含量為125.6 mg/kg,與血漿蛋白相當；賴氨酸含量為2.45%，組氨酸含量為3.20%,蛋氨酸含量為4.98%。酶解產(chǎn)物具有抗氧化性，其DPPH自由基清除率為61.30%,而且本發(fā)明所制備的螺旋藻活性小肽更容易被機體吸收，所以酶解產(chǎn)物與血漿蛋白相比有一定的優(yōu)勢，具有成為高檔蛋白飼料原料替代血漿蛋白的潛力。
【具體實施方式】
[0007]實施例1
(1)稱取100公斤的螺旋藻泥，加入600公斤的水，使螺旋藻泥均勻分散于水中，得到螺旋藻泥混懸液備用；
(2)用lmol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)螺旋藻泥混懸液的酸堿度，使pH值是7.5，加入活性是10萬u/g堿性蛋白酶，所加的酶用量使得酶底比達到600u/g，調(diào)整螺旋藻泥混懸液的酶解溫度是45°C，酶解3小時，得到螺旋藻酶解液備用；
(3)螺旋藻酶解液煮沸滅酶活10min,迅速冷卻，6000r/min離心10min,得到螺旋藻小肽酶解液，噴霧干燥后得到螺旋藻小分子活性肽。
[0008]實施例2
(1)稱取100公斤的螺旋藻泥，加入100公斤的水，使螺旋藻泥均勻分散于水中，得到螺旋藻泥混懸液備用；
(2)用lmol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)螺旋藻泥混懸液的酸堿度，使pH值是8.5，加入活性是150萬u/g植物蛋白水解復(fù)合酶，所加的酶用量使得酶底比達到700u/g，調(diào)整螺旋藻泥混懸液的酶解溫度是70°C，酶解10小時，得到螺旋藻酶解液備用；
(3)螺旋藻酶解液煮沸滅酶活10min,迅速冷卻，6000r/min離心10min,得到螺旋藻小肽酶解液，噴霧干燥后得到螺旋藻小分子活性肽。
[0009]實施例3
(1)稱取100公斤的螺旋藻泥，加入100公斤的水，使螺旋藻泥均勻分散于水中，得到螺旋藻泥混懸液備用；
(2)用lmol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)螺旋藻泥混懸液的酸堿度，使pH值是8.5，加入活性是100萬u/g菠蘿蛋白酶，所加的酶用量使得酶底比達到700u/g，調(diào)整螺旋藻泥混懸液的酶解溫度是55°C，酶解3小時，得到螺旋藻酶解液備用；
(3)螺旋藻酶解液煮沸滅酶活10min,迅速冷卻，6000r/min離心10min,得到螺旋藻小肽酶解液， 噴霧干燥后得到螺旋藻小分子活性肽。
【權(quán)利要求】
1.利用螺旋藻泥制備高活性小肽的方法，其特征在于所述方法包括下述具體步驟: (1)稱取一定量的螺旋藻泥，按照料水重量比是1:6-10的比例于螺旋藻泥中加入水，使螺旋藻泥均勻分散于水中，得到螺旋藻泥混懸液備用； (2)用lmol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)螺旋藻泥混懸液的酸堿度，使pH值是7.5-8.5，加入活性是10-150萬u/g生物酶，所加的酶用量使得酶底比達到600-700u/g，調(diào)整螺旋藻泥混懸液的酶解溫度是45-70°C，酶解3-10小時，得到螺旋藻酶解液備用； (3)螺旋藻酶解液煮沸滅酶活10min,迅速冷卻，6000r/min離心10min,得到螺旋藻小肽酶解液，噴霧干燥后得到螺旋藻小分子活性肽； 所述生物酶指的是:堿性蛋白酶、植物蛋白水解復(fù)合酶或菠蘿蛋白酶。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用螺旋藻泥制備高活性小肽的方法，其特征在于所述方法步驟是: 用lmol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)螺旋藻泥混懸液的酸堿度，使pH值是8.5，加入活性是10-150萬u/g生物酶，所加的酶用量 使得酶底比達到700u/g，調(diào)整螺旋藻泥混懸液的酶解溫度是55°C，酶解3小時，得到螺旋藻酶解液備用。
【文檔編號】C12P21/06GK103981245SQ201410231192
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年5月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月29日
【發(fā)明者】薛命雄, 趙述淼, 余頡 申請人:薛命雄, 趙述淼