紫玉蘭素a在穩(wěn)定四鏈體dna中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了紫玉蘭素A在穩(wěn)定四鏈體DNA中的應(yīng)用。該應(yīng)用是式Ⅰ的紫玉蘭素A在穩(wěn)定四鏈體DNA中的應(yīng)用。式Ⅰ的紫玉蘭素A可以穩(wěn)定G-四鏈體，式Ⅰ的紫玉蘭素A使G-四鏈體的解鏈溫度提高了3℃以上；式Ⅰ的紫玉蘭素A對(duì)G-四鏈體有高選擇性和特異性。式Ⅰ的紫玉蘭素A與人端粒HTG21序列形成的G-四鏈體相互作用的結(jié)合常數(shù)K=1.49×106，結(jié)合比n=2.51。
【專利說(shuō)明】紫玉蘭素A在穩(wěn)定四鏈體DNA中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及紫玉蘭素A的新用途，特別涉及式I的紫玉蘭素A在穩(wěn)定四鏈體DNA中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]G-四鏈體是一類特殊的核酸二級(jí)結(jié)構(gòu)，在人類基因組中的一些鳥(niǎo)嘌呤(G)富集區(qū)具有形成這一特殊結(jié)構(gòu)的傾向。G-四鏈體主要存在于端粒末端G重復(fù)序列，以及許多重要的啟動(dòng)子區(qū)域，包括c-myc、c-myb、bcl-2、c_kit、VEGF、胰島素基因、β -血紅素基因等。最新研究證明，G-四鏈體在體內(nèi)是存在的，某些基因的啟動(dòng)子序列區(qū)域在形成G-四鏈體結(jié)構(gòu)之后，相應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)水平受到了很大影響，因此G-四鏈體的形成或拆散可能涉及到體內(nèi)的一些重要生理事件和過(guò)程，比如細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以及腫瘤細(xì)胞的形成和發(fā)展等。此外，G-四鏈體拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的多樣性，以及與普通雙鏈結(jié)構(gòu)上的顯著差異，使其成為靶向藥物設(shè)計(jì)的理想靶點(diǎn)。例如，通過(guò)藥物干預(yù)方法誘導(dǎo)癌基因形成穩(wěn)定的G —四鏈體結(jié)構(gòu)，有可能干擾癌細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，或抑制癌基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)等，從而抑制癌細(xì)胞的增殖或促進(jìn)其凋亡。近年來(lái)，針對(duì)G-四鏈體的特殊的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)，開(kāi)發(fā)與其選擇性相互作用的小分子配體作為抗腫瘤藥物研究備受關(guān)注。
[0003]端粒是真核細(xì)胞染色體末端的特殊結(jié)構(gòu)，人類端粒由5’ -TTAGGG-3’重復(fù)單元組成。端粒酶是由RNA和蛋白質(zhì)組成的一種核糖核蛋白復(fù)合體，具有逆轉(zhuǎn)錄酶的活性，能以自身RNA為模板合成端粒DNA重復(fù)序列，穩(wěn)定端粒的長(zhǎng)度。端粒3’單鏈垂懸結(jié)構(gòu)的完整性與端粒的降解、端端融合、重排和丟失而引起基因不穩(wěn)定和細(xì)胞提前衰老有著密切的聯(lián)系，而端粒末端G-四鏈體DNA的形成提供了保護(hù)3’末端垂懸可能的分子機(jī)制。這種保護(hù)機(jī)制體現(xiàn)在三方面，首先，3’末端單鏈的富G序列折疊成分子內(nèi)G-四鏈體使染色體末端更穩(wěn)定。其次，G-四鏈體DNA的形成與由端粒酶引起的端粒延長(zhǎng)有一定的關(guān)系。另外，端粒酶對(duì)端粒DNA引物的識(shí)別是其鏈狀結(jié)構(gòu)而非二級(jí)結(jié)構(gòu)，因此G-四鏈體DNA的形成阻止了端粒酶對(duì)端粒DNA引物的識(shí)別，從而抑制了端粒酶活性。因此，以端粒DNA所形成的G-四鏈體為靶點(diǎn)開(kāi)發(fā)端粒酶抑制劑抗癌藥物是一個(gè)具有發(fā)展前景的方向。
[0004]目前報(bào)道的與G-四鏈體相互作用的小分子主要有蒽醌類化合物、吖啶類化合物、異洛嗪類化合物、吲哚喹啉類化合物、二萘嵌苯類化合物、葉啉類化合物和柔性分子等。這些小分子有著共同的特征即:都具有陽(yáng)離子取代的缺電子平面芳環(huán)結(jié)構(gòu)。含有氮元素的平面芳環(huán)結(jié)構(gòu)使這類配體具有更強(qiáng)的溶解性和親和力，同時(shí)也導(dǎo)致其與G-四鏈體相互作用的選擇性較弱。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供式I的紫玉蘭素A在穩(wěn)定四鏈體DNA中的應(yīng)用。
[0006]本發(fā)明所提供的應(yīng)用是下述6種:[0007]1、式I的紫玉蘭素A在制備穩(wěn)定四鏈體DNA產(chǎn)品(如試劑)中的應(yīng)用，
[0008]
【權(quán)利要求】
1.式I的紫玉蘭素A在制備穩(wěn)定四鏈體DNA產(chǎn)品中的應(yīng)用，
2.權(quán)利要求1所述的式I的紫玉蘭素A在制備穩(wěn)定脊椎動(dòng)物端粒DNA產(chǎn)品中的應(yīng)用。
3.權(quán)利要求1所述的式I的紫玉蘭素A在穩(wěn)定四鏈體DNA中的應(yīng)用。
4.權(quán)利要求1所述的式I的紫玉蘭素A在穩(wěn)定脊椎動(dòng)物端粒DNA中的應(yīng)用。
5.權(quán)利要求1所述的式I的紫玉蘭素A在制備特異結(jié)合四鏈體DNA產(chǎn)品中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求1所述的式I的紫玉蘭素A在特異結(jié)合四鏈體DNA中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C12N15/10GK103898093SQ201410092232
【公開(kāi)日】2014年7月2日 申請(qǐng)日期:2014年3月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月13日
【發(fā)明者】王文蜀, 周爽, 武海波, 閆曉倩, 馮金朝, 張文浩, 高超宇 申請(qǐng)人:中央民族大學(xué)