一種基于納米氧化鋅促進(jìn)微生物生長的培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種基于納米氧化鋅促進(jìn)印度梨形孢生長的培養(yǎng)基，所述的培養(yǎng)基中每升含有：2.00g蛋白胨、1.00g酵母提取物、1.00g水解酪蛋白、0.60gNaNO3、0.52gKCl、0.52gMgSO4·7H2O、1.52gKH2PO4、5.00-10.00mgZnO、10mgH3BO3、5mgMnSO4·H2O、1.6mgCoCl·5H2O、1.6mgCuSO4·5H2O、1.1mg(NH4)6MO7O24、1.3mgFeSO4、1.8mgEDTA、0.10mg硫胺素、0.04mg甘氨酸、0.01mg煙酸、0.01mg吡哆醇。本發(fā)明的培養(yǎng)基印度梨形孢生長速率明顯快于原來的培養(yǎng)基，培養(yǎng)出的菌體鮮重比對照分別增加了36.5%和55.8%，干重比對照分別增加了19%和26.2%，菌落比原來的長得更致密，光滑。本發(fā)明提供的方法簡單易行，取材方便，成本低廉，經(jīng)濟(jì)效益好。
【專利說明】一種基于納米氧化鋅促進(jìn)微生物生長的培養(yǎng)基
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及微生物培養(yǎng)【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種基于納米氧化鋅促進(jìn)印度梨形孢生長的培養(yǎng)基。
【背景技術(shù)】
[0002]微生物生長繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)主要有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽和生長因子等，微生物需要的無機(jī)鹽類很多，主要有P、S、K、Na、Ca、Mg、Fe等，其主要功能為構(gòu)成菌體成分，調(diào)節(jié)滲透壓，作為某些酶的成分，并能激活酶的活性等。用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、輕工業(yè)和醫(yī)學(xué)研究與生產(chǎn)的每種微生物都需要在合適的培養(yǎng)基上生產(chǎn)。因此，發(fā)明和探究有利于微生物快速生長的培養(yǎng)基是微生物研究領(lǐng)域的一個重要任務(wù)。
[0003]印度梨形孢(Piriformosporaindia)是一種從印度沙漠植物中分離出來的具有多種生物功能的內(nèi)生真菌，不僅印度梨形孢的菌絲體與孢子對植物的生長具有促進(jìn)作用，其代謝物對植物也具有促進(jìn)作用。目前，有印度、德國、中國、日本、美國等研究團(tuán)隊(duì)的科研人員致力于研究其功能與作用機(jī)理，用于培養(yǎng)印度梨形孢的經(jīng)典培養(yǎng)基是Kafer培養(yǎng)基，但印度梨形孢在此培養(yǎng)基上長速較慢，為了既保持原有培養(yǎng)基的特點(diǎn)，又能促進(jìn)印度梨形孢的快速生長，提高代謝物的作用，發(fā)明一種能提高印度梨形孢生長速度又能提高代謝物作用的培養(yǎng)基具有廣泛的研究與應(yīng)用前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種既保持原有培養(yǎng)基的特點(diǎn)，又能促進(jìn)印度梨形孢較快生長，提高代謝物對植物促生作用的培養(yǎng)基。該方法具有簡單易行，取材方便，成本低廉，經(jīng)濟(jì)效益好等特點(diǎn)。
[0005]本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
[0006]本發(fā)明的基于納米氧化鋅促進(jìn)微生物生長的培養(yǎng)基中每升含有:2.0Og蛋白胨、1.0Og 酵母提取物、1.0Og 水解酪蛋白、0.60gNaN03、0.52gKCl、0.52gMgS04.7H20、1.52gKH2P04、5.00-10.0OmgZnO、10mgH3B03、5mgMnS04.H2O> 1.6mgCoCl.5H20、1.6mgCuS04.5H20、1.1mg(NH4)6MO7O24U.3mgFeS04、l.8mgEDTA、0.1Omg 硫胺素、0.04mg 甘氨酸、0.01mg煙酸、0.01mg吡卩多醇。
[0007]其中，ZnO的粒徑為30nm。
[0008]優(yōu)選:所述的培養(yǎng)基中每升含有Zn08.0mgo
[0009]利用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)印度梨形孢的方法:培養(yǎng)條件為在25°C~28°C、IOOrpm~120rpm搖床上避光培養(yǎng)。
[0010]本發(fā)明采用納米材料氧化鋅(Zn0，30nm)代替原Kafer培養(yǎng)基中的ZnSO4.7Η20，在I升培養(yǎng)基中加入納米材料ZnO (30nm)5mg至IOmg,所用生物菌種為印度梨形孢。
[0011]Kafer培養(yǎng)基配方為每升培養(yǎng)基中含有:2.0Og蛋白胨、1.0Og酵母提取物、1.0Og水解酪蛋白、0.60gNaN03、0.52gKCl、0.52gMgS04.7Η20、1.52gKH2P04、0.52gZnS04.7H20、10mgH3B03、5mgMnS04.H2O> 1.6mgCoCl.5H20、1.6mgCuS04.5H20、1.1mg (NH4) 6M 0 7 0 24、1.3mgFeS04、1.8mgEDTA、0.1Omg 硫胺素、0.04mg 甘氨酸、0.01mg 煙酸、0.01mg 吡卩多醇。
[0012]本發(fā)明的積極效果如下:
[0013]1、在含納米材料Zn0(30nm)5mg至IOmg的Kafer培養(yǎng)基中培養(yǎng)印度梨形孢，其生長速率明顯快于原來的培養(yǎng)基，培養(yǎng)出的菌體鮮重比CK分別增加了 36.5%和55.8%，干重比CK分別增加了 19%和26.2% (圖1)。
[0014]2、在含納米材料Zn0(30nm)5mg至IOmg的Kafer培養(yǎng)基中培養(yǎng)印度梨形孢，肉眼觀察菌落比原來的長得更致密，光滑(圖2)。
[0015]3、在含納米材料Zn0(30nm) 5mg至IOmg的Kafer培養(yǎng)基中培養(yǎng)印度梨形孢7天后，經(jīng)離心過濾濾去印度梨形孢的菌絲體與孢子，獲得的濾液即印度梨形孢的代謝物對煙草的促生作用顯著好于對照。
[0016]4、本發(fā)明提供的方法簡單易行，取材方便，成本低廉(100克納米材料Zn0(30nm)的價格是200元)，經(jīng)濟(jì)效益好?！緦＠綀D】

【附圖說明】
[0017]圖1是納米材料Zn0(30nm)對印度梨形孢生物量影響的示意圖。
[0018]圖2是納米材料Zn0(30nm)對印度梨形孢菌落形態(tài)影響的示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0019]下面的實(shí)施例是對本發(fā)明的進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0020]實(shí)施例1
[0021]本發(fā)明的基于納米氧化鋅促進(jìn)印度梨形孢生長的培養(yǎng)基中每升含有:2.0Og蛋白胨、1.0Og 酵母提取物、1.0Og 水解酪蛋白、0.60gNaN03、0.52gKCl、0.52gMgS04.7H20、1.52gKH2P04、5.0OmgZnO、IOmgH3BO3、5mgMnS04.H20、1.6mgCoCl.5H20、1.6mgCuS04.5H20、1.1mg (NH4)6MO7O24'1.3mgFeS04、l.8mgEDTA、0.1Omg 硫胺素、0.04mg 甘氨酸、0.01mg 煙酸、
0.01mg批口多醇。
[0022]其中，ZnO的粒徑為30nm。
[0023]利用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)印度梨形孢的方法:培養(yǎng)條件為在25°C~28°C、IOOrpm~120rpm搖床上避光培養(yǎng)。
[0024]實(shí)施例2
[0025]本發(fā)明的基于納米氧化鋅促進(jìn)印度梨形孢生長的培養(yǎng)基中每升含有:2.0Og蛋白胨、1.0Og 酵母提取物、1.0Og 水解酪蛋白、0.60gNaN03、0.52gKCl、0.52gMgS04.7H20、
1.52gKH2P04、10.0OmgZnO、IOmgH3BO3'5mgMnS04.H20、1.6mgCoCl.5H20、1.6mgCuS04.5H20、1.1mg (NH4)6MO7O24'1.3mgFeS04、l.8mgEDTA、0.1Omg 硫胺素、0.04mg 甘氨酸、0.01mg 煙酸、
0.01mg批口多醇。
[0026]其中，ZnO的粒徑為30nm。
[0027]利用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)印度梨形孢的方法:培養(yǎng)條件為在25°C~28°C、IOOrpm~120rpm搖床上避光培養(yǎng)。
[0028]實(shí)施例3[0029]本發(fā)明的基于納米氧化鋅促進(jìn)印度梨形孢生長的培養(yǎng)基中每升含有:2.0Og蛋白胨、1.0Og 酵母提取物、1.0Og 水解酪蛋白、0.60gNaN03、0.52gKCl、0.52gMgS04.7H20、
1.52gKH2P04、8.0OmgZnO、10mgH3B03、5mgMnS04.H2OU.6mgCoCl.5H20、1.6mgCuS04.5H20、1.1mg(NH4)6MO7O24U.3mgFeS04、l.8mgEDTA、0.1Omg 硫胺素、0.04mg 甘氨酸、0.01mg 煙酸、
0.01mg批唆醇。
[0030]其中，ZnO的粒徑為30nm。
[0031]利用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)印度梨形孢的方法:培養(yǎng)條件為在25°C~28°C、IOOrpm~120rpm搖床上避光培養(yǎng)。
[0032]實(shí)施例4
[0033]由圖1可以看出，在含納米材料Zn0(30nm)5mg至IOmg的Kafer培養(yǎng)基中培養(yǎng)印度梨形孢，其生長速率明顯快于原來的培養(yǎng)基，培養(yǎng)出的菌體鮮重比CK分別增加了 36.5%和55.8%，干重比CK分別增加了 19%和26.2%。
[0034]由圖2可以看出，在含納米材料Zn0(30nm)5mg至IOmg的Kafer培養(yǎng)基中培養(yǎng)印度梨形孢，肉眼觀察菌落比原來的長得更致密，光滑。
[0035]在含納米材料Zn0(30nm) 5mg至IOmg的Kafer培養(yǎng)基中培養(yǎng)印度梨形孢7天后，經(jīng)離心過濾濾去印度梨形孢的菌絲體與孢子，獲得的濾液即印度梨形孢的代謝物對煙草的促生作用顯著好于對照。 [0036]盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言，可以理解在不脫離本發(fā)明的原理和精神的情況下可以對這些實(shí)施例進(jìn)行多種變化、修改、替換和變型，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求及其等同物限定。
【權(quán)利要求】
1.一種基于納米氧化鋅促進(jìn)印度梨形孢生長的培養(yǎng)基，其特征在于:所述的培養(yǎng)基中每升含有:2.0Og蛋白胨、1.0Og酵母提取物、1.0Og水解酪蛋白、0.60gNaN03、0.52gKCl、0.52gMgS04.7Η20、1.52gKH2P04、5.00-10.0OmgZnO、IOmgH3BO3、5mgMnS04.H2O,1.6mgCoCl.5H20、L 6mgCuS04.5H20、1.1mg (NH4)6MO7O24U.3mgFeS04、l.8mgEDTA、0.1Omg 硫胺素、0.04mg甘氨酸、0.01mg煙酸、0.01mg批卩多醇。
2.如權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基 ，其特征在于:ZnO的粒徑為30nm。
3.如權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于:所述的培養(yǎng)基中每升含有Zn08.0mgo
4.一種利用如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)基培養(yǎng)印度梨形孢的方法，其特征在于:培養(yǎng)條件為在25°C~28°C、1OOrpm~120rpm搖床上避光培養(yǎng)。
【文檔編號】C12N1/38GK103898040SQ201410092234
【公開日】2014年7月2日 申請日期:2014年3月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月13日
【發(fā)明者】樓兵干, 劉曉曦, 郭辰彤, 高其康, 林福呈 申請人:浙江大學(xué)