一種促進(jìn)肌肉細(xì)胞中g(shù)lut4基因表達(dá)的方法
【專利摘要】一種促進(jìn)肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)的方法，它涉及一種促進(jìn)GLUT4基因表達(dá)的方法。本發(fā)明是要建立能夠有效提高GLUT4基因表達(dá)的方法，尤其是提高肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)肌肉細(xì)胞的葡萄糖吸收的方法。本發(fā)明方法為：首先，將肌肉前驅(qū)細(xì)胞（C2C12）進(jìn)行誘導(dǎo)分化培養(yǎng)成為成熟的肌肉細(xì)胞之后，向培養(yǎng)基中添加1～10mmol/L的4-PBA，在溫度是37℃，CO2的體積濃度為5%的細(xì)胞培養(yǎng)條件下進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間為12～24h，回收細(xì)胞。然后，分別檢測(cè)肌肉細(xì)胞的GLUT4基因表達(dá)以及肌肉細(xì)胞的葡萄糖吸收變化等情況。本發(fā)明應(yīng)用于降低糖尿病高血糖等科研與臨床應(yīng)用領(lǐng)域。
【專利說明】—種促進(jìn)肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種促進(jìn)GLUT4基因表達(dá)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]4-苯基丁酸(4-phenlybutyrate,4_PBA)是一種小分子化合物,分子式為CltlH12O2,分子量為164(式1.1)。FDA已經(jīng)批準(zhǔn)4-PBA應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)，但是目前4-PBA只作為一種特殊的氨類清除劑，應(yīng)用于人類尿素循環(huán)障礙的臨床試驗(yàn)。在治療尿素循環(huán)障礙的過程中，4-PBA作為乙酸苯酯的前體，通過β-氧化形成乙酸苯酯。乙酸苯酯可以與谷氨酰胺結(jié)合形成共軛物苯乙酰谷氨酰胺，將血液中對(duì)人體有害的血氨轉(zhuǎn)化成無害的化合物，并通過尿液直接排出到體外。4-ΡΒΑ除了作為氨清除劑外，常作為去乙?；敢种苿┖蛢?nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抑制劑應(yīng)用于一些疾病的臨床研究。4-ΡΒΑ常被用于研究糖尿病、代謝綜合癥、肥胖癥、癌癥、囊腫性纖維化疾病、阿茲海默癥、帕金森癥和神經(jīng)退行性病變等與HDAC和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激有關(guān)的疾病。Ckcari等人證實(shí)4-ΡΒΑ作為化學(xué)分子伴侶，可作用于肥胖型糖尿病小鼠，能有效地減少由于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激增強(qiáng)而引起的相關(guān)蛋白的錯(cuò)誤折疊，使得肥胖型糖尿病小鼠的胰島素抵抗及高血糖得以改善。
[0003]
【權(quán)利要求】
1.一種促進(jìn)肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)的方法，其特征在于它是按照以下步驟進(jìn)行的:將肌肉細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)分化培養(yǎng)，在誘導(dǎo)分化培養(yǎng)的第七天，向誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基中添加I~lOmmol/L的4-PBA后，在細(xì)胞培養(yǎng)條件為37°C，CO2的體積濃度為5%的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間為12~24h，然后回收細(xì)胞，即完成促進(jìn)肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)的方法。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進(jìn)肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)的方法，其特征在于所述的4-PBA添加量為I~8mmol/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種促進(jìn)肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)的方法，其特征在于所述的4-PBA添加量為2~7mmol/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種促進(jìn)肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)的方法，其特征在于所述的4-PBA添加量為3~7mmol/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種促進(jìn)肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)的方法，其特征在于所述的4-PBA添加量為4~Bmmol /I,η
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種促進(jìn)肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)的方法，其特征在于所述的4-ΡΒΑ添加量為5mmol/L。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進(jìn)肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)的方法，其特征在于所述的培養(yǎng)時(shí)間為15~24h。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種促進(jìn)肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)的方法，其特征在于所述的培養(yǎng)時(shí)間為18~24h。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種促進(jìn)肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)的方法，其特征在于所述的培養(yǎng)時(shí)間為20~24h。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種促進(jìn)肌肉細(xì)胞中GLUT4基因表達(dá)的方法，其特征在于所述的培養(yǎng)時(shí)間為22~24h。
【文檔編號(hào)】C12N5/077GK103820384SQ201410076511
【公開日】2014年5月28日 申請(qǐng)日期:2014年3月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月4日
【發(fā)明者】顧寧, 胡海龍, 毛軻, 郭倩 申請(qǐng)人:哈爾濱工業(yè)大學(xué)