一種Sarcodon leucopus中降糖活性成分及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明的目的是提供一種Sarcodon?leucopus中降糖活性成分及其制備方法與應(yīng)用。該方法包括如下步驟：1）將Sarcodon?leucopus子實(shí)體干燥粉碎，加入有機(jī)溶劑，20-25℃浸泡3-5h，過(guò)濾取濾液；2）重復(fù)步驟1）4-6次，合并濾液，于36-40℃減壓濃縮，真空干燥獲得有機(jī)溶劑提取物；3）用20%乙醇溶解有機(jī)溶劑提取物，得到樣品溶液；4）將所述樣品溶液進(jìn)行大孔吸附樹(shù)脂層析，先用20%乙醇洗脫6個(gè)柱保留體積，再用85%乙醇洗脫6個(gè)柱保留體積；收集合并85%乙醇的洗脫液，獲得降糖有效部位。實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明所提供的降糖活性成分具有很強(qiáng)的抑制α-葡萄糖苷酶的活性，且可明顯降低Ⅱ型糖尿病模型大鼠的血糖值；由于來(lái)源于食用真菌，具有一定的安全基礎(chǔ)。本發(fā)明具有潛在巨大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。
【專利說(shuō)明】—種Sarcodon Ieucopus中降糖活性成分及其制備方法與
應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種Sarcodon Ieucopus中降糖活性成分及其制備方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]糖尿病是人體內(nèi)胰島素缺乏或者相對(duì)缺乏而引起的一種臨床常見(jiàn)病，同時(shí)會(huì)導(dǎo)致一系列并發(fā)性疾病的發(fā)生，尤其是導(dǎo)致眼、心、血管、腎、神經(jīng)損害或器官功能衰竭，比如心血管疾病、高血壓等。世界衛(wèi)生組織(WHO)將糖尿病主要分為兩種:1型糖尿病(或稱胰島素依賴型，IDDM)和II型糖尿病(或稱非胰島素依賴型，NIDDM)。其中II型糖尿病占了大多數(shù)，我國(guó)糖尿病患者已達(dá)2000萬(wàn)以上，其中90%以上為II型糖尿病，并且出現(xiàn)多發(fā)性、年輕化的特點(diǎn)，嚴(yán)重威脅國(guó)民健康。
[0003]α -葡萄糖苷酶在小腸內(nèi)將蔗糖等寡糖水解形成葡萄糖，葡萄糖經(jīng)小腸吸收進(jìn)入血液，是餐后血糖升高的主要原因。餐后高血糖過(guò)高可引起機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性降低從而加劇II型糖尿病患者病情。因而α-葡萄糖苷酶抑制劑將顯著提高對(duì)糖尿病的控制。目前市場(chǎng)上使用的α-葡萄糖苷酶抑制劑類藥物主要為阿卡波糖、伏格列波糖、米格列醇等，但是值得注意的是，目前使用的這些抑制劑都帶來(lái)了不同程度上的毒副作用，如胃腸道副作用、蕁麻疹、肝功能障礙、心臟系統(tǒng)風(fēng)險(xiǎn)等。因此，積極發(fā)展更安全、更強(qiáng)效的α-葡萄糖苷酶抑制劑是必要和緊 迫的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種制備Sarcodon Iecucopus中降血糖活性成分的方法。
[0005]本發(fā)明所提供的制備Sarcodon Iecucopus中降血糖活性成分的方法,具體可包括如下步驟:
[0006](I)將Sarcodon Ieucopus子實(shí)體干燥粉碎后,加入有機(jī)溶劑,配比為0.1-lg (干重)的所述子實(shí)體:10ml所述有機(jī)溶劑，20-25°C (如20°C或25°C)浸泡提取3_5h，過(guò)濾后取濾液；
[0007](2)重復(fù)步驟(1) 4-6次，每次所述有機(jī)溶劑均加入到前一次過(guò)濾所得濾渣中，合并每次過(guò)濾所得濾液，于36-40°C (如36-38°C或38_40°C，具體如36°C、38°C或40°C)減壓濃縮，真空干燥獲得有機(jī)溶劑提取物；
[0008](3)用體積分?jǐn)?shù)為20%的乙醇水溶液溶解步驟(2)所得的有機(jī)溶劑提取物，得到樣品溶液；所述有機(jī)溶劑提取物和所述體積分?jǐn)?shù)為20%的乙醇水溶液的配比為lg-1.5g:50mL ；
[0009](4)將步驟(3)所得樣品溶液上樣到裝有大孔吸附樹(shù)脂的樹(shù)脂柱中，先用體積分?jǐn)?shù)為20%的乙醇水溶液洗脫6個(gè)柱保留體積，再用體積分?jǐn)?shù)為85%的乙醇水溶液洗脫6個(gè)柱保留體積，所述吸附和所述洗脫的流速均為1.5-2.5個(gè)(具體如1.5個(gè))柱保留體積每小時(shí)；收集合并用體積分?jǐn)?shù)為85%的乙醇水溶液洗脫所得的洗脫液，于36-40°C (如38°C)減壓濃縮，真空干燥，獲得Sarcodon Ieucopus的降血糖活性成分。
[0010]在所述方法的步驟(4)中，所述將步驟(3)所得樣品溶液上樣到裝有大孔吸附樹(shù)脂的樹(shù)脂柱中，需反復(fù)吸附4-6次。
[0011]在所述方法的步驟(4)中，在上樣吸附后還包括用蒸餾水洗滌的步驟。所述洗滌的流速為1.5-2.5個(gè)(如1.5個(gè))柱保留體積每小時(shí)，體積為1000毫升。
[0012]上述所獲得的Sarcodon Ieucopus的降血糖活性成分經(jīng)高效液相色譜分析后表明
主要含有如下式(I)、式(2)、式(3)所示的化合物及其衍生物。
[0013]
【權(quán)利要求】
1.一種制備Sarcodon Ieucopus降血糖活性成分的方法,包括如下步驟: (1） M^Sarcodon Ieucopus子實(shí)體干燥粉碎后,加入有機(jī)溶劑,配比為0.l_lg干重的所述子實(shí)體:10ml所述有機(jī)溶劑，20-25°C浸泡提取3_5h，過(guò)濾后取濾液； (2)重復(fù)步驟(1)4-6次，每次所述有機(jī)溶劑均加入到前一次過(guò)濾所得濾渣中，合并每次過(guò)濾所得濾液，于36-40°C減壓濃縮，真空干燥獲得有機(jī)溶劑提取物； (3)用體積分?jǐn)?shù)為20%的乙醇水溶液溶解步驟(2)所得的有機(jī)溶劑提取物，得到樣品溶液；所述有機(jī)溶劑提取物和所述體積分?jǐn)?shù)為20%的乙醇水溶液的配比為lg-1.5g:50mL ； (4)將步驟(3)所得樣品溶液上樣到裝有大孔吸附樹(shù)脂的樹(shù)脂柱中，先用體積分?jǐn)?shù)為20%的乙醇水溶液洗脫6個(gè)柱保留體積，再用體積分?jǐn)?shù)為85%的乙醇水溶液洗脫6個(gè)柱保留體積，所述吸附和所述洗脫的流速均為1.5-2.5個(gè)柱保留體積每小時(shí)；收集合并用體積分?jǐn)?shù)為85%的乙醇水溶液洗脫所得的洗脫液，于36-40°C減壓濃縮，真空干燥獲得SarcodonIeucopus的降血糖活性成分。
2.一種制備Sarcodon Ieucopus降血糖有機(jī)溶劑提取物的方法,包括如下步驟: (1)將SarcodonIeucopus子實(shí)體干燥粉碎后，加入有機(jī)溶劑，配比為0.1-1g干重，20-25°C浸泡提取3-5h，過(guò)濾后取濾液； (2)重復(fù)步驟(1)4-6次，每次所述有機(jī)溶劑均加入到前一次過(guò)濾所得濾渣中，合并每次過(guò)濾所得濾液，于36-40°C減壓濃縮,真空干燥獲得Sarcodon Ieucopus降血糖有機(jī)溶劑提取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于:所述有機(jī)溶劑為如下中的任一種: (al)單一溶劑:乙醇、甲醇、乙酸乙酯、正丁醇或丙酮。 (a2)混合溶劑1:由(al)的單一溶劑中的兩種或多種混合而成的溶劑； (a3)混合溶劑2:由(al)的單一溶劑與水任意比例混合而成的溶劑，或由(a2)的混合溶劑I與水任意比例混合而成的溶劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的方法，其特征在于:所述大孔吸附樹(shù)脂為非極性大孔吸附樹(shù)脂、中等極性大孔吸附樹(shù)脂或極性大孔吸附樹(shù)脂。
5.利用權(quán)利要求1或3或4所述的方法制備得到的SarcodonIeucopus降血糖活性成分。
6.利用權(quán)利要求2或3所述的方法制備得到的SarcodonIeucopus降血糖有機(jī)溶劑提取物。
7.權(quán)利要求5所述的SarcodonIeucopus降血糖活性成分，或權(quán)利要求6所述的Sarcodon Ieucopus降血糖有機(jī)溶劑提取物，或所述Sarcodon Ieucopus子實(shí)體在如下(Al) - (A4)任一中的應(yīng)用: (Al)作為α -葡萄糖苷酶抑制劑； (Α2)制備治療和/或預(yù)防II型糖尿病的藥物； (A3)制備抑制α -葡萄糖苷酶的藥物； (Α4)制備具有降糖作用的食品或功能保健品。
8.治療和/或預(yù)防II型糖尿病的藥物，其活性成分為權(quán)利要求5所述的SarcodonIeucopus降血糖活性成分,或權(quán)利要求6所述的Sarcodon Ieucopus降血糖有機(jī)溶劑提取物，或所述Sarcodon Ieucopus子實(shí)體。
9.抑制α-葡萄糖苷酶的藥物，其活性成分為權(quán)利要求5所述的Sarcodon Ieucopus降血糖活性成分,或權(quán)利要求6所述的Sarcodon Ieucopus降血糖有機(jī)溶劑提取物,或所述Sarcodon Ieucopus 子實(shí)體。
10.具有降糖作用的食品或功能保健品，其活性成分為權(quán)利要求5所述的SarcodonIeucopus降血糖活性成分,或權(quán)利要求6所述的Sarcodon Ieucopus降血糖有機(jī)溶劑提取物，或所述Sa rcodon Ieucopus子實(shí)體。
【文檔編號(hào)】A23L1/30GK103800389SQ201410056448
【公開(kāi)日】2014年5月21日 申請(qǐng)日期:2014年2月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月19日
【發(fā)明者】劉宏偉, 馬軻, 韓俊杰, 寶麗 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院微生物研究所