強(qiáng)力腦心康片及制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種純中藥強(qiáng)力腦心康片及制備方法。強(qiáng)力腦心康片由以下原料藥制成：丹參1500g，蜜環(huán)菌提取液1500g，蜂王漿125g。所述蜜環(huán)菌提取液的制備方法為：（1）斜面菌種培養(yǎng)。（2）一級(jí)、二級(jí)搖瓶菌種培養(yǎng)。（3）一級(jí)、二級(jí)種子罐培養(yǎng)。（4）發(fā)酵罐培養(yǎng)。經(jīng)鏡檢：1.培養(yǎng)菌球占80%以上。2.菌液pH：5.0-5.2。26-28℃更適宜蜜環(huán)菌的生長(zhǎng)、更能激活蜜環(huán)菌菌絲的生長(zhǎng)速度，獲得更健壯、更有活力的優(yōu)良蜜環(huán)菌，從而提高蜜環(huán)菌的質(zhì)量，能縮短工時(shí)又能更好地提高強(qiáng)力腦心康片的藥效。蜜環(huán)菌提取液發(fā)酵的時(shí)間短，縮短勞動(dòng)工時(shí)，降低成本。
【專利說(shuō)明】強(qiáng)力腦心康片及制備方法
[0001]【技術(shù)領(lǐng)域】
本發(fā)明涉及一種純生物藥物制劑的制備方法，即強(qiáng)力腦心康片及制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]強(qiáng)力腦心康片是國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)為通化吉通藥業(yè)有限公司所有的全國(guó)獨(dú)家品種，2008年國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)生產(chǎn)，藥品批準(zhǔn)文號(hào)為國(guó)藥準(zhǔn)字Z20080087 ;藥品再注冊(cè)批件號(hào)為:2013R00012。強(qiáng)力腦心康片處方:丹參1500g，蜜環(huán)菌提取液1500g，蜂王漿125g。制法:丹參、蜜環(huán)菌提取液、蜂王漿以上三味藥，取丹參75g，粉碎成細(xì)粉；剩余丹參加水浸泡后煎煮三次，第一、二次各2小時(shí)，第三次3小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.32 (70°C)的稠膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉；將蜜環(huán)菌提取液加熱濃縮干燥后，粉碎成細(xì)粉；與上述細(xì)粉混勻，制成顆粒，干燥；蜂王漿冷凍干燥，粉碎成細(xì)粉，與上述顆?；靹颍瑝褐瞥?000片，包薄膜衣，即得。
[0003]含量測(cè)定
原兒茶醛，照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI D)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-甲酸(18:81.5:0.5)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。理論板數(shù)按原兒茶醛峰計(jì)算應(yīng)不低于1000。
[0004]對(duì)照品溶液的制備
取原兒茶醛對(duì)照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每Iml含3(^g的溶液，即得。
[0005]供試品溶液的制備
取本品20片，除去薄膜衣，研細(xì)，取lg，精密稱定，精密加入水25ml，稱定重量，加熱回流2小時(shí)，放冷，再稱定重量，用水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，蒸干，殘?jiān)?0%甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
[0006]測(cè)定法
分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
[0007]本品每片含丹參以原兒茶醛(C7H6O3)計(jì)，不得少于90μ8。
丹酚酸B
照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI D)測(cè)定。
[0008]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-1%甲酸(28:10:62)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為286nm。理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于 3000。
[0009]對(duì)照品溶液的制備
取丹酚酸B對(duì)照品適量，精密稱定，加水制成每Iml含8(^g的溶液，即得。 [0010]供試品溶液的制備
取本品10片，除去薄膜衣，精密稱定，研細(xì)，取0.3g，精密稱定，置50ml量瓶中，加水適量，超聲處理(功率300W，頻率50kHz) 30分鐘，放冷，加水至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
[0011]測(cè)定法
分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品每片含丹參以丹酚酸B (C36H30O16)計(jì)，不得少于3.0mg0
[0012]通常蜜環(huán)菌提取液為外購(gòu)商品，沒(méi)有質(zhì)量指標(biāo)限制，不同批次、不同廠家質(zhì)量有差異，影響藥品整體療效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013]本發(fā)明的目的是針對(duì)上述情況而提供一種能夠保證蜜環(huán)菌提取液質(zhì)量的強(qiáng)力腦心康片及制備方法。
本發(fā)明技術(shù)解決方案是:一種強(qiáng)力腦心康片，由以下原料藥制成:丹參1500g，蜜環(huán)菌提取液1500g，蜂王漿125g。
[0014]所述蜜環(huán)菌提取液的制備方法為:
(I)斜面菌種培養(yǎng)
斜面菌種培養(yǎng)基:麥麩粉0.5% ；葡萄糖3%、磷酸二氫鉀0.75%、繭蛹粉0.5%、瓊脂1.0%、硫酸鎂0.3%、VB10.005%、水93.945% ;在無(wú)菌條件下將保存菌種以挖塊接種于制備好的斜面培養(yǎng)基上，接種量為1: 10，溫度控制在26-28°C;培養(yǎng)10-15天，待斜面菌絲由白變成棕褐色，轉(zhuǎn)入一級(jí)、二級(jí)搖瓶菌種培養(yǎng)。
[0015](2)—級(jí)、二級(jí)搖瓶菌種培養(yǎng)
一級(jí)、二級(jí)搖瓶菌種培養(yǎng)基:葡萄糖2%、磷酸二氫鉀0.75%、繭蛹粉0.5%、麥麩粉1.5%、硫酸鎂0.3%、VB10.005%、酵母粉0.5%、水94.445%。在旋轉(zhuǎn)式搖床上(轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)/分鐘或以上)，溫度:26-28°C條件下，振蕩培養(yǎng)6-7天，待菌球濃度占培養(yǎng)基30%，無(wú)雜菌污染，即可做菌種備用。在菌種數(shù)量少的情況下，用一級(jí)、二級(jí)搖瓶培養(yǎng)最合理，同時(shí)給足培養(yǎng)基，在合理的環(huán)境下，有足夠的培養(yǎng)基，促使菌種的快速生長(zhǎng)。尤其是到二級(jí)種子搖瓶罐培養(yǎng)，這時(shí)給足培養(yǎng)基和適宜的溫度(28°C)，使蜜環(huán)菌菌種的快速、迅猛擴(kuò)繁。從而縮短了培養(yǎng)時(shí)間，降低了成本。
[0016](3)—級(jí)、二級(jí)種子罐培養(yǎng)
一級(jí)、二級(jí)種子罐培養(yǎng)基:葡萄糖2%、磷酸二氫鉀0.75%、繭蛹粉0.5%、麥麩粉5%、硫酸鎂 0.3%、VB%0.005% 微量、酵母粉 1%、水 90.445%
;培養(yǎng)溫度26-28°C，罐壓0.05Mpa，通氣攪拌，通氣比為1:0.6(V/V/分)條件下培養(yǎng)6_7天，待菌球體積占培養(yǎng)基30%以上，無(wú)雜菌污染，即可轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐。在菌種數(shù)量增多的情況下，用一級(jí)、二級(jí)種子罐培養(yǎng)最合理，同時(shí)給足培養(yǎng)基和適宜的溫度(28°C)，在合理的環(huán)境下，有足夠的培養(yǎng)基，促使蜜環(huán)菌菌種的快速生長(zhǎng)。尤其是到二級(jí)種子罐培養(yǎng)，這時(shí)給足培養(yǎng)基和適宜的溫度(28°C)，使蜜環(huán)菌菌種的快速、迅猛擴(kuò)繁。從而縮短了培養(yǎng)時(shí)間，降低了成本。
[0017](4)發(fā)酵罐培養(yǎng)
發(fā)酵罐培養(yǎng)基:葡萄糖2%、磷酸二氫鉀0.75%、繭蛹粉0.5%、麥麩粉5%、硫酸鎂0.3%、VB10.005%、酵母粉1%、水90.445% ;培養(yǎng)溫度:26-28°C，罐壓0.05Mpa，通氣攪拌，通氣比為
1:0.6 (V/V/分)條件下培養(yǎng)6-7天，待發(fā)酵液變?yōu)樽虾稚?，由稠變稀，部分菌絲開(kāi)始變?nèi)?，菌絲顆粒變碎,罐內(nèi)亮度開(kāi)始減弱即可出罐；將發(fā)酵液離心過(guò)濾,收集濾液至貯罐，即得蜜環(huán)菌發(fā)酵液培養(yǎng)液，濃縮至密度為1.030-1.035 (20°C)，即得蜜環(huán)菌提取液，即可出罐。經(jīng)鏡檢:1、培養(yǎng)菌球占80%以上。2、菌絲狀態(tài):菌絲變細(xì)分枝多，無(wú)雜菌污染。3、菌液pH:
5.0-5.2。4、密度為 1.030-1.035 (20°C)。
[0018]繼續(xù)減壓濃縮，相對(duì)密度為1.30-1.32 (70°C )的稠膏，然后烘干，粉碎，備用。蜜環(huán)菌粉能提高人的免疫功能，對(duì)腦缺血有保護(hù)作用，有抗炎作用，有抗菌作用。
[0019]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:1、選用麥麩粉和繭蛹粉為斜面菌種培養(yǎng)基成分，這樣能提高蜜環(huán)菌菌絲的生長(zhǎng)速度并且蜜環(huán)菌菌絲生長(zhǎng)的更健壯，有利于蜜環(huán)菌的制備。2、26-28°C更適宜蜜環(huán)菌的生長(zhǎng)、更能激活蜜環(huán)菌菌絲的生長(zhǎng)速度，獲得更健壯、更有活力的優(yōu)良蜜環(huán)菌，從而提高蜜環(huán)菌的質(zhì)量，能縮短工時(shí)又能更好地提高強(qiáng)力腦心康片的藥效。3、蜜環(huán)菌提取液發(fā)酵的時(shí)間短，縮短勞動(dòng)工時(shí)，降低成本。4、蜜環(huán)菌提取液質(zhì)量得以控制，培養(yǎng)菌球占80%以上，菌液pH:5.0-5.2即可出罐。
[0020]下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
【具體實(shí)施方式】
[0021]實(shí)驗(yàn)例I
蜜環(huán)菌斜面菌種培養(yǎng)基的篩選。
[0022]通過(guò)4種原種培養(yǎng)基上蜜環(huán)菌菌絲生長(zhǎng)長(zhǎng)勢(shì)和速度的試驗(yàn)對(duì)比。麥麩粉和繭蛹粉培養(yǎng)基最適合用來(lái)制作蜜環(huán)菌培養(yǎng)基，培養(yǎng)基為:麥麩粉0.5% ；葡萄糖3%、磷酸二氫鉀
0.75%、繭蛹粉 0.5%、瓊脂 1.0%、硫酸鎂 0.3%、VB10.005%、水 93.945%。
[0023]表1-1不同培養(yǎng)基對(duì)蜜環(huán)菌菌絲生長(zhǎng)的影響(X 土S.D n= 3)
【權(quán)利要求】
1.一種強(qiáng)力腦心康片，其特征在于由以下原料藥制成:丹參1500g，蜜環(huán)菌提取液1500g，蜂王漿 125g ； 所述蜜環(huán)菌提取液的制備方法為: (1)斜面菌種培養(yǎng) 斜面菌種培養(yǎng)基:麥麩粉0.5% ；葡萄糖3%、磷酸二氫鉀0.75%、繭蛹粉0.5%、瓊脂1.0%、硫酸鎂0.3%、VB10.005%、水93.945% ;在無(wú)菌條件下將保存菌種以挖塊接種于制備好的斜面培養(yǎng)基上，接種量為1: 10，培養(yǎng)溫度控制在26-28°C;培養(yǎng)10-15天，待斜面菌絲由白變成棕褐色，轉(zhuǎn)入一級(jí)、二級(jí)搖瓶菌種培養(yǎng)； (2)—級(jí)、二級(jí)搖瓶菌種培養(yǎng) 一級(jí)、二級(jí)搖瓶菌種培養(yǎng)基:葡萄糖2%、磷酸二氫鉀0.75%、繭蛹粉0.5%、麥麩粉1.5%、硫酸鎂0.S^kVB10.005%、酵母粉0.5%、水94.445% ;培養(yǎng)溫度:26_28°C條件下，振蕩培養(yǎng)6_7天，待菌球濃度占培養(yǎng)基30%，無(wú)雜菌污染，即可做菌種備用；轉(zhuǎn)入進(jìn)入一、二級(jí)種子罐培養(yǎng); (3)—級(jí)、二級(jí)種子罐培養(yǎng) 一級(jí)、二級(jí)種子罐培養(yǎng)基:葡萄糖2%、磷酸二氫鉀0.75%、繭蛹粉0.5%、麥麩粉5%、硫酸鎂0.3%、VB%0.005%微量、酵母粉1%、水90.445% ;培養(yǎng)溫度26-28°C，罐壓0.05Mpa,通氣攪拌，通氣比為1:0.6 V/V/分條件下培養(yǎng)6-7天，待菌球體積占培養(yǎng)基30%以上，無(wú)雜菌污染，即可轉(zhuǎn)入發(fā)酵 罐； (4)發(fā)酵罐培養(yǎng) 發(fā)酵罐培養(yǎng)基:葡萄糖2%、磷酸二氫鉀0.75%、繭蛹粉0.5%、麥麩粉5%、硫酸鎂0.3%、酵母粉1%、VB10.005%、水90.445% ;培養(yǎng)溫度26-28 °C，罐壓0.05Mpa，通氣攪拌，通氣比為I:0.6 V/V/分條件下培養(yǎng)6-7天，即可出罐；將發(fā)酵液離心過(guò)濾，收集濾液至貯罐，即得蜜環(huán)菌發(fā)酵液培養(yǎng)液，在20°C濃縮至密度為1.030-1.035，即得蜜環(huán)菌提取液。
2.按照權(quán)利要求1所述的強(qiáng)力腦心康片，其特征在于培養(yǎng)溫度28°C。
【文檔編號(hào)】C12R1/645GK103751271SQ201410056268
【公開(kāi)日】2014年4月30日 申請(qǐng)日期:2014年2月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月20日
【發(fā)明者】楊靜, 李春娥, 羅曉萍 申請(qǐng)人:通化吉通藥業(yè)有限公司