用于檢測rs40245位點核苷酸的物質(zhì)在早期評價精神分裂癥患病風(fēng)險中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了用于檢測rs40245位點核苷酸的物質(zhì)在早期評價精神分裂癥患病風(fēng)險中的應(yīng)用，具體涉及用于檢測rs40245位點核苷酸的物質(zhì)在早期評價兒童、青少年精神分裂癥患病風(fēng)險中的應(yīng)用。本發(fā)明對于精神分裂癥的防控，特別是兒童和青少年精神分裂癥的防控，具有重大的應(yīng)用價值。
【專利說明】用于檢測rs40245位點核苷酸的物質(zhì)在早期評價精神分裂癥患病風(fēng)險中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及用于檢測rS40245位點核苷酸的物質(zhì)在早期評價精神分裂癥患病風(fēng)險中的應(yīng)用，具體涉及用于檢測rs40245位點核苷酸的物質(zhì)在早期評價兒童、青少年精神分裂癥患病風(fēng)險中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】 [0002]精神分裂癥是一組病因未明的重性精神病，多在青壯年緩慢或亞急性起病，臨床上往往表現(xiàn)為癥狀各異的綜合征，涉及感知覺、思維、情感和行為等多方面的障礙以及精神活動的不協(xié)調(diào)，個體之間癥狀差異很大，即使同一患者在不同階段或病期也可能表現(xiàn)出不同癥狀。
[0003]精神分裂癥的臨床表現(xiàn)如下:
[0004]1、感知覺障礙
[0005]精神分裂癥可出現(xiàn)多種感知覺障礙，最突出的感知覺障礙是幻覺，包括幻聽、幻視、幻嗅、幻味及幻觸等，而幻聽最為常見。
[0006]2、思維障礙
[0007]思維障礙是精神分裂癥的核心癥狀，主要包括思維形式障礙和思維內(nèi)容障礙。思維形式障礙是以思維聯(lián)想過程障礙為主要表現(xiàn)的，包括思維聯(lián)想活動過程(量、速度及形式)、思維聯(lián)想連貫性及邏輯性等方面的障礙。妄想是最常見、最重要的思維內(nèi)容障礙。最常出現(xiàn)的妄想有被害妄想、關(guān)系妄想、影響妄想、嫉妒妄想、夸大妄想、非血統(tǒng)妄想等。據(jù)估計，高達80%的精神分裂癥患者存在被害妄想，被害妄想可以表現(xiàn)為不同程度的不安全感，如被監(jiān)視、被排斥、擔心被投藥或被謀殺等，在妄想影響下患者會做出防御或攻擊性行為，此外，被動體驗在部分患者身上也較為突出，對患者的思維、情感及行為產(chǎn)生影響。
[0008]3、情感障礙
[0009]情感淡漠及情感反應(yīng)不協(xié)調(diào)是精神分裂癥患者最常見的情感癥狀，此外，不協(xié)調(diào)性興奮、易激惹、抑郁及焦慮等情感癥狀也較常見。
[0010]4、意志和行為障礙
[0011]多數(shù)患者的意志減退甚至缺乏，表現(xiàn)為活動減少、離群獨處，行為被動，缺乏應(yīng)有的積極性和主動性，對工作和學(xué)習(xí)興趣減退，不關(guān)心前途，對將來沒有明確打算，某些患者可能有一些計劃和打算，但很少執(zhí)行。
[0012]5、認知功能障礙
[0013]在精神分裂癥患者中認知缺陷的發(fā)生率高，約85%患者出現(xiàn)認知功能障礙，如信息處理和選擇性注意、工作記憶、短時記憶和學(xué)習(xí)、執(zhí)行功能等認知缺陷。認知缺陷癥狀與其他精神病性癥狀之間存在一定相關(guān)性，如思維形式障礙明顯患者的認知缺陷癥狀更明顯，陰性癥狀明顯患者的認知缺陷癥狀更明顯，認知缺陷可能與某些陽性癥狀的產(chǎn)生有關(guān)等。認知缺陷可能發(fā)生于精神病性癥狀明朗化之前(如前驅(qū)期)，或者隨著精神病性癥狀的出現(xiàn)而急劇下降，或者是隨著病程延長而逐步衰退，初步認為慢性精神分裂癥患者比首發(fā)精神分裂癥患者的認知缺陷更明顯。
[0014]精神分裂癥的臨床分型如下:
[0015]1、偏執(zhí)型
[0016]這是精神分裂癥中最常見的一種類型，以幻覺、妄想為主要臨床表現(xiàn)。
[0017]2、青春型
[0018]在青少年時期發(fā)病，以顯著的思維、情感及行為障礙為主要表現(xiàn)，典型的表現(xiàn)是思維散漫、思維破裂，情感、行為反應(yīng)幼稚，可能伴有片段的幻覺、妄想；部分患者可以表現(xiàn)為本能活動亢進，如食欲、性欲增強等。該型患者首發(fā)年齡低，起病急，社會功能受損明顯，一般預(yù)后不佳。
[0019]3、緊張型
[0020]以緊張綜合征為主要表現(xiàn)，患者可以表現(xiàn)為緊張性木僵、蠟樣屈曲、刻板言行，以及不協(xié)調(diào)性精神運動性興奮、沖動行為。一般該型患者起病較急，部分患者緩解迅速。
[0021]4、單純型
[0022]該型主要在青春期發(fā)病，主要表現(xiàn)為陰性癥狀，如孤僻退縮、情感平淡或淡漠等。該型治療效果欠佳，患者社會功能衰退明顯，預(yù)后差。
[0023]5、未分化型
`[0024]該型具有上述某種類型的部分特點，或是具有上述各型的一些特點，但是難以歸入上述任何一型。
[0025]6、殘留型
[0026]該型是精神分裂癥急性期之后的階段，主要表現(xiàn)為性格的改變或社會功能的衰退。
[0027]國外常用的診斷標準包括美國的疾病分類和診斷統(tǒng)計手冊DSM-1V -TR、WHO的國際疾病分類手冊ICD-10，國內(nèi)常用的診斷標準為中國精神障礙分類與診斷標準CCMD-3。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0028]本發(fā)明的目的是提供用于檢測rs40245位點核苷酸的物質(zhì)在早期評價精神分裂癥患病風(fēng)險中的應(yīng)用，具體涉及用于檢測rs40245位點核苷酸的物質(zhì)在早期評價兒童、青少年精神分裂癥患病風(fēng)險中的應(yīng)用。
[0029]本發(fā)明提供了用于檢測rs40245位點的核苷酸的物質(zhì)在制備產(chǎn)品中的應(yīng)用；所述產(chǎn)品的功能為評價(特別是早期評價)或輔助評價(特別是早期輔助評價)待測人患精神分裂癥的風(fēng)險性。
[0030]本發(fā)明還提供了用于檢測rs40245位點的核苷酸的物質(zhì)在制備產(chǎn)品中的應(yīng)用；所述產(chǎn)品的功能為診斷(特別是早期診斷)或輔助診斷(特別是早期輔助診斷)待測患者是否為精神分裂癥患者。
[0031]本發(fā)明還保護一種產(chǎn)品，含有用于檢測rs40245位點的核苷酸的物質(zhì)；所述產(chǎn)品的功能為早期評價(特別是早期評價)或輔助評價(特別是早期輔助評價)待測人患精神分裂癥的風(fēng)險性。所述產(chǎn)品還可包括記載有如下(a)或(b)的載體:(a)如果待測人的基因組DNA中的rs40245位點攜帶A等位基因，待測人患精神分裂癥的風(fēng)險較高；如果待測人的基因組DNA中的rs40245位點不攜帶A等位基因，待測人患精神分裂癥的風(fēng)險較低；(b)如果待測人的基因組DNA中的rs40245位點為AA基因型或AT基因型，待測人患精神分裂癥的風(fēng)險較高；如果待測人的基因組DNA中的rs40245位點為TT基因型，待測人患精神分裂癥的風(fēng)險較低。
[0032]本發(fā)明還保護一種產(chǎn)品，含有用于檢測rs40245位點的核苷酸的物質(zhì)；所述產(chǎn)品的功能為診斷(特別是早期診斷)或輔助診斷(特別是早期輔助診斷)待測患者是否為精神分裂癥患者。
[0033]以上任一所述rs40245位點具體可為:以待測人的基因組DNA為模板，采用特異引物對擴增得到的擴增產(chǎn)物的自5’末端第81位核苷酸；所述特異引物對由序列表的序列I所示的單鏈DNA分子和序列表的序列2所示的單鏈DNA分子組成。
[0034]以上任一所述“用于檢測rs40245位點的核苷酸的物質(zhì)”由特異引物對、探針甲和探針乙組成；所述特異引物對由序列表的序列I所示的單鏈DNA分子和序列表的序列2所示的單鏈DNA分子組成；所述探針甲如序列表的序列3所示；所述探針乙如序列表的序列4所示。
[0035]以上任一所述待測人具體可為待測兒童或待測青少年。
[0036]本發(fā)明還保護一種用于檢測rs40245位點的核苷酸的試劑盒，由特異引物對、探針甲和探針乙組成；所述特異引物對由序列表的序列I所示的單鏈DNA分子和序列表的序列2所示的單鏈DNA分子組成 ；所述探針甲如序列表的序列3所示；所述探針乙如序列表的序列4所示。所述rs40245位點具體可為:以待測人的基因組DNA為模板，采用所述特異引物對擴增得到的擴增產(chǎn)物的自5’末端第81位核苷酸。
[0037]本發(fā)明還保護rs40245位點作為標志物在開發(fā)或設(shè)計或制備檢測精神分裂癥的患病風(fēng)險的產(chǎn)品中的應(yīng)用。所述rs40245位點具體可為:以待測人的基因組DNA為模板，采用所述特異引物對擴增得到的擴增產(chǎn)物的自5’末端第81位核苷酸。
[0038]本發(fā)明對于精神分裂癥的防控，特別是兒童和青少年精神分裂癥的防控，具有重大的應(yīng)用價值。
【具體實施方式】
[0039]以下的實施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實施例中所用的試驗材料，如無特殊說明，均為自常規(guī)生化試劑商店購買得到的。以下實施例中的定量試驗，均設(shè)置三次重復(fù)實驗，結(jié)果取平均值。SNP位點即單核苷酸多態(tài)性位點，各個rs位點為具體的某個SNP位點。rs40245位點位于7號染色體(以人基因組DNA為模板，采用序列表的序列I所示單鏈DNA分子和序列表的序列2所示單鏈DNA分子進行PCR擴增得到的產(chǎn)物的核苷酸序列具體可如序列表的序列5所示)。精神分裂癥的診斷標準為中國精神障礙分類與診斷標準CCMD-3，健康者為按上述標準診斷排除相關(guān)疾病的人。
[0040]實施例1、rs40245位點核苷酸與精神分裂癥患病風(fēng)險的關(guān)聯(lián)分析
[0041]用于進行關(guān)聯(lián)分析的人群:已經(jīng)醫(yī)院確診的精神分裂癥患者1182位、重癥抑郁患者1019位、健康者1213位，均為知情同意的志愿者，均為漢族。
[0042]1、分別取每個個體的血液，提取基因組DNA。[0043]2、以步驟I提取的基因組DNA為模板，采用TaqMan實時熒光PCR鑒定rs40245位點核苷酸。
[0044]上游引物(序列表的序列I):5’-TTGCAGGTAAGTTCTGACATCTTTTT-3’ ；
[0045]下游引物(序列表的序列2):5’-GGTTCCTTATGATTGTGTGTTTACTTCA-3’ ；
[0046]TaqMan探針I(yè) (5’ 一 3’，其核苷酸序列為序列表的序列3，用于檢測等位基因A):
[0047]VIC-CTAATTCTAAGGTTTGACGTAG-MGB ；
[0048]TaqMan探針2 (5’ 一 3’，其核苷酸序列為序列表的序列4，用于檢測等位基因T):
[0049]FAM-TTTTCTCTCCTAATTCTTAG-MGB。
[0050]VIC和FAM為熒光基團。MGB為熒光淬滅基團。
[0051]結(jié)果見表1。
[0052]表1檢測結(jié)果
【權(quán)利要求】
1.用于檢測rs40245位點的核苷酸的物質(zhì)在制備產(chǎn)品中的應(yīng)用；所述產(chǎn)品的功能為評價或輔助評價待測人患精神分裂癥的風(fēng)險性。
2.用于檢測rs40245位點的核苷酸的物質(zhì)在制備產(chǎn)品中的應(yīng)用；所述產(chǎn)品的功能為診斷或輔助診斷待測患者是否為精神分裂癥患者。
3.如權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于:所述rs40245位點為:以待測人的基因組DNA為模板，采用特異引物對擴增得到的擴增產(chǎn)物的自5’末端第81位核苷酸；所述特異引物對由序列表的序列I所示的單鏈DNA分子和序列表的序列2所示的單鏈DNA分子組成。
4.如權(quán)利要求1或2或3所述的應(yīng)用，其特征在于:所述“用于檢測rs40245位點的核苷酸的物質(zhì)”由特異引物對、探針甲和探針乙組成；所述特異引物對由序列表的序列I所示的單鏈DNA分子和序列表的序列2所示的單鏈DNA分子組成；所述探針甲如序列表的序列3所示；所述探針乙如序列表的序列4所示。
5.一種產(chǎn)品，含有用于檢測rs40245位點的核苷酸的物質(zhì)；所述產(chǎn)品的功能為早期評價或輔助評價待測人患精神分裂癥的風(fēng)險性。
6.一種產(chǎn)品，含有用于檢測rs40245位點的核苷酸的物質(zhì)；所述產(chǎn)品的功能為診斷或輔助診斷待測患者是否為精神分裂癥患者。
7.如權(quán)利要求5或6所述的產(chǎn)品，其特征在于:所述rs40245位點為:以待測人的基因組DNA為模板，采用特異引物對擴增得到的擴增產(chǎn)物的自5’末端第81位核苷酸；所述特異引物對由序列表的序列I所示的單鏈DNA分子和序列表的序列2所示的單鏈DNA分子組成。
8.如權(quán)利要求5或6或7所述的產(chǎn)品，其特征在于:所述“用于檢測rs40245位點的核苷酸的物質(zhì)”由特異引物對、探針甲和探針乙組成；所述特異引物對由序列表的序列I所示的單鏈DNA分子和序列表的序列2所示的單鏈DNA分子組成；所述探針甲如序列表的序列3所示；所述探針乙如序列表的序列4所示。
9.一種用于檢測rs40245位點的核苷酸的試劑盒，由特異引物對、探針甲和探針乙組成；所述特異引物對由序列表的序列I所示的單鏈DNA分子和序列表的序列2所示的單鏈DNA分子組成；所述探針甲如序列表的序列3所示；所述探針乙如序列表的序列4所示。
10.rs40245位點作為標志物在開發(fā)或設(shè)計或制備檢測精神分裂癥的患病風(fēng)險的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
【文檔編號】C12Q1/68GK103773882SQ201410045396
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2014年2月7日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月7日
【發(fā)明者】季衛(wèi)東, 師詠勇, 陳劍華, 徐一峰 申請人:上海市長寧區(qū)精神衛(wèi)生中心