一種海洋紅酵母的固體發(fā)酵方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及了一種海洋紅酵母的固體發(fā)酵方法，解決了目前海洋紅酵母液態(tài)發(fā)酵成本高,菌含量不高的缺點,通過固體發(fā)酵，海洋紅酵母菌含量能達(dá)到200億/克以上。
【專利說明】一種海洋紅酵母的固體發(fā)酵方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)應(yīng)用微生物【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]海洋紅酵母菌菌體營養(yǎng)豐富而全面，富含蛋白質(zhì)、肝糖、不飽和脂肪酸、動物幼體生長激素和以蝦青素為主的類胡蘿卜素(具有很強(qiáng)的清除氧自由基、促進(jìn)抗體產(chǎn)生、增加宿主免疫力以及艷麗紅色的作用)，是優(yōu)良的蝦青素生產(chǎn)菌、天然色素源、極具潛力的動物飼料蛋白和食品添加劑。近年來海洋紅酵母菌已用于飼料添加劑中。由于其所產(chǎn)生的胡蘿卜素能提高養(yǎng)殖動物的產(chǎn)量和抗病力，被廣泛應(yīng)用于海洋生物養(yǎng)殖，在水產(chǎn)養(yǎng)殖方面具有較好的功效，添加于對蝦幼體餌料中能提高幼體的成活率、促進(jìn)其生長和增加其對環(huán)境因子耐受力的效果，因此，開發(fā)海洋紅酵母產(chǎn)品具有重大意義.CN101748075A(申請?zhí)?201010010034.0)專利文件中公開了一種高活性海洋紅酵母菌粉得制備方法，CN1415738A(申請?zhí)?02139178.5)專利文件中公開了一種采用連續(xù)流加深層通氣培養(yǎng)和淀粉吸附流化床干燥法制備固體海洋紅酵母菌粉工藝，上述2個專利均為液態(tài)發(fā)酵，且液態(tài)發(fā)酵存在成本高，菌含量不高等缺點，所以發(fā)明一種高效的海洋紅酵母固體發(fā)酵工藝是有必要的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]技術(shù)問題
為了解決以上問題，本發(fā)明提供了 “一種海洋紅酵母的固體發(fā)酵方法”。
[0004]技術(shù)方案` 本發(fā)明提供的方法，包括如下步驟:
(1)菌種活化:將海洋紅酵母菌菌種接種于YPD液體培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)44-48小時作為發(fā)酵種子液；培養(yǎng)溫度25-30°C，轉(zhuǎn)速為150-250rpm ；
(2)液體菌種制備:將步驟(1)活化好的發(fā)酵種子液接種至發(fā)酵罐中攪拌通氣發(fā)酵培養(yǎng)36-48小時；培養(yǎng)基為:葡萄糖15-40g/L，蛋白胨10-30 g/L，酵母粉5_20 g/L，硫酸鎂
0.5-2 g/L, pH 5.0-7.0，其余為海水，0.1MPa下滅菌15-30 min。培養(yǎng)條件:溫度25-30度；攪拌轉(zhuǎn)速為120-180rpm/min,通氣量為l_4m3/min ；
(3)固體培養(yǎng)基的制備:固體培養(yǎng)基包括:固體介質(zhì)和液態(tài)介質(zhì)；固體介質(zhì)為:麩皮40-60%、豆柏10-30%、蓮藕淀粉10-30%、玉米淀粉5-15% ;液態(tài)介質(zhì)為:蔗糖5_15g/L，蛋白胨5-15g/L，酵母粉2-5 g/L，硫酸鎂0.5-2 g/L，其余為海水；將固體介質(zhì)和液態(tài)介質(zhì)按重量比(1-3):(1-3)的比例混合后即為固體培養(yǎng)基；將固體培養(yǎng)基裝入淺盤式固體發(fā)酵罐中，鋪料厚度為3-10厘米，121度高壓滅菌15-30分鐘后冷卻至30度；
(4)將步驟(2)的液態(tài)菌種接種到步驟(3)的固體培養(yǎng)基中通無菌空氣培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25-35度，通氣量為01-lm3/min，培養(yǎng)48-72小時后室溫烘干后即得高濃度海洋紅酵母菌劑，菌含量達(dá)到200億/克以上。[0005]【具體實施方式】:
實施例
(1)將海洋紅酵母菌菌種接種于Yro液體培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)48小時作為發(fā)酵種子液；培養(yǎng)溫度30°c，轉(zhuǎn)速為150rpm ；
(2)將步驟(1)活化好的發(fā)酵種子液接種至發(fā)酵罐中攪拌通氣發(fā)酵培養(yǎng)48小時；培養(yǎng)基為:葡萄糖15g/L，蛋白胨10 g/L，酵母粉10 g/L，硫酸鎂0.5 g/L, pH 5.8，其余為海水，0.1MPa下滅菌15min。培養(yǎng)條件:溫度30度；攪拌轉(zhuǎn)速為180rpm/min,通氣量為2m3/min ；
(3)麩皮40%、豆柏30%、蓮藕淀粉15%、玉米淀粉15%配置成固體介質(zhì)；蔗糖5g/L，蛋白胨5g/L,酵母粉2 g/L,硫酸鎂0.5 g/L,加入到海水中配置成液體介質(zhì)；將固體介質(zhì)和液態(tài)介質(zhì)按重量比1:1的比例混合后配置成固體培養(yǎng)基；將固體培養(yǎng)基裝入淺盤式固體發(fā)酵罐中，鋪料厚度為5厘米，121度高壓滅菌30分鐘后冷卻至30度； (4)將步驟(2)的液態(tài)菌種接種到步驟(3)的固體培養(yǎng)基中通無菌空氣培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30度，通氣量為lm3/min，培養(yǎng)72小時后室溫烘干后即得高濃度海洋紅酵母菌劑，菌含量為262億/克。
【權(quán)利要求】
1.一種海洋紅酵母的固體發(fā)酵方法，其特征在于如下步驟: (1)菌種活化:將海洋紅酵母菌菌種接種于YPD液體培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)44-48小時作為發(fā)酵種子液；培養(yǎng)溫度25-30°C，轉(zhuǎn)速為150-250rpm ； (2)液體菌種制備:將步驟(1)活化好的發(fā)酵種子液接種至發(fā)酵罐中攪拌通氣發(fā)酵培養(yǎng)36-48小時；培養(yǎng)基為:葡萄糖15-40g/L，蛋白胨10-30 g/L，酵母粉5_20 g/L，硫酸鎂0.5-2 g/L, pH 5.0-7.0，其余為海水，0.1MPa下滅菌15-30 min ;培養(yǎng)條件:溫度25-30度；攪拌轉(zhuǎn)速為120-180rpm/min，通氣量為l_4m3/min ； (3)固體培養(yǎng)基的制備:固體培養(yǎng)基包括:固體介質(zhì)和液態(tài)介質(zhì)；固體介質(zhì)為:麩皮40-60%、豆柏10-30%、蓮藕淀粉10-30%、玉米淀粉5-15% ;液態(tài)介質(zhì)為:蔗糖5_15g/L，蛋白胨5-15g/L，酵母粉2-5 g/L，硫酸鎂0.5-2 g/L，其余為海水；將固體介質(zhì)和液態(tài)介質(zhì)按重量比(1-3):(1-3)的比例混合后即為固體培養(yǎng)基；將固體培養(yǎng)基裝入淺盤式固體發(fā)酵罐中，鋪料厚度為3-10厘米，121度高壓滅菌15-30分鐘后冷卻至30度； (4)將步驟(2)的液態(tài)菌種接種到步驟(3)的固體培養(yǎng)基中通無菌空氣培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25-35度，通氣量為01-lm3/min，培養(yǎng)48-72小時后室溫烘干后即得高濃度海洋紅酵母菌劑，菌含量達(dá)到200億/克以上。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種海洋紅酵母的固體發(fā)酵方法，其特征在于固體培養(yǎng)基采用的固體介質(zhì)為:麩皮4 0-60%、豆柏10-30%、蓮藕淀粉10-30%、玉米淀粉5-15%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種海洋紅酵母的固體發(fā)酵方法，其特征在于固體培養(yǎng)基采用的液態(tài)介質(zhì)為:蔗糖5-15g/L，蛋白胨5-15g/L，酵母粉2-5 g/L，硫酸鎂0.5-2 g/L，其余為海水。
【文檔編號】C12N1/16GK103602602SQ201310623897
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年12月1日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月1日
【發(fā)明者】孫義 申請人:領(lǐng)綠生物鎮(zhèn)江有限公司