一種促進(jìn)提取魚皮膠原蛋白的方法
【專利摘要】魚皮膠原蛋白制備方法主要有五種：酸法、堿法、鹽法、酶法和熱水抽提法，本發(fā)明進(jìn)一步用超聲波作用，提高膠原蛋白的得率，縮短了提取時間。
【專利說明】一種促進(jìn)提取魚皮膠原蛋白的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]魚皮膠原蛋白制備方法主要有五種:酸法、堿法、鹽法、酶法和熱水抽提法，本發(fā)明進(jìn)一步用超聲波作用，提高膠原蛋白的得率，縮短了提取時間，使其得到更好的利用于食品、化妝品、醫(yī)藥和保健品等領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]膠原蛋白由于其獨特的生理功能及特性，被廣泛應(yīng)用與食品、化妝品、醫(yī)藥和保健品等領(lǐng)域。傳統(tǒng)的膠原蛋白主要從陸生動物如豬、牛等的結(jié)締組織中提取，近些年，但因瘋牛病、口蹄疫等疾病的爆發(fā)，陸生動物來源的膠原蛋白在應(yīng)用方面受到了極大的限制。另外，由于宗教和習(xí)俗等原因，有些地區(qū)也不能使用豬等牲畜來源的膠原蛋白制品。因此，尋找提取膠原蛋白原料的新來源就顯得非常迫切了。魚類加工后產(chǎn)生大量的廢棄物，如皮、骨、鱗和鰭等含有豐富的膠原蛋白，具有開發(fā)和利用的價值。
[0003]我國是一個海洋大國，漁業(yè)資源極其豐富，但是我們國家對于漁業(yè)副產(chǎn)品的利用還處于初級階段。魚皮是漁業(yè)加工的副產(chǎn)品，蛋白質(zhì)含量很高，較魚肌肉中蛋白質(zhì)還要高，其中膠原蛋白的含量占其蛋白質(zhì)總量的80%以上，因此魚皮可以作為一種新型的膠原資源來利用。目前膠原蛋白已經(jīng)在醫(yī)藥、化妝品、保健品等高附加值領(lǐng)域得到應(yīng)用。膠原及水解膠原，由于富含羥基、氨基等親水基團(tuán)而具有良好的保濕性，可以作為化妝品行業(yè)的一種保濕劑。動物實驗表明膠原蛋白能促進(jìn)皮膚膠原蛋白的代謝，起到美容作用。韓國的Hee-GukByun等人采用復(fù)合酶水解的方法從阿拉斯加鱈魚皮中得到了具有血管緊張素抑制作用的活性肽。由于魚皮膠原蛋白具有變性溫度低、可溶性高、易被蛋白酶水解等特性，使它更適合用于開發(fā)分子量小的活性 肽。
[0004]魚皮膠原蛋白制備方法主要有以下五種:酸法、堿法、鹽法、酶法和熱水抽提法，其基本原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境，把膠原蛋白從其它蛋白質(zhì)中分離出來，同時，在實際提取過程中，不同提取方法之間往往相互結(jié)合，以取得較好的提取效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]魚皮膠原蛋白制備方法主要有五種:酸法、堿法、鹽法、酶法和熱水抽提法，本發(fā)明進(jìn)一步用超聲波作用，提高膠原蛋白的得率，縮短了提取時間。
【具體實施方式】
[0006]實施例一
[0007]對照組:熱水提取法
[0008]原料的預(yù)處理:將魚皮解凍后放入0.1M NaOH(l:30, W/V)中(4°C下)，輕輕攪拌6h，每隔2h更換I次溶液，之后用蒸餾水洗滌至中性，浙干，以去除非膠原蛋白。隨后將魚皮放到10% (V/V) 丁醇(I:30, W/V)中(4°C下)，輕輕攪拌24h，每隔8h更換I次溶液，之后用蒸餾水洗滌至中性，浙干，以去除脂肪。
[0009]熱水提取:料比10倍，pH6.0，溫度90°C，提取4h，提取液取出，濃縮，噴霧干燥，得到膠原蛋白產(chǎn)品，并計算提取率。
[0010]超聲波組:熱水提取過程中，同時用超聲波發(fā)生器施加20kHz超聲波，提取時間縮短為對照組的一半。
[0011]結(jié)果:對照組提取率為39.2 %，而超聲波組為55.7%，超聲波組取得了更好的提取效果，且縮短了提取時間。
[0012]實施例二
[0013]對照組:酸法提取法
[0014]原料的預(yù)處理:將魚皮解凍后放入0.1M NaOH(l:30, W/V)中(4°C下)，輕輕攪拌6h，每隔2h更換I次溶液，之后用蒸餾水洗滌至中性，浙干，以去除非膠原蛋白。隨后將魚皮放到10% (V/V) 丁醇(I:30, W/V)中(4°C下)，輕輕攪拌24h，每隔8h更換I次溶液，之后用蒸餾水洗滌至中性，浙干，以去除脂肪。
[0015]酸法提取:料比I倍，加入0.5%鹽酸，溫度75°C，提取4h，提取液NaOH中和至中性，提取液取出，濃縮，噴霧干燥，得到膠原蛋白產(chǎn)品，并計算提取率。
[0016]超聲波組:酸法提取過程中，同時用超聲波發(fā)生器施加20kHz超聲波，提取時間縮短為對照組的一半。
[0017]結(jié)果:對照組提取率為52.3 %，而超聲波組為72.1 %，超聲波組取得了更好的提取效果，且縮短了提取時間。
`[0018]實施例三
[0019]對照組:酶法提取法
[0020]原料的預(yù)處理:將魚皮解凍后放入0.1M NaOH(l:30, W/V)中(4°C下)，輕輕攪拌6h，每隔2h更換I次溶液，之后用蒸餾水洗滌至中性，浙干，以去除非膠原蛋白。隨后將魚皮放到10% (V/V) 丁醇(I:30, W/V)中(4°C下)，輕輕攪拌24h，每隔8h更換I次溶液，之后用蒸餾水洗滌至中性，浙干，以去除脂肪。
[0021]酶法提取:將底物與水1:10(W/W)的比例于酶解反應(yīng)器中，調(diào)溫度40°C和pH9.0至酶最適反應(yīng)條件，然后將堿性蛋白酶酶按酶量1200U/g加入反應(yīng)器中反應(yīng)，酶解6h。在酶解過程中，保證恒定的溫度和pH，酶解完成后在沸水浴中滅活lOmin，冷卻后用0.1M NaOH調(diào)pH至7.0，離心(20000 X g，4°C，40min)，上清液取出，濃縮，噴霧干燥，得到膠原蛋白產(chǎn)品，并計算提取率。
[0022]超聲波組:酶解提取過程中，同時用超聲波發(fā)生器施加20kHz超聲波，提取時間縮短為對照組的一半。
[0023]結(jié)果:對照組提取率為55.2 %，而超聲波組為77.8%，超聲波組取得了更好的提取效果，且縮短了提取時間。
【權(quán)利要求】
1.選擇合適的方法提取魚皮膠原蛋白。
2.選擇合適的權(quán)利I中的熱水法和酸法提取條件。
3.選擇合適的蛋白酶種類。
4.選擇合適權(quán)利3中的酶解條件。
5.在權(quán)利1-4的方法中，同時用超聲波發(fā)生器施加20kHz超聲波以提高提取膠原蛋白的得率和縮短 提取時間。
【文檔編號】C12P21/06GK103601801SQ201310582130
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年11月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月15日
【發(fā)明者】宋健 申請人:江南大學(xué)