一株降解生物胺的壁畫鹽單胞菌及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于食品生物【技術(shù)領(lǐng)域】。本發(fā)明公開了一株可以降解生物胺的壁畫鹽單胞菌(Halomonas?muralis)BTH001，保藏編號為CGMCC?No.7316。該壁畫鹽單胞菌BTH001不但本身不產(chǎn)生生物胺，而且可以同時降解多種生物胺。該壁畫鹽單胞菌適用的范圍廣泛(溫度20-40℃，pH4-9，氯化鈉濃度≤15％，乙醇濃度≤4％)，可用于發(fā)酵制品的同步發(fā)酵劑，也可用于降解產(chǎn)品中的生物胺，對控制食品中的生物胺具有重要意義。
【專利說明】—株降解生物胺的壁畫鹽單胞菌及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]該發(fā)明涉及一株壁畫鹽單胞菌菌株，特別是一株本身不產(chǎn)生物胺、且對生物胺有降解能力的壁畫鹽單胞菌。
【背景技術(shù)】
[0002]生物胺是一類含氮低分子化合物的總稱，主要包括組胺、色胺、β -苯乙胺、腐胺、尸胺、酪胺和精胺等。生物胺主要來源于相應(yīng)氨基酸的脫羧反應(yīng)，產(chǎn)生生物胺的三個基本條件:①存在前體氨基酸存在能產(chǎn)生氨基酸脫羧酶的微生物；③有適合微生物產(chǎn)氨基酸脫羧酶和酶發(fā)揮作用的環(huán)境。生物胺多存在于氨基酸含量高的食品中，如發(fā)酵香腸、魚露、咸肉、咸魚、干酪和腐乳等。人體自身的胺類氧化酶可以對攝入的低劑量生物胺進行解毒，但生物胺在人體積累到較高數(shù)量時會產(chǎn)生毒害。組胺會中毒后主要損傷的器官是血管和平滑肌，導(dǎo)致頭痛、支氣管痙攣、心跳加快等疾?。焕野?、苯基乙胺和色胺會引起高血壓，也會導(dǎo)致頭痛、嘔吐、瞳孔擴張；腐胺和尸胺的毒性相對較小，主要會造成低血壓、心動過緩、破傷風(fēng)、四肢麻痹等；許多因素會增加生物胺對機體的毒性，主要是基因?qū)е碌娜梭w胺類氧化酶的缺乏、外在因素引起的機體內(nèi)單胺氧化酶、多胺氧化酶等的減少。
[0003]目前，尚沒有有效控制食品中生物胺的方法。為了保證食品的安全，各國科學(xué)家都在積極探索有效控制生物胺的方法。由于食品生產(chǎn)工藝的特殊性，一般很難通過改變生產(chǎn)過程的物理參數(shù)來實現(xiàn)對生物胺的控制；而通過物理(高溫、輻照等)或者添加化學(xué)物質(zhì)的方法對終產(chǎn)品進行處理，則可能會導(dǎo)致食品中營養(yǎng)成分的流失、風(fēng)味的改變，甚至引入新的不安全因素。在食品中引入具備降解生物胺能力、不存在安全隱患的微生物作為發(fā)酵劑，該方法體現(xiàn)了較大的應(yīng)用潛力。目前，尚沒有實際應(yīng)用的生物胺降解微生物。為了控制食品中的生物胺，還需進一步篩選降解效果好、降解生物胺種類多的微生物，開展生物胺降解實際應(yīng)用技術(shù)的研究。`
【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明提供了一株具備較強生物胺降解能力的壁畫鹽單胞菌(Halomonasmural is)BTHOOl。
[0005]本發(fā)明的壁畫鹽單胞菌已于2013年3月15日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC N0.7316。
[0006]所述壁畫鹽單胞菌系從廣東省汕頭市汕頭魚露廠有限公司的魚露樣品中篩選分離得到，是一株對生物胺有較強降解能力的菌株，經(jīng)系統(tǒng)分類鑒定，為壁畫鹽單胞菌(Halomonas mural is)。
[0007]所述壁畫鹽單胞菌保藏方法:從加鹽LB固體培養(yǎng)基(胰蛋白胨1%，酵母浸膏
0.5%,氯化鈉3 %，瓊脂2 % )平板上挑選生長良好的單菌落接種至加鹽LB液體培養(yǎng)基(胰蛋白胨I %，酵母浸膏0.5%，氯化鈉3% )，30°C、160rpm培養(yǎng)24h，取ImL培養(yǎng)液加入到含有l(wèi)mL40%甘油的保藏管中，于-80°C冰箱保藏。[0008]所述壁畫鹽單胞菌的培養(yǎng)過程:將保藏的壁畫鹽單胞菌在加鹽LB固體培養(yǎng)基平板上劃線，30°C恒溫培養(yǎng)24h，挑取單菌落接種至加鹽LB液體培養(yǎng)基中，30°C、160rpm培養(yǎng)24h。
[0009]本發(fā)明同時提供了一種利用所述壁畫鹽單胞菌進行發(fā)酵食品中生物胺的控制方法:對壁畫鹽單胞菌進行培養(yǎng)后，離心(8000rpm，30min，4°C )收集菌體，將菌體用無菌生理鹽水(氯化鈉0.85%，w / V)制備成LOXIO6CFu / mL-1.0X IO8CFU / mL的菌懸液，將該菌懸液作為發(fā)酵劑加入食品原料中，進行同步發(fā)酵，或者加入超標(biāo)食品中，對其中的生物胺進行降解。
[0010]本發(fā)明提供的壁畫鹽單胞菌(Halomonas muralis)BTH001,本身不產(chǎn)生物胺,且可以降解生物胺，可用于發(fā)酵制品的同步發(fā)酵劑，也可用于降解產(chǎn)品中的生物胺。
【具體實施方式】
[0011]實施例1:壁畫鹽單胞菌(Halomonas muralis)BTH001的篩選方法
[0012]取不同發(fā)酵時期的魚露為樣品，加入到50mL的加鹽LB液體培養(yǎng)基中，30 °C，160r / m富集培養(yǎng)24h。用無菌生理鹽水(氯化鈉0.85%，w / v)梯度稀釋培養(yǎng)液10，102，103，104，105倍，每個稀釋度取0.1mL涂布于加鹽LB固體培養(yǎng)基平板，30°C培養(yǎng)24h。根據(jù)菌落形態(tài)，樣品來源信息挑取單菌落，在加鹽LB固體培養(yǎng)基平板上劃線分離三次，然后對獲得的純培養(yǎng)物進行培養(yǎng)，培養(yǎng)后保藏菌株。
[0013]對保藏菌株進行培養(yǎng)后，離心(8000rpm, 30min, 4°C )收集菌體,將菌體用無菌生理鹽水(氯化鈉0.85%，w / V)制備成1.0X IO8CFU / mL的菌懸液。取ImL菌懸液加入到 9mL含色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、組胺、酪胺、精胺和亞精胺八種生物胺各IOOmg / L的生理鹽水，300C、160rpm培養(yǎng)24h，通過丹磺酰氯柱前衍生-高效液相色譜法檢測剩余生物胺的含量。
[0014]
【權(quán)利要求】
1.一株降解生物胺的壁畫鹽單胞菌(Halomonas mural is) BTHOO I,保藏編號為CGMCCN0.7316。
2.如權(quán)利I所述壁畫鹽單胞菌，其特征在于本身不產(chǎn)色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、組胺、酪胺、精胺、亞精胺。
3.如權(quán)利I所述壁畫鹽單胞菌應(yīng)用于降解色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、組胺、酪胺、精胺、亞精胺。
【文檔編號】A23L1/015GK103497912SQ201310409484
【公開日】2014年1月8日 申請日期:2013年9月2日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月2日
【發(fā)明者】汪東風(fēng), 姜維, 徐瑩, 孟祥紅, 徐冰紅, 張曉磊, 李春生 申請人:中國海洋大學(xué)