專(zhuān)利名稱(chēng)：一種以二氫楊梅素協(xié)同有機(jī)酸為原料的新型抑菌劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新型天然抑菌劑劑的制備方法，特別是以二氫楊梅素為原料開(kāi)發(fā)的高效天然天然抑菌劑，可廣泛應(yīng)用食品防腐領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
全世界農(nóng)副產(chǎn)品、水產(chǎn)品等食品有很大部分的損失源于微生物引起的腐敗變質(zhì)， 而現(xiàn)在市場(chǎng)上大多應(yīng)用山梨酸鉀、苯甲酸鈉等化學(xué)合成防腐劑防止腐敗變質(zhì)，長(zhǎng)期食用這些防腐劑會(huì)對(duì)人體帶來(lái)健康隱患。
二氫楊梅素是一種從顯齒蛇葡萄植物中提取的黃酮類(lèi)化合物，具有多種生物活性，有廣譜的抑菌效果，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性、陰性菌霉菌均有抑制作用，而實(shí)驗(yàn)證明二氫楊梅素協(xié)同有機(jī)酸可進(jìn)一步增強(qiáng)抑菌效果，最低抑菌濃度和最低殺菌濃度較低，這些指標(biāo)顯示了其作為天然食品添加劑的前景。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種天然的、安全的高效食品抑菌劑，以降低長(zhǎng)期食用化學(xué)合成的抑菌劑帶來(lái)的健康隱患。
本發(fā)明為解決上述的高效天然抑菌劑的制備方法，其原料組成為:二氫楊梅素(純度> 95% );無(wú)水乙醇、乳酸、檸檬酸(均為分析純級(jí)別)；
本發(fā)明制備上述高效天然防腐劑的技術(shù)方案為:(1)稱(chēng)取一定量的二氫楊梅素溶解于68%乙醇溶液中，使其質(zhì)量濃度為5g/L。(2)在25°C條件下，往二氫楊梅素溶液里依次添加一定量的乳酸、檸檬酸溶液，使乳酸的添加量達(dá)到總量的0.08%，檸檬酸的添加量達(dá)到總量的0.1 %。(3)25°C下用200rpm搖床充分混勻10分鐘，用濾紙過(guò)濾棄掉沉淀取濾液，即為所要的聞效天然食品抑菌劑；
本發(fā)明的天然食品抑菌劑具有廣譜抑菌的功效，對(duì)各類(lèi)細(xì)菌尤其是沙門(mén)氏菌、副溶血性弧菌具有突出的抑菌效果，對(duì)霉菌也有顯著的抑菌效果。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:(I)從天然產(chǎn)物藤茶中提取的二氫楊梅素協(xié)同短碳鏈有機(jī)酸乳酸、檸檬酸制備食品防腐劑，在國(guó)際上是被認(rèn)為是一般安全的；(2) 二氫楊梅素本身具有清除自由基、抗氧化、抗血栓、抗腫瘤、消炎等多種生物活性，而且二氫楊梅素在藤茶中的提取率高最高可達(dá)30%左右，易獲??；(3)本防腐劑與化學(xué)合成的防腐劑如山梨酸鉀在同濃度下，其抑菌效果相當(dāng)；(4)將本發(fā)明用于食品的加工儲(chǔ)存，不 僅成本低，易獲得，且抑菌效果顯著。
具體實(shí)施方式
以下進(jìn)一步介紹本發(fā)明的實(shí)施例。
實(shí)施例一:高效天然防腐劑的制備
(I)無(wú)水乙醇配成68%的乙醇水溶液；
(2)用68%的乙醇水溶液溶解一定質(zhì)量的二氫楊梅素，使二氫楊梅素質(zhì)量濃度為 5g/L ；
(3)在25°C條件下，往二氫楊梅素溶液里依次添加一定量的乳酸、檸檬酸溶液，使乳酸的添加量達(dá)到總量的0.08%，檸檬酸的添加量達(dá)到總量的0.1 %。
(4) 25°C下用200rpm搖床充分混勻10分鐘，用濾紙過(guò)濾棄掉沉淀取濾液，即為所要的聞效天然食品抑菌劑；
抑菌劑安全性實(shí)驗(yàn)
本抑菌劑的毒性實(shí)驗(yàn)主要進(jìn)行了急性毒性及毒理學(xué)安全性評(píng)估兩項(xiàng)試驗(yàn)。(I)急性毒性:本抑菌的最大用量為40g/Kg，通過(guò)對(duì)小鼠灌胃本抑菌劑最大量實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明小鼠使用后均無(wú)明顯的急性毒理反應(yīng)，一周內(nèi)無(wú)死亡。(2)毒理學(xué)安全性評(píng)估:分別以本抑菌劑的低、中、高劑量對(duì)小鼠灌胃實(shí)驗(yàn)(低劑量為0.2% ;中劑量為0.5% ;高劑量為1%)，兩次/日，對(duì)照組按等量的蒸餾水灌胃，兩次/日，連續(xù)30天，結(jié)果表明本防腐劑的各劑量對(duì)小鼠血液指標(biāo)、生化指標(biāo)沒(méi)有明顯改變，肝腎功能無(wú)異常，脂肪、糖類(lèi)、蛋白質(zhì)等代謝正常， 即對(duì)小鼠未出現(xiàn)毒性反應(yīng)。
抑菌效果
以沙門(mén)氏菌、副溶血性弧菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、肺炎克雷伯桿菌、枯草芽孢桿菌、黑曲霉、黃曲霉、青霉為試驗(yàn)菌，用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基和馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基活化菌種；用濾紙片法測(cè)定抑菌效果。將培養(yǎng)基分成三組，第一組用本抑菌劑濃度為0.1 %浸泡已滅菌干燥的6mm濾紙片；第二組用山梨酸鉀濃度為0.1 %浸泡已滅菌干燥的 6mm濾紙片；第三組用68%乙醇溶液浸泡已滅菌干燥的6mm濾紙片；浸泡6h后,用無(wú)菌鑷子夾出，貼于含菌平皿中。一個(gè)平皿貼3片含樣品藥液的濾紙片，呈正三角形。將加好藥液濾紙片的平皿置恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，于37 V培養(yǎng)，細(xì)菌培養(yǎng)24h，霉菌48h，取出觀(guān)察，測(cè)定抑菌圈直徑，所有數(shù)據(jù)均重復(fù)測(cè)試三遍。
本抑菌劑及山梨酸鉀對(duì)各試驗(yàn)菌的抑菌效果見(jiàn)表I
表1對(duì)各試驗(yàn)菌的抑菌效果
權(quán)利要求
1.一種以二氫楊梅素協(xié)同有機(jī)酸為原料作為天然抑菌劑的制備方法。其特征在于由二氫楊梅素協(xié)同有輕微抑菌作用的乳酸、檸檬酸為原料混合而成。
2.按權(quán)利要求I所述的高效天然食品防腐劑，其特征在于其性狀為液體主要成分為 二氫楊梅素0. 5%;乳酸和檸檬酸分別為0. 08%,O. I將它們?nèi)苡跐舛葹?8%乙醇溶液中。
3.按權(quán)利要求I所述的二氫楊梅素提取于顯齒蛇葡萄植物中，提取濃度為95%，乳酸、 檸檬酸均為分析純級(jí)別。
4.一種如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)稱(chēng)取一定量的二氫楊梅素溶解于68%乙醇溶液中，使其質(zhì)量濃度為5g/L。(2)在25°C條件下，往二氫楊梅素溶液里依次添加一定量的乳酸、檸檬酸溶液，使乳酸的添加量達(dá)到總量的O. 08%，檸檬酸的添加量達(dá)到總量的O. I %。(3)混勻，一段時(shí)間后過(guò)濾取濾液，即為所要的高效天然食品抑菌劑。
5.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于步驟(3)中的原料混合后要在恒溫?fù)u床震蕩混勻反應(yīng)lOmin、振蕩速度200rpm。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種以二氫楊梅素協(xié)同有機(jī)酸為原料作為天然抑菌劑加入食品進(jìn)行抑菌防腐的制備方法。本發(fā)明利用以二氫楊梅素(純度≥95％)協(xié)同乳酸、檸檬酸為主要原料的天然抑菌劑；其配方為用68％的乙醇溶解二氫楊梅素使其質(zhì)量濃度調(diào)成5g/L，在25℃下，依次添加乳酸和檸檬酸，使乳酸、檸檬酸含量分別達(dá)到總量的0.08％、0.1％，并用200rpm搖床混勻10分鐘，濾紙過(guò)濾取濾液，即得高效天然抑菌劑；對(duì)細(xì)菌及霉菌都有較好的抑菌作用，經(jīng)試驗(yàn)性比較，抑菌效果與山梨酸鉀相當(dāng)，且在水產(chǎn)品中的防腐保鮮效果顯著。抑菌劑導(dǎo)致了細(xì)菌細(xì)胞膜破裂，細(xì)胞膜通透性增強(qiáng)導(dǎo)致細(xì)菌凋亡。二氫楊梅有多種保健功能，成分穩(wěn)定，協(xié)同有機(jī)酸抑菌被認(rèn)為是GRAS，可廣泛用于食品的防腐保鮮。
文檔編號(hào)A23L3/3544GK103251113SQ201310184800
公開(kāi)日2013年8月21日 申請(qǐng)日期2013年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月29日
發(fā)明者丁利君, 龐文聰, 余姣 申請(qǐng)人:廣東工業(yè)大學(xué)