專(zhuān)利名稱(chēng):通過(guò)液體深層發(fā)酵制備的灰樹(shù)花保健品及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種保健品及其制備方法,特別是涉及一種通過(guò)液體深層發(fā)酵制備的灰樹(shù)花保健品及其制備方法。
背景技術(shù):
灰樹(shù)花學(xué)名Grifolafrondosa ;Polyporus frondosus (Dicks. )Fr. [Boletusfrondosus Dicks.](又名舞茸)是食、藥兼用蕈菌?;覙?shù)花的異名很多,生物分類(lèi)學(xué)屬擔(dān)子菌亞門(mén)、層菌綱、非褶菌目、多孔菌科、樹(shù)花菌屬。是一種珍稀的食、藥兩用菌、夏秋間常野生于栗樹(shù)周?chē)?,具有很好的保健作用和很高的藥用價(jià)值。近年來(lái)作為一種高級(jí)保健食品,風(fēng)行曰本、新加坡等市場(chǎng)。
由于我國(guó)較早的權(quán)威專(zhuān)著《中國(guó)的真菌》的采用,灰樹(shù)花便成為比較通用的漢語(yǔ)名稱(chēng)?;覙?shù)花具有松蕈樣芳香,肉質(zhì)柔嫩,味如雞絲,脆似玉蘭,是極其珍貴的高檔食用蕈菌。目前,國(guó)內(nèi)外的相關(guān)研究主要集中在灰樹(shù)花功能因子的提取及藥理、藥效上。但是,在灰樹(shù)花子實(shí)體的人工栽培領(lǐng)域,卻受到很多的技術(shù)限制,很少大規(guī)模地進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)以及廣泛地民用化使用,同時(shí),該技術(shù)領(lǐng)域也難以商業(yè)化使用。十年前,自然界中灰樹(shù)花子實(shí)體的年保有量約有I萬(wàn)噸,但是目前的保有量卻只有約5千噸,而且,如上所述,灰樹(shù)花子實(shí)體又由于技術(shù)上原因,難以大量的人工生產(chǎn),因此,人們對(duì)灰樹(shù)花保健功效和治療功效的渴求與灰樹(shù)花子實(shí)體保有量的短缺產(chǎn)生了顯著的矛盾。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于,克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷而提供一種能夠大規(guī)模地進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn),并且能夠以較低的成本生產(chǎn)出效用較高的灰樹(shù)花子實(shí)體的通過(guò)液體深層發(fā)酵制備灰樹(shù)花保健品的方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采取以下設(shè)計(jì)方案本發(fā)明的一種通過(guò)液體深層發(fā)酵制備灰樹(shù)花保健品的方法,包括如下步驟A、將灰樹(shù)花菌接入培養(yǎng)液中,并在18 28°C的溫度下以200 300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)72 96小時(shí),獲得菌種液;B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12%大麥芽、重量份3 6%大豆的液體培養(yǎng)基中,接種量為5 10%,并在23 27°C的溫度下通氣培養(yǎng)48 72小時(shí),經(jīng)過(guò)生物發(fā)酵,獲得發(fā)酵的灰樹(shù)花菌絲體以及灰樹(shù)花菌發(fā)酵液;C、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后,用水提取,浸提比為
0.8 1:2 5,浸提溫度為90 95°C,浸提時(shí)間為2 3小時(shí),從而獲得灰樹(shù)花菌絲體提取液;D、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的灰樹(shù)花菌絲體提取液相互混合后,將所得的混合液濃縮4 7倍,并使其折光糖度達(dá)到10 12%,從而得到灰樹(shù)花保健品。
優(yōu)選地,在所述步驟D中,利用反滲透膜濃縮方法或者利用真空濃縮方法對(duì)所述混合液進(jìn)行濃縮處理。更優(yōu)選地,所述反滲透膜濃縮方法的膜設(shè)備操作壓力位設(shè)定在40kg/cm2以下,并于室溫下操作。優(yōu)選地,在所述步驟B中,發(fā)酵終止的指標(biāo)為pH值達(dá)到4. O 5. 5,折光糖度達(dá)到2. 8 3. 8%,菌絲體得率干重達(dá)到O. 65 O. 85%。更優(yōu)選地,在所述步驟D中,灰樹(shù)花菌發(fā)酵液與灰樹(shù)花菌絲體提取液相互混合后的PH值為6 7,折光糖度為2 6%。本發(fā)明的另一目的在于提供一種通過(guò)液體深層發(fā)酵制備的灰樹(shù)花保健品,所述灰樹(shù)花保健品是由如下方法制備而成A、將灰樹(shù)花菌接入培養(yǎng)液中,并在18 28°C的溫度下以200 300次/分鐘的震 蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)72 96小時(shí),獲得菌種液;B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12%大麥芽、重量份3 6%大豆的液體培養(yǎng)基中,接種量為5 10%,并在23 27°C的溫度下通氣培養(yǎng)48 72小時(shí),經(jīng)過(guò)生物發(fā)酵,獲得發(fā)酵的灰樹(shù)花菌絲體以及灰樹(shù)花菌發(fā)酵液;C、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后,用水提取,浸提比為
O.8 1:2 5,浸提溫度為90 95°C,浸提時(shí)間為2 3小時(shí),從而獲得灰樹(shù)花菌絲體提取液;D、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的灰樹(shù)花菌絲體提取液相互混合后,將所得的混合液濃縮4 7倍,并使其折光糖度達(dá)到10 12%,從而得到灰樹(shù)花保健品。優(yōu)選地,在所述步驟D中,利用反滲透膜濃縮方法或者利用真空濃縮方法對(duì)所述混合液進(jìn)行濃縮處理。優(yōu)選地,在所述步驟B中,發(fā)酵終止的指標(biāo)為pH值達(dá)到4. O 5. 5,折光糖度達(dá)到
2.8 3. 8%,菌絲體得率干重達(dá)到O. 65 O. 85%。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是本發(fā)明采用菌種原產(chǎn)地的灰樹(shù)花菌進(jìn)行分離、純化和培育,采用工業(yè)化液體深層發(fā)酵技術(shù),使得灰樹(shù)花菌種能夠在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行大量的繁殖,并且,所得的代謝產(chǎn)物以及菌絲體中均含有與原灰樹(shù)花菌效用相同的有效成分,此外,本發(fā)明還使得灰樹(shù)花菌的子實(shí)體能夠在工業(yè)化條件進(jìn)行生產(chǎn)和培育,工藝簡(jiǎn)單、成本可控,從而能夠顯著地降低生產(chǎn)成本,使得普通消費(fèi)者也能使用上名貴的保健產(chǎn)品。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I :如下為本發(fā)明一種通過(guò)液體深層發(fā)酵制備灰樹(shù)花保健品的方法的優(yōu)選實(shí)施例,本發(fā)明所述的制備方法包括以下主要步驟A、首先,將灰樹(shù)花菌接入培養(yǎng)液中,本發(fā)明的培養(yǎng)液可以為現(xiàn)有技術(shù)中的各種適于灰樹(shù)花菌液體培養(yǎng)的培養(yǎng)液,并在18°C的溫度下以300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)72小時(shí),獲得菌種液;B、然后,將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8%大麥芽、重量份6%大豆的液體培養(yǎng)基中,接種量為5%,并在27°C的溫度下通氣培養(yǎng)48小時(shí),經(jīng)過(guò)生物發(fā)酵,獲得發(fā)酵的灰樹(shù)花菌絲體以及灰樹(shù)花菌發(fā)酵液;c、再將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后,用水提取,浸提比為O. 8:5,浸提溫度為95°C,浸提時(shí)間為2小時(shí),從而獲得灰樹(shù)花菌絲體提取液;進(jìn)一步,本發(fā)明主要利用工業(yè)化液體深層發(fā)酵技術(shù)獲得的灰樹(shù)花發(fā)酵液及濕菌體,來(lái)制備及生產(chǎn)灰樹(shù)花保健品或保健飲料;D、最后,將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的灰樹(shù)花菌絲體提取液相互混合后,將所得的混合液濃縮4倍,并使其折光糖度達(dá)到10%,從而得到灰樹(shù)花保健品。因此,通過(guò)本發(fā)明的制備方法,可以生產(chǎn)大眾直飲產(chǎn)品,包括保健品和飲料。并且,本發(fā)明的制備方法可以直接應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn),且成本低,所得產(chǎn)品營(yíng)養(yǎng)功能高,有利于消費(fèi)者及人民大眾的日常保健。更具體地,本發(fā)明的制備方法能夠直接進(jìn)行工業(yè)化大規(guī)模的連續(xù)生產(chǎn)。批量生產(chǎn)后,通過(guò)本發(fā)明的制備方法可以每日生產(chǎn)10噸以上的灰樹(shù)花菌發(fā)酵液,及每日生產(chǎn)20噸 50噸以上的最終產(chǎn)品。另一方面,在本發(fā)明制備方法的步驟D中所采用的濃縮方法,可以為反滲透膜濃縮方法或者真空濃縮方法,優(yōu)選地,在本實(shí)施例中,采用反滲透膜濃縮方法對(duì)所述混合液進(jìn)行濃縮處理。并且,進(jìn)一步,在本實(shí)施例采用反滲透膜濃縮方法時(shí),反滲透膜濃縮方法的膜 設(shè)備操作壓力位設(shè)定在40kg/cm2以下,并于室溫下操作,由此獲得的灰樹(shù)花保健品,其功能性成分的含量與灰樹(shù)花子實(shí)體相近或聞?dòng)诨覙?shù)花子實(shí)體,其效用與直接服用灰樹(shù)花相當(dāng)。更優(yōu)選地,在本實(shí)施例所述的步驟B中,發(fā)酵終止的指標(biāo)為pH值達(dá)到4. O 5. 5,折光糖度達(dá)到2. 8 3. 8%,同時(shí)菌絲體得率干重達(dá)到O. 65 O. 85%,上述三種指標(biāo)(pH值、折光糖度、菌絲體得率)優(yōu)選為同時(shí)達(dá)到各自相應(yīng)的參數(shù),即可終止發(fā)酵。另外,在本實(shí)施例所述的步驟D中,灰樹(shù)花菌發(fā)酵液與灰樹(shù)花菌絲體提取液相互混合后的自然pH值為6 7,折光糖度為2 6%。本發(fā)明方法所得產(chǎn)物的功能性成分含量和質(zhì)量均非常穩(wěn)定,并高于現(xiàn)代藥理學(xué)研究分析對(duì)天然蛹蟲(chóng)草成分含量的數(shù)值認(rèn)定范圍。本發(fā)明制備方法的工業(yè)化控制能力強(qiáng),且其成本遠(yuǎn)低于天然原料。實(shí)施例2 如下將提供本發(fā)明制備方法的另一種優(yōu)選實(shí)施例。本實(shí)施例的制備方法包括A、首先,選用食、藥用菌灰樹(shù)花,將灰樹(shù)花菌接入培養(yǎng)液中,并在28 °C的溫度下以200次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)96小時(shí),獲得菌種液;B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份12%大麥芽、重量份3%大豆的液體培養(yǎng)基中,接種量為10%,并在23°C的溫度下通氣培養(yǎng)72小時(shí),經(jīng)過(guò)生物發(fā)酵,獲得發(fā)酵的灰樹(shù)花菌絲體以及灰樹(shù)花菌發(fā)酵液;C、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后,用水提取,浸提比為1: 2,浸提溫度為90°C,浸提時(shí)間為3小時(shí),從而獲得灰樹(shù)花菌絲體提取液;D、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的灰樹(shù)花菌絲體提取液相互混合后,將所得的混合液濃縮7倍,并使其折光糖度達(dá)到12%,從而得到灰樹(shù)花保健品。實(shí)施例3 如下將提供本發(fā)明制備方法的再一種優(yōu)選實(shí)施例。本實(shí)施例的制備方法包括如下步驟A、將灰樹(shù)花菌接入培養(yǎng)液中,并在22°C的溫度下以260次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)80小時(shí),獲得菌種液;B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份10%大麥芽、重量份5%大豆的液體培養(yǎng)基中,接種量為7%,并在25°C的溫度下通氣培養(yǎng)60小時(shí),經(jīng)過(guò)生物發(fā)酵,獲得發(fā)酵的灰樹(shù)花菌絲體以及灰樹(shù)花菌發(fā)酵液;c、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后,用水提取,浸提比為O. 9:4,浸提溫度為93°C,浸提時(shí)間為2. 5小時(shí),從而獲得灰樹(shù)花菌絲體提取液;D、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的灰樹(shù)花菌絲體提取液相互混合后,將所得的混合液濃縮6倍,并使其折光糖度達(dá)到11%,從而得到灰樹(shù)花保健品。實(shí)施例4 本實(shí)施例提供一種通過(guò)液體深層發(fā)酵制備的灰樹(shù)花保健品,所述灰樹(shù)花保健品是由如下方法制備而成A、將選用食、藥用灰樹(shù)花菌接入培養(yǎng)液中,并在18 28°C的溫度(本實(shí)施例優(yōu)選為20°C )下以200 300次/分鐘(本實(shí)施例優(yōu)選為260次/分鐘)的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)72 96小時(shí)(本實(shí)施例優(yōu)選為82小時(shí)),獲得菌種液;B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12% (本實(shí)施例優(yōu)選為11%)大麥芽、重量份3 6% (本實(shí)施例優(yōu)選為5%)大豆的液體培養(yǎng)基中,接種量為5 10% (本實(shí)施例優(yōu)選為8%),并在23 270C (本實(shí)施例優(yōu)選為26°C)的溫度下通氣培養(yǎng)48 72小時(shí)(本實(shí)施例優(yōu)選為56小時(shí),經(jīng)過(guò)生物發(fā)酵,獲得發(fā)酵的灰樹(shù)花菌絲體以及灰樹(shù)花菌發(fā)酵液;C、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后,用水提取,浸提比為O. 8 1:2 5(本實(shí)施例優(yōu)選為1:3),浸提溫度為90 95°C (本實(shí)施例優(yōu)選為92°C ),浸提時(shí)間為2. 5小時(shí),從而獲得灰樹(shù)花菌絲體提取液;D、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的灰樹(shù)花菌絲體提取液相互混合后,將所得的混合液濃縮4 7倍,并使其折光糖度達(dá)到10 12%,從而得到灰樹(shù)花保健品。
其中,在步驟D中所采用的濃縮方法可以為反滲透膜濃縮方法或者真空濃縮方法,優(yōu)選地,在本實(shí)施例中,采用反滲透膜濃縮方法對(duì)所述混合液進(jìn)行濃縮處理。并且,進(jìn)一步,在本實(shí)施例采用反滲透膜濃縮方法時(shí),反滲透膜濃縮方法的膜設(shè)備操作壓力位設(shè)定在40kg/cm2以下,并于室溫下操作,由此獲得的灰樹(shù)花保健品,其效用與直接服用灰樹(shù)花相當(dāng)。優(yōu)選地,在本實(shí)施例所述的步驟B中,發(fā)酵終止的指標(biāo)為pH值達(dá)到4. O 5. 5,折光糖度達(dá)到2. 8 3. 8%,同時(shí)菌絲體得率干重達(dá)到O. 65 O. 85%,上述三種指標(biāo)(pH值、折光糖度、菌絲體得率)同時(shí)達(dá)到各自相應(yīng)的指標(biāo),即可終止發(fā)酵。另外,在本實(shí)施例所述的步驟D中,灰樹(shù)花菌發(fā)酵液與灰樹(shù)花菌絲體提取液相互混合后的pH值為6 7,折光糖度為2 6%。本發(fā)明一種通過(guò)液體深層發(fā)酵制備的灰樹(shù)花保健品的其他實(shí)施例與上述實(shí)施例
1、2和3相同或相近,在此不再贅述。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言,不難從上述實(shí)施例1、2和3中獲得相關(guān)的技術(shù)啟示,并用以制備或生產(chǎn)灰樹(shù)花保健品。顯而易見(jiàn),本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員,可以用本發(fā)明的一種通過(guò)液體深層發(fā)酵制備的灰樹(shù)花保健品及其制備方法,形成各種類(lèi)型的保健品及其制備方法。上述實(shí)施例僅供說(shuō)明本發(fā)明之用,而并非是對(duì)本發(fā)明的限制,有關(guān)技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員,在不脫離本發(fā)明范圍的情況下,還可以作出各種變化和變型,因此所有等同的技術(shù)方案也應(yīng)屬于本發(fā)明的范疇,本發(fā)明的專(zhuān)利保護(hù)范圍應(yīng)由各權(quán)利要求限定。
權(quán)利要求
1.通過(guò)液體深層發(fā)酵制備灰樹(shù)花保健品的方法,其特征在于所述制備方法包括如下步驟 A、將灰樹(shù)花菌接入培養(yǎng)液中,并在18 28°C的溫度下以200 300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)72 96小時(shí),獲得菌種液; B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12%大麥芽、重量份3 6%大豆的液體培養(yǎng)基中,接種量為5 10%,并在23 27°C的溫度下通氣培養(yǎng)48 72小時(shí),經(jīng)過(guò)生物發(fā)酵,獲得發(fā)酵的灰樹(shù)花菌絲體以及灰樹(shù)花菌發(fā)酵液; C、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后,用水提取,浸提比為O.8 1:2 5,浸提溫度為90 95°C,浸提時(shí)間為2 3小時(shí),從而獲得灰樹(shù)花菌絲體提取液; D、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的灰樹(shù)花菌絲體提取液相互混合后,將所得的混合液濃縮4 7倍,并使其折光糖度達(dá)到10 12%,從而得到灰樹(shù)花保健品O
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的通過(guò)液體深層發(fā)酵制備灰樹(shù)花保健品的方法,其特征在于在所述步驟D中,利用反滲透膜濃縮方法或者利用真空濃縮方法對(duì)所述混合液進(jìn)行濃縮處理。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的通過(guò)液體深層發(fā)酵制備灰樹(shù)花保健品的方法,其特征在于所述反滲透膜濃縮方法的膜設(shè)備操作壓力位設(shè)定在40kg/cm2以下,并于室溫下操作。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的通過(guò)液體深層發(fā)酵制備灰樹(shù)花保健品的方法,其特征在于在所述步驟B中,發(fā)酵終止的指標(biāo)為pH值達(dá)到4. O 5. 5,折光糖度達(dá)到2. 8 3. 8%,以及菌絲體得率干重達(dá)到O. 65 O. 85%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的通過(guò)液體深層發(fā)酵制備灰樹(shù)花保健品的方法,其特征在于在所述步驟D中,灰樹(shù)花菌發(fā)酵液與灰樹(shù)花菌絲體提取液相互混合后的pH值為6 7,折光糖度為2 6%。
6.一種通過(guò)液體深層發(fā)酵制備的灰樹(shù)花保健品,其特征在于所述灰樹(shù)花保健品是由如下方法制備而成 A、將灰樹(shù)花菌接入培養(yǎng)液中,并在18 28°C的溫度下以200 300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養(yǎng)72 96小時(shí),獲得菌種液; B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12%大麥芽、重量份3 6%大豆的液體培養(yǎng)基中,接種量為5 10%,并在23 27°C的溫度下通氣培養(yǎng)48 72小時(shí),經(jīng)過(guò)生物發(fā)酵,獲得發(fā)酵的灰樹(shù)花菌絲體以及灰樹(shù)花菌發(fā)酵液; C、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后,用水提取,浸提比為O.8 1:2 5,浸提溫度為90 95°C,浸提時(shí)間為2 3小時(shí),從而獲得灰樹(shù)花菌絲體提取液; D、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的灰樹(shù)花菌絲體提取液相互混合后,將所得的混合液濃縮4 7倍,并使其折光糖度達(dá)到10 12%,從而得到灰樹(shù)花保健品O
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的通過(guò)液體深層發(fā)酵制備的灰樹(shù)花保健品,其特征在于在所述步驟D中,利用反滲透膜濃縮方法或者利用真空濃縮方法對(duì)所述混合液進(jìn)行濃縮處理。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的通過(guò)液體深層發(fā)酵制備的灰樹(shù)花保健品,其特征在于在所述步驟B中,發(fā)酵終止的指標(biāo)為pH值達(dá)到4. O 5. 5,折光糖度達(dá)到2. 8 3. 8%,菌絲體得率干 重達(dá)到O. 65 O. 85%。
全文摘要
本發(fā)明涉及通過(guò)液體深層發(fā)酵制備的灰樹(shù)花保健品及其制備方法。其中制備方法包括A、將灰樹(shù)花菌接入培養(yǎng)液中,并在搖床上震蕩培養(yǎng),獲得菌種液;B、將步驟A中得到的菌種液接入含大麥芽、大豆的液體培養(yǎng)基中,通氣培養(yǎng)后,獲得發(fā)酵的灰樹(shù)花菌絲體以及灰樹(shù)花菌發(fā)酵液;C、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌絲體進(jìn)行細(xì)胞組織破碎后,用水提取,從而獲得灰樹(shù)花菌絲體提取液;D、將步驟B中得到的灰樹(shù)花菌發(fā)酵液以及步驟C中得到的灰樹(shù)花菌絲體提取液相互混合后,將所得的混合液濃縮,從而得到灰樹(shù)花保健品。本發(fā)明采用工業(yè)化液體深層發(fā)酵技術(shù),使得灰樹(shù)花菌種能夠在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行工業(yè)化的大量繁殖,因此,工藝簡(jiǎn)單、成本較低。
文檔編號(hào)A23L1/28GK102771770SQ20121025486
公開(kāi)日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2012年7月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月20日
發(fā)明者黃曉青 申請(qǐng)人:黃曉青